CN109722339A - 一种香松烟用香料的制备方法和应用 - Google Patents

一种香松烟用香料的制备方法和应用 Download PDF

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CN109722339A CN201910007049.2A CN201910007049A CN109722339A CN 109722339 A CN109722339 A CN 109722339A CN 201910007049 A CN201910007049 A CN 201910007049A CN 109722339 A CN109722339 A CN 109722339A
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段焰青
郭青
董立民
夏建军
黄立斌
雷声
徐若飞
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China Tobacco Yunnan Industrial Co Ltd
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China Tobacco Yunnan Industrial Co Ltd
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Abstract

本发明提供了一种香松烟用香料的制备方法和应用,其通过包括以下步骤的方法制备:(1)烟草黄色土源菌X7X菌剂的制备;(2)利用烟草黄色土源菌X7X菌剂对香松粉末进行发酵,得到发酵香松;(3)将发酵香松进行碳化处理,得到发酵碳化香松;(4)将发酵碳化香松进行乙醇回流提取,经过滤浓缩得到香松烟用香料。所述香松烟用香料,将其应用于卷烟烟丝中,能使卷烟烟气具有特殊木香及清香的同时,稍带独特焦香,能显著丰富卷烟烟香,增加烟气津润感,协调烟气,提升卷烟抽吸品质。

Description

一种香松烟用香料的制备方法和应用
技术领域
本发明属于烟用香精香料技术领域,具体涉及一种香松烟用香料的制备方法和应用。
背景技术
卷烟香气是卷烟品质的核心内容,但伴随着低焦化卷烟的发展,卷烟抽吸口感降低,香气不足等成为了烟草发展的凸显问题。卷烟加香加料,已是一种常规的、必需的增补香气的技术手段,通过加香、加料的方式可以弥补卷烟叶组配方上的不足,消除杂气,使卷烟烟香更加丰厚、充足,从而在吸味、嗅香上具有独特风格,增强产品的特征。天然香料在卷烟调香中起到的作用极为重要,而其在烟草调香中的应用也较为普遍,但随着企业卷烟自主调香步伐的加快,现有天然香原料的种类、数量、品质、制备工艺等已不能满足调香技术人员的需求,所以持续开发利用更多的香料植物资源,通过改进制备方法等获取品质更为优秀的天然香精香料,一直是卷烟调香和卷烟产品研发面临的现实课题。
香松又叫甘松,为败酱科植物甘松Nardostachysjatamansi DC.的干燥根及根茎,为多年生草本,全株有强烈松脂样香气。甘松有理气止痛、醒脾健胃的功效,外用祛湿消肿。可用于治疗脘腹胀痛、不思饮食、牙痛、脚气,气虚血热者忌服甘松。目前,除了从传统药用角度来应用香松外,尚未见将其制备成烟用香料应用于卷烟中。
利用微生物发酵可以增加传统提取香料中多种香气物质的含量,提升香气丰富性,将其加入卷烟中,可生产出香气丰富、高品质的卷烟,满足消费者对卷烟品质的要求。利用微生物对自身具有气味的植物原料进行发酵,还能赋予植物以区别于原有气味的独特香味。植物碳化,在保留植物原材料部分香味特性的同时,又可赋予植物原材料以特殊的焦香味。目前,并没有利用微生物发酵技术联用碳化技术用于制备香精香料的相关研究。
发明内容
本发明的目的在于针对现有烟用香精香料种类不够丰富及制备方法不足等问题,提供一种具有木香及清香香韵的香松烟用香料的制备方法及在卷烟中的应用,其是利用烟草黄色土源菌X7X发酵工艺及碳化工艺对香松进行处理,再通过溶剂提取工艺得到一种安全性良好的香松烟用香料,将其应用于卷烟烟丝中,能使卷烟烟气具有特殊木香及清香的同时,稍带独特焦香,能显著丰富卷烟烟香,增加烟气津润感,协调烟气,提升卷烟抽吸品质。
*除非另有说明,本发明中所采用的百分数均为质量百分数。
本发明第一方面涉及一种烟草黄色土源菌X7X,其分离于采自昆明市一个烟草生产基地的烟草根际土样,对其进行了形态学、生理生化性质和16S rRNA 测序分析,鉴定结果表明其属于黄色土源菌属,微生物学分类命名为烟草黄色土源菌Flavisolibactersp.X7X,已于2018年9月10日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称:CGMCC)保藏,保藏编号为CGMCC 16451,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院中国科学院微生物研究所。
本发明分离得到的烟草黄色土源菌X7X菌株的主要形态特征和生理生化性质特征为:所述X7X菌株的细胞为革兰氏阴性、需氧型,非运动的杆状结构。细胞大小为宽0.6-0.7um,长1.2-2.0um。在R2A琼脂平板30℃培养7天后,菌落呈现黄色、表面光滑、中央凸起边缘整齐,直径为1.0-3.0mm的形状。菌株能够在20-40℃,pH为6.0-8.0的范围内生长,最适生长温度为30℃,最适pH 值为7.0。菌株的明胶液化,氧化酶、过氧化氢酶,吐温40水解反应结果呈阳性,酪蛋白、纤维素、淀粉和吐温20、80水解结果呈阴性。菌株的碱性磷酸酶、脂酶C4、脂酶C8、亮氨酸芳胺酶、缬氨酸芳胺酶、半胱氨酸芳胺酶,胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、酸性磷酸酶、α-半乳糖苷酶、β-糖醛酸酶、酸性磷酸酶检测结果呈阳性,精氨酸双水解酶、柠檬酸的利用、吲哚反应、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、色氨酸脱氨酶检测结果呈阴性。
所述X7X菌株能够利用乙醛酸、D-阿拉伯醇、蚁酸、果糖、N-乙酰-D-半乳糖胺、糖醛酸、D-乳酸甲酯、苹果酸和山梨醇作为碳源,但不能利用天冬氨酸、α-羟基丁酸、纤维二糖、果糖、半乳糖、蔗糖、鼠李糖和丝氨酸。所述X7X菌株细胞的极性主要包括磷脂酰乙醇胺、一个未鉴定的氨基磷脂、两个未鉴定的糖脂;主要的呼吸醌为MK-7;主要的脂肪酸为iso-C15:0,iso-C17:0 3OH和summed feature 3(C16:1ω7c和/或C16:1ω6c)。
本发明所分离得到的烟草黄色土源菌X7X,其基因组的G+C含量为49.7%的,其16SrRNA基因核苷酸序列如序列表所示,该序列已递交国际核苷酸序列数据库(GenBank),序列检索号:MG209702。
本发明第二方面涉及一种香松烟用香料,其通过包括以下步骤的方法制备:
(1)烟草黄色土源菌X7X菌剂的制备;
(2)利用烟草黄色土源菌X7X菌剂对香松粉末进行发酵,得到发酵香松;
(3)将发酵香松进行碳化处理,得到发酵碳化香松;
(4)将发酵碳化香松进行乙醇回流提取,经过滤浓缩得到香松烟用香料。
上述香松烟用香料,步骤(1)具体包括:将烟草黄色土源菌X7X液体菌种按10%的接种量接种到发酵培养基中,30℃震荡培养7天,得到培养液;每1000 mL培养液离心分离,用无菌水洗涤沉淀,最后用20mL无菌水震荡均匀,稀释 10倍即得菌剂。
上述香松烟用香料,步骤(2)具体包括:将干燥的香松植株粉碎成粒径 30~100目的粉末,平衡水分至10%~13%,每100g香松粉末中喷施烟草黄色土源菌X7X菌剂20mL,混匀,将处理好的香松粉末置于22℃,60%的恒温恒湿箱中发酵24~72h,得到发酵香松。
上述香松烟用香料,步骤(3)具体包括:将发酵香松放入炭化炉中,对其进行封闭式加热碳化处理,具体操作步骤为将炉温逐渐升至80℃,待发酵香松干燥后迅速升温至120~300℃,并保持0.5~2h,得到发酵碳化香松。
上述香松烟用香料,步骤(4)具体包括如下步骤:
1)提取:按发酵碳化香松质量的4~10倍加入80%~95%浓度乙醇,50~80℃条件下热回流提取1~3h;
2)过滤:步骤1)所得热回流提取液通过抽滤方式过滤,过滤目数不低于200 目;
3)浓缩:收集步骤2)抽滤所得清液,在45~60℃、60~100kPa条件下浓缩至密度为1.0~1.5g/cm3的发酵碳化香松提取液,即为香松烟用香料。
本发明第三方面涉及一种包含本发明第二方面制备的香松烟用香料的卷烟。
上述包含香松烟用香料的卷烟,是将所制香松烟用香料,以相对于卷烟烟丝质量0.2~0.5%的量,用丙二醇或乙醇稀释3~5倍质量后,以喷雾的方式喷洒到卷烟烟丝上制得。
本发明具有以下有益效果:
1、本发明首次将香松制备成烟用香料,应用于卷烟加工中,丰富了烟用香精香料来源和种类,满足了消费者的个性化及多元化需求。
2、本发明首次利用新菌种烟草黄色土源菌X7X对香松进行发酵处理,联用碳化增香后、再进行乙醇回流提取制得了一种香松烟用香料,该种制备工艺丰富了烟用香精的提取方式。而通过本发明制备工艺得到的香松烟用香料,应用于卷烟烟丝中,在卷烟抽吸过程中能产生与卷烟香气相协调的特殊木香及清香,且稍带独特焦香,能显著丰富卷烟烟香,增加烟气津润感,提升卷烟抽吸品质。
3、利用本发明方法制备的香松烟用香料,其整个提取过程无不良有机溶剂引入,所得香精香料及加工工艺环保安全,且原料易得,成本低廉,便于实现工业化生产,有良好的应用价值。
附图说明
图1为本发明烟草黄色土源菌X7X在R2A培养基上的电镜照片;
图2为本发明烟草黄色土源菌X7X及部分相关菌株依据16S rRNA基因序列构建的系统发育树。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合附图及实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。此外,下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
实施例1
1.烟草黄色土源菌X7X的分离、培养与鉴定
1.1烟草黄色土源菌X7X的分离
从云南省昆明市的烟草生产基地的烟草根际取土壤样品,塑料袋密封带回, 4℃保存待用。准确称取10g土样,加入100mL无菌水,30℃、200rpm震荡培养30min;用无菌水将浓度稀释至10-3、10-4w/v倍,将2个浓度的菌液各取0.1mL 均匀涂布于R2A琼脂平板上,每个浓度的菌液设置3个平行试验,30℃恒温培养箱中培养2周,在培养平板上挑取不同形态单菌落,继续采用平板划线法分离纯化菌株,编号后接种于R2A斜面培养基,或配制成甘油悬液(20%,w/v),置于-80℃条件下保藏。
将分离得到的微生物分别接种于R2A液体培养基中,30℃、160rpm振荡培养,培养至菌液浓度为OD=1.5,制得各微生物菌株的种子液,观察种子液外观和香气特征变化,筛选出其中能产生特殊香气的微生物菌株,编号为X7X。
1.2烟草黄色土源菌X7X的鉴定
将上述筛选出的能产生特殊香气的微生物菌株X7X,继续接种于R2A琼脂平板培养基上,30℃恒温培养箱中培养7天。进行形态学、生理生化性质和16S rRNA测序分析,鉴定结果表明属于黄色土源菌属,其微生物学分类命名为烟草黄色土源菌(拉丁文学名:Flavisolibacter sp.X7X)。
烟草黄色土源菌X7X在R2A琼脂平板培养基上的电镜照片如附图1所示。
烟草黄色土源菌X7X菌株的细胞为革兰氏阴性、需氧型,非运动的杆状结构。细胞大小为宽0.6-0.7um,长1.2-2.0um。在R2A琼脂平板30℃培养7天后,菌落呈现黄色、表面光滑、中央凸起边缘整齐,直径为1.0-3.0mm的形状。菌株能够在20-40℃,pH为6.0-8.0的范围内生长,最适生长温度为30℃,最适pH 值为7.0。菌株的明胶液化,氧化酶、过氧化氢酶,吐温40水解反应结果呈阳性,酪蛋白、纤维素、淀粉和吐温20、80水解结果呈阴性。菌株的碱性磷酸酶、脂酶C4、脂酶C8、亮氨酸芳胺酶、缬氨酸芳胺酶、半胱氨酸芳胺酶,胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、酸性磷酸酶、α-半乳糖苷酶、β-糖醛酸酶、酸性磷酸酶检测结果呈阳性,精氨酸双水解酶、柠檬酸的利用、吲哚反应、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、色氨酸脱氨酶检测结果呈阴性。
所述X7X菌株能够利用乙醛酸、D-阿拉伯醇、蚁酸、果糖、N-乙酰-D-半乳糖胺、糖醛酸、D-乳酸甲酯、苹果酸和山梨醇作为碳源,但不能利用天冬氨酸、α-羟基丁酸、纤维二糖、果糖、半乳糖、蔗糖、鼠李糖和丝氨酸。所述X7X菌株细胞的极性主要包括磷脂酰乙醇胺、一个未鉴定的氨基磷脂、两个未鉴定的糖脂;主要的呼吸醌为MK-7;主要的脂肪酸为iso-C15:0,iso-C17:0 3OH和summed feature 3(C16:1ω7c和/或C16:1ω6c)。
烟草黄色土源菌X7X的生理生化特征如表1所示:
表1烟草黄色土源菌X7X的生理生化反应鉴定结果
注:“+”表示结果为阳性,“-”表示结果为阴性
烟草黄色土源菌X7X的碳源利用情况如表2所示:
表2烟草黄色土源菌X7X的碳氮源利用情况
注:“+”表示结果为阳性,“-”表示结果为阴性
烟草黄色土源菌X7X的16S rRNA基因核苷酸部分序列如附图说明所示,该序列与GenBank数据库中的已知序列进行BLAST比较分析,并从数据库获得相关种属的16S rRNA基因核苷酸序列,构建系统发育树,见附图2。经比较分析发现,本发明的烟草黄色土源菌X7X与菌株(Flavisolibacterswuensis.SR2-4-2) 亲缘关系最近,在系统进化树上形成独立的分枝,综合形态、生理生化、细胞化学和系统进化分析等特征,两者又有明显差距,表明本发明的烟草黄色土源菌 X7X是一个新物种,命名为Flavisolibacter sp.X7X。
烟草黄色土源菌X7X在GenBank数据库的16S rRNA基因核苷酸序列登录号为MG209702,中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为 CGMCC 16451。烟草黄色土源菌X7X及相关种属的16S rRNA基因序列构建的系统发育树如附图2所示。
实施例2
1.烟草黄色土源菌X7X的培养
(1)试管斜面培养
采用斜面保藏培养基,培养基为R2A琼脂培养基,培养基的配方为:葡萄糖 0.5g,酵母膏0.5g,蛋白胨0.5g,酸水解酪蛋白0.5g,可溶性淀粉0.5g,丙酮酸钠0.3g,磷酸氢二钾0.3g,硫酸镁0.05g,琼脂15g,蒸馏水定容到1000mL,pH7.2。将培养基在121℃下灭菌25分钟,摆成斜面,接种烟草黄色土源菌X7X,30℃下培养2周,获得试管菌种;
(2)种子培养
采用种子培养基,种子培养基为R2A液体培养基,配方为:葡萄糖0.5g;酵母膏0.5g;蛋白胨0.5g;酸水解酪蛋白0.5g;可溶性淀粉0.5g;丙酮酸钠0.3g;磷酸氢二钾0.3g;硫酸镁0.05g;蒸馏水1000mL,pH7.2。将培养基在121℃下灭菌25分钟,从步骤(1)的试管斜面上挑取部分菌丝体接入种子液中,30℃震荡培养48h,获得液体菌种;
(3)烟草黄色土源菌X7X菌剂制备
将烟草黄色土源菌X7X液体菌种按10%的接种量接种到发酵培养基中,30℃震荡培养7天,得到培养液;每1000mL培养液以3500r/min离心10min,用无菌水洗涤沉淀,最后用20mL无菌水震荡均匀,稀释10倍即得烟草黄色土源菌X7X菌剂。
发酵培养基配方为:黄豆饼浸出汁10mL,葡萄糖10g,蛋白胨3g,氯化钠 2.5g,碳酸钙2g,蒸馏水1000mL,PH7.2。将培养基在121℃下灭菌30min,既得发酵培养基。
2.香松发酵
将1kg干燥的香松植株粉碎成粒径50目的粉末,平衡水分至10%,每100g 香松粉末中喷施烟草黄色土源菌X7X菌剂20mL,混匀,将处理好的香松粉置于22℃,60%的恒温恒湿箱中发酵24h,得到发酵香松。
3.发酵香松的碳化
将发酵香松放入炭化炉中,将炉温逐渐升温至约80℃,保持30min,待发酵香松干燥后,迅速升温至150℃,并保持0.5h,检视碳化程度合格后,关闭热源,取出发酵碳化香松样品备用。
4.香松烟用香料的制备
取上述发酵碳化香松,加入4kg的95%浓度乙醇,60℃下热回流提取2h;所得热回流提取液趁热抽滤,过滤目数为200目;继续将抽滤所得清液,在45℃、 80kPa条件下浓缩至密度为1.2g/cm3的发酵碳化香松提取液,即为香松烟用香料。
5.香松烟用香料的应用
取占卷烟烟丝质量0.4%的香松烟用香料,将其用香松烟用香料4倍量的丙二醇溶解后,以喷雾的方式喷洒到卷烟烟丝上,放入恒温恒湿箱内,在湿度60%±2,温度22℃±2条件下平衡48h,卷制成卷烟烟支,即为含香松烟用香料的试验卷烟。
6.香松烟用香料的评价
对照卷烟的制备:将1kg干燥的香松植株粉碎成粒径50目的粉末,将该香松粉末代替发酵碳化香松,按照实施例2中步骤4,5,制得含香松提取物的对照卷烟。
含香松烟用香料的试验卷烟,与空白卷烟以及含香松提取物的对照卷烟交由专业的评吸员进行感官对比评吸,参照烟用香精功能性评价方法进行评价,结果如表3所示。含香松提取物的对照卷烟,带有一定的木香,油脂气息浓重,香味沉闷;加入卷烟进行抽吸时,增加了卷烟杂气,协调性不佳。含香松烟用香料的试验卷烟,较含香松提取物的对照卷烟,木香和清香明显,油脂味变淡,带独特焦香;进行卷烟抽吸时,带有明显辨识性的木香、清香以及焦香,香韵自然柔和,烟气丰富性增加,烟气协调,能增加口腔津润感,显著提升卷烟抽吸品质。
表3香松烟用香料的感官评价
实施例3
1.烟草黄色土源菌X7X的培养方法同实施例2。
2.香松发酵
将1kg干燥的香松植株粉碎成粒径30目的粉末,平衡水分至12%,每100g 香松粉末中喷施烟草黄色土源菌X7X菌剂20mL,混匀,将处理好的香松粉置于22℃,60%的恒温恒湿箱中发酵48h,得到发酵香松。
3.发酵香松的碳化
将发酵香松放入炭化炉中,将炉温逐渐升温至约80℃,保持20min,待发酵香松干燥后,迅速升温至120℃,并保持1h,检视碳化程度合格后,关闭热源,取出发酵碳化香松样品备用。
4.香松烟用香料的制备
取上述发酵碳化香松,加入5kg的90%浓度乙醇,65℃下热回流提取3h;所得热回流提取液趁热抽滤,过滤目数为300目;继续将抽滤所得清液,在50℃、 90kPa条件下浓缩至密度为1.4g/cm3的发酵碳化香松提取液,即为香松烟用香料。
5.香松烟用香料的应用
取占卷烟烟丝质量0.3%的香松烟用香料,将其用香松烟用香料5倍量的95%乙醇溶解后,以喷雾的方式喷洒到卷烟烟丝上,放入恒温恒湿箱内,在湿度60%±2,温度22℃±2条件下平衡48h,卷制成卷烟烟支,即为含香松烟用香料的试验卷烟。
6.香松烟用香料的评价
对照卷烟的制备:以烟草黄色土源菌X7X的亲缘菌种Flavisolibacterswuensis.SR2-4-2(购自日本微生物保藏中心(JCM))代替烟草黄色土源菌X7X发酵香松,其余操作步骤同实施例3中步骤1~5,所制得的卷烟即为对照卷烟。
由烟草黄色土源菌X7X发酵的香松烟用香料制备而得的试验卷烟,与空白卷烟,以及由菌种Flavisolibacterswuensis.SR2-4-2发酵的香松提取物制备而得的对照卷烟,皆交由专业的评吸员进行感官对比评吸,参照烟用香精功能性评价方法进行评价,结果如表4所示。对照卷烟,与空白卷烟相比,有一定木香和焦香香韵,进行卷烟抽吸时,烟气中杂气、刺激性增加,协调不佳。试验卷烟,相较对照卷烟,具有特殊木香,并且清香香韵明显,香气清新透发,进行卷烟抽吸时,烟气带有明显辨识性的木香、清香以及焦香,香韵丰富性增加,香气质有较显著提升,同时降低卷烟烟气刺激性。由此可见,虽是亲缘菌种,但菌种Flavisolibacterswuensis.SR2-4-2用于香松发酵,其并不能取得如烟草黄色土源菌 X7X类似效果。
表4香松烟用香料的感官评价
本领域的技术人员容易理解,以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
附序列表:
烟草黄色土源菌X7X的16S rRNA基因核苷酸部分序列如下:
序列表
<110> 云南中烟工业有限责任公司
段焰青 郭青 董立民 夏建军 黄立斌 雷声 徐若飞
<120> 一种香松烟用香料的制备方法和应用
<130> RIB180487
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1490
<212> DNA
<213> 烟草黄色土源菌(Flavisolibacter soli.X7X)
<400> 1
agagtttgat cctggctcag gatgaacgct agcggcaggc ttaatacatg caagtcgagg 60
ggcagcgcag tgtagcaata catgggcggc gaccggcaaa cgggtgcgga acacgtacgc 120
aacctaccca aaactggggg atagcccacc gaaaggtgga ttaatacctc gtaacctcgt 180
gaagcggcat cgctttatga gtatagctcc ggcggttttg gatgggcgtg cgcctgatta 240
ggtagttggc ggggtaacgg cccaccaagc ctgcgatcag taactggtgt gagagcacga 300
ccagtcacac gggcactgag acacaggccc gactcctacg ggaggcagca gtaaggaata 360
ttggtcaatg gacgcaagtc tgaaccagcc atgccgcgtg agggatgaag gtcctctgga 420
ttgtaaactt cttttatctg ggacgaaacc ctcgttttct aacgggattg acggtaccag 480
aggaataagc accggctaac tccgtgccag cagccgcggt aatacggagg gtgcaagcgt 540
tatccggatt cactgggttt aaagggtgcg taggagggca gggaagtcag tggtgaaatc 600
tccgggctta actcggaaac tgccgttgat actctctgtc ttgaatcccg tggaggtgag 660
cggaatatgt catgtagcgg tgaaatgctt agatatgaca tagaacacca attgcgaagg 720
cagctcgcta cacgaagatt gactctgagg cacgaaagcg tggggatcaa acaggattag 780
ataccctggt agtccacgcc ctaaacgatg gatactcgac atacgcgata cactgtgtgt 840
gtctgagcga aagcattaag tatcccacct gggaagtacg accgcarggt tgaaactcaa 900
aggaattggc gggggtccgc acaagcggtg gagcatgtgg tttaattcga tgatacgcga 960
ggaaccttac ctgggctaga atgctggttg accgtgggtg aaagctcact ttgtagcaat 1020
acacaaccag taaggtgctg catggctgtc gtcagctcgt gccgtgaggt gttgggttaa 1080
gtcccgcaac gagcgcaacc cccatcagta gttgccatca ggtaacgctg ggaactctac 1140
tgaaactgcc gtcgtaagac gcgaggaagg aggggatgat gtcaagtcat catggccttt 1200
atgcccaggg ctacacacgt gctacaatgg ggcgtacaaa gggctgccac ttagcgataa 1260
ggagccaatc ccaaaaaacg cctctcagtt cagatcgcag tctgcaactc gactgcgtga 1320
agctggaatc gctagtaatc gtatatcagc aatgatacgg tgaatacgtt cccggacctt 1380
gcacacaccg cccgtcaagc catggaagct gggtgtacct aaagtcggta accgcaagga 1440
gccgcctagg gtaaaactag taactggggc taagtcgtaa caaggtaacc 1490

Claims (7)

1.一种香松烟用香料,其特征在于,其通过包括以下步骤的方法制备:
(1)烟草黄色土源菌X7X菌剂的制备;
(2)利用烟草黄色土源菌X7X菌剂对香松粉末进行发酵,得到发酵香松;
(3)将发酵香松进行碳化处理,得到发酵碳化香松;
(4)将发酵碳化香松进行乙醇回流提取,经过滤浓缩得到香松烟用香料。
2.根据权利要求1所述的香松烟用香料,其特征在于,步骤(1)具体包括:将烟草黄色土源菌X7X液体菌种按10%的接种量接种到发酵培养基中,30℃震荡培养7天,得到培养液;培养液离心分离,用无菌水洗涤沉淀,最后用无菌水震荡均匀,稀释10倍即得菌剂。
3.根据权利要求1所述的香松烟用香料,其特征在于,步骤(2)具体包括:将干燥的香松植株粉碎成粒径30~100目的粉末,平衡水分至10%~13%,每100g香松粉末中喷施烟草黄色土源菌X7X菌剂20mL,混匀,将处理好的香松粉置于22℃,60%的恒温恒湿箱中发酵24~72h,得到发酵香松。
4.根据权利要求1所述的香松烟用香料,其特征在于,步骤(3)具体包括:将发酵香松放入炭化炉中,对其进行封闭式加热碳化处理,具体操作步骤为将炉温逐渐升至80℃,待发酵香松干燥后迅速升温至120~300℃,并保持0.5~2h,得到发酵碳化香松。
5.根据权利要求1所述的香松烟用香料,其特征在于,步骤(4)具体包括如下步骤:
1)提取:按发酵碳化香松质量的4~10倍加入80%~95%浓度乙醇,50~80℃条件下热回流提取1~3h;
2)过滤:步骤1)所得热回流提取液通过抽滤方式过滤,过滤网孔径不低于200目;
3)浓缩:收集步骤2)抽滤所得清液,在45~60℃、60~100kPa条件下浓缩至密度为1.0~1.5g/cm3的发酵碳化香松提取液,即为香松烟用香料。
6.一种含香松烟用香料的卷烟,其特征在于,其包含权利要求1-5任意所述的香松烟用香料。
7.根据权利要求6所述的一种含香松烟用香料的卷烟,其特征在于,将权利要求1-5中任一所述香松烟用香料,以相对于卷烟烟丝质量0.2~0.5%的量,用丙二醇或乙醇稀释3~5倍质量后,以喷雾的方式喷洒到卷烟烟丝上制得。
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