CN108029458A - 一种黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法 - Google Patents

一种黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法 Download PDF

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Abstract

一种黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法，包括：步骤1）：培养基配制：以1千克所述培养基为基准，所述培养基中含有土豆汁300‑400克、葡萄汁100‑200克、琼脂30‑50克、硫酸镁0.5‑1克、构树发酵粉3‑6克和余量的水；步骤2）：培养基灭菌：将步骤1）所得培养基过滤后，置于灭菌器中灭菌，灭菌后冷却；步骤3）：菌种接种：向步骤2）培养基内接入黑皮鸡枞菌的菌丝，置于摇床上振荡培养；步骤4）：发酵培养：将步骤3）中振荡培养好的液体菌种置于发酵罐中，发酵培养。本发明采用土豆汁、葡萄汁、琼脂、硫酸镁和构树发酵粉制成的液体培养基，各组分共同作用，提供菌丝生长的多种营养物质，能使菌丝生长速度快，菌丝生物量为2.3g/ml以上，且菌丝粗壮，色泽微带琥珀色。

Description

一种黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法
技术领域
本发明属于菌类培养领域，具体涉及一种黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法。
背景技术
黑皮鸡枞菌属伞菌目，白蘑科，是温带和亚热带地区夏秋季生长的野生食用菌，鸡枞菌的一种。由于其生长发育与土白蚁的活动有密切关系，且对生长地依赖性强，人工培养要求高难度大。而由于鸡枞菌肉质细嫩，气味浓香，味道鲜美，是著名的野生食用菇之一，味道尤以黑皮鸡枞菌最好。中医认为鸡枞菌性平味甘，有健脾益气，开胃提神，止痛水肿之功效，是治疗痔疮的极理想食物。现代医学发现，鸡枞除对痔疮有特效外，还能预防肠癌、降低血压、增强人体免疫力，因此单纯采摘野生黑皮鸡枞菌已难以满足巨大的市场需求。
黑皮鸡枞菌已实现人工培养，目前主要是将菌种接入以锯木屑为主的培养基中进行培养，然后再置于菌棒中进行培育，但存在菌丝生长速度慢、产量低的问题。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种能够促进菌丝生产速度的黑皮鸡枞液体菌种制备方法，以解决现有技术中黑皮鸡枞菌人工培养过程中菌丝生长速度慢、产量低的问题。
为了实现以上目的，本发明采用的技术方案为：
一种黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法，包括以下步骤：
步骤1）：培养基配制：以1千克所述培养基为基准，所述培养基中含有土豆汁300-400克、葡萄汁100-200克、琼脂30-50克、硫酸镁0.5-1克、构树发酵粉3-6克和余量的水；
步骤2）：培养基灭菌：将步骤1）所得培养基过滤后，置于灭菌器中灭菌，灭菌后在无菌环境下冷却至20-25℃；
步骤3）：菌种接种：向步骤2）中冷却后的培养基内接入黑皮鸡枞菌的菌丝，置于摇床上在23-24℃条件下恒温振荡培养3-5天；
步骤4）：发酵培养：将步骤3）中振荡培养好的液体菌种置于发酵罐中，在28-30℃的条件下发酵培养3-5天。
进一步的，所述土豆汁是将新鲜干净土豆捣烂绞汁，过滤后得到。土豆汁中含有丰富的维生素A、维生素C、淀粉、木质素等物质，为菌丝生长提供适宜的生长环境和所需的营养物质。
进一步的，所述葡萄汁是将新鲜干净葡萄榨汁，过滤后得到。葡萄中含有多种维生素，含糖分高，能促进菌丝生长。
进一步的，所述构树发酵粉是将构树果实，加入红糖水，置于22-25℃的条件下密封发酵3-6个月，过滤、浓缩干燥后得到。构树果实中含有大量可溶性多糖和黄酮类物质，甜度高、不酸，还含有多种维生素。
进一步的，所述构树果实与红糖水的质量比为1:4，所述红糖水是将红糖溶于3倍质量的水中得到。
进一步的，所述黑皮鸡枞菌的菌丝取至子实体菌盖和菌把之间性能稳定、细胞活跃的组织，作为菌丝体。
进一步的，所述步骤2）中灭菌的条件是在120℃的条件下保持45分钟。
本发明的黑皮鸡枞菌液体菌种制备方法中，在培养基中加入有葡萄汁、构树发酵粉，其中葡萄汁取自新鲜葡萄，其还有多种维生素，含糖分高，能促进菌丝生长。而构树果实中含有大量可溶性多糖和黄酮类物质，甜度高、不酸，还含有多种微量元素，有效促进菌丝生长。
与现有技术相比，本发明具有的有益效果是：
本发明采用土豆汁、葡萄汁、琼脂、硫酸镁和构树发酵粉制成的液体培养基，各组分共同作用，提供菌丝生长的多种营养物质，能使菌丝生长速度快，菌丝生物量为2.3g/ml以上，且菌丝粗壮，色泽微带琥珀色。此外本发明的菌丝选择菌盖和菌把之间性能稳定、细胞活跃的组织结构，有效的提高了遗传的稳定性，并且能够减少杂菌，从而提高了菌丝的产量。
具体实施方式
参照以下具体实施例对本发明的黑皮鸡枞菌的培养方法作详细地说明，但不作为对本发明的限定。
实施例1
一种黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法，包括以下步骤：
步骤1）：培养基配制：土豆汁350克、葡萄汁150克、琼脂40克、硫酸镁0.7克、构树发酵粉5克和水454.3克；
