CN103222436B

CN103222436B - 黑斑狗鱼人工催产方法

Info

Publication number: CN103222436B
Application number: CN201310178480.6A
Authority: CN
Inventors: 白庆利; 张永泉; 贾钟贺; 李小龙; 张玉勇
Original assignee: Heilongjiang River Fisheries Research Institute of Chinese Academy of Fishery Sciences
Current assignee: Heilongjiang River Fisheries Research Institute of Chinese Academy of Fishery Sciences
Priority date: 2013-05-15
Filing date: 2013-05-15
Publication date: 2014-07-09
Anticipated expiration: 2033-05-15
Also published as: CN103222436A

Abstract

黑斑狗鱼人工催产方法，本发明属于黑斑狗鱼养殖领域。本发明要解决现有野生黑斑狗鱼自然产卵过程中出现产卵时间不集中、产卵周期长、雌雄亲鱼成熟不同步和孵化率低的技术问题。本发明的方法是：挑选亲本，4月份用S-GnRH-A、HCG或DOM进行两次药物注射后人工受精，完成黑斑狗鱼的人工催产。本发明的方法使雌雄亲鱼成熟同步、产卵时间集中，产卵周期缩短了15～20天，且受精率高达85～90％，孵化率高达60％～70％；人工催产亲鱼，雄鱼的催产成功率达到97％，雌鱼的催产成功率达到70％～85％。

Description

黑斑狗鱼人工催产方法

技术领域

本发明属于黑斑狗鱼养殖领域；具体涉及黑斑狗鱼人工催产方法。

背景技术

黑斑狗鱼Esox reicherti Dybowski，俗称狗鱼、勾心鱼，属于鲑形目、狗鱼亚目、狗鱼科、狗鱼属。黑斑狗鱼是中国重要的经济冷水性鱼类，分布于北纬44度以北的寒冷水域，主要在多瑙河、涅斯特河和欧洲、西伯利亚、咸海水系及北美、库页岛等地，在中国分布于黑龙江、乌苏里江、嫩江、松花江等水系支流。该鱼肉质坚韧少刺、味道鲜美、生长迅速，是人们非常喜爱的优质经济鱼类，有望成为新的驯化养殖品种。黑斑狗鱼以前是松花江重要的经济鱼类，但由于近几年的过度捕捞和水质污染，在松花江已很少见到黑斑狗鱼了。乌苏里江上游(虎头镇对岸)的大型支流—伊曼河(属俄罗斯)，是乌苏里江黑斑狗鱼最大的产卵场之一，黑斑狗鱼作为乌苏里江重要的经济鱼类，近年由于人为的过渡捕捞及自然资源的破坏，资源量已经急剧下降。因此，开展黑斑狗鱼的人工繁育相关技术的研究，对于野生资源的恢复保存以及为市场提供新的养殖品种意义十分重大。

黑斑狗鱼生活于寒冷地区水域，为冷水性鱼类，适温范围0℃-30℃，最适生长温度22℃～26℃。幼苗阶段以轮虫、小型枝角类、桡足类等浮游动物为食，稍大即捕食其他鱼类，饵料不足时会自相残食，为大型凶猛肉食性鱼类。在天然水体中，幼鱼集群活动，成鱼分散觅食，常活动于水草丛中，行动迅速敏捷，最大个体可达40kg以上。

黑斑狗鱼产卵期为4月中、下旬，产卵水温在7℃以下，栖息水温在20℃以下。在自然界黑斑狗鱼一般具有产卵时间不集中、持续时间长（产卵的周期一般在一个半月左右）、雌雄亲鱼成熟不同步（雄鱼性腺成熟比雌鱼晚半个月以上）等特点，在加上近年黑斑狗鱼产卵场的破坏和水质污染等外部因素，因此目前黑斑狗鱼出现了受精率、孵化率和鱼苗成活率的现象，并严重的导致了黑斑狗鱼自然种群的急剧减少。

