CN108034612A - 一种高产胞外多糖菌株及其多糖分离纯化方法 - Google Patents

一种高产胞外多糖菌株及其多糖分离纯化方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108034612A
CN108034612A CN201810036104.6A CN201810036104A CN108034612A CN 108034612 A CN108034612 A CN 108034612A CN 201810036104 A CN201810036104 A CN 201810036104A CN 108034612 A CN108034612 A CN 108034612A
Authority
CN
China
Prior art keywords
extracellular polysaccharide
polysaccharide
purification process
separation
yield
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810036104.6A
Other languages
English (en)
Inventor
周志江
冯芳
韩烨
肖华志
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tianjin University
Original Assignee
Tianjin University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tianjin University filed Critical Tianjin University
Priority to CN201810036104.6A priority Critical patent/CN108034612A/zh
Publication of CN108034612A publication Critical patent/CN108034612A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种高产胞外多糖菌株及其多糖分离纯化方法。该菌株命名为柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B‑2，于2017年12月04日保藏至中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.15014。本发明从菠萝自然发酵液中分离筛选出一株高产胞外多糖的乳酸菌，经鉴定为柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)。将柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B‑2接种于产糖发酵培养基中培养得到发酵液，离心去除菌体，用乙醇沉淀，获得粗多糖；将粗多糖进行纯化，即得胞外多糖。经结构性质测定，该多糖为葡聚糖，呈高度分支结构。这种纯化方法纯度好、产糖量高、操作简便。本发明用于产胞外多糖。本发明技术方案拓展了产胞外多糖的微生物菌种来源，并提供了一种乳酸菌产胞外多糖纯化的新方法。

Description

一种高产胞外多糖菌株及其多糖分离纯化方法
技术领域
本发明涉及一种高产胞外多糖菌株及其多糖分离纯化方法。
背景技术
胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)是微生物(如细菌、酵母、真菌)在生长过程中分泌到细胞外的粘液或荚膜多糖。在众多产胞外多糖的微生物中，乳酸菌(lactic acidbacteria,LAB)具有发酵周期短、营养要求简单等优越性，成为微生物胞外多糖的理想来源。乳酸菌胞外多糖已作为稳定剂、增稠剂被用于酸奶、奶酪等发酵奶制品的生产中。此外，乳酸菌胞外多糖还有降低胆固醇、抗氧化、抗肿瘤、对消化道的调节等作用。与其他多糖相比，乳酸菌胞外多糖的研究更具有实际价值，乳酸菌生长极为迅速，它的胞外多糖提取工艺更简单，安全性较高、价格便宜，比其他微生物多糖更适用于人类。因此，挖掘自然界中丰富的乳酸菌资源，发现高产胞外多糖的乳酸菌细菌菌株，以短周期、低成本获得更多的胞外多糖，一直是微生物学领域的研究热点。
此前，有研究者为得到纯的胞外多糖，采用固体培养基，直接从培养基表面提取胞外多糖，此法对操作者要求高，且培养基不能被充分利用，产糖量很低，造成成本浪费。
发明内容
本发明的目的是为了拓展产胞外多糖的微生物菌种来源，提供一种乳酸菌胞外多糖的分离纯化新方法。
所述胞外多糖菌株为柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B-2，已于2017年12月04日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(北京市朝阳区北辰路1号院3号中国科学院微生物研究所)，保藏编号为CGMCC No.15014。该菌株经16S rRNA基因测序的结果见序列表SEQ ID NO:1。
所述高产胞外多糖菌株为革兰氏阳性细菌，不产芽孢和鞭毛，兼性厌氧，能以多种糖类为碳源进行乳酸发酵。菌落为圆形，不透明，灰白色，边缘整齐，略突起，正反面颜色一致，中央与边缘颜色一致。发酵葡萄糖产酸产气，接触酶阴性，不水解精氨酸，不产吲哚。微生物生理生化试验说明具有明串株菌属(Leuconostoc)的特性。
本发明胞外多糖分离纯化方法，按以下步骤进行：
1)将柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B-2接种于产糖发酵培养基中培养得到发酵液。将发酵液进行低温高速离心，去除菌体，取上清。
2)将离心去除菌体后的上清用乙醇沉淀，静置，离心，取沉淀。
3)将沉淀溶解于蒸馏水中，在溶液中加入三氯乙酸溶液以沉淀蛋白质，连续搅拌，离心，取上清液。
4)将上清液用乙醇沉淀，静置，离心，取沉淀。
5)将沉淀再溶解于蒸馏水中，进行透析，得到粗多糖溶液。
6)将粗多糖进行凝胶柱层析，得到纯胞外多糖。
在步骤1)中，所述离心温度为4℃，离心时间为30～40min，离心转速为4000rpm。
在步骤2)所述乙醇浓度为95％，预冷温度为-20℃，乙醇:发酵液＝3:1，静置时间为12～24h，离心温度为4℃，离心时间为50～60min，离心转速为12000rpm。
在步骤3)中所述加入80％三氯乙酸溶液至终浓度浓度为5％，连续搅拌3～4h，离心温度为4℃，离心时间为50～60min，离心转速为12000rpm。
在步骤4)中所述乙醇浓度为95％，预冷温度为-20℃，乙醇:上清液＝3:1，静置12h，离心温度为4℃，离心时间为50～60min，离心转速为12000rpm。
在步骤5)中所述于4℃冰箱透析48h，每8h换水一次。
在步骤6)中所述纯化采用G-100凝胶过滤层析对多糖进行纯化，采用真空冷冻干燥法得到多糖产量为28.32±1.87g/L。
本发明的有益效果为：本发明通过系列生物化学技术获得菌株发酵产物胞外多糖，采用现代提取技术对发酵液提取纯化获得高纯度多糖。经过系列实验验证，说明所获的菌株具有明串珠菌属的特性，在底物蔗糖的诱导下，产生大量胞外多糖。因此，柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B-2在产糖发酵培养基中发酵而得的发酵液中，含有胞外多糖，具有产糖周期短、产糖量高的优点。经结构性质测定，该多糖为葡聚糖，呈高度分支结构，直链部分含75％α-(1→6)糖苷键，支链部分含19％α-(1→3)糖苷键和少许α-(1→2)糖苷键。本发明技术采用液体培养基，既能充分利用培养基且产糖量可观，配合其他技术也保证了多糖的纯度。
附图说明
图1是柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B-2产黏菌落形态；
图2是柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B-2胞外多糖凝胶过滤层析图谱；
图3是柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B-2纯胞外多糖紫外光谱图；
图4是柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B-2纯胞外多糖气相色谱图；
图5是柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B-2纯胞外多糖傅里叶红外色谱图；
图6是柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B-2纯胞外多糖一维核磁共振波谱图，图(a)、图(b)分别为一维氢谱图和一维碳谱图。
具体实施方式
实施例1：一种高产胞外多糖菌株的分离筛选
1)培养基
MRS基础培养基：葡萄糖20g，胰蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母提取物5g，柠檬酸铵2g，K2HPO4 2g，CH3COONa 5g，MgSO4·7H2O 0.58g，MnSO4·H2O 0.25g，吐温80 1mL，蒸馏水1000mL，pH值6.5，115℃灭菌20min。
MRS产糖发酵培养基：蔗糖75g，胰蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母提取物5g，K2HPO42g，CH3COONa 5g，柠檬酸铵2g，MgSO4·7H2O 0.58g，MnSO4·H2O 0.25g，吐温80 1mL，蒸馏水1000mL，pH值6.5，115℃灭菌20min。
2)样品预处理
取菠萝发酵液1mL加入装有9mL的无菌生理盐水中，制成10-1浓度的样品液，震荡混匀后逐级稀释到适宜浓度，静置备用。
3)产粘菌落初筛
取上述各稀释度的菌液50μL涂布于产糖培养基琼脂平板中，于30℃恒温培养箱中培养24-48h。挑取平板上产粘的菌落区域，于产糖培养基琼脂平板上反复三区划线，得到纯培养物的平板置于4℃冰箱保存。
4)菌株复筛
将从平板上得到的纯培养物接种到MRS液体培养基中培养18h，再按2％(v/v)的接种量接种到产糖液体培养基中，于30℃培养48h。取发酵液于90℃水浴中加热10min，除去菌液中可能降解多糖的酶，冷却到室温。向发酵液中加入80％三氯乙酸溶液至终浓度为5％(m/v)，室温下搅拌2h，12000rpm 4℃离心40min，去除细胞和蛋白沉淀。上清液装入透析袋中(截留分子量14000Da)，4℃冰箱中超纯水透析2d，每8h换一次水。定容后，采用苯酚硫酸法测定菌株产胞外多糖的产量。结合产粘菌落的粘液浓度，选取多糖产量较高的菌株。
实施例2：一种高产胞外多糖菌株的鉴定
经典的微生物生化检验说明，所获得的高产胞外多糖菌株具有明串珠菌属(Leuconostoc)的特性，革兰氏阳性细菌，不产芽孢和鞭毛，兼性厌氧。菌落为圆形，不透明，灰白色，边缘整齐，略突起，正反面颜色一致，中央与边缘颜色一致。
本菌株不发酵半乳糖、乳糖、麦芽糖和棉籽糖。能够利用葡萄糖产酸产气，接触酶阴性，不水解精氨酸，不产吲哚。精氨酸产氨试验、H2S试验，淀粉水解试验，明胶液化试验均为阴性。
根据其生理生化特性及16S rRNA序列分析的结果，经中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)鉴定为(Leuconstoc citreum)B-2菌株，并进行保藏，保藏编号为CGMCCNo.15014。
实施例3：一种高产胞外多糖菌株发酵产胞外多糖的分离纯化工艺
1)粗多糖制备
将活化好的柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B-2菌液按2％(v/v)的接种量接种到产糖发酵培养基中，30℃，120rpm培养48h得到胞外多糖发酵液。将500mL发酵液4℃，12000rpm离心40min，除去菌体。上清液加入3倍体积的预冷95％乙醇，4℃孵化过夜以沉淀多糖。4℃，12000rpm离心50min收集多糖沉淀，用250mL超纯水30～40℃溶解多糖沉淀，加入250mL(与溶解多糖所用的超纯水等体积)10％三氯乙酸溶液除去蛋白，4℃静置10h，4℃，12000rpm离心40min收集上清液。加入3倍体积的预冷95％乙醇，4℃孵化过夜以沉淀多糖。4℃，12000rpm离心40min收集多糖沉淀，重溶于超纯水中(大约200mL)，装入透析袋(截留分子量14000Da)中，4℃蒸馏水透析2d，每8h换一次水。最终得到粗多糖的水溶液，4℃冰箱保存。
2)多糖纯化
取上述粗多糖的水溶液直接或先适度稀释后进行G-100凝胶过滤层析。将预处理的Sephadex G-100凝胶进行装柱并保证体系密封。基线调稳1h后方可进样，上样量为1-3mL，缓冲液为蒸馏水，流速为0.2mL/min。开始出峰后手动收集洗脱液，将收集的洗脱液-20℃预冷30min后进行真空浓缩冷冻干燥，-50℃干燥24h后得到纯多糖，之后进行精确称重，计算多糖产量。
3)多糖纯度鉴定
准确称取纯化后的多糖5mg，溶于5mL超纯水中，制成1mg/mL的多糖溶液，用紫外可见光谱仪于190-350nm波段进行紫外扫描，检测多糖纯度。
本实施例获得的发酵液中获得胞外多糖的含量为28.32±1.87g/L，无蛋白及核酸污染，纯度高。
实施例4：一种胞外多糖的结构性质测定
1)多糖的单糖组成
称取10mg纯多糖样品放入安瓿瓶中，加入2mL 2mol/L的三氟乙酸，用酒精喷灯封口，于烘箱中120℃水解6h，冷却至室温，采用加蒸馏水反复减压蒸干的方法除去残余的TFA，然后加少量水溶解，冷冻干燥，即得完全酸水解单糖样品。单糖衍生化后采用气相色谱测多糖单糖组成。
2)多糖傅里叶变换红外光谱分析
本实验采用溴化钾(KBr)压片法。将已经冷冻干燥过的多糖样品和KBr粉末置于真空干燥箱中干燥2h，保证多糖样品和KBr的干燥性。将多糖样品与KBr按约1:100的比例混合研磨均匀，压片器压制成0.1mm厚度的薄片，于红外光谱仪上进行检测，检测器分辨率1cm-1，扫描范围4000-400cm-1，记录红外光谱图。
3)核磁共振光谱分析
取冷冻干燥后的多糖样品30mg溶于0.55mL D2O中，离心取上清液，冻干再溶解，反复重水交换2-3次，然后装入核磁管中密封。利用400M Bruker液体核磁共振仪测定多糖样品的一维氢谱和碳谱谱图。
本实施例测得的多糖为葡聚糖，其结构为直链部分含75％α-(1→6)糖苷键，支链部分含19％α-(1→3)糖苷键和少许α-(1→2)糖苷键。
序列表
<110> 天津大学
<120> 一种高产胞外多糖菌株及其多糖分离纯化方法
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1436
<212> DNA
<213> 柠檬明串珠菌B-2(Leuconstoc citreumB-2)
<400> 1
atactgtcgt accgacagcg atgacagcac gatgacgtgc ttgcaccttt caagcgagtg 60
gcgaacgggt gagtaacacg tggataacct gcctcaaggc tggggataac atttggaaac 120
agatgctaat accgaataaa acttagtatc gcatgatatc aagttaaaag gcgctacggc 180
gtcacctaga gatggatccg cggtgcatta gttagttggt ggggtaaagg cttaccaaga 240
cgatgatgca tagccgagtt gagagactga tcggccacat tgggactgag acacggccca 300
aactcctacg ggaggctgca gtagggaatc ttccacaatg ggcgcaagcc tgatggagca 360
acgccgcgtg tgtgatgaag gctttcgggt cgtaaagcac tgttgtatgg gaagaaatgc 420
taaaataggg aatgatttta gtttgacggt accataccag aaagggacgg ctaaatacgt 480
gccagcagcc gcggtaatac gtatgtcccg agcgttatcc ggatttattg ggcgtaaagc 540
gagcgcagac ggttgattaa gtctgatgtg aaagcccgga gctcaactcc ggaatggcat 600
tggaaactgg ttaacttgag tgttgtagag gtaagtggaa ctccatgtgt agcggtggaa 660
tgcgtagata tatggaagaa caccagtggc gaaggcggct tactggacaa caactgacgt 720
tgaggctcga aagtgtgggt agcaaacagg attagatacc ctggtagtcc acaccgtaaa 780
cgatgaatac taggtgttag gaggtttccg cctcttagtg ccgaagctaa cgcattaagt 840
attccgcctg gggagtacga ccgcaaggtt gaaactcaaa ggaattgacg gggacccgca 900
caagcggtgg agcatgtggt ttaattcgaa gcaacgcgaa gaaccttacc aggtcttgac 960
atcctttgaa gcttttagag atagaagtgt tctcttcgga gacaaagtga caggtggtgc 1020
atggtcgtcg tcagctcgtg tcgtgagatg ttgggttaag tcccgcaacg agcgcaaccc 1080
ttattgttag ttgccagcat tcagttgggc actctagcga gactgccggt gacaaaccgg 1140
aggaaggcgg ggacgacgtc agatcatcat gccccttatg acctgggcta cacacgtgct 1200
acaatggcgt atacaacgag ttgccaacct gcgaaggtga gctaatctct taaagtacgt 1260
ctcagttcgg actgcagtct gcaactcgac tgcacgaagt cggaatcgct agtaatcgcg 1320
gatcagcacg ccgcggtgaa tacgttcccg ggtccttgta cacaccgccc gtcacaccat 1380
gggagtttgt aatgcccaaa gccgcgtggc agtatagcac tctatggctc gaatcg 1436

Claims (8)

1.一种高产胞外多糖菌株，其为柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B-2，于2017年12月04日保藏至中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.15014。
2.一种高产胞外多糖菌株胞外多糖的分离纯化方法，其特征在于，采取如权利要求1所述的胞外多糖菌株，包括以下步骤：
(1)将柠檬明串珠菌(Leuconstoc citreum)B-2接种于产糖发酵培养基中培养得到发酵液，将发酵液进行低温高速离心，去除菌体，取上清；
(2)将离心去除菌体后的上清用乙醇沉淀，静置，离心，取沉淀；
(3)将沉淀溶解于蒸馏水中，在溶液中加入三氯乙酸溶液以沉淀蛋白质，连续搅拌，离心，取上清液；
(4)将上清液用乙醇沉淀，静置，离心，取沉淀；
(5)将沉淀再溶解于蒸馏水中，进行透析，得到粗多糖溶液；
(6)将粗多糖进行凝胶柱层析，得到纯胞外多糖。
3.根据权利要求2所述的一种高产胞外多糖菌株的多糖分离纯化方法，其特征在于步骤(1)所述离心温度为4℃，离心时间为30～40min，离心转速为4000rpm。
4.根据权利要求2所述的一种高产胞外多糖菌株的多糖分离纯化方法，其特征在于步骤(2)所述乙醇浓度为95％，预冷温度为-20℃，乙醇:发酵液＝3:1，静置时间为12～24h，离心温度为4℃，离心时间为50～60min，离心转速为12000rpm。
5.根据权利要求2所述的一种高产胞外多糖菌株的多糖分离纯化方法，其特征在于步骤(3)中所述加入80％三氯乙酸溶液至终浓度为5％，连续搅拌3～4h，离心温度为4℃，离心时间为50～60min，离心转速为12000rpm。
6.根据权利要求2所述的一种高产胞外多糖菌株的多糖分离纯化方法，其特征在于步骤(4)中所述乙醇浓度为95％，预冷温度为-20℃，乙醇:上清液＝3:1，静置12h，离心温度为4℃，离心时间为50～60min，离心转速为12000rpm。
7.根据权利要求2所述的一种高产胞外多糖菌株的多糖分离纯化方法，其特征在于步骤(5)中所述透析为于4℃冰箱透析48h，每8h换水一次。
8.根据权利要求2所述的一种高产胞外多糖菌株的多糖分离纯化方法，其特征在于所述步骤(6)中所述采用葡聚糖凝胶G-100过滤层析对多糖进行纯化。
CN201810036104.6A 2018-01-15 2018-01-15 一种高产胞外多糖菌株及其多糖分离纯化方法 Pending CN108034612A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810036104.6A CN108034612A (zh) 2018-01-15 2018-01-15 一种高产胞外多糖菌株及其多糖分离纯化方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810036104.6A CN108034612A (zh) 2018-01-15 2018-01-15 一种高产胞外多糖菌株及其多糖分离纯化方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108034612A true CN108034612A (zh) 2018-05-15

Family

ID=62096676

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810036104.6A Pending CN108034612A (zh) 2018-01-15 2018-01-15 一种高产胞外多糖菌株及其多糖分离纯化方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108034612A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108823127A (zh) * 2018-06-22 2018-11-16 天津大学 用于产α-淀粉酶的菌株和α-淀粉酶的分离纯化方法
CN111254102A (zh) * 2020-04-29 2020-06-09 中国农业大学 柠檬明串珠菌及其在沉淀淀粉浆液中的应用
CN113755372A (zh) * 2021-08-31 2021-12-07 中国科学院天津工业生物技术研究所 一株产胞外多糖的谷氨酸棒杆菌及其应用
CN114316079A (zh) * 2021-01-11 2022-04-12 暨南大学 一种硫还原地杆菌胞外多糖的提取纯化方法
CN115895978A (zh) * 2022-12-29 2023-04-04 江苏省农业科学院 一株柠檬明串珠菌及其应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20130132140A (ko) * 2012-05-25 2013-12-04 연세대학교 산학협력단 김치유산균으로 발효된 쌀 및 이의 용도
CN105054173A (zh) * 2015-08-27 2015-11-18 光明乳业股份有限公司 一种富含果聚糖的果蔬汁饮料及其制备方法
CN105076406A (zh) * 2015-08-27 2015-11-25 光明乳业股份有限公司 一种富含果聚糖的发酵乳饮料及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20130132140A (ko) * 2012-05-25 2013-12-04 연세대학교 산학협력단 김치유산균으로 발효된 쌀 및 이의 용도
CN105054173A (zh) * 2015-08-27 2015-11-18 光明乳业股份有限公司 一种富含果聚糖的果蔬汁饮料及其制备方法
CN105076406A (zh) * 2015-08-27 2015-11-25 光明乳业股份有限公司 一种富含果聚糖的发酵乳饮料及其制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
YANPING YANG 等: "Isolation and characterization of dextran produced by Leuconostoc citreum NM105 from manchurian sauerkraut", 《CARBOHYDRATE POLYMERS》 *
杨燕萍: "产胞外多糖乳酸菌的筛选及其多糖的结构研究", 《万方学位论文数据库》 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108823127A (zh) * 2018-06-22 2018-11-16 天津大学 用于产α-淀粉酶的菌株和α-淀粉酶的分离纯化方法
CN111254102A (zh) * 2020-04-29 2020-06-09 中国农业大学 柠檬明串珠菌及其在沉淀淀粉浆液中的应用
CN111254102B (zh) * 2020-04-29 2020-09-08 中国农业大学 柠檬明串珠菌及其在沉淀淀粉浆液中的应用
WO2021218130A1 (zh) * 2020-04-29 2021-11-04 中国农业大学 柠檬明串珠菌及其在沉淀淀粉浆液中的应用
CN114316079A (zh) * 2021-01-11 2022-04-12 暨南大学 一种硫还原地杆菌胞外多糖的提取纯化方法
CN113755372A (zh) * 2021-08-31 2021-12-07 中国科学院天津工业生物技术研究所 一株产胞外多糖的谷氨酸棒杆菌及其应用
CN113755372B (zh) * 2021-08-31 2023-10-17 中国科学院天津工业生物技术研究所 一株产胞外多糖的谷氨酸棒杆菌及其应用
CN115895978A (zh) * 2022-12-29 2023-04-04 江苏省农业科学院 一株柠檬明串珠菌及其应用
CN115895978B (zh) * 2022-12-29 2024-02-20 江苏省农业科学院 一株柠檬明串珠菌及其应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108034612A (zh) 一种高产胞外多糖菌株及其多糖分离纯化方法
Hehre et al. Formation of serologically reactive dextrans by streptococci from subacute bacterial endocarditis
CN104293699B (zh) 一株具有γ‑氨基丁酸和谷胱甘肽合成能力的嗜热链球菌及其应用
CN103190478B (zh) 含Levan果聚糖的酸奶的制备方法
CN104498402B (zh) 一株具有生理活性产胞外多糖植物乳杆菌及其应用
CN103695341B (zh) 一种由海洋细菌分泌的褐藻胶裂解酶及其制备方法
Sawale et al. Statistical optimization of media for dextran production by Leuconostoc sp., isolated from fermented idli batter
CN106520641B (zh) 一种解淀粉芽孢杆菌及其胞外多糖的制备方法
CN103468611B (zh) 发酵培养基及制备方法和应用、乳酸菌葡聚糖的制备方法
CN106399195B (zh) 一种干酪乳杆菌及其应用
CN111621448A (zh) 一株贝莱斯芽孢杆菌sn-1及其发酵生产胞外多糖的方法
CN104893997B (zh) 一种低温生产几丁质酶的菌株及其发酵方法
CN105462874A (zh) 一种丁酸梭菌及其在厌氧发酵产氢中的应用
Bomrungnok et al. Single Step Lactic Acid Production from Cassava Starch by Laactobacillus plantarum SW14 in Conventional Continuous and Continuous with High Cell Density
CN108018247B (zh) 一种高产直链葡聚糖菌株及其葡聚糖发酵生产方法
Kojima et al. Characterization of levan produced by Serratia sp.
CN104164385A (zh) 一株少动鞘氨醇单胞菌菌株gxas-815及其应用
CN108018226A (zh) 一种高产胞外多糖菌株及其多糖发酵生产方法
CN104651284A (zh) 鞘氨醇单胞菌T-3及其共发酵生产生物多糖和聚β羟基丁酸的方法
CN115851497B (zh) 一株耐牛胆汁型牛黄转化菌及其应用
CN104046585A (zh) 一种动物双歧杆菌细菌素及其生产方法与专用生产菌株
CN111592999B (zh) 一种简单芽孢杆菌及其生产低温淀粉酶的应用
CN112852681B (zh) 发酵乳杆菌及应用、发酵酸浆及制备方法、淀粉沉淀剂
CN112143663B (zh) 一株贝莱斯芽孢杆菌株及其在合成γ-聚谷氨酸中的应用
CN112080448B (zh) 一种菌发酵生产海藻糖酶的培养基及方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20180515

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication