CN107858388A - 一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法 - Google Patents
一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107858388A CN107858388A CN201710977650.5A CN201710977650A CN107858388A CN 107858388 A CN107858388 A CN 107858388A CN 201710977650 A CN201710977650 A CN 201710977650A CN 107858388 A CN107858388 A CN 107858388A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- probiotic lactobacilli
- sheep breast
- prepared
- probiotic
- protein
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 title claims abstract description 79
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 title claims abstract description 71
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 title claims abstract description 71
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 title claims abstract description 70
- 241001494479 Pecora Species 0.000 title claims abstract description 48
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 title claims abstract description 46
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 36
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 35
- 230000003276 anti-hypertensive effect Effects 0.000 title claims abstract description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 title claims abstract description 13
- 239000004365 Protease Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 title claims abstract description 13
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 42
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 42
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 34
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 34
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 claims abstract description 29
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 29
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 21
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 20
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 17
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 claims abstract description 11
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 8
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000000835 fiber Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000012466 permeate Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims abstract description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 30
- 235000020251 goat milk Nutrition 0.000 claims description 16
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 14
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 12
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 12
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 12
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 12
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 claims description 11
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 claims description 11
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 11
- 241000405398 Hovenia Species 0.000 claims description 10
- 235000008586 Hovenia Nutrition 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 8
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 claims description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 6
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 6
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 6
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 6
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 6
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 6
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 6
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 claims description 6
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 claims description 6
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 claims description 6
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 108010009719 mutanolysin Proteins 0.000 claims description 6
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 6
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 6
- 108010009004 proteose-peptone Proteins 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 claims description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 6
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 claims description 5
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 claims description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 229940004208 lactobacillus bulgaricus Drugs 0.000 claims description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 5
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 claims description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 4
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 claims description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinoline Chemical compound N1CCCC2=CC(OC)=CC=C21 FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LPQOADBMXVRBNX-UHFFFAOYSA-N ac1ldcw0 Chemical compound Cl.C1CN(C)CCN1C1=C(F)C=C2C(=O)C(C(O)=O)=CN3CCSC1=C32 LPQOADBMXVRBNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 2
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 abstract description 5
- 239000008267 milk Substances 0.000 abstract description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 3
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 abstract description 3
- 230000001077 hypotensive effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000009413 insulation Methods 0.000 abstract description 3
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 abstract description 3
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 abstract description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 abstract description 2
