CN105769955A - 作为有效成分包含人参皂苷含量得到增进的人参提取物的组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及作为有效成分包含人参皂苷含量得到增进的人参提取物的组合物和上述人参提取物的制备方法，具有抗炎活性、抗氧化活性、皮肤弹力增进、皱纹改善活性，皮脂分泌抑制活性，毛孔缩小活性或痤疮缓解及痤疮皮肤改善活性。上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，含有2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。

Description

作为有效成分包含人参皂苷含量得到增进的人参提取物的组合物
技术领域
本说明书公开作为有效成分包含人参皂苷含量得到增进的人参提取物，并且具有抗炎活性、抗氧化活性、皮肤弹力增进及皱纹改善活性、皮脂分泌抑制活性、毛孔缩小活性或痤疮缓解及痤疮皮肤改善活性的组合物和上述人参提取物的制备方法。
背景技术
炎症是若细胞或组织由某种原因受到损伤，则以将其反应最小化，并且将损伤的部位恢复到原状的一系列的防御目的来呈现，并产生神经、血管、淋巴管、体液反应及细胞反应，最终，导致产生疼痛、浮肿、发红、发热等来诱发功能障碍。
作为诱发炎症的原因有基于外伤、冻伤、烧伤、放射能等的物理性因素和如酸(acid)等基于化学物质的化学性因素及基于抗体反应的免疫学因素，除此之外，还基于激素失衡发生。由外部刺激受损的多个细胞分泌的多种化学媒介物质发生血管扩张，并且随着透射性提高，抗体、补体、血浆(plasma)及多个吞噬细胞向炎症部位靠近，这种现象成为红斑的原因。并且，在炎症中，由紫外线或活性氧、自由基等氧化应激等激活炎症性因子而产生各种疾病及皮肤的老化。
另一方面，皮肤根据皮肤表面的状态分类为干性、中性、油性或复合性等多种类型，这是根据天然保湿因子(NMF，NaturalMoisturingFactor)和皮脂(Sebum)的量来确定。若天然保湿因子和皮脂的量达到均衡，则维持湿润和柔和的状态，相反若皮脂分泌得过多，则容易形成油性皮肤或痤疮皮肤。若皮肤分泌过多，则因油腻、浮妆以及毛孔的扩大而使脸部显得凌乱。
皮脂分泌过多的原因有多种多样，其中已知的为，在皮脂抑制腺的活性中，因与皮脂分泌促进有关的激素之一即二氢睾酮的量而使皮脂腺的细胞激活，从而发生皮脂过分泌。5α-还原酶(5α-Reductase)存在于皮脂腺、毛囊、前列腺、附睾等男性激素反应性组织，并且作为参与使男性激素之一的睾酮(Testosterone)还原成二氢睾酮(Dihydrotestosteron：DHT)的酶，其转换需要还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)。已知在骨骼肌增加和精子形成等中睾酮参与其中，并且在痤疮、皮脂增加及前列腺增生症等中二氢睾酮参与相应组织中(Dianeetal；J.InvestDermatol.775-778,1995.Bruchovsky,Netal；J.B.C.243,2112-2121,1968)。并且在皮肤的皮脂腺中，睾酮被5α-还原酶转换成二氢睾酮，与存在于细胞质内的受体蛋白质(Receptor)结合，从而进入核内激活脂腺细胞来促进分化，由此过分泌皮脂腺内的皮脂(Dianeetal；J.InvestDermatol.105；209-214)。
真皮作为由位于表皮下面的结合组织形成的部分，由被称为细胞外基质的巨大分子的网状结构所填满。形成细胞外基质的部分为被称为糖胺聚糖(Glycosaminoglycan)或黏多糖类(Mucopolysaccharide)的多糖类和胶原蛋白、弹性蛋白(Elastin)的纤维状蛋白质，其中胶原蛋白对细胞外基质的弹力性、张力产生大影响。因此，若由外部或内部的影响胶原蛋白受到损伤，则产生皱纹或降低皮肤弹力而使皮肤变得松弛。毛孔的大小变大的现象是真皮的基质结构变得松弛，从而导致毛孔周围的皮肤变得松弛而呈现的现象。
专利文献1：韩国登录特许第10-0813997号
发明内容
在一实施方式中，本说明书的目的在于，提供作为有效成分包含人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc及人参皂苷Rg1含量得到增进的人参提取物的组合物。
在另一实施方式中，本说明书的目的在于，提供作为有效成分包含人参提取物并且抗炎活性得到增进的组合物。
在另一实施方式中，本说明书的目的在于，提供作为有效成分包含人参提取物并且抗氧化活性得到增进的组合物。
在另一实施方式中，本说明书的目的在于，提供作为有效成分包含人参提取物并且皮肤弹力及皱纹改善活性得到增进的组合物。
在另一实施方式中，本说明书的目的在于，提供作为有效成分包含人参提取物并且皮脂分泌抑制活性得到增进的组合物。
在另一实施方式中，本说明书的目的在于，提供作为有效成分包含人参提取物并且毛孔缩小活性得到增进的组合物。
在另一实施方式中，本说明书的目的在于，提供作为有效成分包含人参提取物并且痤疮缓解及痤疮皮肤改善活性得到增进的组合物。
在一实施方式中，本说明书中公开的技术涉及作为有效成分包含人参提取物的抗炎组合物，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
在一实施方式中，本说明书公开的技术涉及作为有效成分包含人参提取物的皮脂分泌抑制用组合物，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
在一实施方式中，本说明书公开的技术涉及作为有效成分包含人参提取物的毛孔收缩用组合物，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术涉及作为有效成分包含人参提取物的抗氧化组合物，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术涉及作为有效成分包含人参提取物的皮肤弹力增进及皱纹改善用组合物，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术涉及作为有效成分包含人参提取物的痤疮缓解及痤疮皮肤改善用组合物，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术涉及作为有效成分包含人参提取物的组合物的抗炎用用途，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术涉及作为有效成分包含人参提取物的组合物的皮脂分泌抑制用用途，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术涉及作为有效成分包含人参提取物的组合物的毛孔缩小用用途，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术涉及作为有效成分包含人参提取物的组合物的抗氧化用用途，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术涉及作为有效成分包含人参提取物的组合物的皮肤弹力增进及皱纹改善用用途，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术涉及作为有效成分包含人参提取物的组合物的痤疮缓解及痤疮皮肤改善用用途，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
根据示例性的一实例，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，还可包含6重量％以上的人参皂苷Re。
根据示例性的一实例，上述人参提取物可以是从人参的根部提取的。
根据示例性的一实例，上述组合物可以为药学组合物。
根据示例性的一实例，上述组合物可以为化妆品组合物。
根据示例性的一实例，上述组合物可以为食品组合物。
根据示例性的一实例，上述人参提取物的制备方法可包括：在人参中添加水、有机溶剂或水和有机溶剂的混合溶剂之后，依次实施加压提取工序及减压提取工序来提取的步骤；以及在将提取出的提取物溶解于水中之后，利用有机溶剂进行提取，并去除有机溶剂层之后，将水层再次利用有机溶剂进行提取的步骤。
根据示例性的一实例，在上述加压提取工序及减压提取工序中，可分别依次反复实施20至40分钟来进行提取。
根据示例性的一实例，当进行上述加压提取工序时，压力可以为1至3kgf/cm2，当进行减压提取工序时，压力可以为550至650mmHg。
根据示例性的一实例，当进行上述加压提取工序及减压提取工序时，提取温度可以为65至85℃。
在一实施方式中，本说明书公开的技术具有如下效果：提供作为有效成分包含人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc及人参皂苷Rg1含量得到增进的人参提取物的组合物。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术具有如下效果：提供作为有效成分包含人参提取物并且抗炎活性得到增进的组合物。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术具有如下效果：提供作为有效成分包含人参提取物并且抗氧化活性得到增进的组合物。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术具有如下效果：提供作为有效成分包含人参提取物并且皮肤弹力增进及皱纹改善活性得到增进的组合物。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术具有如下效果：提供作为有效成分包含人参提取物并且皮脂分泌抑制活性得到增进的组合物。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术具有如下效果：提供作为有效成分包含人参提取物并且毛孔收缩活性得到增进的组合物。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术具有如下效果：提供作为有效成分包含人参提取物并且痤疮缓解及痤疮皮肤改善活性得到增进的组合物。
附图说明
图1为按人参皂苷的种类表示各化学结构的结构式。
图2为本说明书实施例1的人参提取物所含的人参皂苷的HPLC分析曲线图。
图3为本说明书比较例1的普通人参提取物所含的人参皂苷的HPLC分析曲线图。
图4为表示本说明书一实施例的人参提取物(实施例1)和比较例的普通人参提取物(比较例1)的NO生成抑制功效的曲线图。
图5为表示根据本说明书一实施例的人参提取物(实施例1)和比较例的普通人参提取物(比较例1)浓度的NO生成抑制功效的曲线图。
图6为表示根据本说明书一实施例的人参提取物(实施例1)浓度的iNOS及COX-2表达抑制功效评价(免疫印迹(western-blotting))的图。
具体实施方式
以下，对本发明进行详细说明。
在一实施方式中，本说明书公开的技术为作为有效成分包含人参提取物的抗炎组合物，提供如下抗炎组合物，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
人参皂苷(ginsenoside)是作为糖苷(glycoside)的一种的皂苷之一，来源于植物的植物的根、茎、叶、皮及种子等。例如，人参皂苷有人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1等多种种类，根据植物的种类、栽培条件、加工条件、提取方法、人参的部位等，存在的人参皂苷的种类及含量不同。图1中示出上述各人参皂苷的化学结构。
人参皂苷可根据其结构分为原人参三醇(PPT，Protopanaxatriol；Re，Rg1)，原人参二醇(PPD，Protopanaxadiol；Rb1，Rb2，Rc及Rd)，Rb1，Rb2，Rc，Rd，Re及Rg1为自然人参本来的组成，即为未通过红参化进行除糖改性的极性物质，是水溶性物质。
上述人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc及人参皂苷Rg1含量得到增进的人参提取物，抑制PGE2(ProstaglandinE2：前列腺素E2)、IL-6(白细胞介素-6)、IL-8(白细胞介素-8)及NO生成，并且抑制iNOS(诱导型一氧化氮合酶剂)及COX-2(环氧化酶-2)的表达，从而具有优秀的抗炎活性。
炎症的特征之一是借助生成前列腺素的环氧化酶(COX)及生成白三烯的5-脂氧酶途径而进行代谢的花生四稀酸(arachidonicacid)的氧合作用的增加。前列腺素及白三烯为炎症的媒介。具体地，环氧化酶有环氧化酶-1及环氧化酶-2两种形态，后者的形态，即，环氧化酶-2在炎症进行中起到重要的作用。因此，抑制环氧化酶-2酶的方法可作为无与非可逆性的环氧化酶-1的抑制相关的副作用地减少炎症的有效的方法起到作用[Kyung-sooNam,etal,Kor.J.Pharmacogn.,35(2),pp147-151,2004]。
白细胞介素-8(IL-8)为由包括单核细胞、成纤维细胞、内皮细胞及角质细胞在内的几种细胞类型而生成的趋化因子。从内皮细胞的上述白细胞介素-8的生成，由白细胞介素-1、肿瘤坏死因子(TumorNecrosisFactor)或脂多糖诱导。这是对嗜中性粒细胞、T-淋巴细胞及嗜碱性细胞具有化学引诱特性。并且，这是从全部的正常及过敏性个体的嗜碱性细胞诱导组织胺的放出，而且从嗜中性粒细胞诱导溶酶体酶的放出及呼吸爆发。白细胞介素-8无蛋白质的新合成，在嗜中性粒细胞上呈现增加Mac-1(CD11b/CD18)的表面表达，这是可贡献于增加血管内皮细胞的嗜中性粒细胞的附着。很多疾病将嗜中性粒细胞的大量入侵作为特征。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术作为包含人参提取物作为有效成分的皮肤状态改善用组合物，提供皮脂分泌抑制用组合物，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
在一例中，上述皮肤状态改善可以为皮脂分泌抑制、毛孔缩小、抗氧化、皮肤弹力增进、皱纹改善、痤疮缓解及痤疮皮肤改善。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术作为包含人参提取物作为有效成分的皮脂分泌抑制用组合物，提供如下皮脂分泌抑制用组合物，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
皮脂的分泌过多诱发毛孔扩大，并促进痤疮。上述人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc及人参皂苷Rg1含量得到增进的人参提取物，抑制5α-还原酶的活性，从而抑制二氢睾酮的生成，而具有皮脂的分泌过多抑制效果及痤疮缓解效果。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术作为包含人参提取物作为有效成分的毛孔收缩用组合物，提供如下毛孔收缩用组合物，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
皮脂腺不断地生产皮脂，并从皮脂腺排出管通过毛孔向皮肤表面分泌皮脂。此时，在毛孔中容易产生角化亢进(角化未正常的进行而脱离滞后的现象)，并且由变厚的角质层导致毛孔堵塞而在毛囊内留有皮脂引起斑疹、炎症等，并形成肉芽肿而留下痕迹。因而，为了有效地缩小变大的毛孔，需要去除在非正常的角化过程中变厚的毛孔的角质来使细胞代谢进行的活跃，并从真皮组织增进胶原蛋白的生成，来恢复凹陷或松弛的毛孔的结构。
上述人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc及人参皂苷Rg1含量得到增进的人参提取物具有抑制皮脂分泌，去除角质、抗氧化、皮肤弹力增进及皱纹改善效果从而具有优秀的毛孔缩小活性。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术作为包含人参提取物作为有效成分的抗氧化组合物，提供如下抗氧化组合物，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
上述人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc及人参皂苷Rg1含量得到增进的人参提取物，抑制活性氧类的生成，从而具有防止老化，并且具有优秀的抗氧化活性。借助上述抗氧化活性可防止皮肤老化。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术作为包含人参提取物作为有效成分的皮肤弹力增进及皱纹改善用组合物，提供如下皮肤弹力增进及皱纹改善用组合物，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
上述人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc及人参皂苷Rg1含量得到增径的人参提取物，增进胶原蛋白合成，并具有抗氧化及老化防止效果，从而具有优秀的皮肤弹力增进及皱纹改善活性。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术作为包含人参提取物作为有效成分的痤疮缓解及痤疮皮肤改善用组合物，提供如下痤疮缓解及痤疮皮肤改善用组合物，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
上述人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc及人参皂苷Rg1含量得到增进的人参提取物，具有抗炎、皮脂分泌抑制及毛孔缩小活性，从而具有优秀的痤疮缓解及痤疮皮肤改善活性。
根据示例性的一实例，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，还可包含6重量％以上的人参皂苷Re。
根据示例性的一实例，上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，可包含2.5重量％以上、2.6重量％以上、2.7重量％以上、2.8重量％以上、2.9重量％以上、3重量％以上、3.1重量％以上、3.2重量％以上、3.3重量％以上、3.4重量％以上、3.5重量％以上、3.6重量％以上、3.7重量％以上、3.8重量％以上、3.9重量％以上或4重量％以上并4.5重量％以下、4.4重量％以下、4.3重量％以下、4.2重量％以下、4.1重量％以下、4重量％以下、3.9重量％以下、3.8重量％以下、3.7重量％以下、3.6重量％以下、3.5重量％以下、3.4重量％以下、3.3重量％以下、3.2重量％以下、3.1重量％以下或3重量％以下的人参皂苷Rb2。上述人参提取物可包含3重量％以上、3.1重量％以上、3.2重量％以上、3.3重量％以上、3.4重量％以上、3.5重量％以上、3.6重量％以上、3.7重量％以上、3.8重量％以上、3.9重量％以上、4重量％以上、4.1重量％以上、4.2重量％以上、4.3重量％以上、4.4重量％以上、4.5重量％以上、4.6重量％以上、4.7重量％以上、4.8重量％以上、4.9重量％以上、5重量％以上、5.1重量％以上、5.2重量％以上、5.3重量％以上、5.4重量％以上、5.5重量％以上、5.6重量％以上、5.7重量％以上、5.8重量％以上、5.9重量％以上、6重量％以上、6.1重量％以上、6.2重量％以上、6.3重量％以上、6.4重量％以上、6.5重量％以上、6.6重量％以上、6.7重量％以上、6.8重量％以上、6.9重量％以上或7重量％以上，并7.5重量％以下、7.4重量％以下、7.3重量％以下、7.2重量％以下、7.1重量％以下、7重量％以下、6.9重量％以下、6.8重量％以下、6.7重量％以下、6.6重量％以下、6.5重量％以下、6.4重量％以下、6.3重量％以下、6.2重量％以下、6.1重量％以下、6重量％以下、5.9重量％以下、5.8重量％以下、5.7重量％以下、5.6重量％以下、5.5重量％以下、5.4重量％以下、5.3重量％以下、5.2重量％以下、5.1重量％以下、5重量％以下、4.9重量％以下、4.8重量％以下、4.7重量％以下、4.6重量％以下、4.5重量％以下、4.4重量％以下、4.3重量％以下、4.2重量％以下、4.1重量％以下或4重量％以下的人参皂苷Rc。上述人参提取物可包含2重量％以上、2.1重量％以上、2.2重量％以上、2.3重量％以上、2.4重量％以上、2.5重量％以上、2.6重量％以上、2.7重量％以上、2.8重量％以上、2.9重量％以上、3重量％以上、3.1重量％以上、3.2重量％以上、3.3重量％以上、3.4重量％以上、3.5重量％以上、3.6重量％以上、3.7重量％以上、3.8重量％以上、3.9重量％以上、4重量％以上、4.1重量％以上、4.2重量％以上、4.3重量％以上、4.4重量％以上或4.5重量％以上，并5重量％以下、4.9重量％以下、4.8重量％以下、4.7重量％以下、4.6重量％以下、4.5重量％以下、4.4重量％以下、4.3重量％以下、4.2重量％以下、4.1重量％以下、4重量％以下、3.9重量％以下、3.8重量％以下、3.7重量％以下、3.6重量％以下、3.5重量％以下、3.4重量％以下、3.3重量％以下、3.2重量％以下、3.1重量％以下、3重量％以下、2.9重量％以下、2.8重量％以下、2.7重量％以下、2.6重量％以下或2.5重量％以下的人参皂苷Rg1。上述人参提取物可包含6重量％以上、6.1重量％以上、6.2重量％以上、6.3重量％以上、6.4重量％以上、6.5重量％以上、6.6重量％以上、6.7重量％以上、6.8重量％以上、6.9重量％以上、7重量％以上、7.1重量％以上、7.2重量％以上、7.3重量％以上、7.4重量％以上、7.5重量％以上、7.6重量％以上、7.7重量％以上、7.8重量％以上、7.9重量％以上、8重量％以上、8.1重量％以上、8.2重量％以上、8.3重量％以上、8.4重量％以上、8.5重量％以上、8.6重量％以上、8.7重量％以上、8.8重量％以上、8.9重量％以上、9重量％以上、9.1重量％以上、9.2重量％以上、9.3重量％以上、9.4重量％以上、9.5重量％以上、9.6重量％以上、9.7重量％以上、9.8重量％以上、9.9重量％以上、10重量％以上、10.1重量％以上、10.2重量％以上、10.3重量％以上、10.4重量％以上、10.5重量％以上、10.6重量％以上、10.7重量％以上、10.8重量％以上、10.9重量％以上、11重量％以上、11.1重量％以上、11.2重量％以上、11.3重量％以上、11.4重量％以上、11.5重量％以上、11.6重量％以上、11.7重量％以上、11.8重量％以上、11.9重量％以上、12重量％以上、12.1重量％以上、12.2重量％以上、12.3重量％以上、12.4重量％以上、12.5重量％以上、12.6重量％以上、12.7重量％以上、12.8重量％以上、12.9重量％以上、13重量％以上、13.1重量％以上、13.2重量％以上、13.3重量％以上、13.4重量％以上、13.5重量％以上、13.6重量％以上、13.7重量％以上、13.8重量％以上、13.9重量％以上、14重量％以上、14.1重量％以上、14.2重量％以上、14.3重量％以上、14.4重量％以上、14.5重量％以上、14.6重量％以上、14.7重量％以上、14.8重量％以上、14.9重量％以上、15重量％以上、15.1重量％以上、15.2重量％以上、15.3重量％以上、15.4重量％以上、15.5重量％以上、15.6重量％以上、15.7重量％以上、15.8重量％以上、15.9重量％以上、16重量％以上、16.1重量％以上、16.2重量％以上、16.3重量％以上、16.4重量％以上、16.5重量％以上、16.6重量％以上、16.7重量％以上、16.8重量％以上、16.9重量％以上、17重量％以上、17.1重量％以上、17.2重量％以上、17.3重量％以上、17.4重量％以上、17.5重量％以上、17.6重量％以上、17.7重量％以上、17.8重量％以上、17.9重量％以上、18重量％以上、18.1重量％以上、18.2重量％以上、18.3重量％以上、18.4重量％以上、18.5重量％以上、18.6重量％以上、18.7重量％以上、18.8重量％以上、18.9重量％以上或19重量％以上，并20重量％以下、19.9重量％以下、19.8重量％以下、19.7重量％以下、19.6重量％以下、19.5重量％以下、19.4重量％以下、19.3重量％以下，19.2重量％以下、19.1重量％以下、19重量％以下、18.9重量％以下、18.8重量％以下、18.7重量％以下、18.6重量％以下、18.5重量％以下、18.4重量％以下、18.3重量％以下、18.2重量％以下、18.1重量％以下、18重量％以下、17.9重量％以下、17.8重量％以下、17.7重量％以下、17.6重量％以下、17.5重量％以下、17.4重量％以下、17.3重量％以下、17.2重量％以下、17.1重量％以下、17重量％以下、16.9重量％以下、16.8重量％以下、16.7重量％以下、16.6重量％以下、16.5重量％以下、16.4重量％以下、16.3重量％以下、16.2重量％以下、16.1重量％以下、16重量％以下、15.9重量％以下、15.8重量％以下、15.7重量％以下、15.6重量％以下、15.5重量％以下、15.4重量％以下、15.3重量％以下、15.2重量％以下、15.1重量％以下、15重量％以下、14.9重量％以下、14.8重量％以下、14.7重量％以下、14.6重量％以下、14.5重量％以下、14.4重量％以下、14.3重量％以下、14.2重量％以下、14.1重量％以下、14重量％以下、13.9重量％以下、13.8重量％以下、13.7重量％以下、13.6重量％以下、13.5重量％以下、13.4重量％以下、13.3重量％以下、13.2重量％以下、13.1重量％以下、13重量％以下、12.9重量％以下、12.8重量％以下、12.7重量％以下、12.6重量％以下、12.5重量％以下、12.4重量％以下、12.3重量％以下、12.2重量％以下、12.1重量％以下、12重量％以下、11.9重量％以下、11.8重量％以下、11.7重量％以下、11.6重量％以下、11.5重量％以下、11.4重量％以下、11.3重量％以下、11.2重量％以下、11.1重量％以下、11重量％以下、10.9重量％以下、10.8重量％以下、10.7重量％以下、10.6重量％以下、10.5重量％以下、10.4重量％以下、10.3重量％以下、10.2重量％以下、10.1重量％以下、10重量％以下、9.9重量％以下、9.8重量％以下、9.7重量％以下、9.6重量％以下、9.5重量％以下、9.4重量％以下、9.3重量％以下、9.2重量％以下、9.1重量％以下、9重量％以下、8.9重量％以下、8.8重量％以下、8.7重量％以下、8.6重量％以下、8.5重量％以下、8.4重量％以下、8.3重量％以下、8.2重量％以下、8.1重量％以下、8重量％以下、7.9重量％以下、7.8重量％以下、7.7重量％以下、7.6重量％以下、7.5重量％以下、7.4重量％以下、7.3重量％以下、7.2重量％以下、7.1重量％以下或7重量％以下的人参皂苷Re。
根据示例性的一实例，在本说明书中公开的人参提取物如下：人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，可包含2.5至4.5重量％的人参皂苷Rb2、3至7.5重量％的人参皂苷Rc、2至5重量％的人参皂苷Rg1及6至20重量％的人参皂苷Re。
根据示例性的一实例，上述人参提取物可以是从人参(Panaxginseng)的根部提取的。具体地，上述人参提取物在人参的须根(尾参)中提取，从而可具有高的人参皂苷收率。
根据示例性的一实例，本说明书中公开的人参提取物只要是从人参可提取人参皂苷成分的方法不受限制可使用，所述的人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。根据示例性的一实例，本说明书中公开的人参提取物只要是从人参可提取人参皂苷成分的方法不受限制可使用，所述的人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1及6重量％以上的人参皂苷Re。例如，可通过交替执行加压工序或减压工序的压力循环式提取工序、溶剂分馏法等制备，还可连续实施上述方法。此时，压力循环式提取工序具体为，在人参中添加水、有机溶剂或它们的混合溶剂之后每隔规定时间循环加压及减压来实施，从而可进行提取。
在另一实施方式中，本说明书公开的技术作为上述人参提取物的制备方法，提供如下人参提取物的制备方法，具体包括：在人参中添加水、有机溶剂或水和有机溶剂的混合溶剂之后，依次实施加压及减压提取工序来提取的步骤；以及在水中溶解被提取的提取物之后，利用有机溶剂提取，并去除有机溶剂层之后，重新利用有机溶剂提取水层的步骤。
在一具体例中，上述人参提取物的制备方法可包括步骤(a)：在人参中添加水、有机溶剂或水和有机溶剂的混合溶剂之后，依次实施加压及减压提取工序来提取。
上述人参可以为作为人参(Panaxginseng)的地下部的根部，例如可使用人参的细根(fineroot)。例如，上述人参可使用干燥的人参，例如可使用干燥人参的细根而得的尾参(GingsengRadicella)。在一例中可将上述干燥的人参以微粉状态适用于提取工序，但是并不局限于此。
上述有机溶剂可以为选自乙醇、甲醇、丁醇、醚、乙酸乙酯及氯仿中的一种以上。
对于上述水和有机溶剂的混合溶剂而言，有机溶剂的浓度可以为10至90％(v/v)。更具体地，上述混合溶剂可以为10至90％(v/v)的乙醇水溶液，更具体地，可以为70％(v/v)的乙醇水溶液，例如可以为50％(v/v)的乙醇水溶液。
根据示例性的一实例，上述水、有机溶剂或水和有机溶剂的混合溶剂，能够以上述人参总重量成为5至20％(w/v)的方式使用，但是并不局限于此。
根据示例性的一实例，上述加压及减压提取工序可分别依次反复实施20分钟以上、21分钟以上、22分钟以上、23分钟以上、24分钟以上、25分钟以上、26分钟以上、27分钟以上、28分钟以上、29分钟以上、或30分钟以上，并40分钟以下、39分钟以下、38分钟以下、37分钟以下、36分钟以下、35分钟以下、34分钟以下、33分钟以下、32分钟以下、31分钟以下、或者30分钟以下来进行提取。例如，上述加压及减压提取工序可分别依次反复实施20至40分钟来进行提取。
根据示例性的一实例，上述加压及减压提取工序可依次反复实施共40分钟以上、45分钟以上、50分钟以上、55分钟以上、60分钟以上、65分钟以上、70分钟以上、75分钟以上、80分钟以上、85分钟以上、90分钟以上、95分钟以上、100分钟以上、105分钟以上、110分钟以上、115分钟以上或120分钟以上，并300分钟以下、290分钟以下、280分钟以下、270分钟以下、260分钟以下、250分钟以下、240分钟以下、230分钟以下、220分钟以下、210分钟以下、200分钟以下、190分钟以下、180分钟以下、170分钟以下、160分钟以下、150分钟以下、145分钟以下、140分钟以下、135分钟以下、130分钟以下或125分钟以下来进行提取。例如，上述加压及减压提取工序可依次反复实施1.5至2.5小时来进行提取。
根据示例性的一实例，在上述加压及减压提取工序中，当将一次加压提取工序及一次减压提取工序设定为1循环时，可反复实施1循环、2循环、3循环或4循环来提取。
根据示例性的一实例，当进行上述加压提取工序时，压力可以为1至3kgf/cm2，当进行减压提取工序时，压力可以为550至650mmHg。
根据示例性的一实例，当进行上述加压提取工序及减压提取工序时，提取温度可以为65至85℃。
在如上所述实施加压及减压反复循环工序的情况下，通过将人参的热改性最小化来将人参皂苷的改性最小化，例如将由人参皂苷Rb1糖分解成人参皂苷Rg3的情况最小化。因此，与利用现有的简单的提取装置无反复地提取人参提取物相比，具有将人参提取物的提取收率可提高25～30％的效果。
在一具体例中，上述人参提取物的制备方法可包括步骤(b)：在水中溶解在上述步骤(a)中提取的提取物之后，利用有机溶剂提取，并去除有机溶剂层。
在上述步骤(b)中，有机溶剂可以为选自乙醇、甲醇、丁醇、醚、乙酸乙酯及氯仿中的一种以上。例如，上述有机溶剂可以为乙酸乙酯。通过上述步骤利用有机溶剂可去除非极性物质，并可将特定人参皂苷的含量最大化。
上述步骤(b)的有机溶剂相对于步骤(a)中的提取物总体积，可使用5至20倍，但是并不局限于此。
在一具体例中，上述人参提取物的制备方法可包括步骤(c)：从上述步骤(b)的产物中，重新利用有机溶剂提取水层。
在上述步骤(c)中，有机溶剂可以为选自乙醇、甲醇、丁醇、醚、乙酸乙酯及氯仿中的一种以上。例如，上述有机溶剂可以为丁醇。通过上述步骤可将特定人参皂苷的含量最大化。上述步骤(c)的有机溶剂相对于步骤(b)中的产物总体积，可使用5至20倍，但是并不局限于此。
具体地，根据如上所述的溶剂分馏法，与现有技术中的人参提取物中含有1.5～2重量％的人参皂苷的情况相比，将人参提取物内人参皂苷的总含量与现有技术相比可提高10倍以上，具体地，可提高成15～25重量％的总人参皂苷含量。
根据示例性的一实例，在本说明书中公开的组合物可以为药学组合物。
上述药学组合物还可含有防腐剂、稳定剂、可湿性粉剂(wettablepowder)或乳化促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂等的药学辅助剂及其他在治疗上有用的物质，根据通常的方法可制剂化成多种口服给药剂或非口服给药剂的给药剂形态。
上述口服给药剂例如有片剂、丸剂、硬胶囊剂及软胶囊剂、液剂、悬浮剂、乳化剂、糖浆剂、粉剂、散剂、细粒剂、颗粒剂、小丸剂等，这些剂型除了有效成分之外可包含表面活性剂、稀释剂(例如，乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素及甘氨酸)、润滑剂(例如，二氧化硅、滑石，硬脂酸及硬脂酸的镁盐或钙盐。片剂还可包含硅酸镁铝、淀粉糊剂、凝胶、黄芪胶(Tragacanth)、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠及聚乙烯吡咯烷酮等结合剂，根据情况还可含有淀粉、琼脂、海藻酸或如其钠盐之类的崩解剂、吸收剂，着色剂、香味剂及甜味剂等药学添加剂。上述片剂可通过通常的混合、颗粒化或涂敷方法制备。并且上述非口服给药剂可以为直肠、局部、皮下及经皮给药型剂型，例如可以为注射剂、滴注剂、软膏、乳液、凝胶、霜、喷雾剂、悬浮剂、乳剂、栓剂、贴剂等剂型，但是并不局限于此。本说明书中的一实施例的药学组合物例如可局部给药到头皮。
有效成分的给药量在本发明所属技术领域的普通技术人员的水平内，可根据所要给药的对象的症状发展程度、发病时期、年龄、健康状态、并发症等多种因素，药物的一天给药容量不同，当以成人为基准时，通常将1μg/kg至200mg/kg的上述组合物，优选将50μg/kg至50mg/kg的上述组合物以一天一次或三次的方式分开给药，上述给药量不管哪一种方法均不限定本说明书的范围。
根据示例性的一实例，在本说明书中公开的组合物可以为化妆品组合物。
上述化妆品组合物的外形，可含有在化妆品学或皮肤科学上可接受的媒质或基剂。这是作为适合于局部适用的所有剂型，例如能够以溶液、凝胶、固体、搅拌式无水生成物、在水相中分散油相来取得的乳液、悬浮液、微型乳液、微型胶囊、微细颗粒球或离子型(脂质体)及非离子型的泡分散剂的形态或霜、化妆水、乳液、粉、软膏、喷雾剂或遮瑕膏的形态提供。这些组合物可按照本发明所属技术领域的通常的方法制备。本说明书的组合物能够以泡沫(foam)的形态或还含有被压缩的推进剂的气溶胶的形态制备。
上述化妆品组合物在其剂型中没有特别地限制，例如可制剂化成柔软化妆水、收敛化妆水、营养化妆水、营养霜、按摩霜、精华液、眼霜、眼精华液、洁面霜、洁面乳、洁面水、面膜、粉、沐浴露、润肤霜、润肤油或身体精华液等的化妆品。
在上述化妆品组合物的剂型为糊剂、霜或凝胶的情况下，可利用动物纤维、植物纤维、蜡、石蜡、淀粉、胺黄树胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅、膨润土、二氧化硅、滑石或氧化锌等作为载体成分。
在上述化妆品组合物的剂型为粉或喷雾剂的情况下，可利用乳糖、滑石、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉作为载体成分，尤其，在喷雾剂的情况下，还可包含如氯氟烃(chlorofluorohydrocarbon)、丙烷/丁烷或二甲醚等推进剂。
在上述化妆品组合物的剂型为溶液或乳浊液的情况下，可利用溶剂、溶剂化剂、乳浊化剂来作为载体成分，例如有水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇油、甘油脂肪酯、聚乙二醇或山梨糖醇的脂肪酸酯。
在上述化妆品组合物的剂型为悬浮液的情况下，可利用如水、乙醇或丙二醇等液状稀释剂、如乙氧基化异硬脂醇(ethoxylatedisosearylalcohol)、聚氧乙烯山梨醇酯(polyoxyethylenesorbitolester)及聚氧乙烯山梨糖醇酐酯(polyoxyethylenesorbitanester)之类的悬浮剂、微小结晶纤维素、氢氧化铝氧化物(aluminummetahydroxide)、膨润土、琼脂或胺黄树胶(traganth)等来作为载体成分。
在上述化妆品组合物的剂型为含有表面活性剂的洁面霜的情况下，可使用脂肪醇硫酸盐(aliphaticalcoholSulfate)、脂肪醇醚硫酸盐(aliphaticalcoholetherSulfate)、磺基琥珀酸单酯(sulfosuccinatemonoester)、羟乙基磺酸盐(isethionate)、咪唑啉衍生物、甲基牛磺酸盐(methylTaurate)、肌氨酸盐(sarcosinate)、脂肪酸酰胺醚硫酸盐(fattyacidamideethersulphate)、烷基酰胺甜菜碱(AlkylamidoBetain)、脂肪醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸二乙醇酰胺、植物油、羊毛脂衍生物或乙氧基化甘油脂肪酸酯等来作为载体成分。
有效成分的含量并不特别限制，相对于组合物总重量可包含0.001至20重量％的包含有效成分的提取物。在满足上述含量的情况下，可无副作用地呈现优秀的功效。
根据示例性的一实例，化妆品组合物除了包含上述有效成分的提取物之外，还可包含功能性添加物及通常的化妆品组合物所包含的成分。作为上述功能性添加物可包含选自水溶性维生素、油溶性维生素、高分子肽、高分子多糖、鞘脂及海藻提取物中的一种以上的成分。
并且，上述化妆品组合物除上述功能性添加物之外，根据需要可配合包含于通常的化妆品组合物的成分。除此之外，作为所包含的配合成分可例举油脂成分、保湿剂、润肤剂、表面活性剂，有机及无机颜料，有机粉体、紫外线吸收剂，防腐剂、杀菌剂、抗氧化剂、植物提取物、pH调节剂、乙醇、色素、香料、血液循环促进剂、清凉剂、制汗剂、纯化水等。
根据示例性的一实例，在本说明书中公开的组合物可以为皮肤外用剂组合物。上述皮肤外用剂作为只要能够涂敷于皮肤外部就可包含任一物质的总称，可包含多种剂型的化妆品、医药品。
根据示例性的一实例，在本说明书中公开的组合物可以为食品组合物。
上述食品组合物可以为液状或固体状态的剂型，具体地，可以为片剂、胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、颗粒剂、饮料(清凉剂)、减肥条、巧克力、焦糖剂型或饼干类剂型，其剂型并不特别限制。本说明书的食品组合物除了上述有效成分之外，根据需要可含有赋形剂、糖类、香料、色素、乳脂类、蛋白质等。
包含于食品或饮料中的有效成分的量，从有效性、效率性方面考虑，在保健食品组合物的情况下，可包含整个食品的0.01至20重量％，具体地，可包含1至10重量％，在保健饮料组合物的情况下，以100ml为基准，可包含0.02至10g，更具体地，可包含0.3至1g。
根据示例性的一实例，上述组合物中，以组合物总重量为基准，可包含2重量％以上的人参提取物，具体地，从安全性、剂型制备上的便利性、有效性方面考虑，可包含2至20重量％的人参提取物。
以下，通过实施例对本发明进行更详细的说明。只是，这些实施例仅用于例示本发明，本发明的范围不局限于此实施例，这对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说是显而易见的。
实施例1.人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rg1及人参皂苷Re含量得到增进的人参提取物的制备
利用纯化水清洗人参(锦山人参，购买处：锦山人参农协)，并干燥之后进行粉碎取得微细的人参粉末。在获得的2g人参粉末中，添加50％(v/v)浓度的乙醇水溶液20mL之后，利用压力循环式提取装置将加压及减压提取工序分别依次循环实施30分钟，共提取2小时。此时，加压提取时的压力为2kgf/cm2，减压提取时的压力为600±50mmHg，并且提取温度设定成75℃。
过滤通过上述工序取得的人参提取物，并减压干燥其上清液来取得0.57g的干燥重量。之后，在水中溶解干燥物之后，利用乙酸乙酯进行提取来去除乙酸乙酯层，并利用丁醇提取水层之后，进行减压干燥取得2.7g的干燥重量。将其作为实施例1。
并且，利用以下分析设备及条件对包含于上述实施例1的人参提取物的人参皂苷进行HPLC分析之后，在图2中利用曲线图表示其结果。并且，从上述结果对上述提取物所含有的人参皂苷的各成分含量进行分析，并以重量％示于表2。
HPLC分析设备及分析条件
设备：Waters2998PDAdetecter，1525pump，2707autosampler
柱子：SunfireC18305μm，4.6×150mm
检测器(detector)：UV203nm
流量(Flowrate)：1mL/min
注入体积(Injectionvolumn)：20μL
条件：梯度(gradient)(A-水、B-乙腈(acetonitrile))
表1
时间(min) A(水) B(乙腈)
0 82 18
22 82 18
32 70 30
60 50 50
表2
其结果，如表2及图2所示，可确认如下：上述实施例1的人参提取物包含2.5重量％以上的即2.91重量％的Rb2、3重量％以上的即3.14重量％的Rc、6重量％以上的即6.23重量％的Re及2.0重量％以上的即2.1重量％的Rg1。
比较例1.普通人参提取物的制备
利用纯化水清洗人参(锦山人参，购买处：锦山人参农协)，并干燥之后进行粉碎取得微细的人参粉末。在75℃温度下，利用50％浓度的乙醇100mL对取得的2g的人参粉末提取2小时之后过滤试样，减压干燥其上清液取得0.30g的干燥重量。将其作为比较例1。
并且，利用与上述实施例1相同的分析设备及条件对上述比较例1的人参提取物所含有的人参皂苷进行HPLC分析之后，将其结果利用曲线图示于图3。并且，从上述结果对上述提取物所含有的人参皂苷的各成分含量进行分析，并以重量％示于表3。
表3
其结果，如表3及图3所示，上述比较例1所涉及的人参提取物包含0.33重量％的Rb2、0.55重量％的Rc、0.16重量％的Re及0.14重量％的Rg1，从而可确认如下：实施例1的人参提取物与普通人参提取物相比，以约5～15倍以上的含量％包含各人参皂苷。并且，可确认如下：人参提取物所含有的人参皂苷的总重量，实施例1也比比较例1具有明显高的数值。
试验例1.PGE2、IL-6及IL-8生成抑制评价
在6-孔培养板中，以1×105细胞的浓度接种人成纤维细胞(fibroblast)(德国普诺生公司：PromoCell、Germany)并在37℃温度下，在5％的CO2培养箱中培养24小时。对孔处理500μM的H2O2，来刺激24小时之后，按浓度处理实施例1和比较例1的提取物而反应48小时。
反应结束后，收取培养液执行ELISA(酶联免疫吸附测定法)。此时，作为对照组使用多用于抗炎及刺激缓和剂的物质α-红没药醇(α-bisabolol)。PGE2使用阿赛设计(AssayDesign)公司的试剂盒，IL-6、IL-8使用恩多跟(Endogen)公司的试剂盒，并且根据各公司手册中铭记的方法进行实验。根据以下数学公式1计算抑制效果，测定结果示于下列表4。
如下列表4所示，可确认如下：作为炎症媒介物质的PGE2、IL-6及IL-8的生成量，因本说明书的一实施例的人参提取物的添加而显著地减少，从而对炎症媒介物质呈现高的抑制效果。
数学公式1：
抑制效果＝{1－(试验试样－对照组)/(H2O2－对照组)}×100
表4
试验例2.细胞培养
从美国标准菌库(ATCC，Rockville，MD，USA)购买小鼠(murine)的巨噬细胞株即RAW264.7，添加10％的胎牛血清(FBS，fetalbovineserum)、青霉素(penicillin)(100units/mL)及链霉素(streptomycin)(100g/mL)并在DMEM(DulbeccosModifiedEaglesMedium；赛默飞公司(GIBCOInc.))中保存。这些细胞在37℃温度下，95％空气(air)、5％的CO2加湿空气条件下的饱和状态(subconfluence)下进行培养，并每3天进行传代培养(subculture)来利用于实验。
试验例3.NO(氮氧化合物))生成抑制功效评价
利用添加有10％的FBS的DMEM培养基，将RAW264.7细胞调节成1.5×105个细胞/mL之后，接种于24孔板(wellplate)，并同时处理实施例的试样和脂多糖(LPS)(1μg/mL)来培养24小时。
生成的NO的量，利用格里斯(Griess)试剂[将1％(w/v)的磺胺(sulfanilamide)和0.1％(w/v)的萘基乙二胺(naphylethylenediamine)加入2.5％(v/v)的磷酸]，来以存在于细胞培养液中的NO2-的形态测定。混合100L的细胞培养上清液和100L的格里斯试剂，在96孔板中反应10分钟之后，在540nm中测定吸光度。所生成的NO的量，以亚硝酸钠(sodiumnitrite)(NaNO2)为标准比较。
将结果示于图4及图5。图4为上述实施例1和比较例1的NO的生成比较结果，图5为当以250μg/mL、500μg/mL及750μg/mL处理在图4中NO生成抑制活性最优秀的实施例1的结果。参照图4可知实施例1的活性高于比较例1的活性，参照图5可知如下：在实施例1的情况下，以浓度依赖性呈现NO生成抑制活性(P＜0.05；**，P＜0.01)。
试验例4.iNOS及COX-2表达抑制功效评价(western-blotting：蛋白免疫印迹)
收集培养结束的RAW264.7细胞，利用磷酸盐缓冲液(phosphatebufferedsaline，PBS)清洗2～3次之后，添加细胞溶解缓冲液[50mM的三(羟甲基)氨基甲烷(Tris-HCl)(pH7.5)、150mM的NaCl、1％的诺纳德P-40(NonidetP-40)、2mM的乙二胺四乙酸(EDTA)、1mM的乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)、1mM的NaVO3、10mM的NaF、1mM的二硫苏糖醇(dithiothreitol)、1mM的苯甲基磺酰氟(phenylmethylsulfonylfluoride)、25μg/mL的抑肽酶(aprotinin)及25μg/mL亮抑酶肽(leupeptin)]，在4℃温度下溶解30分钟之后，在15000rpm下离心分离15分钟，去除细胞膜成分等。
对于蛋白质浓度，对牛血清蛋白(BSA，bovineserumalbumin)进行标准化，并使用伯乐蛋白测定试剂盒(Bio-RadProteinAssayKit)定量。将分离出的20～30μg的蛋白质利用8～12％的迷你型SDS-PAGE(minigelSDS-PAGE)进行改性分离，将其在聚偏氟乙烯膜(polyvinylidenedifluoridemembrane)(美国加利福尼亚州里士满伯乐公司、(BIO-RAD，Richmond，CA，USA))中以200mA转移2小时。并且，对于膜(membrane)的阻断(blocking)，在含有脱脂牛奶(skimmilk)的TTBS(0.1％吐温20(Tween20)+叔丁基二甲基硅烷(TBS))的溶液中，在常温条件下，实施2小时。
在TTBS溶液中，以1︰1000稀释用于检查iNOS的表达量的抗体即抗小鼠(anti-mouse)iNOS(美国加利福尼亚州拉由拉市卡尔拜奥卡姆公司(Calbiochem，LaJolla，CA，USA))、用于检查COX-2的表达量的抗体即抗小鼠COX-2(美国加利福尼亚州圣何塞BD生物科技公司(BDBiosciencesPharmingen,SanJose,CA,USA))，来在常温条件下，反应2个半小时之后，利用TTBS清洗三次。作为第二抗体，以1︰5000稀释结合有辣根过氧化物酶(HRP，horseradishperoxidase)的抗小鼠IgG(英国白金汉郡小哈尔伏特安发玛西亚生物技术公司(AmershamPharmaciaBiotech，LittleChalfont，UK))，来在常温条件下，反应30分钟之后，利用TTBS清洗三次，与ECL基质(安发玛西亚生物科学公司(美国新泽西州阿莫仙生物科学公司(AmershamBiosciences、Piscataway、NJ、USA))反应1～3分钟之后，感光于X射线(X-ray)膜。
在图6中表示以25μg/mL、50μg/mL进行处理上述实施例1时的结果。参照图6，在实施例1的情况下，可知浓度依赖性地呈现iNOS及COX-2表达抑制活性。最终，进行有效性评价可知如下：本说明书一实施例的人参提取物与对照组相比具有卓越的抗炎症效果。
试验例5.5α-还原酶活性抑制功效评价
为了评价5α-还原酶活性抑制功效，测定在HEK293-5αR2细胞中[14C]睾酮转换成[14C]二氢睾酮的比率。
HEK293细胞如下培养：转染(transfection)p3×FLAG-CMV-5αR2，按照每孔2.5×105细胞放入24孔板进行培养(Parketal.,2003,JDS.Vol.31,pp191-98)。然后，第二天更换成含有酶基质和抑制剂的新的培养基。作为培养基的基质使用0.05μCi[14C]睾酮(英国安发玛西亚生物技术公司(AmershamPharmaciabiotech，UK))。为了确认抑制程度，作为试验物质分别放入2μg/ml的实施例1和比较例1的提取物，并在37℃温度下，在5％的CO2培养基中培养2小时。此时，作为用于比较的阴性对照组，使用未含有上述试验物质中的任一物质的培养基，作为阳性对照组，使用在培养基中放入2μg/ml的非那雄胺(Finasteride)，并在相同的条件下进行培养的培养基。
之后，收取培养基，利用800μL的乙酸乙酯提取睾酮。分离上部的有机溶剂层，晒干之后，再次利用50μL的乙酸乙酯溶解剩下的残留物，在硅塑料片硅胶60F254(SilicaplasticsheetkieselgelF254)上，作为展开溶剂使用乙酸乙酯-己烷(1︰1)进行展开。在空气中干燥塑料试样之后，为了测定同位素的量使用水浴系统，将已干燥的塑料片和X射线膜一同放入于浴盒，1周后测定剩下的睾酮和二氢睾酮的同位素量。在下列表5中表示其结果。
表5
(a)转换率：DHT区域中的放射能/总放射能
(b)抑制率：100*(对照组的转换率-试样的转换率)/对照组的转换率
从上述表5的结果可知如下：本说明书一实施例的人参提取物，有效地抑制使睾酮转换成二氢睾酮而与存在于细胞质内的受体蛋白质结合并进入核内激活皮脂腺细胞促进分化而使皮脂腺内的皮脂分泌过多的5α-还原酶的活性，从而阻隔睾酮向二氢睾酮的转换。
因此，确认如下：本说明书一实施例的人参提取物抑制5α-还原酶的活性，从而抑制二氢睾酮的生成来有效地抑制皮脂分泌过多，并且对痤疮缓解有效。最终，进行有效性评价可知如下：本说明书一实施例的人参提取物与对照组相比具有卓越的皮脂分泌抑制效果。
试验例6.活性氧类(reactiveoxygenspecies)生成抑制功效评价
在24孔(well)细胞培养板的各孔中放入5×104个从人的表皮组织分离的角质形成细胞(keratinocyte)，并附着24小时。去除培养液之后，向各孔放入100μL的磷酸盐缓冲液(PBS)。利用紫外线B(UVB)灯(型号(Model)：F15T8、UVB15W、日本三共电器株式会社、(SankyoDennkiJapan))向上述角质形成细胞照射30mJ/cm2的紫外线之后，去除PBS并向各孔添加200μL的角质形成细胞培养液。其中，作为试验物质分别处理2μg/ml的实施例1和比较例1的人参提取物，并按规定时间定量由紫外线刺激增加的活性氧类(reactiveoxygenspecies，ROS)的量。此时，为了比较还测定对未处理试验物质(无处理)，并无紫外线刺激的例子、及未处理试验物质但进行紫外线刺激的例子的活性氧类的量。
对于活性氧类的量，参照用于测定被活性氧类氧化的二氯二氢荧光素二乙酯(DCF-DA，dichlorofluorescindiacetate)的荧光的Tan方法定量(Tanetal.,1998,J.CellBiol.Vol.141,pp1423-1432)，并在下列表6中表示对照组的活性氧类的比率。
表6
从示于上述表6的结果可确认如下：本说明书一实施例的人参提取物，可有效地抑制由紫外线引起皮肤细胞损伤这一已知的活性氧类的生成，因此可知上述物质抗氧化功效非常优秀。
并且，根据本说明书一实施例的人参提取物可知抑制氧化，并且防止老化，从而可预防毛孔缩小变大，与此同时可预防产生皮肤刺激。
试验例7.胶原蛋白生物合成功效评价
比较上述实施例1和比较例1的人参提取物的胶原蛋白生物合成促进效果与TGF-β(转化生长因子-β)来进行测定。
首先，在24孔板中以各孔105个方式播种(seeding)成纤维细胞(fibroblast)，培养到生长90％左右为止。将其利用无血清DMEM培养基培养24小时之后，分别以2μg/ml处理实施例1、比较例1及TGF-β，并在CO2培养基中培养24小时。去除它们的上层液之后利用前胶原型(I)ELISA试剂盒(procollagentype(I))观察前胶原(procollagen)是否增减。在表7中表示其结果，对于胶原蛋白合成能力，将非处理组作为100进行对比。
表7
从上述表7所示结果可知如下：本说明书一实施例的人参提取物如作为阳性对照组的TGF-β那样表示高的胶原蛋白合成能力。因此，可知本说明书一实施例的人参提取物使毛孔缩小周边的胶原蛋白的生成量增加来可缩小已变宽的毛孔。
以下，对本发明一实施方式的组合物的剂型例进行说明，但是还可作为多种剂型应用，这只是用于更具体地说明本发明，并不是限定本发明。
剂型例1.皮肤外用剂中的洗发精
根据以下组成，利用通常的方法制备洗发精。
表8
成分 含量(重量％)
实施例1的提取物 2.00
月桂基硫酸钠 10.00
椰油酰胺丙基甜菜碱 3.00
聚羧乙烯 0.30
聚季铵盐-10 0.20
十六烷基三甲基氯化铵 0.10
纯化水 余量
合计 100.00
剂型例2.皮肤外用剂中的护发素(rinse)
根据以下组成，利用通常的方法制备护发素。
表9
剂型例3.皮肤外用剂中的软膏
根据以下组成，利用通常的方法制备软膏。
表10
剂型例4.乳液
根据以下组成，利用通常的方法制备乳液。
表11
成分 含量(重量％)
实施例1的提取物 2.00
L-抗坏血酸-2-磷酸镁盐 1.00
水溶性胶原蛋白(1％水溶液) 1.00
柠檬酸钠 0.10
柠檬酸 0.05
甘草提取液 0.20
1,3-丁二醇 3.00
纯化水 余量
合计 100.00
剂型例5.霜
根据以下组成，利用通常的方法制备霜。
表12
剂型例6.面膜
根据以下组成，利用通常的方法制备面膜。
成分 含量(重量％)
实施例1的提取物 2.00
聚乙烯醇 13.00
L-抗坏血酸-2-磷酸镁盐 1.00
月桂酰羟脯氨酸 1.00
水溶性胶原蛋白(1％水溶液) 2.00
1,3-丁二醇 3.00
乙醇 5.00
纯化水 余量
合计 100.00
剂型例7.美容液型制剂
根据以下组成，利用通常的方法制备美容液型制剂。
表14
剂型例8.软胶囊剂
混合50mg的实施例1的提取物、80～140mg的L-肉碱、180mg的大豆油、2mg的棕榈油、8mg的植物性硬化油、4mg的黄铅及6mg的卵磷脂，并按照通常的方法以每一胶囊填充400mg的方式制备软胶囊。
剂型例9.片剂
混合50mg的实施例1的提取物、200mg的低聚半乳糖、60mg的乳糖及140mg的麦芽糖，并利用流化床干燥器形成颗粒之后，添加6mg的糖酯(sugarester)并利用压片机压片来制备片剂。
剂型例10.颗粒剂
混合50mg的实施例1的提取物、250mg的无水结晶葡萄糖及550mg的淀粉，并使用流化床颗粒机成型为颗粒之后，填充于袋来制备颗粒剂。
剂型例11.清凉剂
混合50mg的实施例1的提取物、10g的葡萄糖、0.6g的柠檬酸及25g的液状低聚糖之后，添加300ml的纯化水来以各瓶200ml的方式进行填充。填充于瓶之后，在130℃温度下，杀菌4～5秒钟来制备清凉剂饮料。
以上，对本发明内容的特定部分进行了详细说明，就本发明所属技术领域的普通技术人员来说，这种详细技术只属于优选实施方式，本发明的范围不局限于此，这是显而易见的。因此，本发明的实质性的范围应根据所附的发明要求保护范围和其的等同技术方案来定义。

Claims (20)

1.一种作为有效成分包含人参提取物的组合物的抗炎用用途，其中，
上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1。
2.根据权利要求1所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的抗炎用用途，其特征在于，
上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，还包含6重量％以上的人参皂苷Re。
3.根据权利要求1或2所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的抗炎用用途，其特征在于，
上述人参提取物是从人参的根部提取的。
4.根据权利要求1或2所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的抗炎用用途，其特征在于，
上述组合物为药学组合物。
5.根据权利要求1或2所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的抗炎用用途，其特征在于，
上述组合物为化妆品组合物。
6.根据权利要求1或2所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的抗炎用用途，其特征在于，
上述组合物为食品组合物。
7.根据权利要求1或2所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的抗炎用用途，其特征在于，
上述人参提取物的制备方法包括：
在人参中添加水、有机溶剂或水和有机溶剂的混合溶剂之后，依次实施加压提取工序及减压提取工序来提取的步骤；以及
在将提取出的提取物溶解于水中之后，利用有机溶剂进行提取，并去除有机溶剂层之后，将水层再次利用有机溶剂进行提取的步骤。
8.根据权利要求7所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的抗炎用用途，其特征在于，
上述加压提取工序及减压提取工序分别依次反复实施20至40分钟来进行提取。
9.根据权利要求7所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的抗炎用用途，其特征在于，
当进行上述加压提取工序时，压力为1至3kgf/cm2，当进行减压提取工序时，压力为550至650mmHg。
10.根据权利要求7所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的抗炎用用途，其特征在于，
当进行上述加压提取工序及减压提取工序时，提取温度为65至85℃。
11.一种作为有效成分包含人参提取物的组合物的皮肤状态改善用用途，其中，
上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，包含2.5重量％以上的人参皂苷Rb2、3重量％以上的人参皂苷Rc及2重量％以上的人参皂苷Rg1，
上述皮肤状态改善为选自皮脂分泌抑制、毛孔缩小、抗氧化、皮肤弹力增进、皱纹改善、痤疮缓解及皮肤改善中的一种以上。
12.根据权利要求11所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的皮肤状态改善用用途，其特征在于，
上述人参提取物中，以人参提取物的总重量为基准，还包含6重量％以上的人参皂苷Re。
13.根据权利要求11或12所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的皮肤状态改善用用途，其特征在于，
上述人参提取物是从人参的根部提取的。
14.根据权利要求11或12所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的皮肤状态改善用用途，其特征在于，
上述组合物为药学组合物。
15.根据权利要求11或12所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的皮肤状态改善用用途，其特征在于，
上述组合物为化妆品组合物。
16.根据权利要求11或12所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的皮肤状态改善用用途，其特征在于，
上述组合物为食品组合物。
17.根据权利要求11或12所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的皮肤状态改善用用途，其特征在于，
上述人参提取物的制备方法包括：
在人参中添加水、有机溶剂或水和有机溶剂的混合溶剂之后，依次实施加压提取工序及减压提取工序来提取的步骤；以及
在将提取出的提取物溶解于水中之后，利用有机溶剂进行提取，并去除有机溶剂层之后，将水层再次重新利用有机溶剂进行提取的步骤。
18.根据权利要求17所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的皮肤状态改善用用途，其特征在于，
上述加压提取工序及减压提取工序分别依次反复实施20至40分钟来进行提取。
19.根据权利要求17所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的皮肤状态改善用用途，其特征在于，
当进行上述加压提取工序时，压力为1至3kgf/cm2，当进行减压提取工序时，压力为550至650mmHg。
20.根据权利要求17所述的作为有效成分包含人参提取物的组合物的皮肤状态改善用用途，其特征在于，
当进行上述加压提取工序及减压提取工序时，提取温度为65至85℃。
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