CN1056812A

CN1056812A - 药物组合物的制备方法

Info

Publication number: CN1056812A
Application number: CN91103023.9A
Authority: CN
Inventors: 埃里克·贝彻加德; 思维伯江·吉拉森; 罗夫·库尔盟·加克耶
Original assignee: Novo Nordisk AS
Current assignee: Novo Nordisk AS
Priority date: 1990-05-10
Filing date: 1991-05-09
Publication date: 1991-12-11
Also published as: EP0532546B1; US5428006A; IL98089A0; DE69129110T2; AU654950B2; JP3219096B2; AU7880991A; DE69129110D1; EP0532546A1; WO1991016929A1; IE911577A1; ATE164080T1; DK0532546T3; AU687496B2; PT97610A; CS136191A3; JPH05507085A; AU1358695A; US5693608A; AU7643591A

Abstract

一种将生物活性物质施敷到哺乳动物粘膜上的药物组合物，该组合物可产生几乎与静脉内注射一样快的药物活性物质的高血浆浓度，含有式I所示的一种或多种n-糖原糠醛和式II所示的n-甘醇，其中式 (I)中n为1-8；式(II)中的p为1-14。

Description

本发明涉及用于哺乳动物的通过粘膜给药的含有生物活性物质的药物组合物的制备方法。

当需要获得快速强烈的系统作用（如在3-5分钟内）时，以及当活性物质不吸收或在胃肠道失活或在首次肝代谢中失活时，注射服用生物活性物质（静脉内，肌内和皮下）通常被认为是最便利的给药方式。但是，注射给药产生一系列缺点，它需要使用无菌注射器并可能产生疼痛和刺激，并有感染的危险性，在重复注射的情况下更是如此。此外，对未经训练的人不能实施注射给药。

目前，鼻内给药日益受到关注，试图避免由于直接进入与肠胃外给药有关的机体而带来的不便。此外，若需要快速的初始效果，上述给药途径也可作为肠胃外注射的一种选择手段，并可由未经训练的人实施。

为了替代注射给药方式，鼻内给药应提供类似的剂量对血浆浓度的关系，并且不应对患者产生任何巨痛或刺激，也不应对鼻粘膜产生不可挽回的损害或刺激。但是，在治疗威胁生命的急性病征时，允许对粘膜有相对高的局部刺激。

在鼻内给药中，生物活性物质必须以这种方式施敷在鼻粘膜上，即活性物质能渗透过粘膜或通过粘膜吸收。为了能渗透粘液，载体必须与粘液生物相容，并因此应有一定的亲水性。但是，载体也应具有亲脂性，以溶解生理活性量的生物活性物质。

鼻粘膜下的广阔的毛细血管网胳尤其适宜提供对药物的快速有效的系统吸收作用。此外，鼻上皮膜实际上由单层的上皮细胞（peseudostratified epithelium）组成，因此比其他的具有鳞状上皮层的粘膜表面，如口、阴道等更适宜给药。但是，也可以通过使用本发明给药系统，经上述表面服用生物活性物质。

若生物活性物质不能以水溶形式存在，则鼻内吸收的效率很低（proctor，1985）。这就对生物活性物质的使用施加了严重的限制，即生物活性物质应是水溶性的并在水溶液中稳定。

大量的生物活性物质，包括药物（如苯并二氮类）、维生素和菌苗，的水溶解度有限，在鼻内给药应用的相对小的体积内溶解临床有效量的活性物质常常是不可能的。

对于液态组合物而言，在小于约300μl的体积内溶解有效量的生物活性物质是重要的。较大的体积量对患者来说是不能接受的，并明显从鼻孔前流出或向后流入咽部。结果是，部分活性物质从吸收部位流失，而且在实际应用中，不可能再现使用正确的剂量。对成人而言，体积宜为约1μl-约1000μl，以约50μl-150μl为佳。

鼻腔内的粘膜上皮被许多毛发状纤毛覆盖，这是哺乳动物抗灰尘、变应体和微生物吸入的重要的防御机体。由于除去外来颗粒的和过量粘液进咽部的粘液清率，施敷在鼻腔内的未吸收物质的正常半时间（half-time）一般为15分钟。因此，最好快速发生吸收作用，宜于在1-20分钟内。

已经研制出各种载体体系，用于生物活性物质在鼻内输送。至今文献中教导，通过向配方中加入特定的载体体系或加入某种吸收促进剂，使从鼻粘膜中吸收生物活性物质。

Lau和Slattery（1989）研究了在治疗癫痫持续状态时鼻内给药后地西泮和劳拉西泮的吸收特性。为了溶解这些药物，从几种所研究的溶剂包括聚乙二醇400中，选择一种非离子型表面活性剂聚乙氧基化蓖麻油作最低刺激剂。在两个被测的成年人中，60小时后地西泮的吸收分别是84%和72%。但是，直到鼻内药1.4小时后才出现峰浓度，并且只是静脉内给药的27%，这表明在试验物质进入咽部并吞咽下去后，已可能发生了大部分的吸收作用。用劳拉西泮所得结果类似，只是出现的峰浓度的时间更长（2.3小时）。作者由此得出结论，在紧急治疗癫痫发作时，鼻内给药途径的作用有限。

Wilton等（1988）给45名儿童服用咪达唑仑，试图达到前驱麻醉颠静作用。服用量非常不切实际，超过了有效给药的最大值，引起咳嗽和打喷嚏，损失部分剂量。该论文没有叙述所用的水溶液载体系统。

国际专利申请WO 86/04233公开了一种药物组合物，其中的药物（如地西泮）溶解于推进剂与助溶剂如甘油磷脂的混合物中。该组合物需要一种加压系统和至少一种卤化烃气雾剂推进剂。

Morimoto等（1987）研究了在小鼠鼻内应用的硝苯啶凝胶制剂，含有凝胶剂Carbopol（聚丙烯酸）和聚乙二醇400（PEG400），以达到药物的持久作用和高的生物有效性。推荐使用等量的carbopol和PEG400的混合物。据表明，鼻内给药可提供比口服用药更高的硝苯啶生物有效性，但是直到30分钟后才出现血浆峰浓度，并且只是静脉内给药的≤10%。

DK 2586/87公开了一种药物组合物，包括一种消炎胆固醇，水，2-10%（体积）的丙二醇。10-25%（体积）的聚乙二醇400和1-4%（体积）的Tween 20。

US 4，153，689公开了一种用于鼻内给药的稳定的胰岛素水溶液制备方法。该胰岛素水溶液的PH范围在2.5-4.7，含有0.1-20%（重量）的稳定剂，稳定剂选自（a）至少一种亲水-亲脂平衡值为9-22的非离子型表面活性剂，（b）分子量范围在200-7500的聚乙二醇稳定剂和（c）上述（a）和（b）中稳定剂的混合物。

国际专利申请90/02737公开了苯并二氮

类催眠药在药学上可接受的鼻用载体中，鼻内给药的方法。所述载体可以是生理盐水，醇、乙二醇、乙二醇醚或上述混合物。没有教导说乙醇或乙二醇醚的存在可以赋予制剂特殊优点，也未指出它们的存在对给药是至关重要的。

其他的鼻内或舌下给药制剂见诸于US 4.746，508和WO87/05210。US 4.746，508公开了通过使用梭链孢酸和其衍生物作为吸收催进剂来吸收例如胰岛素;WO 87/05210公开了舌下喷雾药物制剂，选择包括PEG，并需要乙醇，脂肪酸的甘油二酯和/或甘油三酯以及药用推进气。