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 abstract description 2
- 239000011942 biocatalyst Substances 0.000 abstract description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 2
- 235000021474 generally recognized As safe (food) Nutrition 0.000 abstract description 2
- 235000021473 generally recognized as safe (food ingredients) Nutrition 0.000 abstract description 2
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 abstract description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 13
- 239000005541 ACE inhibitor Substances 0.000 description 7
- 229940044094 angiotensin-converting-enzyme inhibitor Drugs 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 101710129690 Angiotensin-converting enzyme inhibitor Proteins 0.000 description 5
- 101710086378 Bradykinin-potentiating and C-type natriuretic peptides Proteins 0.000 description 5
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 5
- 235000020254 sheep milk Nutrition 0.000 description 5
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000002333 angiotensin II receptor antagonist Substances 0.000 description 3
- 229940125364 angiotensin receptor blocker Drugs 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 102100030988 Angiotensin-converting enzyme Human genes 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 2
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 102000015427 Angiotensins Human genes 0.000 description 1
- 108010064733 Angiotensins Proteins 0.000 description 1
- 241001037822 Bacillus bacterium Species 0.000 description 1
- 229940127291 Calcium channel antagonist Drugs 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 101000984728 Chiropsoides quadrigatus Angiotensin-converting enzyme inhibitory peptide Proteins 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 108010061435 Enalapril Proteins 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 244000126002 Ziziphus vulgaris Species 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002416 angiotensin derivative Substances 0.000 description 1
- 239000002220 antihypertensive agent Substances 0.000 description 1
- 229940127088 antihypertensive drug Drugs 0.000 description 1
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 description 1
- 229940097320 beta blocking agent Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 1
- 235000015155 buttermilk Nutrition 0.000 description 1
- 239000000480 calcium channel blocker Substances 0.000 description 1
- 229960000830 captopril Drugs 0.000 description 1
- FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N captopril Chemical compound SC[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 229940030606 diuretics Drugs 0.000 description 1
- 229960000873 enalapril Drugs 0.000 description 1
