CN110583624A - 一种黄鳝精子高效使用方法 - Google Patents

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    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
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Abstract

本发明涉及一种黄鳝精子高效使用方法，包括以下步骤：1.配置精子保存液并进行冷冻保存；2.取预冷精子保存液，将公黄鳝精液加入预冷精子保存液中，得到精子混合液；3.用显微镜检查精子活力和密度，计算精子混合液的可配置的黄鳝卵数量；4.根据可配置的黄鳝卵数量对精子混合液进行稀释并保存。本发明针对黄鳝精子设计了一种高效利用黄鳝精子的方法，节约了成本，提高了黄鳝受精率，通过本方法进行黄鳝精子使用，可以做到精子在4度保存72小时，随用随取；受精率达到95％以上。

Description

一种黄鳝精子高效使用方法
技术领域
本发明涉及鱼类养殖领域，具体涉及一种黄鳝精子高效使用方法。
背景技术
黄鳝为雌雄同体的性逆转鱼类，黄鳝发育的早期为雌性可以产卵，产卵后卵巢逐渐变成精巢产生精子。黄鳝雌性和雄性存在发育的不同步，而且黄鳝精巢较小，产生的精子较少。因此在规模生产中，如果不对黄鳝精子质量进行检测计算，既浪费了精子，又降低了受精率，造成生产损失。如何有效使用黄鳝精子提高受精率，即是科学问题，也是经济问题。因此发明一种高效利用黄鳝精子的方法提高受精率，是非常必要的和有价值的。
发明内容
本发明提出了一种黄鳝精子高效使用方法。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下：
一种黄鳝精子高效使用方法，包括以下步骤：
步骤1.配置精子保存液并进行冷冻保存；
步骤2.取预冷精子保存液，将公黄鳝精液加入预冷精子保存液中，得到精子混合液；
步骤3.用显微镜检查精子活力和密度，计算精子混合液的可配置的黄鳝卵数量；
步骤4.根据可配置的黄鳝卵数量对精子混合液进行稀释并保存。
进一步的，所述精子保存液中包括无水氯化钙、氯化钠、氯化钾、葡萄糖和碳酸氢钠，所述无水氯化钙的浓度为1g/L，氯化钠的浓度为9g/L，氯化钾的浓度为0.3g/L，葡萄糖的浓度为1.5g/L，碳酸氢钠的浓度为0.4g/L。
进一步的，步骤2.取精子保存液，将黄鳝精子加入精子保存液中，得到总体积为M毫升的精子混合液；
步骤3具体为：吸取P微升精子混合液放置在载玻片上，吸取5P微升纯净水对精子混合液进行稀释混匀，利用显微镜观察精子混合液中的精子活力，随机选择显微镜视野中任一点作为观察点，确定观察点附近的精子游动情况，若此观察点附近游动精子超过3个，则再向载玻片上的精子混合液中加入5P微升纯净水进行稀释，稀释后继续观察原观察点，若3秒内有超过3个精子经过此观察点附近，则继续向载玻片上的精子混合液中加入5P微升纯净水进行稀释，直到观察到3秒钟之内有3个精子经过此观察点附近，则停止稀释，稀释过程中添加的纯净水总量的两倍即为原M毫升精子混合液的配卵碗数，例如，若稀释过程中共添加了N微升纯净水，则原M毫升精子混合液的配卵碗数为N×2碗，每碗包括黄鳝卵400-600粒。
进一步的，步骤4中，若可配置的黄鳝卵数量为N×2碗，则将10毫升精子混合液稀释为N×2毫升，稀释后的每毫升精子混合液可配置一碗黄鳝卵。
进一步的，步骤4中，M＝10000P。
本发明的有益效果为：本发明针对黄鳝精子设计了一种高效利用黄鳝精子的方法，节约了成本，提高了黄鳝受精率，通过本方法进行黄鳝精子使用，可以做到精子在4度保存72小时，随用随取；受精率达到95％以上。
具体实施方式
以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
