CS136191A3 - Pharmaceutical - Google Patents

Description

- 1 455 /- 41

Farmaceutický prostředek ; ~

Oblast techniky vynález se týká farmaceutického prostředku pro podáváníbiologicky účinných látek savcům sliznicovou membránou.

Dosavadní stav techniky

Podávání biologicky účinných látek vstřikováním /intra-venozně, intramuskulárnš a sukutáně/ se zpravidla považuje zanejvhodnější způsob podání, jesliže se má dosáhnout rychléhoa silného systémového účinku, například v průběhu 3 až 5 mi-nut a jestliže se účinná látka neabsorbuje nebo je neúčinnáv gastrointestinálním traktu nebo prostřednictvím prvníhohepatického metabolismu. Avšak podávání vstřikováním je spo-jeno s četnými nedostatky. Je potřeba sterilních stříkačeka může způsobit bolest nebo podráždění, zvláště v případě opakovaného podání vstřikováním včetně nebezpečí infekce. Kromětoho vstřikování nemohou provádět neškolené osoby.

Intranasálnímu padání se v současné době věnuje zvlášt-ní pozornost jakožto možnosti vyhnout se nepřijemnostem,způsobeným přímým zasahováním do organismu při parenterálnímpodávání. Kromě toho se tohoto způsobu podání může vhodně po-užívat jako alternativy parenterálního vstřikováni, když jezapotřebí rychlého účinku a může ho provádět i nezaškolenáosoba.

Aby bylo intranasální podání akraktivní alternativou zavstřikování, musí zxabízet podobný vztah dávky ke koncentra-ci v plasmě, a nesmí působit bolest nebo podráždění ošetřo-vanému jedinci ani nesmí nenávratně poškozovat nebo drážditnosní sliznici. Avšak v případě ošetření při akutním ohrože-ní zdraví je i poměrně vysoké místní podráždění sliznicepřípustné.

Nasální podání biologicky účinné látky musí být na nos-ní sliznici za takových podmínek, aby bylo zajištěno penetro- 2 vání nebo absorpce nosní sliznicí', pro penetraci sliznicí mu-sí být nosič kompatibilní se sliznicí,a proto musí mít urči-tý způsob hydrofilicity. Nosič má mít však současně lipofil-ní vlastnosti, aby rozpouštěl fysiologicky účinné množstvíurčitých biologicky účinných látek·

Rozsáhlé sesítění krevních kapilár pod nosní sliznicíje obzvláště vhodné k rychlé a účinné systémové absorpcidrog. Kromě toho nosní epitheliální membrána sestává prak-ticky z jediné vrstvy epitheliálních buněk /pseudostratifio-vané epithelium/ a je proto vhodnější pro podávání drogy nežjiné sliznicové povrchy mající šupinaté epitheliální vrstvy,jako je sliznice ústní nebo vaginální, '^yto povrchy jsou všaktaké vhodné pro podávání biologicky účinných látek za použi-tí systému uvolňujícího drogu podle vynálezu. Účinná nasální absorpce se považuje za velmi malou, pokudnení účinná látka dostupná ve formě rozpustné ve vodě /Proc-tor, 1985/. Toto konstatování klade závažné meze použití bio-logicky účinných látek, které musí být rozpustné vo vodě astálé ve formě vodných roztoků.

Velký počet biologicky účinných látek včetně drog /například benzodiazepiny/, vitaminů a vakcin má ozemený stupeň roz-pustnosti ve vodě a velmi často není možno rozpustit klinic-ky odpovídající množství v poměrně malém objemu, který přichá-zí v úvahu při intranasálním podávání.

Pro kapalné prostředky je důležité, že účinné množstvíalespoň jedné biologicky účinné látky se může rozpouštětv objemu menším než je přibližně 300 /ul. Větší objem můžebýt nepříjemný pro ošetřovaného a vytlačuje se ven nosnímidírkami nebo směrem do hltanu. Tím se však část účinné látkyztrácí z místa účinné absorpce a v praxi je nemožné repro-dukovatelně podávat správnou dávku. Objem u dospělých lidí jes výhodou přibližně 1 až přibližně 1000 mikrolitrů a přede-vším 50 až přibližně 150 mikrolitrů na nosní dirku.

Sliznicové epithelium nosní dutiny je pokryto četnými vláskovitými chloupky, které představují důležitý obranný - 3 - mechanismus pro savce proti vdechovanému prachu, alergenům amikroorganismům. Normální poločas neabsorbováných látek poda-ných do nosní dutiny je přibližně 15 minut v důsledku čisticí-mu působení hlenů k odstraňování cizích částic a nadbytečnýchhlenů směrem k hltanu. Z tohoto důvodu je výhodné, aby k ab-sorpci docházelo rychle a s výhodou v průběhu 1 až 20 minut.

Byly vyvinuty nejrůznější nosičové systémy pro nasálníuvolňování biologicky účinných látek. Až dosud se v literatu-ře uvádělo, že přijímání biologicky účinných látek z nosní sliz-nice je možné včleňováním speciálního nosičového systému doprostředku nebo přísadou určitých činidel, podporujících ab-sorpci.

Lau a Slattery /1989/ studovali absorpčáí charakteristi-ky diazepamu a lorazepamu při intranasálním podávání pro oše-třování status epilepticus. K solubilizaci těchto drog se vo-lilo nedráždivé povrchově aktivní činidlo, polyoxyethylovanýricinový olej jakožto nejméně dráždivě z četných studovanýchrozpouštědel včetně polyethylenglykolu 400. Absorpce diaze-pamu byla 84 a 72 v případě dvou dospělých lidí, podle měře-ní v průběhu 60 hodin. Avšak vrchol koncentrace nebyl pozoro-ván až do 1,4 hodin po nasálním podání a byl pouze přibližně27 # se zřetelem na intravenozní podání, což indikuje, že kehlavní absorpci by pravděpodobně došlo po odvlečení zkoušnélátky do hltanu a po jejím spolknutí. Podobné výsledky jsoutaké pro lorazepam, který vykazuje vrchol po ještě delší do-bě /2,3 hodiny/. Autoři usoudili, že intranasální cesta podá-ní má omezenou účinnost pro akutní ošetřování epileptickýchstavů, /publikováno v Intern. J. of Pharm. 54, str. 171-174/

Wilton a kol. / "Preanaesthetic sedation of preschoolchildern using intranasal midazolam”, Anesthesiology 69, str. 972 až 975, 1988/ popisují podávání midazolamu 45 dětem prodosažení preanestetického uklidnění. Používané objemy bylyvelmi nepraktické a překračovaly maximální objem potřebný proúčinné podání, což vedlo ke kýchání a vypuzení části dávky.Nepopisuje se však používaný nosič.

Mezinárodní zveřejněná přihláška vynálezu číslo W0 4 86/04233 popisuje farmaceutický prostředek, přičemž je droga/například diazepam/ rozpuštěna ve směsi hnacího prostředkua korozpouštědla, jako je například glycerolfosfatid. Tatohmota však vyžaduje tlakový systém a alespoň jeden halogeno-vaný uhlovodík jako hnací prostředek aerosolu.

Morimoto a kol. /"Naselaabsorption of nifedipine from gelpreparations in rats”, Nasální absorpce nifedipinu z gelovýchprostředků v případě krys, Chemical and Pharmaceutical Bulle-tins, 35, č. 7, str. 3041 až 3044, 198^ studovali gelový pro-středek pro nesální podání v případě krys nifedipi obsahují-cího gelového činidla ksrbopol /polyakrylová kyselina/ v po-lyethylenglykolu 400 /PEG 400/k dosažení prodlouženého půso-bení a vysoké biologické dostupnosti drogy. Směs stejnýchmnožství karbopolu a PDE 400 je výhodná. Ukázalo se, že na-sální podáni vykazuje vyšší biologickou dostupnost nifedipi-nu než perorální podání, avšak vrchol koncentrace v plasměbyl pozorován až za 30 minut a využití bylo toliko rovné nebomenší než 10 % ve srovnání s intravenozním podáním. Dánské zveřejněná přihláška vynálezu číslo 2586/87 po-pisuje farmaceutický prostředek obsahující protizánětlivýsteroičL, vodu a toliko objemově 2 až. 10 B propylenglykolu, 10 až 25 % polyethylenglykolu 400 a objemově 1 až 4 % Twqqtí 20.

Americký patentový spis číslo 5 153689 popisuje prin-cip získání stálého vodného roztoku insulinu, určeného pronasální podání. Má hodnotu pH 2,5 až 4,7 a obsahuje hmotnost-ně 0,1 až 20 % stabilizačního činidla voleného ze souboru za-hrnujícího /A/ alespoň jedno neiontové povrchově aktivní či-nidlo s hydrofilní lipofilní vyváženou hodnotou v oboru 9 až22, /B/ stabilizační činidlo volené z polyethylenglykolů o mo-lekulové hmotnosti 200 až 7500 a /C/ směsi shora uvedenýchstebilizacních činidel podle /A/ a /B/.

Mezinárodní zveřejněná přihláška vymálezu číslo 90/ 02737 popisu nasální podávání benzodiazepinových hypnotik vefarmeceuticky vhodném nasálním nosiči. Nosičem může být so-lankový roztok, alkohol, glykolether nebo jejich směs. Nik-de se neuvádí, že by přítomnost glykolu nebo glykoletherumohla dodávat speciální přednosti prostředku, ani že by byl8 - 5 - jejich přítomnost pro prostředek rozhodující. oiné prostředky pro intranasální nebo podjazykcvé podá-vání jsou popsanány v americkém patentovém spise číslo4 746508, přičemž se podává insulin za použití fusidické ky-seliny a jejich derivátů jakožto promotorů absorpce a v mezi-národní zveřejněné přihlášce vynálezu číslo V/O 87/05210 sepopisuje pod jazyk vstřikovatelný farmaceutický prostředek,obsahující popřípadě PSG a vyžadující ethanol, diglycerid a/ne-bo triglycerid mastné kyseliny a farmaceuticky vhodný hna-cí plyn.

Hlavním úkolem tohoto vynálezu je vyvinout farmaceutic-ký prostředek pro podávání biologicky účinné látky sliznicí savťů, přičemž by prostředek mohl vytvářet vyhokou koncentraciv plasmě farmaceuticky účinné látky téměř tak rychle jako přiintravenosním podání bez doprovodných nepřijatelných účinkůna sliznici.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je farmaceutický prostředek pro podá-ní biologicky účinné látky nebo biologicky účinných láteksliznicovou membránou savců, který obsahuje jednu nebo něko-lik látek ze souboru zahrnujícího n-glykofuroly obecnéhovzorce I

kde znamená n 1 až 8 a\ethylenglykoly obecného vzorce IIH/0CH2CH2/pCH /11/ kde znamená p 1 až 14.

Vynález se týká provedení, kdy n-glykoly obecného vzor-ce II mají p rovno 1 až 8 v případě, že není obsažen žádnýglykofurol a biologicky účinnou látkou je benzodiazepin.

Podle výhodného provedení vynálezu se ouzíva n—glymoluobecného vzorce II, kde p znamená 1 až 3 a především tetra— - 6 - qthylenglykoi u. farmaceutické prostředky podle vynálezu obsahují s výho-dou n-glykofuroly obecného vzorce I, kde znamená η 1 nebo 2.

Podle vynálezu je výhodným prostředek farmaceutický,který obsahuje jeden nebo několik n-glykofurolů a popřípadějeden nebo několik n-ethylenglykolů. farmaceutický prostředek podle vynalezu může obsahovatbiologicky účinnou látku volenou ze souboru zahrnujícíhoadrenální hormony, kortikosteroidy a deriváty jako AGTH a a-nalogy, tetrakosaktrin, alsaktid, kortison, kortisonacetát,hydrokortison, hydrokortisonalkohol, hydrokortisonacetát,hydrokortisonhemikukcinát, prednisolon, prednisolonterbutát, -fluor prednisolon, triamcinolonacetonid, dexamethasonfos-fát, flunisolid, budesonid, tosikorolpivalát atd; aminokyse-liny; anorektika, jako například benzfetaminhydrochlorid,chlorfenterminhydrochlorid; antibiotika, jako například tet-racyklinhydrochlorid, tyrothricin, cefalosporin, aminoglyko-sidy, streptomycin, gentamycin, leukomycin, penicilín a jehoderiváty, erythromycin; antialergicky účinné látky; protilát-ky například monoklonální nebo polyklonální protilátky protiinfekčním nemocem; anticholonergická činidla, jako napříkladatroninová báze; antidepresanty například amitriptylinhyd-rochlorid, imipraminhydrochlorid; antiemetika například neu-roleptika jako metopimazin, antihistaminy například thienylperazin nebo antiemetika mající regulační působení na střevnípohyb jako domperidon; antiepileptika a antispasmolytiká, na-příklad clonazepem, diazepam, nitrazepam, lorazepam; anti-histaminika a histaminické prostředky, například difenhyd-raminhydrochlorid, chlorfeniraminmaleát, clemastin, histamin,profenpyridaminmaleát, chlorprofenpyridaminmaleát, dvojsodnýkromoglykát, meclizin; antihypertensivní činidla napříkladclonidinhydrochlorid; protizánětlivá činidla /enzymatická/například chymotrypsin, bromelainseratiopeptidasa; protizá-nětlivá činidla /nesteroidální/, například acetaminofen, as-pirin, aminopyrin, fenylbutazon, mefenamová kyselina, ibupro- - 7 - fen, diklofenaknatriům, indomethacin, kolchicin, probenocid;protizánctiivá činidla /steroidální/ například hydrokortison,prednison, fluticason, predonisolon, triamcinclon, triamcino-lonacetonid, dexamethason, betamethason, belclcmethason,becklomethasondipropionát; antineoplastická činidla napříkladaktinomycin C; antiseptika například chlorhexidinhydrochlorid,hexylresorcinol, dequaliniumchlorid, ethakridin; protinádoro-vá činidla; prostředky proti kasii /astmatická činidla/, jakoje například natriumkromoglykát, kodeinfosfát, isoprotereol-hydrochlorid; antivirální a antikancerogenní činidla, jakojsouang£říklgd interferony /například Alpha-2 interferon proošetřování/’, fenyl-p-guanidinobenzoát, enviroxim; fy -adre-nergická blokovací činidla, jako je například propranolol-hydrochlorid; krevní faktory například faktor VII, faktorVIII; činidla řídící metabolismus kostí například vitamin D^,aktivní vitamin D^; bronchodilatátory například clenbuterol-hydrochlorid, bitolterolmesylat; kardiotonika například digi-talis, digoxin; kardiovaskulární regulační hormony, drogy aderiváty, například bradykinové antagonisty, atriální natri-uretický peptiď a deriváty, hydralazin, angiotensin II anta-gonist, nitroglycerin, nifedipin, isosorbiddinitrát, pro-pranolol, clofiliumtoaylát; chemoterapeutická činidla, na-příklad sulfathiazol, nitrofurazon; CNS-stimulanty napřík-lad lidokain, kokain; kortikosteroidy, například lacikorton,hydrokortison, fluocinolonacetonid, triamcinoloacetonid;diagnostické drogy, například fenosulfonftalein, barvivoT-1824, vitální barviva, ferrokyanid draselný, sekretin, pen-tagastrin, cetulein; dopaminergická činidla, například bromo -kriptinmexylát; enzymy například lysozymchlorid, dextranasa ,gastrointestinální hormony a deriváty, například sekretin,substance P; hypothalmové hormony a deriváty, například LHRHa anology /například nafarelin, buserelin zolidex/, enkefali-ny /DADLE, metkefamid, leucinenkefalin/, TRH /thyrotropir uvol-ňující hormon; hypotensiva; lokální anestetika například ben-zokain; látky k ošetřování migrény například dihydroergota-min, ergometrin, ergotamin, pizotizin; narkotika, antagonis- 8 ty & analgetika například buprenorfin, naloxon; penkreatovéhormony a deriváty, například insulin /hexemeřni/dimerní/mc-nomerní forma/, giukagon; parasympathomimetiká například ni-kotin, methachclin; parasynpatholytiká, například scopolamin,atropin, ipratropium; látky k ošetřování Parkinscnovy nemocinapříklad apomorfin; hormony slizcvých šlez a deriváty, například růstový hormon /lidský/, vasopresin a analogy /DDAVF, lyp-ressin/, oxytocin a analogy; prostaglandiny, například FGA aderiváty, PGE a deriváty, PGG2 a deriváty, PGF^a deriváty, di-noprost trometamol; inhibitory prcteasy například aprotinin-citrát nebo -antitrypsin; sedativa například alprazolam, bromazepam, brothizolam, kamszepam, chlordiazepoxid, clobazam,chlorazopová kyselina, klonazepam, klotiazepam, kloxazolam,delorazepam, diazepam, estazolam, ethylloflezepát, fludiaze-pam, flunitrazepam, flurazepam, flutazolam, halazepam, halo-xazolam, ketazolam, loprazolam, lorazepam, lormetazepam, oxazepam, oxazolam, pinazepam, prazepam, temazepam, tetrazepam,tofisopam, triazolom; sexuální hormony například ethinyloes-tradiol, levonorgestrel, FSH, xH, xTH, estradiol-17-beta, pro-gesteron, norethindpon, testosteron; sympathomimetika, napřík-lad efedrin, epineřrin, fenylefrin, xylometazolin, tramazolin,dopamin, dobutamin; hormony štítná žlázy a jejich deriváty,jako například kalcitoniny a jejich syntetické modifikace;uklidňovací prostředky, například alprazolam, bromazepam,brotizolam, kamazepam, chlordiazepeoxid, klobszam, chlora-zepová kyselina, klonazepam, klothiazepam, kloxazolam, de-lorazepam, diazepam, estazolam, ethylloflezepát, fludiazepam,flunitrazepam, flurazepam, flutazolam, hlazep&m, haloxazolam,ketazolam, loprazolam, lorazepam, lormetazepam, medazepam,midezolam, nimetazepam, nitrazepam, nordiazepam, oxazepam,oxazolam, pinazepam, prazepam, temazepam, tetrazepam, tofi-sopam, triazolam; vakciny například vakciny AIDS, virus in-fluenza, virus parainfluenza, measoles, polio, thinovirustyp respirační virus syncytiální; vasokonstriktory na-příklad fenylefrinhydrochlorid, tetrahydrozolinhydrochlorid,nafazolinnitrát, oxymetazolinhydrochlorid, tramazolinhydro- chlorid; vasodilatátory například nitroglycerin, papaverinhyd-rochlorid, látka P, VOP /vasoaktivní intestinální peptid/; vi-taminy například vitamin-B^, kyselina folova a nikotinamid.

Prostředek podle vynálezu obsahuje podle výhodného prove-dení biologicky účinnou látku ze souboru zahrnujícího adre-nální hormony, kortikosteroidy a jejich deriváty, aminoky-seliny, anorektika, antibiotika, antialeggické látky, anti-cholinergické látky, antidepresanty, antidoty, antiepilepti-ka, antihistaminika a histaminika, antihypersensiva, protizá-nětlivá činidla /enzymatická, nesteroidální a steroidální/,antineoleptická činidla, antiseptika, protinádorová činidla,prostředky proti kašli /astmatická činidla/ antivirální a pro-tirakovinová činidla, beta-adrenergická blokovací činidla,krevní faktory, činidla řídící kostní metabolismus, broncho-dilatátory, kardiotonika, kardiovaskulátorové hormony, drogy ajejich deriváty, chemoterapeutická činidla, CNS-stimulanty,kortikosteroidy, diagnostické drogy, dopaminergická činidla, enzymy, fibrinalytika, GABA antagonisty, gastrointestinální hor-mony a jejich deriváty, glutamátové antagonisty, glycinové an-tagonisty, hypothalmové hormony a jejich deriváty, hypotensi-va, lokální anestetika, látky k ošetřování migrémy, narkotika,antagonisty a analgetika, hormony pankreatu a jejich deriváty,parasympathomimetika, parasympatholytiká, hormony slizovýchžláz a jejich deriváty, prostaglandiny, sedativa, sexuální hormony, spasmolytika, sympethomimetika, hormony štítné žlázy ajejich deriváty, uklidňovací prostředky, vakciny, vasokon-striktory, vasodilatátory a vitaminy.

Podle jiného výhodného provedení vynálezu obsahuje pro-středek podle vynálezu alespoň jednu biologicky účinnou látkuvolenou ze souboru peptidů, které se stravují ve střevnímtraktu.

Podle jiného velmi výhodného provedení vynálezu je oio- logicky účinná látka volena ze souboru zahrnujícího koagulační faktory, jako faktor VII, faktor VIII, faktor IX a jejich de- riváty a analogy; činidla, řídící metabolismus v kostech, 10 napříklsdvvitamin D-^, aktivní vitamin D^, kalcitonin a jejichderiváty & analogy; hormony vylučované hypothalamem například.l,HRH nebo jeho analogy, například nefarelin, buserelin neboZolidex, enkefaliny jako DADLE nekefamid nebo leucinenkefalin,a TRH a jejich analogy & deriváty; hormony vylučované pankreagnapříklad insulin nebo glukagon a jejich deriváty a analogy;hormony vylučovanépodvěskem mozkový rn., například růstový hormon,vasopressin nebo oxytocin a jejich deriváty a analogy, na-příklad DDAVP nebo lypressin; sexuální hormony například ethi-nylestradiol, levonorgestrol, FSH, LH, j_TH estradiol-17 ,progesteron, norethindron nebo testoteron & jeho deriváty a a-nalogy; a uklidňovací prostředky například alprazolam, brom-azepam, brotizolam, kemazepam, chlordiazepeoxid, klobazam,chlorazepová kyselina, klonezepam, klotiazepam, kloxazolam,delorazepem, diazepam, estazolam, ethylloflazepát, fludiazepsqi,flunitrazepam, flurazepam, flutazolam, halazepam, haloxazolam,ketazolam, loprazolam, lorazepam, lormetazepam, medazepam,midazolam, nimetazepam, nitrazepam, nordiazepam, oxazepam, o-xazolam, pinezepam, prazepam, temazepam, tetrazepam, tofiso-pam nebo triazolam a jejich soli a deriváty a analogy.

Podle jiného výhodného provedení vynálezu je biologickyúčinná látka volena ze souboru zahrnujícího koagulační fakto-ry jako faktor Vil, faktor VIII, faktor IX a jejich deriváty aanalogy; činidla řídící metabolismus v kostech, jako je na-příklad kalcitonin a jeho deriváty a analogy; hormony vylučo-vané hypothelmem, například LHRH nebo jeho analogy, napříkladnafarelin, buserelin nebo Zolidex, enkefaliny, například RADLE,metkefamid nebo leucinenkefalin; hormony, vylučované pankreas,například insulin nebo glukagon a jejich deriváty a analogy;hormony vylučované hypofyzou, jako růstový hormon, vasopressinnebo oxytocin a jejich deriváty a analogy, například SSAVP ne-bo lypressin; sexuální hormony například FSH, LH nebo LTH ajejich deriváty a analogy.

Prostředek podle vynálezu má zvláštní význam, při podává-ní účinné látky, kterou je biologicky účinný peptid, který sevstřebává v gastrointestinálním traktu, jako je insulin, glu- - 11 kagen, růstový hormon nebo jako jsou růstové faktory podobnéinsulinu nebo jejich deriváty nebe analogy.

Podle dalšího velmi výhodného provedení vynálezu je účin-nou látkou pankreatický polypeptidový hormon, například gluka-gen nebo jeho derivát nebo analog.

Podle opět jiného velmi výhodného provedení vynálezu jeúčinná látka ze souboru zahrnujícího antiepileptika, spasmoly-tika a uklidňovaní prostředky ze souboru zahrnujícího benzodi-azepiny, například klonazepam, diazepam, flunitrazepam, tria-zolam, lorazepam, nitrazepam nebo jejich směsi. Účinná látka má být obsažena v množství hmotnostně 0,0001až 50 %, vztaženo na prostředek jako celek, s výhodou ve hmot*-nostním množství 0,001 až 20 %, například v případě benzodia-zepinů.

Farmaceutický prostředek podle vynálezu může dále obsaho-vat kyselinu dusičnou a/nebo dusičnan v koncentraci hmotnostně0,0001 až 5 %· Takováto složka může působit jako stabilizátorpro účinnou látku, jako je klonazepam.

Podle vynálezu mohou farmaceutické prostředky přídavněobsahovat jednu nebo několik sloučenin ze souboru zahrnujícíhopovrchově aktivní činidla, promotory absorpce, polymery absor-bující vodu, mikrokuličky, oleje, emulze, liposomy, látky in-hibující enzymatický rozklad, alkoholy, organická rozpouštěd-la, vodu, hydrofobní činidla, činidla řídící hodnotu pH, kon-servační přísady a činidla řídící osmotický tlak, cyklodex-triny a hnací prostředky nebo směsi uvedených látek. S výhodou je vodu absorbujícím polymerem polyethylen-glykol o střední molekulové hmotnosti 2C0 až 7500 nebo propy-lenglykol nebo jejich směsi.

Podle výhodného provedení vynálezu obsahuje farmaceutic-ký prostředek více než 50 % /hmotnost/hmotnost/ polyethylen-glykolu o střední molekulové hmotnosti 200 až 1000 a/nebo pro—pylenglykol nebo jejich směs.

Vynález se také týká způsobu ošetřování savců biologicky 12

účinnou látkou, přičemž se biologicky účinná látka nanáší nasliznicovou membránu savců spolu s jednou nebo s několika látkami ze souboru zahrnujícího n-glykofuroly obecného vzorce I

CHg/CCí^CHg/^-OH /1/ L_ 0 kde znamená n 1 až 8 a n-ethylenglykoly obecného vzorce IIH/OCÍ^CI^/pOH /11/ kde znamená p a1 až 14·

Vynález se také týká použití farmaceutického prostředkuobsahujícího biologicky účinnou látku a jednu nebo několik látek ze souboru zahrnujícího n-glykofuroly obecného vzorce I

C^/OCI^C^^-CH /1/

kde znamená n 1 až 8 a n-ethylenglykoly obecného vzorce II H/CCI^CÍ^/pOH /11/ kde znamená p 1 až 14 pro aplikaci na sliznicovou membránu.

Sliznicovou membránou, na kterou se farmaceutický pro-středek podle vynálezu nanáší, může být jakákoliv sliznicovámembrána savců, na kterou se nanáší biologicky účinná látka,například, nosní, poševní, oční, ústní, genitálního traktu,plicní, gastrointestinálního traktu nebo rektální, s výhodouvšak nosní, vaginální a ústní. farmaceutické prostředky podle vynálezu se mohou podávatve formě kosočtverečků, které se vkládají do úst nebo ve for-mě pastilek pod jazyk nebo ve formě ústních nebo nosních sprejů jakožto roztoky, suspenze nebo prášky, popřípadě s různý-mi látkami podporujícími absorpci nebo především ve formě - 13 mírně viskozních roztoků, které jsou bioadhesivní nebo popřípa- dě ve formě čípků do pochvy.

Podle výhodného provedení se prostředky podle vynálezunanášejí na nosní sliznici.

Vynález se rovněž týká způsobu výroby farmaceutickéhoprostředku pro podávání biologicky účinné látky prostřednictvímsliznicové membrány savcům, který obsahuje jednu nebo několiklátek ze souboru zahrnujícího n-glykofuroly obecného vzorce I

C^/OCHgCHg/ -OH /1/

kde znamená n 1 až 8 a n-ethylenglykoly obecného vzorce II H/CCH^CK^/pOH Z11/ kde znamená pí až 14, přičemž je biologicky účinná látkarozpuštěna v připraveném nosiči, obsahujícím část nebo všech-ny zbylé složky farmaceutického prostředku. Způsob se může pro-vádět za využití ultrazvuku ε/neco při zvýšené teplotě. 3 vý-hodou se rozpouštění provádí za zvýšené teploty za zahřívánína 30 až 100 °C, přičemž se bere zřetel na tepelnou citlivostúčinné látky. Pro velmi citlivé účinné látky, jako jsou napřík-lad lidské růstové hormony, se využívá pouze mírného míchánínebo prctřepávání.

Vynález se také týká systému pro řízené uvolňování přiintranasální aplikaci, který obsahuje nevcdný nosič, který- jebickompatibilní se sliznici a který je schopen rozpouštět po-žadované množství biologicky účinných látek v malých ob^emecn.

Vynález se dále ještě týká použití jedné nebo několikalátek ze souboru zahrnujícího n-glykofuroly obecného vzorce I

D

Ct^/CCK^^/n-0H /1/ - 14 kde znamená n 1 až 8 a n-ethylenglykoly obecného vzorce li H/CCHOCHO/ CH /11/ á á n kde zanemná p 1 až 14 pro farmaceutické prostředky pro podá-vání biologicky účinných látek savcům prostřednictvím nosnímembrány.

Podle thhotc hlediska vynálezu je výhodné připravovatfarmaceutické prostředky pro systémové podávání prostřednic-tvím sliznice nosní, ústní nebo poševní a především prostřed-nictvím sliznice nosní. n-Glykofuranoly obecného vzorce I se považují za farma-ceuticky vhodný nosič zvláště za farmaceuticky vhodný nosičprostředků pro nasální podání. n-Glykofuroly obecného vzorceIjjsou považovány za nosiče, které usnadňují přijímání biolo-gicky účinné látky sliznicovou membránou, savců, zvláště nosnísliznicí. Ře šení podle vynálezu umožňuje normalizovat napříkladhladinu glukosy v krvi u jedinců, kteří trpí abnormalitamiv metabolismu cukrů, jako je hypoglykemie nebo hyperglykemie,dodáváním glukagenu nebo insulinu nebo jejich analogu nebo de·rivátu velmi snadným a spolehlivým způsobem.

Kromě toho řešeni podle vynálezu umožňuje velmi vhodnépodávání prostředků řídících metabolismus kostí, jako vitami-nu nebo kalcitoninu a jejich derivátů a analogů; hormonů,vylučovaných hypothalmem, jako je LHRH například nafarelinu,buserelinu nebo zolidexu a jejich derivátů a analogů; hormonůregulujících růst nebo mitogenní růstové faktory, jako jsounapříklad sómatropin, IGF-1, IGD-2, FGF, PDGF, EGF a jejichanalogů a derivátů; proteasových inhibitorů, například apro-tinincitrátu nebo ci -antitrypsinových derivátů a ^e^ich ana-logů; a cytochoninů, například IL-1 a Ll-2 k normalizeci je-jich hladiny v krvi v případě jejich nedostatku.

Obzvláště výhodným v nosiči podle vynálezu je glykofu-rol 75 /GF/, který se uvádí jakc obecně dostupná rozpouštědla - 15 polymerů shora uvedeného obecného vzorce I, kde n znamená hlav-ně 1 nebo 2 /Chemical Abstracts, registrace číslo /""2004 76-61 7/.Glykofurol 75 je bezbarvá kapalina mísitelná s vodou, s alkoho-ly, například s methanclem, ethanolem, n-prcppnolem, gylcero-lem a s různými oleji ve všech dílech a má teplotu tání přib-ližně 155 °C. GP údajně způsobuje podráždění při použití v pro-středcích pro parenterální podání v nezředěné formě, jak uvádějíSpiegel a Nosewothy /"Use of nenaqueous solvents in parenteralproducts" Použití nevodných rozpouštědel v parenterálních pro-středcích, Journal of Fharmaceutical Sciences, říjen, 1963, sva-zek 52, číslo 10, str. 907 až 927/. Bylo také publikováno, žeje netoxický a nedráždivý při zředění vodou /Spiegelberg a kol./"Ein neues injizierbares Lflsungsmittel /glycofurol/", Nové,vstřikovatelné rozpouštědlo /glykofurol/, Arzneimittelforschung, 6, str. 75 aý 77/.

Jakožto n-polyethylenglykoly, používané podle vynálezu, sepříkladně uvádějí monoethylenglykol /1EG/, diethylenglykol /2EG/,triethylenglykol /3 EG/, tetraethylenglykol /4EG/, pentaethylen-glykol /5EG/, hexaethylenglykol /6EG/, heptaethylenglykol /7EG/,oktaethylenglykol /8EG/, nonaethylenglykol /9EG/, dekaethylen-glykol /10EG/, undekaethylenglykol /11EG/, dcdekaethylenglykol/12EG/, tridekaethylenglykol /13SG/ a tetradekaethylenglykol./17EG/. Ethylenglykolů se může používat ve formě jednotlivésloučeniny nebo ve formě směsi dvou nebo několika n-ethylengly-kolů, například obchodních produktů, jako je polyethylenglykol200 /PEG 200/ nebo polyethylenglykol 400 /PEG 400/.

Polyethylenglykoly 1 EG až 14^G jsou bezbarvé kapaliny mí-sitelné s vodou a s alkoholy ve všech podílech. PEG 200 je ob-chodně dostupná směs ethylenglykolů o střední molekulové hmot-nosti. přibližně 200. Složení je uvedeno v následující tabulce I:

Tabulka 1: složení PEG 200 monoethylenglykol 0,1 Ediethylenglykol 3,4- etriethylenglykol 21,2 %tetraethylenglykol 31,2 % - 16 penteethylenglykcl 24,4 / hexaethylenglykol 14, o ;’á heptaethylenglykol 5,4 % oktaethylenglykol _0 ,3 % 100,0 % n-Fthylenglykoly a glykofuroly jsou dostupné v různých kvalitáchObzvláště výhodné jsou vysoce čisté produkty, jako je napřík-lad 43G společnosti Fluka-Chemie AG /Buchs, švýcarsko, číslo8666ο, 1590/, označovaný jako 4SGf.

Uvolňovací systém podle vynálezu může být optimalizovánnapříklad se zřetelem na biopřilnavost, rozprašovatelnost neboviskozitu. Například GF v koncentraci toliko 5% má překvapivěkladné působení na stříkatelnost například 43Gf snížením visko-zity. kromě toho přísada 5 % GF je schopna snižovat teplotutuhnutí z -10 na méně než -20 °G nebo na 20 °C. To je důležitév takových případech, kdy osoba nosí prostředek u sebe, aby bylstále připraven k použití.

Farmaceutického prostředku podle vynálezu se může používatk ošetřování, domácích zvířat nebo s výhodou lidí.

Speciální výhodou použití nosičového systému podle vyná-lezu je například vysoká lipofilicita látky, takže se můžebenzodiazepi^i, jakož také ve vodě rozpustné látky, napříkladpeptidy a bílkoviny, jako pankreatické hormony solubilizovatv klinicky odpovídajícím množství pro lidi, například jižv 25 až 300 /Ul nosiče. Ve vodných roztocích klinicky odpovída-jících dávek diazepamu a klonazepamu je rozpuštěna v přibliž-ně 5CCC^a více než 10 ml.

Nosičového systému podle vynálezu se může používat vesměsi s různými korozpouštědly, jako je rostlinný olej napřík-lad iíiglyol 840 /Dynamit Nobel Chemie, Troisdorf, Německo/,nebo popřípadě hydrogenovaný nebo ethoxylovaný ricinový olej, v který s překvapením zvyšuje možnosti ovlivnit řízené uvolno- v vání prostředku, například diazepamu, čímž se vyloučí píkova koncentrace v plasmě. 17

Irostředek podle vynálezu může obsahovat přídavné ex&pientyjfko například: povrchově aktivní činidá^, promotéry absorpces hydrofilně lypofilní rovnováhou přibližně 6 až 26, anionto-va a neiontová povrchově aktivní činidla včetně polvoxyethylen-alkohcletherů, žlučové soli a jejich deriváty, fusidovou kyse-linu a její deriváty, kyselinu olejovou, lecithin, lysolecithinnebo l«een 20 až 85; vodu absorpbující polymery, napříkladpolyethylenglykol 2C0 až 7500, polyvinylpyrrolidon, propylen-glykol nebo polyakrylovou kyselinu, želatinu, celulózu a jejíderiváty; látky, které inhibují odbourání enzymů, jako je na-příklad citrát nebo aprotinin; alkoholy, například ethanol,glycerol nebo benzylalkohol; organická rozpouštědla, napříkladethylacetát nebo benzylalkohol; hydrofobní činidla napříkladrostlinný olej jako sojový olej, podzemnicový olej, kokosový o-lej, kukuřičný olej, olivový olej, slunečnicový olej, ricinovýolej, Miglyol 810/812/840 nebo jejich směs; činidla upravují-cí hodnotu pH, jako je například kyselina dusičná, fosforečná,nebo octová, citrát; konservační přísady a prostředky pro ří-zení osmotického tlaku, například glycerol, chlorid sodný,methylpraoxybenzoát nebo kyselina benzoová; práškové látky na-příklad ct # - a y-c yklodextriny, celulóza a její deriváty;mikrokuličky, liposomy a emulzní hmoty například škrob, albu-min, želatina nebo lecitiny nebo lysolecitiny; mikropDuzdrovéprostředky; hnací plyny jako butan; voda. Použití alkoholůnebo hnacích prostředků není v prostředcích podle vynálezunezbytné. •Vynález blíže objasňují připojené obrázky: na obr. 1 jegraf znázorňující nejvyšší koncentraci v plasmě clonazepamupo intravenozním podání a při intranasálním podání prostřekupodle vynálezu; na obr. 2 je blokový diagram střední doby odez-vy jako funkce oosahů glykofurolu v prostředku podle vynálezu;na obr. 3 je grafické znázornění hladiny glukosy v krvi popodání insulinu při způsobu podle vynálezu; na obr. 4 jegraf hladiny glukosy v krvi po podání glukagonu podle vy-nálezu; na obr. 5 je graf koncentrace clonazepamu v plasměpo podání prostředku obsahujícího různé ethylenglykolové 18 složky; na obr. 6 je graf střední hladiny diazepamu v krvi popodání prostředků obsahujících glykofurol a různá korozpouštěd-la; na obr. 7 je graf vlivu různých složek glykofurolu v pro-středcích podle vynále-au; na obr. 8 je graf porovnávající hla-dinu flunitrazepamu v krvi po podání intravenosním a intrana-sálním podle vynálezu; na obr. 9 je graf porovnávající hladinuplasm^lonazepamu po podání intravenosním a intranasálním podlevynálezu; na obr. 10 je graf ukazující stabilitu klonazepamuv různých pojidlech; na obr. 11 je graf porovnávající koncen-traci estrogenu v plasmě po intravenosním podání a po intrana-sálním podání podle vynálezu a na obr. 12 je graf porovnávají-cí koncentraci esterogenu v plasmě po intravenosním podání apo intranasálním podání estrogenu podle vynálezu.

Vynález také podrobně objasňují příklady praktického pro-vedení, které však vynález nijak neomezují. Příklady provedení vynálezu Příklad 1

Studium toxicity a přijatelnosti posičů podle vynálezu Při toxikologickém hodnocení nosiče je třeba posuzovatmístní 8 také systemické působení po absorpci. Jakožto ex-cipřentu použito GF a PEI 400 ve vstřikovacích prostředcích,kde je podávané množství větší než 300 /til na dávku, což převy-šuje množství podávané intranasálně za použití prostředku po-dle vynálezu. Výsledky lokální toxicity pro nEG a GF po intranasálnímpodání nejsou v literatuře dostupné. Proto se prováděly pří-slušné zkoušky místní toxicity 30 až 100 /Ul na nosní sliznicikrálíků. Při těchto zkouškách se také benzodiazepiny rozpouš-těly v různých rozpouštědlových systémech podle vynálezu a30 /Ul prostředku se podávalo denně po 14 dní na nosní sliznicikrálíků. Posuzovalo se pět provedených zkoušek tekto podanýchprostředků, přičemž výsledky včetně kontrolní zkoušky jsou u-vedeny v tabulce II: - 19 -

1'abulka II

Posouzení místní toxicity benzodiazepinového prostředku podle vynálezu. Živočich J-'evá nosní dírka počet/poh- laví Skupina Zkoušený materiál Doba/dny 1 m 2 1 3 kontrolní 30 /Ul fysiclo-£icxéko rozteku 1 7 8 o s 10 11 12 m /Ul D v PEG 1 f 2 30 13 m 14 15 3 30 /Ul 1 v PEG 1 16 f 17 18 19 m 20 21 4 30 yUl F v PEG 1 22 f 23 24

<ÍO 27 5 30 /Ul F v PEG + GF 1 28 f 29 30

Zkratky: m = sameček, f = samička, D = diazepam, 3 λ, i- = lorazepam 5 G, F = flunitrazepam 1 1, PEG = polyethylen- /-1 .· glykol 2oo, GF = glykofuroi 75, PEG + GF - 7o E PEG + 30 1 GFTgbulka II /pokračování

Posouzení místní toxicity nosičů prostředků podle vynálezu Živočich. .pravá nosní dírka počet/po- hlaví12

Skupina Zkoušený materiál doba/dny 3 4 5 6 f Á kontrolní 1 00 yUlroztoku fysiologického 3 7 m B 30 /ul PEG 1 S C 100/Ul PEG 1 9 D 100 /Ul PEG 3 10 £ Ξ 30 /Ul PEG + GF 1 11 F 100 yUl PEG + GF 1 12 G , .1,0,0 ya.1. PEG + GF 3 13 m B 30 yUl PEG 1 14 C 100 /Ul PEG 1 15 D 100 yUl PEG 3 16 £ E 30 yUl PEG + GF 1 17 F 100 /Ul PEG + GF 1 18 G 1 00 zul PEG + GF- 3

τ £Ft £F f 19 ni E 30 /ul PEG 20 F 1 00 /UI PEG 21 G 100 >1 PEG 22 £ B 30 PEG 23 C 1 oo PE'G 24 2 ,—JLLQ- . alL, 1 1 3 1 1 -3 25 m E 30 z /Ul PEG 6 i“ 1 26 F 100 /U1 PEG - £/- 1 27 G 100 /Ul PEG 3 28 f B 30 PEG 1 29 C' 100 /ul PEG 1 30 D 1 00 /ul PEG 3 21

Zkratky: m - sameček, f - samička, A - kontrola, PEG - poly-ethylenglykol 200, GP - glykofurol 75, PEG GP z 70 $ PEG +50 % GP

Nosní dutina se zkouší histologicky a zjištěny jen mír-né zánětlivé změny po podání prostředků podle vynálezu. Ne-byla zjištěna žádnájasná odezva na dávku při zvyšující se dáv-ce a nebyl zjištěn žádný rozdíl mezi 100$ PEG-200 a 70 $ PEG—200 a 50 $ GP. Zjištěnh, že pojidla podle vynálezu ma-jí pouze mírné nepříznivé toxické působení.

Zjišťována snášenlivost dvou zkoušených, nosičů obsahují-cích tetráethylenglykol /4EGf/ a popřípadě 5 $ glykofurolu/GP/ po intranasální aplikaci devíti zdravým dobrovolníkůma provedeno porovnání pomocí slepých zkoušek s nosiči obchod- •p nich názvů Locilan /Astra-Syntex Scandinavia AB, Sodertálje,Švédsko/. Jako kontrolního roztoku použito solanky /roztok0,9 $ chloridu sodného/.

Solanka a nosič, kterým je obchouní produkt, se snášejívelmi dobře. Oba nosiče obsahující tetráethylenglykol vyka-zují s překvapením pouze mírnou dráždivost bezprostředně povnesení. Symptomy jsou krátkodobě obtěžující, toto středněobtěžující působení trvá 10 minut po nanesení. Při nasoskopii50 minut po aplikaci nejsou pozorovány žádné klinické sympto-my. Při uvažování všech uvedených skutečností se zjišťuje,že 4EGf obsahující nosič, obsahující popřípadě 5 $ GP jepřijatelný pro podávání důležitých biologicky účinných lá- tek příležitostně používaných a že je výhodný pro intranasálnípodání v případě nosičů pro intravenosní podávání.

Podrobnosti a výsledky zkoušek jsou dále uvedeny:

Studium vhodnosti npšičů„poule vynálezu pro lidi

Zkoušce se poarobilo 9 zdravých dobrovolníků. Žádný z nich netrpěl karuiatickým, hepatickým nebo nefrologickým onemocněním a všichni byli zdrávi. 22 Žádná z osob netrpěla pulmonárním nebo respiračním one-mocněním a v posledních dvou. týdnech neprodělala nachalzení.Vitální projevy /krevní tlak a puls/ u všech osob byly nor-mální. Lva týdny před zkouškou se provedly standardní bioche-mické a hematologické zkoušky, kromě dvou osob vykazovalyvšichni klinické chemické hodnoty v rámci normálu. Osobyčíslo 4 a 5 vykazovaly alaninaminotransferasu /óPGřT/ nad nor-mální hodnotou, tato skutečnost byla však posuzována jako bezklinického významu.

Postup zkoušky.- Provádí se dvojice slepých zkoušek setřemi zkoušenými nosiči a kontrolní zkouška /se solankou/ atři stejná sezení vždy s 24 hodinami mezi každým sezením. V průběhu každého sezení se vnáší kontrolní nosič dopravé nosní dírky 5 minut před vnesením zkoušeného nosiče dolevé nosní dírky.Osoby zapisují do dotazníku každou potíž ne-bo podráždění, které pozorují 0 až 1 minuta po aplikaci a 10až 30 minut po aplikaci zkušebního nosiče. Při zaznamenání ja-kýchkoliv symptomů je uvedena závažnost a charakterizace ta-kových symptomů. Před aplikací nosiče a 30 minut po jeho aplikaci se naso*-.skopií zkoumá nosní sliznice obou nosních dírek.

Nosiče.- Zkouší se čtyři nosiče, přičemž jedním je so-lanka a používá se jí jako negativní kontroly. Lalší tři no-siče jsou dva zkoušené podle vynálezu /nosič A a B/ a jako"pozitivní kontrola" slouží velmi dobře snášený obchodní no-sič Locilan^ /íiielsen a kol., 1989/.

Zařízení.— Pro aplikaci se používá Pfeifferova čerpad-la /model 6917.3902/3790.0129/ uvolňujícího jednotkovou dáv-ku 50 /úl. Lávkování.- .Nosiče se aplikují umístěním stříkací jed-notky Pfeifferova čerpadla do levé /nebo do pravé/ nosní dír-ky přičemž se na čerpadlo působí tak, aby celková dávka by-la 100 yUl. klinické vyšetření·— Při klinickém vyšetření nosní tkáně nezjištěno žádnésiče. TJ tří osobaplikaci nosiče;a v případě dvou klinicky významné působení aplikovaného no-zjištěno mírné místní podráždění 30 minut pou jedné osoby jakožto nosiče použito solankyosob použito nosiče B.

Chování jednotlivých osob ke zkoušeným nosičům /tabulka 3 až5/·- Závažnost podráždění /symptomů/ v nosní dírce 0 až 1 m-inntu, 10 minut a 30 minut po aplikaci zkoušeného pojidla jsoushrnuty v tabulce 3, 4 a 5· Osoby uvádějí, že nosiče na bázitetraethylenglykolu obsahující popřípadě glykofurol se ménědobře snášejí než solanka nosiče Locilan . Avšak symptomyzpůsobené 4EGf obsahujícím nosičem jsou poměrně krátkodoběobtěžující a jsou považovány za přijatelné, jelikož biologic-ky účinné látky jsou důležité pro zdraví jedince.

tabulka III

Snášení 0 až 1 minutu po aplikaci, jak se uvádí v dotazníku;počet osob vykazujících symptomy a jejich závažnost Závažnost Kontrolní Nosič podráždění , /prává nos-ní dírka/ A B C žádné podráždění 25 1 0 6 středně přijatelné 2 5 3 3 mírně závažné 0 3 6 0 nepřijatelné 0 0 0 0 A 4EGf nosič B 5 / GE v 4EGf 0 Locilan11 kontrola /pravá nosní dírka/ solanka Tabulka IV Snášení 10 minut po aplikaci, jak se uvádí v dotazníku, počet osob vykazujících symptomy a jejich závažnost Závažnost podráždění žádné podrážděnístředně přijatelnémírně závažné

Koltrola/pravá nos-ní dírka/ 27 0 0

Nosič ABC5 5 7 4 4 2 0 0 0 nepřijatelné 0 0 0 0 - 24 - A 4EGf nosič B 5 % GP v 4EGf C Locilan kontrola /pravá nosní dírka/ solanka

Tabulka V

Snášení 50 minut po aplikaci, jak se uvádí v dotazníku; /počet osob vykazujících symptomy a jejich závažnost Závažnost podráždění žádné podrážděnístředně přijatelnémírně závažnénepřijatelné

ABC kontrola

Nosič A 4 EGf 5 GP v 4EGf s

Locilan/pravá nosní

Kontrola/pravá nos~ní dírka/ 27 0 0 0 dírka/ solanka

Nosič

A B 8 7 1 2 0 0 0 0

C 8 1 0 o 4 EGf nosič I tetraethylenglykol puriss p.a.koncentrovaná kyselina dusičná p.a. II tetraethylenglykol puriss p.a.

roztok I /přibližně 50 kapek/ do pH 25 ml1 kapka 25 ml3,8

Směsi I se použije k nastavení hodnoty pH směsi II zapoužití pH elektrody pro viskozní kapaliny /Sadiometer GK2711/. Do Pfeifferova multidispensoru se vnese 2 až 10 mlnosiče II /nosič A/ /Pfeiffer rozprašovač 6917.59Ο2/579Ο.0129/.

Nosič 3 5 / GP v 4 EGf nosiči I tetraethylenglykol puriss p.a. 25 ml koncentrovaná kyselina ausicná p.a. 1 kapka tetraethylenglykol puriss p.a. 25 ml roztok I /přibližně 50 kapek/ do hodnoty pH 5,8

II - 25 -

III Roztok II glykofurol 75 purises 25,75 ml1,25 ml

Směsi I se použije k nastavení hodnoty pH směsi II zapoužití pH elektrody pro viskozní kapaliny /Radiometer GK2711/· Pak se připraví směs III /nosič B/. Do Pfeifferovamultiuispensoru se vnese 2 až 10 ml nosiče /Pfeiffer rozpra·šovač 6917.5902/5790.0129/.

Nosič 0

Lokilan^ propylenglykol, PhEur.III 2,00 g

Polyethylenglykol 400, Ph.Nord.65 II 20,00 g

Tween 20, Ph.Eur III 2,50 g

Benzalconiumchlorid, BBS 86 70,00 mg dvojsodná EBTA, Ph. Eur. 2.vyd. 1985 10,00 mg butylovaný hydroxytoluen, Ph.Nord 65 II, Add. 10,00 mg kyseliny citrónová, Ph. Eur. III 3uppK;77 5,00 mg citrát sodný, 2 H^Q Ph Eur. III 7,65 mg sorbitol BAR 65 2,86 g čištěná voda, Ph Eur. 2. vyd. 1981 100,00 g Příklad 2

Rozpustí se 10 mg clonazepamu ve 2 ml nosiče B /vizpříklad 1/ za použití ultrazvuku,čímž se dosáhne koncentra-ce clonazepamu 5 mg/ml.- Vn®se se 50 /ul tohoto prostředkudo každé nosní .dírky samečku králíka druhu New Zealand Whi-te, drženého v poloze na znak po dobu podání a 1 manutu popodání. Pro podání se použije pipety Eppendorph. Odeberouse vzorky krve z ušních cév 0, 2, 5, 10, 15, 50 a 60 minutpo pouání a chromatografií HPLO se stanovuje koncentraceclonazepamu.

Na obr. 1 je střední koncentrace clonazepamu, zjištěná po jeho podání. Je ukázána také koncentrace v plasmě po i.v vstřiknutí do ušní cévy téže dávky /0,5 mg clonazepamu ve - 26 p formě Rivotrilu , vstřiknutého v průběhu půl minuty. Z obr.je zřejmé, že koncentrace plasmy po intranasálním podání jepřibližně stejná nebo dokonce vyšší za přibližně 2 minutynež v případě i.v. vstřiknutí. Příklad 3

řarmakodynamická odezva podporovaná GF řarmakodynamická odezva se zkouší na příkladě novozéland-ských bílých králíků po podání 50 yul 2,5 mg clonazepamu v mlnosiče do každé nosní dírky sedícího králíka. Nosič je tvořen0, 10, 20, 30, 70 a 100 % glykofuroll^75 /Roche, Šarže číslo706127/, přidaného do tetraethylenglykolu /Merck, druh 808619/.Clonazepam se rozpustí působením ultrazvuku.

Na obr. 2 je střední doba odezvy /králík může být v le-žící poloze se zadními packami nataženými na jednu stranu/·Čísla nad sloupky znamenají počet responderů ze čtyř zkouše-ných. žádní respondenti v průběhu 10 minut nebyli započtenive střední hodnotě jako desetiminutoví. Pro intranasální po-dání clonazepamu přibližně 10 % GF v 4EGm vykazuje opti-mální odezvu., zatímco přibližně 30 % GF vykazuje minimálníodezvu. Totéž pozorováno pro hodnoty 30 % GF v SEGf. Příklad 4

Podává se 0,33 mg zinku prostého /monomerního/ lidskéhoτ η^ηΐ inu v 5Q ^ul 12,5 mM fosfátovém pňfru /pH 7,4/ obsahují-cílm 5 % glykofurolu 75 do jedné nosní dírky sedícího novozé-landského bílého králíktu o hmotnosti 3 kg. Odebrány vzorky50 yul krve z okrajové ušní cévy po 0, 15, 30 a 60 a 120 mi-nutách a stanoven obsah glukosy v krvi.

Na obr. 3 se uvádí střední obsah glukosy jakožto pro-cento počáteční hodnoty pro formulaci a pro 0,9% roztok kon-trolní chloridu sodného. Podává se 100 yul téže formulaceavšak bez insulinu do nosní dutiny zdravých dobrovolníků; - 27 - se zřetele» na místní podráždění nevykazuje zkoušená formula-ce ve srovnání s 0,9% roztokem chloridu sodného žádný rozdíl· Příklad 5

Vnáší se 4 mg lidského glukagonu ve 100 ml fosfátovéhopufru /o hodnotě pH 4/, obsahujícího 5 % GF do obou nosníchdírek /do každé 50 yul/ 5 sedících hypoglykaemických novozé-landských bílých králíků o hmotnosti přibližně 3 kg· Prostře-dek se připravuje rozpuštěním glykagonu v 7 mM fosfátovém puf-ru /o hodnotě pH 2,5/, nastavením hodnoty pff na 4,0 0,1 N roz-toka» hydroxidu sodného a konečným přidáním 5 % glykofurolumu75. Králíkům se dodá hypoglykaemic ita subkutanním vstřiknutím83 /Ug insulinu hodinu před zkouškou. Kontinuálně se odebírajívzorky krve z obvodové ušní cévy ke stanovení obsahu glukosyv krvi.

Na obr. 4 jsou uvedeny střední hodnoty koncentrace glu-kosy v krvi jakožto procento počáteční hodnoty po intranasál-ním padání glukagonu. Příklad 6 Řízeni píkové hodnoty, farmakokinetiky

Rozpustí se 10 mg clonazepamu ve 2 ml následujících no-isčů: /1/ 4EGf, /2/ PEG-200 a /3/ 4EGm /společnosti MERCK-Schuchardt/ za použití ultrazvuku. Podává se 50 yUl tohotoprostředku do každé nosní dírky sedícího bílého novozéland-ského králíka použitím Eppendorphovy pipety. Odebírají sepak vzorky krve z obvodové ušní cévy v následujících inter-valech: 0, 2, 5, 10, 15, 30 a 60 minut a koncentrace clona-zepamu se stanovuje HP1C chromatografií.

Na obr. 5 je vyznačena střední koncentrace clonazepamuv pí«smě po intranasálním podání. Po přibližně dvou minutáchje koncentrace v plasmě vyšší pro 4EGf než pro PEG-200 a pro4EGm obsahující prostředky. 28 - Příklad 7 Řízení píkové hodnoty, farmakokinetiky Připraví se prostředek obsahující 3 mg diazepamu ve 100/UÍ nosiče a podá se králíkům podobným způsobem, jako je po-psáno v příkladu 6. Používá se těchto nosičů: /1/ glykofuro-lum 75 /GF/, /2/ Miglyol 840 + GF /7 + 3/ a /3/ rostlinný o-lej + GF /7 + 3/· Fak se odebírají vzorky krve z obvodové uš-ní cévy v následujících intervalech: 0, 5, 10, 15, 30 at-60minut a koncentrace diazepamu se stanovuje chromátografiíHPLC.

Na obr. 6 je střední hodnota koncentrace diazepamu v plas-mě po inranasálním podání. Počáteční píková koncentrace v plasmě se může řídit použitým nosičem GF/olej.Koncentrace v plas-mě pro GF prostředky za 5 minut je přibližně 55 % intravenoz-ního vstřiknutí 3 mg diazepamu ve formě Stesolidu R' /DumexΔ/S, Dánsko/. Příklad 8 Řízení hodnoty píku, úloha GF jako podpůrného činidla Připraví se prostředek obsahující 0,5 mg clonazepamuve 100 /Ul nosiče a podává se králíkům podobným způsobem, ja-ko. je popsáno v příkladu 6. Používá se těchto nosičů: /1/tetraethylenglykol /Merck/ /4EGm/, /2/ 2 % glykofurolu 75/GF/ v 4 EGm, /3/ 5 % GF v 4 EGm, /4/ 10 % GF v 4EGm, /5/ 30 % GF v 4 EGm a /6/ GF. Pak se odebírají vzorky krve z ob-vodové ušní cévy v následujících intervalech: 0, 5, 10, 15, 30 a 60 minut a koncentrace clonazepamu se stanovuje chro-má tografií HPLC.

Na obr. 7 je střední hodnota koncentrace clonazepamuv plasmě po intranasálním podání. Počáteční píková koncen-trace v plasmě se může řídit množstvím GF/4 EGm v prostřed-ku. - 29 - Příklad 9 Připraví se prostředek, obsahující 0,5 mé flunitraze-pamu ve 100 ^ul nosiče a podává se králíkům podobným způsobem,jako je popsáno v příkladu 6. Jakožto nosiče se použije pó-ly ethyl engly kolu 200 /Merck, druh 807483/. Pak se odebírajívzorky krve z obvodové ušní cévy v následujících intervalech:0, 5, 10, 15, 30 a 60 minut a koncentrace flunitrazepamu sestanovuje chromatografií HPLC.

Na obr. 8 jsou střední hodnoty koncentrace flunitrazepa-n mu v plasmě po intranasálním a intravenozním /Rohypnol , Ro-che/ podání 0,5 mg flunitrazepamu. Příklad 10 Připraví se prostředek, obsahující 4 mg midazolamu ve1Q0 /Ul nosiče a podává se králíkům podobným způsobem, jakoje popsáno v příkladu 6. Jakožto nosiče se použije polyethy-lenglykolu 200 /Merck, druh 807483/. Pak se odebírají vzorkykrve z obvodové ušní cévy v následujících intervalech: 0, 5,10, 15, 30 a 60 minut a koncentrace midazolamu se stanovujechromatografií HPLC.

Na obr. 9 jsou uvedeny střední hodnoty koncentrace mi-dazolamu v plasmě po intranasálním a intravenozním /Dormi-

R cum, Roche/ podání 4 mg jnidazolamu. Příklad 11 Výzkum stability K dosažení optimální stability clonazepamu v nosičielupodle.vynálezu, se^provádějí urychlené akouáky, Stabilitaclonazepamu se studuje po dobu jednoho měsíce při teplotě25 a 60 °C, přičemž se za velmi uspokojivé považují hodnotypřibližně 90 % nebo vyšší při teplotě 60 °C. Připravují se následující přostředky, obsahující 5 mg/ml clonazepamu s výjimkou prostředku /1/ obsahujícího - 30 20 mg/ml clonazepamu: prostředek /1/ a /2/ obsahuje jako no-sič. 4 EGf; prostředek /3/ ve srovnání s prostředkem /2/ máhodnotu pH upravenou na 3,5 kyselinou fosforečnou; prostře-dek /4/ ve srovnání s prostředkem /2/ má hodnotu pH upravenouna 3,5 kyselinou citrónovou; prostředek /5/ ve srovnání s prostředkem /2/ obsahuje přísadu 9 % ethanolu; prostředek /6/ve srovnání s prostředkem /2/ má hodnotu pH upravenou na 3,5kyselinou dusičnou /méně něž 0,01 %/; prostředek /7/ ve srov-nání s prostředkem /2/ obsahuje 1 % vody; prostředek /8/ obsahuje propylenglykol /PG/; prostředek /9/ ve srovnání s pro-středkem /8/ má hodnotu pH upravenou na 3,8 0,04% kyselinouoctovou; prostředek /10/ ve srovnání s prostředkem /2/ obsa-huje přísadu ¢,4 % kyseliny octové; prostředek /11/ obsahuje4 EGf + 5 % GF a přidanou kyselinu octovou v množství 0,4 %/hodnota pR přibližně 6/; prostředek /12/ ve srovnání s pro-středkem /11/ obsahuje kyselinu dusičnou do hodnoty pH 2·Prostředek /13/ ve srovnání s prostředkem /11/ obsahuje pří-sadu 3 % benzylalkoholu; prostředek /14/ ve srovnání s pro-středkem /10/ obsahuje přísadu 16 % ethanolu a 3 % benzylal-koholu; prostředek /15/ obsahuje 4 EGf + 5 $ GE a má hodnotupR nastsenou na 3,5 kyselinou dusičnou /méně než 0,01 %/;prostředek./16/ ve srovnání s prostředkem /15/ obsahuje pří-sadu 0,04 % dusičnanu sodného; prostředek /17/ ve srovnánís prostředkem /15/ obsahuje přísadu 5 % ethanolu; prostředek/18/ obsahuje 4 EGf + 5 % GF a hodnotu pH má upravenou na 4,2 kyselinou citrónovou /0,1 %/; prostředek /19/ ve srovná-ní s prostředkem /15/ obsahuje přísadu 2 % benzylalkoholu;prostředek /20/ obsahuje 4 EGf + 5 % GF a přísadu dusičnanusodného v množství P,14 %·

Po dvou a čtyřech týdnech se odebere 100 /Ul vzorkuz nádob a kvantitativně se analyzuje chromatografií HPLC.Koncentrace /a stálost/ vzorku se vypočte na základě výškypíku se zřetelem na clonazepamový standard»

Jak je zřejmé z tabulky VII, pouze kyselina dusičná,dusičnan, ethanol a benzylalkohol zvyšují stálost. Obsah - 31 vody v 4 EGf, GE a PG je přibližně 0,05 %· Překvapivě stabili-ta například v 4 EGf se nesnižuje přidáním 1 % vody. Dálestabilita prostředků při teplotě 25 °C je stejná pro prostřed-ky, uchovávané v ampulích /pod dusíkem/ a v 10 ml Pfeiffe-ravě čerpadle /model 6917.5902/3790,0129/.

Na obr. 10 je diagram stability clonazepamu v různých no-sičích.

Tabfclka VII

Stabilita clonazepamu při teplotě 25 °θ a 60 °C v různých no-sičích;; % stálosti po 2 a 4 týdnech

Prostředek Dva týdny Čtyři týdny číslo amp. /-vzduch/ Spraybott. amp.-vzduch/Spraybott 25 °C 60 °C 25 °C 25 °C 60 °C 25 1. 4 EGf 20mg/ml 98 91 100 82 73 87 2. 4 EGf 5mg/ml 98 82 96 83 61 84 3- 4 EGf pH 3,5/fosfát/ 98 79 100 84 62 85 4. 4 EGf pH 3,5/kys.štavelová/ 95 43 95 81 18 82 5. 4 EGf ethanol 9 % 100 90 99 85 71 90 6.. 4 EGf pH 3,8/kys. dusičná/ 98 88 97 95 87 95 7. 4 EGfvoda, 1 % 94 83 94 89 71 94 8. PG 96 69 99 96 56 92 9. PG pH 3,8/kys. octová/ 100 99 103 93 95 97 10 . 4 EGf + 0,4 %kyseliny octové 102 84 102 99 67 102

Kondentrace: prostředek č. 1 přibližně 20 mg C/ml prostředek číslo 2 až 10 přibližně 5 mg C/ml - 32 -

Tabulka VII /pokračování/

Stabilita clonazepamu při teplotě 25 °G a 60 °C v různých no sičíc-h;. % stálosti po 2 a 4 týdnech

Prostředek. Dva týdny čtyři týdny číslo amp./-vzduch/Spraybott. aap./-vzduch/Spraybott 25 °G 60 °C 25 °C 25 °C 60 °C 25 °C 11 · 4 EGf+5 % GE, 0,4 %kys.octové 101 80 100 98 63 99 12» =6.11 , pfi 2/kys.dusičná/ 98 86 97 81 13· =č.11 + 3 %benzyl-QE 103 85 102 99 76 96 14· =č. 10 + 3 %benzyl-OE + 16 % ethanolu 103 92 100 80 15· 4 EGf+5 % GEpE 3,8 /kys.dusičná/ 99 94 96 96 96 98 16. =č.15 + 0,04 %dusičnanu 102 95 100 96 93 98 17/· =č.15 + 5 %ethanolu 96 98 99 98 87 98 18. 4 EGf+5 % GEpE 4,2, /kys.eztronc^á/· 95 85 94 93 67 98 19· =č.15 + 2 %benzyl-OE 101 96 97 98 93 99 20. 4 EGf + 5 % GE+ 0,04 % du-sičnanu 93 75 99 99 78 95 Poznámka: * - " znamená,Koncentrace: prostředek, č že hodnota . 11 až 20 chybí přibližně 5 mg C/ml - 33 - Příklad 12

Toxikologická studie

Tento výzkum se provádí k posouzení změn nosní dutiny králíků po jedné dávce nosiče do každé nosní dírky. Jakožto nosiče se zkouší glykofurol 75, tetraethylenglykol /Fluka/ a propylenglykol /DLS-kvalita, Mecobenzon, Dánsko/,

Rozdělí se 16 králíků do čtyř skupiny vždy o čtyřech krá-líci ch. Tři skupiny se podrobí jedné intranasální aplikacikaždého zkoušeného nosiče, 50 /Ul do každé nosní dutiny. Každýkrálík dostane jen jednu zkoušenou sloučeninu. Jedna skupinase považuje za kontrolní a dostane stejný objem isotonickéhoroztoku chloridu sodného. Králíci se zabijí 10 minut po apli-kaci a nechají se vykrvácet. Pak se otevře pravá nosní duti-na a hodnotí se mikroskopicky. Hodnotitel nezná dávkovačischéma. Levá nosní dutina se vyřízne a fixuje se v neutrál-ně pufrovaném. formalinu pro histologické hodnocení.

Makroskopické a mikroskopické posouzení v případě každéhoz. králíků číslo 1 až 16 je uvedeno v tabulce VIII a shrnutov tabulce IX se zřetelem na čtyři používané nosiče. S překva-pením se nezjistily žádné makroskopické ani mikroskopickérozdíly v případě isotonického fysiologického roztoku /roz-toku chloridu sodného/ a tří zkoušených nosičů.

Tabulka VIII

Posouzení nosních dutin králíků 10 minut po intranasálnímpodání nosiče žádná abnormalita, L = stupeň

Makroskopické Mikroskopické pozorování pozorování /pravá dírka/ /levá dírka/ L 1 překrvení L 2 ohniskové lymfoidní agregátyL 3 N.A. L4 N.A. 1. N.A. - 34 -

Tabulka VIII /pokračování/ 2*. mírně hyperaemické L 1 překrvení ✓ L 2 ohnisková haemorrhagie, překýení L 3 ohniskové lymfoidní agregáty L 4 N.A. 3. K.A. L 1 překrvení L 2 překrvení L 3 překrvení L 4 ohnisková subsliznicové haemorrhagie 4* sliznice nosní du-tiny bledší nežnormálně ih 1 překrvení L 2 překrvení L 3 překrvení a zhuštění sliznice L 4 N.A. 5» 2 mm haemorrha-gické ohnisko L 1 překrvení L 2 překrvení, ohnisková haemorrhagie aodlupování, otok, malé ohnisko chro-nického zánětu a ohniskové lymfoid-ní skvrny L 3 lymfoidní agregáty L 4 oblast chronického zánětu 6. 6 x 3 mm plochahaemorrhagie L 1 překrvení a ohnisko odlupování,nepatrné haemorrhagie L 2 překrvení a oblast subsliznicovéhaemorrhagie L 3 N.A. L 4 mírné překrvení 7. N»A· L 1 překrvení L 2 otokj překrvení, ohnisková haemor-rhagxe L 3 překrvení, ohniskové lyfoidní agre-gáty L 4 difuzní akutní a chronický zánět,póly a mono nukl.buňky, krev v lym-faticích - 35 -

Tabulka VIII /pokračování 8. N.A' 9. N.A. IQ. N.A. 11. N.A, 12. N.A. 13· N.A. L 1 překrvení L 2 překrvení s určitou podsliznicovouhaemorrhagií, otok L 3 překrvení s určitou podsliznicovouhaemorrhagií, otok L 4 překrvení a určitou podsliznicovouhaemorrhagií, otok; podsliznicovézhuštění slizníce, lymfoidní agregáty L 1 překrvení a otok L 2 překrvení a otok L 3 překrvení a boční atěna a mono a po- lymorfonukleárním buněčným infiltrá-tem β lymfoidní agregací L 4 překrvení a boční atěna a mono a po**lymorf©nukleárním buněčným infiltrá-tem a lymfoidní agregací L t. překrvení L 2 překrvení a případnými ohniskovýmilymfoidními agregáty L 3 otok a překrvení L 4 ohniskový chronický mononukleární bu-něčný infiltrát, dilatace lymfatiků L 1 otok a překrvení L 2 otok, překrvení, ohnisková haemorrha-gie a podsliznicové lymfoidní agregáty L 3 dilatace cév L 4 N.A. L 1 překrvení, dilatace cév, ohniskováhaemorrhagie L 2 překrvení, otok, ohniskové haemorrha-gie L 3 překrvení, aubsliznicové lymfoidníagrefáty L 4 překrvení, aubsliznicové lymfoidníagregáty L 1 překrvení L .2 překrvení, otok, subaliznicové lym-foidní agregáty L 3 překrvení, otok, aubsliznicové lym-foidní agregáty L 4 překrvení a výrazné lymfoidní agregáty 36 - 14» 3 mm haemorrhagic- L 1 ké ohnisko v před- γ 9 ní oblasti 11 ά L 3 L 4 15* malý oděr, špendlí- L 1kové body v předníoblasti L 2 L 4 16» 4 x 3 mm plocha L 1haemorrhagie směrem T 9k přední oblasti * L 3 Ν.Α» překrvení, otok, subsliznicovélymfoidní agregáty překrvení, otok, subsliznicovélymfoidní agregáty překrvení, otok, subsliznicovélymfoxdní agregáty překrveni, otok, ohnisková hae-morrhagie překrvení, ohnisková haemorrha-gie, podsliznicové lymfoidní ag-regáty překrvení, otok, mononukleárníbuněčný infiltrát blízko bazál-ní sekce překrvení překrvení, otok překrvení, otok, ohnisková haemorrhagie a odlupování překrvení, otok, subsliznicovélyfoidní agregáty zvláště v blíz-kosti báze otok, subsliznicové lymfoidní ag-regáty V následující tabulce IX je souhrn výsledků pozorovánínosních dutin králíků 10 minut po intranasální aplikaci4 EGf, GF, PG a 0,<£% roztoku chloridu sodného /použitých ja-kožto nosičů/. Zkratka N.A. v tabulce znamená, že se nezjistily žádné abnormality. I znamená 0,9% roztok chloridu sodného,nosič IX znamená glykofurol /GF/, nosič III znamená polypropylenglykol /PG/ a nosič IV znamená tetraethylenglykol /4 EGf/· - 37 -

Tabulka IX Nosič Králík číslo Makroskopické pozorovánípravá dírka Mikroskopické pozorovánílevá dírka I 3 N.A. bhaisková haemorrhagie 6 6 x 3 mm haemorrhagic-ké ohnisko, přední sek- ohnisková haemorrhagie ce 12 N.A. ohnisková haemorrhagie 13 N.A. N.A. II 2 N.A. ohnisková haemorrhagie 8 N.A. ohnisková haemorrhagie 9 N.A. N.A. 16 4 x 3 mm haemorrhagic -ké ohnisko, přední sek-ce ohnisková haemorrhagie III 4 - N.A. N.A. 5 2 mm heemorrhagickéohnisko, přední sekce ohnisková haemorrhagie 11 N.A. ohnisková haemorrhagie 14 2 mm haemorrhagickéohnisko, přední sekce N.A. IV 1 N.A. N.A. 1 N.A. ohnisková haemorrhagie 10 N.A. N.A. 15 špendlíkovitá oděrkav předu ohnisková haemorrhagie Při zkouškách se s překvapením zjistilo, že intranasální absorpce například benzodiazepinů jako clonazepamu a diaze- parnu, v nosičích podle vynálezu je velmi podobná intravenoz-nímu vstřikování /i.v./. Z obr. 1 je zřejmé, že píková kon-centrace clonazepamu v plasmě se dosahuje dříve než za 2 až 3 minuty a že koncentrace v plasmě po dvou a půl minu-tách /Cpi /2 5 minX přibližně 100 % hodnoty při i.v. po-dání. Volba kvality nosičů podle vynálezu má s překvapenímvliv na rychlost absorpce. Koncentrace clonazepamu v plasměpo 2,5 minutách je například o přibližně 40 % vyšáí pro - 38 - 4 EGf /kvality Fluka-Chemie AG/ než pro 4 EGf /kvality MERCK-

Schuchardt/ nebo PEG 200 /kvality MERCK-Schuchardt/ a t jeΠϊθΧ rovno nebo manáí než 2,5, 10 a 15 minut, jak je zřejmé z obr, 5.

Farmakodynamická odezva byla studována na případu králí-ků. Doba odezvy po intranasální aplikaci 0,25 mg clonazepamuve 100 /Ul nosiče se měří. Střední doba je uvedena na obr. 2a experimentální podmínky jsou popsány v příkladu 3. Jak jezřejmé z obr. 2, farmakodynamická odezva po intranasálním po-dání clonazepamu v nosiči podle vynálezu se získá v době krat-ší než 2 minuty po podání.

Prostředek podle vynálezu je stálý. To je doloženo napříklaď měřením koncentrace benzodiazepinu v prostředcích podle vynálezu, po jednom měsíci, uchovávaných při teplotě 60 °C nebo25 °C /viz příklad 11/. Stálý roztok /se stálostí rovnou ne-bo větší než 90 %/ se může získat za použití PG po přidáni ky-seliny octové /k nastavení hodnoty pH 3,8 až 4/. Stejné množ-ství kyseliny octové není schopné dodat stálost roztoku 4 EGfa množství kyseliny octové, potřebné k nastavení hodnoty pHna4, je příliš vysoké. S překvapením nastavení hodnoty pH zapoužití kyseliny dusičné vede ke stálým roztokům clonazepamuv například 4 EGf obsahujícím popřípadě 5 % GF /stálostpřibližně rovná nebo vyšší než 90 %/. S překvapením se nyní zjistilo, že použití nosiče podlevynálezu spolu s insulinem nebo glukagonem vede k výrazné bio-logické odezvě v průběhu 15 až 30 minut po intranasálním po-dání králíkům /viz obr. 3 a 4 a příklad 4 a 5/. Příklad 13

Biologická dostupnost

Biologická dostupnost estrogenu /Ξ2/ a estronu /E1/ pointranasálním podání /i.n./ králíkům /n = 3/ ve formě jednédávky 50 ^ug E2 se zjištuje tak, že se dva prostředky obsa-hující 30 &amp; a 100 % glykofurolu /GF/ podávají ve formě stej-né dávky i.n. a i.v. - 39

Materiály

Používá se 17- y-estrádiolu /estrogen = E2/ společnostiNovo Nordisk /Kodaň, Dánsko/, propylenglycolum ad infundibilia/PG/ společnosti Mecobenzon /Kodaň, Dánsko/ a glykofurolum 75/GF/ společnosti Hoffman La-Roche /Basilej, Švýcarsko/. Všech-ny ostatní reagencie jsou analytické čistoty. Příprava drogy

Prostředky pro i .v. vstřikování a pro int^^asální podá-ní se připravují těsně před podáním. Prostředek|7pro i.v. po-dání se připravuje rozpuštěním 2,729 mg E2 ve 25,0 ml PG apřidáním 25,0 ml isotonické solanky. Prostředek /2/ pro in-tranasální podání /i.n·/ se připravuje rozpuštěním 4,938 mgE2 v. 10,0 ml GE. Prostředek /3/, také pro i.n. podání, sepřipravuje rozpuštěním 4,996 mg E2 v 3,00 ml GF a přidáním isotonické solanky k:dosaženi celkového objemu 10,0 ml· Dávkování Třem králíkům /n = 3/ se i,v. podá 1,0 ml prostředku/1/ /ekvivalent 50 ^ug E2/ ve formě 30 sekundové infuze doušní cévy. Třem králíkům /n - 3/ se intranasálně /i.n./ podáprostředek 2 nebo 3 za použití Eppendorphovy pipety. Každémukrálíkovi se vnáší do nosní dírky 50 /Ul, což odpovídá 50/Ug E2. Intranasélní podání trvá přibližně 5 sekund. Po do-bu přibližně jedné minuty po intranasélním podání se králíciudržují v poloze ležící na znak.

Vzorky krve se odebírají 0, 5, 10, 20, 30 a 60 minut popodání. Plasma se izoluje a uchovává se při teplotě +20 °Cdo zkoušky·

Koncentrace v plasmě nekonjugovaného E2 a El se měříradioimunozkouškou, kterou popsal Emmet a kol., 1972. Poextrakci etherem se El a E2 oddělí na sloupci SephadexuLH20. Radioimunozkouška se provádí po odpaření rozpouštědla·Detekční mez pro Σ1 a E2 je 40 pmol/1. Rozptyl pro intra ainter zkoušku je v případě E1 7,0 % a 9,6 % a pro případ E2zkoušky 7,4 % a 10,5 %· - 40

Korekce dávka/hmotnost pro jednotlivé koncentrace v plas-mě je vypočtena se zřetelem, na střední i.v. hodnotu dávka/hmot-nost /22,3 yUg/kg/. Pro prostředek /1/ i.v. plocha /AUC/ podkřivkou koncentrace E2 v plasmě - čas, od nuly do nekonečna ,je přiřazena část. se 30 sekundovou infuzí. Všechny ostatníhodnoty AUC vypočteny za použití trapezoidálního pravidla.

Koncentrace B 2 a El v plasmě po podání E2 je v tabulceX a XX a na obr. 11 a 12, Na obr. 11 jsou střední - S.D. kon-centrace estrogenu /E2/ v plasmě po podání přibližně 50 y-ugestrogenu králíkům /n = 37 buá ve formě i.v. injekce /prostře-dek 1 nebo ve formě intranasáíniho podání /prostředek /2/ i. n. a /3/ i.n. s obsahem glykofurolu /GF/ 100 % a 30 %/. - x - prostředek /1/ i.v. - ® - prostředek /2/ i.n. a .. o ♦. prostředek /3/ i.n. a na obr. 12 jsou střední -S.D. koncentrace estronu /E1/v plasmě po podání přibližně 50 yug estrogenu králíkům /n = 3/ ve formě i.v. injekce /prostředek /1// nebo intranasálně/prostředek /2/ i.n. a prostředek /3/ i.n. formulovaný s ob-sahem glykofurolu /GF/ 100 % a 30 %/. - x - prostředek /1/ i.v. - f - prostředek /2/ i.n. a *· o .. prostředek /3/ i.n.

Jak je zřejmé z obr. 11 a 12 a z tabulky XII vykazuje in-tranasální podáni hodnoty velmi podobné i.v. podání. Biologic-ké dostupnost je uvedena v tabulce XII. Biologická čostupnostpro E2 je 87 a 80% a pro E2 + E1 104 a 95 % v případě prostředku /2/ i.n. a /3/ i.n. Hodnota C?tnSn pro E2 je 109 % a 95 %a pro E2 + B1 je 118 % a 105 je kratší než 5 minut. V tabulce X se uvádí jednotlivé koncentrace estrogenu/E2/ v plasmě po podání přibližně 50 yUg estrogenu králíkům/n » 3/ i.v. /prostředek 1/ nebo i.n /prostředek /2/ a /3/ i·n., formulovaný se 100 nebo 30 % glykofurolu /GF/. n.d. nižšínež 0,04 nmol/1. V tabulce XI se uvádí jednotlivé koncentraceestronu /E1/ v plasmě po podání přibližně 50 yUg estronu krá-líkům /n = 3/ i.v. /prostředek 1/ nebo i.n. /prostředek /2/ a/3/i.n·, formulovaný se 100 % nebo 30 % glykofurolu /GF//. - 41 n.d. nižší než 0,04 nmol/1» V tabulce XII se uvádějí farmakokinetické hodnoty /dávka ko-rifována se zřetelem na střední i.v. dávku/ pro estrogen /E2/a estron /El/ po jednom podání přibližně 50 yUg estrogenu/n = 3/ ve formě i.v. injekce /prostředek 1/ nebo intranasál-ního padání /prostředek /2/ i.n., prostředek /3/ i.n./. AUC/nmol ml+1 min/ je plocha pod křivkou koncentrace v plasmě -čas od nuly do nekonečna» ^max /η*110!'/“!/ je maximální koncentrace v plasmě tmft.g/min/ je čas maximální koncentrace v plasmě. 42

Tabulka Dávka/ hmotnost pg/xg OJ Ol Ol CO ►v rH CN o «* Ol Ol cH •v. o Ol ΓΊ rH (N 19.3 / 17.5 / •χ σ» r-4 m co cH E2 koncentrace v plasmě (nmol/ml) po počtu min. o IO o o i£> »‘s o • · rH rH o θ' ··' n o Ol ·' in o n n o σι o ’Τ • ' ΓΏ O o •x rd o n o m H o ·«. co rH o cH OJ o rH H O •"X rH H co co 0« co" o »- o cH o *X tn o OJ o r— σ> rd o σι Ol O ·-» m Ol O •x rH o co rd O ’Τ rH o in r-t o • - co OJ co O rH o ·«· n o in "T o o ΓΊ o »>. \0 CsJ o OJ n O ·%. (N o C-i ΓΊ o Ol n o •x > rd ID o «* σ» o m i£> o eo ΓΊ o O ·*» o m o ’τ· O O *5* i£5 o •x f-H ΓΊ O Ό • c rsj rd o o cH •X O σι t—1 O σ o o Ό C O «-Η *\ O σι o o CO o •x o Králík číslo v£> rH í\ m co o >t. +j <n wo Φ > •H • • c-« C O — • O h •H cH O • Ol C <*> —x • O u. •h nu n

Tabulka XI 43 O w, CO C C-Μ -P A ► g 2XO S O X) 22.2 / 21.8 t σ »-v CX (X 20r 1 21.3 19.3 in • rd σ\ rd m r-- co rd El koncentrace v plasmě (nmol/ml) po počtu min. 1 60 1,60 o m cH O ιΛ rd o o rx O o o n 1; 60 2; 30 O K <N 1/. 90 30 2,70 O n ΓΊ O *·«. í\j o co •-X i 3.40 / 1 4f 30 o σι n O σ\ **. 3.70 z 20 3,10 o U3 •«h. o CO ÍN o rd K. Γ- 00*9 5.90 / O co m 5; 00 3ΖθΟ 10 O n 5, 10 o Ό r*\. (X 9,90 7.40 z 00 Z6 06 Z8 0T?9 1 7.50 z tn 4,30 _i 4,00 2.20 11,00 o (X 'O o m co 8,10 1 5,30 8.80 o c n.d. n.d. n.d. T3 c n.d. í n.d. • Ό é •p-u | Králík číslo rd (N n Γ~ co σ Prostře- dek 1. i.v. 2 . i.n. (100% GF) C <*» —. • O b. h nu r> 44

Τθ bulka XII

co C Q cw © +| φ ΌP ® Φ ti p © >ro <#> rH • c •H 80 + 30 179±12 95 + 25 ιΛ n +1 in σ 250+22 <-> r> +1 o r-ť 100± 0 67±38 I- 2 i. n. 87±11 co +1 in σι rH 104±13 109±29 150±22 118±28 100± 0 co n +1 &amp; Pozorovaný střed/dávka korigována/ 3 i.n. 1038 432 1470 54 10 64 m co 2 i.n. 1138 471 1609 62 10 (M t'- ΙΛ co 1 i.v. 1302 241 n ’Τ m rH 57 61 in 12 Parametr ÍN w rM rS w + (N W <N W rH w rH a -j- a (N a rK w AUC X (0 e CJ X «3 6 P - 45 -

Ze shora uvedeného vyplývá, že solubilita E2 v GF jepřibližně 23C mg/ml. Klinická dávka 50 ^ug je rozpustnáv 0,25 /Ul, Proto je za použití GF možné podání klinickédávky v extremně malém mikrolitrovém objemu. Jelikož rozpust-nost klesá exponenciálně ve směsi s vodou, má být objem dávkyza použití GF jako nosiče například přibližně 5 ^ul, aby sepředešlo nežádoucímu vysrážení £2 v nosní sliznici·

Malý objem dávky je žádoucí, aby se snížila nebo vylou-čila místní dráždivost. Je také možno přidávat nedráždivékorozpouštědlo, například se může přidávat rostlinný olej· Tímto způsobem se může získat žádaný objem dávky nebo se mů-že dosáhnout žádané . rychlosti uvolňování. Ke snížení píkovékoncentrace v plasmě může být také žádoucí omezené vysráženíE2 v nosní sliznici.

Bezvodý GF-prostředek může být užitečný při akutním jakoži při chronickém podávání·

Průmyslová využitelnost

Nosič pro farmaceutický prostředek pro podávání biologicky účinné látky sliznicovou membránou savců·

Claims (6)

1. - 46 - ?

   PATENTOVÉ N É ELO Κ-Ύ

   1 - Éarmaceutický prostředek pro podávání biologicky účin-ných látek sliznicovou membránou savců, vyznačujícíse t í m , že obsahuje alespoň jednu látku ze souborun-glykofurolů obecného vzorce I ^CHg/OCHgCHg/ -OH /1/ n kde znamená n 1 až 8 a n-ethylenglykolů obecného vzorce IIN/OC^GHg/pOH kde znamená p 1 až 14» 2. ^armaceautický prostředek podle nároku 1, v y z n a -čující se tím, že jakožto alespoň jeden n-ethy-lenglykol obsahuje alespoň jeden n-ethylenglykol obecnéhovzorce II, kde znamená p 1 až 8,
2. 3. Farmaceutický prostředek podle nároku 1 nebo 2, v y -značující se tím, že obsahuje n-glykofurolobecného vzorce I, kde znamená n 1 nebo 2. 4» Farmaceutický prostředek podle nároku 1 až 3, v y -značující se tím, že alespoň jedna biologickyúčinná látka je volena ze souboru biologický aktivních pepti-dů zažívacího nebo gastrointestinálního traktu.
3. 5. Farmaceutický prostředek podle nároku 4, vyznačující se tím, že obsahuje biologicky účinnou látku,volenou ze souboru zahrnujícího koagulační faktory jako fak-tor VII, faktor Vlil, faktor IX a jejich deriváty a analogy,činidla řídící kostní metabolismus jako calcitonin a jeho de-riváty a analogy, hormony vylučované hypothalamusem jakoLHRH nebo analogy, například nafarelin, buserelin nebo Zoli-dex, enkefaliny jako DADLE, merkephamid nebo leucinenkefalin, - 47 - hormony, vylučované pankreas jako insulin nebo glukagon a je-jich deriváty a analogy, hormony vylučované hypofýzou jakorůstový hormon, vasopresssin nebo oxytocin a jejich derivátya analogy například DDAVP nebo lypressin a sexuální hormonyjako PSH, LH nebo LTH a jejich deriváty a analogy. 6. farmaceutický prostředek podle nároku 1 až 3, v y - značující se tím, že alespoň jedna biologickyúčinná látka je volena ze souboru zahrnujícího antiepileptika,spasmolytika a uklidňovací prostředky ze souboru zahrnujícíhobenzodiazepiny jako clonazepam, diazepam, flunitrazepam, tria-zolam, lorazepam, nitrazepam nebo jejich směsi v množstvíhmotnostně 0,001 až 20 %. V. farmaceutický prostředek podle nároku 4 až 6, v y - značující se tím, že obsahuje hmotnostně0,0001 až 5 % kyseliny dusičné a/nebo dusičnanu. 8. farmaceutický prostředek podle nároku 4 až 5, v y -značující se tím, že obsahuje hormony pankrea-su jako insulin a jeho deriváty a analogy a glukogon a jehoanalogy a deriváty.
4. 9. Způsob,~přípr£vy~'feráiačetit;j.ckěho'iprostředku podlenároku 1 až 8, vyznačující se tím, že sebiologicky účinná látka rozpouští v připraveném nosiči, se-stávajícím z alespoň jedné látky ze souborní η-glykofurolů o-becného vzorce I a π-ethylenglykolů obecného vzorce II, kdejednotlivé symboly mají v nároku 1 uvedený význam, obsahu-jícím část nebo všechny další složky farmaceutického prostřed-ku.
5. 10. Způsob podle nároku 9,vyznačující set í m , že se biologicky účinná látka rozpouští v nosiči zapoužití ultrazvuku a/nebo zvýšené teploty.
6. 11. Použití jedné nebo několika látek ze souboru zahrnu-jícího n-glykofuroly obecného vzorce I a n-ethylenglykoly o-becného vzorce II, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 u-

   - 48 - vedený význam pro přípravu farmaceutického prostředku podlenároku 1 až 8 pro podávání biologicky účinné látky prostřed-nictvími sliznicové membrány savcům.