CN106754402A - 灵芝菌种制作方法 - Google Patents

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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor

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Abstract

本发明涉及一种灵芝菌种制作方法，包括步骤：培养基配制、菌种制作。通过对每一步的细心操作，为下一步制作最好的原料和准备，获得大量优质菌种。

Description

灵芝菌种制作方法
技术领域
本发明涉及一种种植方法，特别是灵芝菌种制作方法。
背景技术
灵芝是名贵中药，高山灵芝更是灵芝中的精品，需要不断的探索高山灵芝的优质高产的种植方法。
发明内容
为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种灵芝菌种制作方法。
具体而言，本发明提供的技术方案是：一种灵芝菌种制作方法，包括步骤：
A、培养基配制，每200克马铃薯配葡萄糖20克、酵母粉4克、磷酸二氢钾2克、硫酸镁0.5克、琼脂20克；称取去皮、切片的马铃薯200克，置于锅内，加入水1000毫升，煮至薯片软而不烂；用4-6层纱布过滤，取滤液；向滤液中加入琼脂20克，继续煮沸至脂完全融化，加入葡萄糖20克，补水至1000毫升；趁热分装于试管中，装至试管长度的1/ 5-1/ 4，擦净管口，塞上盖子，保持密封；然后高温条件下灭菌30分钟；灭菌后斜放试管，置于30摄氏度下培养3天，若无杂菌出现，表明灭菌彻底，可供接种用，若出现杂菌应重新灭菌或重新配置；
B、菌种制作,选用无病虫害的6-7分成熟的鲜灵芝做灵芝种，灵芝种表面经紫外照射消毒、酒精擦拭消毒，再将菌盖撕开，一分为二；选择菌盖黄白色生长区菌肉组织或者菌柄上方菌盖中部的菌肉组织为取种部位；取种时先用无菌手术刀小心切割菌肉组织，然后用接种针取5毫米×5毫米的小块菌肉组织，接种到试管培养基中上部表面；将上述放入菌肉组织的培养基置于生化培养箱中培养,调温至28-30摄氏度，避光培养2-3天，菌肉组织开始萌发，出现肉眼可见的菌丝体，并在培养基表面逐渐蔓延，7-10天菌丝体长满试管斜面，菌丝体洁白、纤细、平坦、致密、均匀，获得不含杂菌的健康灵芝菌丝，随着菌丝的生长、菌落的扩展，接种处的菌丝逐渐老化形成坚韧的菌皮，并随着菌皮老化，这时候挑选灵芝菌丝体生长整齐、长速正常、菌丝外观饱满、长势旺盛，气生菌丝洁白、纤细、平坦、致密、均匀的部分作为菌种。
本发明取得的有益效果是：通过对每一步的细心操作，为下一步制作最好的原料和准备，获得大量优质菌种。
具体实施方式
一种灵芝菌种制作方法，通过对每一步的细心操作，为下一步制作最好的原料和准备，通过分步优化和扩大规模，获得最适宜大规模种植的优质菌种，使得灵芝优质高产，具体方案包括步骤：
A、培养基配制，每200克马铃薯配葡萄糖20克、酵母粉4克、磷酸二氢钾2克、硫酸镁0.5克、琼脂20克；称取去皮、切片的马铃薯200克，置于锅内，加入水1000毫升，煮至薯片软而不烂；用4-6层纱布过滤，取滤液；向滤液中加入琼脂20克，继续煮沸至脂完全融化，加入葡萄糖20克，补水至1000毫升；趁热分装于试管中，装至试管长度的1/ 5-1/ 4，擦净管口，塞上盖子，保持密封；然后高温条件下灭菌30分钟；灭菌后斜放试管，置于30摄氏度下培养3天，若无杂菌出现，表明灭菌彻底，可供接种用，若出现杂菌应重新灭菌或重新配置。
B、菌种制作,选用无病虫害的6-7分成熟的鲜灵芝做灵芝种，灵芝种表面经紫外照射消毒、酒精擦拭消毒，再将菌盖撕开，一分为二；选择菌盖黄白色生长区菌肉组织或者菌柄上方菌盖中部的菌肉组织为取种部位；取种时先用无菌手术刀小心切割菌肉组织，然后用接种针取5毫米×5毫米的小块菌肉组织，接种到试管培养基中上部表面；将上述放入菌肉组织的培养基置于生化培养箱中培养。调温至28-30摄氏度，避光培养2-3天，菌肉组织开始萌发，出现肉眼可见的菌丝体，并在培养基表面逐渐蔓延，7-10天菌丝体长满试管斜面，菌丝体洁白、纤细、平坦、致密、均匀，获得不含杂菌的健康灵芝菌丝，随着菌丝的生长、菌落的扩展，接种处的菌丝逐渐老化形成坚韧的菌皮，并随着菌皮老化，这时候挑选灵芝菌丝体生长整齐、长速正常、菌丝外观饱满、长势旺盛，气生菌丝洁白、纤细、平坦、致密、均匀的部分作为菌种,如果分离物（菌肉组织）不到2天就出现肉眼可见的菌丝体，多事杂菌。如果分离物（菌肉组织）培养4天仍为出现肉眼可见的菌丝体，可能是切割灵芝菌肉组织的手术刀或接种针在酒精火焰上方灼烧之后没有充分冷却，或者其它原因导致分离物（菌肉组织）失去活性而不能萌发菌丝体。通过对每一步的细心操作，为下一步制作最好的原料和准备，获得大量优质菌种。
具体实施方式只是示例性的对本发明进行描述，并不限制本发明的包含在权利要求内的其他实施方式。

Claims (1)

1.一种灵芝菌种制作方法，其特征在于，包括步骤：
A、培养基配制，每200克马铃薯配葡萄糖20克、酵母粉4克、磷酸二氢钾2克、硫酸镁0.5克、琼脂20克；称取去皮、切片的马铃薯200克，置于锅内，加入水1000毫升，煮至薯片软而不烂；用4-6层纱布过滤，取滤液；向滤液中加入琼脂20克，继续煮沸至脂完全融化，加入葡萄糖20克，补水至1000毫升；趁热分装于试管中，装至试管长度的1/ 5-1/ 4，擦净管口，塞上盖子，保持密封；然后高温条件下灭菌30分钟；灭菌后斜放试管，置于30摄氏度下培养3天，若无杂菌出现，表明灭菌彻底，可供接种用，若出现杂菌应重新灭菌或重新配置；
B、菌种制作,选用无病虫害的6-7分成熟的鲜灵芝做灵芝种，灵芝种表面经紫外照射消毒、酒精擦拭消毒，再将菌盖撕开，一分为二；选择菌盖黄白色生长区菌肉组织或者菌柄上方菌盖中部的菌肉组织为取种部位；取种时先用无菌手术刀小心切割菌肉组织，然后用接种针取5毫米×5毫米的小块菌肉组织，接种到试管培养基中上部表面；将上述放入菌肉组织的培养基置于生化培养箱中培养，调温至28-30摄氏度，避光培养2-3天，菌肉组织开始萌发，出现肉眼可见的菌丝体，并在培养基表面逐渐蔓延，7-10天菌丝体长满试管斜面，菌丝体洁白、纤细、平坦、致密、均匀，获得不含杂菌的健康灵芝菌丝，随着菌丝的生长、菌落的扩展，接种处的菌丝逐渐老化形成坚韧的菌皮，并随着菌皮老化，这时候挑选灵芝菌丝体生长整齐、长速正常、菌丝外观饱满、长势旺盛，气生菌丝洁白、纤细、平坦、致密、均匀的部分作为菌种。
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不详: ""灵芝母种的制作"", 《中国食用菌商务网HTTP://JISHU.MUSHROOMMARKET.NET/201607/08/10109.HTML》 *

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