CN110583624B - 一种黄鳝精子高效使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种黄鳝精子高效使用方法,包括以下步骤:1.配置精子保存液并进行冷冻保存;2.取预冷精子保存液,将公黄鳝精液加入预冷精子保存液中,得到精子混合液;3.用显微镜检查精子活力和密度,计算精子混合液的可配置的黄鳝卵数量;4.根据可配置的黄鳝卵数量对精子混合液进行稀释并保存。本发明针对黄鳝精子设计了一种高效利用黄鳝精子的方法,节约了成本,提高了黄鳝受精率,通过本方法进行黄鳝精子使用,可以做到精子在4度保存72小时,随用随取;受精率达到95%以上。
Description
技术领域
本发明涉及鱼类养殖领域,具体涉及一种黄鳝精子高效使用方法。
背景技术
黄鳝为雌雄同体的性逆转鱼类,黄鳝发育的早期为雌性可以产卵,产卵后卵巢逐渐变成精巢产生精子。黄鳝雌性和雄性存在发育的不同步,而且黄鳝精巢较小,产生的精子较少。因此在规模生产中,如果不对黄鳝精子质量进行检测计算,既浪费了精子,又降低了受精率,造成生产损失。如何有效使用黄鳝精子提高受精率,即是科学问题,也是经济问题。因此发明一种高效利用黄鳝精子的方法提高受精率,是非常必要的和有价值的。
发明内容
本发明提出了一种黄鳝精子高效使用方法。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下:
一种黄鳝精子高效使用方法,包括以下步骤:
步骤1.配置精子保存液并进行冷冻保存;
步骤2.取预冷精子保存液,将公黄鳝精液加入预冷精子保存液中,得到精子混合液;
步骤3.用显微镜检查精子活力和密度,计算精子混合液的可配置的黄鳝卵数量;
步骤4.根据可配置的黄鳝卵数量对精子混合液进行稀释并保存。
进一步的,所述精子保存液中包括无水氯化钙、氯化钠、氯化钾、葡萄糖和碳酸氢钠,所述无水氯化钙的浓度为1g/L,氯化钠的浓度为9g/L,氯化钾的浓度为0.3g/L,葡萄糖的浓度为1.5g/L,碳酸氢钠的浓度为0.4g/L。
进一步的,步骤2.取精子保存液,将黄鳝精子加入精子保存液中,得到总体积为M毫升的精子混合液;
步骤3具体为:吸取P微升精子混合液放置在载玻片上,吸取5P微升纯净水对精子混合液进行稀释混匀,利用显微镜观察精子混合液中的精子活力,随机选择显微镜视野中任一点作为观察点,确定观察点附近的精子游动情况,若此观察点附近游动精子超过3个,则再向载玻片上的精子混合液中加入5P微升纯净水进行稀释,稀释后继续观察原观察点,若3秒内有超过3个精子经过此观察点附近,则继续向载玻片上的精子混合液中加入5P微升纯净水进行稀释,直到观察到3秒钟之内有3个精子经过此观察点附近,则停止稀释,稀释过程中添加的纯净水总量的两倍即为原M毫升精子混合液的配卵碗数,例如,若稀释过程中共添加了N微升纯净水,则原M毫升精子混合液的配卵碗数为N×2碗,每碗包括黄鳝卵400-600粒。
进一步的,步骤4中,若可配置的黄鳝卵数量为N×2碗,则将10毫升精子混合液稀释为N×2毫升,稀释后的每毫升精子混合液可配置一碗黄鳝卵。
进一步的,步骤4中,M=10000P。
本发明的有益效果为:本发明针对黄鳝精子设计了一种高效利用黄鳝精子的方法,节约了成本,提高了黄鳝受精率,通过本方法进行黄鳝精子使用,可以做到精子在4度保存72小时,随用随取;受精率达到95%以上。
具体实施方式
以下对本发明的原理和特征进行描述,所举实例只用于解释本发明,并非用于限定本发明的范围。
本发明的具体实施方法为:
1、配置精子保存液;精子保存液的配制方法为,将无水氯化钙1克,氯化钠9克,氯化钾0.3克,葡萄糖1.5克,碳酸氢钠0.4克混合后加纯净水稀释至1升,冰冻保存;
