CN1091314A

CN1091314A - 含有降钙素的药物组合物

Info

Publication number: CN1091314A
Application number: CN93118487A
Authority: CN
Inventors: L·齐奥丁尼; G·兰卡蒂; T·冯尼奥
Original assignee: Smithkline Beecham Farmaceutici SpA
Current assignee: GlaxoSmithKline SpA
Priority date: 1992-10-20
Filing date: 1993-10-18
Publication date: 1994-08-31
Also published as: JPH08505364A; DE69319440D1; ITMI922400A1; ES2120516T3; WO1994008622A1; GR3027611T3; EP0665755A1; US5719122A; MX9306499A; ZA937697B; AU5177993A; ITMI922400A0; DE69319440T2; EP0665755B1; IT1255895B

Abstract

本发明涉及药物组合物，它们含有降钙素和聚乙二醇化的甘油酯。

Description

本发明涉及含有降钙素的新的药物组合物以及增进降钙素穿过粘膜被吸收的新方法。

降钙素是一类具有药理活性的肽类，其来源有天然的也有人工合成的，这些肽含有大约32个氨基酸，能够调节血清钙水平。

现在，各种降钙素在市场上均有销售，包括（例如）自然人、鲑和鳗类降钙素以及人工合成的鳗类降钙素类似物-依降钙素（elcatonin），这些降钙素通常用来（例如）治疗佩吉特氏病、祖德克氏病和骨质疏松症等。

用肽类给药存在一个不可忽视而众所周知的问题，即口服给药时它们容易发生因酸和酶-诱导的快速降解。由于这个原因，迄今为止使用最广泛的给药方式一直是非肠道给药，就具有较高分子量的肽类（例如降钙素）而言，非肠道给药已是唯一的一种特别有效的给药方式。

人们普遍认识到注射给药既不方便又令病人讨厌，特别在不得不以一定时间间隔长期地反复用药时更是如此，例如用降钙素治疗绝经后的骨质疏松症。因此，人们对于通过更可接受的非侵入式的另一种可选择的方式将肽给药表现出日益增加的兴趣，例如以下列的给药形式：舌下、片剂、栓剂、肺内粉剂、鼻内滴剂、喷雾剂、粉剂、凝胶剂、软膏剂和植入物。

对于许多肽，特别是较高分子量的肽来说，一个重要的问题是，它们穿过生物膜，例如粘膜时被吸收得不好，因而这种肽的生物利用率往往是非常低的。因此为了找到改善肽的经上皮吸收的方法，人们进行了大量的研究工作。一种方法是采用辅药或吸收增强剂，目前已有许多研究报告发表，声称所报告的化合物具有增强肽吸收的性质。

因此已被提出作为吸收增强剂的有，例如：胆碱酯类（EP214898）、酰基肉毒碱类（EP215697）、醛糖类和葡萄糖胺类（日本专利申请No.61 126034）、抗坏血酸酯类和水杨酸酯类（EP37943）、α-环糊精（EP0094157）、焦谷氨酸酯类（EP173990）、螯合剂（US4，476，116）、乙醇、苄醇和聚乙二醇400（EP371010）。

有许多已发表的报告指出，表面活性剂能增强多肽类的吸收，例如参见EP115627（Armour）、GB2，127，689（Sandoz）、US4，548，922（Carey等）以及Hirai等人，Int.J.Pharm.，9，165-184，1981。但是，使用表面活性剂吸收促进剂的一个公认的问题是，它们可以在给药部位引起刺激作用和组织损伤（histolesion）。在某些情况下，这种现象的发生可能取决于用药量。若长时间内经常地使用肽给药，则这些问题更为突出。

现在，我们发现，如果将依降钙素以与聚乙二醇化的甘油酯（polyglycolysed glyceride）形成的制剂的形式给药，那么，在直肠给药后依降钙素的吸收会惊人地增强，并且这种制剂不会引起刺激作用或组织损伤。我们还发现，将依降钙素以与聚乙二醇化的甘油酯形成的制剂的形式对结肠粘膜给药时，其吸收会惊人的增加。

