CN106045960B - 一种从高良姜中提取二苯基庚烷类物质的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种从高良姜中提取二苯基庚烷类物质的方法，包括1)粉碎；2)亚临界萃取和3)大孔吸附树脂纯化步骤。本发明提供的方法可选择性地从高良姜中提取二苯基庚烷类物质，可以节省提取和纯化的成本，经济可行性较强；本发明采用亚临界提取与大孔树脂分离相结合的方式，适用于对热较为敏感的二苯基庚烷类化合物，在提取过程中有效成分的损耗少。

Description

一种从高良姜中提取二苯基庚烷类物质的方法
技术领域
本发明涉及一种从高良姜中提取二苯基庚烷类物质的方法,属于天然药物加工技术领域。
背景技术
高良姜是姜科山姜属多年生草本植物高良姜(Alpinia officinarum Hance)的根茎。其药用历史悠久，历代本草均有记载，高良姜味辛、性温，具有温胃散寒、消食止痛等功效，为“十大广药”之一。现代药理研究表明高良姜具抗氧化、抗溃疡、抗腹泻、抗肿瘤、抗菌、抗凝血、抗血栓、降血压及镇痛等作用。
近年来研究人员发现，高良姜中的二苯基庚烷类物质具有较强的镇痛、抗炎、抗菌、抗癌和抗氧化等作用，使之成为研究的热点。二苯基庚烷类物质是一类具有1,7-二取代芳基并以庚烷骨架为母体结构的物质，该类化合物主要存在于姜科的山姜属、姜黄属和姜属植物的根茎、果实、种子和花蕊中。二苯基庚烷类物质因为庚烷的5位与6位容易被羟基取代，也可以双键形式存在，所以对温度较敏感。
亚临界萃取技术是以亚临界状态的流体为溶媒，低温低压状态下从天然产物中提取目标组分的一种新技术，具有效率高、活性成分不易破坏、无杂质、无溶剂残留、环保、成本低等优点，易实现工业化生产。
目前，从高良姜中选择性提取二苯基庚烷类物质的研究报道较少。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种选择性高的从高良姜中提取二苯基庚烷类物质的方法。
实现本发明的目的可以通过采取如下技术方案达到：
一种从高良姜中提取二苯基庚烷类物质的方法，包括以下步骤：
1)粉碎：取洗净、干燥的高良姜的根茎部，粉碎至60-80目，得粉料；
2)亚临界萃取：将步骤1)的粉料，装入萃取袋，放入亚临界萃取釜，注入萃取剂浸没萃取袋，进行亚临界萃取,收集粗提物；
3)纯化：将大孔吸附树脂湿法填装至色谱柱，向上述色谱柱加入步骤2)的粗提物，进行洗脱，得到提取物。
作为优选，步骤1)中，所述高良姜为2年以上龄的高良姜。
作为优选，步骤1)中，取所述高良姜的根茎部的髓部进行粉碎。
作为优选，步骤2)中，所述萃取袋的孔径为200-220目。
作为优选，步骤2)中，所述萃取剂为正丁烷或丙烷。
作为优选，步骤2)中，所述亚临界萃取的萃取压力为0.2-0.8MPa，采用热水循环系统加热，萃取温度为20-60℃。
作为优选，步骤3)中，所述大孔吸附树脂的极性为弱极性。
作为优选，步骤3)中，所述大孔吸附树脂的型号为AB-8、DA201或HPD-400。
作为优选，步骤3)中，依次采用水、65-85％乙醇水溶液和乙醇进行洗脱，收集乙醇水溶液洗脱段即为提取物。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
1)本发明选择性地从高良姜中提取二苯基庚烷类物质，可以节省提取和纯化的成本，经济可行性较强；
2)本发明采用亚临界提取与大孔树脂分离相结合的方式，适用于对热较为敏感的二苯基庚烷类化合物，在提取过程中有效成分的损耗少。
附图说明
图1为实施例1提取物的总离子流色谱图；
图2为实施例1提取物中1,7-二苯基-3，5-二庚酮的TOF MS/MS二级质谱图；
图3为实施例1提取物中5-羟基-1,7-二苯基-3-庚酮的TOF MS/MS二级质谱图；
图4为实施例1提取物中5-羟基-1-苯基-7-(3,4-二羟基苯基)-3-庚酮的TOF MS/MS二级质谱图；
图5为实施例1提取物中5-羟基-1-苯基-7-(4-羟基苯基)-3-庚酮的TOF MS/MS二级质谱图；
图6为实施例1提取物中5-羟基-1-苯基-7-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-庚酮的TOFMS/MS二级质谱图；
图7为实施例1提取物中5-羟基-1-苯基-7-(3,4-二羟基-5-甲氧基苯基)-3-庚酮的TOF MS/MS二级质谱图。
具体实施方式
下面，结合附图以及具体实施方式，对本发明做进一步描述：
