CN102960279A - 一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法 - Google Patents

一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102960279A
CN102960279A CN2012105032334A CN201210503233A CN102960279A CN 102960279 A CN102960279 A CN 102960279A CN 2012105032334 A CN2012105032334 A CN 2012105032334A CN 201210503233 A CN201210503233 A CN 201210503233A CN 102960279 A CN102960279 A CN 102960279A
Authority
CN
China
Prior art keywords
artificial insemination
hypotonic solution
ovum
solution
sperm
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN2012105032334A
Other languages
English (en)
Inventor
王德忠
徐汉连
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
SHEYANG KANGYU AQUATIC PRODUCT TECHNOLOGY Co Ltd
Original Assignee
SHEYANG KANGYU AQUATIC PRODUCT TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SHEYANG KANGYU AQUATIC PRODUCT TECHNOLOGY Co Ltd filed Critical SHEYANG KANGYU AQUATIC PRODUCT TECHNOLOGY Co Ltd
Priority to CN2012105032334A priority Critical patent/CN102960279A/zh
Publication of CN102960279A publication Critical patent/CN102960279A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish

Landscapes

  • Farming Of Fish And Shellfish (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法，属水产养殖技术，通过创新黄颡鱼精卵的采集方式、精子保存液的设计以及在低渗溶液中采用预激活精子完成人工授精的技术。其技术方案包括以下要点：（1）雄鱼经放血后取出的精巢在筛绢中以挤压方式滤出精液，提高精子采集质量，在保存液中冷藏保存，每尾雄鱼精液可供7.5kg的卵子人工授精；（2）两指挤卵方式降低了对雌鱼内脏损伤，提高产后成活率；（3）以0.2～0.4%浓度低渗溶液取代水为受精媒介，在低渗溶液中预激活精子后与卵子授精，提高了精子活力和人工授精条件的可控性，从而提高了人工授精的受精率和稳定性。此方法稳定可靠，适合大规模生产，也适用于同性质卵类型的鱼类。

