CN106543295A - 白术多糖的制备方法及应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了白术多糖的制备方法及应用。制备方法为：将白术除杂清洗，干燥后粉碎为粉末；将白术粉末加8～10倍量的水，60～70℃下真空提取1～2h，过滤；向滤渣中加入3～5倍量的乙醇，60～70℃下提取1～2h，过滤，滤渣用乙醇洗涤，洗液与滤液合并；合并水提与醇提滤液，浓缩；将浓缩后的浸提膏真空干燥，粉碎后过80目筛，即得。白术多糖在治疗低蛋白血症及肠粘膜功能障碍中的用途。研究表明：白术多糖可以提高血清白蛋白含量，纠正低蛋白血症；白术多糖对肠粘膜损伤有治疗作用；发现了白术多糖对急性脑出血致大鼠肠粘膜损伤治疗作用的机理。将白术多糖用于治疗低蛋白血症及肠粘膜功能障碍具有良好的治疗效果且制备方法简单。

Description

白术多糖的制备方法及应用

技术领域

本发明属于中药制备及应用领域，具体地说，涉及一种白术多糖的制备方法及应用。

背景技术

肠粘膜屏障由4部分组成：机械屏障、免疫屏障、化学屏障和生物屏障。其主要作用是能阻止肠道内有害物质(如肠内的细菌及内毒素)进入体循环。病理状态时，肠粘膜生物屏障与机械屏障和免疫屏障具有一定的协同作用，又有调节免疫屏障的作用。

急性脑血管病是中老年人的常见疾病，致残率及死亡率极高。脑卒中患者中8％～35％出现营养不良，导致并发症增加，严重影响功能康复和生存质量，是脑卒中预后的独立危险因素，是脑卒中预后的监测指标。有关脑卒中营养障碍产生的原因及机制的研究很少，多考虑与吞咽困难有关。研究发现，脑出血可引起大鼠小肠粘膜损伤及低蛋白血症。

白术在《神农本草》中被列为中药上品。其性温，味甘、苦，具有健脾益气、燥湿利水、止汗、安胎之功效，主要用于脾虚食少、腹胀泄泻、痰饮眩悸、水肿、自汗、胎动不安。白术多糖作为白术的一个重要组成成分，目前已经证明其有多种重要的药理作用。目前，白术多糖的制备方法均较为复杂。另外，白术多糖能否减轻脑出血引起的低蛋白血症及小肠粘膜损伤，目前尚未见报道。

发明内容

有鉴于此，本发明针对上述的问题，提供了一种白术多糖的制备方法及应用，制备方法简单，且能够用于治疗低蛋白血症及肠粘膜功能障碍。

为了解决上述技术问题，本发明公开了一种白术多糖的制备方法，包括以下步骤：

步骤1，将白术除杂清洗，干燥后粉碎为粉末；

步骤2，将白术粉末加8～10倍量的水，60～70℃下真空提取1～2h，过滤；

步骤3，向步骤2过滤后的滤渣中加入3～5倍量的乙醇，60～70℃下提取1～2h，过滤，滤渣用乙醇洗涤，洗液与滤液合并；

步骤4，合并步骤2和步骤3过滤所得滤液，浓缩至相对密度为1.24～1.26；

步骤5，将浓缩后的浸提膏真空干燥，粉碎后过80目筛，即得。

进一步地，所述步骤2中真空提取的真空度为0.08～0.09MPa。

进一步地，所述步骤3中乙醇的体积浓度为95％。

进一步地，所述步骤4中浓缩的温度为55～60℃，压强为-0.06～-0.075MPa。

进一步地，所述步骤5中真空干燥的温度为50～55℃。

进一步地，所述步骤5中真空干燥至含水量小于等于5％。

进一步地，所述白术多糖的含量为30％～40％。

本发明还公开了白术多糖在治疗低蛋白血症及肠粘膜功能障碍中的应用。

与现有技术相比，本发明可以获得包括以下技术效果：

(1)本发明公开了一种白术多糖的制备方法，制备方法简单，提取效率高，缩短了提取时间，适于工业化生产。

(2)本发明公开了白术多糖在治疗低蛋白血症及肠粘膜功能障碍中的应用，在总结大量文献报道及临床治疗经验的基础上，提出白术多糖具有减轻小肠粘膜损害、提高血清白蛋白水平的功效，可以适用于治疗低蛋白血症和肠粘膜功能障碍。