本发明的第一个方面是提供了一种组合物，它含有降钙素、聚乙二醇化的甘油酯以及可药用的载体。

本发明还提供了一种增强降钙素透过粘膜的吸收方法，该方法包括，将降钙素与有效量的吸收增强剂-聚乙二醇化的甘油酯一起给药。

本发明的聚乙二醇化的甘油酯可以是饱和的也可以是不饱和的。饱和的聚乙二醇化的甘油酯可以通过用聚乙二醇将氢化的植物油部分醇解而得到，或者通过用聚乙二醇和丙三醇将饱和脂肪酸酯化而得到。不饱和的聚乙二醇化的甘油酯可以通过用聚乙二醇将非氢化的植物油部分醇解而得到。

可以在本发明中使用的聚乙二醇化的甘油酯包括由C₈-C₁₈甘油酯和聚乙二醇酯构成的饱和的聚乙二醇化的甘油酯，例如以商品名Gelucire（如Geluc ire 33/01、35/10、37/02和44/14）和Labrafil（如Labrafil WL2514CS）销售的产品;由C₁₆-C₂₀甘油酯和聚乙二醇酯构成的不饱和的聚乙二醇化的甘油酯，例如以商品名Labrafil销售的产品（如Labrafil WL2609BS，或M2125CS）;以及饱和的聚乙二醇化的C₈-C₁₀甘油酯，例如以商品名Labrasol销售的产品。如果需要，可以使用各种聚乙二醇化的甘油酯的混合物。在本发明中特别优选使用的聚乙二醇化的甘油酯包括Gelucire44/14和Labrasol。

聚乙二醇化的甘油酯占赋形剂总重量的5-100%，例如5-50%。因此它可以用来作为降钙素的唯一载体，或者也可以与其它赋形剂混合起来使用。基于降钙素的效力可以了解到它在制剂中的重量相对于赋形剂的重量来说是非常低的。

这里所用的术语降钙素意指这样一类具有药理活性的多肽，它不仅包括天然存在的降钙素类，而且还包括其各种衍生物和类似物，例如其中天然存在的一个或多个氨酸酯残基或序列被删除、取代、逆转或衍生，或者在其中的N或C末端进行修饰。

下文中所用的通用术语降钙素意指所有这些降钙素类，不论是天然存在的或者人工合成的。

天然存在的降钙素类的实例包括：人降钙素，Chemical Abstract Service Registry Number（CAS RN）＝21215-62-3，其结构是：

H-Cys-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Met-Leu-Gly-

-Thr-Tyr-Thr-Gln-Asp-Phe-Asn-Lys-Phe-His-

-Thr-Phe-Pro-Gln-Thr-Ala-Ile-Gly-Val-Gly-

-Ala-Pro-NH₂;

大鼠降钙素（CAS RN＝11118-25-5），其结构为：

H-Cys-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Met-Leu-Gly-

-Thr-Tyr-Thr-Gln-Asp-Leu-Asn-Lys-Phe-His-

-Thr-Phe-Pro-Gln-Thr-Ser-Ile-Gly-Val-Gly-

-Ala-Pro-NH₂;

鲑降钙素（CAS RN＝47931-85-1），其结构为：

H-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly-

-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-

-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-

-Thr-Pro-NH₂;

鳗类降钙素（CAS RN＝57014-02-5），其结构为：

H-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly-

-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-

-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asp-Val-Gly-Ala-Gly-

-Thr-Pro-NH₂;

还原的鸡降钙素Ⅰ（CAS RN＝96157-98-1），其结构为：

H-Cys-Ala-Ser-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly-

-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-

-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asp-Val-Gly-Ala-Gly-

-Thr-Pro-NH₂;

鸡降钙素Ⅱ（CAS RN＝103468-65-1），其结构为：

牛降钙素（CAS RN＝26112-29-8），其结构为：

H-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Ser-

-Ala-Tyr-Trp-Lys-Asp-Leu-Asn-Asn-Tyr-His-

-Arg-Phe-Ser-Gly-Met-Gly-Phe-Gly-Pro-Glu-

-Thr-Pro-NH₂;

猪降钙素（CAS RN＝12321-44-7），其结构为：

H-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Ser-

-Ala-Tyr-Trp-Arg-Asn-Leu-Asn-Asn-Phe-His-

-Arg-Phe-Ser-Gly-Met-Gly-Phe-Gly-Pro-Glu-

-Thr-Pro-NH₂;和

绵羊降钙素（CAS RN＝40988-57-6），其结构为：

H-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Ser-

-Ala-Tyr-Trp-Lys-Asp-Leu-Asn-Asn-Tyr-His-

-Arg-Tyr-Ser-Gly-Met-Gly-Phe-Gly-Pro-Glu-

-Thr-Pro-NH₂;