- GBXSMTUPTTWBMN-XIRDDKMYSA-N enalapril Chemical compound C([C@@H](C(=O)OCC)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 GBXSMTUPTTWBMN-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 208000021822 hypotensive Diseases 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/30—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis
- A23J3/32—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents
- A23J3/34—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes
- A23J3/341—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins
- A23J3/343—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins of dairy proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法，将益生乳杆菌接入益生乳杆菌增菌培养基中恒温培养后离心，收集菌体沉淀得益生乳杆菌菌泥；向益生乳杆菌菌泥中添加磷酸缓冲液，保温离心得胞壁蛋白酶的酶液，向脱脂后鲜羊奶中加入益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉和CaCl2酶解，离心将上清液通过截断分子量为2000Da的中空纤维膜，收集透过液并将其经Bio‑gel P2分离，收集主峰经冷冻干燥获得羊乳降压肽。本发明以羊乳为原料，GRAS微生物——益生乳杆菌的胞壁蛋白酶为生物催化剂，将羊乳中的蛋白质水解成具有降血压活性的寡肽，其可用于辅助降血压食品和保健食品的开发，与化学合成降压药相比，羊乳源降压肽具有天然、安全、无副作用等优点。
Description
技术领域
本发明涉及一种降压肽的制备方法，特别涉及一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法。
背景技术
陕西省是我国传统的奶山羊主产区，关中地区是全国最大的奶山羊良种生产基地。2015年底全省奶山羊存栏180万多只，羊乳产量50万余吨，羊奶粉市场份额达95％以上，奶山羊数量、羊乳产量及羊奶粉产量均为全国第一，但国内羊乳产品的品种少，主要为羊奶粉及液态羊奶，其中大部分羊奶粉作为工业原料销往国外，存在产品科技含量低、附加值不高及同质化严重等问题，国外羊乳产品种类多，主要包括发酵羊乳产品(如奶酪、脱脂酪乳或酸羊奶)、冷冻产品(如冰激凌或冷冻酸羊奶)、液态奶、黄油、功能性羊奶片等。因此，开发羊乳新产品很有必要。
高血压是世界最常见的慢性病，是最大的流行病之一，也是心脑血管病最主要的危险因素。常用降压药物包括钙通道阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)、血管紧张素受体阻滞剂(ARB)、利尿剂、α受体阻滞剂和β受体阻滞剂六类，其中血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)对于高血压患者具有良好的靶器官保护和心血管终点事件预防作用，且降压作用明确，对糖脂代谢无不良影响，是当今降压类药物中发展最快的一种。常用的ACEI类药物包括卡托普利、依那普利、贝那普利等，但这些合成的ACEI会引起许多不良反应，最常见的是持续性干咳。研究表明，天然来源的ACE抑制肽是蛋白质经酶分解而产生的一类具有ACE抑制活性的多肽类物质，通常含3-10个氨基酸，分子量在300-1000之间，可以快速通过消化粘膜进入血液循环，与ACE强效结合从而抑制其活性，起到降压的作用，因此又叫降压肽。部分益生菌的胞壁蛋白酶能水解乳蛋白释放出肽类，其中的一些短肽具有生物活性，如降血压，但目前乳源ACE抑制肽主要来自牛乳，而且所用酶主要为进口酶制剂，因此采用新型酶制剂制备羊乳源ACE抑制肽很有必要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法，所制备的羊乳降压肽可用于保健食品和制剂的开发。
为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：
1)益生乳杆菌增菌培养基制备：
将葡萄糖15-20g、酵母浸粉15-25g、硫酸锰0.02-0.05g、吐温80 0.5-1.0mL，拐枣多糖1.0-1.5g、菊糖1.0-1.5g、酪蛋白胨4-6g、磷酸氢二钠4-6g、亮氨酸15-20mg添加到纯净水中，定容至1L，再将其pH调至5.5-7.0，于121℃灭菌，即得益生乳杆菌增菌培养基；
2)益生乳杆菌培养及菌体收集：
将益生乳杆菌按2％-5％的接种量接入益生乳杆菌增菌培养基中，35-41℃恒温培养18-24h后离心，倒掉上清液，收集菌体沉淀，之后用无菌生理盐水洗涤后离心得到益生乳杆菌菌泥；
3)益生乳杆菌胞壁蛋白酶制备：
按每g益生乳杆菌菌泥中添加20-30mL磷酸缓冲液，在35-45℃保温1-2h后离心所得上清液即为胞壁蛋白酶的酶液，采用1-3KDa超滤去除小分子物质，然后在保留液中添加CaCl2，控制CaCl2的浓度为8-15mM，冷冻干燥获得益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉；
4)羊乳源降压肽的制备：
将鲜羊奶经脱脂后调节pH值至6.0-8.0，按质量体积比向其中加入1-3％的益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉和0.01-0.04％的CaCl2，于35-45℃下酶解2-4h后调节酶解液pH值至4.6，离心将上清液通过截断分子量为2000Da的中空纤维膜，收集透过液并将其经Bio-gelP2分离，收集主峰经冷冻干燥获得羊乳降压肽，其对ACE抑制的IC50值为0.16-0.25mg/mL，产量为0.48-0.60g/100g羊乳。
所述步骤2)的益生乳杆菌采用保加利亚乳杆菌、罗伊式乳杆菌或鼠李糖乳杆菌中的一种或一种以上任意比例的混合物。
所述步骤2)的离心是在4-10℃、6000-8000r/min下离心15-25min。
