CN1082551A

CN1082551A - 香菇多糖及香菇菌多糖提取新工艺

Info

Publication number: CN1082551A
Application number: CN 92109345
Authority: CN
Inventors: 樊菊芬; 章国镇
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1992-08-15
Filing date: 1992-08-15
Publication date: 1994-02-23
Anticipated expiration: 2007-08-15
Also published as: CN1032428C

Abstract

本发明属植物化学大分子化合物分离技术，以香菇子实体或深层发酵培养的香菇液为原料，用中空纤维超滤器超滤，Sephadex G-150～G-200精制。方法简单，其工艺过程不需要特殊设备，即可生产香菇多糖或香菇菌多糖，可供口服制剂和静脉注射制剂原料。适于一般药厂生产，具节省能源、生产周期短、节约有机溶媒等优点，且成本低廉，纯度高，含多糖可达 50～86％。精制后可达96％以上，其红外、紫外和高压液相色谱与日本提供的香菇多糖一致。

Description

本发明属植物化学水溶性大分子化合物的分离技术。

香菇多糖为担子菌纲伞菌科香菇Lentinus endodes（Berk）Sing提取分离的多糖。1965年日本千原吴郎发现其有抗肿瘤活性后，1985年先后由味之素，森下制药、山之内制药株式会社联合开发为香菌多糖粉针剂（英名Lentinan，日名レンチナン），在日本广泛应用，以延长晚期胃癌病人生存时间。1982年以来，四川抗菌素研究所、河南省医药工业研究所先后从深层发酵培养的香菇液中提取多糖，名为“香菇菌多糖”，以区别与从子实体所提取的香菇多糖。1986年河南开封制药厂生产香菇菌多糖片。同年，福建省福州中药厂自干香菇子实体提取香菇多糖并制成肌肉注射剂，1989年卫生部批准由福州梅峰制药厂试产。“香菇菌多糖片”和“香菇多糖肌肉注射剂”均对慢性迁延性肝炎有效，可使部分乙型肝炎患者表面抗原转阴;并配合化疗药物治疗晚期食道癌、胃癌也有较好的近期疗效。

但香菇多糖提取工艺十分复杂，日本味之素、森下制药株式会社提取香菇多糖的工艺流程共有24步，而且在提取过程中需用变性酒精、十六羟基三甲基铵、氯仿、丁醇、甲醇、丙醇等有机溶剂，见图5。国内厂家也基本上仿效日本工艺流程提取香菇多糖和香菇菌多糖，工艺流程复杂，消耗溶剂较多，见图6。

为改进从香菇子实体或深层发酵培养的香菇液中提取分离香菇多糖和香菇菌多糖的方法，简化提取工艺流程，减少或少用有机溶剂，本发明经反复试验，研究成功了香菇多糖和香菇菌多糖提取新工艺，见表1。本发明从子实体提取香菇多糖含量可达50%～64%，自深层发酵培养的香菇液中提取的香菇菌多糖，多糖含量可达87.67%。均提高了香菇多糖和香菇菌多糖的纯度，可作口服制剂原料。

香菇多糖和香菇菌多糖精制后可得到纯度96%以上的白色多孔性粉末，其红外吸收光谱[图1-a、b、c]、紫外吸收光谱[图2]、高压液相色谱[图3-1，2]，与日本提供的香菇多糖一致，可作为静脉注射制剂的原料。

本发明香菇多糖和香菇菌多糖提取新工艺具体方法如下：

（一）从香菇子实体提取香菇多糖

1.将样品粉碎，过20目筛，称重;

2.加10倍量（kg∶l）的水，于85～95℃温浸2小时，并时时搅拌（如上操作2次）;

3.将上清液合并，过滤，以得到澄清液为度;

4.以中空纤维超滤器超滤，截留分子量2～5万，得截留部分约为原材料1∶1～1.5（kg/l）;

5.加4～10倍量乙醇，使多糖沉淀;

6.滤集沉淀，经无水乙醇洗涤，室温挥去乙醇，40～60℃干燥，得淡棕色至棕色粉末，得率约1%，含多糖量50～64%。

实施例：从香菇菌柄提取香菇多糖。（1）香菇菌柄粉碎，过20目筛，称取400g置塘瓷锅中，加常水4000ml，在水浴上加热至沸，时时搅拌，1小时后倾出上清液，用纱布过滤;（2）残渣再加水3000ml，方法同前;（3）合并两次滤液，待冷，离心除去杂质，得溶液5700ml;（4）中空纤维超滤器超滤，截留分子量2万，蒸馏水洗两次，得截留部分350ml;（5）加95%乙醇1400ml于截留部分中，放置;（6）移入离心机，离心（3000转/分）15分钟，收集沉淀，置于干燥器中，得棕色固体4g，实测含多糖64.70%。