降钙素中的一个或多个氨基酸已被删除的实例有US4，597，900中所描述的脱-[Ser²，Tyr²²]-Gly⁸-降钙素类和US4，304，692中所描述的脱-[Tyr²²]-鲑降钙素类。

降钙素中天然存在的序列已被修饰的实例包括1，7-亚烷基降钙素类，例如鳗类1，7-亚烷基降钙素（依降钙素，CAS RN＝60731-46-6），其结构为：

CO-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-NH-CH-CO-Val-Leu-Gly-

-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-

-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asp-Val-Gly-Ala-Gly-

-Thr-Pro-NH₂;

鲑1，7-亚烷基降钙素（CAS RN＝60864-37-1），其结构为：

CO-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-NH-CH-CO-Val-Leu-Gly-

-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-

-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-

-Thr-Pro-NH₂;和

人1，7-亚烷基降钙素（CAS RN＝66811-56-1），其结构为：

CO-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-NH-CH-CO-Met-Leu-Gly-

-Thr-Tyr-Thr-Gln-Asp-Phe-Asn-Lys-Phe-His-

-Thr-Phe-Pro-Gln-Thr-Ala-Ile-Gly-Val-Gly-

-Ala-Pro-NH₂.

在本发明的范围内，特别优选的降钙素是依降钙素（CAS RN＝60731-46-6）。依降钙素及相关的1，7-亚烷基降钙素的制备和性质在英国专利No.1，516，947（Toyo Jozo）中进行了描述。

另一种优选的降钙素是天然存在的鳗类降钙素（CAS RN＝57014-02-5），鳗类降钙素的制备和性质在US3，988，309（Matsuda等）中进行了描述。

本发明的组合物适于采用本领域中已知的，其中药理活性物质经粘膜和经皮传递的方法进行给药，例如，可以将该组合物对直肠粘膜、阴道粘膜、鼻粘膜、舌下粘膜、颊粘膜和结肠粘膜以及皮肤进行给药。它们可以采用滴剂、气雾剂、片剂、胶囊剂、包有肠溶衣的固体口服组合物、糯米纸囊剂、凝胶剂、软膏剂、植入物、栓剂、阴道栓剂、贴剂和膜等剂型。

特殊的组合物是那些用于对直肠粘膜和阴道粘膜给药的组合物。当打算将组合物施用于直肠粘膜或阴道粘膜时，其特殊的剂型包括阴道栓剂、栓剂、溶液泡沫剂（foams）、悬浮液、凝胶剂、软膏剂、片剂和软明胶胶囊剂。

用于直肠或阴道给药的组合物通常是以固体栓剂或者是半固体或液体制剂（装入软明胶胶囊中）的形式提供使用。因此，应该了解的是，需要选择适于在这些栓剂或胶囊制剂中使用的赋形剂，必要时将它们混合起来，在室温和体温条件下制成具有所要求的稠度的制剂。因此，栓剂基质可以（例如）包含选自油、脂肪和聚乙二醇的一种或多种组合构成，可以将它们与聚乙二醇化的甘油酯混合在一起。所述的油和/或脂肪优选包含一种或多种甘油三酯作为主要成分，例如椰子油、分馏的椰子油（如Miglyol）、棕榈仁油、棕榈脂肪、可可脂或猪脂。硬脂栓剂基质的实例包括Witepsol和Suppocire。对于在胶囊制剂中的使用来说，聚乙二醇组分在室温下优选为液态的，例如聚乙二醇-200、300、400或600，而对于固体栓剂来说，较高分子量的聚乙二醇是优选的。当然，各种赋形剂的相对比例尤其取决于所需制剂的稠度。必要时，聚乙二醇化的甘油酯可以用作胶囊制剂中唯一载体。

如上所述，适于直肠给药的组合物是特别优选的。

此外，优选的还有将活性成分传递到结肠粘膜上的组合物。这些组合物包括用于口服给药的包有肠溶衣的组合物，这些组合物可以（例如）采用涂覆了包衣剂的胶囊剂的形式，所述的包衣剂确保降钙素通过胃，随后优选在结肠中释放出来。适宜的包衣剂包括阴离子聚合物，例如丙烯酸/甲基丙烯酸酯共聚物（如Eudragit S）。另一种可选择的方式是，这种制剂可以以控制释放传送的形式掺入，例如按WO90/09168中所述的形式。可以以这种肠胶囊或控制释放的形式掺入的赋形剂包括（例如）上述用于直肠和阴道制剂的那些赋形剂。