所述步骤3)的磷酸缓冲液的pH＝7.0，每升磷酸缓冲液中含180-210g氯化锂、0.2-0.6g溶菌酶和3000-5000U变溶菌素。
所述步骤3)的离心是在4-10℃、4000-6000r/min条件下离心20-30min。
所述步骤4)脱脂后的鲜羊奶通过截断分子量为1000Da的超滤膜将乳糖和盐类小分子从脱脂羊乳中分离出，然后调节超滤保留液的pH值。
所述步骤4)的离心采用7000-9000r/min离心20-30min。
本发明以羊乳为原料，GRAS微生物——益生乳杆菌的胞壁蛋白酶为生物催化剂，将羊乳中的蛋白质水解成具有降血压活性的寡肽，其可用于辅助降血压食品和保健食品的开发，与化学合成降压药相比，羊乳源降压肽具有天然、安全、无副作用等优点。
具体实施方式
以下为结合具体实施例对本发明做进一步详细说明。
实施例1：
1)益生乳杆菌增菌培养基制备：
将葡萄糖15g、酵母浸粉15g、硫酸锰0.02g、吐温80 1.0mL，拐枣多糖1.2g、菊糖1.0g、酪蛋白胨4g、磷酸氢二钠4g、亮氨酸15mg添加到纯净水中，定容至1L，再将其pH调至7.0，于121℃灭菌，即得益生乳杆菌增菌培养基；
2)益生乳杆菌培养及菌体收集：
将活化好的罗伊式乳杆菌按2％的接种量接入益生乳杆菌增菌培养基中，37℃恒温培养18h后离心，倒掉上清液，收集菌体沉淀，之后用无菌生理盐水洗涤后离心得到益生乳杆菌菌泥；
所述的离心是在4℃、6000r/min下离心15min；
3)益生乳杆菌胞壁蛋白酶制备：
按每g益生乳杆菌菌泥中添加20mL的pH＝7.0磷酸缓冲液(每升磷酸缓冲液中含180g氯化锂、0.2g溶菌酶和3000U变溶菌素)，在35℃保温1h后在4℃、4500r/min条件下离心20min所得上清液即为胞壁蛋白酶的酶液，采用1-3KDa超滤去除小分子物质，然后在保留液中添加CaCl2，控制CaCl2的浓度为10mM，冷冻干燥获得益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉；
4)羊乳源降压肽的制备：
将鲜羊奶经脱脂后通过截断分子量为1000Da的超滤膜将乳糖和盐类小分子从脱脂羊乳中分离出，然后调节超滤保留液的pH值至6.0，按质量体积比向其中加入1％的益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉和0.01％的CaCl2，于37℃下酶解4h后调节酶解液pH值至4.6，用7000r/min离心20min将上清液通过截断分子量为2000Da的中空纤维膜，收集透过液并将其经Bio-gel P2分离，收集主峰经冷冻干燥获得羊乳降压肽，其对ACE抑制的IC50值为0.2mg/mL，产量为0.50g/100g羊乳。
实施例2：
1)益生乳杆菌增菌培养基制备：
将葡萄糖20g、酵母浸粉20g、硫酸锰0.03g、吐温80 0.8mL，拐枣多糖1.5g、菊糖1.0g、酪蛋白胨5g、磷酸氢二钠5g、亮氨酸18mg添加到纯净水中，定容至1L，再将其pH调至6.5，于121℃灭菌，即得益生乳杆菌增菌培养基；
2)益生乳杆菌培养及菌体收集：
将活化好的保加利亚乳杆菌和鼠李糖乳杆菌按5％的接种量接入益生乳杆菌增菌培养基中，37℃恒温培养20h后离心，倒掉上清液，收集菌体沉淀，之后用无菌生理盐水洗涤后离心得到益生乳杆菌菌泥；
所述的离心是在6℃、7000r/min下离心25min；
3)益生乳杆菌胞壁蛋白酶制备：
按每g益生乳杆菌菌泥中添加25mL的pH＝7.0磷酸缓冲液(每升磷酸缓冲液中含200g氯化锂、0.4g溶菌酶和4000U变溶菌素)，在40℃保温1.5h后在6℃、5000r/min条件下离心25min所得上清液即为胞壁蛋白酶的酶液，采用1-3KDa超滤去除小分子物质，然后在保留液中添加CaCl2，控制CaCl2的浓度为12mM，冷冻干燥获得益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉；
4)羊乳源降压肽的制备：
将鲜羊奶经脱脂后通过截断分子量为1000Da的超滤膜将乳糖和盐类小分子从脱脂羊乳中分离出，然后调节超滤保留液的pH值至6.0，按质量体积比向其中加入3％的益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉和0.01％的CaCl2，于37℃下酶解4h后调节酶解液pH值至4.6，用9000r/min离心20min将上清液通过截断分子量为2000Da的中空纤维膜，收集透过液并将其经Bio-gel P2分离，收集主峰经冷冻干燥获得羊乳降压肽，其对ACE抑制的IC50值为0.16mg/mL，产量为0.60g/100g羊乳。
实施例3：
1)益生乳杆菌增菌培养基制备：
将葡萄糖18g、酵母浸粉25g、硫酸锰0.04g、吐温80 0.5mL，拐枣多糖1.3g、菊糖1.2g、酪蛋白胨4.5g、磷酸氢二钠6g、亮氨酸20mg添加到纯净水中，定容至1L，再将其pH调至5.5，于121℃灭菌，即得益生乳杆菌增菌培养基；
2)益生乳杆菌培养及菌体收集：
将活化好的保加利亚乳杆菌与罗伊式乳杆菌按3％的接种量接入益生乳杆菌增菌培养基中，35℃恒温培养24h后离心，倒掉上清液，收集菌体沉淀，之后用无菌生理盐水洗涤后离心得到益生乳杆菌菌泥；
所述的离心是在8℃、8000r/min下离心18min；
3)益生乳杆菌胞壁蛋白酶制备：
按每g益生乳杆菌菌泥中添加30mL的pH＝7.0磷酸缓冲液(每升磷酸缓冲液中含190g氯化锂、0.6g溶菌酶和5000U变溶菌素)，在45℃保温1h后在10℃、4000r/min条件下离心22min所得上清液即为胞壁蛋白酶的酶液，采用1-3KDa超滤去除小分子物质，然后在保留液中添加CaCl2，控制CaCl2的浓度为8mM，冷冻干燥获得益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉；
4)羊乳源降压肽的制备：
将鲜羊奶经脱脂后通过截断分子量为1000Da的超滤膜将乳糖和盐类小分子从脱脂羊乳中分离出，然后调节超滤保留液的pH值至7.0，按质量体积比向其中加入2％的益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉和0.04％的CaCl2，于35℃下酶解3h后调节酶解液pH值至4.6，用8000r/min离心25min将上清液通过截断分子量为2000Da的中空纤维膜，收集透过液并将其经Bio-gel P2分离，收集主峰经冷冻干燥获得羊乳降压肽，其对ACE抑制的IC50值为0.23mg/mL，产量为0.48g/100g羊乳。
