CN110225903A - 截短侧耳素的纯化 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及通过结晶和/或重结晶来纯化截短侧耳素(I)的方法。根据本发明的方法在乙酸异丙酯的存在下进行。

Description

截短侧耳素的纯化
技术领域
本发明涉及截短侧耳素的纯化方法，截短侧耳素用作制备药物活性化合物的原料。具体地，所述方法减少了本发明人发现的作为截短侧耳素中的关键杂质的2,3-截短侧耳素环氧化物，并改善了材料的整体纯度。
背景技术
截短侧耳素是一种具有下式的化合物，
截短侧耳素是一种天然存在的抗生素，其例如由担子菌纲(basidiomycetes)侧耳菌(Pleurotus mutilus)和帕氏侧耳菌(P.passeckerianus)产生，参见例如Merck Index，第12版，第7694项。
截短侧耳素通过发酵工艺制备，其从发酵液中提取并最终经分离作为结晶固体化合物。
截短侧耳素用作批准的兽医产品泰妙菌素(Tiamulin)和伐奈莫林(Valnemulin)的原料。
衍生自截短侧耳素的药物活性化合物(半合成化合物)是细菌中核糖体蛋白质合成的抑制剂。经批准的用于人类使用的半合成截短侧耳素的唯一代表是瑞他帕林(retapamulin)其是一种批准用于短期治疗脓疱疮和感染的小撕裂伤、擦伤或缝合的伤口的局部药物。另外两种半合成截短侧耳素衍生物，泰妙菌素和伐奈莫林多年来一直在兽医学中全身使用。
抗生素耐药率的增加，伴随着高致病性病原体如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和多药耐药性肺炎链球菌的出现，加强了对适于对抗由耐药生物体引起的严重细菌感染的新型抗菌剂的迫切需求。鉴于其对发病率和死亡率的重大影响，多药耐药微生物被国家科学院、包括美国传染病学会、疾病控制中心和世界卫生组织在内的工作组视为对公共卫生的重大威胁。
衍生自截短侧耳素的半合成化合物显示出对耐药生物的优异活性，所述耐药生物尤其包括肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、流感嗜血杆菌(Haemophilusinfluenzae)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)(包括MRSA)、卡他莫拉菌(Moraxella catarrhalis)、嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)、肺炎衣原体(Chlamydophila pneumoniae)和肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae)。
已知两类主要的半合成截短侧耳素：硫烷基乙酰基-木替林(sulfanylacetyl-mutilin)和氨基甲酰氧基-木替林(carbamoyloxy-mutilin)。区别在于从三环木替林核心到R侧的不同接头部分。
硫烷基乙酰基-木替林尤其公开在WO2005023257、WO1999021855、WO01/09095、WO02/04414、WO02/22580、WO03/082260、WO03/090740、WO2004011431、WO2007/000001、WO2007000004、WO2007014409、WO2007/079515、WO/2008/040043、WO2008/113089、WO2009/009812、WO2009/009813、WO2010/025482、WO2011/146953、WO2011/146954、WO2012/031307、WO2015/110481中，氨基甲酰氧基-木替林尤其公开在WO1997025309、WO1998005659、WO2006063801、WO2006099196、WO07062333、WO07062335中。硫烷基乙酰基-木替林和氨基甲酰氧基-木替林都使用截短侧耳素作为原料。