本发明的具体实施方法为：
1、配置精子保存液；精子保存液的配制方法为，将无水氯化钙1克，氯化钠9克，氯化钾0.3克，葡萄糖1.5克，碳酸氢钠0.4克混合后加纯净水稀释至1升，冰冻保存；
2、将公黄鳝杀死，取出精巢；
3、在10毫升离心管内放置5-7毫升的预冷精子保存液；
4、将精巢用镊子捏住，将精巢内的精液全部挤入离心管中，将离心管用预冷精子保存液补足10毫升，得到精子混合液；
5、用移液器将1微升精子混合液放置到载玻片上，再吸取5微升纯净水加入精子混合液进行稀释混匀，利用显微镜观察精子活力，用眼盯住显微镜视野中某一个点作为观察点，如此点游动精子较多，则再加入5微升纯净水稀释，持续此过程，直到3秒钟之内有3个精子经过原观察点附近，则停止加纯净水。根据稀释过程中添加纯净水的总量来计算10毫升保存精子的配卵数。若共吸取了25微升纯净水稀释后，达到了3秒钟之内有3个精子经过视野中的原观察点附近，则根据25×2＝50，可以计算出该管精子可以配置50碗黄鳝卵(吸取纯净水量除以5然后乘以10，得出配卵的碗数)。
6、将10毫升精子混合液稀释至可配置的黄鳝卵碗数，例如，若上一步计算得到的配卵碗数为50碗，则将10毫升精子混合液稀释为50毫升，保存在4度冰箱内。
7、将黄鳝卵400-600粒挤入小碗中，加入稀释好的精子1毫升，加水5毫升，放置10-15分钟受精。
通过本发明的方法，可以避免精子使用的盲目性，节约精子使用量，而且精子保存在4度左右环境下，可以随时拿出来受精使用，提高受精率，受精率可达95％以上。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种黄鳝精子高效使用方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1.配置精子保存液并进行冷冻保存；
步骤2.取预冷精子保存液，将公黄鳝精液加入预冷精子保存液中，得到精子混合液；
步骤3.用显微镜检查精子活力和密度，计算精子混合液的可配置的黄鳝卵数量；
步骤4.根据可配置的黄鳝卵数量对精子混合液进行稀释并保存。
2.根据权利要求1所述的黄鳝精子高效使用方法，其特征在于，所述精子保存液中包括无水氯化钙、氯化钠、氯化钾、葡萄糖和碳酸氢钠，所述无水氯化钙的浓度为1g/L，氯化钠的浓度为9g/L，氯化钾的浓度为0.3g/L，葡萄糖的浓度为1.5g/L，碳酸氢钠的浓度为0.4g/L。
3.根据权利要求1所述的黄鳝精子高效使用方法，其特征在于，步骤2具体为：步骤2.取精子保存液，将黄鳝精子加入精子保存液中，得到总体积为M毫升的精子混合液；
步骤3具体为：吸取P微升精子混合液放置在载玻片上，吸取5P微升纯净水对精子混合液进行稀释混匀，利用显微镜观察精子混合液中的精子活力，随机选择显微镜视野中任一点作为观察点，确定观察点附近的精子游动情况，若此观察点附近游动精子超过3个，则再向载玻片上的精子混合液中加入5P微升纯净水进行稀释，稀释后继续观察原观察点，若3秒内有超过3个精子经过此观察点附近，则继续向载玻片上的精子混合液中加入5P微升纯净水进行稀释，直到观察到3秒钟之内有3个精子经过此观察点附近，则停止稀释，稀释过程中添加的纯净水总量的两倍即为原M毫升精子混合液的配卵碗数，例如，若稀释过程中共添加了N微升纯净水，则原M毫升精子混合液的配卵碗数为N×2碗，每碗包括黄鳝卵400-600粒。
4.根据权利要求3所述的黄鳝精子高效使用方法，其特征在于，步骤4中，若可配置的黄鳝卵数量为N×2碗，则将10毫升精子混合液稀释为N×2毫升，稀释后的每毫升精子混合液可配置一碗黄鳝卵。
5.根据权利要求3所述的黄鳝精子高效使用方法，其特征在于，步骤4中，M＝10000P。
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