CN108935701A - 一种提高免疫力的羊奶粉、羊奶粉的制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种提高免疫力的羊奶粉、羊奶粉的制备方法及应用,所述提高免疫力的羊奶粉,包括以下原料:羊乳粉、低聚果糖、葡萄糖酸锌和乳酸亚铁。本发明的羊奶粉具有提高免疫力、使用人群广的特点。
Description
技术领域
本发明属于羊奶粉制备领域,具体涉及一种能够提高人体免疫力的羊奶粉、羊奶粉的制备方法及应用。
背景技术
随着生活水平的提高和健康意识的不断增强,自身免疫力问题越来越受到人们的重视。身体免疫力的高低不仅关系到对各种疾病的预防,而且一旦得病,还将直接影响到病情的轻重和康复效果。《内经》记载:“正气存内,邪不可干”,“邪之所凑、其气必虚”。因此,提高机体免疫力,增强抵抗力,预防疾病已经引起人们的高度关注。增强机体免疫力,除规范自身生活、合理安排工作,加强体育锻炼外,适时服食一些具有提高机体免疫功能的保健食品也是非常必要的。
发明内容
为了解决现有技术中必须依靠药物且药物具有副作用的缺陷,本发明提供了一种提高人体免疫力的羊奶粉、羊奶粉的制备方法及其应用。
本发明要解决的技术问题通过以下技术方案实现:
一种提高免疫力的羊奶粉,包括以下原料:羊乳粉、低聚果糖、葡萄糖酸锌和乳酸亚铁。
进一步地,所述羊乳粉为羊奶经过杀菌浓缩后喷雾干燥而成的粉状产品。
进一步地,所述葡萄糖酸锌为葡萄糖酸锌颗粒。
进一步地,包括以下质量份数的原料:羊乳粉900份-1000份、低聚果糖30份-80份、葡萄糖酸锌0.4份-2份和乳酸亚铁0.1份-1.5份。
进一步地,包括以下质量份数的原料:羊乳粉947.7份、低聚果糖50份、葡萄糖酸锌1.4份和乳酸亚铁0.9份。
本发明还提供了一种提高免疫力的羊奶粉的制备方法,包括以下步骤:
初步混合:将葡萄糖酸锌和乳酸亚铁混合均匀,得到第一混合物;
低聚果糖的加入:将低聚果糖与第一混合物按混合均匀,得到第二混合物;
羊奶粉获得:将羊乳粉和第二混合物混合均匀,得到提高免疫力的羊奶粉。
进一步地,所述初步混合、低聚果糖的加入以及羊奶粉获得步骤中,所述原料的加入以及混合均采用等量递增法加入混合。
进一步地,还包括包装,所述包装具体为:
将包装机预热后,获得的提高免疫力的羊奶粉依次进行内包装和外包装。
本发明还公开了一种提高免疫力的羊奶粉的应用,所述提高免疫力的羊奶粉在制备提高免疫力保健品中的应用。
本发明的有益效果:
本发明提高免疫力的奶粉,采用羊乳粉为原料,避免了牛奶等过敏源的进入,适合于大多数人群免疫力的提高。
其次,与现有技术中的药物相比,本申请避免了直接服用化学物质。本申请的主要原料羊乳粉能够提高人体免疫力。相关研究表明,低聚果糖可以通过改变血液中免疫细胞的数量起到免疫调节的作用。葡萄糖酸锌为锌元素的营养素补充剂,锌广泛分布于人体的各个部分,是人体内200多种酶的组成成分或辅助因子,参与人体内无数种蛋白质核酸的合成,对人体生长发育和组织修复,增强免疫力及提高智商等都有重要的作用。乳酸亚铁为铁元素的营养补充剂,铁和含铁蛋白对人体免疫功能的正常运作极为重要。
本发明中,羊乳粉为关中奶山羊的羊奶制备而成,关中奶山羊以产奶为主,产奶性能稳定,产奶量高,奶质优良,营养价值较高。一般泌乳期为7~9个月,年产奶450~600公斤,单位活重产奶量比牛高5倍。鲜奶中含乳脂3.6%、蛋白质3.5%、乳糖4.3%、总干物质11.6%。与牛奶相比,羊奶含干物质、脂肪、热能、维生素C、尼克酸均高于牛奶,不仅营养丰富,而且脂肪球小,酪蛋白结构与人奶相似,酸值低,比牛奶易为人体吸收,是婴幼儿、老人、病人的营养佳晶,是特殊工种、兵种的保健食品。
具体实施方式
为进一步阐述本发明达成预定目的所采取的技术手段及功效,以下结合实施例对本发明的具体实施方式、结构特征及其功效,详细说明如下。
本发明要解决的技术问题通过以下技术方案实现:
一种提高免疫力的羊奶粉,包括以下原料:羊乳粉、低聚果糖、葡萄糖酸锌和乳酸亚铁。
