CN104604776A - 达氏鲟人工授精液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种人工授精液及其制备方法，具体为达氏鲟人工授精液及其制备方法，NaCl、KCl、MgCl2·6H2O、CaCl2、葡萄糖、Tris-base溶解在去离子水中形成混合溶液，用Hcl调节混合溶液的pH至7.8形成达氏鲟人工授精液；每500毫升的达氏鲟人工授精液中，含有0.585gNaCl、0.0019gKCl、0.5083gMgCl2·6H2O、0.2775gCaCl2、5.4g葡萄糖、1.2114g Tris-base。本发明提供的达氏鲟人工授精液，完全针对达氏鲟精子激活所需物质配制，由不同离子和大分子物质组成的，这些离子和大分子物质对精子的运动可以起到一定的优化作用，精子的激活率超过90％，精子的活力和寿命显著延长，精子的活力可从103s-123s提高到172s-185s，受精率从13％-29％提高到54％-58％。
Description
技术领域
本发明涉及一种人工授精液及其制备方法，具体为达氏鲟人工授精液及其制备方法。
背景技术
达氏鲟又称长江鲟和沙腊子，是我国特有的淡水定居性鲟科鲟属鱼类，分布于长江上游和金沙江下游，国家I级重点保护动物和长江上游一级急切保护鱼类，近年来，由于过度捕捞、水利工程、航运及水体污染等诸多人类活动的影响，达氏鲟野生种群数量逐日减少，种群资源衰退严重，长江流域中的达氏鲟几近灭绝，为了保护这一珍稀鱼类资源，对达氏鲟进行人工繁殖研究，最终实现规模化人工养殖，势在必行。
达氏鲟生长较快，抗病力强，能适应于溪河、池塘、水库等环境，性周期短，口感较好，是引种、驯化养殖的优良品种，但是其受精率偏低，无法获得批量受精卵。现有技术是性成熟达氏鲟经注射催产激素后，采用两种人工授精方法授精，1.干法授精，采用的人工授精液为江水；2.半干法授精，采用的人工授精液为生理盐水。
达氏鲟在自然环境中繁殖受精以江水为介质，现有人工繁殖技术是将江水或生理盐水作为人工授精液使用，由于人工授精过程与达氏鲟自然繁殖过程存在一定的区别，因此，江水或生理盐水的理化指标无法完全满足人工授精要求，其受精率仅为自然条件下的10-30％左右。
同时达氏鲟卵属于强粘性卵类型，人工授精过程中卵遇水后极易粘成团或成块，而达氏鲟精液粘稠，精子密度高，精卵不易混合均匀，若精子活力不高，寿命不长，其受精率将受极大影响，很难获得批量受精卵。
并且江水中的离子成分、渗透压、pH值不确定，其用量控制不准确，存在随意性，且江水易受到各种污染，产生对精子的毒害作用，影响受精率；生理盐水中的钠离子虽然起调节授精液渗透压的作用，但精子的激活还与多种相关离子及pH等因素有关，此外，0.65％的生理盐水也并非达氏鲟精子适应的最适渗透压浓度，因此，采用生理盐水作为授精介质，效果也不理想。
发明内容
针对上述技术问题，本发明提供一种适用于达氏鲟的人工授精液，解决现阶段达氏鲟人工繁殖过程中受精率低的问题。
具体技术方案为：
达氏鲟人工授精液，由以下方法制得：
NaCl、KCl、MgCl2·6H2O、CaCl2、葡萄糖、三羟甲基氨基甲烷溶解在去离子水中形成混合溶液，用Hcl调节混合溶液的pH至7.8形成达氏鲟人工授精液；每500毫升的达氏鲟人工授精液中，含有0.585gNaCl、0.0019gKCl、0.5083gMgCl2·6H2O、0.2775gCaCl2、5.4g葡萄糖、1.2114g三羟甲基氨基甲烷即Tris-base。
达氏鲟人工授精液所用药品均为分析纯，人工授精前2-3小时配制，常温保存。
本发明提供的达氏鲟人工授精液，完全针对达氏鲟精子激活所需物质配制，由不同离子和大分子物质组成的，这些离子和大分子物质对精子的运动可以起到一定的优化作用，精子的激活率超过90％，精子的活力和寿命显著延长，精子的活力可从103s-123s提高到172s-185s，受精率从13％-29％提高到54％-58％。
具体实施方式
结合实施例，说明本发明具体实施方式。
选择性腺发育较成熟的达氏鲟雌雄鱼，雌鱼用LHRH-A2+鲤脑垂体，2针注射，2针间隔12h，雄鱼为1针注射。注射后鲟鱼放在流水池中待其性腺成熟。
达氏鲟精子的采集：选择性腺发育成熟的达氏鲟雄鱼，用干毛巾擦干生殖孔周围及腹部的水，用软管进行导精，精液充氧后在4℃进行保存待用。
达氏鲟人工采卵：雌鱼第2针注射后应检查池中雌鱼排卵情况，对已开始排卵的达氏鲟雌鱼用干毛巾揩干其生殖孔周围以及腹部，轻轻挤压腹部，将雌鱼的卵全部挤入干燥的容器中，常温备用。
NaCl、KCl、MgCl2·6H2O、CaCl2、葡萄糖、Tris-base溶解在去离子水中形成混合溶液，用Hcl调节混合溶液的pH至7.8形成达氏鲟人工授精液；每500毫升的达氏鲟人工授精液中，含有0.585gNaCl、0.0019gKCl、0.5083gMgCl2·6H2O、0.2775gCaCl2、5.4g葡萄糖、1.2114g Tris-base。
应用本发明提供的达氏鲟人工授精液和现有技术作为授精液，分3次对达氏鲟人工授精进行了对比试验，操作采用干法和半干法，同在气温23℃、水温21℃条件下进行。
结果显示，采用干法授精，江水作为授精液3次受精率分别为17.5％、12.3％、11.4％，平均受精率为13.73％；利用本发明提供的达氏鲟人工授精液，其受精率分别为55.3％、51.7％、57.8％，平均受精率为54.93％，较江水作为授精液提高了41.2％。
采用半干法授精，生理盐水作为授精液3次受精率分别为27.6％、28.3％、31.4％，平均受精率为29.1％；采用半干法利用本发明的达氏鲟人工授精液，其受精率分别为56.4％、60.2％、59.5％，平均受精率为58.7％，较生理盐水作为授精液提高了29.6％。
Claims (1)
1.达氏鲟人工授精液，其特征在于，由以下方法制得：NaCl、KCl、MgCl2·6H2O、CaCl2、葡萄糖、三羟甲基氨基甲烷溶解在去离子水中形成混合溶液，用Hcl调节混合溶液的pH至7.8形成达氏鲟人工授精液；每500毫升的达氏鲟人工授精液中，含有0.585gNaCl、0.0019gKCl、0.5083gMgCl2·6H2O、0.2775gCaCl2、5.4g葡萄糖、1.2114g三羟甲基氨基甲烷。
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| CN109287615A (zh) * | 2018-09-13 | 2019-02-01 | 中国长江三峡集团公司中华鲟研究所 | 鲟鱼卵子保存平衡液 |
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