Description

一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法
技术领域
本发明属水产养殖技术领域，涉及黄颡鱼的人工繁殖关键技术，尤其是涉及一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法。
背景技术
养殖鱼类的种苗生产一般是通过自然繁殖和人工繁殖两种途径获得，而大规模生产主要依靠人工繁殖实现；在人工繁殖生产过程中，受精率是生产的关键技术指标，而影响受精率的关键因子，除卵子和精子的质量外，人工授精方法也是影响受精率的稳定性一个重要因素；目前常规的人工授精方法，无论是湿法授精，或是干法授精，卵子和精子的受精过程是以水媒介同步激活后完成，对于强粘性卵类型的鱼类如黄颡鱼，人工授精过程中卵遇水后极易粘成团或成块，不仅影响人工授精的操作，而且还影响受精率的稳定性，降低孵化率；
目前黄颡鱼种苗繁育也是通过池塘自然产卵或人工繁殖方式获得，尽管自然产卵的生产方式成本较低，但由于自然产卵受气候、水温等因素的影响，产卵的不同步和不稳定，其生产规模都难以满足大规模生产的要求；而黄颡鱼人工繁殖过程，雌、雄鱼发情不同步，常规的人工授精方法因需同步采卵和采精，采卵过程易挤伤内脏造成雌鱼产后死亡率高，雄鱼需杀雄取精，通过研磨或剪碎精巢取得精子，易受带入的血块等组织的污染，精子保存时间短，雄鱼浪费大，而且受精过程时间控制严格，遇水后卵易成团，影响人工授精的操作及孵化率；因此，常规的黄颡鱼人工授精方法，授精条件的可控性较差，生产操作难度较高，影响规模化生产的稳定性。
发明内容
本发明的目的是提供一种克服上述现有技术缺点的，解决黄颡鱼在人工繁殖过程中受精率不稳定状况的，减少人工授精过程的干扰因子的，同时具有操作更简捷、更稳定、生产效率更高的一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法；
为实现上述目的，本发明所采用的技术方案为：该种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法，包括以下步骤：
（1）经注射激素催情发情的雄鱼，在下颌靠近心脏处剪断动脉处放血1-3min后取出精巢，用精子保存液冲洗1-3次，将精巢放入80-120目的筛绢中挤出精液，每尾雄鱼收集的精液用10-50ml精子保存液稀释4-8℃保存待用；
（2）经注射激素催情发情的雌鱼，采用两指挤卵方式采集卵子，即一只手抓住黄颡鱼头部，另一只手虎口轻扣背鳍硬刺后基部，大拇指和食指轻扣腹部，沿生殖孔方向轻轻滑动挤压，将卵挤入干燥碗中或盆中，每批鱼卵的采集时间控制20min之内；
（3）取300-500ml左右的低渗溶液，加入2-4ml经精子保存液稀释的精液，搅拌3～5s预激活精子，然后将混合液倒入到500-1000g的卵子中，搅拌20-30s左右，即完成人工授精过程；
所述的一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法，其特征在于：所述黄颡鱼精子保存液配方为：柠檬酸三钠7.5g，葡萄糖29g，氯化钾0.2g，碳酸氢钠2.1g，磷酸二氢钾0.06g，抗坏血酸0.1g，ATP 0.05g，防腐剂0.3g和蒸馏水1000ml，试剂要求等级为分析纯或生化级，配制的溶液4℃下保存；
所述的一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法，其特征在于：低渗溶液的浓度为0.2%～0.4%的NaCl水溶液，或是NaCl和KCl的3:1比例的水溶液，在人工授精时提前2-3小时配制，常温保存。
本发明与现有技术相比的有益效果：本发明一种黄颡鱼在低渗透压溶液的人工授精方法，其精子采集通过放血和筛绢挤压方式采集精子，避免了精子采集过程中血污和其它组织的污染，提高了精子采集质量；精子预先采集在精子保存液中4℃冷藏保存，保存24h精子的激活率超过90%，对受精率无显著影响，保存72h精子激活率仍在50%以上，解决了黄颡鱼精子保存和精卵同步采集的技术问题；挤卵方式通过一只手的虎口轻轻压住背鳍硬刺基部，大拇指和食指轻扣腹部，虎口、大拇指和食指沿生殖孔方向滑动的挤压方式，减少了挤卵过程对内脏的损伤，减少了挤空卵所需要的次数，提高挤卵效率，雌鱼产后成活率可保持在90%以上；
人工授精过程以低渗溶液取代水为受精媒介，卵子和精子都能在低渗透压溶液中激活，精子的激活率超过90%，精子的活力和寿命显著延长，精子的活力可从21s～23s提高到32s～35s，延长了受精时间；通过精子在低渗溶液中预激活人工授精比精卵同步人工授精的受精率提高10%左右，每尾雄鱼的精液能够配备7.5kg卵子人工授精，显著降低雄鱼的消耗，受精的卵在低渗溶液中不存在粘性，遇水后可恢复粘性，减少了受精过程中的干扰因子，增强了人工授精的稳定性，显著提高了受精率，操作更灵活、简便和快捷，更适合规模化生产，也适用于同性质卵类型的鱼类。
具体实施方式：
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明；应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围；
本实施例的黄颡鱼亲鱼，为2011年6月从江苏省射阳县的射阳河收集，在公司养殖基地驯养1年的2冬龄以上黄颡鱼，催产时雌鱼均重137.6±4.2g，成熟系数18.7±3.1%，雄鱼均重274.8±3.6g；在水温26℃～28℃条件下，从6月18日至6月23日连续催产6个批次，每批雌鱼150kg左右，雄鱼3尾；具体操作方法及结果如下：
① 人工催情：雌鱼采用二针注射，第一针注射LHRH-A2 12ug/kg，第二针注射LHRH-A2 12ug/kg+DOM 3.5mg/kg+HCG 1500IU/kg，两针的间隔时间为14～16h；雄鱼采用一针注射，剂量为雌鱼的40%，在注射雌鱼的第二针时注射；采用背鳍基部注射，注射后放入20m2水泥池中，流水饲养，为防止缺氧，用气泵增氧；
② 精子保存液的配制：黄颡鱼精子保存液配方为：柠檬酸三钠7.5g，葡萄糖29g，氯化钾0.2g，碳酸氢钠2.1g，磷酸二氢钾0.06g，抗坏血酸0.1g，ATP 0.05g，防腐剂0.3g和蒸馏水1000ml，试剂要求等级为分析纯或生化级；按所述的配方配制1000ml精子保存液，转移至1000ml的棕色广口瓶中在4℃冷藏待用；
③ 精子采集与保存：注射激素后约13h后雄鱼开始发情，在雄鱼下颌靠近心脏用剪刀剪断动脉，在水中放血2min左右；将雄鱼擦干从肛门口沿腹部剪开，用镊子取出精巢，用精子保存液冲洗2次，冲洗后的精巢放在100目筛绢中挤压出的精液至100ml的棕色广口瓶中，再用10ml注射器吸取10ml精子保存液洗涤筛绢上剩余的精液一起转移至广口瓶中，稀释至90ml摇匀在4℃冷藏保存；
④ 卵子的采集和人工授精：雌鱼注射约14h发情产卵，用毛巾擦干鱼体，将卵挤入到容量2000ml干燥的不锈钢碗中，每批卵控制500g在左右；取300ml浓度为0.3%的低渗溶液，加入1.5ml稀释后的精液搅拌3～5s，迅速倒入卵中搅拌40s，完成授精过程；
⑤ 脱粘与孵化：将授精后的卵沉淀30s，倾去上清液，放入8%浓度的黄泥浆悬浊液中搅拌2min，倒入60目筛绢中滤去悬浊液，再用清水漂洗干净，然后将卵移至容量约80L的孵化桶中孵化，每个孵化桶放入6kg的受精卵，孵化过程按常规方法管理孵化；
⑥ 实施结果：卵和鱼苗的数量按重量法计数，卵发育至原肠中期开始计算受精率；6批共催产雌鱼936kg，催产率92.30±1.68%，共获得卵5349.4万粒，受精率86.1±5.2%，孵化出鱼苗3608.8万尾，出苗率78.4±3.9%。