本发明中,羊乳粉为羊奶经过杀菌浓缩后喷雾干燥而成的粉状产品。羊奶有“奶中之王”之称,营养价值很高。它不仅是羊羔出生后重要的食物来源,还在人类生活中占着重要的地位。近年来,国内外学者对山羊和绵羊奶的成分进行了大量的研究,并且随着蛋白质组学技术的兴起,人们能够进一步对羊奶中酪蛋白、乳清蛋白、乳脂球膜蛋白及初乳特点进行定性和定量研究。虽然羊奶营养成分很高,但羊奶品质参差不齐没有形成像牛奶一样的加工流程,所以没有被大部分消费者熟知,鲜羊奶的加工处理尤为重要,是保证原乳纯洁、新鲜的关键,其方法包括过滤、净化、杀菌、冷却和贮藏。并且还可以制作成非常受青睐的酸奶,将膻味降低到最低,风味独特。
本产品通过羊乳粉中添加低聚果糖、葡萄糖酸锌、乳酸亚铁,达到增强机体免疫力的目的。
其配方分析如下:
羊乳粉以生羊乳为原料,经过杀菌浓缩后喷雾干燥而成的粉状乳粉。《本草纲目》记载中“羊乳性甘温,能补寒冷虚乏,润心肺,治消瘦,疗虚劳,益精气,和小肠气,利大肠,医小儿惊厥,干呕反胃”。“奶汁主治补五脏,命人肥白悦泽、益气、治瘦、悦皮肤、润毛发、点眼止泪”。南朝齐梁时期医学家陶宏景说:“羊乳实为补肾,故北方人食之多强健”。含有人体所需的蛋白质、脂肪、乳糖、矿物质、维生素以及多种生物活性成分,营养价值极为丰富,容易被人体消化吸收。具体而言,羊奶有六大营养特性。第一,羊奶蛋白质营养价值高。羊奶中蛋白质含量约为3%,主要由酪蛋白和乳清蛋白组成。羊奶蛋白质的显著特点是酪蛋白含量较低,乳清蛋白含量较高。羊奶、牛奶、人奶中酪蛋白与乳清蛋白之比大约为70:30、80:20、60:40。羊奶中酪蛋白与乳清蛋白比例接近人奶,在胃中形成的凝乳相对细软,易于人体消化吸收。同时,羊奶蛋白质中必需氨基酸的种类齐全,含有构成人体的20多种氨基酸,且8种必需氨基酸含量丰富。羊奶和人奶一样,含有较高的牛磺酸、核苷酸、左旋肉碱等,对新生婴儿具有重要的生理功能。第二,羊奶脂肪易消化吸收。羊奶的脂肪含量为3%-5%,是以脂肪球的形式存在于乳中,具有良好的乳化状态。羊奶脂肪球较小,平均直径为两微米左右,相对表面积较大,能与消化道中的消化液充分接触,消化吸收率较高。羊奶中的短中链脂肪酸含量较高,易被人体内脂肪酶分解,有利于人体消化吸收,同时短中链脂肪酸能够抑制胆固醇的沉积。第三,羊奶中碳水化合物含量较高。羊乳中的碳水化合物主要是乳糖,其含量大约为4.6%。乳糖对促进婴幼儿的智力发育有着重要的作用,乳糖还可调节胃酸,有促进肠蠕动和消化腺分泌的作用。乳糖能在肠内细菌的作用下形成乳酸,可抑制肠道内病原菌的生长繁殖。同时,乳糖进入肠道,还有利于肠道乳酸菌的生长,乳酸菌的生长又有助于钙和其他物质的吸收。第四,羊奶富含多种矿物质和维生素。羊奶中含有多种矿物质,尤其是钙和磷的含量较高,每100克羊奶中含有134毫克钙和121毫克磷,分别比牛奶高出10%和2%,比人奶高4倍和3倍。羊奶中的钙和磷比例适合,有利人体的消化吸收,对促进人体骨骼生长和发育具有重要的作用。羊奶中含有维生素A、尼克酸、维生素B1、维生素B2和泛酸等。第五,羊奶不易引起蛋白质过敏。牛奶中的α-sl酪蛋白和β-乳球蛋白是可能引起皮疹、湿疹以及腹痛腹泻等症状的过敏源。研究发现,牛奶中酪蛋白主要以α-sl酪蛋白为主,其含量占总酪蛋白的43%;羊奶中α-sl酪蛋白含量仅占酪蛋白的1%-3%,β-乳球蛋白的含量也比牛奶低,且其氨基酸的排列顺序与牛奶有一定的差别,较牛奶更容易消化吸收;而人奶中几乎不含α-s1酪蛋白和β-乳球蛋白。因此,饮用羊奶可以解除大部分牛奶过敏。临床试验表明,对牛奶过敏的婴幼儿改用羊奶后,其过敏现象也会大大降低。第六,羊奶具有独特的保健作用。羊奶含有母乳中特有的上皮细胞生长因子(EGF),具有修复黏膜的功能,可有效提高人体免疫力;羊奶中免疫球蛋白含量、核苷酸等天然成分含量也比较高,对婴幼儿的生长发育大有益处。另外,羊奶中超氧化物歧化酶(SOD)的含量也非常丰富,可帮助清除体内自由基。羊乳粉用量47.4g/日。
低聚果糖又称寡果糖、蔗果寡糖、果低聚糖等,是指2~5个果糖基为链节,以一个葡萄糖基为链的端基,以果糖基→果糖连接键为主体骨架连接而成的碳水化合物,即指1~4个果糖基以β-2,1糖苷键连接在蔗糖的D-果糖基上而形成的蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖和蔗果六糖的混合物,其中蔗果六糖含量不得超过FOS总含量的5%。研究发现,低聚果糖对机体有促进双歧杆菌增殖、减少有害菌和有毒代谢物、预防病原性和功能性腹泻、改善便秘、保护肝脏、降低血清胆固醇、降低血压、降低餐后血糖、促进营养素的吸收等多种生理功能。Hosono A等人进行的小鼠试验表明,低聚果糖能通过改变肠道微生态环境而促进肠粘膜的CD4+PP淋巴细胞亚群分泌IgA和白细胞介素IL-5、IL-6,并抑制Th2控制的免疫应答。Nakamura Y等人用低聚果糖喂食幼鼠,亦发现低聚果糖能增加肠粘膜上IgA的分泌和pIgR的表达。在一项以狗为研究对象的试验中发现,低聚果糖可以通过改变血液中免疫细胞的数量起到免疫调节的作用。Y.Guigoz等人观察发现,老年人摄入低聚果糖后,粪便中双歧杆菌数较摄入前增加了100倍,且肠易激现象亦通过血液中IL-6mRNA的减少而明显减少。还有研究指出,低聚果糖通过增加PP淋巴细胞的分泌,不仅在大肠而且在小肠部位均能激活或诱导粘膜免疫系统,产生免疫调节作用(陈亚非等)。胡晓燕等(2012)研究补充低聚果糖对递增负荷训练大鼠免疫指标的影响。结果显示①运动组大鼠体重和脾脏指数在2、4、6周显著低于对照组,6周时脾重显著低于对照组。脾脏淋巴细胞活性在2、4、6周均显著低于对照组。6周时CD4+显著低于对照组,CD8+在2、4、6周均显著高于对照组,CD4+/CD8+在2、4、6周均显著低于对照组。②运动+补剂组大鼠体重在2、4、6周时显著高于运动组,脾重在4、6周显著高于运动组,4周时脾脏指数显著高于运动组,6周时显著低于运动组;脾淋巴细胞活性在4、6周均显著高于运动组;CD4+在2、4周显著高于运动组,CD8+在2、4、6周均显著低于运动组显著CD4+/CD8+在4、6周均显著高于运动组。结果表明补充低聚果糖可以改善甚至逆转6周递增负荷训练引起的大鼠体重增长过缓、脾重下降、脾脏淋巴细胞活性降低、CD8+值偏高、CD4+/CD8+降低等现象,表明其对免疫抑制有显著调节作用。
杭锋等(2009)试验结果表明,1.38g/(kg·BW)低聚果糖能够促进乳杆菌的增加并抑制肠杆菌的增幅,4.15g/(kg·BW)的低聚果糖能够促进乳杆菌和双歧杆菌的增加并抑制肠杆菌和肠球菌的增幅;低聚果糖可以提高小鼠的免疫力,两者之间具有关联作用。王佳琦等(2013)研究表明大豆分离蛋白和低聚果糖联合作用可以在体外增强人体的细胞免疫和体液免疫功能,并且两种免疫功能在不同浓度的混合物联合作用下呈现不同的变化格局,提示两种成分对细胞免疫和体液免疫功能具有不同调节作用。低聚果糖用量2.5g/日。
葡萄糖酸锌为锌元素的营养素补充剂。锌广泛分布于人体的各个部分,是人体内200多种酶的组成成分或辅助因子,参与人体内无数种蛋白质核酸的合成,对人体生长发育和组织修复,增强免疫力及提高智商等都有重要的作用。人体内如果含锌量减少就会导致免疫组织损伤、免疫功能缺陷、免疫反应降低,使细胞免疫和体液免疫发生异常,免疫器官如:胸腺、脾脏、肠系膜淋巴结重量明显减少,限制T细胞的分化,而且IgG抗体呈现低值状态对感染的易感性增强。反之,通过合理的补充锌元素,可使白细胞功能增强,调整因生理老化带来的免疫紊乱发挥着最佳免疫机能。补锌还可以减弱细胞毒素的毒害,对人体抗御感染起重要的作用。锌在细胞周期各个环节上起重要作用,锌缺乏使细胞正常功能代谢活动破坏,还可导致T辅助细胞和T抑制细胞比率下降,细胞因子(如IL-2)分泌障碍,自然杀伤细胞功能改变,胸腺素浓度降低,使免疫功能受损,致使呼吸道感染增大。研究结果显示,葡萄糖酸锌对提高患儿血清IgG、IgA、IgM含量具有促进作用,而且临床疗效显著,明显强于对照组,表明葡萄糖酸锌能够通过提高血清IgG、IgA、IgM含量来降低呼吸道感染发生率。总之,葡萄糖酸锌可以调整人体免疫功能,能有效地治疗和预防小儿反复呼吸道感染,补充人体微量元素锌的不足所导致的各种感染性疾病(张洁2006,吴嘉惠等1994,李雪竹2005)。万志红等(1997)研究不同补锌方法(补锌、补充微量营养素、补充锌加微量营养素)改善缺锌儿童免疫功能的作用,结果显示:实验10wk后,三个实验组缺锌儿童血清锌浓度明显升高,同时淋巴细胞刺激指数明显高于对照组,流式细胞仪检测细胞周期显示对照组G0/G1期细胞增多,而实验组S+G2/M期细胞增多,细胞处于增殖活化状态,三组中又以锌+微量营养素作用效果最好,结果表明锌和微量营养素单独使用均增强缺锌儿童的免疫功能,但锌和微量营养素联合运用效果最佳。张建英等(2012)研究表明缺锌体重及血锌明显低于正常对照组(P<0.05),缺锌可使机体免疫功能降低,对外界感染抵抗能力下降,补锌增强机体免疫功能,增强感染抵抗能力。锌用量为5~20mg/日,本产品用量为10mg/日。
乳酸亚铁为铁元素的营养素补充剂。铁是人体中含量最丰富的微量元素,是一切生命体不可或缺的必需元素,在氧的转运、脱氧核糖核酸的合成以及氧化还原反应中都起关键作用,一切生物有机体从细菌到人类,其生存都需要有铁的参与。铁在水溶液中以两种氧化状态存在,即亚铁(Fe2+)形式和高铁(Fe3+)形式,而且这两种形式之间极易转换,这就使铁在氧化还原反应中起提供或接受电子的作用,生物体内的一些与氧和能量代谢有关的代谢必须依赖于铁的这种反应特点及其高氧化还原电位才能实现,铁对于人体免疫和致病菌的生长都极为重要,当致病菌侵人时,机体会以转铁蛋白及乳铁蛋白等形式结合血液中的离子铁,限制致病菌的生长图,任何感染的转归都决定于机体内离子铁水平和致病菌与机体内含铁细胞争夺铁能力之间的平衡(杨天憧等2004)。铁是动物体内必需的微量元素,铁和含铁蛋白有很复杂的生物学功能,缺铁可引起多种组织改变和功能失调,骨髓有核细胞DNA和RNA含量减少,缺铁时与杀菌有关的含铁酶或依赖酶活性明显降低,可导致淋巴细胞DNA的合成受阻,抗体产生被抑制,干扰溶菌酶的活性,白细胞杀菌功能减弱,淋巴细胞对特别抗原的反应效能降低,机体对感染的应激能力下降,因此易受感染(曹华斌等,2006)。钟小兰等(2007)观察铁剂治疗反复呼吸道感染患儿,6月和12月后细胞免疫功能的改变及临床疗效。结果铁剂治疗6月后CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值治疗组均明显高于对照组,两组比较在统计学上更有显著差异。铁剂治疗12月后CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值治疗组均明显高于对照组,两组比较在统计学上更有显著差异,铁剂治疗12月后治疗组总有效率(显效率及有效率)明显高于对照组,两组比较在统计学上更有显著差异。结果表明铁缺乏-免疫功能紊乱-反复呼吸道感染之间关系密切,铁剂治疗后反复呼吸道感染患儿细胞免疫功能明显提高,患儿呼吸道感染次数明显减少,再次呼吸道感染时病程缩短、病情减轻,反复呼吸道感染患儿适量补充铁剂有利于阻止小儿反复呼吸道感染的发展。铁用量为5~20mg/日,本产品用量为8.7mg/日。
进一步地,所述葡萄糖酸锌为葡萄糖酸锌颗粒。可直接购买现成的产品使用。
在原料配比上,优选括以下质量份数的原料:羊乳粉900份-1000份、低聚果糖30份-80份、葡萄糖酸锌0.4份-2份和乳酸亚铁0.1份-1.5份。
进一步地,包括以下质量份数的原料:羊乳粉947.7份、低聚果糖50份、葡萄糖酸锌1.4份和乳酸亚铁0.9份。
本发明还提供了一种提高免疫力的羊奶粉的制备方法,包括以下步骤:
初步混合:将葡萄糖酸锌和乳酸亚铁混合均匀,得到第一混合物;
低聚果糖的加入:将低聚果糖与第一混合物按混合均匀,得到第二混合物;
羊奶粉获得:将羊乳粉和第二混合物混合均匀,得到提高免疫力的羊奶粉。
进一步地,所述初步混合、低聚果糖的加入以及羊奶粉获得步骤中,所述原料的加入以及混合均采用等量递增法加入混合。
进一步地,还包括包装,所述包装具体为:
将包装机预热后,获得的提高免疫力的羊奶粉依次进行内包装和外包装。
进一步地,所述葡萄糖酸锌颗粒和乳酸亚铁由北京金康普食品科技有限公司提供。
本发明还公开了一种提高免疫力的羊奶粉的应用,所述提高免疫力的羊奶粉在制备提高免疫力保健品的应用。
进一步地,所述提高免疫力的羊奶粉的用量为25-50g/day。
本发明中,所述羊乳粉的生产工艺为:关中奶山羊的新鲜乳汁经验收合格后进行巴氏杀菌,杀菌条件为:温度为74±2℃、时间为15s,在0-4℃的条件下储藏不超过48小时,然后经过高温短时杀菌,三效降膜浓缩系统进行浓缩,再进行喷雾干燥制成粉末。其中,所谓高温短时杀菌利用高温使微生物的蛋白质及酶发生凝固或变性而死亡。这是应用最广泛而有效的灭菌方法,主要用于手术器械和物品的灭菌。
实施例1
分别称取羊乳粉900份、低聚果糖30份、葡萄糖酸锌0.4份和乳酸亚铁0.1份。
其制备步骤如下:先将0.4份葡萄糖酸锌和0.1份乳酸亚铁混合均匀,然后将30份的低聚果糖按等量递增法混合均匀,最后将900份羊乳粉按等量递增法混合均匀。
其中,羊乳粉为新鲜的羊乳汁,先进行巴氏杀菌之后经过杀菌浓缩、喷雾干燥制成的。上述的羊乳汁的处理方法,为奶粉的湿法生产工艺
本发明中的羊乳汁,为生羊乳,是关山奶山羊新鲜乳汁。
低聚果糖为和乳酸亚铁为北京金康普食品科技有限公司买的成品,而低聚果糖为山东百龙创园生物科技股份有限公司生产的产品。
实施例2
分别称取羊乳粉1000份、低聚果糖80份、葡萄糖酸锌2份和乳酸亚铁1.5份。
其制备步骤如下:先将2份葡萄糖酸锌和1.5份乳酸亚铁混合均匀,然后将80份的低聚果糖按等量递增法混合均匀,最后将1000份羊乳粉按等量递增法混合均匀。
本发明中的羊乳汁,为生羊乳,是关山奶山羊新鲜乳汁。
低聚果糖为和乳酸亚铁为北京金康普食品科技有限公司买的成品,而低聚果糖为山东百龙创园生物科技股份有限公司生产的产品。
实施例3
分别称取羊乳粉947.7份、低聚果糖50份、葡萄糖酸锌1.4份和乳酸亚铁0.9份。
其制备步骤如下:先将1.4份葡萄糖酸锌和0.9份乳酸亚铁混合均匀,然后将50份的低聚果糖按等量递增法混合均匀,最后将947.7份羊乳粉按等量递增法混合均匀。
本发明中的羊乳汁,为生羊乳,是关山奶山羊新鲜乳汁。
低聚果糖为和乳酸亚铁为北京金康普食品科技有限公司买的成品,而低聚果糖为山东百龙创园生物科技股份有限公司生产的产品。
本发明中,提高免疫力的羊奶粉的用量为25g/day-50g/day。
混合均匀性考察
按照实施例1-3的配方用量称取对应的原辅料,先将葡萄糖酸锌与乳酸亚铁混合20min后,用等量递增法加入低聚果糖,每次混合20min,再用等量递增法加入羊乳粉,每次混合20min,分别在不同点取样五份,分别测定铁、锌含量和性状,结果见表1。
表1分别如下:混合均匀性考察结果
从表1结果可以看书,用上述混合方法混合时,混合物性状为乳白色粉末、色泽均匀,锌、铁指标的含量证明使用等量递增法能使本发明的羊奶粉充分混合均匀。
羊奶粉毒理学试验
选取体重18-22g的SPF级健康昆明小鼠20只,雌雄各半,由广西医科大学实验动物中心繁殖,进行小鼠急性经口毒性试验,实验结果表2所示:
表2分别如下:
从表2结果可知,取实施例3中制备的羊奶粉作为样品,以20000mg/kg BW剂量的样品给予小鼠灌胃后,观察期间,动物生长良好,受试小鼠均未见有中毒症状,观察期间无动物死亡,急性经口毒性属无毒级。
同时做三项遗传毒性试验(Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验)结果均为阴性。
选取体重60-80g的SPF级健康SD种大鼠,雌雄各半,由广西医科大学实验动物中心繁殖,进行30天喂养实验。将动物随机分为4组,即阴性对照组和3个试验组,每组20只,雌雄各半。
称取羊乳粉、低聚果糖、葡萄糖酸锌和乳酸亚铁制备提高免疫力的羊奶粉,然后样品按照3个试验组剂量进行喂养,三个实验组剂量分别设为4360、2180、1090mg/kg BW。
