JP6339189B2 - 発毛および育毛促進用組成物 - Google Patents

Description

本明細書に記載された内容は、ジンセノサイドの含量が増加した高麗人参抽出物と、これを含む休止期から成長期へ移行する周期を短縮させて毛髪の成長を促進させる発毛および育毛促進用組成物に関する。

近年、社会的ストレスの増加とともに、環境汚染およびインスタント食品などの西欧化された食習慣、頻繁なパーマや染色等により脱毛人口が次第に増加している。毛髪の周期は、毛髪を成長させる成長期（ａｎａｇｅｎ）；成長を終了し、毛球部が縮小する時期である退行期（ｃａｔａｇｅｎ）；毛乳頭が活動を停止し、毛髪を頭皮に留まらせる時期である休止期（ｔａｌｏｇｅｎ）；毛乳頭が活動を開始し、または新たな毛髪を発生させて、古い毛髪を脱毛させる時期である発生期に分けることができる。

成長期（Ａｎａｇｅｎ Ｓｔａｇｅ；２〜７年）は、毛髪が成長する期間で、再び毛髪が毛球から毛包に出ようとする毛髪生成段階と、硬いケラチンが毛嚢の中で作られる段階とに分けられる。毛髪は、退行期まで自己成長を続ける。退行期（Ｃａｔａｇｅｎ Ｓｔａｇｅ；２〜３週間）は、成長期が終わり、毛髪の形態を維持しつつ代謝過程が遅くなる時期で、この段階では、ケラチンを作り出さない。退行期は、毛髪全体の１％を占める。このとき、毛球部が収縮して毛乳頭から分かれ、毛嚢に覆われて上方に上がっていき、細胞分裂は停止状態となる。休止期（Ｔａｌｏｇｅｎ Ｓｔａｇｅ；３ヶ月）は、毛乳頭が萎縮し、毛嚢が徐々に萎びていき、毛根が上方に押し上げられて抜ける。毛髪がなくなる時期であり、次の成長期段階が始まるまでの寿命は、３〜４ヶ月である。

正常な人の場合、成長期状態の毛髪が多いのに比べ、脱毛症（Ａｌｏｐｅｃｉａ）の人は、休止期状態の毛髪が多く、目に見える脱毛現象が現れるようになる。脱毛が進行するほど成長期の期間が短くなり、これにより、毛髪はますます小型化する。したがって、脱毛の治療のためには、休止期状態の毛嚢を、成長期に速やかに進むことができようにし、短くなった成長期を増やしてやることが重要である。

男性型脱毛症は、テストステロン（Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）という男性ホルモンによって現れる現象で、このテストステロンが、５α‐リダクターゼ（α‐ｒｅｄｕｃｔａｓｅ）という酵素によって、より強力なホルモンであるジヒドロテストステロン（Ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ，ＤＨＴ）に変わると、このホルモンが毛嚢に作用して毛嚢を成長期段階から退行期段階へと誘導して、脱毛を引き起こさせる。したがって、男性型脱毛症を治療するために、５α‐リダクターゼによるＤＨＴの生成を抑制する方法が主に使用される。

女性型脱毛症は、主に閉経後のエストロゲン量の減少によって発生する。女性形脱毛症のための治療剤としては、主にミノキシジルやエストロゲンが使用されている。

円形脱毛症は、自己免疫疾患や精神的ストレス、遺伝的素因によって発生する。こうした円形脱毛症は、アンドロゲン性脱毛症とは根本的に原因が異なり、治療法もまた異なるため、副腎皮質ホルモン剤を処理する方法を使用したり、ミノキシジルを患部に塗ったり、人為的に患部に刺激を誘発したりする方法を使用する。

このように多様かつ複雑な脱毛原因に対し、血液の循環促進、男性ホルモンの作用抑制、毛根の機能強化等を目的とする成分等が市中に製品として販売されているが、はっきりとした効果を持ったものは未だにない状態であり、副作用の問題が提起されたりもしている。たとえば、ミノキシジルの場合、べたつく使用感や皮膚へ刺激を誘発する副作用が報告されており、フィナステリドの場合、経口投与用製剤として現在使用されているが、その摂取によって性機能障害等の副作用が報告されただけでなく、経口服用によってのみ効果を期待することができるため、使用上に多くの不便があった。

韓国特許公開第１０‐２０１１‐００００４３３号 韓国特許第１０−０９５０４２６号 韓国特許公開第１０‐２０１２‐０００５１９５号 韓国特許第１０−０８０５８５２号 韓国特許公開第１０‐２００５‐０１１７７９３号

Matsuda, H., et al., "Promotion of hair growth by ginsengradix on cultured mouse vibrisaal hair follicles", Phytotherapy Research, 2003,Vol.17, pp.797-800

前記のような問題点を解決するために、本発明は、ジンセノサイドの含有量が増加した高麗人参抽出物と、これを含む休止期から成長期への移行される周期を短縮させ、毛髪の成長を促進させながら、安全性を備えた発毛および育毛促進用組成物を提供することをその目的とする。

前記のような目的を解決するために、
本発明の一実施例は、高麗人参抽出物総質量に対して、ジンセノサイドＲｂ２を２．５質量％以上、ジンセノサイドＲｃを３質量％以上、およびジンセノサイドＲｇ１を２質量％以上含む高麗人参抽出物を提供する。

