CN1082714A - 在尿石病情况下结石形成的活度和尿形成结石盐的成分的测定方法 - Google Patents

在尿石病情况下结石形成的活度和尿形成结石盐的成分的测定方法 Download PDF

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Abstract

测定尿石病情况下结石形成的活度和尿的结石 形成盐成分的方法是在于，以相应于9∶1、7∶1或5 ∶1的比例向尿样中加入蛋白质水溶液，将所得的混 合物放在平整表面上并在一昼夜内干燥，然后测定试 样边缘区中盐的结晶特性；在有极少量晶体，其聚集 体或该层完全结晶时，相应地判定为弱的，中等的和 显著的结石形成活度；检测这些结晶形成的成分，同 时测定试样中心区的盐成分并随后进行这些成分的 比较分析以测定尿的结石形成盐。

Description

本发明涉及医学领域中的分析方法，确切地是涉及在尿石病情况下结石形成的活度和尿形成结石盐的成分的测定方法并可用于分析结石构成的活度;在结石形成过程的动力学方面的研究;在尿石病早期结石的盐成分的测定等临床和科学研究，以便于预防尿结石的形成并决定尿石病时特别的治疗。
当前，在人体组织中结石形成的动力学研究，其强度，在结石形成过程中盐成分的测定是迫切的问题，因为使有可能预防尿结石的形成，在上述过程中及时地进行调整，在尿石病时决定并进行特定的治疗。
基于揭示结石形成过程的预测尿石病的方法是已知的，例如，通过检测新排出的尿或排尿后经过短时间的盐结晶预测的方法（B.E.Предтеченский，“Pуоводство    д    клпническим    лабораторным    исслепованиям”，1964，медипина，с.420-446），
或基于通过将氯化钙和草酸钠盐溶液和尿混合，将该混合物曝光并计算形成的结晶测定结晶形成的活性，预测尿石病的方法（SU，A，1629846）。
但是，上述方法其目的仅在于揭示结石形成的过程，并不能判断定一过程的活度。
已知的预测尿石病的方法，其中提出了通过计算按数学计算确定大小的形成的结晶来测定尿中结晶出磷酸钙的危险程度（“Urolog    ical    Research，N2，15，1987，Springer-Verlag，H.-Tiselius，“Mieasuremene    of    Risk    of    Calcium    Phosphate    Crystallization    in    Urine，”P.79-81）。数学计算使上述方法复杂化并且该方法其目的也仅在于揭示结石形成的过程。
还有已知的预测尿石病的方法（PCT/SU    91/00140），其中将蛋白质溶液加入尿试样中，例如白蛋白，使该混合物干燥并在有试样的片状结晶时预测尿石病。上述方法其目的仅在于说明结石形成的过程，不能用于测定结石形成的活度。
此外，已知有测定尿石病时盐成分的方法（B.E.Предтеченский，“Руководство    по    клиническим    лабораторным    исследованиям，1964，медидина，с.452-454;Wandt    M.，Underhill    L.J.Urol”，1988，61，N6，478-481;Schubert    G.，Brien    G.，Adam    K.“Z.Klin.Med”，1989，44，N11，923-928;Nichino    T.，Sakura    T.，Sato    T.，Kioso    K.，Kaneko    S.，“Jap.J.Nephrol”，1987，2p，N5，571-575）。
所有这些方法都是基于通过利用吸附、离子交换，例如色谱分离、借助X射线结构分析、X射线光谱分析、借助核磁共振的热分析，电子-顺磁共振或其他自旋-效应的物理化学途径研究尿的组分（盐沉淀、结砂、结石）。
上述方法仅适用于研究由机体中析出的形成的结石，而不能测定尿石病早期的结石形成的化学性质，以及不能测定不是由机体中析出的形成的结石。
测定尿石病早期形成结石盐的化学成分，以及形成的，但不是由机体中析出的结石的方法尚未公知。本申请测定尿石病情况下结石形成的活度和尿形成结石盐的成分的方法是新的，在文献中尚未描述过。
为研究既可以快速准确地测定尿石病情况下结石形成的活度，也能在其形成的任何阶段测定结石的盐成分这样的方法，这一任务被规定为本发明的基础。
这一任务通过以下方式得到了解决，按照本发明，在测定尿石病情况下结石形成的活度和尿形成结石盐的成分的方法中，相应地以9∶1，7∶1或5∶1的比例向尿样中加入蛋白质水溶液，将所得到的混合物以滴状送至平整的表面上并在不小于24小时期间内干燥，然后测定试样边缘区的盐结晶特性，在有少数晶体，一大批晶体或该区域完全结晶时，相应地判断弱的，中等的或显著的结石形成活度并查明这些结晶形成的成分，同时测定试样中心区的盐成分并随后进行这些成分的比较分析以测定尿的形成结石的盐。
