CN107624513A

CN107624513A - 一种富含多糖的食药用菌菌丝培养方法及应用

Info

Publication number: CN107624513A
Application number: CN201711009267.7A
Authority: CN
Inventors: 福原理加; 郁立; 吴元元
Original assignee: Shandong Huimin Volley Fruit And Vegetable Co Ltd
Current assignee: Shandong Huimin Volley Fruit And Vegetable Co Ltd
Priority date: 2017-10-25
Filing date: 2017-10-25
Publication date: 2018-01-26

Abstract

本发明提供了一种富含多糖的食药用菌菌丝培养方法，通过深海鱼鳞提取物、菊苣、羽衣甘蓝、玉米粉、水组成的培养基培养食药用菌菌丝体，解决现有技术中菌丝多糖含量低，成本高，培养周期长的问题，提供了一种生产效率高、多糖含量高、培养周期短、成本低的菌丝体培养方法。

Description

一种富含多糖的食药用菌菌丝培养方法及应用

技术领域

本发明属于食药用菌生产领域，尤其涉及一种富含多糖的食药用菌菌丝培养方法及其菌丝的应用。

背景技术

食、药用菌在我国已有上千年的应用历史，现代科学研究的最新成果表明，食药用菌不仅具有很高的营养价值，而且有极好的药用效果。含有丰富的多糖、多肽、氨基酸等活性成分，不仅具有传统补益、强身、益寿等功能，还具有抗肿瘤、抗疲劳、免疫调节、改善血液循环、修复受损细胞等调理和保健作用。特别是食药用菌中的真菌多糖、抗菌素、核酸、核苷酸、有机锗、有机硒等许多药用成分，对人体细胞的修复作用和在治疗肝炎、心血管性疾病、特殊疑难病症、抗衰老等方面已显示出极大的优越性，成为人类筛选新的抗癌药物、抗艾滋病药物、抗菌素药物的一条重要途径。

目前培养食药用菌培养基主要以木屑、石膏、麸皮、农作物秸秆、玉米粉、豆粕或大豆粉、酒糟等为主要的培养原料。其中所添加的木屑等均不属于可食用原料。如果以棉籽壳作为培养基需要将原料进行腐熟后再利用，以便于其中的营养物质被食药用菌吸收，方法复杂腐熟条件难以控制。另外，现有技术中还有利用猪粪、淘米水、草木灰按照一定比例组成的食药用菌专用有机营养液用于食药用菌的栽培。对于食药用菌而言，急需一种由可食用原料制备的培养基培养的方法。同时由于人对营养成分的要求的提高，可以利用食药用菌菌丝体生产食品、保健品和提取有效成分作为药品添加剂，是发展食药用菌生产的一条崭新途径。因而研究一种富含多糖的食药用菌菌丝培养方法，也是本发明亟待要解决的问题。

发明内容

为了解决现有技术中食药用菌菌丝含糖量低，成本高，菌丝培养周期长的问题，本发明提供一种生产效率高、含糖量高、菌丝培养周期短、成本低的食药用菌菌丝培养方法。

本发明通过下述技术方案实现：

一种富含多糖的食药用菌菌丝培养方法，包括如下步骤：

培养基由如下原料组成：深海鱼鳞提取物15-22份、菊苣7-15份、玉米粉4-8、羽衣甘蓝6-12份、水20-28份。

菌棒制作：先将培养基料充分混合后装入菌袋中制成菌棒，然后对菌袋进行封口处理；将封口后的菌棒采用倒立式装入菌棒筐中，封口朝下，菌棒泄压孔置于菌棒筐底部；

灭菌：菌棒装筐后送入灭菌柜中，采用高温蒸汽灭菌，菌棒内的冷空气、压力从菌棒泄压孔排出，在蒸汽压力0.13—0.15Mpa经118℃-122℃的高温灭菌。

接种：将种子菌于无菌条件下接种至灭菌后菌棒，接种量6-8％；

菌丝培养：将接种后菌棒筐装入培养架，在培养室进行菌丝培养，长出白色菌丝后收集菌丝并进行后续加工。

其中，深海鱼鳞提取物的制备方法为：将深海鱼鳞研磨后经碱性蛋白酶酶解、浓缩干燥后得提取物。

其中，深海鱼鳞提取物的制备方法具体为：将深海鱼鳞按固液重量比是1：2-3的比例加入水，再磨成浆状，得鱼鳞浆，占鱼鳞浆重量百分比为4％的碱性蛋白酶在50-55℃条件下酶解1-3小时，分离酶解液后进行浓缩、干燥，深海鱼鳞提取物。

其中，菊苣和羽衣甘蓝分别经洗净后切片，经过150-165℃烘干2-4小时后，研磨成粉末。

其中步骤(4)接种前，将灭菌后的料温降至25-35℃，接种后的料温在28-32℃。其中，菊苣可使用其根、叶子、菜或者提取菊粉后剩余部分。

所述食药用菌为灵芝、猴头菇、云芝、白灵菇、杏鲍菇、正红菇、松茸、姬松茸、木耳、银耳、金耳、香菇、金针菇、蛹虫草、冬虫夏草、双孢菇、鸡腿菇、鸡枞、美味牛肝菌、茶树菇、平菇、草菇、榆黄蘑、蜜环菌、灰树花、鸡油菌、茯苓、竹荪、斑玉蕈、侧耳、榛蘑、牛樟芝、树舌灵芝、牛舌菌、羊肚菌、块菌、青头菌、虎掌菌、安络小皮伞、干巴菌、猪苓、松乳菇、裂褶菌、元蘑、金福菇、大杯伞、珊瑚菌、大球盖菇、长根菇、滑菇、虎奶菇、红平菇、鲍鱼菇中的一种或数种。

本发明还提供了一种如上所述的一种富含多糖的食药用菌菌丝的应用，收获上述菌丝后，将白色菌丝直接加工成食品，或将白色菌丝进行酶解提纯后作为食品、药品添加剂。

本发明中主要原料为深海鱼鳞提取物，深海鱼鳞中含有丰富的胶原蛋白和鱼鳞角蛋白，将深海鱼鳞通过，经酶解后能够成为食药用菌极易于吸收利用的低分子蛋白质、肽和氨基酸。并且其作为水产加工剩余产品，变废为宝，又能达到废品利用的效果，减少了环境污染，价格低廉，降低了产品成本，是替代进口转基因大豆的最好蛋白质原料。

本发明中采用的羽衣甘蓝原产地中海和小亚西亚一带，二年生或多年生草本植物，属十字花科芸苔属甘蓝种的一个变种，是一种最接近甘蓝野生种的观叶植物，也是一种富含蛋白质、各种矿物质及维生素的蔬菜，属于食药两用植物。此外，菊苣为药食两用植物，叶可调制生菜，根含菊糖及芳香族物质，可提制代用咖啡，促进人体消化器官活动。植物的地上部分及根可供药用，中药名分别为菊苣、菊苣根，具有清热解毒，利尿消肿，健胃等功效。本发明中，菊苣可使用其根、叶子、菜或者提取菊粉后剩余部分，充分有效的利用资源，降低产品成本。

本发明的有益效果主要体现在以下几个方面：

(1)培养基中采用了深海鱼鳞提取物，通过对深海鱼鳞的再加工，有效的变废为宝充分利用资源，并为食药用菌菌丝的生长提供了充足的氮源。在发酵过程中，有机质、氨基酸以及氮磷钾养分的含量高，能够满足食药用菌菌种的生长，特别是发菌速度快且菌棒质量好，食药用菌菌丝生长浓密，生长力强。

(2)本发明具有能充分利用药食两用植物，更易于吸收，食药用菌菌丝生长快，总产量高、生产周期短。

(3)营养价值高：接种后先长出白色的菌丝，在出菇前，收获白色菌丝，生成的白色菌丝中富含多糖，可以将白色菌丝直接加工成食品，或将白色菌丝进行酶解提纯后作为食品、药品添加剂。

具体实施方式

以下通过具体实施例对本申请做进一步详细说明。实施例1

一种富含多糖的食药用菌菌丝培养方法，包括如下步骤：

首先制备深海鱼鳞提取物，具体为：将深海鱼鳞按固液重量比是1：2的比例加入水，再磨成浆状，得鱼鳞浆，占鱼鳞浆重量百分比为4％的碱性蛋白酶在50℃条件下酶解3小时，分离酶解液后进行浓缩、干燥，深海鱼鳞提取物。

制备菊苣和羽衣甘蓝，具体为：分别经洗净后切片，经过150-155℃烘干4小时后，研磨成粉末。

培养基由如下原料组成：深海鱼鳞提取物18份、菊苣10份、玉米粉4、羽衣甘蓝8份、水28份。

灭菌：菌棒装筐后送入灭菌柜中，采用高温蒸汽灭菌，菌棒内的冷空气、压力从菌棒泄压孔排出，在蒸汽压力0.13-0.15Mpa经118℃-122℃的高温灭菌。

接种：将种子菌于无菌条件下接种至灭菌后菌棒，接种量8％；

收集的白色菌丝经过热水浸提法提取多糖，多糖溶出率较高、有机溶剂使用量少、对多糖活性破坏性小，提取后的多糖含量约34％。

实施例2

一种富含多糖的食药用菌菌丝培养方法，包括如下步骤：

培养基由如下原料组成：深海鱼鳞提取物20份、菊苣12份、玉米粉6、羽衣甘蓝12份、水21份。

接种：将种子菌于无菌条件下接种至灭菌后菌棒，接种量7％；

收集的白色菌丝经过热水浸提法提取多糖，提取后的多糖含量约32％。

对比例1

根据培养基配方，直接将深海鱼鳞研磨成浆液，不经过碱性蛋白酶酶解，用于培养基配方中。其余灭菌、培养方法与实施例1中相同。

对比例2

根据培养基配方，直接将深海鱼鳞研磨成浆液，经过碱性蛋白酶、复合蛋白酶分步骤酶解，用于培养基配方中。其余灭菌、培养方法与实施例1中相同。

对比例3

根据培养基配方，直接将菊苣和羽衣甘蓝粉碎，用于培养基配方中。其余灭菌、培养方法与实施例1中相同。

将实施例1与对比例1-3生产过程中的白色菌丝量进行比较，每试验组重复3次取平均值，研究不同培养基原料下对食药用菌菌丝生物量的影响，结果见表1。

表1.不同条件下食药用菌菌丝生物量

	实施例1	实施例2	对比例1	对比例2	对比例3
						菌丝生物量	9.1	9.0	4.1	5.4	7.1

注：食药用菌菌丝生物量单位为g/100ml

由表1结果可知，对比例1未采用碱性蛋白酶对深海鱼鳞进行水解，进一步配制成培养基后食药用菌菌丝生长量明显减少。对比例2中采用碱性蛋白酶对深海鱼鳞进行水解，同时为了充分水解又采用复合蛋白酶进行分步酶解，但分步酶解后的深海鱼鳞提取物用于食药用菌培养基中培养后，食药用菌菌丝生长量也明显下降，说明深海鱼鳞的酶解程度和酶解方法对于菌丝生长量有重要影响。对比例3中未对菊苣和羽衣甘蓝进行烘干处理，其用于培养基后生长的食药用菌菌丝略有下降，分析原因与原料中水分含量控制有关，同时粉碎成细粉后更利于菌丝生长，可以显著提高食药用菌菌丝的产率及效果。

将实施例1与对比例1-3生产过程中的白色菌丝生长情况进行比较，每试验组重复3次取平均值，研究不同培养基原料下对食药用菌菌丝生物量的影响，结果见表1。

表1.不同条件下菌丝生长情况

	实施例1	实施例2	对比例1	对比例2	对比例3
						菌丝粗细	粗	粗	偏细	较粗	较粗
菌丝自溶性	基本无自溶	基本无自溶	自溶量多	较少自溶	少量自溶
						多糖含量	约34％	约32％	约22％	约24％	约28％

由表1结果可知，对比例1未采用碱性蛋白酶对深海鱼鳞进行水解，进一步配制成培养基后食药用菌菌丝生长情况明显变差，菌丝偏细，且培养后期出现较多自溶，并且其多糖含量也明显下降。对比例2中采用碱性蛋白酶对深海鱼鳞进行水解，同时为了充分水解又采用复合蛋白酶进行分步酶解，但分步酶解后的深海鱼鳞提取物用于食药用菌培养基中培养后，菌丝生长情况也明显变差，菌丝没有实施例1或2中粗，有变细的趋势，且培养后期也出现了一部分自溶，并且其多糖含量也有所下降，说明深海鱼鳞的酶解程度和酶解方法对于菌丝生长有重要影响。对比例3中未对菊苣和羽衣甘蓝进行烘干处理，其用于培养基后生长的食药用菌菌丝略有下降，菌丝变细没有实施例1或2中粗，且培养后期也出现了少量自溶，并且其多糖含量也有所下降，分析原因与原料中水分含量控制有关，同时粉碎成细粉后更利于菌丝生长，可以显著提高菌丝的产率及效果。

上述实验充分说明，相比于现有技术，本发明的培养基所含有的营养成分更能满足食药用菌菌丝对营养的需求，菌丝生长快，生物量高。

尽管发明人已经对本发明的技术方案做了较为详细的阐述和列举，应当理解，对于本领域一个熟练的技术人员来说，对上述实施例做出修改或者采用等同的替代方案，这对本领域的技术人员而言是显而易见，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims

1.一种富含多糖的食药用菌菌丝培养方法，其特征在于：一种富含多糖的菌丝培养方法，包括如下步骤：

(1)培养基由如下原料组成：深海鱼鳞提取物、菊苣、玉米粉、羽衣甘蓝、水；

(2)菌棒制作：先将培养基料充分混合后装入菌袋中制成菌棒，然后对菌袋进行封口处理；将封口后的菌棒采用倒立式装入菌棒筐中，封口朝下，菌棒筐底部设置菌棒泄压孔；

(3)灭菌：菌棒筐送入灭菌柜中，采用高温蒸汽灭菌，菌棒内的冷空气、压力从菌棒泄压孔排出，在蒸汽压力0.13-0.15Mpa经118℃-122℃的高温灭菌；

(4)接种：将种子菌于无菌条件下接种至灭菌后菌棒，接种量6-8％；

(5)菌丝培养：将接种后菌棒筐装入培养架，在培养室进行菌丝培养，长出白色菌丝后收集菌丝并进行后续加工。

2.根据权利要求1所述的方法，其中深海鱼鳞提取物15-22份、菊苣7-15份、玉米粉4-8、羽衣甘蓝6-12份、水20-28份。

3.根据权利要求2所述的方法，其中深海鱼鳞提取物的制备方法为：将深海鱼鳞研磨后经碱性蛋白酶酶解、浓缩干燥后得提取物。

4.根据权利要求3所述的方法，其中深海鱼鳞提取物的制备方法具体为：将深海鱼鳞按固液重量比是1：2-3的比例加入水，再磨成浆状，得鱼鳞浆，占鱼鳞浆重量百分比为4％的碱性蛋白酶在50-55℃条件下酶解1-3小时，分离酶解液后进行浓缩、干燥，深海鱼鳞提取物。

5.根据权利要求1所述的方法，其中菊苣和羽衣甘蓝分别经洗净后切片，经过150-165℃烘干2-4小时后，研磨成粉末。

6.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(4)接种前，将灭菌后的料温降至25-35℃，接种后的料温在28-32℃。

7.根据权利要求1所述的方法，其中菊苣可使用其根、叶子、菜或者提取菊粉后剩余部分。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述食药用菌为灵芝、猴头菇、云芝、白灵菇、杏鲍菇、正红菇、松茸、姬松茸、木耳、银耳、金耳、香菇、金针菇、蛹虫草、冬虫夏草、双孢菇、鸡腿菇、鸡枞、美味牛肝菌、茶树菇、平菇、草菇、榆黄蘑、蜜环菌、灰树花、鸡油菌、茯苓、竹荪、斑玉蕈、侧耳、榛蘑、牛樟芝、树舌灵芝、牛舌菌、羊肚菌、块菌、青头菌、虎掌菌、安络小皮伞、干巴菌、猪苓、松乳菇、裂褶菌、元蘑、金福菇、大杯伞、珊瑚菌、大球盖菇、长根菇、滑菇、虎奶菇、红平菇、鲍鱼菇中的一种或数种。

9.根据权利要求1-8任一项方法培养的所述的富含多糖的食药用菌菌丝的应用，收获上述菌丝后，将白色菌丝直接加工成食品，或将白色菌丝进行酶解提纯后作为食品、药品添加剂。