本发明提供一种从高良姜中提取二苯基庚烷类物质的方法，包括以下步骤：
1)粉碎：取洗净、干燥的高良姜的根茎部，粉碎至60-80目，得粉料；
2)亚临界萃取：将步骤1)的粉料，装入萃取袋，放入亚临界萃取釜，注入萃取剂浸没萃取袋，进行亚临界萃取,收集粗提物；
3)纯化：将大孔吸附树脂湿法填装至色谱柱，向上述色谱柱加入步骤2)的粗提物，进行洗脱，得到提取物。
本发明选择性地从高良姜中提取二苯基庚烷类物质，可以节省提取和纯化的成本，经济可行性较强；
本发明采用亚临界提取与大孔树脂分离纯化相结合的方式，适用于对热较为敏感的二苯基庚烷类化合物，在提取过程中有效成分的损耗少。
本发明中，采用弱极性的大孔吸附树脂，结合水、65-85％乙醇水溶液、乙醇的梯度洗脱液体系，高效率地、选择性地分离出二苯基庚烷类物质。其中水洗脱出来的主要是皂苷类、糖苷类物质；65-85％乙醇水溶液洗脱出来的主要是二苯基庚烷和黄酮类物质，其二苯基庚烷的含量为60-90％；乙醇洗脱出来的主要是挥发油成分。
实施例1：
一种从高良姜中提取二苯基庚烷类物质的方法，包括以下步骤：
1)粉碎：选取2年以上龄的高良姜，取洗净、干燥的高良姜的根茎部，分离出髓部，将髓部粉碎至60-80目，得粉料；
2)亚临界萃取：将步骤1)的粉料，装入200-220目萃取袋，放入亚临界萃取釜，用真空泵使亚临界的萃取釜和分离釜的压力达到0.2MPa，注入正丁烷浸没萃取袋，采用热水循环系统加热，萃取温度为40℃，循环萃取3次，进行亚临界萃取,收集粗提物；
3)纯化：将大孔吸附树脂湿法填装至色谱柱，向上述色谱柱加入步骤2)的粗提物，依次采用水、75％的乙醇水溶液、乙醇进行洗脱，收集80％的乙醇水溶液洗脱段即提取物。
步骤3)得到的提取物经过高效液相色谱-质谱分析，二苯基庚烷类化合物含量为83.22％。图1为提取物的总离子流色谱图。图2-图7为二苯基庚烷类物质的TOF MS/MS二级质谱图。
其中，图2为提取物中1,7-二苯基-3，5-二庚酮的TOF MS/MS二级质谱图；图3为提取物中5-羟基-1,7-二苯基-3-庚酮的TOF MS/MS二级质谱图；图4为5-羟基-1-苯基-7-(3,4-二羟基苯基)-3-庚酮的TOF MS/MS二级质谱图；图5为5-羟基-1-苯基-7-(4-羟基苯基)-3-庚酮的TOF MS/MS二级质谱图；图6为5-羟基-1-苯基-7-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-庚酮的TOF MS/MS二级质谱图；图7为5-羟基-1-苯基-7-(3,4-二羟基-5-甲氧基苯基)-3-庚酮的TOF MS/MS二级质谱图。
实施例2：
一种从高良姜中提取二苯基庚烷类物质的方法，包括以下步骤：
1)粉碎：选取2年以上龄的高良姜，取洗净、干燥的高良姜的根茎部，分离出髓部，将髓部粉碎至60-80目，得粉料；
2)亚临界萃取：将步骤1)的粉料，装入200-220目萃取袋，放入亚临界萃取釜，用真空泵使亚临界的萃取釜和分离釜的压力达到0.8MPa，注入正丁烷浸没萃取袋，采用热水循环系统加热，萃取温度为50℃，循环萃取3次，进行亚临界萃取,收集粗提物；
3)纯化：将DA-201大孔吸附树脂湿法填装至色谱柱，向上述色谱柱加入步骤2)的粗提物，依次采用水、80％的乙醇水溶液、乙醇进行洗脱，收集80％的乙醇水溶液洗脱段即提取物。
步骤3)得到的提取物经过高效液相色谱-质谱分析，二苯基庚烷类化合物含量为85.76％。
实施例3：
一种从高良姜中提取二苯基庚烷类物质的方法，包括以下步骤：
1)粉碎：选取2年以上龄的高良姜，取洗净、干燥的高良姜的根茎部，分离出髓部，将髓部粉碎至60-80目，得粉料；
2)亚临界萃取：将步骤1)的粉料，装入200-220目萃取袋，放入亚临界萃取釜，用真空泵使亚临界的萃取釜和分离釜的压力达到0.4MPa，注入丙烷浸没萃取袋，采用热水循环系统加热，萃取温度为50℃，循环萃取3次，进行亚临界萃取,收集粗提物；
3)纯化：将HPD-400大孔吸附树脂湿法填装至色谱柱，向上述色谱柱加入步骤2)的粗提物，依次采用水、60％的乙醇水溶液、乙醇进行洗脱，收集80％的乙醇水溶液洗脱段即提取物。
步骤3)得到的提取物经过高效液相色谱-质谱分析，二苯基庚烷类化合物含量为82.43％。
实施例4：
一种从高良姜中提取二苯基庚烷类物质的方法，包括以下步骤：
1)粉碎：选取2年以上龄的高良姜，取洗净、干燥的高良姜的根茎部，分离出髓部，将髓部粉碎至60-80目，得粉料；
2)亚临界萃取：将步骤1)的粉料，装入200-220目萃取袋，放入亚临界萃取釜，用真空泵使亚临界的萃取釜和分离釜的压力达到0.6MPa，注入丙烷浸没萃取袋，采用热水循环系统加热，萃取温度为60℃，循环萃取3次，进行亚临界萃取,收集粗提物；
3)纯化：将AB-8大孔吸附树脂湿法填装至色谱柱，向上述色谱柱加入步骤2)的粗提物，依次采用水、85％的乙醇水溶液、乙醇进行洗脱，收集85％的乙醇水溶液洗脱段即提取物。
步骤3)得到的提取物经过高效液相色谱-质谱分析，二苯基庚烷类化合物含量为83.29％。
对比例1：
对比例1与实施例1不同的是，步骤1)中，取洗净、干燥的高良姜的根茎部，分离出皮层，将皮层粉碎至60-80目，得粉料。
提取物经过高效液相色谱-质谱分析，二苯基庚烷类化合物含量为26.1％。
对比例1与实施例1得到的提取物的主要成分的检出情况如下表所示，
表1 高良姜中髓部及皮层主要成分的检出情况
注：“+”表示有此化合物，“-”表示无此化合物。
由实施例1与对比例1的提取物的主要成分比较可知，高良姜的髓部含有较多种的二苯基庚烷类化合物，而其皮层含有的二苯基庚烷类化合物组分种类较少。
对比例1与实施例1得到的提取物中，均含有的二苯基庚烷成分5-羟基-1-苯基-7-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-庚酮，在髓部的提取物中，其含量为3.56mg/g，而在皮层的提取物中，其含量为2.25mg/g。
由此可见，以高良姜的髓部作为主要的提取部位，其二苯基庚烷类物质的提取效率高、活性成分种类多。
对比例2：
对比例2与实施例1不同的是，步骤3)中，大孔吸附树脂的型号为HPD600。
提取物经过高效液相色谱-质谱分析，二苯基庚烷类化合物含量为32.67％。
HPD600属于极性吸附树脂，相对于实施例1-3使用的弱极性吸附树脂，采用HPD600的分离效果不佳，不能选择性地分离出二苯庚烷类物质。
对比例3：
对比例3与实施例1不同的是，步骤3)中，直接采用80％的乙醇水溶液进行洗脱。
提取物经过高效液相色谱-质谱分析，二苯基庚烷类化合物含量为54.35％。
直接使用80％的乙醇水溶液作洗脱液，高良姜中二苯基庚烷类物质的分离选择性差。
对于本领域的技术人员来说，可根据以上描述的技术方案以及构思，做出其它各种相应的改变以及变形，而所有的这些改变以及变形都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种从高良姜中提取二苯基庚烷类物质的方法，包括以下步骤：
1）粉碎：取洗净、干燥的高良姜的根茎部的髓部，粉碎至60-80目，得粉料；
2）亚临界萃取：将步骤1）的粉料，装入萃取袋，放入亚临界萃取釜，注入萃取剂浸没萃取袋，进行亚临界萃取,收集粗提物；
3）纯化：将大孔吸附树脂湿法填装至色谱柱，向上述色谱柱加入步骤2）的粗提物，进行洗脱，得到提取物。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1）中，所述高良姜为2年以上龄的高良姜。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2）中，所述萃取袋的孔径为200-220目。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2）中，所述萃取剂为正丁烷或丙烷。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2）中，所述亚临界萃取的萃取压力为0.2-0.8MPa，采用热水循环系统加热，萃取温度为20-60℃。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3）中，所述大孔吸附树脂的极性为弱极性。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤3）中，所述大孔吸附树脂的型号为AB-8、DA201或HPD-400。
8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤3）中，依次采用水、65-85vt%乙醇水溶液和乙醇进行洗脱，收集乙醇水溶液洗脱段即为提取物。
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Inventor before: Fu Yunfei

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