最好使用8-12%白蛋白水溶液作为蛋白质水溶液。较佳的是，为了提高分析的准确度，在室温进行干燥送入平整表面上的所得到的混合物滴。为了加速并提高分析准确度，最好使用X射线光谱微量分析以检测上述结晶形成的成分元素。
本申请的方法查明了结石形成的活性与尿试样的边缘区中的盐结晶强度的依赖关系。这可以使快速、准确地测定尿样中结石形成的活度，有可能进行结晶形成过程的动力学方面研究，及时地在上述过程中提供调整，以及必要时进行特定的治疗。本申请的方法也可以在机体中结石形成之前测定结石形成盐的成分并采取目的在于由机体中将它们分离并预防这些盐随饮用水和食物制品一起进入的措施。本申请的分析方法可以在病人尿道中存在结石时经一定的观察周期知道其表面层是由什么样的结石形成盐生成的，这例如在碎石术时可能是必需的。
动力学方面对结石形成盐成分的研究，使有可能查明成分及随后的全部结石的结构，这在进行碎石术操作时具有意义。
此外，本申请的分析方法可以实现具有特定目的的尿石病复发的预防。本方法在实施时方便，简单，不需要专门的设备。
如上所述，本申请测定结石形成活度的方法，是建立在所揭示的尿样边缘区中盐的结晶程度与结石形成活性的依赖关系的基础上的。本申请的方法以如下方式实现。以相应于9∶1、7∶1或5∶1的比例向尿样中加入蛋白质水溶液（最好使用8-12%白蛋白水溶液作为该溶液）。可以使用取含上述比例之一的蛋白质水溶液的尿样进行分析。为了分析的可靠性，可以采用2或3种的上述比例。然后将所得的混合物液滴放入平整的表面上并在室温下不少于24小时的期间内进行干燥。
在干燥后，测定尿样边缘区中尿盐的结晶强度：极少数晶体表明弱的结晶形成过程活性;有盐晶体的聚集物表明中等活性;该区盐完全结晶表明显著的结石形成过程活性。
在边缘区没有晶体证明了未发生结石形成。本申请的方法可以使同时进行检测尿的结石形成盐的活度和成分。当试样边缘区有结晶形成时，借助物理方法（最好是X-射线光谱微量分析）测定这些结晶形成的成分元素。同时测定尿样中心区的盐成分并进行这些成分的比较分析，在此基础上得出结石形成盐化学成分的结论。结石形成一这一动力学过程，其盐的成分可适时地改变。本申请的方法可以测定在所述尿的盐成分下形成的或将来可能会形成的结石的盐成分。
本申请的方法经过了临床实验室的试验。为了测定结石形成的活度，观察12名病人-结石分泌者（即对其进行定期观察结石的自发破坏与分泌的病人）和128名在尿石病的临床阶段前实际上是健康人员，以前已用已知方法处理过，但结石形成的活度未知。研究工作进行如下：取尿样，向其中相应地以9∶1、7∶1或5∶1的比例加入蛋白质（白蛋白）水溶液，将所得到的混合物以滴状放在载物玻璃片表面上，在室温下干燥24小时。然后进行在试样干燥的边缘区中晶体存在的研究。研究结果示于表1和2。
表1
病人-结晶分泌者的临床的实验室数据
NO.    待试验者    尿/白蛋白水溶液    结石形成    在随后临床观察
的比例    的活度    时结石呈现的时刻
试样号    (分)
9:1    7:1    5:1
1. 病人
Figure 931073278_IMG1
+ - - 弱 27
2. 病人
Figure 931073278_IMG2
. + - - 弱 24
3. 病人 . + - - 弱 29
4.    病人III    +++    ++    -    中等    7
5.    病人M.    +++    ++    -    中等    8
6.    病人P.    +++    ++    -    中等    8
7.    病人O.    +++    ++    -    中等    7
8.    病人K.    +++    ++    -    中等    9
9.    病人C.    +++    ++    -    中等    8
10.    病人Y.    +++    ++    -    中等    7
11.    病人A.    +++    +++    -    显著    3
12. 病人
Figure 931073278_IMG4
+++ +++ +++ 显著 2
注：（+）-试样边缘区中存在极少量晶体
（++）-晶体聚集物
（+++）-边缘区全结晶。
表2
在尿石病临床前阶段实际上是健康人员的临床和实验室数据
NO    被观察人    尿/白蛋白水    结石形成的活度    在随后临床观察
员的数量    溶液比例    时结石呈现的
试样号    9:1    7:1    5:1    时刻(分)
1    61    +    -    -    弱    24-30
2    49    +++    ++    -    中等    7-8
3    18    +++    +++    +++    显著    2-3
注：（+）-在试样边缘区存在极少量晶体
（++）-晶体聚集物
（+++）-边缘区全结晶。
