RU2367607C1 - Способ определения иммунных комплексов у белых мышей в условиях стресса - Google Patents

Способ определения иммунных комплексов у белых мышей в условиях стресса Download PDF

Info

Publication number
RU2367607C1
RU2367607C1 RU2008107197/15A RU2008107197A RU2367607C1 RU 2367607 C1 RU2367607 C1 RU 2367607C1 RU 2008107197/15 A RU2008107197/15 A RU 2008107197/15A RU 2008107197 A RU2008107197 A RU 2008107197A RU 2367607 C1 RU2367607 C1 RU 2367607C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
immune complexes
stage
under stress
white mice
mice under
Prior art date
Application number
RU2008107197/15A
Other languages
English (en)
Inventor
Вячеслав Григорьевич Подсеваткин (RU)
Вячеслав Григорьевич Подсеваткин
Светлана Владимировна Кирюхина (RU)
Светлана Владимировна Кирюхина
Дмитрий Сергеевич Блинов (RU)
Дмитрий Сергеевич Блинов
Original Assignee
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева" filed Critical Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева"
Priority to RU2008107197/15A priority Critical patent/RU2367607C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2367607C1 publication Critical patent/RU2367607C1/ru

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано в лабораторной диагностике. Заявлен способ определения иммунных комплексов у белых мышей в условиях стресса путем центрифугирования биологической ткани и последующим определением в ней иммунных комплексов методом преципитации комплексов антиген-антитело в полиэтиленгликоле при помощи фотометрического измерения оптической плотности преципитата, отличающийся тем, что на первом этапе выделяют паренхиматозный орган для исследования, на втором этапе готовят экстракт ткани паренхиматозного органа путем его гомогенизации перед центрифугированием, на третьем этапе в полученном экстракте определяют концентрацию мелких, средних и крупных иммунных комплексов. Изобретение позволяет совершенствовать методы лабораторной диагностики иммуноопосредованных заболеваний, а также расширить функциональные возможности способа. 1 табл.

Description

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано в лабораторной диагностике.
Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) являются важным компонентом системы гуморального иммунитета. В состав ЦИК входят антигены и антитела к ним, компоненты системы комплемента и антиглобулиновые факторы. В норме ЦИК быстро удаляются из крови и выводятся из организма.
Известен способ определения циркулирующих мелких, средних и крупных иммунных комплексов в плазме крови, основанный на преципитации комплексов антиген-антитело в полиэтиленгликоле различной концентрации с последующим фотометрическим определением плотности преципитата (Иммунологические методы исследования. - М.: Изд-во «Мир», 1988, с.489-503).
Недостатком способа является то, что с помощью него невозможно определить концентрацию иммунных комплексов, осажденных в сосудах и тканях паренхиматозных органов. При развитии иммунно-опосредованного патологического процесса иммунные комплексы (ИК) длительно циркулируют в кровотоке, происходит их фиксация на стенках кровеносных сосудов, что приводит к функциональным и морфологическим повреждениям внутренних органов и тканей. Поэтому важной проблемой диагностики иммунокомплексной патологии являются не только мониторинг циркулирующих иммунных комплексов в периферической крови, но, в большей степени, возможность исследования количества иммунных комплексов в тканях, что делает возможным изучение патогенетических механизмов развития иммунокомплексных заболеваний, определение тропности ИК к различным тканям организма. Диагностическое значение имеет определение тканевых ИК разной молекулярной массы (низкой, средней, высокой).
Технический результат заключается в совершенствовании методов лабораторной диагностики иммуноопосредованных заболеваний, а также расширение функциональных возможностей способа.
Технический результат достигается тем, что в способе определения иммунных комплексов у белых мышей в условиях стресса путем центрифугирования биологической ткани и последующим определением в ней иммунных комплексов методом преципитации комплексов антиген-антитело в полиэтиленгликоле при помощи фотометрического измерения оптической плотности преципитата, что на первом этапе выделяют паренхиматозный орган для исследования, на втором этапе готовят экстракт ткани паренхиматозного органа путем его гомогенезации перед центрифугированием, на третьем этапе в полученном экстракте определяют концентрацию мелких, средних и крупных иммунных комплексов.
Способ осуществляют следующим образом. На первом этапе под эфирным наркозом животных декапитируют, после чего извлекают головной мозг, печень и тимус. Ткани промывают в охлажденном 0,9% физиологическом растворе хлористого натрия, высушивают фильтровальной бумагой, взвешивают на аналитических весах. На втором этапе для получения гомогенатов навеску биологических тканей растирают со стеклом в фарфоровых ступках на холоде при температуре 10-12 градусов Цельсия. Для экстрагирования используют 0,05 М Трис-НС1-буфер (рН 7,4) в соотношении 1:8 по объему. Полученные гомогенаты центрифугируют при 1500 оборотах в минуту в течение 10-12 минут. На заключительном этапе надосадочную жидкость забирают микродозатором. Определение концентрации иммунных комплексов (ИК) разной молекулярной массы проводят следующим образом: исследуемые экстракты каждого вида биологической ткани разводят 0,1 М боратным буфером (рН 8,4) в соотношении 1:24. К разведенному экстракту, разделенному на 3 части, добавляют равные объемы 2,5%; 4% или 5,5% раствора полиэтиленгликоля для определения крупных, средних и мелких иммунных комплексов соответственно. Смеси выдерживают при температуре 20-22 градуса Цельсия в течение 1 часа. Концентрацию иммунных комплексов определяют на фотометре при длине волны 540 нм и выражают в единицах оптической плотности.
Апробация проведена на 76 половозрелых белых нелинейных мышах обоего пола, из которых половину составляли интактные животные, а у половины воспроизводили иммобилизационный стресс. Установлено, что последовательное выделение, гомогенизация, экстракция и фотометрия экстракта тканей паренхиматозных органов (головного мозга, печени и тимуса) позволяет достоверно определять концентрацию иммунных комплексов в этих тканях.
В качестве примера осуществления способа с получением конкретных значений концентрации мелких, средних и крупных иммунных комплексов приводим значения исследуемых показателей, полученных при проведении экспериментальных исследований на интактных и стрессированных животных табл.1.
Таблица 1
№ п/п Исследуемые иммунные комплексы Интактные животные (n=10) Животные, находившиеся в течение 5 суток в состоянии иммобилизационного стресса (n=10)
1 Тимус 4,0±0,4 Тимус 6,0±0,7*
мелкие Печень 5,1±0,5 Печень 7,2±1,1*
Головной мозг 2,2±0,3 Головной мозг 1,9±0,3
2 Тимус 2,0±0,4 Тимус 3,2±0,3*
средние Печень 3,1±0,4 Печень 4,1±0,4*
Головной мозг 1,01±0,2 Головной мозг 1,3±0,2
3 Тимус 0,9±0,2 Тимус 1,1±0,4
крупные Печень 1,3±0,1 Печень 1,4±0,5
Головной мозг 0,6±0,2 Головной мозг 0,7±0,1
Примечание: * - различия при сравнении с группой интактных животных достоверны при р<0,05.
Предлагаемый способ позволяет совершенствовать метод лабораторной диагностики иммунноопосредованных заболеваний. Кроме того, раширяются функциональные возможности способа за счет возможности использования его для определения концентрации иммунных комплексов не только в крови, но и в тканях паренхиматозных органов.