实施例4：
1)益生乳杆菌增菌培养基制备：
将葡萄糖16g、酵母浸粉22g、硫酸锰0.05g、吐温80 0.9mL，拐枣多糖1.0g、菊糖1.5g、酪蛋白胨6g、磷酸氢二钠5.5g、亮氨酸16mg添加到纯净水中，定容至1L，再将其pH调至6.0，于121℃灭菌，即得益生乳杆菌增菌培养基；
2)益生乳杆菌培养及菌体收集：
将活化好的罗伊式乳杆菌、保加利亚乳杆菌和鼠李糖乳杆菌按4％的接种量接入益生乳杆菌增菌培养基中，41℃恒温培养22h后离心，倒掉上清液，收集菌体沉淀，之后用无菌生理盐水洗涤后离心得到益生乳杆菌菌泥；
所述的离心是在10℃、6500r/min下离心22min；
3)益生乳杆菌胞壁蛋白酶制备：
按每g益生乳杆菌菌泥中添加28mL的pH＝7.0磷酸缓冲液(每升磷酸缓冲液中含210g氯化锂、0.5g溶菌酶和4500U变溶菌素)，在38℃保温2h后在8℃、6000r/min条件下离心30min所得上清液即为胞壁蛋白酶的酶液，采用1-3KDa超滤去除小分子物质，然后在保留液中添加CaCl2，控制CaCl2的浓度为15mM，冷冻干燥获得益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉；
4)羊乳源降压肽的制备：
将鲜羊奶经脱脂后通过截断分子量为1000Da的超滤膜将乳糖和盐类小分子从脱脂羊乳中分离出，然后调节超滤保留液的pH值至8.0，按质量体积比向其中加入2.5％的益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉和0.03％的CaCl2，于45℃下酶解2h后调节酶解液pH值至4.6，用9000r/min离心30min将上清液通过截断分子量为2000Da的中空纤维膜，收集透过液并将其经Bio-gel P2分离，收集主峰经冷冻干燥获得羊乳降压肽，其对ACE抑制的IC50值为0.25mg/mL，产量为0.55g/100g羊乳。
以上实施例的拐枣多糖通过如下方法制备：取新鲜拐枣经洗净后进行打浆，然后加入20倍拐枣重量的水，搅拌均匀，于90℃条件下保温2h，然后抽滤获得拐枣多糖提取液，冷却至38℃后按质量体积比接入2％的保拉迪酵母活化液，37℃恒温培养24h除去拐枣中的单糖和双糖，离心收集保拉迪酵母菌体，将上清液用旋转蒸发仪浓缩至1/20，再按1:3的体积比加入无水乙醇，然后用布氏漏斗抽滤获得拐枣粗多糖，再将拐枣粗多糖复水加入氯仿和正丁醇除蛋白，然后取水相再次加入氯仿和正丁醇，三次脱蛋白后通过冷冻干燥获得拐枣多糖。
Claims (8)
1.一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法，其特征在于：
1)益生乳杆菌增菌培养基制备：
将葡萄糖15-20g、酵母浸粉15-25g、硫酸锰0.02-0.05g、吐温80 0.5-1.0mL，拐枣多糖1.0-1.5g、菊糖1.0-1.5g、酪蛋白胨4-6g、磷酸氢二钠4-6g、亮氨酸15-20mg添加到纯净水中，定容至1L，再将其pH调至5.5-7.0，于121℃灭菌，即得益生乳杆菌增菌培养基；
2)益生乳杆菌培养及菌体收集：
将益生乳杆菌按2％-5％的接种量接入益生乳杆菌增菌培养基中，35-41℃恒温培养18-24h后离心，倒掉上清液，收集菌体沉淀，之后用无菌生理盐水洗涤后离心得到益生乳杆菌菌泥；
3)益生乳杆菌胞壁蛋白酶制备：
按每g益生乳杆菌菌泥中添加20-30mL磷酸缓冲液，在35-45℃保温1-2h后离心所得上清液即为胞壁蛋白酶的酶液，采用1-3KDa超滤去除小分子物质，然后在保留液中添加CaCl2，控制CaCl2的浓度为8-15mM，冷冻干燥获得益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉；
4)羊乳源降压肽的制备：
将鲜羊奶经脱脂后调节pH值至6.0-8.0，按质量体积比向其中加入1-3％的益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉和0.01-0.04％的CaCl2，于35-45℃下酶解2-4h后调节酶解液pH值至4.6，离心将上清液通过截断分子量为2000Da的中空纤维膜，收集透过液并将其经Bio-gel P2分离，收集主峰经冷冻干燥获得羊乳降压肽，其对ACE抑制的IC50值为0.16-0.25mg/mL，产量为0.48-0.60g/100g羊乳。
2.根据权利要求1所述的利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法，其特征在于：所述步骤2)的益生乳杆菌采用保加利亚乳杆菌、罗伊式乳杆菌或鼠李糖乳杆菌中的一种或一种以上任意比例的混合物。
3.根据权利要求1所述的利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法，其特征在于：所述步骤2)的离心是在4-10℃、6000-8000r/min下离心15-25min。
4.根据权利要求1所述的利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法，其特征在于：所述步骤3)的磷酸缓冲液的pH＝7.0，每升磷酸缓冲液中含180-210g氯化锂、0.2-0.6g溶菌酶和3000-5000U变溶菌素。
5.根据权利要求1所述的利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法，其特征在于：所述步骤3)的离心是在4-10℃、4000-6000r/min条件下离心20-30min。
6.根据权利要求1所述的利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法，其特征在于：所述步骤4)脱脂后的鲜羊奶通过截断分子量为1000Da的超滤膜将乳糖和盐类小分子从脱脂羊乳中分离出，然后调节超滤保留液的pH值。
7.根据权利要求1所述的利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法，其特征在于：所述步骤4)的离心采用7000-9000r/min离心20-30min。
8.根据权利要求1所述的利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法，其特征在于：所述步骤4)的拐枣多糖制备过程为：