(3)本发明发现白术多糖可以用于治疗急性脑出血引起的低蛋白血症和肠粘膜功能障碍，机理可能是修复肠粘膜结构；可明显降低血浆D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)含量，降低肠粘膜的通透性；可明显增加血清转铁蛋白，血清白蛋白含量，纠正低蛋白血症，改善小肠吸收功能；可明显降低炎性细胞因子IL-1β、TNF-α的表达，减轻炎性反应；白术多糖可明显降低肠粘膜超微结构的损伤，对肠粘膜损伤有治疗作用。

当然，实施本发明的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有技术效果。

附图说明

此处所说明的附图用来提供对本发明的进一步理解，构成本发明的一部分，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：

图1是本发明实施例白术多糖对肠粘膜损伤病理组织学检测(400×)；其中(A)为1d处死，(B)为6d处死，(C)为11d处死；(a)为Sham组，(b)为Model组，(c)为白术多糖高剂量组，(d)为白术多糖低剂量组；

图2是本发明实施例白术多糖对肠粘膜损伤后IL-6β表达的影响检测(400×)；其中(A)为1d处死，(B)为6d处死，(C)为11d处死；(a)为Sham组，(b)为Model组，(c)为白术多糖高剂量组，(d)为白术多糖低剂量组；

图3是本发明实施例白术多糖对肠粘膜损伤后TNF-α表达的影响检测(400×)；其中(A)为1d处死，(B)为6d处死，(C)为11d处死；(a)为Sham组，(b)为Model组，(c)为白术多糖高剂量组，(d)为白术多糖低剂量组。

具体实施方式

以下将配合实施例来详细说明本发明的实施方式，藉此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题并达成技术功效的实现过程能充分理解并据以实施。