Claims (1)

  1. Способ определения иммунных комплексов у белых мышей в условиях стресса путем центрифугирования биологической ткани и последующего определения в ней иммунных комплексов методом преципитации комплексов антиген-антитело в полиэтиленгликоле при помощи фотометрического измерения оптической плотности преципитата, отличающийся тем, что на первом этапе выделяют паренхиматозный орган для исследования, на втором этапе готовят экстракт ткани паренхиматозного органа путем его гомогенизации перед центрифугированием, на третьем этапе в полученном экстракте определяют концентрацию мелких, средних и крупных иммунных комплексов.
RU2008107197/15A 2008-02-26 2008-02-26 Способ определения иммунных комплексов у белых мышей в условиях стресса RU2367607C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2008107197/15A RU2367607C1 (ru) 2008-02-26 2008-02-26 Способ определения иммунных комплексов у белых мышей в условиях стресса

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2008107197/15A RU2367607C1 (ru) 2008-02-26 2008-02-26 Способ определения иммунных комплексов у белых мышей в условиях стресса

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2367607C1 true RU2367607C1 (ru) 2009-09-20

Family

ID=41167852

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2008107197/15A RU2367607C1 (ru) 2008-02-26 2008-02-26 Способ определения иммунных комплексов у белых мышей в условиях стресса

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2367607C1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2560841C1 (ru) * 2014-09-05 2015-08-20 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарёва" Способ нормализации измененных показателей кислотно-щелочного равновесия крови у белых мышей в условиях стресса

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Иммунологические методы исследования. - М.: изд-во «Мир», 1988, с.489-503. Наше здоровье. Нелли Мельман. Газета «Каскад». Published in Baltimore Since-1995, http://www.kackad.com/article.asp?article=263. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2560841C1 (ru) * 2014-09-05 2015-08-20 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарёва" Способ нормализации измененных показателей кислотно-щелочного равновесия крови у белых мышей в условиях стресса

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Abreu-Velez et al. Collagen IV in normal skin and in pathological processes
Delamare The lymphatics
Suskind et al. Maternal microchimerism in the livers of patients with biliary atresia
Harboe et al. Synthesis of donor type γG‐globulin following thymus transplantation in hypo‐γ‐globulinaemia with severe lymphocytopenia
Beaudu-Lange et al. Unusual clinical presentation of leptospirosis in a cat
Prasetyo et al. Honey can repairing damage of liver tissue due to protein energy malnutrition through induction of endogenous stem cells
Watson et al. Studies of protoporphyrin: IV. A comparison of the erythrocyte protoporphyrin concentration with the reticulocyte percentage under experimental and clinical conditions
Phillips et al. Quantitative chromatographic analysis of the phospholipids of abnormal human red blood cells.
RU2367607C1 (ru) Способ определения иммунных комплексов у белых мышей в условиях стресса
US4640897A (en) Immunoanalysis of basophil-containing blood fraction for diagnosing parasitoses and allergies
KR100896396B1 (ko) 점착성 미세소포의 제거 방법
Gupta et al. Multiple sclerosis and malabsorption.
Taniguchi Studies on heterophile antigen and antibody
Søltoft et al. Immunoglobulin-containing cells in the small intestine during acute enteritis
RU2455937C1 (ru) Способ выявления псевдоэксфолиативного материала на ранних стадиях заболевания глаза
WO2021052450A1 (zh) 反相色谱分离非人动物羊水中的活性成分
CN106543295A (zh) 白术多糖的制备方法及应用
KARAVODIN et al. Inhibition of adherence and cytotoxicity by circulating immune complexes formed in experimental filariasis
RU2525688C2 (ru) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОЧИЩЕННОГО СОМАТИЧЕСКОГО АНТИГЕНА Dirofilaria immitis
Sultana et al. Association between Helicobacter pylori infection and primary open-angle glaucoma
RU2616904C1 (ru) Способ определения инфаркта миокарда при проведении судебно-медицинской экспертизы
RU2612010C1 (ru) Способ определения угрозы формирования гемической анемии у беременных на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции, подавляющей активность SH-групп в эритроцитах и приводящей к снижению оксигенации гемоглобина
Lochnit et al. Immunohistochemical localization and differentiation of phosphocholine-containing antigens of the porcine, parasitic nematode, Ascaris suum
Yeremiev et al. Histomorphological characteristics of Ascaris lumbricoides and Taeniarhynchus saginatus
RU2405153C2 (ru) Способ приготовления проб крови с экстрактами пищевых продуктов

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20100227