已经开发了多个其它的截短侧耳素例如作为抗菌剂，该多个其它的截短侧耳素具有截短侧耳素的主要环结构并且在伯羟基上被取代。由于它们显著的抗微生物活性，已经发现一组截短侧耳素衍生物，如WO 2008/113089中公开的氨基-羟基-取代的环己基硫烷基乙酰基木替林，是特别令人感兴趣的。如WO2008/113089中所述，14-O-{[(4-氨基-2-羟基-环己基)-硫烷基]-乙酰基}-木替林是特别有用的化合物，因为它们对革兰氏阳性和革兰氏阴性病原体，特别是在呼吸道和皮肤和皮肤结构感染的情况下具有活性。特别地，14-O-{[(1R,2R,4R)-4-氨基-2-羟基-环己基硫烷基]-乙酰基}-木替林(以下称为“BC-3781”或“lefamulin”)已被开发用于治疗人类严重感染的全身用途。BC-3781尤其通过R.Novak,Arepleuromutilin antibiotics finally fit for human use？,Ann.N.Y.Acad.Sci.1241(2011)第71至81页和W.T.Prince等,Phase II Clinical Study of BC-3781,aPleuromutilin Antibiotic,in Treatment of Patients with Acute Bacterial Skinand Skin Structure Infections,Antimicrobial Agents and Chemotherapy，第57卷,第5期(2013),第2087至2094页进行了描述。后一出版物说明了截短侧耳素衍生物通过全身给药治疗人类严重感染的概念的第一个证据。同样在BC-3781的合成中，使用截短侧耳素作为原料。
在现有技术中，描述了以下方法用于截短侧耳素的结晶/纯化：
此外，用于截短侧耳素的提取和随后纯化的方法公开在美国专利4,092,424、4,129,721、4,247,542、GB专利1,197,942中，并且发表在例如Antibiotic Substances fromBasidiomycetes VIlI,F.Kavanagh等,Proc.N.A.S.,1951,第570至574页等文章中。该方法包括用水不混溶的溶剂(例如甲苯、乙酸乙酯或氯仿)提取过滤的液体培养基。还描述了用水混溶的溶剂(例如丙酮)从培养菌丝体中提取截短侧耳素，然后用水不混溶的溶剂(例如乙酸乙酯)提取。
然而，在现有技术文献中均未描述2,3-截短侧耳素环氧化物杂质的减少。本发明的发明人发现2,3-截短侧耳素是市售截短侧耳素的重要杂质。2,3-截短侧耳素环氧化物在N.Palma等人的Eur.Congr.Biotechnol.,3rd,第1卷,1984,第533至542页中被提到，在通过担子菌属Clitopilus Kummer的深层培养时作为截短侧耳素的主要可能的代谢物之一被产生。
截短侧耳素的另一种重要杂质是14-乙酰基木替林，然而，对于进一步的下游化学过程而言，它更不重要。例如进行甲苯磺酰化反应，其通常用于活化截短侧耳素中的伯羟基以合成半合成的截短侧耳素衍生物(例如描述在WO/2008/040043、WO2008/113089、WO2009/009812、WO2009/009813、WO2010/025482、WO2011/146953、WO2011/146954、WO2012/031307、WO2015/110481中)，这将从市售批料中完全除去14-乙酰基木替林。14-乙酰基木替林无法经受甲苯磺酰化反应，并且在母液中耗尽。
然而，2,3-截短侧耳素环氧化物将进行甲苯磺酰化反应并保留在分离的甲苯磺酸截短侧耳素酯中。
对市售截短侧耳素批料进行甲苯磺酰化反应，不进行进一步纯化，纯度简况如下所示，并分离结晶甲苯磺酸截短侧耳素酯，得到以下结果：
*对应于RRF(相对响应因子)校正后的0.96％重量/重量
分离的结晶甲苯磺酸截短侧耳素酯的纯度从截短侧耳素的86.17％面积提高到98.55％面积且未检测到14-乙酰基木替林。然而，2,3-截短侧耳素环氧化物转化为甲苯磺酸-2,3-环氧-截短侧耳素酯，并作为重要杂质保留在甲苯磺酸截短侧耳素酯中。与甲苯磺酸截短侧耳素酯相比，对于HPLC分析方法中使用的波长的甲苯磺酸-2,3-环氧-截短侧耳素酯的RRF约为1，将杂质转化为约1.32％重量/重量。这些数据证实，考虑到市售截短侧耳素批料中0.96％重量/重量的2,3-截短侧耳素环氧化物投入水平，甲苯磺酸-2,3-环氧-截短侧耳素酯未耗尽。
因此，高度需要具有可用的截短侧耳素纯化方法，其显著减少2,3-截短侧耳素环氧化物并将最终活性药物成分(API)中产生的杂质的可能性最小化。
发明内容
发明人通过公开的关于泰妙菌素的数据的事实认识到2,3-截短侧耳素环氧化物可以产生API杂质。在EUROPEAN PHARMACOPOEIA 8.0(第3416至3418页)中列出了以下泰妙菌素杂质I：
泰妙菌素以加氢富马酸盐的形式存在。假设杂质2-富马酸-2,3-二羟基泰妙菌素酯最可能是由2,3-环氧泰妙菌素杂质与富马酸反应产生的。
用通过在乙酸异丙酯的存在下结晶和/或重结晶来纯化截短侧耳素的方法解决了本发明的根本问题。
在从属权利要求中限定了本发明的优选实施方案。
令人惊讶地发现，特别是截短侧耳素中的杂质2,3-截短侧耳素环氧化物的量可以通过用乙酸异丙酯结晶和/或重结晶截短侧耳素来有效地降低。
术语“结晶和/或重结晶”包括以下选项：
一种方法，其中仅通过结晶纯化截短侧耳素。在这种情况下，存在乙酸异丙酯。
一种方法，其中通过结晶和重结晶纯化截短侧耳素。在这种情况下，在两个步骤的至少一个中、优选在两个步骤中，存在乙酸异丙酯。
在本发明的优选实施方案中，该方法通过重结晶进行，即仅在重结晶步骤中使用乙酸异丙酯。
术语“在乙酸异丙酯的存在下”是指在结晶和/或重结晶方案中可以存在其它试剂以及其它溶剂。然而，优选地，在结晶和/或重结晶方法中使用的溶剂基本上由乙酸异丙酯组成，即不存在其它溶剂。
在本发明的优选实施方案中，结晶和/或重结晶在有机反溶剂的存在下进行。
反溶剂结晶的概念本身是众所周知的，表示向化合物在结晶溶剂中的溶液中加入一种液体，在这种液体中待纯化的化合物不溶于或仅微溶(即“反溶剂”)，从而促进化合物沉淀。
在包含结晶和重结晶步骤的本发明方法中，反溶剂应至少存在于存在乙酸异丙酯的方法的单个步骤或多个步骤中。
本领域技术人员清楚知道如何根据本发明的方法确定溶液的合适的反溶剂，即截短侧耳素在乙酸异丙酯中的溶液的合适的反溶剂。
优选地，反溶剂选自由庚烷、己烷和它们的混合物组成的组。
在根据前述权利要求中任一项所述的优选方法中，结晶和/或重结晶在乙酸异丙酯和反溶剂的组合的存在下进行，该组合选自由以下组成的组：
庚烷存在下的乙酸异丙酯，
己烷存在下的乙酸异丙酯，
和它们的混合物。
乙酸异丙酯与反溶剂的比例优选为8至0.25，特别优选为2至0.4。
本发明的方法优选包括使用晶种引发结晶和/或重结晶的步骤。
本申请还公开了一种通过在乙酸异丙酯的存在下或在乙酸异丙酯和反溶剂的存在下结晶和/或重结晶来纯化截短侧耳素的方法，得到的截短侧耳素的整体纯度≥95％，特别地≥97％。
优选地，在该方法中，与结晶和/或重结晶步骤之前的截短侧耳素中所含的水平相比，2,3-截短侧耳素环氧化物的水平降低了25％或更多，更优选35％或更多。
特别地，在该方法中，所获得的截短侧耳素中2,3-截短侧耳素环氧化物杂质的含量从约1.0％重量/重量降低至0.70％重量/重量或甚至更低。
具体实施方式
惯用名木替林是指IUPAC系统名称(1S,2R,3S,4S,6R,7R,8R,14R)-3,6-二羟基-2,4,7,14-四甲基-4-乙烯基-三环[5.4.3.01,8]十四烷-9-酮。
在下面的讨论中，使用H.Berner描述的木替林编号系统(Berner,H.；Schulz,G.；SchneiderH.Tetrahedron 1980,36,第1807至1811页)。
本发明涉及通过(重)结晶截短侧耳素的有效纯化工艺/方法。
本发明能够纯化截短侧耳素，并且可以在从发酵液中提取产物后用于初始分离/结晶。可选地，在分离截短侧耳素后，可以使用如上所述的溶剂和溶剂体系进行重结晶。
