CN107383130A - 一种利用扁桃叶制备芒果甙的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种利用扁桃叶制备芒果甙的方法，属于扁桃叶提取有效成份的技术领域，所述芒果甙是经过粉碎、微波提取、一次脱色、粗结晶、二次脱色、大孔吸附树脂分离提纯、浓缩结晶、干燥等步骤制成的。本发明的方法制得的纯度在98.76％以上，均高于现有技术制得的芒果甙的纯度，且能作为定性、定量的对照品；同时有效解决了现有技术采用调碱工序，操作工艺复杂，除杂过程各式各样，导致芒果甙杂质多，产品纯度低，达不到作为定性、定量的对照品要求的实际问题。

Description

一种利用扁桃叶制备芒果甙的方法
【技术领域】
本发明属于扁桃叶提取有效成份的技术领域，具体涉及一种利用扁桃叶制备芒果甙的方法。
【背景技术】
芒果甙(苷)(mangiferin，I)，又名芒果素、知母宁，是一种四羟基吡啶的碳糖甙，属双苯吡酮类化合物。芒果甙可从漆树科芒果树和扁桃树的叶、果实、树皮及百合、知母、东北龙胆、獐芽菜、水龙骨科植物光石韦、元宝草(Hypericum sampsonii Hance)等中提取得到。
现代药理和临床研究证明，芒果甙有多方面的生理活性和药理作用，如抗肿瘤作用、抗脂质过氧化作用、免疫调节、抗糖尿病、消炎、止痛、抗病毒、抗辐射等，目前国内外对芒果甙进了很多的研究，尤其是广西中医学院多年来对从扁桃叶提取芒果甙并进行了多种药理和药效学的试验，取得了很多成果，因为随着人们生活的普遍提高，人们认识到扁桃是味道鲜美、营养丰富的热带水果，扁桃叶性味酸、甘、凉，平，具有行气疏滞，去癌积、清热解毒、消肿止痛、退湿的功能，用于感冒发烧，咽喉肿痛、风湿等症，从扁桃叶中提取的芒果甙具有抗菌、抗病毒、祛痰、镇咳等作用。目前扁桃栽种面积很多，以广西为例，扁桃树种植面积超过5万公顷，扁桃叶的数量也很多，每年修枝和果树淘汰所产生的叶子有上千万吨。因此广西的医药部门对扁桃叶提取芒果甙及其应用研究得最多。
如中国专利：ZL200510093658.2的《一种提取芒果甙的方法》它是一种以芒果叶、扁桃叶或含有芒果甙的植物为原料，以水或低碳醇如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇等作为溶媒；提取的方法采用水或低碳醇加热提取，也可以用微波提取、或者微波提取；分离纯化采用柱层析分离纯化，获得重量含量为60％以上芒果甙产品；中国专利：200710066354.6的《提取芒果甙的一种方法》，该方法以芒果叶或扁桃叶为原料，采用高温、高压方法，以水或醇-水混合液为溶媒提取芒果甙，该方法能充分提取芒果叶或扁桃叶中的芒果甙，工艺简单，节约能源和时间，易于实现工业化生产；中国专利：200610079234.5《高纯度芒果甙的制备方法》公开了一种制备高纯度芒果甙的方法，该方法以芒果叶或扁桃叶为原料，使用的提取和精制溶剂均以醇-水混合溶液，其中的醇，可以是甲醇也可以是乙醇，芒果叶或扁桃叶原料经浸泡、回流提取、常温常压渗施等方法，之后用树脂脱色、精制获得纯度＞90％的芒果甙成品。
目前芒果甙提取方法存在的问题是：采用调碱工序，操作工艺复杂，除杂过程各式各样，导致芒果甙杂质多，产品纯度低，达不到作为定性、定量的对照品要求。
【发明内容】
本发明提供的一种利用扁桃叶制备芒果甙的方法，以解决从扁桃叶中提取纯化芒果甙纯度较低，达不到作为定性、定量的对照品要求的问题。
为解决以上技术问题，本发明采用以下技术工艺：
一种利用扁桃叶制备芒果甙的方法，包括以下步骤：
S1：将扁桃叶进行粉碎并过筛子，制得扁桃叶粉末；
S2：向步骤S1制得的扁桃叶粉末中加入质量比为6-10:1的乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸盐，在水浴条件下微波回流提取2-3次，每次微波的频率为450-550W，温度为45-52℃，时间为12-20min，提取完全后合并提取液，调节提取液的pH值至4.2-4.6，温度控制为40-52℃，通过活性炭脱色除杂，过滤后制得一次脱色液；
S3：将步骤S2制得的一次脱色液浓缩干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏4.8-6倍体积的50-55℃的水进行溶解，采用无水乙酸乙酯溶剂进行萃取2-3次，继续用无水乙酸乙酯进行2-3次结晶处理，结晶过程中固液比为1:4-5.2(W/V)，制得结晶粗品；
S4：将步骤S3制得的粗晶经75％-80％的乙醇溶解，调节溶液的pH值至4.5-5，温度控制为44-50℃，通过活性炭脱色除杂，过滤后制得二次脱色液；
S5：将步骤S4制得的二次脱色液浓缩至每毫升中含芒果甙6％-22％，采用大孔吸附树脂分离提纯制得芒果甙的液体，条件为：解析剂为52％-73％的乙醇溶液，其用量是大孔吸附树脂体积的2-3.6倍，水洗区为去离子水，大孔吸附树脂吸附再生溶剂为3.2％-5％的NaOH溶液，吸附区流速8-10BV/h，解吸区流速16-20BV/h，水洗区流速22-26BV/h，再生区流速6-9BV/h，切换时间为700-750s，温度为45-52℃，压力为0.6-0.8MPa；
S6：将步骤S5制得的芒果甙液体进行浓缩后结晶，所得晶体在温度为42-44℃下真空干燥，制得芒果甙。
进一步地，步骤S1中所述筛子的目数为40-70。
进一步地，步骤S2中所述扁桃叶粉末与乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸盐的总重量比为1:4-6。
进一步地，所述乙醇的体积分数为65％-72％。
进一步地，步骤S2中所述通过活性炭脱色除杂的时间为0.7-1.2h。
进一步地，步骤S4中所述通过活性炭脱色除杂的时间为0.5-0.9h。
进一步地，步骤S5中所述大孔吸附树脂为AD-8型大孔吸附树脂。
进一步地，步骤S6中所述浓缩为真空减压浓缩。
进一步地，步骤S6中所述结晶是在温度为3-7℃下进行的。
进一步地，步骤S6中所述晶体在温度为42-44℃下真空干燥至含水率≤0.7％。
本发明具有以下有益效果：
(1)本发明的方法制得的纯度在98.76％以上，均高于现有技术制得的芒果甙的纯度，且能作为定性、定量的对照品；
(2)有效解决了现有技术采用调碱工序，操作工艺复杂，除杂过程各式各样，导致芒果甙杂质多，产品纯度低，达不到作为定性、定量的对照品要求的实际问题。
【具体实施方式】
为便于更好地理解本发明，通过以下实施例加以说明，这些实施例属于本发明的保护范围，但不限制本发明的保护范围。
在实施例中，所述利用扁桃叶制备芒果甙的方法，包括以下步骤：
S1：将扁桃叶进行粉碎并过40-70目筛子，制得扁桃叶粉末；
S2：向步骤S1制得的扁桃叶粉末中加入质量比为6-10:1的65％-72％乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸盐，其中扁桃叶粉末与乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸盐的总重量比为1:4-6，在水浴条件下微波回流提取2-3次，每次微波的频率为450-550W，温度为45-52℃，时间为18-25min，提取完全后合并提取液，调节提取液的pH值至4.2-4.6，温度控制为40-52℃，通过活性炭脱色除杂0.7-1.2h，过滤后制得一次脱色液；
S3：将步骤S2制得的一次脱色液浓缩干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏4.8-6倍体积的50-55℃的水进行溶解，采用无水乙酸乙酯溶剂进行萃取2-3次，继续用无水乙酸乙酯进行2-3次结晶处理，结晶过程中固液比为1:4-5.2(W/V)，制得结晶粗品；
S4：将步骤S3制得的粗晶经75％-80％的乙醇溶解，调节溶液的pH值至4.5-5，温度控制为44-50℃，通过活性炭脱色除杂0.5-0.9h，过滤后制得二次脱色液；
S5：将步骤S4制得的二次脱色液浓缩至每毫升中含芒果甙6％-22％，采用AD-8型大孔吸附树脂分离提纯制得芒果甙的液体，条件为：解析剂为52％-73％的乙醇溶液，其用量是大孔吸附树脂体积的2-3.6倍，水洗区为去离子水，大孔吸附树脂吸附再生溶剂为3.2％-5％的NaOH溶液，吸附区流速8-10BV/h，解吸区流速16-20BV/h，水洗区流速22-26BV/h，再生区流速6-9BV/h，切换时间为700-750s，温度为45-52℃，压力为0.6-0.8MPa；
S6：将步骤S5制得的芒果甙液体进行真空减压浓缩后，在温度为3-7℃下结晶，所得晶体在温度为42-44℃下真空干燥至含水率≤0.7％，制得芒果甙。
实施例1
一种利用扁桃叶制备芒果甙的方法，包括以下步骤：
S1：将扁桃叶进行粉碎并过60目筛子，制得扁桃叶粉末；
S2：向步骤S1制得的扁桃叶粉末中加入质量比为8:1的68％乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸盐，其中扁桃叶粉末与乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸盐的总重量比为1:5，在水浴条件下微波回流提取2次，每次微波的频率为500W，温度为50℃，时间为22min，提取完全后合并提取液，调节提取液的pH值至4.5，温度控制为46℃，通过活性炭脱色除杂1h，过滤后制得一次脱色液；
S3：将步骤S2制得的一次脱色液浓缩干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5.5倍体积的53℃的水进行溶解，采用无水乙酸乙酯溶剂进行萃取2次，继续用无水乙酸乙酯进行2次结晶处理，结晶过程中固液比为1:4.5(W/V)，制得结晶粗品；
S4：将步骤S3制得的粗晶经78％的乙醇溶解，调节溶液的pH值至4.8，温度控制为48℃，通过活性炭脱色除杂0.8h，过滤后制得二次脱色液；
S5：将步骤S4制得的二次脱色液浓缩至每毫升中含芒果甙15％，采用AD-8型大孔吸附树脂分离提纯制得芒果甙的液体，条件为：解析剂为62％的乙醇溶液，其用量是大孔吸附树脂体积的2.8倍，水洗区为去离子水，大孔吸附树脂吸附再生溶剂为4.2％的NaOH溶液，吸附区流速9BV/h，解吸区流速18BV/h，水洗区流速25BV/h，再生区流速8BV/h，切换时间为720s，温度为48℃，压力为0.7MPa；
S6：将步骤S5制得的芒果甙液体进行真空减压浓缩后，在温度为5℃下结晶，所得晶体在温度为43℃下真空干燥至含水率为0.7％，制得芒果甙。
实施例2
一种利用扁桃叶制备芒果甙的方法，包括以下步骤：
S1：将扁桃叶进行粉碎并过40目筛子，制得扁桃叶粉末；
S2：向步骤S1制得的扁桃叶粉末中加入质量比为6:1的65％乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸盐，其中扁桃叶粉末与乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸盐的总重量比为1:4，在水浴条件下微波回流提取3次，每次微波的频率为450W，温度为45℃，时间为25min，提取完全后合并提取液，调节提取液的pH值至4.2，温度控制为40℃，通过活性炭脱色除杂1.2h，过滤后制得一次脱色液；
S3：将步骤S2制得的一次脱色液浓缩干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏4.8倍体积的50℃的水进行溶解，采用无水乙酸乙酯溶剂进行萃取3次，继续用无水乙酸乙酯进行3次结晶处理，结晶过程中固液比为1:4(W/V)，制得结晶粗品；
S4：将步骤S3制得的粗晶经75％-80％的乙醇溶解，调节溶液的pH值至4.5，温度控制为45℃，通过活性炭脱色除杂0.9h，过滤后制得二次脱色液；
S5：将步骤S4制得的二次脱色液浓缩至每毫升中含芒果甙6％，采用AD-8型大孔吸附树脂分离提纯制得芒果甙的液体，条件为：解析剂为52％的乙醇溶液，其用量是大孔吸附树脂体积的2倍，水洗区为去离子水，大孔吸附树脂吸附再生溶剂为3.2％的NaOH溶液，吸附区流速8BV/h，解吸区流速16BV/h，水洗区流速22BV/h，再生区流速6BV/h，切换时间为750s，温度为45℃，压力为0.6MPa；
S6：将步骤S5制得的芒果甙液体进行真空减压浓缩后，在温度为3℃下结晶，所得晶体在温度为42℃下真空干燥至含水率为0.6％，制得芒果甙。
实施例3
一种利用扁桃叶制备芒果甙的方法，包括以下步骤：
S1：将扁桃叶进行粉碎并过70目筛子，制得扁桃叶粉末；
S2：向步骤S1制得的扁桃叶粉末中加入质量比为10:1的72％乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸盐，其中扁桃叶粉末与乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸盐的总重量比为1:6，在水浴条件下微波回流提取2次，每次微波的频率为550W，温度为52℃，时间为18min，提取完全后合并提取液，调节提取液的pH值至4.6，温度控制为52℃，通过活性炭脱色除杂0.7h，过滤后制得一次脱色液；
S3：将步骤S2制得的一次脱色液浓缩干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏6倍体积的55℃的水进行溶解，采用无水乙酸乙酯溶剂进行萃取2次，继续用无水乙酸乙酯进行2次结晶处理，结晶过程中固液比为1:5.2(W/V)，制得结晶粗品；
S4：将步骤S3制得的粗晶经80％的乙醇溶解，调节溶液的pH值至5，温度控制为50℃，通过活性炭脱色除杂0.5h，过滤后制得二次脱色液；