由表1和表2所示结果所见，显示出在实验室和临床数据之间100%的一致。在一组具有显著结石形成活度的（边缘区完全结晶）的病人-结石分泌者中，经2-3分钟可观察到结石形成;在另一组具有边缘区部分结晶（晶体聚集物）-中等结石形成程度的病人-结石分泌者中，经过7-8分钟可观察到结石形成;在边缘区具有极少量晶体的第三组中（弱的结石形成程度）经过2-2.5年可观察时结石产生。同样的现象可以论及尿石病临床前期实际上是健康人员的临床和实验室数据（表2）。因此，本申请的方法可以得到结石形成强度（显示出活度）和形成结石时刻的结论。与在13名尿石病病人中（具有查明显著结石形成程度）显示结石形成活度的同时，进行结石形成盐成分的研究。在上述13名病人中：6名病人是结石分泌者，7名病人经受过碎石术。由其中边缘区完全结晶的，在载物玻璃片上干燥的试样中，借助于X-射线结构分析、X-射线光谱微量分析进行测定这些结晶形成的相或元素成分。将所得到的试样边缘区结晶形成的元素（相）成分资料与其后析出的尿结石分析资料相比较。研究结果示于表3。
表3
试样边缘结晶形成的尿成分和析出的尿结石分析比较资料
NO    待试验者    诊断    尿样边缘区结晶形成    析出的尿结石
的盐成分(元素、相)    成分(沿表面层盐
的偏析)
1    2    3    4    5
1    病人K.    尿石病    尿酸    尿酸盐
2. 病人П. 尿石病 尿酸*尿酸盐
酸性尿酸铵
3.    病人X.    尿石病    尿酸    尿酸盐
酸性尿酸铵
4. 病人Л. 尿石病 尿酸*尿酸盐
5.    病人P.    尿石病    钙、磷镁    磷酸盐
二期肾盂肾炎
6.    病人A.    尿石病    钙、磷镁    磷酸盐
二期肾盂肾炎
7. 病人H. 尿石病 磷、钙、锌*磷酸盐
二期肾盂肾炎
8. 病人B. 尿石病 磷、钙**磷酸盐
二期肾盂肾炎
9. 病人A. 尿石病 磷、钙、镁**磷酸盐
10. 病人И. 尿石病 磷、钙**磷酸盐
11. 病人Г. 尿石病 钙**草酸盐
二期肾盂肾炎
12.    病人T.    尿石病    钙    草酸盐
二期肾盂肾炎
13.    病人A.    尿石病    钙    草酸盐
二期肾盂肾炎
＊    X射线结构分析资料
＊＊    X射线光谱微量分析资料。
如由表3中所示结果可见，尿样边缘区结晶形成的成分分析资料与在研究尿结石成分时所得的资料相符。
因此，本申请的方法可以预报或测定尿石病发展的临床阶段前结石的盐成分，使有可能用于预防大批结石的形成。
为了更好的理解本发明，进行了如下应用本申请方法具体方案的实施例。
实施例1
患者6;50岁，在临床实验室观察下经2年。在由机体析出结石后置于动力学观察研究。用本申请的方法进行每周尿的研究。研究的方法在于，以9∶1、7∶1或5∶1的相应比例向尿样中加入蛋白质水溶液。将所得混合物的液滴放在载物玻璃片上并在室温下干燥24小时。然后测定试样边缘区中盐的结晶特性。在四个月期间内呈现显著的结石形成活度（试样边缘区完全结晶）。同时，借助于光谱微量分析查明了边缘区结晶形成的元素成分。为了比较分析，同时进行了试样中心区元素成分的测定。边缘区中单个元素的含量相对于中心区显著提高造成了结石形成盐的基础。
结石形成盐成分测定的结果被在其由机体析出后结石成分的分析所证实。研究结果示于表4。
表4
中心和边缘区尿试样以及析出的尿结石元素分析比较分析的数据
NO    物料    元素%
试样号    Na    Mg    P    S    Cl    K    Ca    Zn    Si
1    尿样    27.4    1.1    3.4    1.1    62.6    3.3    -    -    -
(中心区)
2    尿样    17.3    0.9    14.6    9.5    39.6    11.6    6.1    -    -
(边缘区)
3    析出的尿    -    3.3    30.3    -    -    -    64.2    -    -
结石
如由图4的数据可见，Ca和P是结石形成盐的元素，它为由机体析出后结石的成分所证实。
在由机体所出结石后，规定给患者进行药物治疗并继续用本申请的方法进行每周研究，该研究进行了二年。所述患者的动力学观察结果（定期测定结石形成的活度）示于表5。
表5
在开始治疗后在动力学方面对病人6.结石过程活度的观察结果
研究周期    以下尿/白蛋白水溶液比例时    结石形成活度
尿样边缘区结晶指标
9:1    7:1    5:1
1周    ++    ++    -    中等
1个月    +    +    -    弱
2-4个月    -    -    -    没有过程
5-7个月    ++    +    -    中等
8个月    +    -    -    弱
9-13个月    -    -    -    没有过程
14个月    +    -    -    弱
15-20个月    +    -    -    弱
注：+-存在极少量晶体
++-晶体聚集物
--没有晶体
实施例2
如同实施例1所述进行测定病人X.尿样中结石形成活度。测得显著的结石形成活度（尿边缘区完全结晶）。借且X光谱微量分析检测边缘区结晶形成的元素成分。进行干燥尿样边缘和中心区元素成分的比较分析。结石形成盐的成分测定结果为其由机体中析出后的结石成分分析所证实。研究结果示于表6。
表6
尿样中心和边缘区以及析出的尿结石的元素成分比较分析数据
NO    物料    元素%
试样号    Na    Mg    P    S    Cl    K    Ca    Zn    Si
1    尿样    26.2    2.0    15.1    8.9    30.5    13.0    2.6    -    -
(中心区)
2    尿样    27.6    2.1    19.6    12.3    26.0    4.8    7.6    -    -
(边缘区)
3    析出的尿    1.5    -    4.1    0.5    -    -    93.0    -    -
结石
如由表6资料可见，形成结石盐的元素主要是Ca，这已为结石成分：Ca-93%所证实。
实施例3
如同实施例1所述进行病人K.尿样中结石形成的活度测定。测得显著的结石形成活度（试样边缘区完全结晶）。借助X光谱微量分析检测边缘区结晶形成的元素成分。进行干燥尿样的中心和边缘区的元素成分比较分析。结石形成盐的成分测定结果为其由机体析出后的结石成分所证实。研究结果示于表7。
表7
尿样中心和边缘区以及析出的尿结石的元素成分比较分析数据
NO    物料    元素%
试样号    Na    Mg    P    S    Cl    K    Ca    Zn    Si
1    尿样    17.2    -    15.8    12.2    31.1    19.7    2.6    -    -
(中心区)
2    尿样    12.7    3.9    23.3    9.2    22.4    12.5    5.5    -    -
(边缘区)
3    析出的尿    -    14.0    39.3    -    -    -    44.7    -    -
结石
如由表7数据可见，结石形成盐的元素主要是Ca、P和Mg，这已为结石成分：Ca-44.7%;P-39.3%;Mg-14.0%所证实。
实施例4
如同实施例1所述进行病人C.尿样中结石形成活度的测定。测得显著的结石形成活度（边缘区完全结晶）。借助X射线光谱微量分析检测边缘区结晶形成元素成分。进行干燥尿样的中心和边缘区元素成分的比较分析。在呈现显著的结石形成活度和测定病人的结石形成尿盐的成分后，经过特别治疗的疗程。研究结果示于表8。
表8
尿样中心和边缘区以及析出的尿结石的元素成份比较分析数据（%）
研究周期    结石形    物料    元素
成活度
Na    Mg    P    S    Cl    K    Ca    Zn    Si
治疗前  显著  尿样  25.2  1.5  7.1  7.8    37.1    16.4    1.7    0.2    -
(中心区)
尿样    14.1    0.2    14.6    2.7    17.0    8.4    4.7    0.2    -
(边缘区)
治疗后  没有  尿样  33.4  1.0  10.6  10.1  35.9    7.1    1.4    1.3    -
过程    (中心区)
尿样    34.6    -    10.6    8.3    35.9    6.4    0.4    1.1    -
(边缘区)
如由表8可见，结石形成盐元素（治疗前）为Ca和P;治疗后没有结石形成过程。

Claims (4)

1、测定尿石病情况下结石形成活度和结石形成尿盐的成分的方法，其特征在于以相应9∶1、7∶1或5∶1的比例向尿样中加入蛋白质水溶液；以滴状将所得混合物放在平整表面上并在不少于24小时期间内干燥，然后测定试样边缘区中盐的结晶特性；当存在极少量晶体，其聚集体或该区完全结晶时相应地判定为弱的，中等或显著的结石形成活度；检测这些结晶形成的成分，同时进行试样中心区盐成分的测定并随后进行这些成分的比较分析以测定尿的结石形成盐。
2、权利要求1的方法，其特征在于使用8-12%白蛋白水溶液作为蛋白质水溶液。
3、权利要求1的方法，其特征在于在室温下进行放在平整表面上的所得混合物液滴的干燥。
4、权利要求1-3中任一项的方法，其特征在于为检测结晶形成元素成分，利用X射线光谱微量分析。
CN93107327A 1992-05-21 1993-05-21 结石形成的活度和形成尿结石盐的成分的测定方法 Expired - Fee Related CN1050426C (zh)

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