取新鲜拐枣经洗净后进行打浆，然后加入20倍拐枣重量的水，搅拌均匀，于90℃条件下保温2h，然后抽滤获得拐枣多糖提取液，冷却至38℃后按质量体积比接入2％的保拉迪酵母活化液，37℃恒温培养24h除去拐枣中的单糖和双糖，离心收集保拉迪酵母菌体，将上清液用旋转蒸发仪浓缩至1/20，再按1:3的体积比加入无水乙醇，然后用布氏漏斗抽滤获得拐枣粗多糖，再将拐枣粗多糖复水加入氯仿和正丁醇除蛋白，然后取水相再次加入氯仿和正丁醇，三次脱蛋白后通过冷冻干燥获得拐枣多糖。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710977650.5A CN107858388A (zh) | 2017-10-17 | 2017-10-17 | 一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710977650.5A CN107858388A (zh) | 2017-10-17 | 2017-10-17 | 一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107858388A true CN107858388A (zh) | 2018-03-30 |
Family
ID=61697338
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710977650.5A Pending CN107858388A (zh) | 2017-10-17 | 2017-10-17 | 一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107858388A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108611303A (zh) * | 2018-05-16 | 2018-10-02 | 陕西科技大学 | 一种除镉益生菌吸附剂的制备方法及其在蔬菜汁中的应用 |
| CN108651810A (zh) * | 2018-05-16 | 2018-10-16 | 陕西科技大学 | 一种益生菌吸附剂的制备方法及其在果汁中除镉的应用 |
Citations (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1685058A (zh) * | 2002-08-09 | 2005-10-19 | 科·汉森有限公司 | 制备具有抗高血压特性的肽的方法 |
| CN1802093A (zh) * | 2003-04-07 | 2006-07-12 | 科·汉森有限公司 | 具有心率降低特性的混合物 |
| CN101845080A (zh) * | 2010-01-08 | 2010-09-29 | 宁波大学 | 一种血管紧张素转化酶的抑制肽及其制备方法 |
| CN102002108A (zh) * | 2010-11-25 | 2011-04-06 | 南京泽朗医药科技有限公司 | 一种拐枣多糖的制备方法 |
| CN102477104A (zh) * | 2010-11-25 | 2012-05-30 | 苏州宝泽堂医药科技有限公司 | 拐枣多糖的分离纯化方法 |
| CN102948480A (zh) * | 2012-11-19 | 2013-03-06 | 陕西科技大学 | 一种基于保加利亚乳杆菌发酵的含ace抑制肽的羊乳饮料的制备方法 |
| CN102960444A (zh) * | 2012-11-19 | 2013-03-13 | 陕西科技大学 | 一种基于瑞士乳杆菌发酵的含ace抑制肽的羊奶的制备方法 |
| CN103215333A (zh) * | 2013-04-16 | 2013-07-24 | 陕西科技大学 | 一种酶解羊乳酪蛋白制备ace抑制肽的方法 |
| CN103211024A (zh) * | 2013-04-16 | 2013-07-24 | 陕西科技大学 | 一种含ace抑制肽羊乳饮料的制备方法 |
| CN103215331A (zh) * | 2013-04-16 | 2013-07-24 | 陕西科技大学 | 一种复合酶解羊乳酪蛋白制备ace抑制肽的方法 |
| CN103222505A (zh) * | 2013-04-24 | 2013-07-31 | 陕西科技大学 | 一种含ace抑制肽的植物乳杆菌发酵羊奶的制备方法 |
| CN103694371A (zh) * | 2014-01-10 | 2014-04-02 | 吉首大学 | 一种拐枣多糖的制备方法 |
| CN103923835A (zh) * | 2014-04-25 | 2014-07-16 | 陕西科技大学 | 一种保加利亚乳杆菌冻干菌粉制备方法 |
| CN106665858A (zh) * | 2016-12-30 | 2017-05-17 | 陕西师范大学 | 一种具有降血压功能的绿茶羊奶及其制备方法 |
| CN106892993A (zh) * | 2015-12-20 | 2017-06-27 | 张世禄 | 一种拐枣渣粗多糖的制备方法 |
-
2017
- 2017-10-17 CN CN201710977650.5A patent/CN107858388A/zh active Pending
Patent Citations (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1685058A (zh) * | 2002-08-09 | 2005-10-19 | 科·汉森有限公司 | 制备具有抗高血压特性的肽的方法 |
| CN1802093A (zh) * | 2003-04-07 | 2006-07-12 | 科·汉森有限公司 | 具有心率降低特性的混合物 |
| CN101845080A (zh) * | 2010-01-08 | 2010-09-29 | 宁波大学 | 一种血管紧张素转化酶的抑制肽及其制备方法 |
| CN102002108A (zh) * | 2010-11-25 | 2011-04-06 | 南京泽朗医药科技有限公司 | 一种拐枣多糖的制备方法 |
| CN102477104A (zh) * | 2010-11-25 | 2012-05-30 | 苏州宝泽堂医药科技有限公司 | 拐枣多糖的分离纯化方法 |
| CN102960444A (zh) * | 2012-11-19 | 2013-03-13 | 陕西科技大学 | 一种基于瑞士乳杆菌发酵的含ace抑制肽的羊奶的制备方法 |
