CN104956914A - 一种野生灵芝的育种方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种野生灵芝的育种方法，属于食用菌遗传选育技术领域。其包括如下步骤：(1)野生灵芝采集；(2)配制试管斜面培养基；(3)组织分离；(4)菌种接种和培养；(5)接种与培养。本发明的育种方法所分离出的野生灵芝母种朵形大、产量高、抗杂菌能力强，能解决野生灵芝的培养扩大问题，且成品率高。

Description

一种野生灵芝的育种方法
技术领域
本发明涉及一种野生灵芝的育种方法，属于食用菌遗传选育技术领域。
背景技术
野生灵芝,又称仙草、瑞草、灵芝草,属担子菌纲多孔菌科灵芝属,是一种以孢子进行有性繁殖、以木质素为主要碳源养分的药用真菌,自古以来就被我国人民当做中草药利用。灵芝，味甘、性平，归心、肺、肝、肾经，具有补气养血、养心安神、止咳平咳之功效，主治虚劳、咳嗽、气喘、失眠、消化不良、恶性肿瘤等病症。
灵芝的菌丝体、子实体和孢子都可入药，以紫灵芝药效为最好。紫芝主要含麦角甾醇、有机酸、氨基葡萄糖、多糖类、树脂、甘露醇和多糖醇等麦角甾醇、树脂、脂肪酸、甘露醇和多糖类，又含生物碱、内酯、香豆精、水溶性蛋白质和多种酶类。
现代科学证明，灵芝具有滋补、健脑强壮、消炎利尿健胃、抗肿瘤、镇痛、祛痰、保肝解毒、调节血糖、控制血压、辅助肿瘤放化疗、保肝护肝、促进睡眠、提高人体免疫力等功能，还能治疗慢性支气管炎、心脑血管疾病、冠心病、神经衰弱、失眠、糖尿病、偏头痛、血细胞减少症、心肌炎，以及阳痿遗精、频繁性感冒、消除皮肤黑斑、青春痘。
由于野生灵芝极少，远远不能满足人们需求。目前，有关野生灵芝育种方法的报道也相对较少。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种野生灵芝的育种方法，该育种方法能解决野生灵芝的培养扩大问题，且成品率高。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种野生灵芝的育种方法，包括如下工艺步骤：
(1)野生灵芝采集：采集在海拔800～1900m高山生长的野生灵芝；
(2)配制试管斜面培养基：
①配制母种培养基；
②制作试管斜面培养基：将步骤①所得母种培养基分装于试管中，高压灭菌30～50分钟，制成试管斜面培养基后，冷却；
(3)组织分离：取步骤(1)所得野生灵芝的子实体，用水冲洗干净，切去菌柄，再消毒并洗净后吸干水分，将菌盖切成两半，在菌盖和菌柄连接中央处割成3～5mm的菌肉组织片，置于无菌培养皿内，再将组织片接种于步骤(2)②得到的试管斜面培养基上，培养，上述操作均在无菌条件下进行，即得组织分离的母种；
(4)菌种接种和培养：将步骤(3)所得组织分离的母种，在无菌状态下，接种于步骤(2)②得到的的试管斜面培养基上，继续培养，待试管上长满菌丝，即得二次母种，并于5～6℃保存；将二次母种在无菌条件下，转移到另一支步骤(2)②得到的试管斜面培养基中，即得栽培母种；
(5)接种与培养：将步骤(4)所得栽培母种接种于原种培养基中，培养，即得原种；再将上述原种接种于栽培种培养基，培养，即得栽培种。
在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。
进一步，步骤(1)所述野生灵芝为紫芝，形状为盖圆形或偏半圆形、直径为25～35cm、柄长为8～15cm、颜色为紫黑色。
进一步，步骤(2)所述母种培养基为以下三种培养基中的一种或几种：
a、糯米培养基：取糯米100g、葡萄糖25g、琼脂20g、水1000mL，将糯米加水，文火煮20～30分钟，用2层纱布过滤，取汁液，然后将上述汁液补充到1000mL；
b、马铃薯培养基：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL，马铃薯切片，加水1000mL，文水煮沸15～20分钟，4层纱布过滤，取汁液，然后将上述汁液补充到1000mL；
c、综合培养基：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B110mg、琼脂20g。
进一步，步骤(3)所述子实体的性状为出菇早、正常、健壮、朵形大、未成熟，所述消毒并洗净后吸干水分的具体方法为用体积分数为75％的酒精消毒，然后用无菌水冲洗，用无菌纱布吸干水分，所述培养的温度为25～30℃、环境为黑暗、培养的时间为10～15天。
进一步，步骤(4)所述继续培养的温度25～30℃、环境为黑暗、培养的时间为10～15天。
进一步，步骤(5)中原种培养基包括质量百分数为70％的玉米粒、24％的木屑、5％的麦麸、1％的石膏，其制作方法为：取质量百分数为24％的木屑，先预湿，取质量百分数为70％的玉米粒，用质量百分数为0.3％的多菌灵浸泡15～20小时，用清水过滤一次，再取质量百分数为5％的麦麸、1％的石膏，然后将上述木屑、玉米粒、麦麸、石膏拌匀后装袋，即得原种培养基袋，在≤10h内，置于灭菌锅中，升温至100℃，开始计时，灭菌20～25小时，然后待上述原种培养基袋完全冷却后，移至接种箱，将接种箱密封，消毒1～2小时后，备用。
进一步，步骤(5)所述栽培种培养基为以下两种培养基中的一种或两种的混合：
a、包括质量百分数为50％的玉米粒、42％的木屑、7％的麦麸、1％的石膏，其制作方法为：取质量百分数为42％的木屑，先预湿，取质量百分数为50％的玉米粒，用质量百分数为0.3％的多菌灵浸泡15～20小时，用清水过滤一次，再取质量百分数为7％的麦麸、1％的石膏，然后将上述木屑、玉米粒、麦麸、石膏拌匀后装袋，即得栽培种培养基菌袋，在≤10h内，置于灭菌锅中，升温至100℃，开始计时，灭菌20～25小时，然后待上述栽培种培养基菌袋完全冷却后，移至接种箱，将接种箱密封，消毒1～2小时后，备用；
b、包括质量百分数为70％的玉米粒、24％的木屑、5％的麦麸、1％的石膏，其制作方法为：取质量百分数为24％的木屑，先预湿，取质量百分数为70％的玉米粒，用质量百分数为0.3％的多菌灵浸泡15～20小时，用清水过滤一次，再取质量百分数为5％的麦麸、1％的石膏，然后将上述木屑、玉米粒、麦麸、石膏拌匀后装袋，即得栽培种培养基菌袋，在≤10h内，置于灭菌锅中，升温至100℃，开始计时，灭菌20～25小时，然后待上述栽培种培养基菌袋完全冷却后，移至接种箱，将接种箱密封，消毒1～2小时后，备用。
进一步，步骤(5)所述培养的温度均为25～30℃，环境均为黑暗环境，培养的时间均至菌丝长满菌袋为止。
本发明的有益效果：
(1)本发明的育种方法所分离出的野生灵芝母种朵形大、产量高、抗杂菌能力强。
(2)本发明采用糯米培养基作为母种培养基，具有菌丝粗壮洁白、不易老化、菌丝生活力强等特点。
(3)本发明的原种培养基和栽培种培养基均采用玉米粒培养基，得到的菌种菌丝洁白、旺盛、生长快，萌发率100％，具有生长快、产量高的特点，一般1m3的杂木菌筒6～7年产干品40～60kg。
(4)本发明的育种方法能解决野生灵芝的培养扩大问题，且成品率高。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
实施例1：
(1)野生灵芝采集：采集在海拔800～1900m高山生长的野生灵芝，所述野生灵芝为紫芝，形状为盖圆形或偏半圆形、直径为25～35cm、柄长为8～15cm、颜色为紫黑色；
(2)配制试管斜面培养基：
①配制母种培养基：选取糯米培养基：取糯米100g、葡萄糖25g、琼脂20g、水1000mL，将糯米加水，文火煮20～30分钟，用2层纱布过滤，取汁液，然后将上述汁液补充到1000mL；
②制作试管斜面培养基：将步骤①所得母种培养基分装于试管中，高压灭菌30～50分钟，制成试管斜面培养基后，冷却；
(3)组织分离：取步骤(1)所得野生灵芝的子实体，所述子实体的性状为出菇早、正常、健壮、朵形大、未成熟，用水冲洗干净，切去菌柄，再用体积分数为75％的酒精消毒，然后用无菌水冲洗，用无菌纱布吸干水分，将菌盖切成两半，在菌盖和菌柄连接中央处割成3～5mm的菌肉组织片，置于无菌培养皿内，再将组织片接种于步骤(2)②得到的试管斜面培养基上，培养，在温度为25～30℃的黑暗环境下培养10～15天，上述操作均在无菌条件下进行，即得组织分离的母种；
(4)菌种接种和培养：将步骤(3)所得组织分离的母种，在无菌状态下，接种于步骤(2)②得到的的试管斜面培养基上，继续在温度为25～30℃的黑暗环境下培养10～15天，待试管上长满菌丝，即得二次母种，并于5～6℃保存；将二次母种在无菌条件下，转移到另一支步骤(2)②得到的试管斜面培养基中，即得栽培母种；
(5)接种与培养：将步骤(4)所得栽培母种接种于原种培养基中，在温度为25～30℃的黑暗环境下培养至菌丝长满菌袋为止，即得原种；再将上述原种接种于栽培种培养基，在温度为25～30℃的黑暗环境下培养至菌丝长满菌袋为止，即得栽培种；
其中，原种培养基包括质量百分数为70％的玉米粒、24％的木屑、5％的麦麸、1％的石膏，其制作方法为：取质量百分数为24％的木屑，先预湿，取质量百分数为70％的玉米粒，用质量百分数为0.3％的多菌灵浸泡15～20小时，用清水过滤一次，再取质量百分数为5％的麦麸、1％的石膏，然后将上述木屑、玉米粒、麦麸、石膏拌匀后装袋，即得原种培养基袋，在≤10h内，置于灭菌锅中，升温至100℃，开始计时，灭菌20～25小时，然后待上述原种培养基菌袋完全冷却后，移至接种箱，将接种箱密封，消毒1～2小时后，备用。
所述栽培种培养基包括质量百分数为50％的玉米粒、42％的木屑、7％的麦麸、1％的石膏，其制作方法为：取质量百分数为42％的木屑，先预湿，取质量百分数为50％的玉米粒，用质量百分数为0.3％的多菌灵浸泡15～20小时，用清水过滤一次，再取质量百分数为7％的麦麸、1％的石膏，然后将上述木屑、玉米粒、麦麸、石膏拌匀后装袋，即得栽培种培养基袋，在≤10h内，置于灭菌锅中，升温至100℃，开始计时，灭菌20～25小时，然后待上述栽培种培养基袋完全冷却后，移至接种箱，将接种箱密封，消毒1～2小时后，备用。
实施例2：
(1)野生灵芝采集：采集在海拔800～1900m高山生长的野生灵芝，所述野生灵芝为紫芝，形状为盖圆形或偏半圆形、直径为25～35cm、柄长为8～15cm、颜色为紫黑色；
(2)配制试管斜面培养基：
①配制母种培养基：选取马铃薯培养基：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL，马铃薯切片，加水1000mL，文水煮沸15～20分钟，4层纱布过滤，取汁液，然后将上述汁液补充到1000mL；
②制作试管斜面培养基：将步骤①所得母种培养基分装于试管中，高压灭菌30～50分钟，制成试管斜面培养基后，冷却；
(3)组织分离：取步骤(1)所得野生灵芝的子实体，所述子实体的性状为出菇早、正常、健壮、朵形大、未成熟，用水冲洗干净，切去菌柄，再用体积分数为75％的酒精消毒，然后用无菌水冲洗，用无菌纱布吸干水分，将菌盖切成两半，在菌盖和菌柄连接中央处割成3～5mm的菌肉组织片，置于无菌培养皿内，再将组织片接种于步骤(2)②得到的试管斜面培养基上，培养，在温度为25～30℃的黑暗环境下培养10～15天，上述操作均在无菌条件下进行，即得组织分离的母种；
(4)菌种接种和培养：将步骤(3)所得组织分离的母种，在无菌状态下，接种于步骤(2)②得到的的试管斜面培养基上，继续在温度为25～30℃的黑暗环境下培养10～15天，待试管上长满菌丝，即得二次母种，并于5～6℃保存；将二次母种在无菌条件下，转移到另一支步骤(2)②得到的试管斜面培养基中，即得栽培母种；
(5)接种与培养：将步骤(4)所得栽培母种接种于原种培养基中，在温度为25～30℃的黑暗环境下培养至菌丝长满菌袋为止，即得原种；再将上述原种接种于栽培种培养基，在温度为25～30℃的黑暗环境下培养至菌丝长满菌袋为止，即得栽培种；
其中，原种培养基和栽培种培养基均包括质量百分数为70％的玉米粒、24％的木屑、5％的麦麸、1％的石膏，其制作方法为：取质量百分数为24％的木屑，先预湿，取质量百分数为70％的玉米粒，用质量百分数为0.3％的多菌灵浸泡15～20小时，用清水过滤一次，再取质量百分数为5％的麦麸、1％的石膏，然后将上述木屑、玉米粒、麦麸、石膏拌匀后装袋，即得原种培养基袋和栽培种培养基菌袋，在≤10h内，置于灭菌锅中，升温至100℃，开始计时，灭菌20～25小时，然后待上述原种培养基袋和栽培种培养基菌袋完全冷却后，移至接种箱，将接种箱密封，消毒1～2小时后，备用。
实施例3：
(1)野生灵芝采集：采集在海拔800～1900m高山生长的野生灵芝，所述野生灵芝为紫芝，形状为盖圆形或偏半圆形、直径为25～35cm、柄长为8～15cm、颜色为紫黑色；
(2)配制试管斜面培养基：
①配制母种培养基：选取综合培养基：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B110mg、琼脂20g。
②制作试管斜面培养基：将步骤①所得母种培养基分装于试管中，高压灭菌30～50分钟，制成试管斜面培养基后，冷却；
(3)组织分离：取步骤(1)所得野生灵芝的子实体，所述子实体的性状为出菇早、正常、健壮、朵形大、未成熟，用水冲洗干净，切去菌柄，再用体积分数为75％的酒精消毒，然后用无菌水冲洗，用无菌纱布吸干水分，将菌盖切成两半，在菌盖和菌柄连接中央处割成3～5mm的菌肉组织片，置于无菌培养皿内，再将组织片接种于步骤(2)②得到的试管斜面培养基上，培养，在温度为25～30℃的黑暗环境下培养10～15天，上述操作均在无菌条件下进行，即得组织分离的母种；
(4)菌种接种和培养：将步骤(3)所得组织分离的母种，在无菌状态下，接种于步骤(2)②得到的的试管斜面培养基上，继续在温度为25～30℃的黑暗环境下培养10～15天，待试管上长满菌丝，即得二次母种，并于5～6℃保存；将二次母种在无菌条件下，转移到另一支步骤(2)②得到的试管斜面培养基中，即得栽培母种；
(5)接种与培养：将步骤(4)所得栽培母种接种于原种培养基中，在温度为25～30℃的黑暗环境下培养至菌丝长满菌袋为止，即得原种；再将上述原种接种于栽培种培养基，在温度为25～30℃的黑暗环境下培养至菌丝长满菌袋为止，即得栽培种；
其中，原种培养基包括质量百分数为70％的玉米粒、24％的木屑、5％的麦麸、1％的石膏，其制作方法为：取质量百分数为24％的木屑，先预湿，取质量百分数为70％的玉米粒，用质量百分数为0.3％的多菌灵浸泡15～20小时，用清水过滤一次，再取质量百分数为5％的麦麸、1％的石膏，然后将上述木屑、玉米粒、麦麸、石膏拌匀后装袋，即得原种培养基袋，在≤10h内，置于灭菌锅中，升温至100℃，开始计时，灭菌20～25小时，然后待上述原种培养基菌袋完全冷却后，移至接种箱，将接种箱密封，消毒1～2小时后，备用。
所述栽培种培养基包括质量百分数为50％的玉米粒、42％的木屑、7％的麦麸、1％的石膏，其制作方法为：取质量百分数为42％的木屑，先预湿，取质量百分数为50％的玉米粒，用质量百分数为0.3％的多菌灵浸泡15～20小时，用清水过滤一次，再取质量百分数为7％的麦麸、1％的石膏，然后将上述木屑、玉米粒、麦麸、石膏拌匀后装袋，即得栽培种培养基袋，在≤10h内，置于灭菌锅中，升温至100℃，开始计时，灭菌20～25小时，然后待上述栽培种培养基袋完全冷却后，移至接种箱，将接种箱密封，消毒1～2小时后，备用。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种野生灵芝的育种方法，其特征在于，包括如下工艺步骤：
(1)野生灵芝采集：采集在海拔800～1900m高山生长的野生灵芝；
(2)配制试管斜面培养基：
①配制母种培养基；
②制作试管斜面培养基：将步骤①所得母种培养基分装于试管中，高压灭菌30～50分钟，制成试管斜面培养基后，冷却；
(3)组织分离：取步骤(1)所得野生灵芝的子实体，用水冲洗干净，切去菌柄，再消毒并洗净后吸干水分，将菌盖切成两半，在菌盖和菌柄连接中央处割成3～5mm的菌肉组织片，置于无菌培养皿内，再将组织片接种于步骤(2)②得到的试管斜面培养基上，培养，上述操作均在无菌条件下进行，即得组织分离的母种；
(4)菌种接种和培养：将步骤(3)所得组织分离的母种，在无菌状态下，接种于步骤(2)②得到的的试管斜面培养基上，继续培养，待试管上长满菌丝，即得二次母种，并于5～6℃保存；将二次母种在无菌条件下，转移到另一支步骤(2)②得到的试管斜面培养基中，即得栽培母种；
(5)接种与培养：将步骤(4)所得栽培母种接种于原种培养基中，培养，即得原种；再将上述原种接种于栽培种培养基，培养，即得栽培种。
2.根据权利要求1所述的一种野生灵芝的育种方法，其特征在于，步骤(1)所述野生灵芝为紫芝，形状为盖圆形或偏半圆形、直径为25～35cm、柄长为8～15cm、颜色为紫黑色。
3.根据权利要求1所述的一种野生灵芝的育种方法，其特征在于，步骤(2)所述母种培养基为以下三种培养基中的一种或几种：
a、糯米培养基：取糯米100g、葡萄糖25g、琼脂20g、水1000mL，将糯米加水，文火煮20～30分钟，用2层纱布过滤，取汁液，然后将上述汁液补充到1000mL；
b、马铃薯培养基：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL，马铃薯切片，加水1000mL，文水煮沸15～20分钟，4层纱布过滤，取汁液，然后将上述汁液补充到1000mL；
c、综合培养基：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B110mg、琼脂20g。
4.根据权利要求1所述的一种野生灵芝的育种方法，其特征在于，步骤(3)所述子实体的性状为出菇早、正常、健壮、朵形大、未成熟，所述消毒并洗净后吸干水分的具体方法为用体积分数为75％的酒精消毒，然后用无菌水冲洗，用无菌纱布吸干水分，所述培养的温度为25～30℃、环境为黑暗、培养的时间为10～15天。
5.根据权利要求1所述的一种野生灵芝的育种方法，其特征在于，步骤(4)所述继续培养的温度25～30℃、环境为黑暗、培养的时间为10～15天。
6.根据权利要求1所述的一种野生灵芝的育种方法，其特征在于，步骤(5)中原种培养基包括质量百分数为70％的玉米粒、24％的木屑、5％的麦麸、1％的石膏，其制作方法为：取质量百分数为24％的木屑，先预湿，取质量百分数为70％的玉米粒，用质量百分数为0.3％的多菌灵浸泡15～20小时，用清水过滤一次，再取质量百分数为5％的麦麸、1％的石膏，然后将上述木屑、玉米粒、麦麸、石膏拌匀后装袋，即得原种培养基菌袋，在≤10h内，置于灭菌锅中，升温至100℃，开始计时，灭菌20～25小时，然后待上述原种培养基菌袋完全冷却后，移至接种箱，将接种箱密封，消毒1～2小时后，备用。
7.根据权利要求1所述的一种野生灵芝的育种方法，其特征在于，步骤(5)所述栽培种培养基为以下两种培养基中的一种或两种的混合：
a、包括质量百分数为50％的玉米粒、42％的木屑、7％的麦麸、1％的石膏，其制作方法为：取质量百分数为42％的木屑，先预湿，取质量百分数为50％的玉米粒，用质量百分数为0.3％的多菌灵浸泡15～20小时，用清水过滤一次，再取质量百分数为7％的麦麸、1％的石膏，然后将上述木屑、玉米粒、麦麸、石膏拌匀后装袋，即得栽培种培养基袋，在≤10h内，置于灭菌锅中，升温至100℃，开始计时，灭菌20～25小时，然后待上述栽培种培养基菌袋完全冷却后，移至接种箱，将接种箱密封，消毒1～2小时后，备用；
b、包括质量百分数为70％的玉米粒、24％的木屑、5％的麦麸、1％的石膏，其制作方法为：取质量百分数为24％的木屑，先预湿，取质量百分数为70％的玉米粒，用质量百分数为0.3％的多菌灵浸泡15～20小时，用清水过滤一次，再取质量百分数为5％的麦麸、1％的石膏，然后将上述木屑、玉米粒、麦麸、石膏拌匀后装袋，即得栽培种培养基袋，在≤10h内，置于灭菌锅中，升温至100℃，开始计时，灭菌20～25小时，然后待上述栽培种培养基菌袋完全冷却后，移至接种箱，将接种箱密封，消毒1～2小时后，备用。
8.根据权利要求1所述的一种野生灵芝的育种方法，其特征在于，步骤(5)所述培养的温度均为25～30℃，环境均为黑暗环境，培养的时间均至菌丝长满菌袋为止。
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Cited By (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105474994A (zh) * 2015-12-16 2016-04-13 黑龙江众生生物工程有限公司 一种灵芝原生态仿野生栽培方法
CN105815112A (zh) * 2016-03-17 2016-08-03 上海金苇子生物技术有限公司 一种培养蘑菇的方法及培育出的蘑菇、含有该蘑菇的药物组合物
CN106754402A (zh) * 2016-11-25 2017-05-31 邓小坤 灵芝菌种制作方法
CN106852496A (zh) * 2015-12-09 2017-06-16 黄建钧 诱导菇蕈所含的三萜类合成的方法
CN107047066A (zh) * 2017-05-24 2017-08-18 大悟鸿源农业科技有限公司 一种低成本灵芝培育方法
CN107164236A (zh) * 2017-05-24 2017-09-15 贵州黔芝灵绿色农业科技发展有限公司 一种灵芝母种的制作方法
CN107164240A (zh) * 2017-06-20 2017-09-15 贵州黔芝灵绿色农业科技发展有限公司 一种洁白度好的灵芝菌种复壮方法
CN107245455A (zh) * 2017-06-20 2017-10-13 贵州黔芝灵绿色农业科技发展有限公司 一种灵芝菌种复壮方法
CN107267399A (zh) * 2017-06-20 2017-10-20 贵州黔芝灵绿色农业科技发展有限公司 一种菌丝长势好的灵芝菌种复壮方法
CN107258324A (zh) * 2017-07-07 2017-10-20 贵州原生态生物科技有限公司 一种灵芝孢子粉优质高产栽培方法
CN107488596A (zh) * 2017-08-16 2017-12-19 什邡昊阳农业发展有限公司 一种木耳的液体制种方法
CN107820997A (zh) * 2017-10-10 2018-03-23 广西融水县融乐农林综合开发有限责任公司 灵芝的仿野生栽培方法
CN108029451A (zh) * 2017-11-30 2018-05-15 山东职业学院 一种灵芝母种培养基及其制备方法
CN108101603A (zh) * 2017-11-30 2018-06-01 山东职业学院 一种灵芝原种培养基及其制备方法
CN108310020A (zh) * 2018-02-06 2018-07-24 青岛润达生物科技有限公司 一种灵芝药质菌丝的制备方法
CN108370839A (zh) * 2018-01-25 2018-08-07 桂林灌阳桂灌菌业科技开发有限公司 一种野生灵芝母种培养基及其制备方法
CN109006189A (zh) * 2018-08-03 2018-12-18 四川省农业科学院土壤肥料研究所 一种利用单核原生质体技术选育金针菇优良品种的方法
CN109105149A (zh) * 2018-08-13 2019-01-01 宁波禾沐生物科技有限公司 一种灵芝栽培方法
CN111149617A (zh) * 2019-12-31 2020-05-15 广西仙草堂制药有限责任公司 一种灵芝的组培方法
CN112715351A (zh) * 2021-01-18 2021-04-30 广西民族师范学院 一种桑黄的快速育种方法
CN115530005A (zh) * 2022-10-14 2022-12-30 韶关市五马寨菌业有限公司 一种组织培养快速繁殖甜灵芝的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101245332A (zh) * 2008-02-29 2008-08-20 张嘉闻 富硒、富锗侧耳菌,富硒、富锗侧耳菌试管种
CN101352144A (zh) * 2008-09-16 2009-01-28 福建农林大学 一种灵芝杂交育种方法
CN102422773A (zh) * 2011-08-30 2012-04-25 孙思伦 野生白灵芝的分离训化与培养方法
CN103238459A (zh) * 2012-02-14 2013-08-14 贵州省生物研究所 一种多孢灵芝的选育方法
CN104429592A (zh) * 2014-11-07 2015-03-25 成都煜泉绿健科技有限公司 一种灵芝的培养基及栽培方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101245332A (zh) * 2008-02-29 2008-08-20 张嘉闻 富硒、富锗侧耳菌,富硒、富锗侧耳菌试管种
CN101352144A (zh) * 2008-09-16 2009-01-28 福建农林大学 一种灵芝杂交育种方法
CN102422773A (zh) * 2011-08-30 2012-04-25 孙思伦 野生白灵芝的分离训化与培养方法
CN103238459A (zh) * 2012-02-14 2013-08-14 贵州省生物研究所 一种多孢灵芝的选育方法
CN104429592A (zh) * 2014-11-07 2015-03-25 成都煜泉绿健科技有限公司 一种灵芝的培养基及栽培方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
王德芝等: "信阳鸡公山野生灵芝的驯化育种", 《中国食用菌》 *
王明霞: "灵芝培养基的研究", 《食用菌》 *

Cited By (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106852496A (zh) * 2015-12-09 2017-06-16 黄建钧 诱导菇蕈所含的三萜类合成的方法
CN105474994A (zh) * 2015-12-16 2016-04-13 黑龙江众生生物工程有限公司 一种灵芝原生态仿野生栽培方法
CN105815112A (zh) * 2016-03-17 2016-08-03 上海金苇子生物技术有限公司 一种培养蘑菇的方法及培育出的蘑菇、含有该蘑菇的药物组合物
CN106754402A (zh) * 2016-11-25 2017-05-31 邓小坤 灵芝菌种制作方法
CN107047066A (zh) * 2017-05-24 2017-08-18 大悟鸿源农业科技有限公司 一种低成本灵芝培育方法
CN107164236A (zh) * 2017-05-24 2017-09-15 贵州黔芝灵绿色农业科技发展有限公司 一种灵芝母种的制作方法
CN107164240A (zh) * 2017-06-20 2017-09-15 贵州黔芝灵绿色农业科技发展有限公司 一种洁白度好的灵芝菌种复壮方法
CN107245455A (zh) * 2017-06-20 2017-10-13 贵州黔芝灵绿色农业科技发展有限公司 一种灵芝菌种复壮方法
CN107267399A (zh) * 2017-06-20 2017-10-20 贵州黔芝灵绿色农业科技发展有限公司 一种菌丝长势好的灵芝菌种复壮方法
CN107258324A (zh) * 2017-07-07 2017-10-20 贵州原生态生物科技有限公司 一种灵芝孢子粉优质高产栽培方法
CN107488596A (zh) * 2017-08-16 2017-12-19 什邡昊阳农业发展有限公司 一种木耳的液体制种方法
CN107820997A (zh) * 2017-10-10 2018-03-23 广西融水县融乐农林综合开发有限责任公司 灵芝的仿野生栽培方法
CN108029451A (zh) * 2017-11-30 2018-05-15 山东职业学院 一种灵芝母种培养基及其制备方法
CN108101603A (zh) * 2017-11-30 2018-06-01 山东职业学院 一种灵芝原种培养基及其制备方法
CN108370839A (zh) * 2018-01-25 2018-08-07 桂林灌阳桂灌菌业科技开发有限公司 一种野生灵芝母种培养基及其制备方法
CN108310020A (zh) * 2018-02-06 2018-07-24 青岛润达生物科技有限公司 一种灵芝药质菌丝的制备方法
CN109006189A (zh) * 2018-08-03 2018-12-18 四川省农业科学院土壤肥料研究所 一种利用单核原生质体技术选育金针菇优良品种的方法
CN109105149A (zh) * 2018-08-13 2019-01-01 宁波禾沐生物科技有限公司 一种灵芝栽培方法
CN111149617A (zh) * 2019-12-31 2020-05-15 广西仙草堂制药有限责任公司 一种灵芝的组培方法
CN112715351A (zh) * 2021-01-18 2021-04-30 广西民族师范学院 一种桑黄的快速育种方法
CN112715351B (zh) * 2021-01-18 2022-02-08 广西民族师范学院 一种桑黄的快速育种方法
CN115530005A (zh) * 2022-10-14 2022-12-30 韶关市五马寨菌业有限公司 一种组织培养快速繁殖甜灵芝的方法

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