从发酵中分离后的截短侧耳素具有合理的高纯度，其可在约85至95％之间变化。然而，如果将截短侧耳素用作原料以生产用于动物或人类治疗的半合成API，则存在的大量杂质将引起关注。特别是2,3-截短侧耳素环氧化物的存在被高度关注。
在下表中，示出了市售(粗)截短侧耳素和纯化的截短侧耳素的纯度。
*根据本发明的示例
n.d.：未检测到
*根据本发明的示例
作为反溶剂的己烷，例如乙酸异丙酯/己烷的使用导致了相当的纯化结果。
从具有所应用的所有纯化方法的上表中可以看出，实现了显著的纯化。
纯化后，只剩下三种杂质，其中两种是已知的杂质，即14-乙酰基木替林和2,3-截短侧耳素环氧化物。2,3-截短侧耳素环氧化物的结构通过从粗截短侧耳素中分离该物质并进行NMR和MS等分析步骤被阐明。
用于分析截短侧耳素批料的HPLC方法如下：
HPLC柱 Phenomenex Kinetex C18
检测波长 210nm
洗脱液A 1mL对于HPLC的H<sub>3</sub>PO<sub>4</sub>+1L HPLC-水
洗脱液B 1mL对于HPLC的H<sub>3</sub>PO<sub>4</sub>+1L乙腈
注入体积 7μL
为了确定截短侧耳素中杂质的重量含量，需要用杂质的相对响应因子(RRF)值校正面积％值。
应用响应因子校正会导致两种已知杂质的以下结果：
*根据本发明的示例
令人惊奇的是，对于用于纯化市售截短侧耳素批料的一系列乙酸酯溶剂，任选地在反溶剂存在下，两种已知杂质的减少是不同的。最令人惊讶的是，当使用结晶溶剂i-PrOAc或i-PrOAc/庚烷的组合时，重要的2,3-截短侧耳素环氧化物的减少显著增强。
特别令人惊讶的是，与n-PrOAc相比，使用i-ProAc与反溶剂(庚烷)的组合仍增强了2,3-截短侧耳素环氧化物的减少。这是令人惊讶的，因为虽然已知使用反溶剂会增加该方法的产率，但往往会降低纯化效率。
上述非常令人惊讶的效果在进一步合成半合成截短侧耳素衍生物中非常有价值。除了t-BuOAc之外，14-乙酰基木替林的减少大致相同，在t-BuOAc中更大量的14-乙酰基木替林残留在截短侧耳素中。然而，如上所述，杂质14-乙酰基木替林不像2,3-截短侧耳素环氧化物那样重要/关键。
用于人类的API的杂质阈值非常严格。
用于人类市场的药物必须满足相应的ICH指南(人用药品注册技术要求国际协调会)中规定的监管要求。对于新药物中的杂质的ICH指南(Q3A(R2))包括以下阈值：
最大日剂量 报告阈值 识别阈值 质控阈值
≤2g 0.05％ 0.10％ 0.15％
>2g 0.03％ 0.05％ 0.05％
从上述ICH阈值可以看出，希望使所有单独的未知杂质低于0.10％面积，并且使阐明结构的杂质低于0.15％面积。根据本发明提供的截短侧耳素纯化工艺/方法支持在所需规格内生产API(活性药物成分)并满足ICH要求。
已经发现，根据本发明的(重)结晶方法可以大规模使用，并具有高回收率(在大多数情况下>50％)。
当然，可以重复根据本发明的(重)结晶方法，直到达到所需的纯化程度。
缩写
API 活性药物成分
EP 欧洲药典
G 克
Kg 千克
l 升
M 摩尔
mmol 毫摩尔
min 分钟
ml 毫升
RRF 相对响应因子
w/v 重量/体积
w/w 重量/重量
实验部分-截短侧耳素纯化方法：
A)溶剂：乙酸甲酯
将截短侧耳素(10.02g，26.5mmol)和乙酸甲酯(20ml)加入烧瓶中并加热至65℃。将批料在该温度下搅拌30分钟以确保溶解，然后经4小时冷却至0至5℃，并在该温度下搅拌1小时。然后过滤批料，用冷却的乙酸甲酯(10ml)洗涤固体，并在40℃的真空烘箱中干燥。
产量：6.70g
B)溶剂：乙酸乙酯
将截短侧耳素(10.07g，26.6mmol)和乙酸乙酯(20ml)加入烧瓶中并加热至80℃。将批料在该温度下搅拌30分钟以确保溶解，然后经4小时冷却至0至5℃，并在该温度下搅拌1小时。然后过滤批料，用冷却的乙酸乙酯(10ml)洗涤固体，并在40℃的真空烘箱中干燥。
产量：7.06g
C)溶剂：乙酸异丙酯-根据本发明
将截短侧耳素(10.04g，26.5mmol)和乙酸异丙酯(20ml)加入烧瓶中并加热至90℃。将批料在该温度下搅拌30分钟以确保溶解，然后经4小时冷却至0至5℃，并在该温度下搅拌1小时。然后过滤批料，用冷却的乙酸异丙酯(10ml)洗涤固体，并在40℃的真空烘箱中干燥。
产量：5.83g
D)溶剂：乙酸正丙酯
将截短侧耳素(10.01g，26.4mmol)和乙酸正丙酯(20ml)加入烧瓶中并加热至90℃。将批料在该温度下搅拌30分钟以确保溶解，然后经4小时冷却至0至5℃，并在该温度下搅拌1小时。然后过滤批料，用冷却的乙酸正丙酯(10ml)洗涤固体，并在40℃的真空烘箱中干燥。
产量：4.64g
E)溶剂：乙酸异丁酯
将截短侧耳素(10.00g，26.4mmol)和乙酸异丁酯(20ml)加入烧瓶中并加热至90℃。将批料在该温度下搅拌30分钟以确保溶解，然后经4小时冷却至0至5℃，并在该温度下搅拌1小时。然后过滤批料，用冷却的乙酸异丁酯(10ml)洗涤固体，并在40℃的真空烘箱中干燥。
产量：6.43g
F)溶剂：乙酸叔丁酯
将截短侧耳素(10.00g，26.4mmol)和乙酸叔丁酯(20ml)加入烧瓶中并加热至90℃。将批料在该温度下搅拌30分钟，但未发生完全溶解。批料经4小时冷却至0至5℃，在该温度下搅拌1小时，过滤，并用冷却的乙酸叔丁酯(10ml)洗涤固体。然后将固体产物在40℃的真空烘箱中干燥。
产量：7.44g
G)溶剂/反溶剂：乙酸异丙酯/庚烷-方法1-根据本发明
将截短侧耳素(10.01g，26.4mmol)和乙酸异丙酯(20ml)加入烧瓶中并加热至回流以确保溶解。然后批料经2小时冷却至40至45℃。然后在约1小时内滴加庚烷(40ml)，保持温度在40至45℃。然后将批料在40至45℃下搅拌1小时，经1小时冷却至室温并在该温度下搅拌1小时。然后过滤批料，用冷却的乙酸异丙酯-庚烷(1:1，2×10ml)洗涤固体。将得到的固体在40℃的真空烘箱中干燥。
产量：7.69g
H)溶剂/反溶剂：乙酸异丙酯/庚烷-方法2-根据本发明
将截短侧耳素(10.01g，26.4mmol)和乙酸异丙酯(20ml)加入烧瓶中并加热至回流以确保溶解。然后批料经2小时冷却至40至45℃。然后在约1小时内滴加庚烷(40ml)，保持温度在40至45℃。然后将批料在40至45℃下搅拌1小时，经1小时冷却至室温并在该温度下搅拌1小时。然后批料经1小时冷却至0至5℃并在该温度下再搅拌1小时。然后过滤批料，用冷却的乙酸异丙酯-庚烷(1:1，2×10ml)洗涤固体。将得到的固体在40℃的真空烘箱中干燥。
产量：8.01g
I)截短侧耳素甲苯磺酰化
将截短侧耳素(10.03g，26.5mmol)和乙腈(40ml)加入烧瓶中，加入氢氧化钠(1.62g，40.5mmol)的水(13.3ml)溶液，然后加入乙腈(5ml)作为管线冲洗液(line rinse)。然后将批料冷却至17℃并加入对甲苯磺酰氯(5.12g，26.9mmol)，然后加入乙腈(5ml)作为管线冲洗液。然后将批料在室温下搅拌1.5小时直至通过HPLC完成。加入甲基叔丁基醚(50ml)和水(50ml)，搅拌并使其沉降。除去下层水层。然后用5％氯化钠水溶液(2×50ml)洗涤批料。分离和精过滤(polish filtration)后，将批料浓缩至约6体积，加入MTBE(100ml)并再次浓缩至6体积。加入另一份MTBE(35ml)，并将批料浓缩至6体积。然后加入二异丙醚(24ml)和庚烷(35ml)的混合物，并将批料浓缩至6体积。然后加入另一二异丙醚(24ml)和庚烷(35ml)的混合物，并将批料搅拌30分钟。然后将批料加热至57℃，搅拌2小时并过夜冷却至室温，然后过滤并用二异丙醚-庚烷(2:3，2×20ml)洗涤。将得到的固体在40℃的真空烘箱中干燥。
产量：12.46g
J)伴随放入晶种的溶剂：乙酸异丙酯-方法1-根据本发明
将截短侧耳素(200g，0.528mol)和乙酸异丙酯(400ml)加入烧瓶中并加热至回流。将溶液在回流下搅拌30分钟。然后将批料经2小时冷却至53℃，在55℃下加入截短侧耳素晶种(200mg)。将批料在53℃下搅拌2小时，经2小时冷却至20℃并在该温度下搅拌2小时。然后批料经1小时进一步冷却至1℃并在该温度下再搅拌13小时。然后过滤批料，用冷却的乙酸异丙酯(2×200ml)洗涤固体，并在40℃的真空烘箱中干燥。
产量：124.04g
K)伴随放入晶种的溶剂：乙酸异丙酯-方法2-根据本发明
将截短侧耳素(200g，0.528mol)和乙酸异丙酯(400ml)加入烧瓶中并加热至回流。将批料在回流下搅拌30分钟以确保溶解，然后经4小时冷却至18℃，在55℃下加入截短侧耳素晶种(200mg)。将批料在18℃下搅拌2小时，过滤，用冷却的乙酸异丙酯(2×200ml)洗涤固体，并在40℃的真空烘箱中干燥。
产量：106.59g
L)伴随放入晶种的溶剂/反溶剂：乙酸异丙酯/己烷-根据本发明
将截短侧耳素(200g，0.528mol)和乙酸异丙酯(400ml)加入烧瓶中并加热至回流以确保溶解。然后批料经3小时冷却至45℃，2小时后加入截短侧耳素晶种(60mg)。然后将批料在45℃下搅拌1小时，经2小时冷却至17℃并在该温度下搅拌12小时。然后将批料经1小时冷却至5℃并在该温度下再搅拌2小时。然后在约4小时内滴加己烷(794ml)，保持温度在5℃。然后将批料在5℃下搅拌2小时，过滤，固体用冷却的乙酸异丙酯(132ml)洗涤，然后进一步用冷却的乙酸异丙酯(66ml)洗涤，然后用冷却的己烷(200ml)洗涤。将得到的固体在40℃的真空烘箱中干燥。
产量：167.89g
M)2,3-截短侧耳素环氧化物
通过一系列制备型HPLC分离从截短侧耳素中分离出2,3-截短侧耳素环氧化物。进行初始纯化，然后进行第二次制备型HPLC分离以进一步纯化。最后，通过SFC(超临界流体色谱法)进行第三次纯化，得到最终的2,3-截短侧耳素环氧化物。
总共从约5kg的批量(粗)截短侧耳素中分离出约7g的2,3-截短侧耳素环氧化物，纯度>90％。
1H-NMR(200MHz,DMSO-d6)δ6.13(dd,J顺＝10.8Hz,J反＝18.0Hz,1H,H-19),5.58(d,J＝8.8Hz,H-14),5.25(t,1H,22-OH),5.05(d,J顺＝13.2,1H,H-20a),5.01(d,J反＝9.2Hz,1H,H-20b),4.46(d,J＝6.0Hh,1H,11-OH),3.88(AB,2H,H-22),3.60(d,J＝3.2Hz,1H,H-3),3.32(d,J＝3.2Hz,,1H,H-2),3.23(dd,1H,H-11),2.28-1.15(11H,与H1，H4，H6，H7，H8，H10和H13相关的多重系列),1.18(s,3H H-15),1.05(s,3H,H-18),0.74(d,J＝7.2Hz,3H,H-17),0.63(d,J＝6.8Hz,3H,H-16)
质谱:
m/z＝396.3[M+H2O]；m/z＝423.5[M+HCOO-]。

Claims (6)

1.一种纯化截短侧耳素的方法，
所述方法通过在乙酸异丙酯的存在下的结晶和/或重结晶进行。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述结晶和/或重结晶在有机反溶剂的存在下进行。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述反溶剂选自由庚烷、己烷和它们的混合物组成的组。
4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述结晶和/或重结晶在乙酸异丙酯和反溶剂的组合的存在下进行，乙酸异丙酯和所述反溶剂的组合选自由以下组成的组：
庚烷存在下的乙酸异丙酯，
己烷存在下的乙酸异丙酯，
和它们的混合物。
5.根据权利要求2至4中任一项所述的方法，其中乙酸异丙酯与所述反溶剂的比例为8至0.25，优选为2至0.4。
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，包括使用晶种引发所述结晶和/或重结晶的步骤。
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