| CN102948480A (zh) * | 2012-11-19 | 2013-03-06 | 陕西科技大学 | 一种基于保加利亚乳杆菌发酵的含ace抑制肽的羊乳饮料的制备方法 |
| CN103215333A (zh) * | 2013-04-16 | 2013-07-24 | 陕西科技大学 | 一种酶解羊乳酪蛋白制备ace抑制肽的方法 |
| CN103211024A (zh) * | 2013-04-16 | 2013-07-24 | 陕西科技大学 | 一种含ace抑制肽羊乳饮料的制备方法 |
| CN103215331A (zh) * | 2013-04-16 | 2013-07-24 | 陕西科技大学 | 一种复合酶解羊乳酪蛋白制备ace抑制肽的方法 |
| CN103222505A (zh) * | 2013-04-24 | 2013-07-31 | 陕西科技大学 | 一种含ace抑制肽的植物乳杆菌发酵羊奶的制备方法 |
| CN103694371A (zh) * | 2014-01-10 | 2014-04-02 | 吉首大学 | 一种拐枣多糖的制备方法 |
| CN103923835A (zh) * | 2014-04-25 | 2014-07-16 | 陕西科技大学 | 一种保加利亚乳杆菌冻干菌粉制备方法 |
| CN106892993A (zh) * | 2015-12-20 | 2017-06-27 | 张世禄 | 一种拐枣渣粗多糖的制备方法 |
| CN106665858A (zh) * | 2016-12-30 | 2017-05-17 | 陕西师范大学 | 一种具有降血压功能的绿茶羊奶及其制备方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| LEILA SADAT-MEKMENE等: "Original features of cell-envelope proteinases of Lactobacillus helveticus.A review", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF FOOD MICROBIOLOGY》 * |
| 任晓芬: "胞壁蛋白酶（CEP）酶解对酪蛋白结构及功能特性的影响", 《现代食品科技》 * |
| 温旺荣: "《临床分子诊断学 第2版》", 30 May 2015 * |
| 舒国伟: "羊乳源ACE抑制肽制备、分离纯化及鉴定", 《中国博士学位论文全文数据库（电子期刊）》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108611303A (zh) * | 2018-05-16 | 2018-10-02 | 陕西科技大学 | 一种除镉益生菌吸附剂的制备方法及其在蔬菜汁中的应用 |
| CN108651810A (zh) * | 2018-05-16 | 2018-10-16 | 陕西科技大学 | 一种益生菌吸附剂的制备方法及其在果汁中除镉的应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2276689C2 (ru) | Способ получения продукта, содержащего гипотензивные пептиды, продукт, полученный способом, и пищевой продукт | |
| CN103004984B (zh) | 一种植物乳杆菌发酵乳及其制备方法 | |
| CN108208853A (zh) | 一种解酒护肝益生菌低聚肽复合制剂及制备方法 | |
| CN102972522B (zh) | 益生菌牛乳及其制备方法 | |
| CN116024130B (zh) | 一株降血尿酸发酵乳杆菌a21215及其应用 | |
| CN107280014A (zh) | 一种能促进肠道动力的复合益生菌蛋白质粉 | |
| CN109287749B (zh) | 一种富含活性植物乳杆菌的双蛋白发酵乳及其制备方法 | |
| CN108782758A (zh) | 一种发酵型合生元羊奶粉及其制备方法 | |
| CN1960739A (zh) | 改善内源性褪黑素分泌规律用功能食品和改善昼夜节律用功能食品 | |
| CN103229831A (zh) | 一种含ace抑制肽的植物乳杆菌发酵的高钙酸羊奶的制备方法 | |
| CN109022323A (zh) | 一种瑞士乳杆菌复合剂及其制备方法和应用 | |
| CN107853396A (zh) | 一种鼠李糖乳杆菌蛋白酶制备羊乳活性饮料的方法 | |
| CN107858388A (zh) | 一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法 | |
| CN104585825A (zh) | 一种山药发酵制品及其制备方法 | |
| CN108935704A (zh) | 一种益生菌羊奶粉及其制备方法 | |
| CN114214230B (zh) | 一株具有共聚幽门螺杆菌能力的北酸乳杆菌及其应用 | |
| CN116200290A (zh) | 一种具有抑制结直肠癌细胞增殖的副干酪乳酪杆菌及其应用 | |
| CN103222505A (zh) | 一种含ace抑制肽的植物乳杆菌发酵羊奶的制备方法 | |
| CN103141575A (zh) | 一种富含血管紧张素转化酶抑制肽山楂酸乳的制备方法 | |
| CN112029676B (zh) | 一种有利于提高免疫力的益生菌组合及其应用 | |
| CN102960444A (zh) | 一种基于瑞士乳杆菌发酵的含ace抑制肽的羊奶的制备方法 | |
| CN1903052A (zh) | 具有酪蛋白磷酸肽、抗血管紧张素转化酶肽和低聚半乳糖乳清粉的制备方法 | |
| CN106497847A (zh) | 一种鼠李糖乳杆菌冻干粉及其制备方法 | |
| WO2023056736A1 (zh) | 一种富含蜜柚纤维的低乳糖乳制品的制备方法 | |
| CN111165750A (zh) | 一种利用发酵技术制备海参花粉剂的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20180330 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |