CN108546304A - 一种利用陈皮制备聚阿拉伯半乳糖醛酸的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用陈皮制备聚阿拉伯半乳糖醛酸的方法。将陈皮粉碎,加水浸提,分离并收集浸提液后将其浓缩,加入乙醇沉淀多糖类物质,收集沉淀即得到陈皮粗多糖,采用阴离子交换柱纯化陈皮粗多糖,用水、NaCl溶液梯度洗脱,收集NaCl溶液洗脱组分,浓缩后继续用凝胶过滤柱纯化,水洗脱,收集目标组分,浓缩干燥得到聚阿拉伯半乳糖醛酸。本发明从陈皮中制备分离得到聚阿拉伯半乳糖醛酸,其产率为6~45g/kg(纯度为80~95%)。本发明为聚阿拉伯半乳糖醛酸的制备提供了一种新的方法,对于推动陈皮的深加工利用,提升陈皮产品附加值,促进该行业的可持续发展具有重要的意义。
Description
技术领域:
本发明属于农产品加工领域,具体涉及一种利用陈皮制备聚阿拉伯半乳糖醛酸的方法。
背景技术:
陈皮为芸香科柑橘属植物橘(Citrus reticulata Blanco)的成熟果皮,主要产于中国南方多个省份。陈皮是一味重要的传统中药材,也是药食同源食品。可以治疗呕吐,改善胃肠功能,促进消化。对于心血管疾病有很好的疗效,可有效降低血脂、血压。另外,还有抗菌消炎、祛痰平喘等功效。用在烹饪调味方面,陈皮可以去除腥膻味,提升食物香味。目前有关陈皮活性物质的报道,集中在芳香精油、甲氧基黄酮类物质等,对于其主要的多糖类成分结构特征,仍未被鉴定。因此,有必要开展陈皮多糖的分离纯化与结构鉴定研究,揭示主要多糖的结构,这对于明确陈皮化学组成具有重要意义。
发明内容:
本发明的目的是提供一种利用陈皮制备聚阿拉伯半乳糖醛酸的方法。
本发明发现并制备了陈皮中的一种主要多糖,经NMR解析确定结构为聚阿拉伯半乳糖醛酸,其化学结构如式(I)所示:
本发明的制备聚阿拉伯半乳糖醛酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:
将陈皮粉碎,加水浸提,分离并收集浸提液后将其浓缩,加入乙醇沉淀多糖类物质,收集沉淀即得到陈皮粗多糖,采用阴离子交换柱纯化陈皮粗多糖,用水、NaCl溶液梯度洗脱,收集NaCl溶液洗脱组分,浓缩后继续用凝胶过滤柱纯化,水洗脱,收集目标组分,浓缩干燥得到聚阿拉伯半乳糖醛酸。
优选,所述的“采用阴离子交换柱纯化陈皮粗多糖,用水、NaCl溶液梯度洗脱,收集NaCl溶液洗脱组分,浓缩后继续用凝胶过滤柱纯化,水洗脱,收集目标组分,浓缩干燥得到聚阿拉伯半乳糖醛酸”是将陈皮粗多糖采用阴离子交换柱纯化,先用水洗脱去除中性多糖组分,再用NaCl溶液洗脱,收集该洗脱组分,浓缩后用凝胶过滤柱纯化,以水作为溶剂进行洗脱,收集目标多糖组分,浓缩后干燥得到聚阿拉伯半乳糖醛酸。
优选,所述的将陈皮粉碎,加水浸提是将陈皮粉碎后,加入1~30倍质量的水中,25℃~100℃浸提1~120小时。
优选,所述的分离并收集浸提液中的分离是采用离心或过滤的方式。
优选,所述的加入乙醇进行沉淀是加入乙醇至浸提液的终浓度为体积分数20%~90%进行沉淀。
所述的陈皮为新鲜陈皮或者干燥后的陈皮。
所述的NaCl溶液优选为0.2M NaCl水溶液。
本发明还提供了陈皮在制备聚阿拉伯半乳糖醛酸中的应用。
本发明所获得的聚阿拉伯半乳糖醛酸具有良好的免疫增强活性。
本发明从陈皮中制备分离得到聚阿拉伯半乳糖醛酸,其产率为6~45g/kg(纯度为80~95%)。本发明为聚阿拉伯半乳糖醛酸的制备提供了一种新的方法,对于推动陈皮的深加工利用,提升陈皮产品附加值,促进该行业的可持续发展具有重要的意义。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明,而不是对本发明的限制。
实施例1:聚阿拉伯半乳糖醛酸制备分离和结构鉴定
一、聚阿拉伯半乳糖醛酸的制备分离
1)选料:选择新鲜陈皮,粉碎;
2)浸提:加入陈皮15倍质量的水,50℃浸提2小时,离心,收集浸提液;
3)有机溶剂沉淀:将上述浸提液浓缩,加入乙醇至终浓度为体积分数60%(浸提液:乙醇=60:40,v/v),4℃放置12小时。离心,收集沉淀,即为陈皮粗多糖;
4)柱纯化:陈皮粗多糖采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱纯化,以水/NaCl溶液为洗脱溶剂,先用水洗脱,然后用0.2M NaCl溶液洗脱,收集NaCl溶液洗脱的组分,浓缩后上Sephadex G100凝胶过滤柱(15×460mm),用水进行洗脱,流速为0.5ml/min,收集50~160min流出的多糖组分,浓缩后干燥即得到多糖A(聚阿拉伯半乳糖醛酸)。
采用该方法获得的聚阿拉伯半乳糖醛酸产率为26~35g/kg,纯度为80~95%。
二、多糖A(聚阿拉伯半乳糖醛酸)的结构鉴定
多糖A(聚阿拉伯半乳糖醛酸)可溶于水,该多糖的1H NMR(500MHz,D2O)和13C NMR(125MHz)结果见表1。
表1.陈皮聚阿拉伯半乳糖醛酸的13C与1H谱化学位移
依据NMR信息,鉴定该多糖的结构如式(I)所示,名称为聚阿拉伯半乳糖醛酸。
实施例2:
1)选料:选择新鲜陈皮,粉碎;
2)浸提:加入陈皮1倍质量的水,室温(25℃)浸提120小时,过滤,收集浸提液;
3)有机溶剂沉淀:将上述浸提液浓缩,加入乙醇至终浓度为体积分数50%(浸提液:乙醇=50:50,v/v),4℃放置12小时。离心,收集沉淀,即为陈皮粗多糖;
4)柱纯化:陈皮粗多糖采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱纯化,以水/NaCl溶液为洗脱溶剂,先用水洗脱,然后用0.2M NaCl溶液洗脱,收集NaCl溶液洗脱的组分,浓缩后上Sephadex G100凝胶过滤柱,用水进行洗脱,收集目标多糖组分,浓缩后干燥即得到多糖A(聚阿拉伯半乳糖醛酸)。结构鉴定同实施例1。
采用该方法获得的聚阿拉伯半乳糖醛酸产率为6~16g/kg,纯度为80~95%。
实施例3:
1)选料:选择新鲜陈皮,粉碎;
2)浸提:加入陈皮30倍质量的水,100℃浸提5小时,过滤,收集浸提液;
3)有机溶剂沉淀:将上述浸提液浓缩,加入乙醇至终浓度为体积分数90%(浸提液:乙醇=90:10,v/v),4℃放置12小时。离心,收集沉淀,即为陈皮粗多糖;
4)柱纯化:陈皮粗多糖采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱纯化,以水/NaCl溶液为洗脱溶剂,先用水洗脱,然后用0.2M NaCl溶液洗脱,收集NaCl溶液洗脱的组分,浓缩后上Sephadex G100凝胶过滤柱,用水进行洗脱,收集目标多糖组分,浓缩后干燥即得到多糖A(聚阿拉伯半乳糖醛酸)。结构鉴定同实施例1。
采用该方法获得的聚阿拉伯半乳糖醛酸产率为32~45g/kg,纯度为80~95%。
实施例4:
1)选料:选择干燥陈皮,粉碎;
2)浸提:加入陈皮30倍质量的水,60℃浸提1小时,过滤,收集浸提液;
3)有机溶剂沉淀:将上述浸提液浓缩,加入乙醇至终浓度为体积分数20%(浸提液:乙醇=20:80,v/v),4℃放置12小时。离心,收集沉淀,即为陈皮粗多糖;
4)柱纯化:陈皮粗多糖采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱纯化,以水/NaCl溶液为洗脱溶剂,先用水洗脱,然后用0.2M NaCl溶液洗脱,收集NaCl溶液洗脱的组分,浓缩后上Sephadex G100凝胶过滤柱,用水进行洗脱,收集目标多糖组分,浓缩后干燥即得到多糖A(聚阿拉伯半乳糖醛酸)。结构鉴定同实施例1。
采用该方法获得的聚阿拉伯半乳糖醛酸产率为11~23g/kg,纯度为80~95%。
Claims (10)
1.聚阿拉伯半乳糖醛酸,其化学结构如式(I)所示:
2.一种制备权利要求1所述的聚阿拉伯半乳糖醛酸的方法,其特征在于,所述的聚阿拉伯半乳糖醛酸是从陈皮中分离得到的。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,将陈皮粉碎,加水浸提,分离并收集浸提液后将其浓缩,加入乙醇沉淀多糖类物质,收集沉淀即得到陈皮粗多糖,采用阴离子交换柱纯化陈皮粗多糖,用水、NaCl溶液梯度洗脱,收集NaCl溶液洗脱组分,浓缩后继续用凝胶过滤柱纯化,水洗脱,收集目标组分,浓缩干燥得到聚阿拉伯半乳糖醛酸。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的“采用阴离子交换柱纯化陈皮粗多糖,用水、NaCl溶液梯度洗脱,收集NaCl溶液洗脱组分,浓缩后继续用凝胶过滤柱纯化,水洗脱,收集目标组分,浓缩干燥得到聚阿拉伯半乳糖醛酸”是将陈皮粗多糖采用阴离子交换柱纯化,先用水洗脱去除中性多糖组分,再用NaCl溶液洗脱,收集该洗脱组分,浓缩后用凝胶过滤柱纯化,以水作为溶剂进行洗脱,收集目标多糖组分,浓缩后干燥得到聚阿拉伯半乳糖醛酸。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的将陈皮粉碎,加水浸提是将陈皮粉碎后,加入1~30倍质量的水中,25℃~100℃浸提1~120小时。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的分离并收集浸提液中的分离是采用离心或过滤的方式。
7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的加入乙醇沉淀是加入乙醇至浸提液的终浓度为体积分数20%~90%进行沉淀。
8.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的陈皮为新鲜陈皮或者干燥后的陈皮。
9.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的NaCl溶液为0.2M NaCl水溶液。
10.陈皮在制备聚阿拉伯半乳糖醛酸中的应用。
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20180918 |
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