CN107091889A - 一种ase法提取黄芩中黄芩苷的方法 - Google Patents

一种ase法提取黄芩中黄芩苷的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107091889A
CN107091889A CN201710259549.6A CN201710259549A CN107091889A CN 107091889 A CN107091889 A CN 107091889A CN 201710259549 A CN201710259549 A CN 201710259549A CN 107091889 A CN107091889 A CN 107091889A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ase
ethanol
extract
extraction
scutellaria baicalensis
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201710259549.6A
Other languages
English (en)
Inventor
廖强
陈学松
韦日伟
王丽丽
欧妮
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Wuzhou Institutes for Food and Drug Control
Original Assignee
Wuzhou Institutes for Food and Drug Control
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wuzhou Institutes for Food and Drug Control filed Critical Wuzhou Institutes for Food and Drug Control
Priority to CN201710259549.6A priority Critical patent/CN107091889A/zh
Publication of CN107091889A publication Critical patent/CN107091889A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N2030/062—Preparation extracting sample from raw material

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了一种ASE法提取黄芩中黄芩苷的方法，该方法提取效果好且耗时短、重复性好。属于黄芩苷的提取领域。该方法是这样的：将黄芩样品粉碎，过筛，取0.3g与1g石英砂混合；将所得的混合物装于放有滤膜的ASE萃取池中，加石英砂至与池口平行；用70％乙醇萃取，结束后，将萃取液用70％乙醇定容至50ml，离心，取上清液，即得。本发明可以代替药典方法对黄芩中的黄芩苷进行提取。

Description

一种ASE法提取黄芩中黄芩苷的方法
技术领域
本发明属于黄芩苷的提取领域，尤其是一种ASE法提取黄芩中黄芩苷的方法。
背景技术
2010年版药典方法中记载的制备供试品溶液的方法为：取本品中粉约0.3g，精密称定，加70％乙醇40ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置100ml量瓶中，用少量70％乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤人同一量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀。精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
该方法回流时间长，且对技术人员的专业水平要求较高。
发明内容
针对上述不足，本发明旨在提供一种ASE法提取黄芩中黄芩苷的方法，该方法提取效果好且耗时短、重复性好。
为了实现上述技术效果，本发明提供的技术方案是这样的：一种ASE法提取黄芩中黄芩苷的方法，依次包括下述步骤：
步骤1：将黄芩样品粉碎，过筛，取0.3g与1g石英砂混合；
步骤2：将所得的混合物装于放有滤膜的ASE萃取池中，加石英砂至与池口平行；
步骤3：用70％乙醇萃取，结束后，将萃取液用70％乙醇定容至50ml，离心，取上清液，即得。
优选地，步骤3所述的萃取参数为：压力为1500psi，温度为120℃，萃取时间为5min，循环次数为3次，冲洗体积为100％，吹扫时间为100s。
优选地，步骤2所述的ASE萃取池的体积为10ml。
优选地，步骤3所述的离心参数为：离心速度为15000r/min，离心时间为3min。
本发明与传统方法相比，具有以下优点：
本发明曾对快速溶剂萃取使用的溶剂进行考察，《中国药典》使用70％乙醇回流3小时。本实验选用甲醇、乙醇、70％乙醇作为提取溶剂进行了溶剂考察，结果显示甲醇与乙醇提取后黄芩苷含量与2015年版《中国药典》含量下降，原因可能是黄芩苷的极性大，故采用与药典一致的提取溶剂70％乙醇。
70％乙醇的熔沸点较高，快速溶剂萃取(以下简称ASE)提取原理：A:提高温度降低溶剂的黏度，减少溶剂进入样品基体的阻止，增加了溶剂进入样品基体的扩散，降低溶剂和样品基体之间的表面张力，使溶剂溶解待测物的容量增加；B:萃取液体的沸点随压力升高而提高，从而使溶剂在高温高压下仍保持在液态(液体对溶质的溶解能力远大于气体对溶质的溶解能力)。故我们选择采用120℃，提取5min，提取3次，即可达到与药典含量接近，更多的提取时间、温度、次数对结果已经无明显影响。最终确定最佳提取工艺组合为提取温度120℃，提取时间5min，提取次数3次。
附图说明
图1为以黄芩苷对照品的浓度(mg/ml)-峰面积进行的线性回归图；
图2为黄芩苷对照品的色谱图；
图3为采用药典方法提取所得的供试品溶液的色谱图；
图4为采用ASE法萃取所得的供试品溶液的色谱图。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，对本发明的权利要求做进一步说明，但不构成对本发明的任何限制，任何在本发明的权利要求保护范围内所做的有限次修改，仍在本发明的权利要求保护范围内。
实施例1
1、仪器设备及试剂
1.1仪器：
电子分析天平(XA205DU)、ASE350快速溶剂萃取仪(美国DIONEX公司)、ThermoU3000UHPLC液相色谱仪。
1.2试剂：
水：符合GB/T 6682规定的一级水；
乙醇(CH4O)：色谱纯(液相色谱用)；
石英砂：粒径2mm。
2、方法
2.1供试品溶液的制备
2.1.1 2010年版药典方法：
取本品中粉约0.3g，精密称定，加70％乙醇40ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置100ml量瓶中，用少量70％乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤人同一量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀。精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
2.1.2快速溶剂萃取法(ASE)制备供试品方法：
样品经粉碎机粉碎，过三号筛，精密称定0.3g，与1g石英砂混合均匀，待用，移入到预先放好过滤膜的10ml萃取池中再加入适量石英砂，轻轻振摇使之与池口在同一水平线上，拧紧萃取池上盖。萃取结束后，把萃取液转移于50ml容量瓶中，用70％乙醇稀释至刻度，在15000r/min下离心3min，取上清液，进入LC测定。
2.2对照品溶液的制备：
取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，即得。
2.3ASE萃取条件：
压力为1500psi，温度为120℃，萃取时间为5min，循环次数为3次，冲洗体积为100％，吹扫时间为100s。
2.4色谱条件与系统适用性试验：
a)仪器：Thermo双三元液相(U-3000)No.5121；
b)色谱柱：Thermo Syncronis C18，3*100mm，3μm；
c)柱温：40℃；
d)流速：0.5mL/min；
e)流动相：：甲醇-0.1％磷酸(47:53)；
f)检测波长：280nm；
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；理论板数按补骨脂素峰计算应不低于2500。
2.5测定法：
照高效液相色谱法(通则0512)测定；
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2.6标准限值要求：
本品按干燥品计算，含黄芩苷(C21H18O11)不得少于9.0％。
2.7计算(外标法)：
式中CR—对照品溶液浓度，单位为微克每升(mg/L)；
AX—供试品的峰面积；
AR—对照品峰面积。
注意：
使用前萃取池底部应拆卸清理干净，否则容易引起压力不稳；
萃取池底部的滤纸应在密封圈内，否则引起渗漏；
萃取池装样时松紧适中，太松容易导致提取液过多；
开机前检查气瓶气压是否达到1Mpa；
使用结束后清理干净，萃取池要及时晾干(容易生锈)。
3、结果
3.1线性关系
取黄芩苷对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加70％乙醇制成每1ml含黄芩苷0.2852mg的溶液，然后分别精密吸取该溶液0.5μl、0.8μl、1μl、2μl、5μl进入LC测定，并依照上述方法测定，结果详见表1。
以浓度(mg/ml)-峰面积进行线性回归，求得回归方程：y＝6021.6316x-32.5278，R2＝1.0000。黄芩苷在0.1426～1.426mg/ml范围内呈良好的线性关系，详见图1。
表1线性实验结果
3.2重现性实验
取相同批号的样品(批号：1510077)0.3g，共4份，精密称定，按ASE提取方法提取供试品溶液，进样量为1μL，以上述的色谱条件平行试验，测得样品中黄芩苷的含量见表2，RSD为0.01％，结果表明ASE提取方法重复性良好。
表2重现性实验结果
3.3样品含量测定结果(3批)
表3样品含量测定结果
3.4色谱测定
图2为黄芩苷对照品的色谱图；图3为采用药典方法提取所得的供试品溶液的色谱图；图4为采用ASE法萃取所得的供试品溶液的色谱图。
4、讨论：
4.1ASE提取溶剂的选择：
本发明曾对快速溶剂萃取使用的溶剂进行考察，《中国药典》使用70％乙醇回流3小时。本实验选用甲醇、乙醇、70％乙醇作为提取溶剂进行了溶剂考察，结果显示甲醇与乙醇提取后黄芩苷含量与2015年版《中国药典》含量下降，原因可能是黄芩苷的极性大，故采用与药典一致的提取溶剂70％乙醇。
4.2ASE提取条件的优化
70％乙醇的熔沸点较高，快速溶剂萃取(以下简称ASE)提取原理：A:提高温度降低溶剂的黏度，减少溶剂进入样品基体的阻止，增加了溶剂进入样品基体的扩散，降低溶剂和样品基体之间的表面张力，使溶剂溶解待测物的容量增加；B:萃取液体的沸点随压力升高而提高，从而使溶剂在高温高压下仍保持在液态(液体对溶质的溶解能力远大于气体对溶质的溶解能力)。故我们选择采用120℃，提取5min，提取3次，即可达到与药典含量接近，更多的提取时间、温度、次数对结果已经无明显影响。最终确定最佳提取工艺组合为提取温度120℃，提取时间5min，提取次数3次。
以上所述的仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则范围内所做的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的饿保护范围内。

Claims (4)

1.一种ASE法提取黄芩中黄芩苷的方法，其特征在于，依次包括下述步骤：
步骤1：将黄芩样品粉碎，过筛，取0.3g与1g石英砂混合；
步骤2：将所得的混合物装于放有滤膜的ASE萃取池中，加石英砂至与池口平行；
步骤3：用70％乙醇萃取，结束后，将萃取液用70％乙醇定容至50ml，离心，取上清液，即得。
2.根据权利要求1所述的一种ASE法提取黄芩中黄芩苷的方法，其特征在于，步骤3所述的萃取参数为：压力为1500psi，温度为120℃，萃取时间为5min，循环次数为3次，冲洗体积为100％，吹扫时间为100s。
3.根据权利要求1所述的一种ASE法提取黄芩中黄芩苷的方法，其特征在于，步骤2所述的ASE萃取池的体积为10ml。
4.根据权利要求1所述的一种ASE法提取黄芩中黄芩苷的方法，其特征在于，步骤3所述的离心参数为：离心速度为15000r/min，离心时间为3min。
CN201710259549.6A 2017-04-20 2017-04-20 一种ase法提取黄芩中黄芩苷的方法 Pending CN107091889A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710259549.6A CN107091889A (zh) 2017-04-20 2017-04-20 一种ase法提取黄芩中黄芩苷的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710259549.6A CN107091889A (zh) 2017-04-20 2017-04-20 一种ase法提取黄芩中黄芩苷的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN107091889A true CN107091889A (zh) 2017-08-25

Family

ID=59638295

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710259549.6A Pending CN107091889A (zh) 2017-04-20 2017-04-20 一种ase法提取黄芩中黄芩苷的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107091889A (zh)

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102675387A (zh) * 2011-03-18 2012-09-19 四川济生堂药业有限公司 一种从黄芩中提取黄芩苷的方法
CN104277086A (zh) * 2013-07-12 2015-01-14 河北以岭医药研究院有限公司 一种半枝莲中野黄芩苷提取方法
CN104610401A (zh) * 2015-02-25 2015-05-13 山东省中医药研究院 一种从黄芩中同时提取黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法
CN104710392A (zh) * 2015-03-31 2015-06-17 山西大学 一种用黄芩苷制备黄芩素的方法
CN104829666A (zh) * 2015-05-20 2015-08-12 山西大学 一种从黄芩中制备高纯度黄芩苷的方法
CN104910225A (zh) * 2015-05-12 2015-09-16 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 从黄芩中提取黄芩苷的方法
CN105001285A (zh) * 2015-06-29 2015-10-28 兰捷 一种从黄芩中提取黄芩苷的方法
CN105784885A (zh) * 2016-04-27 2016-07-20 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 一种黄芩中黄芩苷和黄芩素的萃取方法
CN105929073A (zh) * 2016-04-27 2016-09-07 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 一种同时检测黄芩中黄芩苷和黄芩素的方法

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102675387A (zh) * 2011-03-18 2012-09-19 四川济生堂药业有限公司 一种从黄芩中提取黄芩苷的方法
CN104277086A (zh) * 2013-07-12 2015-01-14 河北以岭医药研究院有限公司 一种半枝莲中野黄芩苷提取方法
CN104610401A (zh) * 2015-02-25 2015-05-13 山东省中医药研究院 一种从黄芩中同时提取黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法
CN104710392A (zh) * 2015-03-31 2015-06-17 山西大学 一种用黄芩苷制备黄芩素的方法
CN104910225A (zh) * 2015-05-12 2015-09-16 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 从黄芩中提取黄芩苷的方法
CN104829666A (zh) * 2015-05-20 2015-08-12 山西大学 一种从黄芩中制备高纯度黄芩苷的方法
CN105001285A (zh) * 2015-06-29 2015-10-28 兰捷 一种从黄芩中提取黄芩苷的方法
CN105784885A (zh) * 2016-04-27 2016-07-20 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 一种黄芩中黄芩苷和黄芩素的萃取方法
CN105929073A (zh) * 2016-04-27 2016-09-07 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 一种同时检测黄芩中黄芩苷和黄芩素的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105954380A (zh) 一种密蒙花中蒙花苷的测定方法
CN105929059A (zh) 一种桃仁中苦杏仁苷的测定方法
CN105699562B (zh) 一种威灵仙中齐墩果酸的测定方法
CN105954383A (zh) 一种威灵仙中齐墩果酸和常春藤皂苷元的测定方法
CN105954385A (zh) 一种威灵仙中齐墩果酸和常春藤皂苷元的萃取方法
CN105891380A (zh) 一种ase方法提取密蒙花中蒙花苷的方法
CN105738536A (zh) 一种大青叶中靛玉红的萃取方法
CN107064347A (zh) 一种ase‑hplc法测定补骨酯中补骨酯素、异补骨酯素含量的方法
CN107091889A (zh) 一种ase法提取黄芩中黄芩苷的方法
CN106950318A (zh) 一种ase‑hplc法测定黄芩中黄芩苷含量的方法
CN108088940A (zh) 一种ase法提取黄芩中黄芩苷的方法
CN105954405A (zh) 一种密蒙花中柳穿鱼叶苷的测定方法
CN106872611A (zh) 一种ase‑hplc法测定卷柏中穗花双黄酮含量的方法
CN108020618A (zh) 一种ase-hplc法测定黄芩中黄芩苷含量的方法
CN105929073A (zh) 一种同时检测黄芩中黄芩苷和黄芩素的方法
CN108169352A (zh) 一种ase-hplc法测定卷柏中穗花双黄酮含量的方法
CN106885861A (zh) 一种ase‑hplc法测定升麻中异阿魏酸含量的方法
CN106885862A (zh) 一种ase‑hplc法测定浙贝母中贝母素甲、贝母素乙含量的方法
CN108088928A (zh) 一种测定大青叶中靛玉红含量的方法
CN106885860A (zh) 一种ase‑hplc法测定酸枣仁中斯皮诺素含量的方法
CN105758980A (zh) 一种野菊花中的总黄酮的测定方法
CN105717241A (zh) 一种野菊花中的绿原酸的测定方法
CN106831914A (zh) 一种ase法提取陈皮中橙皮苷的方法
CN105954406A (zh) 一种密蒙花中柳穿鱼叶苷的萃取方法
CN106955502A (zh) 一种ase法萃取车前子中京尼平苷酸和毛蕊花糖苷的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20170825