S5：将步骤S4制得的二次脱色液浓缩至每毫升中含芒果甙22％，采用AD-8型大孔吸附树脂分离提纯制得芒果甙的液体，条件为：解析剂为73％的乙醇溶液，其用量是大孔吸附树脂体积的3.6倍，水洗区为去离子水，大孔吸附树脂吸附再生溶剂为5％的NaOH溶液，吸附区流速10BV/h，解吸区流速20BV/h，水洗区流速26BV/h，再生区流速9BV/h，切换时间为700s，温度为52℃，压力为0.8MPa；
S6：将步骤S5制得的芒果甙液体进行真空减压浓缩后，在温度为7℃下结晶，所得晶体在温度为44℃下真空干燥至含水率为0.6％，制得芒果甙。
对比例1
采用“一种芒果苷的制备方法(授权公告号：CN 101973985B)”的实施例2、3的方法制备芒果甙。
对实施例1-3和对比例1制得的芒果甙的纯度进行检测，结果如下表所示。
实验项目 纯度(％)
实施例1 99.23
实施例2 98.76
实施例3 99.05
对比例1 ≤96
由以上表可知，本发明的方法制得的纯度在98.76％以上，均高于现有技术制得的芒果甙的纯度，且能作为定性、定量的对照品。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明，对于所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明由所提交的权利要求书确定的专利保护范围。

Claims (10)

1.一种利用扁桃叶制备芒果甙的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：将扁桃叶进行粉碎并过筛子，制得扁桃叶粉末；
S2：向步骤S1制得的扁桃叶粉末中加入质量比为6-10:1的乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸盐，在水浴条件下微波回流提取2-3次，每次微波的频率为450-550W，温度为45-52℃，时间为12-20min，提取完全后合并提取液，调节提取液的pH值至4.2-4.6，温度控制为40-52℃，通过活性炭脱色除杂，过滤后制得一次脱色液；
S3：将步骤S2制得的一次脱色液浓缩干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏4.8-6倍体积的50-55℃的水进行溶解，采用无水乙酸乙酯溶剂进行萃取2-3次，继续用无水乙酸乙酯进行2-3次结晶处理，结晶过程中固液比为1:4-5.2(W/V)，制得结晶粗品；
S4：将步骤S3制得的粗晶经75％-80％的乙醇溶解，调节溶液的pH值至4.5-5，温度控制为44-50℃，通过活性炭脱色除杂，过滤后制得二次脱色液；
S5：将步骤S4制得的二次脱色液浓缩至每毫升中含芒果甙6％-22％，采用大孔吸附树脂分离提纯制得芒果甙的液体，条件为：解析剂为52％-73％的乙醇溶液，其用量是大孔吸附树脂体积的2-3.6倍，水洗区为去离子水，大孔吸附树脂吸附再生溶剂为3.2％-5％的NaOH溶液，吸附区流速8-10BV/h，解吸区流速16-20BV/h，水洗区流速22-26BV/h，再生区流速6-9BV/h，切换时间为700-750s，温度为45-52℃，压力为0.6-0.8MPa；
S6：将步骤S5制得的芒果甙液体进行浓缩后结晶，所得晶体在温度为42-44℃下真空干燥，制得芒果甙。
2.根据权利要求1所述的利用扁桃叶制备芒果甙的方法，其特征在于：步骤S1中所述筛子的目数为40-70。
3.根据权利要求1所述的利用扁桃叶制备芒果甙的方法，其特征在于：步骤S2中所述扁桃叶粉末与乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸盐的总重量比为1:4-6。
4.根据权利要求3所述的利用扁桃叶制备芒果甙的方法，其特征在于：所述乙醇的体积分数为65％-72％。
5.根据权利要求1所述的利用扁桃叶制备芒果甙的方法，其特征在于：步骤S2中所述通过活性炭脱色除杂的时间为0.7-1.2h。
6.根据权利要求1所述的利用扁桃叶制备芒果甙的方法，其特征在于：步骤S4中所述通过活性炭脱色除杂的时间为0.5-0.9h。
7.根据权利要求1所述的利用扁桃叶制备芒果甙的方法，其特征在于：步骤S5中所述大孔吸附树脂为AD-8型大孔吸附树脂。
8.根据权利要求1所述的利用扁桃叶制备芒果甙的方法，其特征在于：步骤S6中所述浓缩为真空减压浓缩。
9.根据权利要求1所述的利用扁桃叶制备芒果甙的方法，其特征在于：步骤S6中所述结晶是在温度为3-7℃下进行的。
10.根据权利要求1所述的利用扁桃叶制备芒果甙的方法，其特征在于：步骤S6中所述晶体在温度为42-44℃下真空干燥至含水率≤0.7％。
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