TW201835024A - 截短側耳素之純化 - Google Patents

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Abstract

本發明係關於經由結晶及/或再結晶之手段純化截短側耳素之方法。

Description

截短側耳素之純化
本發明係關於截短側耳素(pleuromutilin)之純化方法，截短側耳素係用於作為製備藥物活性化合物之起始原料。具體而言，所述方法減少經由本案發明人發現為截短側耳素中的關鍵性雜質之2,3-截短側耳素環氧化合物，且該方法會改善該原料的整體純度。
截短側耳素，化合物之化學式為:是一種天然存在的抗生素，如經由膽子菌網 (basidiomycetes)擔子菌側耳屬(Pleurotus mutilus)以及帕氏側耳屬(P. passeckerianus)製造，如參見默克索引，第12版，第7694項。 　　截短側耳素係經由發酵製法製造，從發酵液中萃取且最終呈結晶固體化合物單離。 　　截短側耳素係為核准的獸醫產品泰妙素(tiamulin)以及沃尼妙林(valnemulin)的起始原料。 　　衍生自截短側耳素的藥物活性化合物(半合成化合物)係為在細菌中核糖體蛋白質合成的抑制物。核准用於人類使用的半合成截短側耳素的唯一代表係為瑞他帕林(retapamulin)(AltargoP® 、AltabaxP® )，其為一種已核准用於短期治療膿皰瘡以及感染小裂傷、擦傷或縫合傷口的局部藥劑。泰妙素(Denagard® )以及沃尼妙林(Econor® )係為另外兩種半合成截短側耳素衍生物，已在獸醫藥物中全身性使用多年。抗生素抗藥牽的持續增加，組合上出現高度致病性病原體(例如是抗甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcus aureus ，MRSA)以及多重抗藥性肺炎鏈球菌(multidrug resistantStreptococcus pneumoniae ))，支持了新穎適用於抵抗由有抗藥性生物所引起的嚴重細菌感染之抗菌試劑的迫切需求。基於多重抗藥性微生物對發病率及死亡率的重大影響，彼等被國家學院(負責單位包括美國傳染病協會、疾病控制中心以及世界衛生組織)認為對公共健康造成重大的威脅。 　　衍生自截短側耳素的半合成化合物已表現出優異的對抗抗藥性生物之活性，該些抗藥性生物尤其是包含肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌(Heamophilus influenzae )、金黃色葡萄球菌(包括MRSA)、黏膜炎莫拉氏菌(Moraxella catarrhalis )、嗜肺性退伍軍人桿菌(Legionella pneumophila )、肺炎衣原體(Chlamydophila pneumoniae )以及肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae )。 　　已知兩種主要的半合成截短側耳素:硫基乙醯基-馬替琳(sulfanylacetyl-mutilins)和胺甲醯基氧基-馬替琳(carbamoyloxy-mutilins)。不同之處在於從三環馬替琳核心到側邊R的不同連接子部分。硫基乙醯基馬替琳尤其是揭露在WO2005023257、 WO1999021855、WO01/09095、WO02/04414、 WO02/22580、WO03/082260、WO03/090740、 WO2004011431、WO2007/000001、WO2007000004、 WO2007014409、WO2007/079515、WO/2008/040043、 WO 2008/113089、WO2009/009812、WO2009/009813、 WO2010/025482、WO2011/146953、WO2011/146954、 WO2012/031307、WO2015/110481，以及胺甲醯基氧基-馬替琳尤其是揭露在WO1997025309、WO1998005659、 WO2006063801、WO2006099196、WO07062333、 WO07062335。硫基乙醯基-以及胺甲醯基氧基-馬替琳兩者都使用截短側耳素作為起始原料。 　　已發展出大量具有截短側耳素主要環型結構且於一級羥基團被取代之其它截短側耳素，例如作為抗菌劑。由於彼等顯著的抗菌活性，已發現一群特別令人感興趣的截短側耳素衍生物，胺基-羥基-經取代的環己基硫基乙醯基馬替琳，如WO 2008/113089揭露者。如WO2008/113089揭露14-O-{[(4-胺基-2-羥基-環己基)-硫基]-乙醯基}-馬替琳是特別有用的化合物，因彼等為對抗革蘭氏陽性及革蘭氏陰性病原體的活性，特別是呼吸道及皮膚及皮膚結構感染的情況下。特別是，已開發14-O-{[(1R, 2R, 4R)-4-胺基-2-羥基-環己基硫基]-乙醯基}-馬替琳(以下表示為「BC-3781」或「利福林(lefamulin)」)用於治療人類嚴重感染的全身性用途。BC-3781尤其是描述在R. Novak, Are pleuromutilin antibiotics finally fit for human use?Ann. N.Y. Acad. Sci. 1241(2011)71-81 以及W. T. Prince et al, Phase II Clinical Study of BC-3781, a Pleuromutilin Antibiotic, in Treatment of Patients with Acute Bacterial Skin and Skin Structure Infections, Antimicrobial Agents and Chemotherapy Vol 57, No 5(2013), 2087-2094。後面的公開物例示說明截短側耳素衍生物經由全身給藥治療人嚴重感染概念的初步證據。在BC-3781的合成，亦使用截短側耳素做為起始原料。 　　在先前技術中，以下方法描述截短側耳素的結晶/純化:再者，在美國專利第4,092,424號、第4,129,721號、第4,247,542號、英國專利第1,197,942號中揭露以及在例如是Antibiotic Substances from Basidiomycetes VIlI, F. Kavanagh et al., Proc. N.A.S., 1951, 570-574的論文中公開截短側耳素的萃取及後續純化之方法。該等方法包括以水不可溶性之溶劑(例如甲苯、乙酸乙酯或氯仿)萃取已過濾的培養液。亦描述以水可溶性之溶劑(例如是丙酮)從培養的菌絲體進行萃取，接著以水不可溶性的溶劑(例如乙酸乙酯)萃取出截短側耳素。
然而，先前技術中未有描述2,3-截短側耳素環氧化物雜質的減少者。本發明的發明人發現2,3-截短側耳素是商業上可獲得的截短側耳素的重要雜質。由N. Palma et al 撰寫的Eur. Congr. Biotechnol., 3rd , Volume 1, 1984, p 533-542提及2,3-截短側耳素環氧化物為當擔子菌門斜蓋傘屬(Basidiomycetous Genus Clitopilus Kummer)浸沒培養時產生的截短側耳素中的主要可能代謝物之一。 　　另一個重要的截短側耳素的雜質為14-乙醯基馬替琳，然而，其在更下游的化學中較不重要。例如進行甲苯磺醯化反應，其通常是用以活化用於半合成截短側耳素衍生物的合成之截短側耳素中一級羥基團(如在WO/2008/040043、WO 2008/113089、WO2009/009812、 WO2009/009813、WO2010/025482、WO2011/146953、 WO2011/146954、WO2012/031307、WO2015/110481中揭露)，將從商業批料中完全去除14-乙醯基馬替琳。14-乙醯基馬替琳不會進行甲苯磺醯化反應，以原樣存在母液中而被耗盡。然而，2,3-截短側耳素環氧化物將進行甲苯磺醯化反應且保留在單離出的截短側耳素甲苯磺酸酯中。在沒有進一步純化的情況下，對具有如下所示純度概況之商業上截短側耳素批料進行甲苯磺酰化反應，並單離結晶截短側耳素甲苯磺酸酯會導致以下結果:單離的結晶截短側耳素-甲苯磺酸酯的純度從截短側耳素中的86.17%面積改善至未有檢測出14-乙醯基馬替琳的98.55%面積。然而，2,3-截短側耳素環氧化物會轉換為2,3-環氧-截短側耳素甲苯磺酸酯且為明顯的雜質仍留在截短側耳素甲苯磺酸酯中。相較於截短側耳素-甲苯磺酸酯，2,3-環氧-截短側耳素的RRF之於HPLC分析方法所用波長為約1，換言之該雜質至約1.32% w/w。考量到在商業上截短側耳素批料中有0.96% w/w的2,3-截短側耳素環氧化物進料量而言，該些數據確認2,3-環氧-截短側耳素甲苯磺酸酯不會被耗盡。 　　因此極期望能得到一種截短側耳素的純化方法，其顯著減少2,3-截短側耳素環氧化物且使在最終活性藥物成分(API)中產生雜質的可能性減到最小。 　　經由關於泰妙素的公開數據，發明人認知到2,3-截短側耳素環氧化物可能會導致API雜質。在EUROPEAN PHARMACOPOEIA 8.0(第3416頁至第3418頁)列出以下泰妙素雜質I:泰妙素係以氫富馬酸單酯鹽(hydrogenfumarate salt)存在。推測雜質2,3-二羥基泰妙素 2-富馬酸酯很可能從2,3-環氧基泰妙素雜質與富馬酸反應產生。本發明係利用純化截短側耳素的方法，來解決這個潛在問題，該方法在乙酸異丙酯存在下經由結晶及/或再結晶之手段。本發明之較佳實施例係在附屬請求項中定義。 　　令人感到驚訝地發現，特別是以乙酸異丙酯結晶及/或再結晶截短側耳素能有效減少在截短側耳素中的雜質2,3-截短側耳素環氧化物的量。 　　「結晶及/或再結晶」用語包含以下選項: 　　其中僅經由結晶純化截短側耳素的製法。在該情況下，有乙酸異丙酯存在。 　　其中經由結晶及再結晶純化截短側耳素的製法。在該情況下，至少在兩個步驟中的一個中，較佳為在兩個步驟中，有乙酸異丙酯存在。 　　在本發明之一較佳實施例中，經由再結晶之手段進行該製法，如:僅在再結晶步驟中採用乙酸異丙酯。 　　「在乙酸異丙酯存在下」用語表示在結晶及/或再結晶製法中可存在其他試劑、以及亦存在其他溶劑。然而，較佳地，使用在結晶及/或再結晶製法中的溶劑基本上由乙酸異丙酯所組成，亦即未有其他溶劑存在。 　　在本發明之一較佳實施例中，在有機反溶劑的存在下進行結晶及/或再結晶。 　　反溶劑結晶的觀念本身是已知的且意指在化合物中添加液體(其中，待純化的化合物為不溶或僅微溶(亦即反溶劑))到於結晶溶劑中的化合物溶液，以促進化合物之沉澱。 　　在發明的製法中，其包含結晶及再結晶兩個步驟，反溶劑應至少存在於其中有乙酸異丙酯存在的該或該等步驟。 　　熟悉技藝人士非常瞭解如何決定合適於依據本發明之製法之溶液的反溶劑，如合適於在乙酸異丙酯中的截短側耳素溶液的反溶劑。 　　較佳地，該反溶劑係選自於由庚烷、己烷及其混合物所組成之群組。 　　在較佳之依據任一前述請求項的方法中，在乙酸異丙酯與反溶劑之組合的存在下進行結晶及/或再結晶，該組合選自於由下列者所組成之群組: 　　在庚烷存在下的乙酸異丙酯、 　　在己烷存在下的乙酸異丙酯、 　　及其混合物。 　　乙酸異丙酯對反溶劑之比率較佳係從8至0.25，特別佳為2至0.4。 　　本發明之方法較佳包含施用晶種(seed crystals)之步驟，以啟動結晶及/或再結晶。 　　本申請案進一步揭露，在乙酸異丙酯存在下或在乙酸異丙酯及反溶劑存在下之經由結晶及/或再結晶之手段的純化截短側耳素之方法，該方法會導致所得到截短側耳素的整體純度為≥ 95%，特別是≥ 97%。 　　較佳地，相較於結晶及/或再結晶步驟之前含在截短側耳素中之2,3-截短側耳素環氧化物的水平，在本方法中2,3-截短側耳素環氧化物的水平減少25%或更多，較佳為35%或更多。 　　特別地，在本發明中，在獲得的截短側耳素中，2,3-截短側耳素環氧化物雜質含量從約1.0% w/w減少到0.70% w/w或甚至更少。
俗名馬替琳(mutilin)意指IUPAC系統名(1S,2R,3S,4S, 6R,7R,8R,14R)-3,6-二羥基-2,4,7,14-四甲基-4-乙烯基-三環[5.4.3.01,8 ]十四碳-9-酮。以下所討論的，使用H. Berner(Berner, H.; Schulz, G.; Schneider H.Tetrahedron 1980 ,36 , 1807-1811)所述之馬替琳編號系統予以編號。本發明係關於經由截短側耳素(再)-結晶手段的有效純化製法/方法。 　　本發明使得能夠純化截短側耳素，並且可使用在從發酵培養液萃取出產物之後的初步單離/結晶中。或者，在單離出截短側耳素之後，使用上述特定的試劑及試劑系統。 　　在從發酵單離之後的截短側耳素具有在約85至95%之間變化的合理高純度。然而，如果使用截短側耳素作為起始原料以製造用於治療動物或人類半合成的API，則有明顯大量的雜質存在，其等越來越受到關注。特別是2,3-截短側耳素環氧化物的存在是受到高度的關注。 　　在下列表中陳列商業上(粗)截短側耳素的純度以及純化的截短側耳素。 使用己烷作為反溶劑(如:乙酸異丙酯/己烷)導致可相比擬的純化結果。 　　從上述那些表中可看出，以所有施用的純化方法都達到顯著的純化。 　　純化之後只剩下三種雜質，其中兩種是已知的雜質，即為14-乙醯基馬替琳以及2,3-截短側耳素環氧化物。經由從粗製截短側耳素中單離出2,3-截短側耳素環氧化物並進行像是NMR和MS等分析製程，已經說明該材料的結構。用以分析截短側耳素批料之HPLC方法如下表示:為測定在截短側耳素中雜質的重量含量，必需以雜質的RRF(相對響應因子)值校正面積%數值。應用響應因子校正得到以下兩個已知雜質的結果:令人驚訝地，對於純化該商業化截短側耳素馬替琳批料所用該系列乙酸酯溶劑而言，視需要在反溶劑存在下，兩種已知的雜質的減少並不相同。最令人驚訝的是當使用i-PrOAc或使用i-PrOAc/庚烷的組合作為結晶溶劑時，關鍵性的2,3-截短側耳素環氧化物的減少會顯著增加。 　　尤其，令人驚訝的是與n-PrOAc相比，i-ProAc與反溶劑(庚烷)之組合對2,3-截短側耳素環氧化物的減少仍是增加。這個結果是令人驚訝的，因為儘管已知反溶劑會增加該製法的產率，但傾向於降低純化的效率。 　　上述非常令人驚訝的效果在進一步合成半合成截短側耳素衍生物上是極具有價值的。除了在其中截短側耳素中殘留較大量的t-BuOAc外，14-乙醯基馬替琳的減少大致上是相同的。然而，如上述提及者，雜質14-乙醯基馬替琳並不如2,3-截短側耳素環氧化物那樣重要/關鍵性的。 　　用於人類API的雜質閥值非常嚴格。 　　人類市場的藥劑物質必須滿足在對應的ICH(人用藥物註冊技術要求國際協調會議)指導原則中所定義之管理要求。新穎藥劑物質中對ICH的雜質指導原則(Q3A(R2))包含下述之閥值:從前述之ICH閥值可看出所欲的是讓所有的個別未知的雜質低於0.10%面積及結構明確的雜質低於0.15%。依據本發明提供之截短側耳素的製法/方法支持製造在所欲規格範圍內且滿足ICH要求的API(活性藥物成分)。 　　已發現，依據本發明之(再)-結晶製法可用於大規模上且具有高的回收率(在大部分的情況下是＞50%)。 　　當然，依據本發明之(再)-結晶方法可以重複直到達到所欲純度。 　　縮寫字 　　API 活性藥物成分 　　EP 歐洲藥典 　　g 公克 　　kg 公斤 　　l 公升 　　M 莫耳濃度 　　mmol 毫莫耳 　　min 分鐘 　　ml 毫升 　　RRF 相對響應因子 　　w/v 重量/體積 　　w/w 重量/重量實驗部分 - 截短側耳素的純化方法 : A) 溶劑 : 乙酸甲酯 截短側耳素(10.02 g，26.5 mmol)以及乙酸甲酯(20 ml)裝入燒瓶並加熱至65℃。該批料在該溫度下攪拌30分鐘以確保溶解，然後以4小時冷卻至0-5℃，以及在該溫度下攪拌1小時。接著將該批料過濾，並以冷卻的乙酸甲酯(10 ml)清洗該固體且在40℃真空烘箱中乾燥。 　　產率:6.70 gB) 溶劑 : 乙酸乙酯 截短側耳素(10.07 g，26.6 mmol)以及乙酸乙酯(20 ml)裝入燒瓶並加熱至80℃。該批料在該溫度下攪拌30分鐘以確保溶解，然後以4小時冷卻至0-5℃，以及在該溫度下攪拌1小時。接著將該批料過濾，並以冷卻的乙酸乙酯(10 ml)清洗該固體且在40℃真空烘箱中乾燥。 　　產率:7.06 gC) 溶劑 : 乙酸異丙酯 - 依據本發明 截短側耳素(10.04 g，26.5 mmol)以及乙酸異丙酯(20 ml)裝入燒瓶並加熱至90℃。該批料在該溫度下攪拌30分鐘以確保溶解，然後以4小時冷卻至0-5℃，以及在該溫度下攪拌1小時。接著將該批料過濾，並以冷卻的乙酸異丙酯(10 ml)清洗該固體且在40℃真空烘箱中乾燥。 　　產率:5.83 g D)溶劑 : 乙酸正丙酯 截短側耳素(10.01 g，26.4 mmol)以及乙酸正丙酯(20 ml)裝入燒瓶並加熱至90℃。該批料在該溫度下攪拌30分鐘以確保溶解，然後以4小時冷卻至0-5℃，以及在該溫度下攪拌1小時。接著將該批料過濾，並以冷卻的乙酸正丙酯(10 ml)清洗該固體且在40℃真空烘箱中乾燥。 　　產率:4.64 gE) 溶劑 : 乙酸異丁酯 截短側耳素(10.00 g，26.4 mmol)以及乙酸異丁酯(20 ml)裝入燒瓶並加熱至90℃。該批料在該溫度下攪拌30分鐘以確保溶解，然後以4小時冷卻至0-5℃，以及在該溫度下攪拌1小時。接著將該批料過濾，並以冷卻的乙酸異丁酯(10 ml)清洗該固體且在40℃真空烘箱中乾燥。 　　產率:6.43 g F)溶劑 : 乙酸第三丁酯 截短側耳素(10.00 g，26.4 mmol)以及乙酸第三丁酯(20 ml)裝入燒瓶並加熱至90℃。該批料在該溫度下攪拌30分鐘但未發生完全溶解。該批料以4小時冷卻至0-5℃，在該溫度下攪拌1小時、過濾，並以冷卻的乙酸第三丁酯(10 ml)清洗該固體。將該固體在40℃真空烘箱中乾燥。 　　產率:7.44 gG) 溶劑 / 反溶劑 : 乙酸異丙酯 / 庚烷 - 方法 1- 依據本發明 截短側耳素(10.01 g，26.4 mmol)以及乙酸異丙酯(20 ml)裝入燒瓶並加熱至回流以確保溶解。然後將該批料以2小時冷卻至40-45℃。再以約1小時將庚烷(40 ml)逐滴加入，維持在40-45℃的溫度下。然後將該批料在40-45℃攪拌1小時，以1小時冷卻至室溫且在該溫度下攪拌1小時。接著將該批料過濾，且以冷卻的乙酸異丙酯-庚烷(1:1，2×10 ml)清洗該固體。該最終固體在40℃真空烘箱中乾燥。 　　產率:7.69 gH) 溶劑 / 反溶劑 : 乙酸異丙酯 / 庚烷 - 方法 2- 依據本發明 截短側耳素(10.01 g，26.4 mmol)以及乙酸異丙酯(20 ml)裝入燒瓶並加熱至回流以確保溶解。然後該批料以2小時冷卻至40-45℃。然後以約1小時將庚烷(40 ml)逐滴加入，維持在40-45℃的溫度下。然後將該批料在40-45℃攪拌1小時，以1小時冷卻至室溫且在該溫度下攪拌1小時。再將該批料以1小時冷卻至0-5℃並在該溫度下攪拌再1小時。接著將該批料過濾，且以冷卻的乙酸異丙酯-庚烷(1:1，2×10 ml)清洗該固體。該最終固體在40℃真空烘箱中乾燥。 　　產率:8.01 g I)截短側耳素之甲苯磺醯化 截短側耳素(10.03 g，26.5 mmol)以及乙腈(40 ml)裝入燒瓶中，並加入溶於水(13.3 ml)的氫氧化鈉(1.62 g，40.5 mmol)溶液，接著加入乙腈(5 ml)管線沖洗(line rinse)。然後將該批料冷卻到17℃以及加入對甲基苯基磺醯氯(5.12 g，26.9 mmol)，接著該批料以乙腈(5 ml) 管線沖洗。然後該批料在室溫下攪拌1.5小時直至到經由HPLC完成。加入甲基第三丁基醚(50 ml)以及水(50 ml)，攪拌並使其沉降。移除下層水層。然後將該批料用5％氯化鈉水溶液(2×50 ml)洗滌。分離和精加工過濾之後，將該批料濃縮至約6 vol，加入MTBE(100 ml)並再次濃縮至6 vol。再加入另一部分MTBE(35 ml)並將該批料濃縮至6 vol。然後加入二異丙基醚(24 ml)和庚烷(35 ml)的混合物並將該批料濃縮至6 vol。然後加入二異丙基醚(24 ml)和庚烷(35 ml)的另一混合物並將該批料攪拌30分鐘。然後將該批料加熱至57℃，攪拌2小時並冷卻至室溫過夜，之後過濾並以二異丙基醚-庚烷(2:3，2×20 ml)洗滌。所得固體在40℃的真空烘箱中乾燥。 　　產量:12.46克J) 溶劑 : 乙酸異丙酯及種晶 - 方法 1- 依據本發明 截短側耳素(200 g，0.528 mol)以及乙酸異丙酯(400 ml)裝入燒瓶並加熱至回流。該溶液回流攪拌30分鐘。然後將該批料以2小時冷卻至53℃，在55℃下加入截短側耳素晶種(200 mg)。將該批料在53℃攪拌2小時，以2小時冷卻至20℃並在此溫度下攪拌2小時。然後該批料以1小時進一步冷卻至1℃且在該溫度下攪拌另13小時。接著將該批料過濾，並以冷卻的乙酸異丙酯(2×200 ml)清洗該固體且在40℃真空烘箱中乾燥。 　　產率:124.04 gK) 溶劑 : 乙酸異丙酯及種晶 - 方法 2- 依據本發明 截短側耳素(200 g，0.528 mol)以及乙酸異丙酯(400 ml)裝入燒瓶並加熱至回流。該批料回流攪拌30分鐘以確保溶解，然後以4小時冷卻至18℃，在55℃下加入截短側耳素晶種(200 mg)。該批料在18℃攪拌2小時、過濾，並以冷卻的乙酸異丙酯(2×200 ml)清洗該固體且在40℃真空烘箱中乾燥。 　　產率:106.59 gL) 溶劑 / 反溶劑 : 乙酸異丙酯 / 庚烷及種晶 - 依據本發明 截短側耳素(200 g，0.528 mol)以及乙酸異丙酯(400 ml)裝入燒瓶並加熱至回流以確保溶解。然後以3小時將該批料冷卻至45℃，2小時之後加入截短側耳素晶種(60 mg)。然後將該批料在45℃攪拌1小時，以2小時冷卻至17℃並在該溫度下攪拌12小時。再將該批料以1小時冷卻至5℃且在該溫度下攪拌另2小時。然後以大約4小時將庚烷(794 ml)逐滴加入，維持在5℃的溫度下。該批料在5℃攪拌2小時、過濾，且以冷卻的乙酸異丙酯(132 ml)，接著以另一冷卻的乙酸異丙酯(66 ml)，然後以冷卻的庚烷(200 ml)清洗該固體。該最終固體在40℃真空烘箱中乾燥。 　　產率:167.89 gM)2,3- 截短側耳素環氧化物 經由一連串製備型-HPLC分離法從截短側耳素單離截短側耳素環氧化物。進行初步的純化，接著以第二製備型-HPLC分離法進一步純化。最後，利用SFC(超臨界流體色譜法)進行第三次純化以提供最終2,3-截短側耳素環氧化物。 從約5 kg散裝(粗製)之具有＞90%純度的截短側耳素單離出總共約7 g的2,3-截短側耳素環氧化物。1 H-NMR(200 MHz, DMSO-d6 )δ 6.13(dd, Jcis =10.8Hz, Jtrans =18.0Hz, 1H, H-19), 5.58(d, J=8.8Hz, H-14), 5.25(t, 1H, 22-OH), 5.05(d, Jcis =13.2, 1H, H-20a), 5.01(d, Jtrans =9.2Hz, 1H, H-20b), 4.46(d, J=6.0Hh, 1H, 11-OH), 3.88(AB, 2H, H-22), 3.60(d, J=3.2Hz, 1H, H-3), 3.32(d, J=3.2Hz,, 1H, H-2), 3.23(dd, 1H, H-11), 2.28-1.15(11H, 關於H1, H4, H6, H7, H8, H10以及H13之一系列多重譜), 1.18(s, 3H H-15), 1.05(s, 3 H, H-18), 0.74(d, J=7.2Hz, 3H, H-17), 0.63(d, J=6.8Hz, 3H, H-16)質譜 : m/z = 396.3 [M+H2 O]；m/z = 423.5 [M+HCOO- ]

Claims (6)

  1. 一種純化截短側耳素之的方法，其在乙酸異丙酯存在下經由結晶及/或再結晶之手段。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中結晶及/或再結晶係在有機反溶劑(anti-solvent)存在下進行。
  3. 如申請專利範圍第2項所述之方法，其中該反溶劑係選自由庚烷、己烷及其混合物所組成之群組。
  4. 如前述申請專利範圍中任一項所述之方法，其中結晶及/或再結晶係在乙酸異丙酯與反溶劑之組合的存在下進行，該組合係選自由以下所組成之群組： 　　在庚烷存在下之乙酸異丙酯、 　　在己烷存在下之乙酸異丙酯、 　　及其混合物。
  5. 如申請專利範圍第2項至第4項中任一項所述之方法，其中乙酸異丙酯對反溶劑之比率係從8至0.25，較佳為2至0.4。
  6. 如前述申請專利範圍中任一項所述之方法，包含施用晶種(seed crystals)之步驟，以啟動結晶及/或再結晶。
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113354538A (zh) * 2020-03-03 2021-09-07 新疆上昵生物科技有限公司 一种高纯度截短侧耳素的提取方法
WO2021209173A1 (en) * 2020-04-17 2021-10-21 Nabriva Therapeutics GmbH Novel therapeutic use of pleuromutilins
JP2023548968A (ja) * 2020-10-29 2023-11-21 エランコ ティーアゲズンタイト アーゲー プレウロムチリン類を精製する方法

Family Cites Families (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4092424A (en) 1964-04-17 1978-05-30 Biochemie Ges.M.B.H. Antibiotic derivatives
GB1197942A (en) 1967-08-15 1970-07-08 Biochemie Gmbh Process for the production of the Antibiotic Pleuromutilin
US4129721A (en) 1977-12-08 1978-12-12 Eli Lilly And Company A-40104 antibiotics and process for production thereof
US4247542A (en) 1978-06-22 1981-01-27 Eli Lilly And Company A-40104 Antibiotics and process for production thereof
WO1997025309A1 (en) 1996-01-03 1997-07-17 Smithkline Beecham Plc Carbamoyloxy derivatives of mutiline and their use as antibacterials
HUP0001741A3 (en) 1996-08-02 2000-11-28 Smithkline Beecham Plc Azabicyclic carbamoyloxy mutilin derivatives for antibacterial use, process for preparing them, pharmaceuticals contg. them and their use
UY25225A1 (es) 1997-10-29 2000-12-29 Smithkline Beecham Plc Derivados de pleuromutilina utiles como agentes antimicrobianos
GB9918037D0 (en) 1999-07-30 1999-09-29 Biochemie Gmbh Organic compounds
GB0017031D0 (en) 2000-07-11 2000-08-30 Biochemie Gmbh Antimicrobials
PE20020676A1 (es) 2000-09-13 2002-08-27 Biochemie Gmbh Compuestos de mutilina como antibacterianos
GB0207495D0 (en) 2002-03-28 2002-05-08 Biochemie Gmbh Organic compounds
GB0209262D0 (en) 2002-04-23 2002-06-05 Biochemie Gmbh Organic compounds
WO2004011431A1 (en) 2002-07-24 2004-02-05 Sandoz Ag Pleuromutilin derivatives as antimicrobbials
GB0218578D0 (en) * 2002-08-09 2002-09-18 Glaxo Group Ltd Novel method
ATE450535T1 (de) 2003-09-03 2009-12-15 Glaxo Group Ltd Neues verfahren zur herstellung von pleuromutilinderivaten
EP1863768A1 (en) 2004-12-13 2007-12-12 Glaxo Group Limited Novel polymorph of (5-amino-6-methoxy-3-pyridincarbonyl)carbamic acid 2-(s)-hydroxymutilin 14-ester
GB0504314D0 (en) * 2005-03-02 2005-04-06 Glaxo Group Ltd Novel polymorph
JP2008534443A (ja) 2005-03-10 2008-08-28 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 新規な方法
EP2298733B1 (en) 2005-06-27 2016-05-25 Nabriva Therapeutics AG Pleuromutilin derivatives containing a hydroxyamino- or acyloxyaminocycloalkyl group
GB0513058D0 (en) 2005-06-27 2005-08-03 Sandoz Ag Organic compounds
GB0515995D0 (en) 2005-08-03 2005-09-07 Sandoz Ag Organic compounds
TW200736203A (en) 2005-11-18 2007-10-01 Glaxo Group Ltd New pleuromutilin derivative and its use
TW200738599A (en) 2005-11-18 2007-10-16 Glaxo Group Ltd New pleuromutilin derivative and its use
EP1808431A1 (en) 2006-01-16 2007-07-18 Nabriva Therapeutics Forschungs GmbH Mutilin derivatives and their use as pharmaceutical
EP1908750A1 (en) 2006-10-05 2008-04-09 Nabriva Therapeutics Forschungs GmbH Process for the preparation of pleuromutilins
EP1972618A1 (en) 2007-03-20 2008-09-24 Nabriva Therapeutics AG Pleuromutilin derivatives for the treatment of diseases mediated by microbes
EP2014640A1 (en) 2007-07-13 2009-01-14 Nabriva Therapeutics AG Pleuromutilin derivatives
EP2014645A1 (en) 2007-07-13 2009-01-14 Nabriva Therapeutics AG Pleuromutilin derivatives and their use as antimicrobials
EP2159220A1 (en) 2008-09-02 2010-03-03 Nabriva Therapeutics AG Organic compounds
CN101838199B (zh) * 2010-05-21 2013-01-30 西南大学 截短侧耳素的溶剂提取工艺
EP2399904A1 (en) * 2010-05-26 2011-12-28 Nabriva Therapeutics AG Process for the preparation of pleuromutilins
EP2390245A1 (en) 2010-05-26 2011-11-30 Nabriva Therapeutics AG Enantiomerically pure amines
EP2433926A1 (en) 2010-09-09 2012-03-28 Nabriva Therapeutics AG Pleuromutilin derivatives for use in the treatment of diseases mediated by microbes
CN102050737B (zh) * 2010-12-10 2013-05-08 山东胜利股份有限公司 一种截短侧耳素的提取纯化方法
CN102351698A (zh) * 2011-08-15 2012-02-15 上海华震科技有限公司 一种用吸附色谱法从结晶母液中回收截短侧耳素的方法
JP6715772B2 (ja) 2014-01-22 2020-07-01 ナブリヴァ セラピュティクス ゲーエムベーハー １２−ｅｐｉ−プロイロムチリン

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