また、本発明の一実施例は、前記高麗人参抽出物に、ジンセノサイドＲｅを６質量％以上さらに含む高麗人参抽出物を提供する。

本発明の他の一実施例は、前記高麗人参抽出物の製造方法であって、
高麗人参に、水、有機溶媒、または水および有機溶媒の混合物を加えた後、加圧および減圧抽出工程を順次的に繰返し実施しながら抽出するステップ；および
前記ステップによって得られた高麗人参抽出物を水に溶かした後、有機溶媒で抽出して有機溶媒層を除去し、水層をさらに有機溶媒で抽出して高麗人参抽出物を製造するステップを含む高麗人参抽出物の製造方法を提供する。

本発明のまた他の一実施例は、前記のようにジンセノサイドの含量が増加した高麗人参抽出物を含む発毛および育毛促進用組成物を提供する。

本発明に係る発毛および育毛促進用組成物は、ジンセノサイドＲｂ２、ＲｃおよびＲｇ１、またはＲｂ２、Ｒｃ、Ｒｇ１およびＲｅを、増加した濃度で多量に含むことにより、従来技術による発毛剤以上の発毛および育毛促進効果を示すことができる。

また、植物性天然物を使用するため、安全性に優れるので、発毛および育毛を促進するための皮膚外用剤として使用することができ、化粧料組成物、薬学組成物および食品組成物等に広く使用することができる。

本発明の一実施例に係るジンセノサイドの種類別各化学構造を示す構造式である。 本発明の一実施例に係る高麗人参抽出物に含有されるジンセノサイドのＨＰＬＣ分析グラフである。 本発明の比較例である一般高麗人参抽出物に含有されるジンセノサイドのＨＰＬＣ分析グラフである。 本発明の一実施例に係る高麗人参抽出物（実施例１）、比較例の一般高麗人参抽出物（比較例１）の毛乳頭細胞における毛髪成長因子ＶＥＧＦの発現増加を示すグラフである。 本発明の一実施例に係る高麗人参抽出物（実施例１）、比較例の一般高麗人参抽出物（比較例１）の毛乳頭細胞増殖効果（ｈＤＰｃ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）を示すグラフである。 本発明の一実施例に係る高麗人参抽出物の主要構成成分であるジンセノサイドの種類別毛嚢毛乳頭細胞増殖効果（ｈＤＰｃ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）を示すグラフである。 本発明の一実施例に係る高麗人参抽出物（実施例１）、比較例の一般高麗人参抽出物（比較例１）の人体毛嚢器官における毛髪成長促進効果を示す図である。 本発明の一実施例に係る高麗人参抽出物（実施例１）、比較例の一般高麗人参抽出物（比較例１）、ジンセノサイドＲｂ１，Ｒｂ２，Ｒｃ，Ｒｄ，ＲｅおよびＲｇ１の人体毛嚢器官における毛髪成長促進効果を示す図である。

以下、本発明を詳細に説明する。

本発明の一実施例は、高麗人参抽出物総質量に対して、ジンセノサイドＲｂ２を２．５質量％以上、ジンセノサイドＲｃを３質量％以上、ジンセノサイドＲｇ１を２質量％以上含む高麗人参抽出物を提供する。

本発明の一実施例は、前記高麗人参抽出物に対して、ジンセノサイドＲｅを６質量％以上さらに含む高麗人参抽出物を提供する。

ジンセノサイド（ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ）とはグリコシド（ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ）の一種であるサポニンの一種で、植物の根、茎、葉、皮、種等に由来する。ジンセノサイドには、たとえば、ジンセノサイドＲｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ１等の多様な種類が存在し、植物の種類や栽培条件、加工条件、抽出方法、高麗人参の部位等によって存在するジンセノサイドの種類および含量が異なる。図１には、前記各ジンセノサイドの化学構造を図で示した。

ジンセノサイドは、その構造に応じて、ＰＰＴ（Ｒｅ，Ｒｇ１）、ＰＰＤ（Ｒｂ１，Ｒｂ２，Ｒｃ，Ｒｄ）に分けることができ、Ｒｂ１，Ｒｂ２，Ｒｃ，Ｒｄ，ＲｅおよびＲｇ１は、天然高麗人参そのままの組成、すなわち、紅参化を通じた糖の除去された変性がなされていない極性の物質であって、水溶性である。

本発明の他の一実施例は、前記のような高麗人参抽出物であって、高麗人参の部位のうち根から抽出した高麗人参抽出物を提供する。具体的に、前記ジンセノサイドの収率の高い高麗人参のひげ根（尾蔘）から抽出した高麗人参抽出物を提供する。

本発明の一実施例として、前記ジンセノサイドはそれぞれ、ジンセノサイドＲｂ２は高麗人参抽出物総質量に対して２．５質量％以上含まれてよく、ジンセノサイドＲｃは３質量％以上含まれてよく、ジンセノサイドＲｅは６質量％以上含まれてよく、ジンセノサイドＲｇ１は２質量％以上含まれてよい。ジンセノサイドＲｂ２を２．５〜４．５質量％、Ｒｃを３〜７．５質量％、Ｒｅを６〜２０質量％、およびＲｇ１を２〜５質量％含む高麗人参抽出物を提供してよい。

本発明の一実施例によれば、前記のような高麗人参抽出物総質量に対して、ジンセノサイドＲｂ２を２．５質量％以上、Ｒｃを３質量％以上、Ｒｅを６質量％、およびＲｇ１を２質量％以上含む高麗人参抽出物は、高麗人参からジンセノサイド等の成分を抽出することのできる方法であれば、制限されることなく使用して製造してよい。たとえば、加圧工程または減圧工程を交互に遂行する圧力循環型抽出工程、溶媒分画法等により製造してよく、これらを連続的に実施してもよい。このとき、圧力循環型抽出工程は、具体的に、高麗人参に水、有機溶媒またはこれらの混合物を加えた後、一定時間ごとに加圧および減圧を循環しながら実施することにより抽出してよい。

より具体的に、本発明は、一実施例として、前記のような高いジンセノサイドＲｂ２、ＲｃおよびＲｇ１の含量を有する高麗人参抽出物を、以下のような方法で製造してよい。

高麗人参に、水、有機溶媒、または水および有機溶媒の混合物を加えた後、加圧および減圧抽出工程を順次的に循環実施しながら抽出するステップ；および
前記ステップによって得られた高麗人参抽出物を水に溶かした後、有機溶媒で抽出し、有機溶媒層を除去した後、水層を有機溶媒でさらに抽出するステップを含む方法によって、高麗人参抽出物を製造してよい。

具体的に、本発明の一実施例として使用可能な溶媒の種類は、特に制限されるものではなく、たとえば、水、有機溶媒、または水と有機溶媒の混合溶媒であってよい。たとえば、前記有機溶媒は、エタノール、メタノール、ブタノール、エーテル、酢酸エチルおよびクロロホルムからなる群から選択される１つ以上であってよい。たとえば、前記の水と有機溶媒の混合溶媒は、有機溶媒の比が１０〜９０％（ｖ／ｖ）であってよい。より具体的に、前記溶媒は、１０〜９０％（ｖ／ｖ）エタノール、より具体的には、７０％（ｖ／ｖ）エタノールを利用して抽出された抽出物であってよい。

また、本発明の一実施例によれば、前記加圧および減圧抽出工程は、圧力循環型抽出装置により加圧および減圧抽出工程をそれぞれ２０〜４０分の間、順次的に循環実施しながら計１．５〜２．５時間の間抽出してよい。そして、本発明の一実施例に係る加圧抽出時の圧力は１〜３ｋｇｆ／ｃｍ^２、減圧抽出時の圧力は５５０〜６５０ｍｍＨｇとし、抽出温度は６５〜８５℃である。

前記のように減圧および加圧の反復循環工程を実施する場合、高麗人参の熱変性を最小化して、ジンセノサイドの変性、たとえば、ジンセノサイドＲｂ１からＲｇ３へ糖分解されることを最小化することができる。したがって、高麗人参抽出物を既存の単純な抽出装置により反復なしに抽出する場合に比べて、抽出収率を２５〜３０％向上させることができる。また、その後、酢酸エチルといった有機溶媒を使用して非極性物質を除去し、ブタノールといった有機溶媒で水層を抽出することにより、ジンセノサイドの含有量を極大化してよい。具体的に、このような溶媒分画法によれば、総ジンセノサイドが１．５〜２質量％含有される一般高麗人参抽出物に比べて、高麗人参抽出物内のジンセノサイドの総含量を既存比１０倍以上、具体的に１５〜２５質量％に向上させることができる。

本発明の一実施例は、前記のような高麗人参抽出物を含む発毛および育毛促進用組成物を提供することにより、毛髪の成長周期のうち休止期から成長期へ移行される周期を効果的に短縮させることができるので、一般高麗人参抽出物を含む場合に比べて毛髪の成長促進効果が顕著に優れる。したがって、既存にはなかった優れた発毛および育毛を促進する効果を達成することができる。

一実施例によれば、本発明は、前記のように本発明の明細書に記載された高麗人参抽出物の発毛および育毛促進用途、または前記高麗人参抽出物を含む組成物の発毛および育毛促進用途を提供する。

また、本発明の他の一実施例は、前記のように本発明の明細書に記載された高麗人参抽出物を有効成分として、対象に有効量で投与することを含む発毛および育毛促進方法を提供し、このとき、前記高麗人参抽出物を組成物に含めて投与してよい。

さらに、本発明のまた他の一実施例は、発毛および育毛促進に使用するために、前記のように本発明の明細書に記載された高麗人参抽出物を提供することができ、このとき、前記高麗人参抽出物を組成物に含めて使用してよい。

本発明の一実施例によれば、前記組成物は、前記のジンセノサイドＲｂ２、ＲｃおよびＲｇ１を含む高麗人参抽出物の量を特に限定するものではないが、たとえば、組成物の総質量に対して２質量％以上含んでよく、たとえば２〜２０質量％含んでよい。高麗人参抽出物を２質量％未満含む場合、十分毛髪成長効果を期待することができず、２０質量％を超えて含む場合、安全性または剤形上製造に困難があるためである。

前記本発明の一実施例に係る組成物は、たとえば、薬学組成物、化粧料組成物または健康食品組成物であってよい。

本発明の一実施例に係る前記発毛および育毛促進用薬学組成物は、防腐剤、安定化剤、水和剤または乳化促進剤、浸透圧調節のための塩および／または緩衝剤等の薬剤学的補助剤、ならびにその他治療的に有用な物質をさらに含有してよく、通常の方法に従って多様な経口投与剤または非経口投与剤の形態で剤形化してよい。

前記経口投与剤は、たとえば、錠剤、丸剤、硬質および軟質カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳化剤、シロップ剤、粉剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、ペレット剤等があり、これらの剤形は、有効成分以外に、界面活性剤、希釈剤（例：ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよびグリシン）、滑沢剤（例：シリカ、タルク、ステアリン酸およびそのマグネシウムまたはカルシウム塩、ならびにポリエチレングリコール）を含有してよい。錠剤は、また、マグネシウムアルミニウムシリケート、澱粉ペースト、ゼラチン、トラガカンス、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロースおよびポリビニルピロリジンといった結合剤を含有してよく、場合によって、澱粉、寒天、アルギン酸またはそのナトリウム塩といった崩解剤、吸収剤、着色剤、香味剤、および甘味料等の薬剤学的添加剤を含有してよい。前記錠剤は、通常の混合、顆粒化またはコーティング方法によって製造されてよい。また、前記非経口投与形態として、経皮投与型剤形であってよく、たとえば、注射剤、点滴剤、軟膏、ローション、ゲル、クリーム、スプレー、懸濁剤、乳剤、坐剤、パッチ等の剤形であってよいが、これらに限定されるものではない。

本発明の一実施例に係る前記薬学組成物は、非経口、直腸、局所、経皮、皮下等に投与されてよい。本発明の一実施例に係る薬学組成物は、たとえば、頭皮に局所投与されてよい。

前記有効成分の投与量の決定は、当業者の水準内にあり、薬物の１日投与量は、投与しようとする対象の脱毛進行程度、発症時期、年齢、健康状態、合併症などの多様な要因に応じて異なるが、成人を基準とした場合、一般的には、前記組成物１μｇ／ｋｇ〜２００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは５０μｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇを、１日１〜３回に分割して投与してよく、前記投与量は、いかなる方法であれ、本発明の範囲を限定するものではない。

本発明の一実施例に係る前記発毛および育毛促進用組成物は、化粧料組成物であってよく、化粧料組成物の外形は、化粧品学または皮膚科学的に許容可能な媒質または基剤を含有する。これは、局所適用に適合したすべての製剤であって、たとえば、溶液、ゲル、固体、混練無水生成物、水相に油相を分散させて得たエマルジョン、懸濁液、マイクロエマルジョン、マイクロカプセル、微細顆粒球、あるいはイオン型（リポソーム）および非イオン型の小嚢分散剤の形態で、またはクリーム、スキン、ローション、パウダー、軟膏、スプレーもしくはコンシールスティックの形態で提供してよい。これらの組成物は、当該分野の通常の方法に従って製造されてよい。本発明に係る組成物は、また、泡沫（ｆｏａｍ）の形態で、または圧縮された推進剤をさらに含有したエアロゾル組成物の形態でも使用されてよい。

本発明の一実施例に係る前記化粧料組成物は、その剤形において特に限定されるところがなく、たとえば、柔軟化粧水、収斂化粧水、栄養化粧水、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、アイクリーム、アイエッセンス、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、パック、パウダー、ボディローション、ボディクリーム、ボディオイルおよびボディエッセンス等の化粧品に剤形化されてよい。
本発明の剤形がペースト、クリームまたはゲルである場合には、担体成分として、動物繊維、植物繊維、ワックス、パラフィン、澱粉、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイト、シリカ、タルクまたは酸化亜鉛等が利用されてよい。

本発明の剤形がパウダーまたはスプレーである場合には、担体成分として、ラクトース、タルク、シリカ、アルミニウムヒドロキシド、カルシウムシリケートまたはポリアミドパウダーが利用されてよく、特に、スプレーの場合には、さらにクロロフルオロヒドロカーボン、プロパン／ブタンまたはジメチルエーテルといった推進体を含んでよい。

本発明の剤形が溶液または乳濁液の場合には、担体成分として、溶媒、溶媒化剤または乳濁化剤が利用されてよく、たとえば、水、エタノール、イソプロパノール、エチルカーボネート、酢酸エチル、ベンジルアルコール、ベンジルベンゾエート、プロピレングリコール、１，３‐ブチルグリコールオイル、グリセロール脂肪族エステル、ポリエチレングリコールまたはソルビタンの脂肪酸エステルがある。

本発明の剤形が懸濁液である場合には、担体成分として、水、エタノールまたはプロピレングリコールといった液状希釈剤、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールエステルおよびポリオキシエチレンソルビタンエステルといった懸濁剤、微小結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、アガーまたはトラガカント等が利用されてよい。

本発明の剤形が界面活性剤含有クレンジングである場合には、担体成分として、脂肪族アルコールソルフェート、脂肪族アルコールエーテルソルフェート、スルホコハク酸モノエステル、イセチオネート、イミダゾリニウム誘導体、メチルタウレート、サルコシネート、脂肪酸アミドエーテルソルフェート、アルキルアミドベタイン、脂肪族アルコール、脂肪酸グリセリド、脂肪酸ジエタノールアミド、植物性油、リノリン誘導体またはエトキシル化グリセロール脂肪酸エステル等が利用されてよい。

本発明の一実施例によれば、有効成分の含有量は、特に制限されないが、有効成分を含む抽出物を、組成物の総質量に対して０．００１〜２０質量％含んでよい。前記含量を満たす場合、副作用なしに優れた効能を発現することができる。

本発明の一実施例に係る化粧料組成物には、前記有効成分を含む抽出物以外に、機能性添加物および一般的な化粧料組成物に含まれる成分がさらに含まれてよい。前記機能性添加物としては、水溶性ビタミン、油溶性ビタミン、高分子ペプチド、高分子多糖、スフィンゴ脂質および海藻エキスからなる群より選択された成分を含んでよい。

本発明の化粧料組成物には、また、前記機能性添加物とともに、必要に応じて、一般的な化粧料組成物に含まれる成分を配合してもよい。その他に含まれる配合成分としては、油脂成分、保湿剤、エモリエント剤、界面活性剤、有機および無機顔料、有機粉体、紫外線吸収剤、防腐剤、殺菌剤、酸化防止剤、植物抽出物、ｐＨ調整剤、アルコール、色素、香料、血行促進剤、冷感剤、制汗剤、精製水等を挙げることができる。

さらに、前記本発明の一実施例に係る発毛および育毛促進用組成物は、皮膚外用剤であり、前記皮膚外用剤は、皮膚外部において塗布されるいかなるものであっても含まれ得る総称であって、多様な剤形の化粧品、医薬品がここに含まれてよい。