2、将公黄鳝杀死,取出精巢;
3、在10毫升离心管内放置5-7毫升的预冷精子保存液;
4、将精巢用镊子捏住,将精巢内的精液全部挤入离心管中,将离心管用预冷精子保存液补足10毫升,得到精子混合液;
5、用移液器将1微升精子混合液放置到载玻片上,再吸取5微升纯净水加入精子混合液进行稀释混匀,利用显微镜观察精子活力,用眼盯住显微镜视野中某一个点作为观察点,如此点游动精子较多,则再加入5微升纯净水稀释,持续此过程,直到3秒钟之内有3个精子经过原观察点附近,则停止加纯净水。根据稀释过程中添加纯净水的总量来计算10毫升保存精子的配卵数。若共吸取了25微升纯净水稀释后,达到了3秒钟之内有3个精子经过视野中的原观察点附近,则根据25×2=50,可以计算出该管精子可以配置50碗黄鳝卵(吸取纯净水量除以5然后乘以10,得出配卵的碗数)。
6、将10毫升精子混合液稀释至可配置的黄鳝卵碗数,例如,若上一步计算得到的配卵碗数为50碗,则将10毫升精子混合液稀释为50毫升,保存在4度冰箱内。
7、将黄鳝卵400-600粒挤入小碗中,加入稀释好的精子1毫升,加水5毫升,放置10-15分钟受精。
通过本发明的方法,可以避免精子使用的盲目性,节约精子使用量,而且精子保存在4度左右环境下,可以随时拿出来受精使用,提高受精率,受精率可达95%以上。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种黄鳝精子高效使用方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1. 配置精子保存液并进行冷冻保存;
步骤2. 取预冷精子保存液,将公黄鳝精液加入预冷精子保存液中,得到精子混合液,精子混合液的总体积为M毫升;步骤2具体为:步骤2.取精子保存液,将黄鳝精子加入精子保存液中,得到总体积为M毫升的精子混合液;
步骤3. 吸取P微升精子混合液放置在载玻片上,吸取纯净水对精子混合液进行稀释混匀,利用显微镜检查精子活力和密度,计算精子混合液的可配置的黄鳝卵数量,所述M=10000P;
步骤3具体为:吸取P微升精子混合液放置在载玻片上,吸取5P微升纯净水对精子混合液进行稀释混匀,利用显微镜观察精子混合液中的精子活力,随机选择显微镜视野中任一点作为观察点,确定观察点附近的精子游动情况,若此观察点附近游动精子超过3个,则再向载玻片上的精子混合液中加入5P微升纯净水进行稀释,稀释后继续观察原观察点,若3秒内有超过3个精子经过此观察点附近,则继续向载玻片上的精子混合液中加入5P微升纯净水进行稀释,直到观察到3秒钟之内有3个精子经过此观察点附近,则停止稀释,稀释过程中添加的纯净水总量的两倍即为原M毫升精子混合液的配卵碗数,例如,若稀释过程中共添加了N微升纯净水,则原M毫升精子混合液的配卵碗数为N×2碗,每碗包括黄鳝卵400-600粒;
步骤4.根据可配置的黄鳝卵数量对精子混合液进行稀释并保存。
2.根据权利要求1所述的黄鳝精子高效使用方法,其特征在于,所述精子保存液中包括无水氯化钙、氯化钠、氯化钾、葡萄糖和碳酸氢钠,所述无水氯化钙的浓度为1g/L,氯化钠的浓度为9g/L,氯化钾的浓度为0.3g/L,葡萄糖的浓度为1.5g/L,碳酸氢钠的浓度为0.4g/L。
3.根据权利要求1所述的黄鳝精子高效使用方法,其特征在于,步骤4中,若可配置的黄鳝卵数量为N×2碗,则将10毫升精子混合液稀释为N×2毫升,稀释后的每毫升精子混合液可配置一碗黄鳝卵。
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