CN105054173A - 一种富含果聚糖的果蔬汁饮料及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种富含果聚糖的果蔬汁，果蔬汁饮料及其制备方法，该果蔬汁饮料的制备方法包括如下步骤：将柠檬明串珠菌(Leuconostoc？citreum)发酵菌种在番茄汁蔗糖培养基中发酵培养即得。本发明采用的柠檬明串珠菌是乳酸菌的一种，其发酵产物具有更高的食品安全性。本发明的制备方法极大简化了生产步骤，节省了生产成本，同时降低了非连续性操作中带来的污染风险。制备过程所采用的发酵培养基来源广泛、成本低廉、天然安全，在降低物料成本的同时，提高了食品的安全性。

Description

一种富含果聚糖的果蔬汁饮料及其制备方法

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种富含果聚糖的果蔬汁饮料及其制备方法。

背景技术

多糖(polysaccharide)是一种由单糖以糖苷键键合而成大分子聚合物，研究表明，多糖具有免疫调节、抗病毒、抗癌、降血糖、降血压等益生功能。自然界中的多糖主要分布于微生物、高等植物、动物、地衣以及藻类中，其中，微生物来源的多糖尤指其胞外多糖，为某些特定微生物(如乳酸菌、土壤杆菌、根瘤菌等)在生长代谢过程中分泌到细胞壁外的一类糖类化合物，其中，依附于微生物细胞壁外的多糖被称为荚膜多糖，而粘液多糖则以渗透于生长环境中的形式存在。

果聚糖(果聚糖的英文名称为Levan)是一种天然的果糖聚合物，存在于多种植物和微生物发酵产物中，虽然在甘蔗汁加工业中是不受欢迎的微生物代谢产物，但在抗癌、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、降血糖、降血脂、降胆固醇、增强免疫、减肥等医药临床领域具有极高的应用价值，近年来受到研究者的关注。有关levan的报道最早可追溯到20世纪30年代，至今相关研究已遍布产量优化、结构解析、作用机理、功能特性等多个领域，然而，纵观国内饮料市场，尽管各类功能性饮料丛生，如红牛(补充能量)、脉动(补充维生素)等，但以levan为主要功能成分的饮料几乎没有。而且，现有的含多糖饮料的相关研究报道，其涉及的多糖来源多为芽孢杆菌、产气杆菌等有害菌代谢获得，应用方式也都是人为添加于饮料中，具有一定应用风险的多糖来源与人为添加的应用方式使这类产品渐渐缺乏创新性与安全性。

因此，利用安全性更高的微生物代谢果蔬汁来生产以果聚糖为功能性成分的发酵型饮料，将是未来新型功能性饮料发展的趋势之一。该问题亟待解决。

发明内容

因此，本发明为了解决目前市场缺乏以果聚糖为主要功能成分的果蔬汁饮料，现有果聚糖产生菌多为致病菌，以及类似饮料中多糖多为人工添加的问题，提供了一种富含果聚糖的果蔬汁饮料及其制备方法。本发明人发现利用保藏编号为CGMCCNo.6431柠檬明串珠菌株，发酵蕃茄汁蔗糖培养基后获得的发酵液中含有大量果聚糖，该发酵液经勾兑调味后所得果蔬汁饮料的风味可被大部分消费者接受，从而完成了本发明。

为解决上述技术问题，本发明采取的技术方案之一是：一种富含果聚糖的果蔬汁的制备方法，该制备方法包括如下步骤：将柠檬明串珠菌(Leuconostoccitreum)发酵菌种在番茄汁蔗糖培养基中发酵培养，即得。

其中所述的番茄汁蔗糖培养基的制备方法较佳地包括以下步骤：番茄榨汁，将所得榨汁过滤后煮沸，离心取上清液，与蔗糖混合后加热冷却，调节pH值，灭菌后冷却即得。其中所述过滤的方法较佳地为利用80～100目纱布过滤取汁，所述煮沸的时间较佳地为1～10分钟，更佳地为3～7分钟，优选地为5分钟，所述离心的较佳地速度为4,000～12,000g，更佳地为6,000～10,000g，优选地为8,000g，离心的时间较佳地为8～12分钟，更佳地为9～11分钟，优选地为10分钟，蔗糖的加入量较佳地为5～30％，更佳地为10～20％，优选地为15％，所述灭菌的温度较佳地为95～125℃，更佳地为100～123℃，优选地为121℃，灭菌时间较佳地为10～30分钟，更佳地为15～25分钟，优选地为20分钟，pH值较佳地为4.5～7.5，更佳地为6.0～7.0，优选地为6.5。

所述的发酵培养的温度较佳地为20℃～35℃，更佳地为25～32℃，优选地为30℃，所述的发酵培养较佳地为震荡发酵培养，所述振荡的速度较佳地为100～300rpm，更佳地为150～250rpm，优选地为200rpm，发酵培养的时间较佳地为24～120小时，更佳地为72～110小时，优选地为96小时。

所述的柠檬明串珠菌(Leuconostoccitreum)发酵菌种的接种量较佳地为0.5％～4.0％，更佳地为1％～3％，优选地为地为2％，所述百分比为体积百分比。其中所述的柠檬明串珠菌为现有技术，其制备方法为本领域常规制备方法，或者通过购买获得。该菌株已于2012年08月13日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101。该菌株的建议的分类命名为：柠檬明串珠菌Leuconostoccitreum，该菌株的保藏编号为：CGMCCNo.6431，所保藏的培养物名称为：BD01707。

为解决上述技术问题，本发明采取的技术方案之二是：一种富含果聚糖的果蔬汁饮料，所述果蔬汁饮料包括如上所述的果蔬汁的制备方法制备所得的果蔬汁，甜味料，酸味剂和水。

其中所述的甜味料为本领域常规的甜味料，更佳地为选自蔗糖、果葡糖浆、阿斯巴甜、甜蜜素和安赛蜜中的一种或多种；所述的甜味料的含量为使所述的发酵果蔬汁饮料的蔗糖甜度为10％～12％；所述的酸味剂为本领域常规的酸味剂，较佳地为选自柠檬酸、苹果酸、酒石酸、乳酸和醋酸中的一种或多种；所述酸味剂的质量百分比浓度较佳地为50-70％，所述的酸味剂的含量为使所述的果蔬汁饮料的滴定酸度为60°T～70°T。本发明所述甜味料和酸味剂的种类和使用量都符合中国食品添加剂相关法律法规的规定。所述果蔬汁饮料中果聚糖含量较佳地为≥0.5％，所述百分比为质量百分比。

为解决上述技术问题，本发明采取的技术方案之三是：一种富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：将如上所述的果蔬汁与甜味料混合，利用酸味剂将所得混合液的酸度调节为60°T～70°T，均质，灭菌即得。

其中所述的将所述果蔬汁与甜味料混合的方法较佳地为：将所述果蔬汁与含有甜味料的勾兑液混合，所述甜味料为选自蔗糖、果葡糖浆、阿斯巴甜、甜蜜素和安赛蜜中的一种或多种，所述甜味料的含量为0.02％～11.83％，所述百分比为质量百分比，所述果蔬汁与所述的勾兑液混合时，所述的果蔬汁与勾兑液的体积比例较佳地为1:1.5～1:4.52，更佳地为1:3.35～1:4.52，优选地为1:4.52。本发明所述甜味料和酸味剂的种类和使用量都符合中国食品添加剂相关法律法规的规定。其中所述均质的压力较佳地为15～30MP，更佳地为20～28MP优选地为25MP；所述灭菌的温度较佳地为95℃～125℃，更佳地为100～120℃，优选地为110℃；灭菌的时间为5分钟～30分钟，更佳地为15～25分钟，优选地为20分钟。

其中所述利用酸味剂将所得混合液的酸度调节为60°T～70°T的方法较佳地为：将所得混合液与酸味剂混合，将该混合液的酸度调节到所需酸度即得。所述的酸味剂为本领域常规的酸味剂，较佳地为选自柠檬酸、苹果酸、酒石酸、乳酸和醋酸中的一种或多种；所述酸味剂的质量百分比浓度较佳地为50-70％，所述的酸味剂的含量为使所述的果蔬汁饮料的滴定酸度为60°T～70°T。本发明所述甜味料和酸味剂的种类和使用量都符合中国食品添加剂相关法律法规的规定。本发明所述的蔗糖甜度是一个相对值，又称为比甜度。所述蔗糖甜度是选择蔗糖作为标准，将其他甜味剂的甜度是与它比较而得出的。例如：当本发明所述一种溶液的蔗糖甜度为10％时，该溶液的甜度相当于将100g蔗糖完全溶解于1L水中所得到的甜度，本发明所述其他溶液的甜度以此类推即得。本发明所述甜味料和酸味剂的种类和使用量都符合中国食品添加剂相关法律法规的规定。

在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

本发明所用试剂和原料均市售可得。

本发明的积极进步效果在于：

1、本发明采用的菌株为一株产果聚糖的柠檬明串珠菌(Leuconostoccitreum)，该菌株为首次发现具有产levan能力的柠檬明串珠菌。

2、本发明采用的柠檬明串珠菌是乳酸菌的一种，与其他产levan的菌株(如芽孢杆菌等)相比，其代谢产物具有更高的食品安全性。

3、本发明提供的果蔬汁饮料中所含有的levan是柠檬明串珠菌代谢蔗糖产生的，与市面上以人工后添加方式生产的多糖饮料相比，本发明的制备工艺极大简化了生产步骤，节省了生产成本，同时降低了非连续性操作中带来的污染风险。

4、本发明提供的果蔬汁饮料的制备方法采用的发酵培养基来源广泛、成本低廉、天然安全，在降低物料成本的同时，提高了食品的安全性。

5、本发明利用产果聚糖的柠檬明串珠菌发酵天然发酵培养基，结合勾兑、调味的方法生产可直接食用的功能性饮料，打破现有市场上稀缺以果聚糖作为功能性成分饮料的现状。

生物材料保藏信息

本发明涉及的柠檬明串珠菌的菌株，已于2012年08月13日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101。该菌株的建议的分类命名为：柠檬明串珠菌Leuconostoccitreum，该菌株的保藏编号为：CGMCCNo.6431，所保藏的培养物名称为：BD01707。

附图说明

图1显示柠檬明串珠菌BD01707多糖的单糖组成色谱测定结果。

图2显示柠檬明串珠菌BD01707多糖的红外光谱测定结果。

图3显示柠檬明串珠菌BD01707多糖的核磁共振测定结果。

具体实施方式

下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。

实施例1富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备

1、材料与方法

番茄汁蔗糖培养基的制备：成熟番茄清洗，去皮，榨汁机压榨，100目纱布过滤取汁，煮沸5min，8000g离心10min取上清液，加入15％(w/v)蔗糖加热溶解后冷却至室温，以食用级碱调节pH至6.5，121℃灭菌20min，冷却至室温，即得无菌的番茄汁蔗糖培养基。

种子(发酵菌种)的制备：将保藏编号为CGMCCNo.6431的柠檬明串珠菌(Leuconostoccitreum)BD01707的冻干粉用少量无菌蒸馏水溶解，用接种环取一环划线于含2％(w/v)蔗糖的M17琼脂培养基(MerckCo.德国)上，28℃好氧培养24h取出，用接种环挑取单菌落放入20mL含2％(w/v)蔗糖的M17液体培养基(MerckCo.德国)，28℃180rpm摇床培养24h取出，培养物9,000rpm离心10分钟，弃去上清液，菌体用无菌蒸馏水洗涤2次后，用原培养体积的无菌蒸馏水悬浮，得到发酵用的种子。

发酵液中多糖(果聚糖)的制备：取发酵液以4倍于发酵液体积的无菌水稀释，15,000g离心10min，取上清液，加入3倍体积于上清液体积的无水乙醇，静置过夜，15,000g离心10min，收集沉淀物并溶于水后，真空冷冻干燥即得。

果蔬汁饮料中多糖(果聚糖)的制备：取果蔬汁饮料15,000g离心10min，取上清液(去除灭活的死菌体)，加入3倍体积的无水乙醇，静置过夜，15,000g离心10min，收集沉淀物并溶于水后，真空冷冻干燥即得。

2、富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备

(1)将所得的柠檬明串珠菌BD01707种子以接种量2％(v/v)无菌接种于含蔗糖百分比含量为15％的番茄汁培养基，30℃、200rpm培养96小时，发酵结束后取发酵液，经测定，该发酵液中levan的质量百分比含量为2.87％。

(2)将蔗糖以118.3g/L的比例完全溶解于50℃的水中制得含有11.83％的蔗糖甜度的甜味勾兑液，50℃将柠檬酸完全溶解于水中，制得柠檬酸百分比浓度为70％的酸味勾兑液。将上述发酵液与甜味勾兑液以1：4.52(v/v)充分混合均匀，再与酸味勾兑液缓慢混合直至酸度为65°T，然后在15MP压力下进行均质，并于95℃灭菌30min，灌装，得本实施例的果蔬汁饮料产品A。

经检测，本实施例生产的富含果聚糖levan的果蔬汁饮料中levan含量0.52％(w/v)，甜度为含有11％的蔗糖甜度，酸度65°T。

3、成分检测

(1)柠檬明串珠菌BD01707发酵液中多糖的单糖组成测定

(a)标准样品配置：

多糖水解：吸取100μL浓度为4mg/mL～5mg/mL的多糖样品溶液于5mL的具塞刻度试管中，加入100μL的4moL/LTFA，充N₂封管，110℃烘箱中水解2h；冷却后打开盖，加200μL甲醇后用N₂吹干，如此重复加甲醇并用N₂吹3次，去除TFA，将其残渣用水溶解定容至5mL，用0.45μm微孔膜过滤后供进样分析。

(b)色谱条件

色谱柱：CarboPacPA203mmi.d.×150mm；

流动相：A、H₂O；B、250mmol/LNaOH；C、1mol/LNaAc；

三元梯度洗脱：流速：0.5mL/min；积分脉冲安培检测器；

Au工作电极：Ag/AgCl参比电极；

进样体积：20μL；柱温：30℃。

(c)按前述方法制备的步骤(1)发酵液中的多糖样品，并以高效阴离子色谱法测定多糖的单糖组成。

数据结果：柠檬明串珠菌BD01707多糖样品糖基组成的色谱分析结果见图1，该多糖在14.50min有单一吸收峰，且该吸收峰的保留时间与果糖标品保留时间一致。

结论：柠檬明串珠菌BD01707多糖由果糖单一糖基组成，是一种果聚糖。

(2)柠檬明串珠菌BD01707发酵液中多糖的结构判定

(a)傅里叶红外光谱(FTIR)测定

将前述方法制备的步骤(1)发酵液中的多糖样品与溴化钾粉末充分混合后，压制成片状，应用傅里叶红外光谱仪(Nicolet6700,ThermoFisher公司，美国)进行傅里叶红外光谱(FTIR)测定。

结果如图2所示，3306cm^-1处的强宽峰为分子间及分子内羟基吸收峰，2930cm^-1和2884cm^-1为果糖残基中C－H键伸缩振动的吸收峰，1634cm^-1处的吸收峰是结合水所致，1412－1217cm^-1为C－H变角振动的吸收峰，1120－1008cm^-1处的吸收峰是C－O－C和C－O－H的伸缩振动的结果。923cm^-1和810cm^-1处的吸收峰与呋喃环的伸缩振动有关。

结论：BD01707多糖的糖环构型以呋喃环为主。

(b)核磁共振(NMR)测定

将前述方法制备的步骤(1)发酵液中的多糖样品按10mg/mL的浓度完全溶解于重水中，并应用核磁共振波谱仪(AvanceIII400MHz,Bruker公司，德国)进行核磁共振(NMR)测定。结果如图3所示，图3中A为NMR-¹H谱，显示样品的七个质子的化学位移集中在3.4－4.2ppm区域，而图3中B为NMR-¹³C谱，显示样品在104.537(C-2),80.622(C-5),76.628(C-3),75.532(C-4),63.716(C-6)和60.234(C-1)ppm处有共振。

结论：FTIR与¹H、¹³C谱的数据结合分析表明，BD01707多糖为果聚糖。

实施例2富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备

1、材料与方法

番茄汁蔗糖培养基的制备：成熟番茄清洗，去皮，榨汁机压榨，100目纱布过滤取汁，煮沸10min，4000g离心12min取上清液，加入质量百分比为30％的蔗糖加热溶解后冷却至室温，以食用级碱调节pH至7.5，135℃灭菌10min，冷却至室温，即得无菌的番茄汁蔗糖培养基。

种子(发酵菌种)的制备、发酵液中多糖(果聚糖)的制备、果蔬汁饮料中多糖(果聚糖)的制备：同实施例1。

2、富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备

(1)将所得的柠檬明串珠菌BD01707种子以接种量0.5％(v/v)无菌接种于蔗糖质量百分比含量为30％的番茄汁培养基，35℃、100rpm培养120小时，发酵结束后取发酵液，经测定，该发酵液中levan的质量百分比含量为2.36％。

(2)将果葡糖浆、阿斯巴甜分别以15.0g/L、0.25g/L的比例完全溶解于50℃的水中制得含有6.04％的蔗糖甜度的甜味勾兑液，将苹果酸、酒石酸、乳酸分别以550g/L的比例完全溶解于50℃的水中制得酸味勾兑液。将上述发酵液与甜味勾兑液以1：3.35(v/v)充分混合均匀，再与酸味勾兑液缓慢混合直至酸度为70°T，然后在30MP压力下进行均质，并于125℃灭菌5min，灌装，得本实施例的果蔬汁饮料产品B。

经检测，本实施例生产的富含果聚糖levan的果蔬汁饮料中levan的质量百分比含量为0.53％，甜度为含有10％的蔗糖甜度，酸度70°T。

实施例3富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备

1、材料与方法

番茄汁蔗糖培养基的制备：成熟番茄清洗，去皮，榨汁机压榨，120目纱布过滤取汁，煮沸1min，12000g离心8min取上清液，加入质量百分比含量为5％蔗糖加热溶解后冷却至室温，以食用级碱调节pH至5.5，110℃灭菌30min，冷却至室温，即得无菌的番茄汁蔗糖培养基。

种子(发酵菌种)的制备、发酵液中多糖(果聚糖)的制备、果蔬汁饮料中多糖(果聚糖)的制备：同实施例1。

2、富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备

(1)将所得的柠檬明串珠菌BD01707种子以接种量4.0％(v/v)无菌接种于蔗糖质量百分比含量为5％的番茄汁培养基，20℃、300rpm培养72小时，发酵结束后取发酵液，经测定，该发酵液中levan的质量百分比含量为1.88％。

(2)将蔗糖、甜蜜素、安赛蜜分别以85g/L、0.5g/L、0.5g/L的比例完全溶解于50℃的水中制得含有16.75％的蔗糖甜度的甜味勾兑液，将柠檬酸、醋酸分别以700g/L的比例完全溶解于50℃的水中制得酸味勾兑液。将上述发酵液与甜味勾兑液以1：2.42(v/v)充分混合均匀，再与酸味勾兑液缓慢混合直至酸度为60°T，然后在25MP压力下进行均质，并于110℃灭菌20min，灌装，得本实施例的果蔬汁饮料产品C。

经检测，本实施例生产的富含果聚糖levan的果蔬汁饮料中levan质量百分比含量为0.55％，甜度为含有12％的蔗糖甜度，酸度60°T。

实施例4富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备

1、材料与方法

番茄汁蔗糖培养基的制备：成熟番茄清洗，去皮，榨汁机压榨，100目纱布过滤取汁，煮沸8min，10000g离心9min取上清液，加入质量百分比含量为20％的蔗糖加热溶解后冷却至室温，以食用级碱调节pH至4.5，115℃灭菌25min，冷却至室温，即得无菌的番茄汁蔗糖培养基。

种子(发酵菌种)的制备、发酵液中多糖(果聚糖)的制备、果蔬汁饮料中多糖(果聚糖)的制备：同实施例1。

2、富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备

(1)将所得的柠檬明串珠菌BD01707种子以接种量1.0％(v/v)无菌接种于蔗糖质量百分比含量为20％的番茄汁培养基，25℃、150rpm培养24小时，发酵结束后取发酵液，经测定，该发酵液中leva的n质量百分比含量为1.46％。

(2)将蔗糖、果葡糖浆、安赛蜜分别以10g/L、15g/L、0.5g/L的比例完全溶解于50℃的水中制得含有8.83％的蔗糖甜度的甜味勾兑液，将柠檬酸、乳酸、醋酸分别以650g/L的比例完全溶解于50℃的水中制得酸味勾兑液。将上述发酵液与甜味勾兑液以1：1.5(v/v)充分混合均匀，再与酸味勾兑液缓慢混合直至酸度为68°T，然后在20MP压力下进行均质，并于100℃灭菌25min，灌装，得本实施例的果蔬汁饮料产品D。

经检测，本实施例生产的富含果聚糖levan的果蔬汁饮料中levan的质量百分比含量为0.58％，甜度为含有11.5％的蔗糖甜度，酸度68°T。

实施例5富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备

1、材料与方法

番茄汁蔗糖培养基的制备：成熟番茄清洗，去皮，榨汁机压榨，100目纱布过滤取汁，煮沸11min，6000g离心11min取上清液，加入质量百分比含量为10％的蔗糖加热溶解后冷却至室温，以食用级碱调节pH至6.5，125℃灭菌15min，冷却至室温，即得无菌的番茄汁蔗糖培养基。

种子(发酵菌种)的制备、发酵液中多糖(果聚糖)的制备、果蔬汁饮料中多糖(果聚糖)的制备：同实施例1。

2、富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备

(1)将所得的柠檬明串珠菌BD01707种子以接种量3.0％(v/v)无菌接种于蔗糖质量百分比含量为10％的番茄汁培养基，28℃、250rpm培养48小时，发酵结束后取发酵液，经测定，该发酵液中levan的质量百分比含量为2.05％。

(2)将蔗糖、果葡糖浆、阿斯巴甜、甜蜜素、安赛蜜分别以40g/L、15g/L、0.2g/L、0.2g/L、0.2g/L的比例完全溶解于50℃的水中制得含有12.46％的蔗糖甜度的甜味勾兑液，将柠檬酸、苹果酸、酒石酸、乳酸、醋酸分别以600g/L的比例完全溶解于50℃的水中制得酸味勾兑液。将上述发酵液与甜味勾兑液以1：2.8(v/v)充分混合均匀，再与酸味勾兑液缓慢混合直至酸度为63°T，然后在22MP压力下进行均质，并于120℃灭菌10min，灌装，得本实施例的果蔬汁饮料产品E。

经检测，本实施例生产的富含果聚糖levan的果蔬汁饮料中levan的质量百分比含量为0.54％，甜度为含有10.5％的蔗糖甜度，酸度63°T。

实施例6富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备

1、材料与方法

番茄汁蔗糖培养基的制备：成熟番茄清洗，去皮，榨汁机压榨，80目纱布过滤取汁，煮沸1min，12000g离心8min取上清液，加入质量百分比含量为5％蔗糖加热溶解后冷却至室温，以食用级碱调节pH至5.5，110℃灭菌30min，冷却至室温，即得无菌的番茄汁蔗糖培养基。

种子(发酵菌种)的制备、发酵液中多糖(果聚糖)的制备、果蔬汁饮料中多糖(果聚糖)的制备：同实施例1。

2、富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备

(1)将所得的柠檬明串珠菌BD01707种子以接种量4.0％(v/v)无菌接种于蔗糖质量百分比含量为5％的番茄汁培养基，20℃、300rpm培养72小时，发酵结束后取发酵液，经测定，该发酵液中levan的质量百分比含量为1.68％。

(2)将蔗糖、甜蜜素、安赛蜜分别以75g/L、0.5g/L、0.5g/L的比例完全溶解于50℃的水中制得含有15.7％的蔗糖甜度的甜味勾兑液，将柠檬酸、醋酸分别以500g/L的比例完全溶解于50℃的水中制得酸味勾兑液。将上述发酵液与甜味勾兑液以1：2.00(v/v)充分混合均匀，再与酸味勾兑液缓慢混合直至酸度为66°T，然后在25MP压力下进行均质，并于110℃灭菌20min，灌装，得本实施例的果蔬汁饮料产品F。

经检测，本实施例生产的富含果聚糖levan的果蔬汁饮料中levan质量百分比含量为0.56％，甜度为含有10.8％的蔗糖甜度，酸度66°T。

对比例1

将实施例1中的接种量，培养基pH，培养温度，发酵时间，发酵震荡的速度以及蔗糖浓度逐一进行调整，获得了以下一组不同方法制备的果蔬汁发酵液，各组所得果蔬汁发酵液中的levan含量如表1所示。

表1不同方法制备所得果蔬汁发酵液levan含量

从表1所示的结果中可以得出，将所述果蔬汁发酵液的制备方法中接种量，培养基pH，培养温度，发酵时间，发酵震荡的速度以及蔗糖浓度调整到本发明请求保护范围之外的时候，所得果蔬汁发酵液中果聚糖的含量显著降低。

效果实施例1产品口味与喜好程度测试

以上述实施例所制备的果蔬汁饮料产品A、B、C、D和E为实验对象，进行产品的口味测试。测试人数50人。品尝方式：采用不记名打分的方式进行品尝；分别对上述果蔬汁饮料产品A、B、C、D和E的色泽、酸甜比、风味、口感、营养项进行单独打分，每一项满分是20分，计算平均分及其总分，统计结果记录于表2。同时，根据对产品的整体喜好程度给出的意见，统计对每个单品的喜好人数，统计结果记录于表3。

表2产品口味测试结果数据统计表

表3产品喜好程度测试结果数据统计表

从产品口味测试和喜好程度统计结果可以看出，总体而言，本发明的富含果聚糖的果蔬汁饮料在产品风味、口感、营养方面可被大部分消费者所接受。

效果实施例2产品中果聚糖的稳定性实验

以上述实施例所制备的果蔬汁饮料产品A、B、C、D和E为实验对象，在常温条件下放置，根据实施例1中所述方法测定不同放置时间内产品中的果聚糖含量，结果见表4。

表4产品中果聚糖含量的变化

由上表结果可以看出，本发明的果蔬汁饮料在常温保存90天期间内，其中的果聚糖未发生降解，含量稳定不变。

应理解，在阅读了本发明的上述内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种富含果聚糖的果蔬汁的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：将柠檬明串珠菌(Leuconostoccitreum)发酵菌种在番茄汁蔗糖培养基中发酵培养，即得。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的发酵菌种的接种量为0.5％～4.0％，所述百分比为体积百分比。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的番茄汁蔗糖培养基的制备方法包括以下步骤：番茄榨汁，将所得榨汁过滤后煮沸，离心取上清液，与蔗糖混合后加热冷却，调节pH值，灭菌后冷却即得，其中所述过滤的方法为利用80～120目纱布过滤取汁，所述煮沸的时间为1～10分钟，所述离心的速度为4,000～12,000g，离心的时间为8～12分钟，蔗糖加入量为5～30％，所述灭菌的温度为110～135℃，灭菌的时间为10～30分钟，pH值为4.5～7.5，所述百分比为质量百分比。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的发酵培养的温度为20℃～35℃，所述的发酵培养为震荡发酵培养，振荡的速度为100～300rpm，发酵培养的时间为24～120小时。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的柠檬明串珠菌发酵菌种为保藏号为CGMCCNo.6431的柠檬明串珠菌株。

6.一种富含果聚糖的果蔬汁饮料，其特征在于，所述果蔬汁饮料包括如权利要求1所述的果蔬汁的制备方法制备所得的果蔬汁，甜味料，酸味剂和水。

7.如权利要求6所述的果蔬汁饮料，其特征在于，所述甜味料为选自蔗糖、果葡糖浆、阿斯巴甜、甜蜜素和安赛蜜中的一种或多种；所述甜味料的含量为使所述的果蔬汁饮料的蔗糖甜度为10％～12％；所述的酸味剂为柠檬酸、苹果酸、酒石酸、乳酸和醋酸中的一种或多种；所述的酸味剂的含量为使所述的果蔬汁饮料的滴定酸度为60°T～70°T。

8.一种富含果聚糖的果蔬汁饮料的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：将权利要求1所述的果蔬汁与甜味料混合，利用酸味剂将所得混合液的酸度调节为60°T～70°T，均质，灭菌即得。

9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述的果蔬汁与甜味料混合的方法为：将所述果蔬汁与含有甜味料的勾兑液混合，所述甜味料为选自蔗糖、果葡糖浆、阿斯巴甜、甜蜜素和安赛蜜中的一种或多种，所述勾兑液中甜味料的含量为0.02％～11.83％，所述百分比为质量百分比，所述的果蔬汁与所述的勾兑液混合的体积比为1:1.5～1:4.52，所述的均质的压力为15～30MP；所述灭菌的温度为95℃～125℃；灭菌的时间为5分钟～30分钟。

10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述的果蔬汁与所述的勾兑液混合的体积比为1:3.35～1:4.52，所述的均质的压力为20～28MP；所述灭菌的温度为100～120℃；灭菌的时间为15～25分钟。