CN105885851A - 一种菠萝皮提取物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从菠萝皮中提取多酚类物质的方法，该方法包括步骤，取菠萝皮渣，用乙醇水溶液提取后去除乙醇得到多酚类物质粗提物；将多酚类物质粗提物用乙酸乙酯萃取，得到初级纯化的多酚类物质；将初级纯化的多酚类物质用D101树脂进行柱层析，冷冻干燥得多酚类物质。本发明的从菠萝皮中提取多酚类物质的方法，合理充分地利用了菠萝加工产业的废弃物，并且制备过程中多酚类物质总回收率在60％以上，所得的多酚类物质具有优异的抗氧化效果。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种菠萝皮提取物及其制备方法。
背景技术
菠萝(Ananas comosus)，是凤梨科多年生常绿草本植物，每株在中心结一个果实。其果实呈圆筒形，由许多子房和花轴聚合而长成，是一种复合果。菠萝原产于中、南美洲热带地区，适宜种植于南北纬30°之间。近年来，我国菠萝种植业发展迅速，每年产量近百万吨。由于消费习惯的改变，目前菠萝加工产品由罐头向浓缩果汁转变。菠萝果皮有众多的花器(俗称果眼或菠萝钉)，坚硬棘手，食用前必须削皮，菠萝加工的副产物菠萝皮中，含有丰富的蛋白质、脂肪、粗纤维、糖类及其它无机元素。可以用于制备菠萝果酒、果醋等，也可以用于乙醇发酵、提取菠萝蛋白酶、制备果胶、提取色素等。
多酚类是指一组植物中化学元素的统称，因具有多个酚基团而得名。多酚在一些植物中起到了呈现颜色的作用。多酚类物质具有很强的抗氧化作用，被称为“第七类营养素”，其主要活性成分为多酚类化合物，指分子结构中有若干个酚性羟基的植物成分的总称，包括黄酮类、单宁类、酚酸类以及花色苷类等。目前关于菠萝皮中多酚类化合物的研究还不多见。
发明内容
有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种从菠萝皮中提取多酚类物质的方法。
为实现上述目的，本发明提供了一种从菠萝皮中提取多酚类物质的方法，该方法包括步骤：
(1)制备粗提物
取菠萝皮渣，用乙醇水溶液提取后去除乙醇得到多酚类物质粗提物；
(2)初级纯化
将多酚类物质粗提物用乙酸乙酯萃取，得到初级纯化的多酚类物质；
(3)二级纯化
将步骤(2)得到的初级纯化的多酚类物质用D101树脂进行柱层析，冷冻干燥得多酚类物质。
优选地，步骤(1)中，提取过程中乙醇浓度在70％以上。
优选地，步骤(1)中，料液体积比为1∶3-10。
优选地，步骤(2)中，调节多酚类物质粗提物的pH为2-3后进行萃取。
优选地，步骤(3)中，使用D101树脂进行柱层析过程中，上柱液pH为2.5-4.5。
优选地，所述步骤(1)中，取菠萝皮渣，用80-95％(v/v)的乙醇水溶液在50℃-70℃下浸泡提取1-2h后，过滤取上清液，真空旋蒸去除乙醇，得到多酚类物质粗提物。
优选地，所述步骤(2)中，将多酚类物质粗提物中加入2-3倍体积的水，调节pH为2.5后，加入1/3体积的乙酸乙酯进行萃取。
优选地，所述步骤(3)中，用水溶解经初级纯化的多酚类物质，用盐酸调整pH到2.5，上大孔吸附树脂D101层析柱，上柱后先用5％-10％的乙醇水溶液洗脱除杂，再用20-30％的乙醇水溶液将多酚类物质集中洗下，冷冻干燥得粉末状物质即为多酚类物质。
技术效果
本发明的从菠萝皮中提取多酚类物质的方法，合理充分地利用了菠萝加工产业的废弃物，并且制备过程中多酚类物质总回收率在60％以上，所得的多酚类物质具有优异的抗氧化效果。
具体实施方式
实施例1
取2kg菠萝皮渣，水洗后滤干，用3L 75％(v/v)乙醇在60℃下浸泡提取2h后，过滤取上清液，重复提取一次，合并两次上清液，在30℃下真空旋蒸至无醇味儿，得到多酚类物质粗提物。
在多酚类物质粗提物中加入3倍体积的水，用盐酸调节pH至3，过滤后用1/3体积的乙酸乙酯萃取两次，振荡混合后取酯相在30℃下旋蒸除去乙酸乙酯得多酚类物质粗品；用水溶液溶解多酚类物质粗品，并用盐酸将其pH调整到3。
将多酚类物质粗品的溶液上大孔吸附树脂D101(Φ80×350mm)层析柱，上柱后先用4BV含5％的乙醇水溶液洗脱除杂，再用3BV 30％的乙醇水溶液将多酚类物质集中洗下。
将上述多酚类物质混合液在30-35℃下真空旋蒸至无醇味儿，用盐酸调节上述混合液的pH至3，过滤后用1/2体积的乙酸乙酯萃取两次，取酯相在30℃下旋蒸除去乙酸乙酯用水溶解后冷冻干燥得淡棕色粉末状物质即为多酚类物质。
实施例2
取3kg菠萝皮渣，水洗后滤干，用10L 95％(v/v)乙醇在50℃下浸泡提取2h后，过滤取上清液，重复提取一次，合并两次上清液，在30-35℃下真空旋蒸至无醇味儿，得到多酚类物质粗提物。
在多酚类物质粗提物中加入3倍体积的水，用盐酸调节pH至2.5，过滤后用1/3体积的乙酸乙酯萃取两次，振荡混合后取酯相在30℃下旋蒸除去乙酸乙酯得多酚类物质粗品；用水溶液溶解多酚类物质粗品，并用盐酸将其pH调整到2.5。
将多酚类物质粗品的溶液上大孔吸附树脂D101(Φ150×550mm)层析柱，上柱后先用3BV含10％的乙醇水溶液洗脱除杂，再用3BV 30％的乙醇水溶液将多酚类物质集中洗下。
将上述多酚类物质混合液在30-35℃下真空旋蒸至无醇味儿，用盐酸调节上述混合液的pH至3，过滤后用1/2体积的乙酸乙酯萃取两次，取酯相在30℃下旋蒸除去乙酸乙酯用水溶解后冷冻干燥得淡棕色粉末状物质即为多酚类物质。
实施例3
取2kg菠萝皮渣，水洗后滤干，用8L 85％(v/v)乙醇在65℃下浸泡提取2h后，过滤取上清液，重复提取一次，合并两次上清液，在30℃下真空旋蒸至无醇味儿，得到多酚类物质粗提物。
在多酚类物质粗提物中加入2倍体积的水，用盐酸调节pH至2，过滤后用1/3体积的乙酸乙酯萃取两次，振荡混合后取酯相在30℃下旋蒸除去乙酸乙酯得多酚类物质粗品；用水溶液溶解多酚类物质粗品，并用盐酸将其pH调整到2。
将多酚类物质粗品的溶液上大孔吸附树脂D101(Φ80×350mm)层析柱，上柱后先用5BV含5％的乙醇水溶液洗脱除杂，再用2BV 30％的乙醇水溶液将多酚类物质集中洗下。
将上述多酚类物质混合液在30-35℃下真空旋蒸至无醇味儿，用盐酸调节上述混合液的pH至2，过滤后用1/2体积的乙酸乙酯萃取两次，取酯相在30℃下旋蒸除去乙酸乙酯用水溶解后冷冻干燥得淡棕色粉末状物质即为多酚类物质。
实施例4
取1kg菠萝皮渣，水洗后滤干，用5L 70％(v/v)乙醇在70℃下浸泡提取2h后，过滤取上清液，重复提取一次，合并两次上清液，在30℃下真空旋蒸至无醇味儿，得到多酚类物质粗提物。
在多酚类物质粗提物中加入2倍体积的水，用盐酸调节pH至3，过滤后用1/3体积的乙酸乙酯萃取两次，振荡混合后取酯相在30℃下旋蒸除去乙酸乙酯得多酚类物质粗品；用水溶液溶解多酚类物质粗品，并用盐酸将其pH调整到3。
将多酚类物质粗品的溶液上大孔吸附树脂D101(Φ10×350mm)层析柱，上柱后先用4BV含5％的乙醇水溶液洗脱除杂，再用3BV 30％的乙醇水溶液将多酚类物质集中洗下。
将上述多酚类物质混合液在30-35℃下真空旋蒸至无醇味儿，用盐酸调节上述混合液的pH至3，过滤后用1/2体积的乙酸乙酯萃取两次，取酯相在30℃下旋蒸除去乙酸乙酯用水溶解后冷冻干燥得淡棕色粉末状物质即为多酚类物质。
实施例5
取5kg菠萝皮渣，水洗后滤干，用30L 70％(v/v)乙醇在50℃下浸泡提取2h后，过滤取上清液，重复提取一次，合并两次上清液，在30℃下真空旋蒸至无醇味儿，得到多酚类物质粗提物。
在多酚类物质粗提物中加入3倍体积的水，用盐酸调节pH至3，过滤后用1/3体积的乙酸乙酯萃取两次，振荡混合后取酯相在30℃下旋蒸除去乙酸乙酯得多酚类物质粗品；用水溶液溶解多酚类物质粗品，并用盐酸将其pH调整到3。
将多酚类物质粗品的溶液上大孔吸附树脂D101(Φ150×550mm)层析柱，上柱后先用4BV含8％的乙醇水溶液洗脱除杂，再用4BV 25％的乙醇水溶液将多酚类物质集中洗下。
将上述多酚类物质混合液在30-35℃下真空旋蒸至无醇味儿，用盐酸调节上述混合液的pH至3，过滤后用1/2体积的乙酸乙酯萃取两次，取酯相在30℃下旋蒸除去乙酸乙酯用水溶解后冷冻干燥得淡棕色粉末状物质即为多酚类物质。
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。
Claims (8)
1.一种从菠萝皮中提取多酚类物质的方法，该方法包括步骤：
(1)制备粗提物
取菠萝皮渣，用乙醇水溶液提取后去除乙醇得到多酚类物质粗提物；
(2)初级纯化
将多酚类物质粗提物用乙酸乙酯萃取，得到初级纯化的多酚类物质；
(3)二级纯化
将步骤(2)得到的初级纯化的多酚类物质用D101树脂进行柱层析，冷冻干燥得多酚类物质。
2.如权利要求1所述的方法，其中，步骤(1)中，提取过程中乙醇浓度在70％以上。
3.如权利要求1所述的方法，其中，步骤(1)中，料液体积比为1∶3-10。
4.如权利要求1所述的方法，其中，步骤(2)中，调节多酚类物质粗提物的pH为2-3后进行萃取。
5.如权利要求1所述的方法，其中，步骤(3)中，使用D101树脂进行柱层析过程中，上柱液pH为2.5-4.5。
6.如权利要求1所述的方法，其中，所述步骤(1)中，取菠萝皮渣，用80-95％(v/v)的乙醇水溶液在50℃-70℃下浸泡提取1-2h后，过滤取上清液，真空旋蒸去除乙醇，得到多酚类物质粗提物。
7.如权利要求1所述的方法，其中，所述步骤(2)中，将多酚类物质粗提物中加入2-3倍体积的水，调节pH为2.5后，加入1/3体积的乙酸乙酯进行萃取。
8.如权利要求1所述的方法，其中，所述步骤(3)中，用水溶解经初级纯化的多酚类物质，用盐酸调整pH到2.5，上大孔吸附树脂D101层析柱，上柱后先用5％-10％的乙醇水溶液洗脱除杂，再用20-30％的乙醇水溶液将多酚类物质集中洗下，冷冻干燥得粉末状物质即为多酚类物质。
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