发明内容

本发明要解决现有野生黑斑狗鱼自然产卵过程中出现产卵时间不集中、产卵周期长、雌雄亲鱼成熟不同步和孵化率低的技术问题；而提供了黑斑狗鱼的人工催产方法。

为解决上述技术问题，本发明的黑斑狗鱼人工催产方法是按下述步骤进行的：

步骤一、挑选体型好、活动力强而无伤、体重大于2kg且3龄以上的雌鱼作为雌性亲本，

挑选体型好，活动力强而无伤，体重大于1.5kg且3龄以上的雄鱼作为雄性亲本；

步骤二、4月份，待水温升高到8℃，捕捞步骤一挑选的雌性亲本及雄性亲本麻醉后进行第一针药物注射，在亲鱼胸鳍基部注射，注射深度为5mm，雌性按雌性本体每公斤体重注射2.0μg鲑鱼促性腺激素释放激素类似物和500IU绒毛膜促性腺激素的比例注射第一针药物；雄性按雄性本体每公斤体重注射1.0μg鲑鱼促性腺激素释放激素类似物和300IU绒毛膜促性腺激素的比例注射第一针药物；鲑鱼促性腺激素释放激素类似物和绒毛膜促性腺激素用医用葡萄糖或者生理盐水进行稀释；

步骤三、水温8℃在第一针药物注射后5天注射第二针药物，或者水温高于8℃在第一针注射后3～4天注射第二针药物，雌、雄亲本麻醉后在亲鱼胸鳍基部注射，注射深度为5mm，雌性按雌性本体每公斤体重注射15.0μg鲑鱼促性腺激素释放激素类似物、800IU绒毛膜促性腺激素和2mg马来酸地欧酮的比例注射第二针药物；雄性按雄性本体每公斤体重注射20.0μg鲑鱼促性腺激素释放激素类似物和1000IU绒毛膜促性腺激素的比例注射第二针药物；鲑鱼促性腺激素释放激素类似物、绒毛膜促性腺激素和马来酸地欧酮用医用葡萄糖或者生理盐水进行稀释；

步骤四、第二针药物注射完成后的第5至7天，水温高于8℃条件下取8～12尾雄鱼亲本采集精液，每尾雄鱼精液单独保存；然后取雌鱼亲本进行卵采集，每采集一尾雌鱼的卵后立即将之前采集好的8～12尾雄鱼的精液以每尾0.3ml的量挤于卵子表面，用羽毛搅拌30s，然后加入200毫升清水，再用羽毛均匀、快速搅拌1～2min，随即将受精卵放入黄泥浆水中搅拌拖粘20min，再换入清水中进行孵化，即完成黑斑狗鱼的人工催产；

步骤四中雄鱼精液采集至受精保存的时间不超过1h。

使用药物量过大会刺激鱼体短时间性激素分泌过多，将导致卵巢和精巢充血，甚至血管破裂，直接影响卵子和精子质量，甚至导致亲鱼死亡；使用药物剂量过小诱导鱼体性激素分泌过少，卵巢和精巢发育时间过长，将起不到缩短繁殖周期和集中繁殖的目的。而本发明的方法通过诱导繁殖期亲鱼雌激素和雄激素达到理想分布浓度，进而刺激卵子和精子同时成熟，从而使雌雄亲鱼成熟同步、产卵时间集中，产卵周期缩短了15～20天，且受精率高达85%～90%，孵化率高达60％～70％；人工催产亲鱼，雄鱼的催产成功率达到97％，雌鱼的催产成功率达到70％～85％。

具体实施方式

具体实施方式一：本实施方式中黑斑狗鱼人工催产方法是按下述步骤进行的：

步骤四中雄鱼精液采集至受精保存的时间不超过1h。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤二麻醉是将鱼放入浓度为5％苯氧乙醇麻醉液中，麻醉到轻轻翻动鱼体不再挣扎。其它步骤和参数与具体实施方式一相同。

具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式二不同的是：步骤三麻醉是将鱼放入浓度为5％苯氧乙醇麻醉液中，麻醉到轻轻翻动鱼体不再挣扎。其它步骤和参数与具体实施方式二相同。

具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式三不同的是：步骤四所述卵采集方法：将雌性亲鱼依次捕捞，放入浓度为5％苯氧乙醇麻醉液中，麻醉到轻轻翻动鱼体不再挣扎（一般需要放置1min～2min），用干毛巾将腹部和泄殖孔周围的水擦干，然后将鱼卵挤入产卵盆中。其它步骤和参数与具体实施方式三相同。

