CN102246747A - 精液稀释液及其配制方法和使用方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种精液稀释液及其配制方法和使用方法，主要用于种公鸡精液的稀释和保存，所述稀释液由如下含量的组份组成：葡萄糖0.1～10g，注射用硫酸丁胺卡那霉素0.1～2g，注射用头孢噻肟钠0.1～2g，卵黄液0.1～5ml，生理盐水100ml，其采用下列步骤配制：（1）将所述葡萄糖、注射用硫酸丁胺卡那霉素、注射用头孢噻肟钠分别溶解于所述生理盐水中，（2）加入所述卵黄液，混合均匀制得所述稀释液，配制后的所述精液稀释液与待稀释精液的比例为1:1.5～1.5：1，经该稀释液稀释后的精液，能够提高精子的利用率，并能够延长保存的时间，且能够在更宽的温度范围内保存，还能够保持精子更高的活率和活力。

Description

精液稀释液及其配制方法和使用方法

技术领域

本发明涉及一种精液稀释液，用于人工受精时对采集后的精液进行稀释，尤其是用于家禽如鸡等的人工受精，本发明还涉及该精液稀释液的一种配制方法和使用方法。

背景技术

为了提高种公鸡的精液利用率，延长保存时间，且不明显降低精子的活力，现有技术中通常采用的方法是：将种公鸡精液采集入集精装置之后，采用与原精液采集时温度相近的温水对集精装置进行恒温水浴保存，通常水温保持在36.5-37℃。

采用该方法保存时对温度要求较严格，并且精子在保存30分钟后其活率通常会由最初的70-80%降低至30-40%，不仅使得精液的利用不够充分，并且保存时间短，实际操作时难度较大，需要边保存边使用，为了提高受精率，从采集到使用完毕的时间一般不能超30分钟。

对于需要保存时间较长的精液，现有技术中普遍采用低温保存的方法，如在5-10℃下保存，以延长保存时间，方便运输等，但是其保存时间一般不超过24小时，不能满足实际中的需求。

发明内容

为了解决现有技术的上述缺陷，本发明的目的在于提供一种精液稀释液及其配制方法和使用方法，经该精液稀释液稀释后的精液，能够获得更高的精子利用率和受精成功率，并能够延长保存的时间，且能够在更宽的温度范围内保存，还能够使精子的活率和活力保持在更高的水平。

本发明采用的技术方案是：

一种精液稀释液，主要用于禽类精液的稀释，所述精液稀释液由如下含量的组份组成：

葡萄糖0.1～10g；

注射用广谱抗生素，适量（如0.1～4g）；

卵黄液0.1～5ml；

生理盐水100ml。

所述注射用广谱抗生素及其添加量通常可以为：注射用硫酸丁胺卡那霉素0.1～2g和/或注射用头孢噻肟钠0.1～2g；

较优地，所述精液稀释液由如下含量的组份组成：

葡萄糖3～5g；

注射用硫酸丁胺卡那霉素0.5～1.5g和/或注射用头孢噻肟钠0.5～1.5g；

卵黄液1～3ml；

生理盐水100ml。

所述注射用硫酸丁胺卡那霉素通常为硫酸丁胺卡那霉素注射液，其规格优选为1ml（0.1g）100,000单位。

按无水物计算，每1mg所述注射用头孢噻肟钠的效价不得少于860头孢噻肟单位。

通常每100ml所述生理盐水所配制的所述精液稀释液中的葡萄糖的含量在4wt%左右，注射用硫酸丁胺卡那霉素的含量在10,000,000单位左右，注射用头孢噻肟钠的含量在860,000头孢噻肟单位左右。

上述任意一项技术方案中，所述卵黄液与待稀释精液相匹配，可以属于同一种禽类，也可以属于不同的禽类，优选为属于同一种禽类，如利用鸡卵黄液配制相应的精液稀释液用于稀释鸡精液，以尽可能的提高精子的活力、活率和存活时间。

所述生理盐水的浓度通常为0.75%或0.9%。

上述任意一项技术方案中所述的卵黄液可以源自受精卵也可以源自非受精卵，优选为源自非受精卵，以提高稀释后的稀释精液中的精子存活率。根据申请人的实验，稀释液中的卵黄液源自非受精卵时在36～37.5℃的条件下保存1～2小时后的精子存活率较取自受精卵时可以提高3～5%，在低温（1～10℃）下保存1～48小时后的精子存活率也能够提高3%左右。

所述精液稀释液可以为鸡或其他禽类的精液稀释液。

一种配制上述任意一种精液稀释液的配制方法，包括如下步骤：（1）将适量所述葡萄糖和注射用广谱抗生素（如注射用硫酸丁胺卡那霉素和/或注射用头孢噻肟钠）分别溶解于适量所述生理盐水中；（2）加入所述适量卵黄液，混合均匀制得所述精液稀释液。

所述卵黄液优选为直接取自完整卵黄，具体提取步骤可以为：（a）取新鲜卵黄置于容器中，保持卵黄完整；（b）用吸管刺入所述卵黄的卵黄膜内吸取适量所述卵黄液。刺入深度优选为所述吸管能够吸取所述卵黄的中心部位的卵黄液，取自每只所述卵黄的卵黄液优选为不超过所述卵黄中的卵黄液总量的60%。

较优地，上述各个步骤均在无菌环境下进行，相应的设备、器材均经过灭菌、消毒后使用。

一种上述任意一种精液稀释液的使用方法，所述精液稀释液与待稀释精液的比例可以为1:2～1.65:1，优选为1:1.5～1.5:1。可以在常温（36～37.5℃）或低温（1～10℃）环境下使用，优选为在常温环境下使用。

本发明的有益效果是：

由于本发明采用精液稀释液对原精液进行了稀释，相当于增加了精液的数量，因此，使得同样量的精液能够用于更多人工受精的需求，提高了精液的利用率，还可以降低种公鸡的养殖数量，同时，稀释后的精液的粘稠度有所降低，使用后的受精成功率较未稀释前有所提高；

本发明的精液稀释液配方中的葡萄糖能够补充精子活动所需的能量，明显有利于阻止精子活力降低的速率，非常有利于提高精子的存活时间；

本发明的精液稀释液配方中的卵黄液既为精子提供了体外存活所需的营养，还能够保证精子在保存温度有较大波动的情况下保持较高的活力和活率，提高其存活时间，更有利于提高受精的成功率；

特别是，本发明的精液稀释液配方中将葡萄糖和卵黄液配合使用，不仅利用了葡萄糖的能量，还利用了卵黄液的营养，根据申请人对添加或不添加葡萄糖和/或卵黄液进行的多次对比实验，添加葡萄糖或卵黄液特别是同时添加这两种成份后，极大地提高了精子活力、活率和存活时间。尤其是卵黄液的加入，由于其取自同一种禽类，因此还使得其对于种蛋受精率的提高带来了很大的改进。

本发明的精液稀释液配方中的注射用硫酸丁胺卡那霉素和注射用头孢噻肟钠等注射用广谱抗生素的使用能够抑制稀释后的精液内的细菌繁殖，避免了细菌对精液的污染，减少了细菌对精子活力和存活率造成的负面影响，同时还能够预防某些疾病，如降低种鸡患输卵管炎的风险，提高种蛋受精率和种鸡的产蛋率。

并且本发明的精液稀释液配方可以同时适用于常温直接输精和低温长期保存，且配方成份简单，配制容易，并且原材料易得，成本低廉，适宜于广泛推广使用。

具体实施方式

为了更好的解释本发明，以便更好的理解本发明，本发明还提供了下列实施例，下列实施例不构成对本发明范围的限制。

下列实施例中的稀释液均按如下步骤配制：量取适量生理盐水置于三角烧杯中，再分别精确量取葡萄糖、注射用硫酸丁胺卡那霉素（简称丁胺卡那霉素）、注射用头孢噻肟钠，将该三种药物分别顺序投入生理盐水中充分溶解、混合均匀，制得稀释液原液；取新鲜鸡蛋黄放于无菌平皿中，保持卵黄完整，用吸管刺入卵黄膜吸取适量卵黄液，加入上述稀释液原液中混合均匀即可。

为了保持精子的高活力，提高精子的存活率，上述配制全过程均在无菌环境下完成。

用配制好的精液稀释液将待稀释精液按一定的比例进行稀释（所述稀释比例指稀释液与待稀释精液的体积比），较优地，取精、配制稀释液、用稀释液稀释精液、保存稀释后的稀释精液以及采用稀释后的稀释精液进行人工受精操作各个步骤的操作温度在同一环境温度下进行。优选为全程操作过程中的温度波动不超过±2℃，以提高精子的活力、存活时间和存活率，提高受精成功率。

实施例1～4采用0.75%的生理盐水，实施例5～8采用0.9%的生理盐水。

实施例1

实施例2

实施例3

实施例4

实施例5

实施例6

实施例7

实施例8

采用本发明的稀释液进行稀释后的稀释精液的精子密度可以根据需要调节到合适的范围，以提高精子的利用率和受精的成功率，同时还可以有效提高精子的存活时间和存活率。

所述精液稀释液与待稀释精液的比例优选为1.5:1～1:1.5以便最大限度的提高精液的利用率、精子的存活时间、精子的活力、精子的存活率和受精的成功率。

通常来说注射用硫酸丁胺卡那霉素和注射用头孢噻肟钠混合使用时的协同作用效果很好，有效地抑制了稀释后的精液内的细菌繁殖，尤其是对于大肠杆菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌的协同抑制作用明显，避免了细菌对精液的污染，减少了细菌对精子活力和存活率造成的负面影响，同时还能够预防某些疾病，如降低种鸡患输卵管炎的风险，提高种蛋受精率和种鸡的产蛋率。

所述注射用广谱抗生素也可以采用其他现有或可能的注射用广谱抗生素，其所称“适量”的剂量范围应依据所用注射用广谱抗生素的特性，采用在合理的或所需的精液稀释液保存条件和保存时间下足以抑制微生物生长并避免产生负面影响的剂量范围。必要时，可以通过实验检验所用抗生素及其用量对微生物的抑制效果和对精子可能存在的负面影响。根据申请人的实验，对于现有常见的广谱抗生素在上述适量的添加量下，不会对精液稀释液的使用效果产生负面影响，但从安全或经济的角度，在具备所需的抑菌效果的前提下，应避免过多使用广谱抗生素。

本发明的精液稀释液可以适用于常温下的应用，也可以适用于低温下的应用，尤其适用于长远距离的运输以及科研用。

Claims (10)

1.一种精液稀释液，用于禽类精液的稀释，其特征在于所述稀释液由如下含量的组份组成：

葡萄糖0.1～10g；

注射用广谱抗生素，适量；

卵黄液0.1～5ml；

生理盐水100ml。

2.根据权利要求1所述的精液稀释液，其特征在于所述注射用广谱抗生素及其添加量为：

注射用硫酸丁胺卡那霉素0.1～2g；和/或

注射用头孢噻肟钠0.1～2g。

3.根据权利要求2所述的精液稀释液，其特征在于所述稀释液由如下含量的组份组成：

葡萄糖3～5g；

注射用硫酸丁胺卡那霉素0.5～1.5g；

注射用头孢噻肟钠0.5～1.5g；

卵黄液1～3ml；

生理盐水100ml。

4.根据权利要求1、2或3所述的精液稀释液，其特征在于所述卵黄液与待稀释精液属于同一种禽类。

5.根据权利要求4所述的精液稀释液，其特征在于所述卵黄液源自受精卵。

6.根据权利要求5所述的精液稀释液，其特征在于所述精液稀释液为鸡精液稀释液。

7.一种权利要求1-5所述的精液稀释液的配制方法，其特征在于包括如下步骤：（1）将适量所述葡萄糖和注射用广谱抗生素分别溶解于适量所述生理盐水中；（2）加入适量所述卵黄液，混合均匀制得所述精液稀释液。

8.根据权利要求7所述的配制方法，其特征在于所述卵黄液为直接取自完整卵黄，具体提取步骤为：（a）取新鲜卵黄置于容器中，保持卵黄完整；（b）用吸管刺入所述卵黄的卵黄膜内吸取适量所述卵黄液。

9.根据权利要求7或8所述的配制方法，其特征在于各个所述步骤均在无菌环境下进行。

10.一种权利要求1-9中所述的精液稀释液的使用方法，其特征在于所述精液稀释液与待稀释精液的比例为1:2～1.65:1。