若打算将这种组合物施用于鼻粘膜，那么具体的剂型是溶液、气雾剂、滴剂和凝胶剂。

适于颊和吞下给药的具体剂型是凝胶剂、悬浮液、片剂、贴剂、软膏剂、溶液、气雾剂和糯米纸囊剂。

气雾剂制剂典型地包含由活性物质在生理学上可接受的水溶剂或非水溶剂中形成的溶液或精细悬浮液，通常是盛在密封的容器中，以单剂量或多剂量形式提供使用。密封的容器可以是配有喷雾装置使用的药筒或再装容器，或者是一个整体配药装置和单剂量鼻吸入器（参见法国专利申请FR2578426）或装有计量阀的气雾剂配药器，一旦容器内的药物用尽就可以用此阀处理。如果剂型包含气雾剂配药器，它将含有推进剂，该推进剂可以是一种压缩气体（如压缩空气）或一种有机推进剂（如氟氯烃）。这些气雾剂配药器在本领域中是公知的。气雾剂剂型也可以采用唧筒-喷雾器的形式，而这种形式也是本领域中所公知的。用于配药气雾剂喷雾器的喷雾或配药装置典型地设计成配药颗粒的尺寸大于10微米。为了确保有效量的组合物与口腔或鼻粘膜保持接触，而不被吸入体内，颗粒的大小以10-160微米为宜。

若该组合物打算以液体喷雾剂的形式给药时，可以根据需要按已知的方法调整液体组合物的粘度，以保证该组合物是可以喷雾的。

以糯米纸囊剂形式存在的组合物（例如）可以是PCT/GB91/00651中所述的那样。这些糯米纸囊剂主要由淀粉制成，稠度以0.3-1.0mm为宜。

本发明的组合物还可以含有水溶剂或者生理学上可以接受的非水溶剂或液体载体。非水溶剂或载体的实例有醇类，特别是多羟基醇类（例如丙二醇和丙三醇）以及植物油和矿物油。如果需要，可以将这些非水溶剂或载体与水混合形成（例如）乳剂。

本发明的制剂还可以含有下列赋形剂，例如：抗氧化剂、稳定剂、防腐剂（如对羟基苯甲酸酯类或苄醇）、表面活性剂（如十二烷基硫酸钠）、粘度调节剂、肌肉的正常张力调节剂（如氯化钠、甘氨酸或甘露糖醇）以及缓冲剂。

这些组合物还可以含有甘草酸或甘草酸盐，例如甘草酸钠、甘草酸钾或甘草酸铵。通常，甘草酸盐的浓度至少是组合物总重量的0.1%（W/W），适宜的浓度为0.1-10%（W/W），优选的是0.2-5%（W/W）。在栓剂和用于直肠或阴道给药的软明胶胶囊中，甘草酸盐存在的适宜数量为每100g组合物中含有0.1-2g，甘草酸盐的优选存在量为每100g组合物中含有0.2-1g。

这些组合物还可以含有蛋白酶抑制剂，优选非表面活性剂蛋白酶抑制剂，例如EP127535中所述的这类抑制剂。

本发明的组合物，根据其中所含的各种不同成分的化学物理学性质，其pH值可以在宽范围内变动。然而，该组合物适宜的pH值范围是pH为3-8，优选pH约为3.5至约为7。为了调整pH值并使之保持在一适宜的值，该组合物中可以含有一种缓冲剂。可以使用的缓冲剂的实例包括柠檬酸盐（如柠檬酸和柠檬酸钠的混合物）、乙酸盐、磷酸盐和己二酸盐。除了缓冲剂（如上面所述的那些缓冲剂）之外，为了调整pH值还可以掺入碱金属氢氧化物（如氢氧化钠）。

为了避免出现疑问，含有降钙素、Gelucire、甘草酸铵和苄醇组合成分的组合物被排除于本申请之外，这种制剂在国际申请WO93/06854号中已有记载。

一般地说，上面所述的组合物可以按照公知药物生产工艺来制备，例如参见Remington′s Pharmaceutical Sciences，17th Edition，Mack Publishing Company，1985。软明胶胶囊（例如）可以按WO84/03417或EPA122463中所述的方法制造。

本发明的组合物可用于治疗象下面这样一些疾病：佩吉特氏病（畸形性骨炎）、骨质疏松症（包括绝经后的骨质疏松症）、祖德克氏病和各种高钙血症（参见（例如）the Physician′s Desk Reference，42nd Edition，1988，pages 1796-1797）。

在单位剂量的本发明组合物中药理活性物质的数量依据降钙素的效力大小和组合物的性质而有所不同。但是，一般地说，供人使用的单位剂量组合物典型地含有1-1000国际单位（I.U.）的降钙素。就依降钙素来说，单位剂量通常含有5-200I.U.。用于结肠给药的单位剂量组合物优选含有40-800I.U.的依降钙素。可将这种组合物以含有治疗上述疾病有效量的降钙素的剂量给病人用药。依降钙素的典型剂量形式是每天5-200I.U.（或者对于结肠给药是40-800I.U.），可以以单剂量或分开的剂量给药，例如连续每天给药或隔天给药。

术语“国际单位”指的是人、鲑或猪降钙素或依降钙素的适宜的International Reference Preparation（I.R.P），是由National Institute for Biological Standards and Control，Blanche Lane，South Mimms，Potters Bar，Hertfordshire，EN63QG，United Kindom制定的。

现在通过下面实施例更加详细地说明本发明。

用于阴道、直肠或口服给药的制剂

实施例1

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

聚乙二醇600(g) 550.0 550.0

Gelucire44/14(g) 400.0 400.0

蒸馏水(g) 44.1 49.1

甘草酸铵(g) 5.0 -

氯化钠(g) 300.0 300.0

柠檬酸钠二水合物(mg) 231.5 231.5

氢氧化钠(mg) 350 -

柠檬酸(mg) 18.5 18.5

方法

将柠檬酸、柠檬酸钠二水合物、氯化钠、蒸馏水、依降钙素，如果适宜的话还有甘草酸铵和氢氧化钠，在温度调节在约70℃的水浴中一起混合，然后冷却到约55℃。在约50～60℃下使Gelucire熔化，加入聚乙二醇600，冷却至约45～50℃，然后在搅拌条件下加入上述溶液。

将所得混合物冷却至约30℃，填入软明胶胶囊中（每个胶囊1g制剂（a））供直肠或阴道给药，或者填入软明胶胶囊中（每个胶囊300mg制剂（b））用于口服给药。任选地，也可以将该混合物在真空下干燥，填入硬明胶胶囊中（每个胶囊290mg制剂（b））用于口服给药。用于口服给药的胶囊可以涂覆下列包衣：

mg/胶囊

Eudragit S 33.0

滑石 9.0

邻苯二甲酸二丁酯 6.6

PEG600 0.9

实施例2

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

聚乙二醇600(g) 580.0 580.0

Gelucire44/14(g) 420.0 420.0

方法

将Gelucire于约50～60℃下熔化，加入聚乙二醇，冷却至约45～50℃，然后加入依降钙素。把所得混合物装入软明胶胶囊中用于直肠、阴道或口服给药，对于口服给药来说可任选地按实施例1所述进行包衣。另外，对于口服给药来说，可将该混合物装入经过上述包衣的硬明胶胶囊中。

实施例3

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

Gelucire35/10(g) 950.0 950.0

蒸馏水(g) 44.1 49.1

甘草酸铵(g) 5.0 -

氯化钠(g) 300.0 300.0

柠檬酸钠二水合物(mg) 231.5 231.5

氢氧化钠(mg) 350 -

柠檬酸(mg) 18.5 18.5

方法

除了不包含聚乙二醇外，按照与实施例1类似的方法制备制剂。

实施例4

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

Gelucire35/10(g) 1000.0 1000.0

方法

将Gelucire于约50～60℃下熔化，冷却至约45～50℃，并加入依降钙素。所得混合物装入明胶胶囊中，任选地按实施例1和2所述方式进行包衣。

实施例5

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

Gelucire37/02(g) 950.0 950.0

蒸馏水(g) 49.1 44.1

甘草酸铵(g) - 5.0

氯化钠(mg) 300.0 300.0

柠檬酸钠二水合物(mg) 231.5 231.5

氢氧化钠(mg) - 350.0

柠檬酸(mg) 18.5 18.5

方法

实施例6

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

Gelucire37/02(g) 1000.0 1000.0

方法

将Gelucire于约50～60℃下熔化，冷却至约45～50℃，然后加入依降钙素。把所得混合物装入明胶胶囊中，任选地按实施例1和2所述方式进行包衣。

实施例7

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

Gelucire44/14(g) 450.0 450.0

Labrafil M2125CS(g) 500.0 500.0

蒸馏水(g) 44.1 49.1

甘草酸铵(g) 5.0 -

氯化钠(mg) 300.0 300.0

柠檬酸钠二水合物(mg) 231.5 231.5

氢氧化钠(mg) 350.0 -

柠檬酸(mg) 18.5 18.5

方法

将Gelucire于约50～60℃下熔化，加入Labrafil，冷却至约45～50℃，按实施例1所述添加缓冲的依降钙素溶液。所得混合物按实施例1所述方式装入胶囊中。

实施例8

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

Gelucire44/14(g) 500.0 500.0

Labrafil M2125CS(g) 500.0 500.0

方法

将Gelucire于约50～60℃下熔化，加入Labrafil，冷却至约45～50℃，在搅拌条件下加入依降钙素。按实施例1和2所述方法把这一混合物装入胶囊中。

实施例9

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8或 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 29.6

Labrasol(g) 950.0 950.0

蒸馏水(g) 49.1 49.1

氯化钠(mg) 300.0 300.0

柠檬酸钠二水合物(mg) 231.5 231.5

柠檬酸(mg) 18.5 18.5

方法

按实施例1所述制备缓冲的依降钙素溶液，然后在搅拌下加入Labrasol。所得混合物按实施例1所述方式装入胶囊中。

实施例10

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

Labrasol(g) 1000.0 1000.0

方法

将Labrasol和依降钙素在搅拌下进行混合。所得混合物可以按实施例1和2中所述方式装入胶囊中。

实施例11

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

聚乙二醇600(g) 550.0 550.0

Labrasol(g) 400.0 400.0

蒸馏水(g) 49.1 44.1

甘草酸铵(g) - 5.0

氯化钠(mg) 300.0 300.0

柠檬酸钠二水合物(mg) 231.5 231.5

氢氧化钠(mg) - 350.0

柠檬酸(mg) 18.5 18.5

方法

将Labrasol与聚乙二醇进行混合。在搅拌条件下加入缓冲的依降钙素溶液。所得混合物可以按实施例1中所述方式装入胶囊中。

实施例12

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

聚乙二醇600(g) 580.0 580.0

Labrasol(g) 420.0 420.0

方法

与实施例2类似。

实施例13

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

Labrafil M2125CS(g) 1000.0 1000.0

方法

与实施例10类似。

实施例14

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

Labrafil WL2609BS(g) 1000.0 1000.0

方法

与实施例10类似。

实施例15

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

Labrasol(g) 667.0 667.0

Gelucire44/14(g) 333.0 333.0

方法

与实施例8类似。

实施例16

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

Labrafil WL2609BS(g) 500.0 500.0

Gelucire35/10(g) 500.0 500.0

方法

与实施例8类似。

实施例17

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 25,50或100

(6500I.U./mg效力) 或29.6

Labrasol(g) 500.0 500.0

Gelucire35/10(g) 500.0 500.0

方法

与实施例8类似。

用于直肠或阴道给药的栓剂

实施例18

依降钙素（mg） 15.4

（6500I.U./mg效力）

硬脂肪（g） 750.0

Labrafil WL2514 CS（g） 750.0

方法

将硬脂肪和Labrafil在50～60℃下熔化并混合，冷却至45～50℃，在搅拌条件下加入依降钙素。将所得物料注入栓剂模中，冷却至室温，得到栓剂（每个1.5g）。

用于鼻、舌下、颊、直肠或阴道给药的溶液

实施例19

a b c

依降钙素(mg) 3690 7380 3690

(6500I.U./mg效力)

Gelucire44/14(g) 8.0 8.0 8.0

聚乙二醇600(g) 11.0 11.0 11.0

柠檬酸(mg) 37.0 37.0 37.0

柠檬酸钠二水合物(mg) 463.0 463.0 463.0

氯化钠(mg) 600.0 600.0 600.0

苄醇(g) 2.0 - -

对羟基苯甲酸甲酯(mg) - 130.0 -

对羟基苯甲酸丙酯(mg) - 20.0 -

氯苄烷胺(mg) - - 10.0

蒸馏水适量至100ml

1N氢氧化钠适量至pH6

方法

在约35-40℃温度下，将除依降钙素外的所有组分溶解于80%的水中，将所得溶液冷却至室温。把依降钙素溶解于剩下的20%的水中。在搅拌条件下将这两种溶液混合起来。对于鼻、舌下或颊的使用来说，该溶液可以以100μl的体积给药，而对于直肠或阴道使用来说则以200-400μl体积给药。

用于经皮给药的剂型

实施例20

依降钙素（mg）

依降钙素(mg)

(6500I.U./mg效力) 6.0 6.0

Gelucire44/14或35/10(g) 8.0 8.0

聚乙二醇600(g) 11.0 11.0

甘草酸铵(g) 2.0 -

聚羧乙烯934(g) 2.0 2.0

柠檬酸(mg) 37.0 37.0

柠檬酸钠二水合物(mg) 463.0 463.0

氯化钠(mg) 600.0 600.0

蒸馏水适量至100g

1N NaOH 适量至pH6

方法

在温度调节在约70℃的水浴中，将Gelucire、聚乙二醇600、柠檬酸、柠檬酸钠二水合物、氯化钠、聚羧乙烯934、氢氧化钠、甘草酸铵（如果使用的话）和部分蒸馏水混合到一起以制备实施例20的制剂。所得凝胶冷却至室温，然后向其中加入依降钙素在剩余的部分蒸馏水中形成的溶液。最终得到的凝胶填入每个500mg的贴剂中。

用于直肠或阴道给经的制剂

实施例21

依降钙素（mg）

（6500I.U./mg效力） 14.8

聚乙二醇600（g） 550.0

Gelucire44/14（g） 400.0

蒸馏水（g） 49.449

氯化钠（mg） 300.0

柠檬酸钠二水合物（mg） 231.5

柠檬酸（mg） 18.5

氢氧化钠（mg） 1.0

方法

在温度约为55℃的水浴中将柠檬酸、柠檬酸钠二水合物、氯化钠、氢氧化钠、蒸馏水和依降钙素混合到一起。把Gelucire于约50～60℃下熔化，加入聚乙二醇600。将所得混合物冷却至约45～50℃，然后在搅拌下将其加到上述溶液中。

最终得到的混合物待冷却至约30℃后填入软明胶胶囊中（每个胶囊1g）供直肠或阴道给药。

用于阴道、直肠或口服给药的制剂

实施例22

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 50,100,200

(6500I.U./mg效力) 或29.6 或400

Labrasol(g) 500.0 500.0

聚乙二醇600(g) 398.5 398.5

聚乙二醇200(g) 100.0 100.0

十二烷基硫酸钠(g) 1.5 1.5

方法

将依降钙素溶解在聚乙二醇200中，然后加入所有其它组分，将它们混合到一起。

将所得混合物按实施例1中所述方式填入胶囊中。

实施例23

依降钙素（mg）

（6500I.U./mg效力） 2.55

Labrasol（g） 500.0

聚乙二醇600（g） 398.5

聚乙二醇200（g） 100.0

十二烷基硫酸钠（g） 1.5

方法

按实施例22中所述方式制备实施例23的制剂。

实施例24

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 50,100,200

(6500I.U./mg效力) 或29.6 或400

Labrasol(g) 500.0 500.0

聚乙二醇600(g) 348.5 348.5

聚乙二醇200(g) 100.0 100.0

十二烷基硫酸钠(g) 1.5 1.5

蒸馏水(g) 44.45 44.45

甘草酸铵(g) 5.0 5.0

氯化钠(mg) 300.0 300.0

柠檬酸钠二水合物(mg) 231.5 231.5

柠檬酸(mg) 18.5 18.5

方法

在温度约为55℃的水浴中将柠檬酸、柠檬酸钠二水合物、氯化钠、甘草酸铵、蒸馏水和依降钙素混合到一起。再把聚乙二醇200、聚乙二醇600和Labrasol混合到一起。把这两种混合物掺混到一起并冷却到室温。

最终得到的混合物可以按实施例1中所述方式填入胶囊中。

实施例25

a b

依降钙素(mg) 7.4,14.8 50,100,200

(6500I.U./mg效力) 或29.6 或400

Labrasol(g) 857.0 857.0

聚乙二醇200(g) 33.0 33.0

十二烷基硫酸钠(g) 10.0 10.0

蒸馏水(g) 50.0 50.0

己二酸(g) 40.0 40.0

乙酸钠三水合物(g) 10.0 10.0

方法

将依降钙素溶解在聚乙二醇200和蒸馏水中，然后加入Labrasol、十二烷基硫酸钠、己二酸和乙酸钠三水合物并将它们混合到一起。

最终得到的混合物可以按实施例1中所述方式填入胶囊中。

试验A

通过下述试验，证明了聚乙二醇化的甘油酯（Gelucire44/14）的增强吸收的性质。

将实施例21的所报告的含40%Gelucire44/14的制剂以及具有下列成分的、不含Gelucire的参比制剂分别对兔子进行药效活性试验（即降低血清中钙浓度的试验），然后加以比较。

参比制剂

依降钙素（mg）

（6500I.U./mg效力） 14.8

聚乙二醇600（g） 880.0

聚乙二醇4000（g） 70.0

蒸馏水（g） 49.449

氯化钠（mg） 300.0

柠檬酸钠二水合物（mg） 231.5

柠檬酸（mg） 18.5

氢氧化钠（mg） 1.0

（加入聚乙二醇4000为的是使参比制剂具有与实施例21的制剂相类似的粘度;制备方法与实施例21的制备方法相似）。

借助一个小导管，以0.5g/kg体重（相当于约50I.U./kg的用量，将上述制剂对几组6只清醒的、禁食过夜的新西兰兔（体重约2kg）进行直肠给药。

将产物给药后0、60、120、180和240分钟，从每只兔的耳侧静脉采集血样，在所取得的血样上测定血清钙浓度（使用原子吸收分光光度计VARIAN30/40）。

结果表示与基准值（时间为0）相比较的血清钙浓度的剩余百分数，列于表1中。

表1

与基准值相比较的血清钙的剩余百分数

（平均值±标准误差）

0分钟 60分钟 120分钟 180分钟 240分钟

实施例21

的制剂 100.0 77.2 81.6 92.8 94.7

±2.5 ±2.6 ±1.3 ±1.3

不含Gelucire

的参比制剂 100.0 83.7 93.9 95.1 97.5

±2.8 ±1.1 ±2.6 ±3.6

试验B

通过本试验证明聚乙二醇化的甘油酯（Labrasol）的增强吸收的性质。

用实施例23中所述含50%Labrasol的制剂和不含Labrasol的参比制剂（Labrasol完全被聚乙二醇600所取代）分别对大鼠进行药效活性试验，即降低血清中钙浓度的试验。

借助一个小的导管，以2ml/kg体重的体积（相当于大约30I.U./kg），将上述制剂对几组4只清醒的、禁食过夜的Sprague Dawley大鼠（体重约220±20g）进行结肠内给药。

将产物给药后0、60和120分钟，从每只大鼠的尾静脉采集血样，对所取得的血样测定血清钙浓度（使用原子吸收分光光度计VARIAN30/40）。

结果表示为与基准值（时间为0）相比较的血清钙浓度的剩余百分数，列于表2中。

表2

与基准值相比较的血清钙的剩余百分数

（平均值±标准误差）

0分钟 60分钟 120分钟

实施例23的制剂 100.0 79.5 88.2

±3.0 ±5.8

不含Labrasol的参比制剂 100.0 96.0 99.1

±2.5 ±1.4

Claims

1、一种药物组合物，它含有降钙素和聚乙二醇化的甘油酯。

2、权利要求1的一种组合物，其中所述的聚乙二醇化的甘油酯是饱和的聚乙二醇化的甘油酯。

3、权利要求2的一种组合物，其中所述的饱和的聚乙二醇化的甘油酯由C₈-C₁₈甘油酯类和聚乙二醇酯类构成。

4、权利要求2的一种组合物，其中所述的饱和的聚乙二醇化的甘油酯由C₈-C₁₈甘油酯类。

5、权利要求1的一种组合物，其中所述的聚乙二醇化的甘油酯是不饱和的。

6、权利要求5的一种组合物，其中所述不饱和的聚乙二醇化的甘油酯由C₁₆-C₂₀甘油酯类和聚乙二醇酯类构成。

7、权利要求1-6中任何一项的一种组合物，其中所述的降钙素是依降钙素。

8、权利要求1-7中任何一项的一种组合物，它适于直肠、阴道、鼻、舌下、颊、口服、经皮或者结肠给药。

9、权利要求8的一种组合物，它包含一种控制释放传递的剂型，该剂型适于口服给药，随后在结肠粘膜区域内释放出活性成分。

10、权利要求1-9中任何一项的一种组合物，它采用含有1-1000LU.降钙素的单位剂量形式。

11、权利要求1-10中任何一项的一种组合物，其pH值在约3.5至约7的范围内。