CN108250052A - 从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法，包括：1)提取，以龙眼或荔枝为原料，在40～65℃下，以甲醇为提取液提取得到液体A；2)脱色，在液体A中加入活性炭或骨炭脱色，得到液体B；3)纯化，取预处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，加入液体B吸附得到液体C；4)浓缩，在≤80℃下，将液体C进行减压浓缩滤液得到液体D；5)结晶，将液体D在0～10℃下，低温结晶，即得到所述白坚木皮醇。本发明的原料主要来源于龙眼或荔枝整株植物的各个部位。相对于现有技术，本发明是一种很好的农残开发利用方法，不仅原料价廉易得，工艺简单可靠，而且在保证纯度高的同时提取率有了较大的提升。

Description

从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法

技术领域

本发明属于天然化合物的分离提取技术领域，具体涉及一种从无患子科植物龙眼或荔枝中提取白坚木皮醇的方法。

背景技术

白坚木皮醇最早由Tanret从南美居民用来治病的白坚木的树皮浸提取液中分离出来，后来PICKLES和WHITFIELD发现在橡胶种子里叶有该物质。目前已成功利用巴西橡胶胶乳提取具有旋光性的天然产物白坚木皮醇为植物药物原料，供制药工业简单而方便地合成无毒、无害而有特效的手性药物，用于治疗癌症、早老期痴呆症、糖尿病和艾滋病等疾病。但天然胶乳乳清成分复杂，干扰物质较多，尤其是甲氧基右旋肌醇、甲氧基外消旋肌醇、双甲氧基外消旋肌醇和外消旋肌醇等异构体，对白坚木皮醇的分离纯化产生很大阻碍。

龙眼和荔枝同属无患子科，是我国著名的南亚热带果树。荔枝具有行血散结、祛寒止痛功效。我国是龙眼、荔枝的高产国，2016年荔枝种植面积813万亩、总产量230万吨，龙眼种植面积565万亩、总产量191万吨，均位居世界第一。王慧聪等在荔枝和龙眼的枝叶、果皮、种子等栽培和加工废弃物中，分离得到白坚木皮醇，为优化白坚木皮醇的提取分离工艺奠定了基础。

申请号为2011100383490的中国专利公开了一种从无患子科植物荔枝或龙眼中提取白坚木皮醇的方法。该方法包括热乙醇回流提取、孔吸附树脂分离纯化、活性炭脱色和结晶步骤，工艺流程复杂，且还存在提取率较低的缺点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法。该方法原料的来源包括荔枝或龙眼整株植物的各个部位，不仅廉价易得，步骤简单，而且能够在保证高纯度的同时达到较高的提取率。

本发明所述的方法利用热甲醇回流提取，氯仿去杂，活性炭脱色，孔吸附树脂分离纯化，浓缩，在低温下重结晶，得到高纯度的晶体。

换言之，本发明公开了一种从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法，其中，包括以下步骤：

1)提取，以龙眼或荔枝为原料，在40～65℃下，以甲醇为提取液提取得到液体A；

2)脱色，在所得的液体A中加入活性炭或骨炭脱色，过滤，得到液体B；

3)纯化，取HPD500大孔树脂，湿法装柱后，加入所述液体B吸附纯化得到液体C；

4)浓缩，在≤80℃下，将所述液体C进行减压浓缩滤液得到液体D；

5)结晶，将所得的液体D在0～10℃下，低温结晶，即得到所述白坚木皮醇。

优选的是，所述HPD500大孔树脂经过以下处理：

1)取HPD500大孔树脂用去离子水漂洗5次，置于容器中，加入95％乙醇浸泡24h；

2)取出上述浸泡后的HPD500大孔树脂，用95％乙醇淋洗至流出乙醇且加水不显浊，再用大量水清洗至流出液无醇味；

3)加入2～4倍HPD500大孔树脂体积的3～5％的盐酸溶液通柱，再用水洗至接近中性；

4)加入2～4倍HPD500大孔树脂体积的3～5％的氢氧化钠酸溶液通柱，最后用大量水洗至中性即可。

优选的是，所述原料粉碎至小于60目的粉末。

优选的是，所述提取步骤中，甲醇与所述原料的比重为6～3:1。

优选的是，所述脱色步骤中，活性炭或骨炭的用量比例为提取过程中溶液总重的5～10％。

优选的是，所述纯化步骤中，设定在80℃条件下吸附120min。

优选的是，所述纯化步骤中，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述液体B进行吸附，待上样液面刚好与填料表面齐平时，加入乙醇洗脱；其中，所述乙醇的浓度为60～90％，用量为60ml。

优选的是，所述纯化步骤中，所述大孔树脂与原料质量比为1:10。

优选的是，所述浓缩步骤还包括：将所述液体C减压旋转蒸发浓缩成粗提物浸膏，加入蒸馏水充分混匀得到粗提物浸膏水溶液，再加入氯仿或乙酸乙酯于分液漏斗充分混匀，经过80℃水浴，充分混合，最后再次减压旋转蒸发浓缩得到所述液体D。

优选的是，所述氯仿与所述粗提物浸膏水溶液的体积比是5～2:1。

本发明的优点：

1)原料来源广，成本低廉。使用本方法提取白坚木皮醇，可用到荔枝或龙眼整株植物的各个部位，即可以利用脱落的树叶或修剪产生的废弃枝干等，物尽其用，大大地降低了生产成本。

2)纯度高。首先用甲醇溶液提取可减少水溶性杂的溶出；提取后先用活性炭或骨炭进行脱色，充分的利用了活性炭在有机溶剂中较在水中的脱色效果好的优点；再者大孔树脂HPD500的孔径很接近白坚木皮醇的分子直径，且在7种大孔吸附树脂中比表面积最大，故吸附率最高，与普通层析硅胶相比吸附、解吸效果较好，与氨基键合硅胶相比性能略差，但考虑到二者在实际应用时的生产成本，HPD500却要经济实用不少；因此采用本方法提取白坚木皮醇不仅保证了生产成本，更是保证了提取的纯度。

3)提取率高。采用本方法提取白坚木皮醇，首先将原料粉碎至60目，使得原料在提取液中溶解得更加充分，回流产生的杂质也会相对的减少，再通过活性炭的脱色，进一步去除杂质，保证了通过大孔树脂HPD500吸附的溶液中白坚木皮醇的浓度较高，从而增大了大孔树脂HPD500吸附量；再者，控制吸附时间利用了大孔树脂HPD500在吸附过程中起始速率较快，后趋于平缓的性质，保证最终的提取率大于73.6％的同时不影响效率。

4)工艺路线简单，利于产业化。本发明重在提升白坚木皮醇的提取率，同时保证白坚木皮醇的纯度，相对于现有技术中提取的工艺路线不仅操作简单，所使用的原料、试剂等都是廉价易得的，在成倍量增加提取量用于工业时也可以方便操作。

具体实施方式

下面对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

实施例1

取10g HPD500大孔树脂用去离子水漂洗5次，置于容器中，加入95％乙醇浸泡24h；取出上述浸泡后的HPD500大孔树脂，用95％乙醇淋洗至流出乙醇且加水不显浊，再用大量水清洗至流出液无醇味；加入20ml 3％的盐酸溶液通柱，再用水洗至接近中性；再加入20ml3％的氢氧化钠酸溶液通柱，最后用大量水洗至中性备用。

将荔枝叶片粉碎至小于60目粉末，取100g粉末加入甲醇300ml,每次加100ml，分3次加，在50℃条件下，回流提取各1小时，过滤后合并滤液；加入15g活性炭或骨炭，在50℃条件下回流1小时后再过滤；在50℃条件下，将吸附后的滤液减压旋转蒸发浓缩成粗提物浸膏，加入100ml蒸馏水充分混匀后加入200ml氯仿于分液漏斗，充分混匀，经过80℃水浴，充分混合，在60℃条件下，再次减压旋转蒸发浓缩成至20ml左右；取10g经过处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，在80℃条件下吸附120min；待上样液面刚好与填料表面齐平时，加入60ml的60％乙醇洗脱。

在0℃条件下，低温结晶，然后在80℃条件下干燥，即得白坚木皮醇。

实施例2

取10g HPD500大孔树脂用去离子水漂洗5次，置于容器中，加入95％乙醇浸泡24h；取出上述浸泡后的HPD500大孔树脂，用95％乙醇淋洗至流出乙醇且加水不显浊，再用大量水清洗至流出液无醇味；加入20ml 3％的盐酸溶液通柱，再用水洗至接近中性；再加入20ml3％的氢氧化钠酸溶液通柱，最后用大量水洗至中性备用。

将龙眼枝干粉碎至小于60目粉末，取100g粉末加入甲醇300ml，每次加100ml，分3次加，在50℃条件下，回流提取各1小时，过滤后合并滤液；加入15g活性炭或骨炭，在50℃条件下回流1小时后再过滤；在50℃条件下，将吸附后的滤液减压旋转蒸发浓缩成粗提物浸膏，加入100ml蒸馏水充分混匀后加入200ml氯仿于分液漏斗，充分混匀，经过80℃水浴，充分混合，在60℃条件下，再次减压旋转蒸发浓缩成至20ml左右；取10g经过处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，在80℃条件下吸附120min；待上样液面刚好与填料表面齐平时，加入60ml的60％乙醇洗脱。

在0℃条件下，低温结晶，然后在80℃条件下干燥，即得白坚木皮醇。

实施例3

取10g HPD500大孔树脂用去离子水漂洗5次，置于容器中，加入95％乙醇浸泡24h；取出上述浸泡后的HPD500大孔树脂，用95％乙醇淋洗至流出乙醇且加水不显浊，再用大量水清洗至流出液无醇味；加入20ml 3％的盐酸溶液通柱，再用水洗至接近中性；再加入20ml3％的氢氧化钠酸溶液通柱，最后用大量水洗至中性备用。

将荔枝叶片粉碎至小于60目粉末，取100g粉末加入甲醇600ml，每次加100ml，分3次加，在50℃条件下，回流提取各1小时，过滤后合并滤液；加入15g活性炭或骨炭，在50℃条件下回流1小时后再过滤；在50℃条件下，将吸附后的滤液减压旋转蒸发浓缩成粗提物浸膏，加入100ml蒸馏水充分混匀后加入200ml氯仿于分液漏斗，充分混匀，经过80℃水浴，充分混合，在60℃条件下，再次减压旋转蒸发浓缩成至20ml左右；取10g经过处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，在80℃条件下吸附120min；待上样液面刚好与填料表面齐平时，加入60ml的60％乙醇洗脱。

在0℃条件下，低温结晶，然后在80℃条件下干燥，即得白坚木皮醇。

实施例4

取10g HPD500大孔树脂用去离子水漂洗5次，置于容器中，加入95％乙醇浸泡24h；取出上述浸泡后的HPD500大孔树脂，用95％乙醇淋洗至流出乙醇且加水不显浊，再用大量水清洗至流出液无醇味；加入20ml 3％的盐酸溶液通柱，再用水洗至接近中性；再加入20ml3％的氢氧化钠酸溶液通柱，最后用大量水洗至中性备用。

将龙眼叶片粉碎至小于60目粉末，取100g粉末加入甲醇400ml，每次100ml，分3次加，在50℃条件下，回流提取各1小时，过滤后合并滤液；加入15g活性炭或骨炭，在50℃条件下回流1小时后再过滤；在50℃条件下，将吸附后的滤液减压旋转蒸发浓缩成粗提物浸膏，加入100ml蒸馏水充分混匀后加入200ml氯仿于分液漏斗，充分混匀，经过80℃水浴，充分混合，在60℃条件下，再次减压旋转蒸发浓缩成至20ml左右；取10g经过处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，在80℃条件下吸附120min；待上样液面刚好与填料表面齐平时，加入60ml的60％乙醇洗脱。

在0℃条件下，低温结晶，然后在80℃条件下干燥，即得白坚木皮醇。

实施例5

取10g HPD500大孔树脂用去离子水漂洗5次，置于容器中，加入95％乙醇浸泡24h；取出上述浸泡后的HPD500大孔树脂，用95％乙醇淋洗至流出乙醇且加水不显浊，再用大量水清洗至流出液无醇味；加入20ml 3％的盐酸溶液通柱，再用水洗至接近中性；再加入20ml3％的氢氧化钠酸溶液通柱，最后用大量水洗至中性备用。

将龙眼叶片粉碎至小于60目粉末，取100g粉末加入甲醇300ml，每次加100ml，分3次加，在50℃条件下，回流提取各1小时，过滤后合并滤液；加入30g活性炭或骨炭，在50℃条件下回流1小时后再过滤；在50℃条件下，将吸附后的滤液减压旋转蒸发浓缩成粗提物浸膏，加入100ml蒸馏水充分混匀后加入200ml氯仿于分液漏斗，充分混匀，经过80℃水浴，充分混合，在60℃条件下，再次减压旋转蒸发浓缩成至20ml左右；取10g经过处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，在80℃条件下吸附120min；待上样液面刚好与填料表面齐平时，加入60ml的60％乙醇洗脱。

在0℃条件下，低温结晶，然后在80℃条件下干燥，即得白坚木皮醇。

实施例6

取10g HPD500大孔树脂用去离子水漂洗5次，置于容器中，加入95％乙醇浸泡24h；取出上述浸泡后的HPD500大孔树脂，用95％乙醇淋洗至流出乙醇且加水不显浊，再用大量水清洗至流出液无醇味；加入20ml 3％的盐酸溶液通柱，再用水洗至接近中性；再加入20ml3％的氢氧化钠酸溶液通柱，最后用大量水洗至中性备用。

将龙眼叶片粉碎至小于60目粉末，取100g粉末加入甲醇300ml，每次加100ml，分3次加，在50℃条件下，回流提取各1小时，过滤后合并滤液；加入15g活性炭或骨炭，在50℃条件下回流1小时后再过滤；在50℃条件下，将吸附后的滤液减压旋转蒸发浓缩成粗提物浸膏，加入100ml蒸馏水充分混匀后加入200ml氯仿于分液漏斗，充分混匀，经过80℃水浴，充分混合，在60℃条件下，再次减压旋转蒸发浓缩成至20ml左右；取10g经过处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，在80℃条件下吸附120min；待上样液面刚好与填料表面齐平时，加入60ml的90％乙醇洗脱。

在0℃条件下，低温结晶，然后在80℃条件下干燥，即得白坚木皮醇。

实施例7

取10g HPD500大孔树脂用去离子水漂洗5次，置于容器中，加入95％乙醇浸泡24h；取出上述浸泡后的HPD500大孔树脂，用95％乙醇淋洗至流出乙醇且加水不显浊，再用大量水清洗至流出液无醇味；加入20ml 3％的盐酸溶液通柱，再用水洗至接近中性；再加入20ml3％的氢氧化钠酸溶液通柱，最后用大量水洗至中性备用。

将龙眼叶片粉碎至小于60目粉末，取100g粉末加入甲醇300ml，每次加100ml，分3次加，在50℃条件下，回流提取各1小时，过滤后合并滤液；加入15g活性炭或骨炭，在50℃条件下回流1小时后再过滤；在50℃条件下，将吸附后的滤液减压旋转蒸发浓缩成粗提物浸膏，加入100ml蒸馏水充分混匀后加入500ml氯仿于分液漏斗，充分混匀，经过80℃水浴，充分混合，在60℃条件下，再次减压旋转蒸发浓缩成至20ml左右；取10g经过处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，在80℃条件下吸附120min；待上样液面刚好与填料表面齐平时，加入60ml的60％乙醇洗脱。

在0℃条件下，低温结晶，然后在80℃条件下干燥，即得白坚木皮醇。

实施例8

取10g HPD500大孔树脂用去离子水漂洗5次，置于容器中，加入95％乙醇浸泡24h；取出上述浸泡后的HPD500大孔树脂，用95％乙醇淋洗至流出乙醇且加水不显浊，再用大量水清洗至流出液无醇味；加入20ml 3％的盐酸溶液通柱，再用水洗至接近中性；再加入20ml3％的氢氧化钠酸溶液通柱，最后用大量水洗至中性备用。

将龙眼叶片粉碎至小于60目粉末，取100g粉末加入甲醇300ml，每次加100ml，分3次加，在50℃条件下，回流提取各1小时，过滤后合并滤液；加入15g活性炭或骨炭，在50℃条件下回流1小时后再过滤；在50℃条件下，将吸附后的滤液减压旋转蒸发浓缩成粗提物浸膏，加入100ml蒸馏水充分混匀后加入300ml氯仿于分液漏斗，充分混匀，经过80℃水浴，充分混合，在60℃条件下，再次减压旋转蒸发浓缩成至20ml左右；取10g经过处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，在80℃条件下吸附120min；待上样液面刚好与填料表面齐平时，加入60ml的60％乙醇洗脱。

在0℃条件下，低温结晶，然后在80℃条件下干燥，即得白坚木皮醇。

比较例1

取100g粉碎至20目的黑叶荔枝果皮干粉，加入400ml 75％乙醇，分三次加入,每次约133ml；在70℃超声波提取各1.5小时，然后合并滤液；合并的滤液在60℃下减压旋转蒸发浓缩成至50ml左右；加入50ml蒸馏水充分混匀；加入200ml乙酸乙酯于分液漏斗充分混匀，留水相待用；加入200ml乙醇到水相，经过80℃水浴，充分混合后加入30g活性碳1小时后过滤；滤液在60℃下减压旋转蒸发浓缩成至50ml左右，加入100ml乙醇，80℃水浴溶解静置1小时；-5℃冷却，过滤获得晶体，100℃干燥，得1.51g白坚木皮醇粗品；在粗品中加入8ml蒸馏水80℃溶解30分钟；加入20ml乙醇，保温30分钟；在-5℃下冷却，过滤收集晶体，重复3次，得干燥晶体。

比较例2

在纯化步骤中，湿法装柱后，以4BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液。其余参数均与实施例1完全相同，工艺过程也完全相同。

比较例3

取10g经过处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，在80℃条件下吸附90min。其余参数均与实施例1完全相同，工艺过程也完全相同。

比较例4

取10g经过处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，在80℃条件下吸附150min。其余参数均与实施例1完全相同，工艺过程也完全相同。

比较例5

将荔枝叶片粉碎至小于60目粉末，取100g粉末加入甲醇300ml,每次100ml，分3次加，在50℃条件下，回流提取各1小时，过滤后合并滤液；取10g经过处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，在80℃条件下吸附120min；待上样液面刚好与填料表面齐平时，加入60ml的60％乙醇洗脱；加入15g活性炭或骨炭，脱色；在50℃条件下，将吸附后的滤液减压旋转蒸发浓缩成粗提物浸膏，加入100ml蒸馏水充分混匀后加入200ml氯仿于分液漏斗，充分混匀，经过80℃水浴，充分混合，在60℃条件下，再次减压旋转蒸发浓缩成至20ml左右。

在0℃条件下，低温结晶，然后在80℃条件下干燥，即得白坚木皮醇。

比较例6

取10g HPD500大孔树脂用去离子水漂洗5次，置于容器中，加入95％乙醇浸泡24h；取出上述浸泡后的HPD500大孔树脂，用95％乙醇淋洗至流出乙醇且加水不显浊，再用大量水清洗至流出液无醇味；加入20ml 3％的盐酸溶液通柱，再用水洗至接近中性；再加入20ml3％的氢氧化钠酸溶液通柱，最后用大量水洗至中性备用。

将龙眼叶片粉碎至小于60目粉末，取100g粉末加入甲醇300ml，每次加100ml，分3次加，在50℃条件下，回流提取各1小时，过滤后合并滤液；加入15g活性炭或骨炭，在50℃条件下回流1小时后再过滤；在50℃条件下，将吸附后的滤液减压旋转蒸发浓缩成粗提物浸膏，加入100ml蒸馏水充分混匀后加入300ml氯仿于分液漏斗，充分混匀，经过80℃水浴，充分混合，在60℃条件下，再次减压旋转蒸发浓缩成至20ml左右；取5g经过处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，在80℃条件下吸附120min；待上样液面刚好与填料表面齐平时，加入60ml的60％乙醇洗脱。

在0℃条件下，低温结晶，然后在80℃条件下干燥，即得白坚木皮醇。

比较例7

取10g HPD500大孔树脂用去离子水漂洗5次，置于容器中，加入95％乙醇浸泡24h；取出上述浸泡后的HPD500大孔树脂，用95％乙醇淋洗至流出乙醇且加水不显浊，再用大量水清洗至流出液无醇味；加入20ml 3％的盐酸溶液通柱，再用水洗至接近中性；再加入20ml3％的氢氧化钠酸溶液通柱，最后用大量水洗至中性备用。

将龙眼叶片粉碎至小于60目粉末，取100g粉末加入甲醇300ml，每次加100ml，分3次加，在50℃条件下，回流提取各1小时，过滤后合并滤液；加入15g活性炭或骨炭，在50℃条件下回流1小时后再过滤；在50℃条件下，将吸附后的滤液减压旋转蒸发浓缩成粗提物浸膏，加入100ml蒸馏水充分混匀后加入300ml氯仿于分液漏斗，充分混匀，经过80℃水浴，充分混合，在60℃条件下，再次减压旋转蒸发浓缩成至20ml左右；取20g经过处理的HPD500大孔树脂，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，在80℃条件下吸附120min；待上样液面刚好与填料表面齐平时，加入60ml的60％乙醇洗脱。

在0℃条件下，低温结晶，然后在80℃条件下干燥，即得白坚木皮醇。

通过实验对实施例和比较例纯度和提取率进行比较验证：

[表1]

	白坚木皮醇纯度	白坚木皮醇提取率
			实施例1	96.5％	78.9％
实施例2	96.5％	78.9％
			实施例3	96.2％	79.6％
实施例4	96.6％	78.6％
			实施例5	96.8％	73.6％
实施例6	95.6％	82.3％
			实施例7	96.6％	78.1％
实施例8	96.9％	78.6％
			比较例1	97.2％	10.7％
比较例2	96.2％	71.1％
			比较例3	93.5％	67.6％
比较例4	96.5％	79％
			比较例5	90.6％	70.8％
比较例6	80％	62.2％
			比较例7	97％	80％

从上表1能够看出，在实施例中：

选取叶片和枝干作为原料进行提取对提取的纯度和提取率而言影响并不大，另外，发明人利用本方法对其他部位：例如树根、果皮、果核等为原料进行提取得到的结果也不受影响，在此就不做赘述。由此可见，通过本发明所提供的提取方法，可以更广泛的利用剩余资源，降低生产成本。

甲醇与原料的比重控制在6～3:1之间，白坚木皮醇提取的纯度控制在96％左右，提取率控制在78％左右。如果超过，将直接影响溶液中白坚木皮醇的浓度，从而影响大孔树脂的吸附量，导致提取率降低；再者高浓度的甲醇挥发会影响人的呼吸、视网膜以及神经系统，对人体健康产生不利的影响，并且残留物将污染环境，且造成不必要的资源浪费；如果不足，将导致反应不完全，初提取液中白坚木皮醇的浓度较小，最终白坚木皮醇的提取率也较小。

活性炭或骨炭的用量比例控制在提取过程中溶液总重的5～10％之间，白坚木皮醇提取的纯度控制在96％左右，提取率控制在73～78％左右。如果超过，会造成资源的浪费；如果不足，将影响脱色的效果，去杂不完全将影响大孔树脂的吸附量，导致提取率降低。

氯仿与所述粗提物浸膏水溶液的体积比控制5～2:1之间，白坚木皮醇提取的纯度控制在96％左右，提取率控制在78％左右。如果超过，将有部分氯仿浪费，挥发或溶解在废液中，污染环境；如果不足，将影响萃取的效果，影响白坚木皮醇的纯度。

比较例1与实例相比：比较例1为现有技术，其中的工艺过程复杂，虽然得到的纯度为97.2％，与本发明所得到的纯度相当，但是提取率只有10.7％，远远低于本发明所得的提取率。

比较例2与实例相比：以1BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液相对于以4BV/h的流速加入所述脱色步骤所得的滤液，所得的纯度相当，但是提取率较高，主要原因是随着初提液浓度增大，HPD500树脂对白坚木皮醇吸附量增大，当达到2.5倍过后，吸附趋于平稳。

比较例3、4与实例相比：纯化步骤设定吸附时间为120min，如果超过大孔树脂的吸附效率慢慢减弱，影响生产效益；如果不足，将导致大孔树脂的吸附时间不充分，直接降低提取率。

比较例5与实例相比：先用活性炭或骨炭脱色再用HPD500大孔树脂吸附相对于先用HPD500大孔树脂吸附再用活性炭或骨炭脱色虽然只是工艺顺序的不同，得到的白坚木皮醇纯度以及提取率均有明显的区别。主要原因是，没有先通过活性炭或骨炭脱色会使得溶液中的杂质较多，当白坚木皮醇的浓度很低时，HPD500大孔树脂在吸附的过程中杂质分子在与白坚木皮醇的“竞争”占有明显优势，直接导致HPD500大孔树脂对白坚木皮醇的吸附量大大降低，从而导致了提取率大大降低。

比较例6、7与实例相比：大孔树脂与原料比重为1:10，如果超过对白坚木皮醇的纯度以及提取率的影响并不大，而且会有部分的大孔树脂浪费；但是如果不足，将导致大孔树脂的吸附量减少，直接降低提取率。

综上可见，本发明从无患子科植物龙眼或荔枝中提取白坚木皮醇的方法在保证提取纯度的同时，使得提取率提高，更利于工业化提取的实现。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用。它完全可以被适用于各种适合本发明的领域。对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改。因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节。

Claims (10)

1.一种从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)提取，以龙眼或荔枝为原料，在40～65℃下，以甲醇为提取液提取得到液体A；

2)脱色，在所述的液体A中加入活性炭或骨炭脱色，过滤，得到液体B；

3)纯化，取HPD500大孔树脂，湿法装柱后，加入所述液体B吸附纯化得到液体C；

4)浓缩，在≤80℃下，将所述液体C进行减压浓缩滤液得到液体D；

5)结晶，将所述的液体D在0～10℃下，低温结晶，即得到所述白坚木皮醇。

2.如权利要求1所述的从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法，其特征在于，所述HPD500大孔树脂经过以下预处理：

1)取HPD500大孔树脂用去离子水漂洗5次，置于容器中，加入95％乙醇浸泡24h；

2)取出上述浸泡后的HPD500大孔树脂，用95％乙醇淋洗至流出乙醇且加水不显浊，再用大量水清洗至流出液无醇味；

3)加入2～4倍HPD500大孔树脂体积的3～5％的盐酸溶液通柱，再用水洗至接近中性；

4)加入2～4倍HPD500大孔树脂体积的3～5％的氢氧化钠酸溶液通柱，最后用大量水洗至中性即可。

3.如权利要求1所述的从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法，其特征在于，所述原料粉碎至小于60目的粉末。

4.如权利要求1所述的从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法，其特征在于，所述提取步骤中，甲醇与所述原料的比重为6～3:1。

5.如权利要求1所述的从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法，其特征在于，所述脱色步骤中，活性炭或骨炭的用量比例为提取过程中溶液总重的5～10％。

6.如权利要求1所述的从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法，其特征在于，所述纯化步骤中，设定在80℃条件下吸附120min。

7.如权利要求1所述的从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法，其特征在于，所述纯化步骤中，湿法装柱后，以1BV/h的流速加入所述液体B进行吸附，待上样液面刚好与填料表面齐平时，加入乙醇洗脱；

其中，所述乙醇的浓度为60～90％，用量为60ml。

8.如权利要求1所述的从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法，其特征在于，所述纯化步骤中，所述大孔树脂与原料质量比为1:10。

9.如权利要求1所述的从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法，其特征在于，所述浓缩步骤还包括：将所述液体C减压旋转蒸发浓缩成粗提物浸膏，加入蒸馏水充分混匀得到粗提物浸膏水溶液，再加入氯仿或乙酸乙酯于分液漏斗充分混匀，经过80℃水浴，充分混合，最后再次减压旋转蒸发浓缩得到所述液体D。

10.如权利要求9所述的从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法，其特征在于，所述氯仿与所述粗提物浸膏水溶液的体积比是5～2:1。