具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式四不同的是：步骤四所述精液采集方法：雄性亲鱼放入浓度为5％苯氧乙醇麻醉液中麻醉到轻轻翻动鱼体不再挣扎（一般需要放置1min～2min），用干毛巾将腹部和泄殖孔周围的水擦干，轻压腹部将精液挤到小烧杯中，放置于避光处。其它步骤和参数与具体实施方式四相同。

具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一至五之一不同的是：黑斑狗鱼亲鱼是按下述方法培育的：春天在自然水体中捕捞性成熟的黑斑狗鱼个体，放置于少人为打扰的土池中，养殖用水为涌泉水、江河或水库清澈水体，鱼池进、排水通畅，水深在1.5m以上，放养密度为3kg/m²，雌雄比例为4:1，用体长在4.5cm～5.5cm的鲫鱼活饵料投喂。其它步骤和参数与具体实施方式一至五之一相同。

土池底部要平坦，平坦池底便于捕捞。而且采用土池而非水泥池是为了防止亲鱼跳跃和捕食时受伤。

水深和水面的要求尽量大，因为黑斑狗鱼为大型肉食性凶猛鱼类，鱼池过小放养密度过大会导致互相争斗和吞食，增加死亡。

亲鱼采用活饵料投喂，因为亲鱼野生不喜欢摄食饲料，而且摄食饲料亲鱼的脂肪含量较高，人工采卵时常常出现脂肪堵塞生殖孔的现象。

具体实施方式六：本实施方式中黑斑狗鱼人工催产方法，其特征在于黑斑狗鱼人工催产方法是按下述步骤进行的：

步骤二、4月份，待水温升高到8℃，捕捞步骤一挑选的雌性亲本及雄性亲本麻醉后进行第一针药物注射，在亲鱼胸鳍基部注射，注射深度为5mm，雌性按雌性本体每公斤体重注射2.0μg鲑鱼促性腺激素释放激素类似物（S-GnRH）和500IU绒毛膜促性腺激素（HCG）的比例注射第一针药物；雄性按雄性本体每公斤体重注射1.0μg鲑鱼促性腺激素释放激素类似物和300IU绒毛膜促性腺激素的比例注射第一针药物；鲑鱼促性腺激素释放激素类似物和绒毛膜促性腺激素用医用葡萄糖或者生理盐水进行稀释；

步骤三、水温8℃在第一针药物注射后5天注射第二针药物，或者水温高于8℃在第一针注射后3～4天注射第二针药物，雌、雄亲本麻醉后在亲鱼胸鳍基部注射，注射深度为5mm，雌性按雌性本体每公斤体重注射15.0μg鲑鱼促性腺激素释放激素类似物、800IU绒毛膜促性腺激素和2mg马来酸地欧酮（DOM）的比例注射第二针药物；雄性按雄性本体每公斤体重注射20.0μg鲑鱼促性腺激素释放激素类似物和1000IU绒毛膜促性腺激素的比例注射第二针药物；鲑鱼促性腺激素释放激素类似物、绒毛膜促性腺激素和马来酸地欧酮用医用葡萄糖或者生理盐水进行稀释；

步骤四、第二针药物注射完成后的第5至7天，水温高于8℃条件下取10尾雄鱼亲本采集精液，每尾雄鱼精液单独保存；然后取雌鱼亲本进行卵采集，每采集一尾雌鱼的卵后立即将之前采集好的10尾雄鱼的精液以每尾0.3ml的量挤于卵子表面，用羽毛搅拌30s，然后加入200毫升清水，再用羽毛均匀、快速搅拌1～2min，随即将受精卵放入黄泥浆水中搅拌拖粘20min，再换入清水中进行孵化，即完成黑斑狗鱼的人工催产；

步骤四中雄鱼精液采集至受精保存的时间不超过1h。

雌、雄亲鱼挑选和鉴别：

在非生殖季节，雌鱼肛门与生殖孔之间稍隆起，雄鱼没有隆起；生殖季节：雌鱼腹柔软膨大呈圆囊形，体宽较宽，肛门和生殖孔较大，略红突出较大；雄鱼腹部较小，体宽较窄，用手抚摸腹部较硬，背部体色明显较深，生殖孔不红肿，突出不明显，在未注射催产药物时挤压腹部也不会发现精液。

黑斑狗鱼亲鱼的培育：

可繁殖的黑斑狗鱼亲鱼都是自然水体中捕捞的野生个体，春天在自然水体中捕捞性成熟的黑斑狗鱼个体，放置于少人为打扰的土池中，养殖用水为涌泉水、江河或水库清澈水体，鱼池进、排水通畅，水深在1.5m以上，放养密度为3kg/m²，雌雄比例为4:1，用体长在4.5cm～5.5cm的鲫鱼活饵料投喂。土池底部要平坦，平坦池底便于捕捞。而且采用土池而非水泥池是为了防止亲鱼跳跃和捕食时受伤。水深和水面的要求尽量大，因为黑斑狗鱼为大型肉食性凶猛鱼类，鱼池过小放养密度过大会导致互相争斗和吞食，增加死亡。亲鱼采用活饵料投喂，因为亲鱼野生不喜欢摄食饲料，而且摄食饲料亲鱼的脂肪含量较高，人工采卵时常常出现脂肪堵塞生殖孔的现象。

注意：注射完药物将亲鱼放置入水口处，有利于亲鱼快速清醒，防止缺氧导致死亡。注射药物提前1个小时配置好。第二针时一定要将雌雄亲鱼分清，如极个别个体无法分辨雌雄，可认为做雌鱼注射药物即刻，因为雌鱼药物浓度较大，由于雌鱼卵价值相对较高于雄鱼，一旦判断错误也会将损失降低。挤卵时应从身体前部向生殖孔处挤压，要快、稳、准，一定要在鱼体肌肉放松，不乱蹦时，再挤压腹部，当鱼体肌肉紧张时，生殖孔紧闭，不易推挤出卵粒，挤压不易太用力，防治挤坏鱼体内脏或体表感染病菌导致死亡。

黑斑狗鱼产的卵粘性极强，如不用黄泥拖粘，受精卵将粘成一团，孵化过程中极易感染水霉和缺氧，死亡率极高。

注射药物过深针头会扎到内脏易导致死亡，过浅药物会随着针孔流出，达不到理想药物浓度。每尾亲鱼每次注射稀释后的药剂为2ml，鲑鱼促性腺激素释放激素类似物、绒毛膜促性腺激素及马来酸地欧酮用医用葡萄糖或者生理盐水按使用比例稀释。

本实施方式方法使产卵周期缩短了15～20天，且受精率高达85%～90%，孵化率高达60％～70％；雄鱼的催产成功率达到97％，雌鱼的催产成功率达到70％～85％。

Claims

1.黑斑狗鱼人工催产方法，其特征在于黑斑狗鱼人工催产方法是按下述步骤进行的：

其中，步骤四中雄鱼精液采集至受精保存的时间不超过1h。

2.根据权利要求1所述的黑斑狗鱼人工催产方法，其特征在于步骤二麻醉是将鱼放入浓度为5％苯氧乙醇麻醉液中，麻醉到轻轻翻动鱼体不再挣扎。

3.根据权利要求2所述的黑斑狗鱼人工催产方法，其特征在于步骤三麻醉是将鱼放入浓度为5％苯氧乙醇麻醉液中，麻醉到轻轻翻动鱼体不再挣扎。

4.根据权利要求3所述的黑斑狗鱼人工催产方法，其特征在于步骤四所述卵采集的方法：将雌性亲鱼依次捕捞，放入浓度为5％苯氧乙醇麻醉液中，麻醉到轻轻翻动鱼体不再挣扎，再用干毛巾将腹部和泄殖孔周围的水擦干，然后将鱼卵挤入产卵盆中。

5.根据权利要求4所述的黑斑狗鱼人工催产方法，其特征在于步骤四所述精液的采集方法：雄性亲鱼放入浓度为5％苯氧乙醇麻醉液中麻醉到轻轻翻动鱼体不再挣扎，用干毛巾将腹部和泄殖孔周围的水擦干，轻压腹部将精液挤到小烧杯中，放置于避光处。

6.根据权利要求1-5中任一项权利要求所述的黑斑狗鱼人工催产方法，其特征在于黑斑狗鱼亲鱼是按下述方法培育的：春天在自然水体中捕捞性成熟的黑斑狗鱼个体，放置于少人为打扰的土池中，养殖用水为涌泉水、江河或水库清澈水体，鱼池进、排水通畅，水深在1.5m以上，放养密度为3kg/m²，雌雄比例为4:1，用体长在4.5cm～5.5cm的鲫鱼活饵料投喂。