Claims (3)

1.一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法，包括以下步骤：
（1）经注射激素催情发情的雄鱼，在下颌靠近心脏处剪断动脉处放血1-3min后取出精巢，用精子保存液冲洗1-3次，将精巢放入80-120目的筛绢中挤出精液，每尾雄鱼收集的精液用10-50ml精子保存液稀释4-8℃保存待用；
（2）经注射激素催情发情的雌鱼，采用两指挤卵方式采集卵子，即一只手抓住黄颡鱼头部，另一只手虎口轻扣背鳍硬刺后基部，大拇指和食指轻扣腹部，沿生殖孔方向轻轻滑动挤压，将卵挤入干燥碗中或盆中，每批鱼卵的采集时间控制20min之内；
（3）取300-500ml左右的低渗溶液，加入2-4ml经精子保存液稀释的精液，搅拌3～5s预激活精子，然后将混合液倒入到500-1000g的卵子中，搅拌20-30s左右，即完成人工授精过程。
2.根据权利要求1所述的一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法，其特征在于：所述黄颡鱼精子保存液配方为：柠檬酸三钠7.5g，葡萄糖29g，氯化钾0.2g，碳酸氢钠2.1g，磷酸二氢钾0.06g，抗坏血酸0.1g，ATP 0.05g，防腐剂0.3g和蒸馏水1000ml，试剂要求等级为分析纯或生化级，配制的溶液4℃下保存。
3.根据权利要求1所述的一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法，其特征在于：低渗溶液的浓度为0.2%～0.4%的NaCl水溶液，或是NaCl和KCl的3:1比例的水溶液，在人工授精时提前2-3小时配制，常温保存。
CN2012105032334A 2012-11-30 2012-11-30 一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法 Pending CN102960279A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2012105032334A CN102960279A (zh) 2012-11-30 2012-11-30 一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2012105032334A CN102960279A (zh) 2012-11-30 2012-11-30 一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN102960279A true CN102960279A (zh) 2013-03-13