（二）从深层发酵培养香菇菌液提取香菇菌多糖

1.将培养液与菌丝体分开;

2.菌丝体加适量水煮沸，如结块，捣碎，离心除去残留菌丝体，上清液与菌丝液合并;

3.中空纤维超滤器超滤，截留分子量2～5万，收集截留部分，加3～10倍量（kg/l）乙醇，使多糖沉淀;

4.滤集沉淀，40～60℃干燥，为无色粉末，得率1～1.5%，含多糖量70.83～86.19%

实施例：从深层发酵培养香菇菌液提取香菇菌多糖。（1）取已煮沸过滤的香菇培养液4250ml;（2）用中空纤维超滤器超滤，截留分子量2万，得截留部分600ml;（3）加乙醇21放置;（4）抽滤，滤集沉淀;（5）用无水乙醇洗沉淀2次，室温挥去乙醇，置干燥器中，得白色粉末62.1g，得量约为原液的1.5%（g/ml），含多糖87.67%。

（三）香菇多糖与香菇菌多糖的精制

1.将香菇多糖或香菇菌多糖溶于水;

2.以Sephadex G-150～G-200上柱;

3.分部收集滤液，冷冻干燥，得白色多孔性香菇多糖粉末。

实施例：（1）称取从香菇子实体提得多糖100mg，溶于2ml水中;（2）Sephadex G-200装柱;（3）从柱顶加入多糖水溶液，以水洗脱，分部收集，冷冻干燥，得白色多孔性粉末55mg。

本发明香菇多糖及香菇菌多糖提取新工艺的特征在于：

1.温浸香菇子实体，浸液或深层发酵培养的香菇液，不经浓缩，直接经中空纤维超滤器超滤，截留部分用乙醇沉淀，即可得到香菇多糖或香菇菌多糖。

2.如权利要求1所述，香菇多糖或香菇菌多糖提取新工艺特征在于从香菇子实体提取香菇多糖，温浸温度控制在85～95℃之间。

3.如权利要求1所述，香菇多糖或香菇菌多糖提取新工艺特征在于从香菇浸液或深层发酵香菇液选用中空纤维超滤器超滤，截留分子量2～5万之间。

4.如权利要求1所述，香菇多糖或香菇多糖提取新工艺特征在于香菇多糖或香菇菌多糖经Sephadex G-150～G-200柱精制，可成为静脉注射剂原料。

应用本发明提取香菇多糖新工艺的优点

本发明不仅适于香菇子实体香菇多糖的提取与精制，而且对深层培养香菇液也适用，其优点为：

（一）提取工艺方法简便，应用新工艺从子实体提取多糖，只有6步工艺流程，得到精制品共为9步工艺流程[图4];而日本味之素、森下制药的粉针原料流程为24步[图5];福州中药厂注射剂原料，进一步精制经30步工艺流程才得到浅灰黄色粉末[图6]。

（二）节约大量提取时间，本发明工艺过程短，从原料分离得到粉针原料需时约7天，而日本的粉针工艺流程比较复杂，需要较长的时间。

（三）节约大量有机溶剂，应用本发明的新工艺所需的溶剂仅用乙醇和少量无水乙醇，而日本工艺需用变性酒精、十六羟基三甲基铵、氯仿、丁醇、甲醇、丙酮等有机溶剂，国内厂家基本上仿效日本工艺，消耗溶剂较多。

（四）节约能源，成本低，纯度高，按本发明新工艺所得精制香菇多糖，与日本生产的香菇多糖主要光谱数据一致，成本不到日本商品的1/50;纯度较国内药厂生产的香菇多糖和香菇菌多糖为高。

实现本发明的最好形式：凡从事药品、保健药品生产的制药厂、医院药房制剂室或生产保健食品的食品厂，欲得到口服或注射用的香菇多糖或香菇菌多糖原料者，如按本发明的技术要求实施，可达到事半功倍的效果。

Claims

香菇多糖及香菇菌多糖提取新工艺特征在于：

1、温浸香菇子实体；浸液或深层发酵培养的香菇液，不经浓缩，直接经中空纤维超滤器超滤，截留部分用乙醇沉淀，即可得到香菇多糖或香菇菌多糖，均可为口服制剂原料；
2、如权利要求1所述，香菇多糖提取新工艺特征在于：从香菇子实体提取香菇多糖，温浸温度控制在85～95℃之间;
3、如权利要求1所述，香菇多糖及香菇菌多糖提取新工艺其特征在于：从香菇浸液或深层发酵香菇液选用中空纤维超滤器超滤，截留分子量2～5万之间;
4、如权利要求1所述，香菇多糖及香菇菌多糖提取新工艺其特征在于：从香菇多糖或香菇菌多糖提取的原料经Sephadex G-150～G-200柱精制，可成为静脉注射制剂原料。