本发明的主要目的是提供一种通过哺乳动物粘膜施用生物活性物质的药物组合物，该组合物产生药物活性物质的高血浆浓度的速度几乎与静脉内给药一样快，而对粘膜不产生不可接受的损害。本发明组合物完全可达到上述目的。

本发明的药物组合物的特征是包括如下式Ⅰ所示的一种或多种n-糖原糠醛（n-glgcofurols）

（式中n为1-8的一个整数）和如式Ⅱ所示的n-甘醇：

式中p是1-14的一个整数。

当不存在糖原糠醛并且生物活性物质是苯并二氮

时，则在本发明中，n-甘醇中p为1-8。

根据本发明，优选p为1-8的n-甘醇，并且更优选在制剂中含有四甘醇。

本发明的药物组合物最好包括n-糖原糠醛，其中n是1或2。

本发明的药物组合物最好包括一种或多种n-糖原糠醛，并且必要时包括一种或多种n-甘醇。

本发明药物组合物中的生物活性物质可以选自：肾上腺激素，皮质类胆固醇和衍生物，例如：ACTH和其同类物，teracosactrin，alsatide，可的松，醋酸可的松，氢化可的松，氢化可的松醇，醋酸氢化可的松，半琥珀酸氢化可的松，泼尼龙，三丁酸泼尼龙，9-α-氟泼尼龙，曲安缩松，磷酸地塞米松，氟尼缩松，budesonide，toxicorol pivalate等;氨基酸;减食欲剂如苄非他明HCl，对氯苯丁胺HCl等;抗生素如四环素HCl，缺杆菌素，先锋霉素，氨基，链霉素，庆大霉素，北里霉素，青霉素和其衍生物，红霉素等;抗变应剂;抗体如抗感染疾病的单克隆或多克隆抗体;抗胆硷能剂如阿托品碱等;抗抑制剂如阿密替林HCl，丙咪嗪HCl等;止吐剂例如安定剂如甲磺哌丙嗪，抗组胺药如吐来抗或具有由调节肠移动效果的止吐剂如domperidon;镇癫痫剂和镇痉剂如氯硝西泮，地西泮，硝基安定，劳拉西泮等;抗组胺剂和组胺剂如苯海拉明HCl，扑尔敏马来酸盐，克立马丁，组胺，prophenpyridamine maleate，chlorprophenpyritamind maleate，咳乐钠，氯苯甲嗪等;抗高血压剂如氯压定HCl等;抗感染剂（酶）如胰凝乳蛋白酶，菠萝蛋白酶，丝拉肽酶等，消炎剂（非胆固醇）如扑热息痛，阿司匹林，氨基比林，保泰松，甲灭酸，布洛劳，双氯灭痛，消炎痛，秋水仙碱，丙磺舒等;消炎（胆固醇类）如氢化可的松，泼尼松，氟替阿嗪，predonisolone，去炎松，丙酮缩去炎松，地塞米松，倍他米松，倍氯米松，双丙酸倍氯米松等;抗肿瘤剂如天生霉素C等;抗菌剂如洗必太HCl，己基间苯二酚，地奎氯铵，利凡诺等;抗肿瘤剂;镇咳剂如色甘酸钠，磷酸可待因，异丙去甲肾上腺素HCl等;抗病毒和抗癌剂如干扰素（如用于治疗普通感冒的α-2-干扰素），对胍基苯甲酸甲酯，enviroxime等;β-肾上腺素能阻滞剂如盐酸心得安等;血因子如第七因子，第八因子等;骨代谢控制剂如维生素D3，活性维生素D3等;支气管扩张药如盐酸克仑特罗，镇咳祛痰药等;强心药如洋地黄，地高辛等;心血管调节激素、药和其衍生物如舒管激肽，尿钠排泄肽，尿钠排泄肽和衍生物，肼苯哒嗪，血管紧张素Ⅱ，拮抗药，硝酸甘油，硝苯吡啶，消心痛，萘心安，氯非铵甲苯磺酸盐等;化疗剂如磺胺噻唑，呋喃西林等;CNS-刺激剂如利多卡因，古柯碱等;皮质类胆固醇如lacicortone，氢化可的松，肤轻松，丙酮缩去炎舒松等;诊断药物如酚磺酞，染料T-1824，活性染料，铁氰化钾，分泌素，五胺促胃酸菌素，变蓝素菌等;多巴胺能剂如溴麦角环肽甲磺酸盐等;酶如溶菌酶氯化物，菌聚糖酶等;胃肠道激素及衍生物如分泌素，物质P等，下丘脑激素及衍生物如LHPH及同类物（如纳法来林，布塞来林，佐利代斯等），脑啡肽（DADLE，美克法胺，亮氨酸脑啡肽），TRH（促甲状腺素释放激素）等;Hypothensives;局部麻碎剂如苯佐卡因等;治疗偏头痛药如二氢麦角胺，麦角新碱，麦角胺，pizotizin等;麻碎剂，拮抗药和止痛剂如叔丁啡，纳洛酮等;胰腺激素和衍生物和胰岛素（以六聚体/二聚体/单体形式）;高血糖素等;类副交感神经功能剂如尼古丁，乙酰甲胆碱等;抗副交感剂如东茛蓉碱，阿托品，溴化异丙基阿托品等;parcinson病药物如阿朴吗啡等;垂体腺激素和衍生物如生长激素（如人），加压素和同类物（DPAVP，赖氨酸加压素），催产素和同类物等;前列腺素如PGA和衍生物，PGE1和衍生物，PGE2和衍生物，PGF1和衍生物，地诺前列素，氨丁三醇等;蛋白酶抑制剂如抑肽酶柠檬酸盐或α1-抗胰蛋白酶等;镇静剂如阿普唑仑，溴西泮，溴替唑仑，卡马西泮，氯氮

，氯巴詹，氯西泮酸，氯硝西泮，氯噻西泮，氯噁唑仑，地洛西泮，地西泮，艾司他唑仑，劳拉西泮酸乙酯，氯硝西泮，氟硝西泮，氟西泮，氟他唑仑，哈拉西泮，卤沙唑仑，凯他唑仑，劳拉唑仑，劳拉西泮，劳美他西泮，美达西泮，咪达唑仑，硝甲西泮，硝基安定，诺地阿西泮，去甲羟安定，噁唑仑，匹那西泮，普拉西泮，替马西泮，四氢西泮，托非索泮，三唑仑等;性激素如炔雌醇，左炔诺孕酮，FSH，LH，LTH，雌二醇-17-β，黄体酮，norethindronetestosteron，等;拟交感剂如麻黄碱，肾上腺素，苯福林，塞洛唑啉，曲马唑啉，多巴胺，多巴酚丁胺等;甲状腺激素和衍生物如降钙素及其合成改性物等;镇定药如阿普拉西泮，溴西泮，溴替唑仑，卡马西泮，甲氨二氮