また、本発明の一実施例に係る前記発毛および育毛促進用組成物は、健康食品組成物であってよく、本発明の健康食品組成物は、ジンセノサイドＲｂ２，Ｒｃ，Ｒｅ，Ｒｇ１を有効成分として含む高麗人参抽出物を、組成物の総質量に対して０．００１〜２０質量％含むことが好ましい。抽出物が０．００１質量％未満である場合には効能が十分に発現されず、２０質量％を超える場合には有効成分添加による効果の効率性が低下する。

本発明の一実施例に係る健康食品組成物において、前記組成物は、液状または固体状態の剤形であってよく、錠剤、カプセル剤、軟質カプセル剤、丸剤、顆粒剤、飲料（ドリンク剤）、ダイエットバー、チョコレート、キャラメル剤形または菓子類の剤形であってよく、その剤形が特に限定されるものではない。本発明の健康食品組成物は、前記有効成分以外にも、必要に応じて、賦形剤、糖類、香料、色素、油脂類、タンパク質等を適宜含有してよい。

以下、本発明を、下記の実施例および試験例を通じて説明する。実施例および試験例は、本発明をより詳細に説明するためのものであって、本発明の範囲が下記の実施例の範囲に限定されるものではない。

また、この技術分野における通常の知識を有する者であれば、誰でも、この発明の技術思想の範疇を逸脱することなく、添付した特許請求の範囲内で多様な変形および模倣が可能であることは明白な事実である。

［実施例１］ジンセノサイドＲｂ２，Ｒｃ，Ｒｇ１およびＲｅの含有量が増加した高麗人参抽出物の製造
高麗人参（錦山人参、購入先：錦山人参農協）を精製水で洗浄し、乾燥させた後、粉砕して細かく粉末化した高麗人参粉末を得た。得られた高麗人参粉末２ｇを、５０％エタノールを２０ｍＬ加えた後、圧力循環型抽出装置で加圧および減圧抽出工程をそれぞれ３０分間順次的に循環実施しながら、計２時間抽出した。このとき、加圧抽出時の圧力は２ｋｇｆ／ｃｍ^２、減圧抽出時の圧力は６００±５０ｍｍＨｇとし、抽出温度は７５℃に設定した。前記工程により得られた高麗人参抽出物を濾過し、その上澄み液を減圧乾燥して乾燥質量０．５７ｇを得た。その次に、乾燥物を水に溶かした後、酢酸エチルで抽出して、酢酸エチル層を除去し、水層をブタノールで抽出した後、減圧乾燥して乾燥質量２．７ｇを得た。これを実施例１とした。

また、この実施例１の高麗人参抽出物に含有されたジンセノサイドを、下記分析機器および条件でＨＰＬＣ分析した後、その結果をグラフに示した。そして、この結果から、前記抽出物に含有されたジンセノサイドの各成分別含量を分析して、質量％で表２および図２に示した。

ＨＰＬＣ分析機器と分析条件
機器：Ｗａｔｅｒｓ ２９９８ ＰＤＡ ｄｅｔｅｃｔｅｒ，１５２５ ｐｕｍｐ，２７０７ ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ
カラム：Ｓｕｎ ｆｉｒｅ Ｃ１８ ３０５μｍ、４．６×１５０ｍｍ
検出器（ｄｅｔｅｃｔｏｒ）：ＵＶ ２０３ｎｍ
流量（Ｆｌｏｗ ｒａｔｅ）：１ｍＬ／ｍｉｎ
注入体積（Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｎ）：２０μｌ
条件：ｇｒａｄｉｅｎｔ（Ａ‐水、Ｂ‐アセトニトリル）

その結果、表２および図２に示されたところのように、本発明の実施例１は、ジンセノサイドＲｂ２を２．５質量％以上である２．９１質量％、Ｒｃを３質量％以上である３．１４質量％、Ｒｅを６質量％以上である６．２３質量％、およびＲｇ１を２．０質量％以上である２．１質量％含んでいることを確認することができた。

［比較例１］一般高麗人参抽出物の製造
高麗人参（錦山人参、購入先：錦山人参農協）を精製水で洗浄し、乾燥させた後、粉砕して細かく粉末化した高麗人参粉末を得た。得られた高麗人参粉末２ｇを、５０％エタノール１００ｍＬで、７５℃で２時間抽出した後、試料を濾過して、その上澄み液を減圧乾燥して乾燥質量０．３０ｇを得た。これを比較例１とした。

また、この比較例１の高麗人参抽出物に含有されたジンセノサイドを、前記実施例１と同一の分析機器および条件でＨＰＬＣ分析した後、その結果をグラフに示した。そして、この結果から、前記抽出物に含有されたジンセノサイドの各成分別含量を分析して、質量％で表３および図３に示した。

その結果、表３および図３に示されたところのように、比較例１は、ジンセノサイドＲｂ２を０．３３質量％、Ｒｃを０．５５質量％、Ｒｅを０．１６質量％、およびＲｇ１を０．１４質量％含んでおり、本発明の実施例１が、一般高麗人参抽出物よりも、各ジンセノサイドを約５〜１５倍以上の含量％で含んでいることを確認することができた。また、高麗人参抽出物に含有されたジンセノサイドの総質量も、本発明の実施例１が比較例１よりも顕著に高い数値を有することを確認することができる。

［実験例１］毛乳頭細胞における毛髪成長因子ＶＥＧＦの発現評価
高麗人参抽出物が、血管形成に必要な成長因子であって毛髪の成長期に移動するのに必要な成長因子である血管内皮細胞増殖因子（Ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ；ＶＥＧＦ）を発現させる程度を評価するために、生体外（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）システムを適用して高麗人参抽出物適用後の活性を評価した。

前記実験のために、４７歳の男性の毛乳頭真皮細胞（Ｄｅｒｍａｌ Ｐａｐｉｌｌａ Ｃｅｌｌ；ＤＰＣ）（Ｐ．１１）４×１０^５ｃｅｌｌを、１２ウェルプレート（ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅ）にシーディング（ｓｅｅｄｉｎｇ）し、１０％ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ）を含有するＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ´ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ´ｓ ｍｅｄｉｕｍ）培地において一晩培養した。培養後、前記実施例１と比較例１をそれぞれ２０ｐｐｍで処理した。陰性対照群としては、ＤＭＳＯを使用した。２４時間後、前記実施例１または比較例１が処理された混合液を収集（ｓｏｕｐ ｃｏｌｌｅｃｔ）し、ＶＥＧＦ ＥＬＩＳＡ（Ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ Ｅｎｚｙｍｅ‐Ｌｉｎｋｅｄ Ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ Ａｓｓａｙ；Ｒ＆Ｄ ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して、実施例１と比較例１の高麗人参抽出物による発現程度の差を確認した。そして、その結果を図４に示した。

図４から見られるように、一般高麗人参抽出物である比較例１は、高麗人参抽出物を使用していない対照群と比較して大きな効果の差が認められなかった。しかし、本発明の実施例１は、比較例１と同一濃度で使用した場合、毛乳頭細胞における毛髪成長因子ＶＥＧＦの発現を約３倍以上増加させた。これは、実施例１の高麗人参抽出物が、ジンセノサイドＲｂ２，ＲｃおよびＲｇ１等を比較例１の一般高麗人参抽出物よりも多く含有することにより、毛乳頭細胞における毛髪成長因子ＶＥＧＦの発現をより効果的に増加させたためである。したがって、本発明に係る高麗人参抽出物は、優れた毛髪生成促進能を有することが分かる。

［試験例２］毛嚢毛乳頭細胞増殖効果の評価
毛髪を構成するケラチンタンパク質は、毛根部ケラチン形成細胞（ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ）で生成され、このケラチン形成細胞は、毛乳頭細胞から分化される。したがって、本発明に係る高麗人参抽出物が毛乳頭細胞の活性を促進するのであれば、それから分化されるケラチン形成細胞の活性を促進させることができ、ひいては毛髪生成を促進することができるであろう。

そこで、本実験では、高麗人参抽出物の毛乳頭細胞活性促進効果を、下記のように評価した。

まず、本実験においては、ヒト乳頭細胞（Ｈｕｍａｎ ｄｅｒｍａｌ ｐａｐｉｌｌａ ｃｅｌｌ）細胞株を使用した。前記細胞株は、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）が含有されたＤｕｌｂｅｃｃｏ´ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ´ｓ ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ；Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ，ＵＳＡ）において、５％ＣＯ_２、３７℃で維持されるインキュベータで２４時間培養した後、実施例１の高麗人参抽出物を１０ｐｐｍおよび２０ｐｐｍ、比較例１の高麗人参抽出物を２０ｐｐｍそれぞれ処理した。陰性対照群としては、ＤＭＳＯを使用した。試験物質を処理した後、２４時間経過後に、ＷＳＴ‐１キット（Ｒｏｃｈｅ）を使用して、細胞増殖能（％）を測定した。その結果を図５に示した。

図５から見られるように、本発明に係る高麗人参抽出物である実施例１は、１０ｐｐｍおよび２０ｐｐｍともに、２つの細胞の増殖を、有意差を持って増加させた。特に、実施例１を１０ｐｐｍ処理した場合が、一般高麗人参抽出物である比較例１を２０ｐｐｍ処理した場合よりも、約１．５倍以上高い毛乳頭細胞増殖増加率を示した。これは、本発明に係る高麗人参抽出物が、既存の一般高麗人参抽出物よりも毛乳頭細胞の増殖を促進させることができるので、ケラチン形成細胞の活性および毛髪生成もより効果的に促進することができることを意味する。

［試験例３］人体毛嚢器官を利用した毛髪成長促進効果の評価
本発明の、実際の人体毛嚢器官における毛髪成長促進能を確認した実験を実施した。

まず、前記試験例２と同一の方法で、高麗人参抽出物の主要構成成分であるジンセノサイドＲｂ１，Ｒｂ２，Ｒｃ，Ｒｄ，ＲｅおよびＲｇ１を、それぞれ種類別に、毛乳頭細胞に０．１μＭ、１μＭずつ処理し、２４時間経過後に、ＷＳＴ‐１キット（Ｒｏｃｈｅ）を使用して、細胞増殖能（％）を測定した。その結果を図６に示した。

次に、５５歳の男性の後頭部頭皮組織から毛包器官を一つずつ分離して、Ｗｉｌｌｉａｍ Ｅ培地（Ｌ‐グルタミン（２ｍＭ）、インスリン（１０μｇ／ｍｌ）、ヒドロコルチゾン（４０ｎｇ／ｍｌ）、抗生剤（１％）、抗真菌剤（１％）含有）に培養した。培養後３日目に成長が起こった毛嚢を選別して３ｍｍに切り、選別した毛嚢組織に対して、薬物を処理していない場合を対照群とし、実験群は、実施例１で得られた高麗人参抽出物２ｐｐｍ、５ｐｐｍをそれぞれ処理した場合と、比較例１を５ｐｐｍ処理した場合に分けた。そして、処理してから８日後、それぞれの長さの測定および写真撮影を行った。また、前記と同一の方法で、ジンセノサイドＲｂ１，Ｒｂ２，Ｒｃ，Ｒｄ，Ｒｅ，Ｒｇ１、比較例１、および実施例１を、それぞれ種類別に、毛嚢組織に５ｐｐｍずつ処理した。その結果を図７と図８に示した。

その結果、図６から見られるように、ジンセノサイドのうちジンセノサイドＲｂ１，Ｒｃ，Ｒｇ１がはっきりとした毛髪成長促進効果を示した。これは、すべて統計学的に有意なものである。

また、図７から見られるように、毛嚢器官における毛髪の長さの増加において、実施例１の高麗人参抽出物を５ｐｐｍ処理した場合は、同一濃度で処理した比較例１および対照群よりも優れた毛髪成長促進効果が示された。特に、比較例１の場合は、対照群よりも平均成長長さが減少したものと示された。さらに、図８から見られるように、ジンセノサイドＲｂ１，Ｒｂ２，Ｒｃ，Ｒｄ，Ｒｅ，Ｒｇ１は、比較例１よりも平均成長長さが増加したが、実施例１が、平均成長長さが最も多く増加したものと示された。

従って、前記図６、図７および図８の結果を総合してみると、本発明に係る高麗人参抽出物は、既存の一般高麗人参抽出物よりも毛髪成長促進効果を有するジンセノサイドＲｂ１，Ｒｃ，Ｒｇ１を、より増加された含量で含むため、毛嚢における毛髪の長さの成長を促進する効果に優れることが分かる。

［試験例４］脱毛患者を対象とした臨床試験
前記実施例１の高麗人参抽出物２％を含む頭皮エッセンスと、実施例１の高麗人参抽出物成分を除いた対照群を、満２０〜６０歳の成人女性のうち脱毛症状のある者を対象に、試験群（実施例１）と対照群とにそれぞれ２３人ずつ分けた後、１日夕方１回、脱毛部位に塗布して使用させた。塗布期間は１６週とし、育毛効果を、被験者の主観的評価、臨床写真による研究者の評価、および客観的毛髪測定法のうち非侵襲的方法であるフォトトリコグラム（Ｐｈｏｔｏｔｒｉｃｈｏｇｒａｍ）を利用した毛髪密度、毛髪の太さ、毛髪の成長速度および脱落毛髪数を含む毛髪の生物学的変数の測定を通じて、脱毛防止および育毛効果を評価した。本試験は、無作為割付、二重盲検、活性対照臨床試験で構成された。実験結果を表４〜８に示した。

実施例１と対照群の毛髪密度を表４において比較した。実施例１の場合、使用８週、１６週後に、それぞれ５．４８５％、７．４０９％増加し、すべての時点において有意な変化を確認した。改善された被験者の比率は、使用８週、１６週後に、それぞれ８６．３６４％、８６．３６４％であった。一方、対照群の場合、使用８週、１６週後に、それぞれ１．６１５％、１．３３４％増加した。

実施例１と対照群の毛髪成長速度を表４において比較した。実施例１の場合、使用８週、１６週後に、それぞれ３．２１８％、８．７８３％増加し、１６週後において有意な変化を確認した。改善された被験者の比率は、使用８週、１６週後に、それぞれ６８．１８２％、８１．８１８％であった。一方、対照群の場合、使用８週、１６週後に、それぞれ２．４８０％増加、１．１４２％減少した。

実施例１と対照群の毛髪の太さを表５において比較した。実施例１の場合、使用２週、４週、８週、１６週後に、それぞれ１．５２６％、２．６１１％、４．７８２％、７．１７８％増加し、すべての時点において有意な変化を確認した。改善された被験者の比率は、使用２週、４週、８週、１６週後に、それぞれ７２．７２７％、８１．８１８％、９５．４５５％、９５．４５５％であった。一方、対照群の場合、使用２週、４週、８週、１６週後に、それぞれ０．９０３％、０．７６５％、０．５９５％、１．０８４％減少した。

実施例１と対照群の脱落毛髪数を表６において比較した。実施例１の場合、使用４週後に１．５８９％増加、８週後に４．８４９％減少、１６週後に３３．２７８％減少し、１６週後において有意な変化を確認した。改善された被験者の比率は、使用４週、８週、１６週後に、それぞれ５０．０００％、５４．５４５％、７２．７２７％であった。一方、対照群の場合、使用４週後に２６．７２１％増加、８週後に１．９５３％減少、１６週後に２．３６４％増加した。

実施例１と対照群の脱落改善度肉眼評価を表７において比較した。実施例１の場合、使用４週、８週、１６週後に、それぞれ０．０４５点、０．３１８点、０．３６４点増加し、使用８週、１６週後において有意な変化を確認することができた。改善された被験者の比率は、使用４週、８週、１６週後に、それぞれ９．０９１％、２２．７２７％、３６．３６４％であった。一方、対照群の場合、使用４週、８週、１６週後に、それぞれ０．１３０点減少、０．０８７点増加、０．０８７点減少した。改善された被験者の割合は、使用４週、８週、１６週後に、それぞれ０．０００％、１７．３９１％、１７．３９％であった。

実施例１と対照群の被験者の主観的改善度評価を表８において比較した。実施例１の場合、使用８週、１６週後に、それぞれ４０．９％、６３．６％が肯定的に認知し、否定的認知は、使用８週、１６週後に、それぞれ０．０％、４．４％に過ぎなかった。一方、対照群の場合、使用８週、１６週後に、それぞれ５２．１％、３９．１％が肯定的に認知し、否定的認知は、使用８週、１６週後に、それぞれ０．０％、８．７％と示された。

結論として、本発明の実施例１は、有効性評価の結果、１日１回の塗布のみで、対照群に比べて卓越した脱毛防止および育毛効果があった。

下記に、本発明に係る組成物の剤形例について説明するが、他の様々な剤形へも応用可能であり、これは、本発明を限定しようとするものではなく、ただ具体的に説明しようとするものである。

［剤形例１］皮膚外用剤（シャンプー）
下記表９に記載された組成に従って、通常の方法でシャンプーを製造した。

［剤形例２］皮膚外用剤（リンス）
下記表１０に記載された組成に従って、通常の方法でリンスを製造した。

［剤形例３］皮膚外用剤（軟膏）
下記表１１に記載された組成に従って、通常の方法で軟膏を製造した。

［剤形例４］ローション
下記表１２に記載された組成に従って、通常の方法でローションを製造した。

［剤形例５］クリーム
下記表１３に記載された組成に従って、通常の方法でクリームを製造した。

［剤形例６］パック
下記表１４に記載された組成に従って、通常の方法でパックを製造した。

［剤形例７］美容液型製剤
下記表１５に記載された組成に従って、通常の方法で美容液型製剤を製造した。

［剤形例８］軟質カプセル剤
実施例１の抽出物５０ｍｇ、Ｌ‐カルニチン８０〜１４０ｍｇ、大豆油１８０ｍｇ、パーム油２ｍｇ、植物性硬化油８ｍｇ、黄蝋４ｍｇおよびレシチン６ｍｇを混合し、通常の方法に従って、１カプセルあたり４００ｍｇずつ充填して軟質カプセルを製造した。

［剤形例９］錠剤
実施例１の抽出物５０ｍｇ、ガラクトオリゴ糖２００ｍｇ、乳糖６０ｍｇおよび麦芽糖１４０ｍｇを混合し、流動層乾燥機を利用して顆粒した後、糖エステル（ｓｕｇａｒ ｅｓｔｅｒ）６ｍｇを添加して、打錠機で打錠して錠剤を製造した。

［剤形例１０］顆粒剤
実施例１の抽出物５０ｍｇ、無水結晶ブドウ糖２５０ｍｇおよび澱粉５５０ｍｇを混合し、流動層造粒機を使用して顆粒に成形した後、包に充填して顆粒剤を製造した。

［剤形例１１］ドリンク剤
実施例１の抽出物５０ｍｇ、ブドウ糖１０ｇ、クエン酸０．６ｇおよび液状オリゴ糖２５ｇを混合した後、精製水３００ｍｌを加えて各瓶に２００ｍｌずつ充填した。瓶に充填した後、１３０℃で４〜５秒間殺菌して、ドリンク剤飲料を製造した。

Claims (12)

1. 高麗人参抽出物総質量に対して、ジンセノサイドＲｂ２を２．５質量％以上４．５質量％以下、ジンセノサイドＲｃを３質量％以上７．５質量％以下、およびジンセノサイドＲｇ１を２質量％以上５質量％以下含む高麗人参抽出物。
2. 前記高麗人参抽出物は、ジンセノサイドＲｅを、高麗人参抽出物総質量に対して６質量％以上２０質量％以下さらに含むことを特徴とする、請求項１に記載の高麗人参抽出物。
3. 前記高麗人参抽出物は、高麗人参の根から抽出された抽出物であることを特徴とする、請求項１に記載の高麗人参抽出物。
4. 前記高麗人参抽出物は、高麗人参のひげ根から抽出された抽出物であることを特徴とする、請求項１に記載の高麗人参抽出物。
5. 請求項１の高麗人参抽出物の製造方法であって、
   高麗人参に、有機溶媒の比率が１０容量％以上９０容量％以下である水および有機溶媒の混合物を加えた後、加圧抽出工程および減圧抽出工程を順次的に繰返し実施しながら抽出するステップ；および
   前記ステップによって得られた高麗人参抽出物を水に溶かした後、酢酸エチルで抽出し、酢酸エチル層を除去した後、水層をさらにブタノールで抽出して高麗人参抽出物を製造するステップ；
   を含み、
   前記有機溶媒は、エタノール、メタノール、ブタノール、エーテル、酢酸エチルおよびクロロホルムからなる群より選択される少なくとも１種であり、
   前記加圧抽出時の圧力は、１ｋｇｆ／ｃｍ ^２ 以上３ｋｇｆ／ｃｍ ^２ 以下であり、
   前記減圧抽出時の圧力は、５５０ｍｍＨｇ以上６５０ｍｍＨｇ以下であり、
   抽出温度は、６５℃以上８５℃以下である、
   高麗人参抽出物の製造方法。
6. 請求項１〜４のいずれか１項の高麗人参抽出物を有効成分として含む発毛および育毛促進用組成物。
7. 前記高麗人参抽出物を組成物総質量に対して２質量％以上２０質量％以下含む、請求項６に記載の発毛および育毛促進用組成物。
8. 前記高麗人参抽出物に含まれるジンセノサイドは、毛髪の成長周期のうち休止期から成長期へ移行される周期を短縮させるものであることを特徴とする、請求項６に記載の発毛および育毛促進用組成物。
9. 前記組成物は、薬学組成物であることを特徴とする、請求項６に記載の発毛および育毛促進用組成物。
10. 前記組成物は、化粧料組成物であることを特徴とする、請求項６に記載の発毛および育毛促進用組成物。
11. 前記組成物は、皮膚外用剤であることを特徴とする、請求項６に記載の発毛および育毛促進用組成物。
12. 前記組成物は、食品組成物であることを特徴とする、請求項６に記載の発毛および育毛促進用組成物。

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