所述土豆汁是将新鲜干净土豆捣烂绞汁，过滤后得到。所述葡萄汁是将新鲜干净葡萄榨汁，过滤后得到。所述构树发酵粉是将构树果实，加入红糖水，置于25℃的条件下密封发酵5个月，过滤、浓缩干燥后得到。所述构树果实与红糖水的质量比为1:4，所述红糖水是将红糖溶于3倍质量的水中得到。
步骤2）：培养基灭菌：将步骤1）所得培养基过滤后，置于灭菌器中于120℃的温度下灭菌45分钟，灭菌后在无菌环境下冷却至25℃；
步骤3）：菌种接种：向步骤2）中冷却后的培养基内接入黑皮鸡枞菌的菌丝，置于摇床上在23℃条件下恒温振荡培养5天；
步骤4）：发酵培养：将步骤3）中振荡培养好的液体菌种置于发酵罐中，在30℃的条件下发酵培养4天。
经检测，菌丝生物量为2.6g/100ml，且菌丝粗壮，色泽微带琥珀色。
实施例2
一种黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法，包括以下步骤：
步骤1）：培养基配制：土豆汁400克、葡萄汁160克、琼脂35克、硫酸镁0.8克、构树发酵粉4.2克和水400克；
所述土豆汁是将新鲜干净土豆捣烂绞汁，过滤后得到。所述葡萄汁是将新鲜干净葡萄榨汁，过滤后得到。所述构树发酵粉是将构树果实，加入红糖水，置于24℃的条件下密封发酵6个月，过滤、浓缩干燥后得到。所述构树果实与红糖水的质量比为1:4，所述红糖水是将红糖溶于3倍质量的水中得到。
步骤2）：培养基灭菌：将步骤1）所得培养基过滤后，置于灭菌器中于120℃的温度下灭菌45分钟，灭菌后在无菌环境下冷却至24℃；
步骤3）：菌种接种：向步骤2）中冷却后的培养基内接入黑皮鸡枞菌的菌丝，置于摇床上在23℃条件下恒温振荡培养5天；
步骤4）：发酵培养：将步骤3）中振荡培养好的液体菌种置于发酵罐中，在30℃的条件下发酵培养4天。
经检测，菌丝生物量为2.4g/100ml，且菌丝粗壮，色泽微带琥珀色。
实施例3
一种黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法，包括以下步骤：
步骤1）：培养基配制：土豆汁380克、葡萄汁140克、琼脂38克、硫酸镁0.5克、构树发酵粉4.5克和水437克；
所述土豆汁是将新鲜干净土豆捣烂绞汁，过滤后得到。所述葡萄汁是将新鲜干净葡萄榨汁，过滤后得到。所述构树发酵粉是将构树果实，加入红糖水，置于24℃的条件下密封发酵6个月，过滤、浓缩干燥后得到。所述构树果实与红糖水的质量比为1:4，所述红糖水是将红糖溶于3倍质量的水中得到。
步骤2）：培养基灭菌：将步骤1）所得培养基过滤后，置于灭菌器中于120℃的温度下灭菌45分钟，灭菌后在无菌环境下冷却至24℃；
步骤3）：菌种接种：向步骤2）中冷却后的培养基内接入黑皮鸡枞菌的菌丝，置于摇床上在23℃条件下恒温振荡培养5天；
步骤4）：发酵培养：将步骤3）中振荡培养好的液体菌种置于发酵罐中，在28℃的条件下发酵培养4天。
经检测，菌丝生物量为2.5g/100ml，且菌丝粗壮，色泽微带琥珀色。
上述实施例的液体菌种相比传统的固态菌种相比，制种时间大大缩短，产能提高了50%，种植黑皮鸡枞菌的大棚利用率也提高了30%以上，有效的较低了成本。所得的液体菌种接种于菌棒上，15天左右菌丝长满菌棒，23天左右菌丝达到生理成熟，生长速度显著提升。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1）：培养基配制：以1千克所述培养基为基准，所述培养基中含有土豆汁300-400克、葡萄汁100-200克、琼脂30-50克、硫酸镁0.5-1克、构树发酵粉3-6克和余量的水；
步骤2）：培养基灭菌：将步骤1）所得培养基过滤后，置于灭菌器中灭菌，灭菌后在无菌环境下冷却至20-25℃；
步骤3）：菌种接种：向步骤2）中冷却后的培养基内接入黑皮鸡枞菌的菌丝，置于摇床上在23-24℃条件下恒温振荡培养3-5天；
步骤4）：发酵培养：将步骤3）中振荡培养好的液体菌种置于发酵罐中，在28-30℃的条件下发酵培养3-5天。
2.根据权利要求1所述的黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法，其特征在于，所述土豆汁是将新鲜干净土豆捣烂绞汁，过滤后得到。
3.根据权利要求1所述的黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法，其特征在于，所述葡萄汁是将新鲜干净葡萄榨汁，过滤后得到。
4.根据权利要求1所述的黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法，其特征在于，所述构树发酵粉是将构树果实，加入红糖水，置于22-25℃的条件下密封发酵3-6个月，过滤、浓缩干燥后得到。
5.根据权利要求4所述的黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法，其特征在于，所述构树果实与红糖水的质量比为1:4，所述红糖水是将红糖溶于3倍质量的水中得到。
6.根据权利要求1所述的黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法，其特征在于，所述黑皮鸡枞菌的菌丝取至子实体菌盖和菌把之间性能稳定、细胞活跃的组织，作为菌丝体。
7.根据权利要求1所述的黑皮鸡枞菌液体菌种的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中灭菌的条件是在120℃的条件下保持45分钟。
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