，氯巴詹，氯西泮酸，氯硝西泮，氯噻西泮，氯恶唑仑，地劳拉西泮，地西泮，艾司他西泮，洛氟拉西泮酸乙酯，氟塞西泮，氟硝安定，氟西泮，氟他唑仑，哈拉西泮，卤沙唑仑，卡他唑仑，劳拉唑仑，劳拉西泮，洛美他西泮，美达西泮，咪哒唑仑，尼美达西泮，硝基安定，诺地阿西泮，去甲羟安定，恶唑仑，匹那西泮，普拉西泮，替马西泮，四氢西泮，tofisopam，三唑仑等;菌苗如AIDS菌苗，感染病毒，副流感病毒，麻疹病毒，灰质病毒，鼻病毒型13，呼吸合胞体病毒，等;血管收缩剂如phenylephrine HCl，四氢维洛林HCl，苯甲唑啉硝酸盐，oxymetazoline HCL，萘胺唑啉HCL等;血管扩张剂如硝酸甘油，罂粟果HCL，物质P;VIP（血管肠肽）等;维生素如维生素B12，叶酸或烟酰胺;

本发明组合物包括以下优选的生物活性物质：肾上腺激素，皮质胆固醇及其衍生物，氨基酸，减食欲剂，抗菌素，抗变应性剂，抗胆碱能剂，抗抑制剂，解毒剂，抗癫痫剂，抗组胺剂及组胺剂，抗增压剂，消炎剂（酶类，非胆固醇类以胆固醇类），抗新塑料剂，防腐剂，抗肿瘤剂，镇咳祛痰剂，抗病毒及抗癌剂，β-类肾上腺素能阻滞剂，血因子，骨代谢控制剂，支气管扩张药，强心药，心肌调节激素药和衍生物，化疗剂，CNS-刺激剂，皮质胆固醇，诊断药，多巴胺能剂，酶，溶解纤维蛋白剂，GABA拮抗药，胃肠道激素和衍生物，谷氨酸拮抗药，大豆拮抗药，下丘脑激素和衍生物，Hypothensive，局部麻碎剂，偏头痛治疗物质，麻碎剂，拮抗剂和止痛剂，胰腺激素和衍生物，类副交感神经功能剂，抗副交感神经剂，垂体腺激素和衍生物，前列腺，镇静剂，性激素，解痉剂，拟交感剂，甲状腺激素和衍生物，镇静药，菌苗，血管收缩剂，血管扩张剂和维生素。

用于本发明的生物活性物质选自可在胃肠道消化的生物活性多肽。

用于本发明的生物活性物质最好选自：凝固因子如因子Ⅶ，因子Ⅷ，因子1×和衍生物及同类物;骨代谢控制剂如维生素D3，活性维生素D3，降血钙素及其衍生物和同类物;选自下丘脑的激素如LHRH或同类物，例如纳法来啉，布塞来林，佐利代斯，脑啡肽如DADLE，美克法胺或亮氨酸脑啡肽和TRH以及衍生物和同类物;激素，选自胰腺如胰岛素如高血糖素以及衍生物和同类物;激素选自垂体腺，如生长激素，后叶加压素或催产素及其衍生物和同类物，例如DDAVP，或赖氨酸加压素;性激素如乙炔雌二醇，levonorgestrol，FSH，LH，LTH雌二醇-17β，孕酮，炔诺酮或睾酮及其衍生物和同类物;镇定剂如阿普唑仑，溴西泮，溴替唑仑，卡马西泮，氯氮

，氯巴詹，氯西泮酸，氯硝西泮，氯噻西泮，氯恶唑仑，地洛西泮，地西泮，艾司他唑仑，劳拉西泮酸乙酯，氟地西泮，氟硝西泮，氟西泮，氟他唑仑，哈拉西泮，卤沙唑仑，凯他唑仑，劳拉唑仑，劳拉西泮，洛美他西泮，米达西泮，米达唑仑，尼米达西泮，硝基西泮，诺地西泮，去甲羟安定，恶唑仑，匹那西泮，普拉西泮，替马西泮，四氢西泮，托非索泮或三唑仑及其盐衍生物和同类物。

本发明优选的生物活性物质选自凝固因子如因子Ⅶ，因子Ⅷ，因子1×及其衍生物和同类物;骨代谢控制剂如降血钙素及其衍生物和同类物;激素，选自下丘脑激素，如LHRH及同类物，例如纳法来啉，布塞来林，佐利代斯，脑啡呔如DADLE，美克法胺或亮氨酸脑啡呔;激素;选自胰腺如胰岛素或高血糖素及其衍生物和同类物;激素，选自垂体腺如生长激素，后叶加压素或催产素及其衍生物和同类物;激素，如DDAVP或赖氨酸加压素;性激素如FSH，LH，或LTH及其衍生物或同类物。

本发明尤其重要的活性物质是在胃肠道内可消化的生物活性多肽如胰岛素，高血糖素，生长激素或类胰岛素生长因子及其衍生物或同类物。

本发明尤其优选的活性物质是胰腺多肽激素如胰岛素和高血糖素或其衍生物或同类物。

本发明另一类优选的活性物质是选自镇痫剂，镇痉剂和镇定剂如选自苯并二氮杂如氯硝西泮，地西泮，氟硝西泮，三唑仑，劳拉西泮，硝基西泮或其混合物。

若活性物质为苯并二氮类，则其占组合物总量的0.0001%-50%，最好占0.001%-20%。

本发明的药物组合物还可以包括硝酸和/或硝酸盐，浓度在0.001-5%。上述组分可作为活性物质如氯硝西泮的稳定剂。

本发明的药物组合物还可以包括一种或多种选自以下的化合物：表面活性剂，吸收促进剂，吸水聚合物，微球体，油，乳化剂，脂质体，抑制酶降解物质，醇，有机溶剂，水，疏水剂，PH-控制剂，保存剂和渗透压控制剂，环糊精和推进剂，或上述制剂的混合物。

吸水聚合物最好是平均分子量在200-7500范围的聚乙二醇或者是丙二醇，或其混合物。

本发明的组合物最好包括多于50%（重量）的平均分子量在200-1000范围的聚乙二醇和/或丙二醇或其混合物。

本发明还涉及用生物活性物质治疗哺乳动物的方法，其中将生物活性物质与选自如式Ⅰ所示的一种或多种n-糖原糖醛以及式Ⅱ所式n-甘醇施敷到哺乳动物的粘膜上：

式中n为1-8;

式中p为1-14.

本发明还涉及药物组合物用于粘膜的用途，该药物组合物包括一种生物活性物质，一种或多种如式Ⅰ所示的n-糖原糠醛以及如式Ⅱ所示的n-甘醇。

式中n为1-8;

式中p为1-14

本发明的药物制剂给药粘膜可以是待给生物活性物质的哺乳动物的任何粘膜，如在鼻、阴道、眼、口、生殖道、肺、胃肠道或直肠粘膜，最好是鼻，口或阴道粘膜。

本发明的药物组合物可以以下形式给药：舌下锭剂，以溶液，悬浮液或粉剂必要时与各种吸收促进剂联合形式的颊或鼻喷雾剂，最好是以生物粘性的略微粘性溶液或者必要时以栓剂或Vagitory的形式。

本发明优选的用药部位是鼻粘膜。

本发明还涉及制备药物组合物的方法，该药物组合物用来将生物活性物质施敷到哺乳动物的粘膜上，包括一种或多种选自如式Ⅰ所示的n-糖原糠醛和如式Ⅱ所示的n-甘醇：

式中n为1-8;

式中p为1-14，其中将生物活性物质溶解在已制备的载体中，所述的载体包括部分或全部其他药物制剂组分。该方法在利用超声和/或在高温下进行。最好在30℃-100℃的一个温度下进行溶解，要考虑到活性物质对温度的敏感性。对非常敏感的活性物质如人类生长激素，只能进行轻微搅拌或摇荡。

本发明还提供了一种鼻内应用的缓释系统，包括与粘液相容的基本不含水载体，该载体能够在小体积内溶解所需量的生物活性物质。

本发明还涉及选自如式Ⅰ所示的n-糖原糠醛和如式Ⅱ所示的n-甘醇在制备药物组合物中的应用，所述药物组合物，用来将生物活性物质通过粘膜施敷到哺乳动物上。

式中n为1-8;

式中p为1-14

上述的本发明用途尤其适于用来制备以以下途径系统给药的药物组合物：通过鼻、口或阴道粘膜，特别是鼻粘膜。

根据本发明，一方面式In-糖原糠醛被认为是药用载体，尤其是药用鼻用载体;另一方面式In-糖原糠醛认为是一种促进剂，促进生物活性物质通过哺乳动物粘膜尤其是鼻粘膜吸收。

而且，本发明可使各种药剂投药变得方便起来，如骨代射控制剂，如维生素D3或降钙素及其衍生物和类似物;下丘脑分泌的激素，如LHRH，如纳法来林，布塞来林或佐利代斯及其衍生物和类似物;调节生长或致有丝分裂生长因子的激素，如生长激素，IGF-1，IGF-2，FGF，PDGF，TGF，EGF及其衍生物或类似物;蛋白酶抑制剂，如抑肽酶柠檬酸盐或α1-抗胰蛋白酶及其衍生物和类似物以及cytochines，如IL-1和IL-2，旨在使其血量不足时达到正常化。

特别优选用于本发明载体组合物的包括糖原糠醛75（GF），指上述式Ⅰ中n主要为1和2的聚合物的市售溶剂（Chemical Abstract Registration No。〔（9004 76-6〕）糖原糠醛75为一种无色液体，可与水，醇，如甲醇，乙醇，正丙醇，甘油和各种油以各种比例混合，沸点约155℃。据报道GF用于不经稀释而肠胃外投药的组合物时会引起刺激作用，这正如Spiegel和Noseworthy（1963）所述，而用水稀释时已报道为无毒和无刺激性作用（spiegelberg等，1965）。

本发明所用n-甘醇可为例如单甘醇（1EG），二甘醇（2EG），三甘醇（3EG），四甘醇（4EG），五甘醇（5EG），六甘醇（6EG），七甘醇（7EG），八甘醇（8EG），九甘醇（9EG），十甘醇（10EG），十一甘醇（11EG），十二甘醇（12EG），十三甘醇（13EG）和十四甘醇（14EG）。各种n-甘醇可单独使用或两种或多种混用，如聚乙二醇200（PEG 200）或聚乙二醇400（PEG 400）等市售品。

1EG至14EG为无色液体，可与水和醇以各种比例混合。PEG200为平均分子量约200的市售甘醇混合物。组成列于表1：

表1：

PEG200的组成

一甘醇 0.1%

二甘醇 3.4%

三甘醇 21.2%

四甘醇 31.2%

五甘醇 24.4%

六甘醇 14.0%

七甘醇 5.4%

八甘醇 0.3%

100%

市nEG′S和糖原糠醛质量各异。特别优选用高纯度产品。如4EG，由Fluka Chemie AG提供（Buchs Switzerland，art.no：86660，1990），缩写为4EGf。

本发明的传送体系可得以优化，如就生物结合性，可喷性或粘性而言。例如，GF仅以5%浓度应用时可降低粘性，对例如4EGf的可喷性带来惊人的积极效果。而且，加5%GF可将固化温度从约-10℃降至≤-20℃。在配方需室外患者携带备用或运输时，这一点就显得尤为重要。

本发明药物组合物可用来治疗动物，如家离或玩物，优选用来治疗人类。

应用上述载体体系的特殊优点在于，高度亲脂物质，如苯并二氮杂以及水溶性物质，如肽和蛋白，如胰激素可仅以人类临床应用剂置溶于如25-300ml载体中。另一方面，临床应用地西泮和氯硝西泮又必须分别溶于约500ml和＞10ml中。

本发明载体体系可与各种共溶剂并用，如植物油，如Miglyol 840（Dynamit Nobel Chemie，Troisdorf，W-Germany）或必要时氢化或乙氧化的蓖麻油，这可惊人地提高设计受控释放配方，如可避免峰值血浆浓度的地西泮配方的可能性。

本发明的组合物可包括一种或各种其它药物赋形剂，如表面活性剂和吸收促进剂，其亲水亲脂平衡值约6-26以及离子和非离子表面活性剂，包括聚氧化烯醇醚，胆汁盐及其衍生物，梭链孢酸及其衍生物，油酸，卵磷脂，溶血卵磷脂或Tween20-85;吸水聚合物，如聚乙二醇200-7500，聚乙烯基吡咯烷酮，丙二醇，聚丙烯酸，明胶，纤维素及其衍生物;抑制酶降解物质，如柠檬酸盐或抑肽酶，醇，如乙醇，甘油或苯甲醇;有机溶剂，如乙酸乙酯或苯甲醇;疏水剂，如植物油，如豆油，花生油，椰子油，玉米油，橄榄油，葵花籽油，蓖麻油，Miglyol

810/812/840或其混合物;pH调节剂，如硝酸，磷酸或乙酸，柠檬酸盐;防腐剂和渗透压调节剂，如甘油，氯化钠，对氧苯甲酸甲酯或苯甲酸;粉剂组合物，如α-，β-和Γ-环糊精，纤维素及其衍生物;中心体，微脂粒和乳液组合物，如淀粉，清蛋白，明胶或卵磷脂或溶血卵磷脂;微胶囊配方;推进剂，如丁烷;水。在本发明组合物中，醇和水的应用不是强制性的。

现参考附图详述本发明。

图1为本发明制剂静脉内和鼻内投药后氯硝西泮平均血浆浓度示意图。

图2为糖原糠醛在本发明制剂中的含量与平均反应时间示意图。

图3为胰岛素按本发明投药后血糖量示意图。

图4为高血糖素按本发明投药后血糖量示意图。

图5为包括各种甘醇成分的制剂投药后血浆中氯硝西泮浓度示意图。

图6为包括糖原糠醛和各种共溶剂的制剂投药后地西泮的平均血浆浓度示意图。

图7为糖原糠醛在本发明制剂中各种含量作用示意图。

图8为按本发明静脉内和鼻内内投药后氟硝西泮的血浆浓度比较示意图。

图9为按本发明静脉内和鼻内投药后氯硝西泮的血浆浓度示意图。

图10为氯硝西泮在各种载体中的稳定性。

图11为按本发明静脉内内鼻内投药后雌激素的血浆浓度比较示意图。

图12为按本发明静脉内和鼻内雌激素投药后雌酮的血浆浓度比较示意图。

下述非限制性实例详述本发明，但决不能理解为对本发明后续权利要求所述范围的限制。

实例1

本发明载体毒性和可接收性研究

载体毒性评价时，应当考虑局部以及系统效果。GF和PET400在注射配方中用作赋形剂其中每剂量投药量大于300ml，这超过了本发明制剂鼻内投药量。

鼻内投药后nEG和GF的局部毒性结果文献中并没记载。因此，进行了兔鼻粘膜上30-100ml的局部毒性评价试验。在这些试验中，苯并二氮杂

还溶于本发明各种溶剂体系中，兔子鼻粘膜用药30μl组合物，长达14天。进行5次试验评价组合物用药效果，包括按表2所示进行的对比试验。

表2

本发明苯并二氮杂

组合物局部毒性评价试验

缩写：地西泮3%;劳拉西泮 5;F＝氟硝西泮

PEG＝聚乙二醇200;GF＝糖原糠醛75;

PEG+GF＝70%PEG+30%GF。

组合物投药后检查鼻腔组织，发现仅有轻微发炎变化。增加剂量时，没有发现与剂量有关的反应并且没有发现100%PEG-200和70%PEG-200+30%GF之间有区别，因此可以得出结论认为，本发明载体仅引起轻微可逆转毒性效果。

9个健康自愿受试者鼻内投药后研究含四甘醇（4EGf）和必要时的5%糖原糠醛（GF）的两种受试载体的耐受性并在双盲三种方式交错设计后与市售载体产品Locilan CAstra-Syntex Scandinavia AB，Sodertaje，Sweden）比较。作为对比，则应用盐水（0.9%氯化钠）。

盐水和市售载体产品耐药力非常好。含四甘醇的两种载体则投药后立即引起灼烧感觉或中等程度的针刺感觉。症状持续时间短，投药后10分钟即消失或仅有轻微症状。投药后30分钟鼻镜观察不到任何临床症状。

受询问时，所有受试者均述说必要时包括5%GF的含4EGf载体适宜于间或服用的基本生物活性物质投药并且在这些载体之中鼻内投药优于静脉内投药。

试验细节和结果如下。

人体对本发明载体的可接收性研究

受试者

试验时登记9位健康的自愿受试者。所有受试者均健康，无任何心，肝或肾疾病。

所有受试者均无任何肺或呼吸道疾病或在过去2星期内没患过感冒。所有受试者的体征（血压和脉搏）均在正常范围内。研究前两星期内进行标准生物化学和血液学试验。除两个以外的所有其它受试者临床化学数据均在正常范围内。受试者4和5的氨基丙酸转氨酶（SPGT）在上述正常值上限以下，但据认为这在临床上并不重要。

研究程序

用3种试验载体和对比载体（盐水）作双盲试验而进行研究，共分三个相同的周期，各周期间间隔24小时。

每周期中，试验载体投入左鼻孔之前5分钟将对比载体投入右鼻孔。请受试者在问卷中记下试验载体投放后0-1分钟期间以及10和30分钟观察到的任何疼痛或刺激。若注意到任何症状，受试者要记下周期并描述症状特征。

载体投放前和试验载体投放后30分钟，两鼻孔内粘膜均用鼻镜检测仪检查。

载体

试验4种载体，一种为盐水，用作负对比载体，其它三种载体为本发明两种载体（载体A和B）和“正对比载体”，为耐受性非常好的市售载体产品Locilan

（Nielsen等，1989）。

装置

投药时应用pfeiffer泵装置（Model 6917.5902/3790/0129），启动时传送50送入μ1。

剂量

Pfeiffer泵喷射装置放入左（或右）鼻孔后投放载体，两次启动泵，总剂量100μl。

临床检查

鼻内组织临床检测未发现投放载体具有任何明显的临床效果。载体投放后30分钟3位受试者注意到轻微的局部刺激，一位受试者的投放载体为盐水，另两位受试者的投放载体为试验载体B。

受试者报告的耐受性（表3-5）

试验载体投放后0-1分钟，10分钟和30分钟鼻内刺激（症状）程度分别列于表3，4和5。

受试者得出结论认为，必要时包括糖原糠醛的四甘醇载体耐受性比Locilan

中盐水载体差。但是，含4EGf的载体引发的症状持续时间很短，若生物活性物质对于病人的健康很关键，就可以认为是可接受的。

表3

受试者在问卷中报告的投药后0-1分钟耐受性：出现症状及其程度的受试者数。

刺激程度对照载体

（右鼻孔） A B C

无 25 1 0 6

轻微 2 5 3 3

中等 0 3 6 0

不可接受 0 0 0 0

A＝4EGf载体

B＝5%GF在4EGf中

C＝Locilan

载体

对比＝（右鼻孔）盐水

表4

受试者在问卷中报告的投药后10分钟耐药力：出现症状及其程度的受试者数。

刺激程度对照载体

（右鼻孔） A B C

无 27 5 5 7

轻微/合格 0 4 4 2

中等 0 0 0 0

不合格 0 0 0 0

A＝4EGf载体

B＝5%GF在4EGf中

C＝Locilan

载体

对比＝（右鼻孔）盐水。

表5

受试者在问卷中报告的投药后30分钟耐受性：出现症状及其程序的受试者数。

刺激程度对照载体

（右鼻孔） A B C

无 27 8 7 8

轻微 0 1 2 1

中等 0 0 0 0

不可接受 0 0 0 0

A＝4EGf载体

B＝5%GF在4EGf中

C＝Locilan载体

对比＝（右鼻孔）盐水

载体A

4EGf载体

Ⅰ纯四甘醇p·a 25ml

浓硝酸p·a 1滴

Ⅱ纯四甘醇p·a 25ml

溶液Ⅰ（大约30滴） ad pH3.8

采用粘性液pH电极（Radiometer GK 2711）将混合物Ⅰ用来调节Ⅱ的pH。将2-10ml（载体A）调入pfeiffer多级给药器（Pfeiffer Zerstauber，6917.5902/3790.0129）中。

载体B：

5%GF在4EGf载体中

Ⅰ纯四甘醇 p·a 25ml

浓硝酸 p·a 1滴

Ⅱ纯四甘醇 p·a 25ml

溶液Ⅰ（大约30滴） ad pH 3.8

Ⅲ溶液Ⅱ 23.75ml

纯糖原糠醛75 1.25ml

采用粘性液体电极（Radiometer GK 2711）将混合物Ⅰ用来调节Ⅱ的pH。然后制得混合物Ⅲ（载体B）。将2-10ml该载体调入Pfeiffer多级给药器（pfeiffer zerstauber，6917.5902/3790。0129）中。

载体C

Locilan 载体

丙二醇，ph.Eur.Ⅲ 2g

聚乙二醇400，ph.Nord。63Ⅱ 20g

Tween200，ph，Eur.Ⅲ 2.5g

二氯甲苯，DLS 86 70mg

EDTA二钠， 10mg

ph.Eur.2nd Ed1983

丁基化羟基甲苯， 10mg

ph.Nord.63Ⅱ，Add.

柠檬酸， 5mg

ph.Eur.Ⅲ，Suppl 77

柠檬酸钠2H2O，ph.Eur.Ⅲ 7.65mg

山梨糖醇 DAK 63 2.86g

净化水， ad 100g

ph.Eur.2nd Ed.1983

实例2

超声法将10mg氯硝西泮溶于2ml载体B（实例1）中，得到5mg/ml的氯硝西泮浓度。50μl该制剂投入雄性新西兰白兔的每一鼻腔中，投药过程中和投药后1分钟仰卧。采用Eppendorph吸移管投药。0，2，5，10，15，30和60分钟有从耳边静脉中取血样并经HPLC测定氯硝西泮浓度。

图1表明扳药后血浆中平均氯硝西泮浓度。该图还表明耳边静脉注射同剂量（0.5mg）Rivotril氯硝西泮后的血浆浓度，注射历时1/2分钟。图中还表明，鼻中投药后血浆浓度大致相同或约2分钟时甚至高于静脉注射。

实例3

药剂反应，经GF提高

向新西兰白兔每一只鼻孔投放50μl的2.5mg氯硝西泮/ml载体，同时使其呈坐态，然后试验投药反应。载体由0，10，20，30，70和100%糖原糠醛75（Roche，lot No.706127）加入四甘醇（Merck，Art.808619）中构成。氯硝西泮超声法溶解。

图2示出了平均反应时间（兔子躺卧，后腿伸向一边）。各部分顶端的数字表明4位受试者中的反应者量。10分钟内未反应者记为平均值10分钟。对于鼻内投放氯硝西泮约10%GF在4EGm中具有最佳反应，而约30%GF具有最小反应。30%GF在4EGf中观察到同一模式。

实例4

将0.33mg无锌（单体）人胰岛素在50μl含5%糖原糠醛75的12.5mM磷酸盐缓冲（ph 7.4）溶液投入5只取坐势，重达约3Kg的新西兰白兔的一个鼻孔内。0，15，30，60和120分钟从耳边静脉抽血样并测定血糖量。

图3示出了该配方和0.9%氯化钠对比品的平均血糖量，以最初值的%表示。将100μl无胰岛素的同一配方投入健康受试者的鼻腔中。

就局部刺激而言，该配方与0.9%氯化钠不能区别开。

实例5

将4mg人高血糖素的100μl含5%GF的磷酸盐缓冲液（pH4）溶液投入5只取坐势，重约3kg的低血糖新西兰白兔的两只鼻孔中（每只50μl）。该配方制法是将高血糖素溶于7mM磷酸盐缓冲液（pH2.5）中，用0.1N氢氧化钠将pH调为4.0并最后加5%糖原糖醛75。试验前1小时皮下注射83μg胰岛素使兔成为低血糖的。从耳边静脉中连续抽血样进行血糖分析。

图4示出了鼻内投放高血糖素后平均血糖量，为最初值的%。

实例6

峰值对比，药物动力学

10mg氯硝西泮溶于2ml以下载体中：（1）4EGf，（2）PEG-200和（3）4EGm（Merck-Schuchardt），其中采用超声法。用Eppendorph吸移管将50μl该制剂投入取坐势新西兰白兔的每一鼻腔中。以下时间间隔点从耳边静脉取血样：0，2，5，10，15，30和60分钟，并用HPLC测定氯硝西泮浓度。

图5示出了鼻内投药后平均血浆氯硝西泮浓度。约2分钟时，4EGf的血浆浓度高于PEG-200和4EGm配方。

实例7

峰值控制，药物动力学

制取3mg地西泮的100μl载体制剂并将其投入兔子中，方式类似于实例6所述。应用以下载体：（1）糖原糠醛75（GF）;（2）Myglyol 840+GF（7+3）和（3）植物油+GF（7+3）。0，5，10，15，30和60分钟时从耳边静脉取血样并用HPLC测定地西泮浓度。

图6示出了鼻内投药后平均血浆安全浓度。初始峰值血浆浓度可根据GF/油载体而加以控制。5分钟时GF配方的血浆浓度为3mgStesolid地西泮（Dumex A/S，Denmark）静脉注射的约55%。

实例8

峰值控制，GF作为增效剂的作用

制取0.5mg氯硝西泮的100μl载体制成剂并将其按实例6所述的类似方式给兔子投药。采用以下载体：（1）四甘醇（Merck）（4EGm），（2）2%糖原糖醛75（GF）在4EGm中，（3）5%GF在4EGm中，（4）10%GF在4EGM中（5）30%GF在4EGm中和（6）GF。0，5，10，15，30和60分钟时从耳边静脉取血样并用HPLC测定氯硝西泮浓度。

图7示出了鼻内投药后平均血浆氯硝西泮浓度。最初峰值血浆浓度可根据配方中GF/4EGm比而得以控制。

实例9

用0.5mg氟硝西泮和100μl载体制成制剂并按类似于实例6所述的方式给兔子投药，其中采用以下载体：聚乙二醇200（Merck Art.807483）。0，5，10，15，30和60分钟时从耳边静脉取血样并用HPLC测定氟硝西泮浓度。

图8示出了0.5mg氟硝西泮鼻内和静脉（Rohypnol，Roche）投药后平均血浆氟硝西泮浓度。

实例10

4mg咪哒唑仑和100μl载体制成制剂并按类似于实例6所述的方式给兔子投药，其中采用以下载体：聚乙二醇200（Merck，Art.807483）。0，5，10，15，30和60分钟时从耳边静脉取血样并用HPLC测定咪哒唑仑浓度。

图9示出了4mg咪哒唑仑鼻内和静脉（Dormicum，Roche）投药后的平均血浆咪哒唑仑浓度。

实例11

稳定性研究

为了优化氯硝西泮在本发明载体中的稳定性，已进行了加速研究。25和60℃下1月内对氯硝西泮进行了研究，60℃下可回收约90%或更多，就认为是非常令人满意的。

制得以下配方，其中含5mg/ml的氯硝西泮，只是（1）含20mg/ml，（1）和（2）在4EGf中，（3）为（2）用磷酸调至PH3.5，（4）为（2）用柠檬酸调至PH3.5，（5）为（2）加9%乙醇，（6）为（2）用硝酸（低于0.01%）调至PH3.5，（7）为（2）加1%水，（8）丙二醇（PG），（9）为（8）用0.04%乙酸调至PH3.8，（10）为（2）加0.4%乙酸，（11）4EGf+5%GF加0.4%乙酸（PH约6），（12）为（11）加硝酸至PH2，（13）为（11）加3%苯甲醇，（14）为（10）加16%乙醇和3%苯甲醇，（15）为4EGf+5%GF用硝酸（低于0.01%）调至PH3.5，（16）为（15）加0.04%硝酸钠，（17）为（15）加5%乙醇，（18）为4EGf+5%GF用柠檬酸（0.1%）调至PH4.2，（19）为（15）加2%苯甲醇和（20）为4EGf+5%GF加0.04%硝酸钠。

2和4星期后，从容器中取100μl样品并用HPLC定量分析。样品浓度（和回收率）以峰值高度为基础计算，相对外部氯硝西泮标准而言。

如表7所示，只有硝酸，硝酸盐，乙醇和苯甲醇提高了稳定性。4EGf，GF和PG中水含量为约0.05%。令人惊奇的是，在例如4EGf中加1%水并不能提高稳定性。而且，对安瓿（N中）和10ml Pfeiffer泵（Model 6917.5902/3790.0129）中贮存的配方而言，25℃下的稳定性是相同的。

图10为氯硝西泮在各种载体中的稳定性示意图。

表7

25℃和60℃氯硝西在各种载体中的

稳定性2和4星期后的回收率%

2 星期 4星期

配方号 Amp.(-air)喷雾瓶 Amp.(-air)喷雾瓶

25℃ 60℃ 25℃ 25℃ 60℃ 25℃

1.4EGf 20mg/ml 98 91 100 82 73 87

2.4EGf 5mg/ml 98 82 96 83 61 84

3.4EGf pH 3.5 98 79 100 84 62 85

(磷酸盐）

4.4EGf pH3.5 95 43 95 81 18 82

(草酸）

5.4EGf 100 90 99 85 71 90

(乙酸)9%

6.4EGf pH 3.8 98 88 97 95 87 95

(硝酸）

7.4EGf 94 83 94 89 71 94

水 1%

8.PG 96 69 99 96 56 92

9.PG pH3.8 100 99 103 93 95 97

(乙酸）

10.4EGf+40% 102 84 102 99 67 102

(乙酸）

浓度：配方 No.1＝约 20mg C/ml

配方 No.2-10＝约 5mg C/ml

表7（续）

2 星期 4星期

配方号 Amp.(-air)喷雾瓶 Amp.(-air)喷雾瓶

25℃ 60℃ 25℃ 25℃ 60℃ 25℃

11.4EGf+5%GF 101 80 100 98 63 99

乙酸

0.4%

12.=No.11 pH 2 98 86 无数据 97 81 无数据

（硝酸）

13.＝No.11+ 103 85 102 99 76 96

苄基-OH 3%

14.=No.10+ 103 92 无数据 100 80 无数据

乙醇 16%

苄基-OH 3%

15.4EGf+5%GF 99 94 96 96 96 98

pH 3.8

(硝酸）

16.=No.15 + 102 95 100 96 93 98

硝酸盐 0.04%

17.=No.15 + 96 98 99 98 87 98

乙酸 5％

18.4EGf+5%GF 95 85 94 93 67 98

pH 4.2

(柠檬酸）

19.=No.15 + 101 96 97 98 93 99

苄基－OH 2%

20.4EGf+5%GF+ 93 75 99 99 78 95

硝酸盐 0.04%

浓度：配方 No.11－20＝约5mg/Cml

实例12

急性毒性研究

该研究旨在观察单一剂量载体投入每一鼻腔后兔子鼻腔内的急性变化。试验载体为糖原糠醛75，四甘醇（Fluka）和丙二醇（DLS级，Mecobenzon，Denmerk）。

16只兔子任意分成4×4组。3组接受试验载体之一单一鼻内投药，每一鼻腔50μl。每只兔子只接收一种试验化合物。1组用来对比，接收等体积等渗氯化钠盐水。投药后10分钟兔子即流血而死去。剖开右鼻腔并肉眼评价。左鼻腔解剖后固定在福尔马啉中并在缓冲液中进行组织评价。

1-16中每只兔子肉眼和显微观察结果列于表8，而表9则总结了4种载体的结果。令人惊奇的是，肉眼或显微观察均没发现等渗盐水和3种试验载体间存在差别。

表8

鼻内投放载体后10分钟兔子鼻腔观察结果

N.A＝无异常 L＝位置

肉眼观察显微镜观察

（右鼻腔）（左鼻腔）

1.N.A. L1充血

L2灶性淋巴样凝集

L3N.A.

L4N.A.

2.轻微充血 L1充血

L2灶性出血，充血

L3灶性淋巴样凝集

L4N.A.

3.N.A. L1充血

L2充血

L3充血

L4灶性粘膜下层出血

4.粘液层 L1充血

鼻腔比正常情况更白 L2充血

L3充血和

L4粘液浓缩

5.前部2mm出血灶 L1充血

L2充血，灶性出血和脱皮，

水肿，慢性发炎小灶和

灶性淋巴样斑

L3淋巴样凝集

L4慢性发炎区

6.前部6×3mm出血区 L1充血和胶皮灶，少量出血

L2充血和粘膜下层出血区

L3N.A.

L4轻微充血

7.N.A. L1充血

L2水肿，充血，灶性出血

L3充血，灶性淋巴样凝集

L4扩散性急性和慢性发炎，

多和单核细胞，淋巴管内积血

8.N.A. L1充血

L2充血伴有粘膜下层出血，

水肿

L3充血伴有粘膜下层出血，

水肿

L4充血伴有粘膜下层出血，

水肿，粘液浓缩，粘膜下

层淋巴样凝集

9.N.A. L1充血和水肿

L2充血和水肿

L3充血和外侧壁单和多核细

胞浸润并伴有淋巴样凝集

L4充血和外侧壁单和多核细

胞浸润并伴有淋巴样凝集

10.N.A. L1充血

L2充血并伴有间或灶性淋巴

样凝集

L3水肿和充血

L4灶性慢性单核细胞浸润，

淋巴管膨胀

11.N.A. L1水肿和充血

L2水肿，充血，灶性出血和

粘膜下层淋巴样凝集

L3小静脉膨胀

L4N.A.

12.N.A. L1充血，小静脉膨胀，灶性

出血

L2充血，水肿，灶性出血

L3充血，粘膜下层淋巴样

凝集

L4充血，粘膜下层淋巴样

凝集

13.N.A. L1充血

L2充血，水肿，粘膜下层淋

巴样凝集

L3充血，水肿，粘膜下层淋

巴样凝集

L4充血，水肿，粘膜下层淋

巴样凝集

14.3mm出血灶向前延伸 L1N.A.

L2充血，水肿，粘膜下层淋

巴样凝集

L3充血，水肿，粘膜下层淋巴样凝集

L4充血，水肿，粘膜下层淋

巴样凝集

15.前区小块擦破，有针点 L1充血，水肿，灶性出血

L2充血，灶性出血，水肿粘

膜下层淋巴样凝集

L3充血，水肿，基片切口附

近单核细胞浸润

L4充血

16.4×3mm出血区向前 L1充血，水肿

延伸 L2充血，水肿，灶性出血和

脱皮

L3充血，水肿，粘膜下层淋

巴样凝集，特别是基片附

近

L4水肿，粘膜下层淋巴样凝

集

表9

鼻内投放4EGf，GF，PG和0.9%NaCl后10分钟兔子鼻腔结果总结（按载体排列）N.A.＝无异常

载体动物号肉眼观察结果显微观察结果

（右侧）（左侧）

0.9%NaCl 3 N.A. 灶性出血

6 前区6×3mm出血灶灶性出血

12 N.A. 灶性出血

13 N.A. N.A.

糖原糠醛 2 N.A. 灶性出血

（GF） 8 N.A. 灶性出血

9 N.A. N.A.

16 前区4×3mm出血灶灶性出血

丙二醇 4 N.A. N.A.

（PG） 5 前区2mm出血灶灶性出血

11 N.A. 灶性出血

14 前区2mm出血灶 N.A.

四甘醇 1 N.A. N.A.

（4EGf） 7 N.A. 灶性出血

10 N.A. N.A.

15 前区针点擦破灶性出血

令人惊奇的是已发现，鼻内吸收本发明载体中的例如苯并二氮杂卓，如氯硝西泮和地西泮极其类似于静脉注射（i.v.）。从图1可以看出，不足2-3分钟即达到峰值氯硝西泮血浆浓度（tmax）并且2.5分钟后血浆浓度（Cpl（2.5分钟））为约100%i.v.投药所得浓度。出人意料的是，根据本发明，载体质量的选择对吸收速度要产生影响。例如，4EGf（Fluka-Chemie AG产品级）2.5分钟时的氯硝西泮血浆浓度要比4EGm（MERCK-Schuchardt产品级）或PEG200（MERCK-Schuchardt产品级）40%，并且tmax分别达到大约≤2.5，10和15分钟（图5）。

用兔子进行药效反应研究。用100μl载体鼻内投放0.25mg氯硝西泮后测定反应时间。图2示出了平均时间，试验细节在实例3中作了说明。如图2所示，用本发明载体鼻内投放氯硝西泮后的药效反应可在投药后不足2分钟内达到。

本发明组合物稳定。例如本发明组合物60℃和25℃分别放置1月后测定苯并二氮杂

（见实例11）即可说明这一点。PG加乙酸后（调至PH3.8-4）即可得稳定液（回收率约≥90%）。而等量乙酸却不能使4EGf溶稳定，调至PH约4所需乙酸量太大。令人惊奇的是，用硝酸调节PH可得到氯硝西泮与如4EGf及必要时的5%GF的稳定液（回收率约≥90%）。

令人惊奇的是还发现，将本发明载体与胰岛素或高血糖素并用，兔子鼻内投药后15-30分钟可达到显著的生物反应（见图3和4以及实例4和5）。

实例13

生物利用率

先将50μg单剂量E2给兔子（n＝3）鼻内（i.n.）投药后研究雌激素（E2）和雌酮的生物利用率进行研究。i.n.试验两种分别含30%和100%糖原糠醛（GF）的配方，与同剂量i.v.注射相比较。

物料

17-β-雌二醇（雌激素＝E2）来自Novo Nordisk（Copenhagen，Denmark），丙二醇（PG）来自Mecobenzon（Copenhagen，Denmark），而糖原糖醛75（GF）来自Hoffman La-Roche（Basel，Switzerland）。所有其它试剂均为分析级试剂。

药物制剂

刚好在投药前制取静脉注射和鼻内投药配方。静脉投药配方1制法是将2-729mgE2溶于25.0mlPG中，然后加25.0ml等渗盐水。鼻内投药配方2制法是将4.938mgE2溶于10.0mlGF中。同为鼻内投药的配方3制法是将4.996mgE2溶于3.00mlGF后加等渗盐至总体积10.0ml。

剂量和研究方案

静脉注射兔子（n＝3）30秒钟内耳静脉i.v.输入1.0ml配方1（相当于50μgE2）。鼻内投药兔子（n＝3）用Eppendorph吸移管i.n.投入配方2或3。每只兔子每只鼻孔接收50μl，相当于50μgE2。鼻内投药持续约5秒钟。鼻内投药期间和之后约1分钟，兔子保持仰卧。

投药后0，5，10，20，30和60分钟收集血样。分出血浆并存于÷20℃下，等待分析。

采用Emmet et al.在1972年描述的放射免疫测定法测定非共轭E2和E1的血浆浓度。用乙醚萃取后用Sephadex LH20柱将E1和E2分开。溶剂蒸发后进行放射免疫测定试验。E1和E2的检测极限为40pmol/l。试验期间E1变量分别为7.0%和9.6%，E2变量为分别为7.4%和10.5%。

各血浆浓度的剂量/重量校准是相对于i.v.剂量/重量（22.3μg/kg）平均值计算的。对于i.v.配方1，E2血浆浓度一时间曲线下的面积（AUC），从0分钟至无穷，30秒钟内输注1格即对应这些数据。所有其它AUC都是借助不规则四边形规则计算的。

E2和E1投放后，E2和E1的血浆浓度分别列于表10和11以及图11和12。图11和12分别示出了平均±S.D.雌激素（E2）和雌酮（E1）血浆浓度，其中给兔子（n＝3）投药约50μg雌激素，采取i.v.注射（配方1）或鼻内投药（分别用糖原糖醛（GF）100%和30%配制成配方2i.n.和3i.n.）。

-X-配方1i.v. -●-配方2i.n.

…○…配方3i.n.。

从图11和12以及表12可以看出，鼻内投药非常类似于i.v.投药。生物利用率见表12。E2生物利用率分别为87和80%，而对于E2+E1，配方2i.n.和3i.n.分别为104和95%。E2和C5分钟为109和95%，对于E2+E1为118%和105%。Tmax少于5分钟。

已发现E2在GF中的溶解度为约230mg/ml。因此，50μg临床剂量可溶于0.25μl中。采用GF可用极少量μl体积投放临床剂量。由于溶解度随水量呈指数下降，所以GF作为载体的剂量体积应为例如5μl，以避免E2不必要地在鼻粘液中沉淀。

为了降低或消除局部刺激作用，要求采用小剂量体积。另一方面，可采用非刺激性共溶剂，如植物油。以这种方式也可达到要求剂量体积或传送速度。为了减少血浆峰值浓度，又要求在粘液中沉淀有限量的E2。

无水GF配方可用于急性热冲洗以及慢性用药。

Claims

1、用于向哺乳动物粘膜施敷生物活性物质的药物组合物，包括由式Ⅰ所示的一种或多种n-糖原糠醛和式Ⅱ所示的n-甘醇：

式中n为1-8；

式中p为1-14。

2、权利要求1的药物组合物，其特征在于所述的n-甘醇包括p为1-8的n-甘醇。

3、权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述的n-糖原糠醛n为1或2。

4、权利要求1-3中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述的生物活性物质选自可在胃肠道消化的生物活性肽。

5、权利要求4的药物组合物，其特征在于，所述的生物活性物质选自凝固因子如因子Ⅶ，因子Ⅷ，因子Ⅸ和其衍生物和同类物;骨代谢控制剂如降钙素及其衍生物和同类物;激素，选自下血脑如LHRH或同类物，例如纳法来林，布塞来林或佐利代斯，脑啡肽如DADLE，美克法胺或亮氨酸酸脑啡呔;激素，选自胰腺如胰岛素或高血糖素及其衍生物和同类物;激素，选自垂体腺如生长激素，后叶加压素或催产素及其衍生物和同类物，例如DDAVP或赖氨酸加压素;性激素如FSH，LH或LTH及其衍生物或同类物。

6、权利要求1-3中任一项所述的药物组合物，其中的生物活性物质的含量为0.001%-20%，并选自镇痫剂，镇痉剂和镇静剂，选自苯并二氮类如氯硝西泮，地西泮，氟硝西泮，三唑仑，劳拉西泮，硝西泮或上述镇静剂混合物。

7、权利要求4-6中任一项所述的药物组合物，其中还包括浓度为0.0001-5%的硝酸和/或硝酸盐。

8、权利要求4或5的药物组合物，包括胰腺激素如胰岛素及其衍生物和同类物，高血糖素及其衍生物和同类物。

9、用生物活性物质治疗哺乳动物的方法，其特征在于，将生物活性物质及其式Ⅰ所示的一种或多种n-糖原糠醛和式Ⅱ所示的n-甘醇施敷到待治疗的哺乳动物粘膜上：

式中n为1-8;

式中p为1-14。

10、一种药物组合物施敷到粘膜上的用途，所述组合物包括选自式Ⅰ所示的一种或多种n-糖原糠醛和式Ⅱ所示的n-甘醇：

式中为n为1-8，

式中p为1-14。

11、一种制备将生物活性物质施敷到哺乳动物粘膜上的药物组合物的方法，所述的药物组合物包括由式Ⅰ所示的一种或多种n-糖原糠醛和式Ⅱ所示的n-甘醇：

式中n为1-8;

式中p为1-14;

该方法的特征在于，将生物活性物质溶解于已制成的载体中，载体包括部分或全部其他药物制剂的组分。

12、权利要求11的方法，其特征在于，利用超声和/或高温将生物活性物质溶解。

13、式Ⅰ所示的一种或多种n-糖原糠醛和式Ⅱ所示的n-甘醇在制备将生物活性物质施敷到哺乳动物粘膜上的药物组合物中的用途：

式中n为1-8;

式中p为1-14。