本发明提供一种白术多糖的制备方法，具体包括以下步骤：

步骤1，将白术除杂清洗，干燥后粉碎为粉末，过60目筛；

步骤2，将白术粉末加8～10倍量的水，60～70℃下真空提取1～2h，真空度为0.08～0.09MPa，过滤；

步骤3，向步骤2过滤后的滤渣中加入3～5倍量体积浓度为95％的乙醇，60～70℃下提取1～2h，过滤，滤渣用体积浓度为95％的乙醇洗涤，洗液与滤液合并；

步骤4，合并步骤2水提和步骤3醇提所得滤液，浓缩至相对密度为1.24～1.26，浓缩温度为55～60℃，压强为-0.06～-0.075MPa；

步骤5，将浓缩后的浸提膏50～55℃真空干燥至含水量小于等于5％，粉碎后过80目筛，即得。

所述白术多糖的含量为30％～40％。

本发明提供一种白术多糖在治疗低蛋白血症及肠粘膜功能障碍中的应用。

实施例1

步骤1，将白术除杂清洗，干燥后粉碎为粉末，过60目筛；

步骤2，将白术粉末加8倍量的水，60℃下真空提取2h，真空度为0.09MPa，过滤；

步骤3，向步骤2过滤后的滤渣中加入3倍量体积浓度为95％的乙醇，60℃下提取2h，过滤，滤渣用体积浓度为95％的乙醇洗涤，洗液与滤液合并；

步骤4，合并步骤2水提和步骤3醇提所得滤液，浓缩至相对密度为1.24，浓缩温度为55℃，压强为-0.075MPa；

步骤5，将浓缩后的浸提膏50℃真空干燥至含水量小于等于5％，粉碎后过80目筛，即得。

实施例2

步骤1，将白术除杂清洗，干燥后粉碎为粉末，过60目筛；

步骤2，将白术粉末加9倍量的水，65℃下真空提取1.5h，真空度为0.08MPa，过滤；

步骤3，向步骤2过滤后的滤渣中加入4倍量体积浓度为95％的乙醇，65℃下提取1.5h，过滤，滤渣用体积浓度为95％的乙醇洗涤，洗液与滤液合并；

步骤4，合并步骤2水提和步骤3醇提所得滤液，浓缩至相对密度为1.25，浓缩温度为58℃，压强为-0.07MPa；

步骤5，将浓缩后的浸提膏53℃真空干燥至含水量小于等于5％，粉碎后过80目筛，即得。

实施例3

步骤1，将白术除杂清洗，干燥后粉碎为粉末，过60目筛；

步骤2，将白术粉末加10倍量的水，70℃下真空提取1h，真空度为0.09MPa，过滤；

步骤3，向步骤2过滤后的滤渣中加入5倍量体积浓度为95％的乙醇，70℃下提取1h，过滤，滤渣用体积浓度为95％的乙醇洗涤，洗液与滤液合并；

步骤4，合并步骤2水提和步骤3醇提所得滤液，浓缩至相对密度为1.26，浓缩温度为60℃，压强为-0.06MPa；

步骤5，将浓缩后的浸提膏55℃真空干燥至含水量小于等于5％，粉碎后过80目筛，即得。

下面通过试验对本发明的疗效做进一步阐述。

建立急性脑出血模型诱导大鼠应激性肠粘膜损伤，造模后对其生理状态进行评分，分别于术后1d、6d及11d处死取材，检测大鼠血浆DAO活性、D-乳酸含量，血清转铁蛋白、白蛋白含量，回肠组织IL-1β及TNF-α的表达。通过观察白术多糖对急性脑出血致大鼠低蛋白血症的治疗作用，阐明白术多糖治疗低蛋白血症的可能机制；观察白术多糖对急性脑出血致大鼠肠粘膜损伤的影响，阐明白术多糖修复粘膜功能的可能机制。具体如下：

一、试验动物

健康SD大鼠，250～300g，雌雄各半，由贵州医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(黔)2012-0001。

二、试验条件

动物雌雄分笼饲养，每笼5只，由专人饲养管理。动物室光照充足，通风良好，实验室环境温度18～25℃，相对湿度50～70％，实验室按常规定期消毒。饲以贵州医科大学实验动物中心提供全价颗粒饲料，自由饮水。

三、数据处理

实验数据采用SPSS16.0统计软件包，方差齐性采用F检验，用student-t test进行组件分析，P<0.05为具有显著性差异，P<0.01为具有极显著性差异。

四、试验方法和测试结果

1、模型建立

(1)试验分组

大鼠按体重随机分为4组，即假手术组(Sham)，模型组(Model)，白术多糖高剂量组(0.8g/kg)及低剂量组(0.4g/kg)，白术多糖含量为30％，每组24只。造模前连续灌胃给药5d，每日一次，给药容积10mL/kg，Sham组及Model组给予等容积生理盐水，造模后持续灌胃给药，每日一次。

(2)模型制备

禁食12h，禁水4h后，3％水合氯醛10mL/kg腹腔注射麻醉。调整脑立体定位仪，使门齿钩平面比耳尖线平面低2.4mm，将大鼠俯卧位固定在立体定位仪上，前囟和后囟基本在同一平面，常规消毒，沿矢状缝切开头皮，暴露前囟及冠状缝，于前囟前1mm，中线右侧旁开3mm，用颅骨钻钻一直径1mm的圆孔，深度达硬脑膜表面，不伤及脑组织。在立体定位仪的引导下，用微量进样器(针头直径约0.6mm)沿钻孔垂直进针6mm，Model组及高、低剂量组缓慢注入VII型胶原酶0.4U和肝素钠3.5U混合液2μL，留针10min后缓慢退出。Sham组注射等体积生理盐水，其余步骤同Model组。各组大鼠术后均腹腔注射青霉素16万U/只，每日一次，连续3d。

(3)评分

表1 Zea Longa评分法

造模后，按照表1的评分标准进行评分，评分结果见表2。Model组、白术多糖高、低剂量组动物全部向手术对侧转圈，Zea Longa评分均为2分，sham组各动物无神经损伤症状，评分均为0分，提示模型复制成功。术后sham组大鼠毛色白而有光泽、行动迅速、反应灵敏，Model及白术多糖高、低剂量组大鼠出现活动力低、行动迟缓、食欲不佳等症状，个别可见毛色干枯变黄、缩肩拱背。与Model组比较，白术多糖高、低剂量组均有不同程度改善。

表2 评分结果

注：与模型组比较，**P<0.01。

2、血浆DAO(二胺氧化酶)活力测试

(1)试验方法

术后1d、6d及11d各组处死8只大鼠，抗凝管接取股动脉血4mL，3000rpm离心10min，吸取上清液-80℃保存待测。检测前将紫外分光光度计于340nm，0.5cm光径石英比色皿，超纯水调零。在相应编号的试管中加入80μL待测血浆，迅速加入800μL检测试剂，立即混匀，迅速倒入比色皿中比色，20秒时读取吸光度值(A₁)。之后将比色液倒入原试管中37℃水浴10min，再次倒入比色皿中，在10分20秒时读取吸光度值(A₂)。根据公式计算DAO活力。

(2)试验结果

造模后1d，Model组、白术多糖高、低剂量组血浆DAO活力显著升高，与Sham组比较差异显著(P<0.05)。造模后11d，白术多糖高、低剂量组血浆DAO活力显著降低，与Model组比较差异显著(P<0.01)，结果见表3。

表3 白术多糖对肠粘膜损伤大鼠DAO活力的影响(n＝8)

注：与sham组比较，^#P<0.05，^##P<0.01；与Mode组比较，*P<0.05，**P<0.01。

3、血浆D-乳酸含量测试

(1)试验方法

取材同血浆DAO活力测试，检测前配置试剂。

(2)试剂配置

试剂一：酶稀释液；

试剂二：酶储备液；

酶工作液配制：临用前将试剂二和试剂一按照1:100的体积比混合，现用现配；

试剂三：黄色透明液体；

试剂四：白色粉末；

显色剂配制：使用前用移液枪取约1mL试剂三液体加入试剂四粉末中，待粉剂全部溶解后，转入试剂三瓶中，如此重复3次，使二者充分混合，配成显色剂待用。

试剂五：终止液；

试剂六：3mmol/L标准液。

(3)试剂组成及操作方法

表4 试剂组成

按照表4的试剂组成在各管中加入双蒸水、标准液、待测样本、酶工作液、显色剂后混匀，37℃水浴10min。然后加入终止液，混匀，530nm，1cm光径，超纯水调零，测各管吸光度值。

(4)计算公式

(5)试验结果

造模后，模型组D-乳酸含量升高，高剂量组于造模后6d显著降低，与模型组比较，差异显著(P<0.05)；低剂量组于造模后1d、6d及11d显著降低，与模型组比较，差异显著(P<0.05)。结果见表5。

表5 白术多糖对肠粘膜损伤大鼠D-乳酸含量的影响(n＝8)

注：与模型组比较，*P<0.05。

4、血清转铁蛋白含量测试

(1)试验方法

术后1d、6d及11d各组处死8只大鼠，非抗凝管接取股动脉血4mL，1500rpm离心20min，吸取上清液-20℃保存待测。严格按照试剂盒操作程序执行。

a、标准品的稀释

按照表6制备标准品稀释液。

表6 标准品稀释液制备表

b、加样

①空白孔：空白对照孔不加样品、生物素标记的抗-TRF抗体以及链霉亲和素-HRP，只加显色剂A&B和终止液，其余各部操作相同；

②标准品孔：加入标准品50μL，链霉素-HRP 50μL；

③待测样品孔：加入样本40μL，然后再各加入抗-TRF抗体10μL、链霉亲和素-HRP50μL，盖上封板膜，轻轻振荡使其混和均匀，快速放入37℃培养箱温育60min；

④配液：在温育快要结束的时候配制洗涤液，将浓缩洗涤液用蒸馏水稀释成1×应用液，备用；

⑤洗涤：从培养箱中取出酶标板，小心揭掉封板膜，倒掉液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30s后弃去，在实验台上铺垫几层吸水纸，然后将酶标板朝下用力拍几次，尽量吸干液体，如此重复5次，拍干；

⑥显色：每孔先加入显色剂A 50μL，再加入显色剂B 50μL，轻轻振荡混匀，37℃避光显色10min；

⑦终止：每孔加终止液50μL，终止反应，(此时液体颜色由蓝色立即转成黄色)；

⑧测定：以空白孔调零，450nm波长处依序测量各孔的吸光度(OD值)，操作应快速，在加终止液后10min之内完成测定；

⑨根据标准品的浓度及反应的OD值计算出标准曲线的回归方程，然后再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。

(2)试验结果

造模后1d，模型组转铁蛋白含量显著升高，白术多糖各剂量组转铁蛋白含量显著降低，与模型组比较，差异显著(P<0.05，P<0.01)，造模后6d及11d，各组之间无显著性差异，结果见表7。

表7 白术多糖对肠粘膜损伤大鼠转铁蛋白含量的影响(n＝8)

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。

5、血清白蛋白含量测试

(1)试验方法

取材同血浆D-乳酸含量测试，严格按照试剂盒操作程序执行。

(2)试剂配制

试剂一：溴甲酚绿贮备液，使用时按1:4加入超纯水配成应用液；

试剂二：34.8g/L白蛋白标准品。

(3)试剂组成及操作方法

表8 试剂组成

	空白管	标准管	测定管
				双蒸水(mL)	0.01
白蛋白标准品(mL)		0.01
				样本(mL)			0.01
溴甲酚绿应用液(mL)	2.5	2.5	2.5

按照表8的试剂组成将试剂加入各管中，充分混匀，室温静置10min，波长628nm，光径1cm，超纯水调零，测定各管吸光度值。

(4)计算公式

(5)试验结果

造模后1d及6d，Model组血清白蛋白含量有降低趋势，与Sham组比较无显著性差异，造模后11d，Model组血清白蛋白含量显著降低，与Sham组比较，差异显著(P<0.01)；白术多糖高、低剂量组血清白蛋白含量于造模后11d显著升高，与Model组比较，差异显著(P<0.05)，结果见表9。

表9 白术多糖对肠粘膜损伤大鼠白蛋白含量的影响(n＝8)

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。

6、病理组织学检测

(1)试验方法

大鼠处死后，取适当长度回肠，中性福尔马林固定、切片，严格按照HE染色操作步骤执行。

(2)试验结果

切片显示结果见图1：Sham组小肠粘膜绒毛细长，排列整齐、密集，呈指状，固有膜内见排列密集的肠腺。Model组及白术多糖高、低剂量组小肠肠绒毛糜烂、缺失，肠绒毛变短、增宽，粘膜表面上皮细胞变性、坏死，固有膜内见较多的炎症细胞浸润。白术多糖高、低剂量组肠绒毛在排列、糜烂、缺失、炎症细胞浸润方面与Model组比较明显减轻，高、低剂量组差异不明显。

7、小肠IL-1β的表达

(1)试验方法

大鼠处死后，取适当长度回肠，中性福尔马林固定、切片，严格按照免疫组织化学法操作步骤执行。

(2)操作步骤

60℃恒温箱中烘烤30min；脱蜡：二甲苯中浸泡10min×2次；水化：100％酒精中浸泡5min×2次，95％酒精中浸泡5min，85％酒精中浸泡5min，70％酒精中浸泡5min；抗原修复：取一定量的0.01M柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)于烧杯中，微波加热至沸腾，将组织切片置于耐高温切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中高档继续处理10-15min，取出烧杯冷却至室温，取出玻片，蒸馏水洗2次，PBS洗5min；封闭：新配置的3％H₂O₂，室温封闭10min，以阻断内源性过氧化物酶活性，PBS洗5min；甩去多余液体，滴加Ⅰ抗(兔抗IL-1β多克隆抗体)，4℃过夜，37℃复温45min；PBS洗5min；滴加Ⅱ抗(羊抗兔IgG/HRP聚合物)；37℃孵育15-20min，PBS洗5min；甩去多余液体并用吸水纸吸去组织周围水分后，滴加新鲜配制的DAB显色剂显色5-10min，在显微镜下掌握染色程度；自来水充分冲洗，苏木素复染10min；0.5％盐水酒精分化；脱水：70％酒精5min，80％酒精5min，95％酒精5min，100％酒精5min×2次；透明：二甲苯浸泡10min×2次；中性树胶封片。

(3)数据分析

同时设立阴性对照，以PBS代替一抗进行反应。以细胞膜或细胞质中出现棕黄色颗粒者定为IL-1β阳性。把封好的的切片置显微镜观察，各组IL-1β含量用棕黄色颗粒的平均光密度(A)值表示，于400倍视野下，每片随机选取5个视野，采用MIAS图像分析软件，对各切片进行图像分析，测定平均光密度值。

(4)试验结果

免疫组化结果显示，造模后1d、6d及11d，与sham组比较，Model组回肠粘膜着色明显加深，平均光密度值显著升高(P<0.01)，造模后1d及6d，白术多糖高、低剂量组粘膜着色明显减轻，平均光密度值显著降低，与Model组比较，差异显著(P<0.05，P<0.01)；造模后11d，白术多糖高、低剂量组平均光密度值与Model组比较，无差异(P>0.05)。结果见表10及图2。

表10 白术多糖对肠粘膜损伤大鼠回肠IL-1β表达的影响n＝4)

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。

8、小肠TNF-α的表达

(1)试验方法

试验方法同病理组织学试验方法，Ⅰ抗采用鼠抗TNF-α抗体，Ⅱ抗采用羊抗鼠IgG/HRP聚合物。

(2)试验结果

免疫组化结果显示，造模后1d、6d及11d，与sham组比较，Model组回肠粘膜着色明显加深，平均光密度值显著升高(P<0.01)；白术多糖高剂量组于造模后1d、6d及11d回肠粘膜着色明显减轻，平均光密度值显著降低，与Model组比较，差异显著(P<0.01)；白术多糖低剂量组于造模后1d及6d粘膜着色明显减轻，平均光密度值显著降低，与Model组比较，差异显著(P<0.05，P<0.01)，造模后11d，与Model组比较，无差异(P>0.05)，结果见表11及图3。

表11 白术多糖对肠粘膜损伤大鼠回肠TNF-α表达的影响(n＝4)

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。

通过上述描述可知：造模后模型组及白术多糖各剂量组Zea Longa评分均为2分，假手术组均为0分；白术多糖于造模后11d显著降低血浆DAO活力；白术多糖高剂量组于造模后6d，低剂量组于造模后1d、6d及11d均显著降低血浆D-乳酸含量，与模型组比较，差异显著；白术多糖于造模后1d显著降低血清转铁蛋白含量；造模后11d显著提高血清白蛋白含量，与模型组比较，差异显著；病理组织学观察回肠粘膜组织显示，造模后肠绒毛糜烂、缺失，肠绒毛变短、增宽，粘膜表面上皮细胞变性、坏死，固有膜内见较多的炎症细胞浸润，白术多糖各剂量组肠绒毛在排列、糜烂、缺失、炎症细胞浸润方面与模型组比较明显减轻，高、低剂量组差异不明显；免疫组化结果显示，白术多糖显著降低IL-1β及TNF-α的表达，与模型组比较差异显著。

通过上述描述得出以下结论：

1、白术多糖可以提高血清白蛋白含量，纠正低蛋白血症；

2、白术多糖对肠粘膜损伤有治疗作用；

3、发现了白术多糖对急性脑出血致大鼠肠粘膜损伤治疗作用的机理。

综上所述，白术多糖用于治疗低蛋白血症及肠粘膜功能障碍具有良好的治疗效果。

如在说明书及权利要求当中使用了某些词汇来指称特定成分或方法。本领域技术人员应可理解，不同地区可能会用不同名词来称呼同一个成分。本说明书及权利要求并不以名称的差异来作为区分成分的方式。如在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”为一开放式用语，故应解释成“包含但不限定于”。“大致”是指在可接收的误差范围内，本领域技术人员能够在一定误差范围内解决所述技术问题，基本达到所述技术效果。说明书后续描述为实施本发明的较佳实施方式，然所述描述乃以说明本发明的一般原则为目的，并非用以限定本发明的范围。本发明的保护范围当视所附权利要求所界定者为准。

还需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的商品或者系统不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种商品或者系统所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的商品或者系统中还存在另外的相同要素。

上述说明示出并描述了发明的若干优选实施例，但如前所述，应当理解发明并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述发明构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离发明的精神和范围，则都应在发明所附权利要求的保护范围内。

Claims (8)

1.白术多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，将白术除杂清洗，干燥后粉碎为粉末；

步骤2，将白术粉末加8～10倍量的水，60～70℃下真空提取1～2h，过滤；

步骤3，向步骤2过滤后的滤渣中加入3～5倍量的乙醇，60～70℃下提取1～2h，过滤，滤渣用乙醇洗涤，洗液与滤液合并；

步骤4，合并步骤2和步骤3过滤所得滤液，浓缩至相对密度为1.24～1.26；

步骤5，将浓缩后的浸提膏真空干燥，粉碎后过80目筛，即得。

2.如权利要求1所述的白术多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤2中真空提取的真空度为0.08～0.09MPa。

3.如权利要求1所述的白术多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤3中乙醇的体积浓度为95％。

4.如权利要求1所述的白术多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤4中浓缩的温度为55～60℃，压强为-0.06～-0.075MPa。

5.如权利要求1所述的白术多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤5中真空干燥的温度为50～55℃。

6.如权利要求1或5所述的白术多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤5中真空干燥至含水量小于等于5％。

7.如权利要求1-6中任一权利要求所述的白术多糖的制备方法，其特征在于，所述白术多糖的含量为30％～40％。

8.如权利要求1-7之一所述的白术多糖在治疗低蛋白血症及肠粘膜功能障碍中的应用。