用对应剂量的溶液每天给相应剂量组动物灌胃,阴性对照组灌给等体积的纯水,每天灌胃一次,连续灌胃30天。实验结束动物隔夜禁食,称体重后处死大鼠,采集血样后解剖进行大体观察和病理组织学检查,实验结束解剖动物,大体观察各组动物均未发现明显病变,故只选样品的高剂量组和阴性对照组动物的主要脏器进行组织病理切片检查,其结果如表3~9所示:
表3分别如下:30天喂养试验大鼠肝脏组织病理学检查结果
表4分别如下:30天喂养试验大鼠肾脏组织病理学检查结果
表5分别如下:30天喂养试验大鼠脾脏组织病理学检查结果
表6分别如下:30天喂养试验大鼠胃组织病理学检查结果
表7分别如下:30天喂养试验大鼠十二指肠组织病理学检查结果
表8分别如下:30天喂养试验大鼠雄鼠睾丸组织病理学检查结果
表9分别如下:30天喂养试验大鼠雌鼠卵巢组织病理学检查结果
30天喂养试验期间动物生长发育良好,各剂量组大鼠的体重、增重量、进食量、食物利用率、血常规指标、血液生化指标、脏器重量及脏器/体重比值等均未受明显影响;大体解剖观察和组织病理学检查未见与样品有关的异常改变。
上述试验结果表明在受试剂量范围内未见该样品对大鼠各项观察指标产生毒副作用。
药效学试验
选取体重18-22g的SPF级昆明种雄性小鼠120只,由广西医科大学实验动物中心繁殖。每40只小鼠为一组,共3组。免疫Ⅰ组,进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验;免疫Ⅱ组,进行迟发型变态反应试验;免疫Ⅲ组,进行抗体生成细胞数测定和血清溶血素测定。动物实验室温度:22-25℃,相对湿度:55-70%。
根据人口服推荐用量,设样品低、中、高剂量组分别为12500mg/kg BW、8333mg/kgBW和4166mg/kg BW(分别相当于人体推荐剂量的15倍、10倍、5倍),小鼠使用剂量是人体使用剂量的9倍时与人体有等量效果,设一个阴性对照组,每组10只动物。分别称取实施例3样品41.66、83.33、125.00g,各加纯水至200mL,混匀、配成208.30、416.65、625.00mg/mL浓度溶液,按0.2mL/10g BW的体积给子相应剂量组动物灌胃,阴性对照组予以等体积的纯水,每天灌胃一次,连续灌胃30天。
各组小鼠按照下述方法进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应试验、抗体生成细胞检测和血清溶血素测定,结果见表10。
1、ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法)
无菌取脾,置于盛有适量无菌Hank's液的平皿中,制成细胞悬液,经200目筛网过滤。用Hank's液洗2次,每次离心10min(1000r/min)。然后将细胞悬浮于1mL完全培养液中,计数活细胞数,用RPMI1640培养液调整细胞浓度3*106个/mL。再将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中,每孔1mL,在其中一孔加75μL ConA液(相当于7.5μg/mL),另一孔作为对照,置5%CO2,37℃二氧化碳孵箱中培养72h。培养结束前4h,每孔轻轻吸去上清液0.7mL,加入0.7mL不含小牛血清的RPMI1640培养液,同时加入MTT(5mg/mL)50μL/孔,继续培养4h。培养结束后,每孔加入1mL酸性异丙醇,吹打混匀,使紫色结晶完全熔解。然后分装到96孔培养板中,每个孔作3个平行孔,用酶标仪,以570nm波长测定光密度值。淋巴细胞的增殖能力用加ConA孔的光密度值减去不加ConA孔的光密度值表示。
2、迟发型变态反应试验
实验结束前5天用硫化钡将小鼠腹部皮肤脱毛约3cm×3cm范围,用5OμL DNFB溶液均匀涂抹致敏,5天后将10μL DNFB均匀涂抹于小鼠右耳两面进行攻击,24小时后颈椎脱臼处死小鼠,剪下左右耳壳,用打孔器取下8mm直径的耳片、称重,以左右耳重量之差值表示DTH的程度。
3、抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)
取脱纤维的羊血,用生理盐水洗涤3次,每次离心10min(2000r/min),用生理盐水将压积SRBC配成2%(v/v)的细胞悬液,每鼠腹腔注射0.2mL。将免疫后5天的小鼠处死,取脾脏置盛有Hank's液的平皿内,轻轻磨碎脾脏,制成细胞悬液,经200目筛网过滤,离心10min(2000r/min),用Hank's液洗涤2遍,最后将细胞悬浮在8mL Hank's液中。将表层培养基(1g琼脂糖加双蒸水至100mL)加热溶解后,放45-50℃水浴保温,与等量Ph7.2-7.4、2倍浓度的Hank's液混合,分装小试管,每管0.5mL,再向管内加入50μL10%SRBC(v/v,用SA缓冲液配制)、25uL脾细胞悬液,迅速混匀后倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上,做平行片,待惊脂凝固后,将玻片平扣放在玻片架上,放入二氧化碳培养箱中孵育1.5h,用SA缓冲液稀释的补体(1:8)加入玻片架凹槽内,继续孵育1.5h,计数溶血空斑数。用空斑数/106脾细胞表示抗休生成细胞数。
4、血清溶血素的测定(血凝法)
取脱纤维的羊血,用生理盐水洗涤3次,每次离心10min(2000r/min),用生理盐水将压积SRBC配成2%(v/v)的细胞悬液,每鼠腹腔注射0.2ml。免疫5天后,摘除小鼠的眼球,取血于离心管内,放置约1h,2000r/min离心10min,分离、收集血清。用生理盐水将血清倍比稀释,将不同稀释度的血清分别置于微量血凝板内,每孔100μL,再加入100μL 0.5%(v/v)的SRBC悬液,混匀,装入湿润的平盘内加盖,于37℃温箱孵育3h,观察血球凝集程度。按下式计算抗体积数:
抗体积数=(S1+2S2+3S3……nSn)
式中1、2、3……n为对倍稀释的指数,S为凝集程度的级别。
表10分别如下:各功效测定结果
表10结果表明:相对于阴性对照组,高剂量组淋巴细胞增殖能力明显增强(P<0.01),迟发型变态反应显著提高(P<0.05),抗体生成细胞数显著增加(P<0.01),血清溶血素水平显著提高(P<0.01);中剂量组淋巴细胞增殖能力明显增强(P<0.05),迟发型变态反应显著提高(P<0.05),抗体生成细胞数显著增加(P<0.05),血清溶血素水平显著提高(P<0.05);低剂量组淋巴细胞增殖能力明显增强(P<0.05),迟发型变态反应显著提高(P<0.05),抗体生成细胞数显著增加(P<0.05),血清溶血素水平显著提高(P<0.05)。说明本发明制备的羊奶粉具有良好的增强免疫力的功效。
原料使用依据及标志性成分:
本产品根据营养素使用相关标准要求组方,羊乳粉应符合GB 19644的规定;低聚果糖应符合GB/T 23528低聚果糖的规定;葡萄糖酸锌应符合GB 8820食品添加剂葡萄糖酸锌的规定;乳酸亚铁应符合GB 6781食品添加剂乳酸亚铁的规定。
考虑到长期食用的安全性和有效性,本品所用葡萄糖酸锌、乳酸亚铁用量均在《维生素、矿物质的种类和用量》规定范围内。锌用量为5~20mg/日,本产品用量为10mg/日。铁用量为5~20mg/日,本产品用量为8.7mg/日。低聚果糖用量2.5g/日,羊乳粉用量47.4g/日。本产品经安全性毒理学评价试验、动物功能试验表明,其服用剂量是安全有效的。适用于免疫力低下者人群食用。
本品中主要原料有葡萄糖酸锌、乳酸亚铁,因此我们把锌、铁定为本产品的标志性成分。
本发明的安全性:
本产品根据营养素使用相关标准要求组方,羊乳粉应符合GB 19644的规定;低聚果糖应符合GB/T 23528低聚果糖的规定;葡萄糖酸锌应符合GB 8820食品添加剂葡萄糖酸锌的规定;乳酸亚铁应符合GB 6781食品添加剂乳酸亚铁的规定。考虑到长期食用的安全性和有效性,本品所用葡萄糖酸锌、乳酸亚铁用量均在《维生素、矿物质的种类和用量》规定范围内。锌用量为5~20mg/日,本产品用量为10mg/日。铁用量为5~20mg/日,本产品用量为8.7mg/日。低聚果糖用量2.5g/日,羊乳粉用量47.4g/日。本产品经安全性毒理学评价试验、动物功能试验表明,其服用剂量是安全有效的。适用于免疫力低下者人群食用。
本产品经安全性毒理学评价试验、动物功能试验证明,是安全有效的。
本发明实施例1-3中制备的羊奶粉,对其卫生学试验进行检测,检测结果如表11所示:
表11分别如下:卫生学试验检验结果
通过观察表11,本发明实施例1-3中卫生学试验的检测结果均符合国标GB19644-2010《食品安全国家标准乳粉》要求。说明使用本发明的方法生产的羊奶粉各项指标符合国标要求。
本发明实施例1-3中制备的羊奶粉,对其进行加速试验,试验条件为:30-40℃,RH75%,试验期为3个月,每个月对样品的功效成分、微生物指标、理化指标和污染物限量指标进行检测,结果如表11所示:
表12分别如下:加速试验检验结果
从表12可知,本发明中的羊奶粉,主要营养成分蛋白脂肪在实验期内的含量稳定,主要功效成分铁和锌的含量也相对稳定,各项指标的检测结果均符合国标GB19644-2010《食品安全国家标准乳粉》的要求,综上所述,在加速试验的过程中本产品的各项营养成分含量稳定,长期保存不会造成营养成分的大量损失。微生物指标和污染物限量达标,不会对人体造成潜在危害。
上述指标的检验依据:GB/T5009.(11、14、90、123)-2003、GB5413.3-2010、GB5009.(3、4、5、12、24、33)-2010、JJF1070-2005、Q/SHR002-2012、GB/T4789.(3、5、11)-2003、GB4789.(2、4、10、15)-2010。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明,不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干简单推演或替换,都应当视为属于本发明的保护范围。
Claims (9)
1.一种提高免疫力的羊奶粉,其特征在于,包括以下原料:羊乳粉、低聚果糖、葡萄糖酸锌和乳酸亚铁,所述羊乳粉为关中奶山羊的羊奶制备而成。
2.根据权利要求1所述的一种提高免疫力的羊奶粉,其特征在于,所述羊乳粉为羊奶经过杀菌浓缩后喷雾干燥而成的粉状产品。
3.根据权利要求1所述的一种提高免疫力的羊奶粉,其特征在于,所述葡萄糖酸锌为葡萄糖酸锌颗粒。
4.根据权利要求1所述的一种提高免疫力的羊奶粉,其特征在于,包括以下质量份数的原料:羊乳粉900份-1000份、低聚果糖30份-80份、葡萄糖酸锌0.4份-2份和乳酸亚铁0.1份-1.5份。
5.根据权利要求4所述的一种提高免疫力的羊奶粉,其特征在于,包括以下质量份数的原料:羊乳粉947.7份、低聚果糖50份、葡萄糖酸锌1.4份和乳酸亚铁0.9份。
6.一种如权利要求1-5任一所述的提高免疫力的羊奶粉的制备方法,包括以下步骤:
初步混合:将葡萄糖酸锌和乳酸亚铁混合均匀,得到第一混合物;
低聚果糖的加入:将低聚果糖与第一混合物按混合均匀,得到第二混合物;
羊奶粉获得:将羊乳粉和第二混合物混合均匀,得到提高免疫力的羊奶粉。
7.根据权利要求6所述的一种提高免疫力的羊奶粉的制备方法,其特征在于,所述初步混合、低聚果糖的加入以及羊奶粉获得步骤中,所述原料的加入以及混合均采用等量递增法加入混合。
8.根据权利要求6所述的一种提高免疫力的羊奶粉的制备方法,其特征在于,还包括包装,所述包装具体为:
将包装机预热后,获得的提高免疫力的羊奶粉依次进行内包装和外包装。
9.一种如权利要求1-5所述的提高免疫力的羊奶粉的应用,其特征在于,所述提高免疫力的羊奶粉在制备提高免疫力保健品中的应用。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20181207 |