Family

ID=47790941

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2012105032334A Pending CN102960279A (zh) 2012-11-30 2012-11-30 一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102960279A (zh)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103518705A (zh) * 2013-10-17 2014-01-22 南京市水产科学研究所 一种黄颡鱼精液保存液及其制备方法
CN105123566A (zh) * 2015-07-23 2015-12-09 新疆农业大学 一种哲罗鲑精子激活液及制备方法
CN105706976A (zh) * 2016-03-07 2016-06-29 五河县金满塘生态种养殖家庭农场 一种泥鳅人工授精繁育方法
CN105724292A (zh) * 2016-03-07 2016-07-06 五河县金满塘生态种养殖家庭农场 一种大银鱼人工授精繁育方法
CN106417256A (zh) * 2016-10-12 2017-02-22 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 一种提高虹鳟伪雄鱼精子利用率的方法
CN107711822A (zh) * 2017-10-09 2018-02-23 安徽省农业科学院水产研究所 一种大鳞副泥鳅精子保存液、活化液和孵化方法
CN113142105A (zh) * 2021-02-22 2021-07-23 眉山市人和渔业专业合作社 一种黄颡鱼杂交方法及杂交黄颡鱼突变体的培育方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101904329A (zh) * 2009-06-05 2010-12-08 江苏省淡水水产研究所 黄颡鱼精子超低温冷冻及复苏技术

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101904329A (zh) * 2009-06-05 2010-12-08 江苏省淡水水产研究所 黄颡鱼精子超低温冷冻及复苏技术

Non-Patent Citations (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
《水产养殖》 19900630 郑闽泉等 "水溶液和NaCl溶液浓度对泥鳅" 第15-16页 1-3 , 第3期 *
《水产养殖》 20110301 张玉杰等 "黄颡鱼高效人工繁殖技术" 第31-33页 1-3 , 第3期 *
《水利渔业》 20030525 杨彩根等 "pH及不同浓度NaCl溶液对黄颡鱼精子活力的影响" 第10-11页 1-3 第23卷, 第3期 *
《沈阳教育学院学报》 20100430 孙越 "浅谈黄颡鱼养殖技术" 第98-100页 1-3 第12卷, 第2期 *
《现代农业科技》 20070920 朱盛林等 "黄颡鱼人工繁殖及养殖技术研究" 第157-159页 1-3 , 第18期 *
《科学养鱼》 20010225 孙大江 "史氏鲟人工繁殖及养殖技术" 第9-10页 1-3 , 第2期 *
YOUICHI HAYAKAWA ET AL: "Fertilization enviroment of the non-copulating marine sculpin Hemilepidotus gilberti", 《ENVIRONMENTAL BIOLOGY OF FISHES》 *
孙大江: ""史氏鲟人工繁殖及养殖技术"", 《科学养鱼》 *
孙越: ""浅谈黄颡鱼养殖技术"", 《沈阳教育学院学报》 *
张玉杰等: ""黄颡鱼高效人工繁殖技术"", 《水产养殖》 *
朱盛林等: ""黄颡鱼人工繁殖及养殖技术研究"", 《现代农业科技》 *
杨彩根等: ""pH及不同浓度NaCl溶液对黄颡鱼精子活力的影响"", 《水利渔业》 *
王昭明等: "《虹鳟鱼养殖》", 31 December 2003, 中国农业出版社 *
申玉春: "《鱼类增养殖学》", 30 June 2008, 中国农业出版社 *
邹叶茂: "《特种水产品养殖》", 31 July 2007, 中国农业出版社 *
郑闽泉等: ""水溶液和NaCl溶液浓度对泥鳅"", 《水产养殖》 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103518705A (zh) * 2013-10-17 2014-01-22 南京市水产科学研究所 一种黄颡鱼精液保存液及其制备方法
CN105123566A (zh) * 2015-07-23 2015-12-09 新疆农业大学 一种哲罗鲑精子激活液及制备方法
CN105706976A (zh) * 2016-03-07 2016-06-29 五河县金满塘生态种养殖家庭农场 一种泥鳅人工授精繁育方法
CN105724292A (zh) * 2016-03-07 2016-07-06 五河县金满塘生态种养殖家庭农场 一种大银鱼人工授精繁育方法
CN106417256A (zh) * 2016-10-12 2017-02-22 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 一种提高虹鳟伪雄鱼精子利用率的方法
CN106417256B (zh) * 2016-10-12 2020-01-31 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 一种提高虹鳟伪雄鱼精子利用率的方法
CN107711822A (zh) * 2017-10-09 2018-02-23 安徽省农业科学院水产研究所 一种大鳞副泥鳅精子保存液、活化液和孵化方法
CN113142105A (zh) * 2021-02-22 2021-07-23 眉山市人和渔业专业合作社 一种黄颡鱼杂交方法及杂交黄颡鱼突变体的培育方法
CN113142105B (zh) * 2021-02-22 2022-03-01 眉山市人和渔业专业合作社 一种黄颡鱼杂交方法及杂交黄颡鱼突变体的培育方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102960279A (zh) 一种黄颡鱼在低渗溶液中的人工授精方法
CN106489798B (zh) 一种中华沙鳅人工繁殖方法
CN101066046B (zh) 翘嘴鳜与斑鳜的杂交繁殖方法
CN110537506B (zh) 一种野生拉萨裂腹鱼人工繁殖方法
CN104872065A (zh) 山羊的繁殖方法
CN103461253B (zh) 黄河裸裂尻鱼人工繁殖方法
CN103222436B (zh) 黑斑狗鱼人工催产方法
JP2021066719A (ja) 湖羊精液凍結保存液及びその用途
CN101317558B (zh) 哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法
CN107711822A (zh) 一种大鳞副泥鳅精子保存液、活化液和孵化方法
CN101999332B (zh) 一种人工授精的尼罗罗非鱼繁殖方法
CN103478042B (zh) 花斑裸鲤人工繁殖方法
CN102599094B (zh) 一种金沙鲈鲤的人工孵化方法
CN102599095B (zh) 一种提高重嘴裂腹鱼人工授精率的催情催产方法
CN103688880A (zh) 以翘嘴鳜为父本与斑鳜为母本进行的杂交繁殖方法
CN105123566A (zh) 一种哲罗鲑精子激活液及制备方法
CN112293318A (zh) 一种鱼类受精卵脱粘的方法
CN105340791A (zh) 拟赤梢鱼人工催产方法
CN103563848A (zh) 一种用于藏鸡的受精方法
Ayoola et al. Comparative study of piscine and non-piscine pituitary extract and ovulin for inducing spawning in catfish (Clarias gariepinus)
CN109349271A (zh) 一种大鳞鲃精子保存液的使用方法
CN102657123A (zh) 一种黑龙江茴鱼人工繁殖方法
CN104604776A (zh) 达氏鲟人工授精液及其制备方法
CN108184726A (zh) 一种黄颡鱼的人工繁育方法
CN106818622A (zh) 一种促进品种优化并提高繁殖力的种羊配种及繁殖技术

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20130313