CN104955453B - Lfa-1抑制剂制剂 - Google Patents

Abstract

本发明提供用于治疗干眼病的制剂、方法和试剂盒。特别是，本文描述了包含式1化合物的稳定的药物组合物，其用于多种用途，包括治疗干眼综合征。在一方面，本发明描述了改善式1化合物的组合物的稳定性的方法和成分。

Description

LFA-1抑制剂制剂

相关申请的交叉引用

本申请要求2012年12月19日提交的美国临时申请号61/739,609和2013年1月29日提交的美国临时申请61/758,147的优先权，将它们整体引入本文作为参考。

背景技术

眼泪向眼提供持久的润湿和润滑，其对于维持视力和舒适度是关键的。眼泪为水(用于润湿)、油(用于润滑)、粘液(用于均匀撒布)和抗体和特定蛋白质(用于抵抗感染)的组合。这些组分由位于眼周围的特殊的腺体分泌。当该眼泪体系中存在不平衡时，人会感觉眼干。

干眼综合征(dry eye syndrome)为常见的眼表面炎性疾病。患有干眼病的人可能感觉疼痛、光敏性、发痒、发红和视力模糊。干眼综合征有多种诱发因素，包括年龄、性别、环境、药物、外科手术，和全身疾病如糖尿病、甲状腺疾病、淋巴瘤、炎性疾病等。缺少恰当的诊断和治疗可导致进一步的并发症如感染、眼表面角质化、角膜溃疡和结膜鳞状化生。

以引用方式合并

本说明书提到的所有出版物和专利申请通过相同程度的引用方式并入本发明，引入程度如同特定且独立地指定各出版物或者专利申请以引用方式并入本文。

附图说明

本发明的新特征在随附权利要求书中具体列出。通过参考以下阐述示例性具体实施方式的详细说明和附图，将更好地理解本发明的特征与优点，所述具体实施方式利用了本发明的原理，其附图为：

图1显示在不同温度下，于5.0％眼科溶液中的式1化合物随时间的稳定性。

图2显示不同制剂中，式1化合物的稳定性。

图3显示在不同条件下，于3％眼科溶液中的式1化合物的稳定性。

图4显示不同浓度的式1化合物的稳定性，其显示为在40℃储存时式1化合物随时间的总降解百分比(％)。

图5显示不同浓度的式1化合物的稳定性，其显示为降解产物A和B在不同温度随时间的外观。

图6显示式1化合物的稳定性，其显示为在25℃和40℃储存时式1化合物随时间的降解百分比(％)。

图7显示在浓度为1％w/v和5％w/v时式1化合物随时间的降解曲线。

图8显示对于式1化合物溶液，鼓泡对总降解(％)的作用，其中在不同pH下用氮气鼓泡以去除氧气。

图9显示在氮气鼓泡的溶液中在不同pH的情况下pH随时间对式1化合物的稳定性的作用。

图10显示抗氧化剂和pH对式1化合物的稳定性的作用，其显示为随时间的总降解百分比(％)。

图11显示抗氧化剂对式1化合物的稳定性的作用，其显示为在不同抗氧化剂情况下在pH 6.5和40℃储存一个月后的总降解产物(％)。

图12显示对于氮气鼓泡的溶液，在不同pH的情况下，在不存在抗氧化剂组分的情况下在40℃储存一个月后，pH对式1化合物的稳定性的作用。

发明详述

定义

本发明使用的术语“共同给药”、“联合给药”及其语法上的等同物，包括向动物给药两种或更多种试剂从而使两种试剂和/或其代谢物同时存在于动物内。共同给药包括在单独的组合物中同时给药，在单独的组合物中在不同时间给药，或者在存在两种试剂的一种组合物中给药。

如本发明所使用，“治疗”或“减轻”或“改善“可在本发明互换使用。这些术语指的是获得有益的或者需要的结果的方法，包括但不限于治疗性益处和/或预防性益处。对于治疗性益处，指的是所治疗的根本疾病的根除或改善。治疗性益处也通过一种或多种生理学症状的根除或改善而实现，所述生理学症状与根本疾病有联系，从而在患者中观察到改善，尽管该患者可能仍然受根本疾病的折磨。对于预防性益处，可能将组合物给药于有发展特定疾病风险的患者，或者给药于报告有疾病的一种或多种生理学症状的患者，即使可能还没有诊断患有该疾病。可以将组合物给药于受试者，以预防生理学症状的发展或者预防根本疾病的发展。

本发明使用的术语“治疗效果”包括如上面描述的治疗性益处和/或预防性益处。预防性效果包括延迟或消除疾病或病症的出现，延迟或消除疾病或病症的症状发作，减缓、停止或逆转疾病或病症的发展，或其任何组合。

“药学上可接受的载体”或者“药学上可接受的赋形剂”或“药学上可接受的成分”包括任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和延迟吸收剂等。这些介质和试剂用于药学活性物质的用途是本领域所熟知的。除了与活性成分不相容的传统介质和试剂，其在本发明治疗组合物中的使用是可预期的。也可将补充的活性成分加入组合物中。

本发明使用的术语“药学上可接受的盐”指的是那些适于药用的盐，优选用于人和低等动物的组织，无过度刺激、变态反应等的盐。胺、羧酸及其他类型化合物的药学上可接受的盐是本领域所熟知的。例如，S.M.Berge等人在J Pharmaceutical Sciences，66：1-19(1977)中详细描述了药学上可接受的盐，将该文献并入本申请作为参考。盐可以在本发明化合物最后的分离与提纯期间原位制备，或者单独地使游离碱或游离酸官能团与适当的试剂(如同下文描述)反应而制备。例如，游离的碱官能团可以与适当的酸反应。而且，当本发明化合物携带酸式部分时，其合适的药用可接受盐可以包括金属盐例如碱金属盐，如钠或钾盐；和碱土金属盐，如钙或镁盐。药学上可接受的、无毒的酸加成盐的例子是氨基与无机酸或与有机酸形成的盐，所述无机酸为例如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸，所述有机酸为例如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸，或者使用本领域使用的其他方法例如离子交换形成的盐。其他药学上可接受的盐包括己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡萄糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸酯、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一酸盐、戊酸盐等等。典型的碱金属或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙、镁盐等等。其他药学上可接受的盐包括，适当的无毒的铵盐、季铵盐、通过与药物羧酸直接反应或通过使用抗衡离子例如卤素、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、磺酸根和芳基磺酸根形成的胺阳离子。除非另有所述，当提及式1化合物时包括其盐。

如本文所述的“受试者”指的是动物，例如哺乳动物，例如人类。本发明描述的方法可以用于人类治疗和兽医学应用中。在一些实施方式中，患者是哺乳动物，在一些实施方式中，患者是人类。

如本文所述的术语“主要抗氧化剂”，是指一种抗氧化剂，当其与一种或多种其它抗氧化剂组合存在时，该主要抗氧化剂单独起的作用占总抗氧化或稳定作用的多于50％。

如本文所述的术语“基本上无”，是指不以有效量存在。例如基本上不包含润滑剂的制剂是指包含亚有效量的润滑剂的制剂。有效量为实现性质的显著变化所需的具体物质或添加剂的量，添加该物质用于得到所述性质。

除非另有说明，本发明描写的结构也包括区别仅在存在一个或多个同位素富集原子的化合物。例如，具有其中氢原子被氘或氚代替，或碳被¹³C-或¹⁴C-富集的碳代替的结构的化合物在本发明的范围之内。

本发明化合物也可以在组成这种化合物的一个或多个原子上含有反常比例的原子同位素。例如，该化合物可以是用放射性同位素放射标记的，例如氚(³H)、碘-125(¹²⁵I)或碳-14(¹⁴C)。本发明化合物所有的同位素变体，不管是否是有放射活性的，均包含在本发明范围内。

当本发明对物理性质例如分子量或者化学性质例如化学通式使用范围时，应包括范围的所有组合和亚组合以及其内的具体实施方式。术语“约”当指数量或数值范围时，意思是所指数量或者数值范围是试验变异性内(或在统计学实验误差内)的近似值，因此该数量或者数值范围可以在所述数量或数值范围的例如1％至15％之间变化。

术语“包含”(以及相关术语例如“含有”或“含”或“具有”或“包括”)包括那些实施方式，例如，物质、组合物、方法或过程等的任何组成的具体实施方式。短语“基本上由……组成”表明其它组分不会实质性影响所述特征。

本发明使用的缩写具有在化学和生物学领域的通常含义。

I.化合物和组合物

式1化合物

已发现，式1化合物:

或其盐，为LFA-1与ICAM-1相互作用的有效抑制剂。其为LFA-1的一类直接竞争性抑制剂的成员，直接结合至LFA-1上的ICAM的结合位点，因此阻止ICAM结合。LFA-1的直接竞争性抑制剂可提供比变构抑制剂更有效调节炎性和/或免疫响应的潜能，正是因为这些抑制剂更有效封闭结合位点。

此外，式1化合物具有快速的全身清除率。LFA-1与ICAM的相互作用在整个身体内产生各种全身效应。使用LFA-1拮抗剂治疗疾病由于LFA-1拮抗剂在不希望的位置(例如，在并非给药位点的位置)的活性可导致不希望的作用。本发明使用从体循环快速清除的式1化合物。式1化合物可具有最小的全身LFA-1拮抗剂活性。在一些实施方案中，式1化合物可具有不可检测到的全身LFA-1拮抗剂活性。因此，式1化合物可特别适合治疗由LFA-1与ICAM-1相互作用介导的疾病，在该疾病中需要局部治疗和/或该局部治疗给药多个月或多年。

为开发临床有用的治疗，药物候选物需要容易获得(通过合成或其它方式)、化学纯的和适合于给药至受试者的可接受的物理形式。开发药物候选物的稳定制剂需要彻底研究化合物的内在稳定性。还需要测试与该药物候选物相关的赋形剂的相容性，需要识别低风险赋形剂。

本发明公开了方法和组合物以获得式1化合物的稳定药物制剂，从而用作治疗眼病的药物。在一些实施方案中，式1化合物制剂用于治疗干眼综合征或更具体地用于治疗继发于假性眼表面炎症(presumed ocular surface inflammation)的干眼。

在一些实施方案中，本发明提供用于局部给药至眼的式1化合物的制剂。在一些方面该制剂为式1化合物的水溶液。在一些实施方案中，式1化合物的制剂还包含其它药学上可接受的成分。在一些方面该药学上可接受的成分为改善制剂中式1化合物的稳定性的成分。在一些方面用于增加式1化合物的稳定性的成分为一种或多种抗氧化剂。在一些情况下式1化合物的水溶液缓冲至pH为约6.0-8.0以进一步增加式1化合物的稳定性。在一些方面该制剂另外用惰性气体鼓泡以进一步增加式1化合物的稳定性。

多晶型、盐和制剂

本发明的组合物可包含式1化合物的无定形形式或其晶形I、II、III、IV、V或VI的任一种或它们的组合。在本发明一些实施方案中，式1化合物的无定形形式用于制备该制剂。在一些实施方案中，式1化合物的晶形在制剂中使用。在一些实施方案中，使用的式1化合物为晶形I，或II，或III，或IV，或V，或VI。在一些实施方案中，式1化合物的无定形形式与晶形I、II、III、IV、V或VI中的一种或多种组合使用。在一些实施方案中，式1化合物的晶形I与无定形形式、晶形II、晶形III、晶形IV、晶形V或晶形VI中的一种或多种组合使用。在一些实施方案中，式1化合物的晶形II与无定形形式、晶形I、晶形III、晶形IV、晶形V或晶形VI中的一种或多种组合使用。在一些实施方案中，式1化合物的晶形III与无定形形式、晶形I、晶形II、晶形IV、晶形V或晶形VI中的一种或多种组合使用。在一些实施方案中，式1化合物的晶形IV与无定形形式、晶形I、晶形II、晶形III、晶形V或晶形VI中的一种或多种组合使用。在一些实施方案中，式1化合物的晶形V与无定形形式、晶形I、晶形II、晶形III、晶形IV或晶形VI中的一种或多种组合使用。在一些实施方案中，式1化合物的晶形VI与无定形形式、晶形I、晶形II、晶形III、晶形IV或晶形V中的一种或多种组合使用。

在本发明一些实施方案中，将碳酸氢钠添加至式1化合物的无定形形式或晶形I、II、III、IV、V或VI的任一种或它们的混合物中以及其转化为钠盐。在本发明一些实施方案中，将该无定形形式或晶形I、II、III、IV、V或VI的任一种以其钠、钾、锂、镁、锌或钙盐形式配制。

此外，预期式1化合物的无定形形式或任一晶形、或它们的组合，可释放地连接至用于持续释放制剂的生物相容的聚合物，其在插入物上、插入物中或连接至插入物，以用于局部、眼内、眼周或全身给药。该从生物相容的聚合物的控制释放也可与水溶性聚合物一起使用以形成可缓慢滴注的制剂。从该从生物相容的聚合物(例如，PLGA微球体或纳米球体)的控制释放，也可用于适合眼内植入或注射的制剂以用于持续释放给药。可使用任何合适的生物可降解的和生物相容的聚合物。

此外，式1化合物的无定形形式或晶形I、II、III、IV、V和VI的任一种，或它们的组合，可适合用于其中药物实体可保持为固体的持续释放制剂。而且，预期这些形式中任一种的游离酸的钙盐对于缓慢释放制剂是有用的，其为固体制剂、凝胶制剂或液体制剂。

溶液

本发明提供式1化合物的稳定的药物组合物，其用于治疗疾病，如眼病。在一些方面，本发明提供用于稳定式1化合物的液体制剂的组合物和方法。在一些实施方案中，式1化合物的液体制剂通过将式1化合物的无定形形式或任一晶形或它们的组合溶于无菌水溶液来制备。在一些实施方案中，该水溶液为生理盐水或缓冲溶液。

如本领域已知，可选择其它媒介物，包括但不限于:平衡盐溶液、盐水溶液、水溶性聚醚如聚乙二醇、聚乙烯基类如聚乙烯醇和聚乙烯吡咯酮、纤维素衍生物如甲基纤维素和羟丙基甲基纤维素、石油衍生物如矿物油和白矿脂、动物脂肪如羊毛脂、丙烯酸聚合物如羧聚乙烯凝胶、植物脂肪如花生油和多糖如葡聚糖和糖胺聚糖如透明质酸钠。如果需要的话，可添加滴眼剂中常用的添加剂。该添加剂包括等渗剂(例如，氯化钠，等)；缓冲剂(例如，硼酸，磷酸一氢钠，磷酸二氢钠，等)；防腐剂(例如，苯扎氯铵，苄索氯铵，氯丁醇，等)；增稠剂(例如，糖如乳糖，甘露醇，麦芽糖，等；例如，透明质酸或其盐如透明质酸钠，透明质酸钾，等；例如，粘多糖如硫酸软骨素，等；例如，聚丙烯酯钠，羧基乙烯基聚合物，交联聚丙烯酸酯，聚乙烯醇，聚乙烯基吡咯烷酮，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羟基乙基纤维素，羧基甲基纤维素，羟基丙基纤维素或其它本领域技术人员已知的试剂)。

本发明的制剂中式1化合物的量的浓度范围可为约0.0001％至10.0w/v％，约0.005％至10.0w/v％，约0.01％至10.0w/v％，约0.05％至10.0w/v％，约0.1％至10.0w/v％，约0.5％至10.0w/v％，约1.0％至10.0w/v％，约2.0％至10.0w/v％，约3.0％至10.0w/v％，约4.0％至10.0w/v％，或约5.0％至10.0w/v％，6.0％至10.0w/v％，约7.0％至10.0w/v％，约8.0％至10.0w/v％，或约9.0％至10.0w/v％。在一些实施方案中，式1化合物的量的范围为约1％至约20.0w/v％，约5％至约20.0w/v％，约7％至约20.0w/v％，约10％至约20.0w/v％，约12％至约20.0w/v％，约15％至约20.0w/v％，或约17％至约20.0w/v％；约5％至约25.0w/v％，约7％至约25.0w/v％，约10％至约25.0w/v％，约12％至约25.0w/v％，约15％至约25.0w/v％，约17％至约25.0w/v％，约20％至约25.0w/v％，或约22％至约25.0w/v％；约5％至约35.0w/v％，约7％至约35.0w/v％，约10％至约35.0w/v％，约12％至约35.0w/v％，约15％至约35.0w/v％，约17％至约35.0w/v％，约20％至约35.0w/v％，22％至约35.0w/v％，25％至约35.0w/v％，27％至约35.0w/v％，30％至约35.0w/v％，或约32％至约35.0w/v％；约5％至约40.0w/v％，约7％至约40.0w/v％，约10％至约40.0w/v％，约12％至约40.0w/v％，约15％至约40.0w/v％，约17％至约40.0w/v％，约20％至约40.0w/v％，22％至约40.0w/v％，25％至约40.0w/v％，27％至约40.0w/v％，30％至约40.0w/v％，33％至约40.0w/v％，35％至约40.0w/v％，或约37％至约40.0w/v％；约5％至约50.0w/v％，约10％至约50.0w/v％，约12％至约50.0w/v％，约15％至约50.0w/v％，约20％至约50.0w/v％，约22％至约50.0w/v％，约25％至约50.0w/v％，约27％至约50.0w/v％，约30％至约50.0w/v％，约32％至约50.0w/v％，约35％至约50.0w/v％，约37％至约50.0w/v％，约40％至约50.0w/v％，约42％至约50.0w/v％，约45％至约50.0w/v％，或约47％至约50.0w/v％。

在一些实施方案中，式1化合物的量为约0.5％，约1.0％，约1.5％，约2.0％，约2.5％，约3.0％，约3.5％，约4.0％，约4.5％，约5.0％，约5.5％，约6.0％，约6.5％，约7.0％，约7.5％，约8.0％，约8.5％，约9.0％，约9.5，约10％，约15％，约20％，约25％，约30％，约35％，约40％，约45％，或约50％w/v。

本发明一个实施方案的制剂具有约1.0％至10.0w/v％的式1化合物。本发明一个实施方案的制剂具有约0.01％至10.0w/v％的式1化合物。本发明一个实施方案的制剂具有约5.0％至10.0w/v％的式1化合物。本发明一个实施方案的制剂具有约10％至约50.0w/v％的式1化合物。本发明一个实施方案的制剂具有约10％至约20.0w/v％的式1化合物。本发明一个实施方案的制剂具有约10％至约35.0w/v％的式1化合物。

在一些实施方案中，为增加式1化合物的稳定性，该制剂通过添加缓冲剂组分而缓冲。在一些实施方案中，该水溶液缓冲至pH为约6.0至约8.0。在一些实施方案中，该水溶液的pH缓冲至范围为约6.5至约8.0，约7.0至约8.0，约7.5至约8.0，约6.0至约7.5，约6.5至约7.5，约7.0至约7.5，6.0至约7.0，约6.5至约7.0，约7.0至约7.5，或约7.5至约8.0。在一些实施方案中，该水溶液缓冲至pH为约6.0，约6.5，约7.0，约7.5，约8.0或约8.5。

在一些实施方案中，该水溶液用磷酸二氢钠缓冲至pH为约6.0至约8.0。在一些实施方案中，该水溶液的pH缓冲至范围为约6.5至约8.0，约7.0至约8.0，约7.5至约8.0，约6.0至约7.5，约6.5至约7.5，约7.0至约7.5，6.0至约7.0，约6.5至约7.0，约7.0至约7.5，或约7.5至约8.0。在一些实施方案中，该水溶液用磷酸二氢钠缓冲至pH为约6.0，约6.5，约7.0，约7.5，约8.0或约8.5。在一些实施方案中，该缓冲剂为磷酸氢钠。

抗氧化剂

在本发明一些实施方案中，式1化合物的制剂包含一种或多种抗氧化剂以防止式1化合物的氧化降解。在一些实施方案中，该一种或多种抗氧化剂包括硫代硫酸盐。在一些实施方案中，式1化合物的制剂中使用的该一种或多种抗氧化剂包括硫代硫酸钠。在一些实施方案中，式1化合物的制剂中使用的抗氧化剂包括焦亚硫酸盐。在一些实施方案中，该抗氧化剂包括硫酸氢钠。

可用于形成本发明的药物制剂的其它抗氧化剂包括，但不限于，没食子酸的丙基酯、没食子酸的辛基酯和没食子酸的十二烷基酯，丁羟基茴香醚(BHA，通常作为邻和间异构体的混合物购买)，绿茶提取物，尿酸，半胱氨酸，丙酮酸盐(酯)，去甲二氢愈创木脂酸，抗坏血酸，抗坏血酸盐如抗坏血酸棕榈酸盐和抗坏血酸钠，抗坏血酸葡糖胺，维生素E(即，生育酚如a-生育酚)，维生素E衍生物(例如，醋酸生育酚)，类维生素A类如视黄酸，视黄醇，反式-视黄醇，顺式-视黄醇，反式-视黄醇和顺式-视黄醇的混合物，3-脱氢视黄醇和维生素A的衍生物(例如，视黄基乙酸酯，视黄醛和视黄基棕榈酸酯，也称为tetinyl palmitate)，柠檬酸钠，亚硫酸钠，番茄红素，花青素(anthocyanids)，生物黄酮素(bioflavinoids)(例如，橙皮素(hesperitin)，柚皮苷(naringen)，芸香苷和槲皮素)，超氧化物岐化酶，谷胱甘肽过氧化物酶，丁羟基甲苯(BHT)，吲哚-3-甲醇，pycnogenol，褪黑素，莱菔硫烷，孕烯醇酮，硫辛酸和4-羟基-5-甲基-3[2H]-呋喃酮。在不同实施方案中，不包含一种或多种上述抗氧化剂，或它们以低于有效量存在，包括单独存在或以组合形式存在。

在一些实施方案中，使用的抗氧化剂的量的范围为约0.01-0.5％w/v。在一些实施方案中，使用的抗氧化剂的量的范围为约0.1-约0.5％，约0.2-约0.5％，约0.3-约0.5％，约0.4-约0.5％，约0.01-约0.4％，约0.1-约0.4％，约0.2-约0.4％，约0.3-约0.4％，约0.01-约0.3％，约0.1-约0.3％，约0.2-约0.3％，约0.01-约0.2％，约0.1-约0.2％，或约0.01-约0.1％。在一些实施方案中，硫代硫酸钠存在的量能提供制剂以抗氧化稳定性，且硫代硫酸钠的量基于所有抗氧化剂的重量的百分比为大于50％重量。

鼓泡

在一些实施方案中，制剂中式1化合物的稳定性进一步通过用惰性气体对制剂进行鼓泡而改善。多种惰性气体可用作鼓泡物质包括但不限于氮气、氩气和氦气。在一些实施方案中，所述惰性气体为氮气。通常进行所述鼓泡直到氧气从式1化合物的制剂减少或完全去除。鼓泡的时间取决于多种因素，包括制剂的量、搅动的有效性和惰性气体的流速。在一些实施方案中，鼓泡通过使惰性气体鼓泡通过制剂达约1分钟-约12小时来进行。在一些实施方案中，将制剂鼓泡以下时间段：约1分钟-约11小时，约1分钟-约10小时，约1分钟-约9小时，约1分钟-约8小时，约1分钟-约7小时，约1分钟-约6小时，约1分钟-约5小时，约1分钟-约4小时，约1分钟-约3小时，约1分钟-约2小时，约1分钟-约1小时，约1分钟-约45分钟，约1分钟-约30分钟，约1分钟-约15分钟，约1分钟-约10分钟，约1分钟-约9分钟，约1分钟-约8分钟，约1分钟-约7分钟，约1分钟-约6分钟，约1分钟-约5分钟，约1分钟-约4分钟，约1分钟-约3分钟，约1分钟-约2分钟。在一些实施方案中，鼓泡持续少于约1分钟。

其它赋形剂和组分

本发明组合物的组分的溶解性可通过组合物中的表面活性剂或其它合适的助溶剂而增强。该助溶剂包括聚山梨醇酯20、60和80、F68、F-84和P-103、环糊精，或本领域技术人员已知的其它试剂。可用于形成本发明的药物组合物和剂型的表面活性剂包括，但不限于，亲水性表面活性剂，亲脂性表面活性剂，及其混合物。即，可使用亲水性表面活性剂的混合物，可使用亲脂性表面活性剂的混合物，或可使用至少一种亲水性表面活性剂和至少一种亲脂性表面活性剂的混合物。该表面活性剂可为任何合适的、无毒的化合物，其与药物无反应性且实质上减少药物、赋形剂和给药位点之间的表面张力。

在一些实施方案中，本发明的制剂不含有表面活性剂。在一些实施方案中，本发明的制剂为不包含表面活性剂的局部制剂。在一些其它实施方案中，该制剂基本上不包含表面活性剂，即包含少于约0.0001％重量的表面活性剂。在一些实施方案中，该制剂基本上不包含表面活性剂。

然而，如果需要的话，该制剂可包含局部制剂中通常使用的表面活性剂，如油酸、卵磷脂、脱水山梨醇三油酸酯、西吡氯铵、苯扎氯铵、聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单月桂酸酯、聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单硬脂酸酯、聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单油酸酯、聚氧丙烯/聚氧乙烯嵌段共聚物、聚氧丙烯/聚氧乙烯/乙二胺嵌段共聚物、乙氧基化蓖麻油等，其中如果存在的话，表面活性剂的比例可为约0.0001至1％重量，或约0.001至0.1％重量，以总制剂计。其它合适的表面活性剂/乳化剂是本领域技术人员已知的且列在CTFA国际化妆品原料词典和手册，第2卷，第7版(1997)中。

其它合适的水性媒介物包括，但不限于，林格溶液和等渗氯化钠。水性悬浮液可包括悬浮剂如纤维素衍生物、海藻酸钠、聚乙烯基-吡咯烷酮和西黄蓍胶、和湿润剂如卵磷脂。用于水性悬浮液的合适的防腐剂包括对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸正丙酯。在一些实施方案中，本发明的制剂不包含或基本上不包含悬浮剂。在一些其它实施方案中，该制剂为不包含悬浮剂的溶液。

可用于形成本发明的药物组合物和剂型的螯合剂包括，但不限于，乙二胺四乙酸(EDTA)、EDTA二钠、乙二胺四乙酸二钠钙、EDTA三钠、白蛋白、转铁蛋白、去铁胺、除铁灵(desferal)、甲磺酸去铁胺、EDTA四钠和EDTA二钾、偏硅酸钠或这些中任意的组合。

可用于形成本发明的药物组合物和剂型的防腐剂包括，但不限于，purite，过氧化物，过硼酸盐，咪唑烷基脲，重氮烷基脲，苯氧基乙醇，氯铵(alkonium)包括苯扎氯铵，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯。在其它实施方案中，用于本发明的组合物的合适的防腐剂包括:苯扎氯铵，purite，过氧化物，过硼酸盐，硫柳汞，氯丁醇，对羟苯甲酸甲酯，对羟苯甲酸丙酯，苯基乙醇，乙二胺四乙酸二钠，山梨酸，Onamer M，或本领域技术人员已知的其它试剂。在本发明一些实施方案中，该防腐剂的用量可为0.004％至0.02％w/v。在本申请的一些组合物中，该防腐剂，例如，苯扎氯铵、对羟苯甲酸甲酯和/或对羟苯甲酸丙酯，可以约0.001％至少于约0.01％的量使用，例如约0.001％至约0.008％，或约0.005％w/v。已发现，浓度为约0.005％的苯扎氯铵可足以防止本发明的组合物受微生物侵袭。例如，眼科滴剂或用于施加于皮肤的制剂可使用对羟苯甲酸甲酯和对羟苯甲酸丙酯(分别为约0.02％w/v和约0.04％w/v)的混合物。在一些实施方案中，这些制剂使用的对羟苯甲酸甲酯和/或对羟苯甲酸丙酯的量分别为至多约0.02％w/v和至多约0.04％w/v，其包括不使用对羟苯甲酸甲酯或不使用对羟苯甲酸丙酯的实施方案。在不同实施方案中，基本上不包含防腐剂。

可优选使用防腐剂以防止使用过程中的微生物污染。合适的防腐剂包括:苯扎氯铵、硫柳汞、氯丁醇、对羟苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟苯甲酸丙酯、苯基乙醇、咪唑烷基脲、重氮烷基脲、苯氧基乙醇、乙二胺四乙酸二钠、山梨酸、Onamer M，或本领域技术人员已知的其它试剂。在现有技术的眼科产品中，该防腐剂可以0.004％至0.02％的水平使用。

在本申请的一些组合物中，对羟苯甲酸甲酯和对羟苯甲酸丙酯组合使用。

在本申请的组合物中，防腐剂苯扎氯铵，可使用的水平为约0.001％重量至少于约0.01％重量，例如约0.001％重量至约0.008％重量，或为约0.005％重量。

也可添加其它试剂，如抗微生物剂，以防止储存时的腐败，即，抑制微生物如酵母和霉菌生长。合适的抗微生物剂通常选自对羟基苯甲酸甲基酯和对羟基苯甲酸丙基酯(即，对羟苯甲酸甲酯和对羟苯甲酸丙酯)、苯甲酸钠、山梨酸、咪脲、purite、过氧化物、过硼酸盐及其组合。

在一些实施方案中，本发明的制剂包含抑制或多种润滑剂。可用于形成本发明的药物组合物和剂型的润滑剂包括，但不限于，硬脂酸钙、硬脂酸镁、矿物油、轻质矿物油、甘油、山梨醇、甘露醇、聚乙二醇、其它二醇、硬脂酸、月桂基硫酸钠、滑石、氢化植物油(例如，花生油、棉子油、向日葵油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)、硬脂酸锌、油酸乙酯、月桂酸乙酯、琼脂、或其混合物。其它润滑剂包括，例如，syloid硅胶、合成性二氧化硅的凝结气溶胶、或其混合物。润滑剂可任选添加的量为少于药物组合物的约1重量百分比。在一些实施方案中，所述制剂不包含或基本上不包含润滑剂。在一些其它实施方案中，所述制剂为不包含润滑剂的溶液。

本发明的制剂包含一种或多种增稠剂。可用于形成本发明的药物组合物和剂型的增稠剂包括，但不限于，肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、新戊酸异癸酯、角鲨烯、矿物油、C₁₂-C₁₅苯甲酸酯和氢化聚异丁烯。不破坏最终产物的其它化合物的试剂可能是期望的，如非离子增稠剂。其它增稠剂的选择是本领域技术人员众所周知的。在一些实施方案中，所述制剂基本上不包含增稠剂。在一些情况下所述制剂不包含增稠剂。在一些实施方案中，所述制剂为不包含增稠剂的溶液。

本发明的制剂可进一步包含其它药理活性成分，只要它们不与本发明的目的相冲突。在多种活性成分的组合中，考虑到它们的作用和安全性，可适当增加或降低它们各自的含量。

稳定性和降解

在一些实施方案中，当在温度40℃储存一个月时本发明的制剂中形成的式1化合物总降解产物少于1.0％。在一些其它实施方案中，当在温度40℃储存一个月时，形成的式1化合物的总降解产物少于约0.9％，约0.8％，约0.7％，约0.6％，约0.5％，约0.4％，约0.3％，约0.2％，或约0.1％。

在一些其它实施方案中，当在温40℃储存约2个月，约3个月，约4个月，约5个月，约6个月时本发明的制剂中形成的式1化合物的总降解产物少于1.0％。

在一些情况下该药学上可接受的制剂的有效期为约1-5年。在一些情况下该制剂的有效期为约1、2、3或4年。在一些情况下该制剂的有效期大于5年。在一些情况下该制剂的有效期少于1年。在一些情况下该制剂的有效期为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或11个月。

在一些情况下，式1化合物的总降解产物在产品过期时的范围为大于0.1-10％。在一些情况下总降解产物在过期时的范围为约0.01-1，约0.01-2，约0.01-3，约0.01-4，约0.01-5，约0.01-6，约0.01-7，约0.01-8，或约0.01-9，约1-2，约1-3，约1-4，约1-5，约1-6，约1-7，约1-8，约1-9，约2-3，约3-4，约2-5，约2-6，约2-7，约2-8，约2-9，约3-4，约3-5，约3-6，约3-7，约3-8，约3-9，约3-10，约4-5，约4-6，约4-7，约4-8，约4-9，约4-10，约5-6，约5-7，约5-8，约5-9，约5-10，约6-7，约6-8，约6-9，约6-10，约7-8，约7-9，约7-10，约8-9，约8-10或约9-10％。在一些实施方案中，在过期时总降解产物的量为约1％，约2％，约3％，约4％，约5％，约6％，约7％，约8％，约9％，约10％。在一些实施方案中，在过期时总降解产物的量为约0.01％，约0.05％，约0.1％，约0.15％，约0.2％，约0.25％，约0.3％，约0.35％，约0.40％，约0.45％，约0.50％，约0.55％，约0.60％，约0.65％，约0.70％，约0.75％，约0.80％，约0.85％，约0.90％，约0.95％，或约1.0％。

在一些情况下，式1化合物的药物制剂储存在-5至65℃。在一些情况下该制剂可储存在约0℃，约5℃，约10℃，约15℃，约20℃，约25℃，约30℃，约35℃，约40℃，约45℃，约50℃，约55℃，约60℃，或约65℃。在不同实施方案中，该组合物储存在环境温度或低于环境温度。

II.治疗方法

在一些实施方案中、式1化合物存在的量足以产生治疗效果以使干眼症状平均减少了至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％，多于90％，或基本上消除干眼症状。

在一些实施方案中，式1化合物存在的量足以在受试者治疗的眼中使视网膜新血管形成平均减少了至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％，多于90％，或基本上消除视网膜新血管形成。

在一些实施方案中，有效量的式1化合物为日剂量约1x 10-¹⁰，1x10-⁹，1x 10^-8，1x10^-7，1x 10^-6，1x 10^-5，1x 10^-4，1x 10^-3，1x 10^-2，1x10^-1，1，1x 10¹，1x 10²克。

给药

本发明的制剂可利用许多合适的给药方式。递送至身体的感染区域可通过局部或全身给药实现。合适的制剂和其它载体描述于Remington“The Science and Practice ofPharmacy”(20^th Ed.，Lippincott Williams&Wilkins，Baltimore MD)，将其教导的内容整体并入本申请作为参考。

为了减少眼病中的炎症，本发明的药物组合物优选递送至视网膜、眼内空间、眼表面、互相连接的神经支配、结膜、泪腺、或睑板腺。

在一些实施方案中，该治疗剂局部给药。在一些实施方案中，该治疗剂通过滴眼剂局部给药。如果以分开的组合物的形式给药药物的组合，它们可通过相同途径或不同途径给药。如果以单一组合物的形式给药药物的组合，它们可通过任何合适的途径给药。在一些实施方案中，药物的组合作为单一组合物局部给药。在不同实施方案中，将有效量的治疗剂给药于眼表面，而不将有效量的治疗剂给药于皮肤。

在一些实施方案中，式1化合物以单一剂量给药。式1化合物的单一剂量也可在其与另一物质(例如，止痛剂)共同给药以在治疗急性病症时使用。

在一些实施方案中，式1化合物(其本身或与其它药物组合)以分多次剂量给药。给药可为每天约1次、2次、3次、4次、5次、6次、7次、8次、9次、10次或多于10次。给药可为约每年一次、每年两次、每6个月一次，每4个月一次，每3个月一次，每60天一次，一月一次、两周一次、一周一次或每隔一天一次。在一个实施方案中，所述药物为止痛剂。在另一实施方案中，式1化合物和另一治疗物质一起给药，约每天一次至约每天10次。在另一实施方案中，式1化合物和另一治疗物质的给药持续少于约7天。在另一实施方案中该共同给药持续多于约6天、10天、14天、28天、2个月、6个月、或1年。在一些情况下，共同给药按需要维持尽可能长时间，例如，给药用于治疗慢性炎症。

本发明的组合物的给药可按需要持续尽可能长的时间。在一些实施方案中，本发明的组合物给药超过1、2、3、4、5、6、7、14、或28天。在一些实施方案中，本发明的组合物给药少于28、14、7、6、5、4、3、2、或1天。在一些实施方案中，本发明的组合物不间断地长期给药，例如，用于治疗慢性疼痛。

本发明的式1化合物的制剂的剂量可通过常规实验确定。日剂量范围可为约1x10^-8g至5000mg。日剂量范围可取决于所使用的式1化合物的形式，例如，酯或盐，和/或给药途径，如本文所述。例如，对于全身给药，典型日剂量范围为，例如约1-5000mg，或约1-3000mg，或约1-2000mg，或约1-1000mg，或约1-500mg，或约1-100mg，或约10-5000mg，或约10-3000mg，或约10-2000mg，或约10-1000mg，或约10-500mg，或约10-200mg，或约10-100mg，或约20-2000mg或约20-1500mg或约20-1000mg或约20-500mg，或约20-100mg，或约50-5000mg，或约50-4000mg，或约50-3000mg，或约50-2000mg，或约50-1000mg，或约50-500mg，或约50-100mg，约100-5000mg，或约100-4000mg，或约100-3000mg，或约100-2000mg，或约100-1000mg，或约100-500mg。在一些实施方案中，式1化合物的日剂量为约100，200，300，400，500，600，700，800，900，或1000mg。在一些实施方案中，式1化合物的日剂量为10mg。在一些实施方案中，式1化合物的日剂量为100mg。在一些实施方案中，式1化合物的日剂量为500mg。在一些实施方案中，式1化合物的日剂量为1000mg。

对于局部递送至眼表面，典型的日剂量范围为，例如约1x10^-8g至5.0g，或约1x10^{- 8}g至2.5g，或约1x10^-8g至1.00g，或约1x10^-8g至0.5g，或约1x10^-8g至0.25g，或约1x10^-8g至0.1g，或约1x10^-8g至0.05g，或约1x10^-8g至0.025g，或约1x10^-8g至1x 10^-2g，或约1x10^-8g至5x 10^-3g，或约1x10^-8g至2.5x 10^-3g，或约1x10^-8g至1x 10^-3g，或约1x10^-8g至5x 10^-4g，或约1x10^-7g至5.0g，或约1x10^-7g至2.5g，或约1x10^-7g至1.00g，或约1x10^-7g至0.5g，或约1x10^-7g至0.25g，或约1x10^-7g至0.1g，或约1x10^-7g至0.05g，或约1x10^-7g至0.025g，或约1x10^-7g至1x10^-2g，或约1x10^-7g至5x 10^-3g，或约1x10^-7g至2.5x 10^-3g，或约1x10^-7g至1x 10^-3g，或约1x10^-7g至5x 10^-4g，或约1x10^-6g至5.0g，或约1x10^-6g至2.5g，或约1x10^-6g至1g，或约1x10^-6g至0.5g，或约1x10^-6g至0.25g，或约1x10^-6g至0.1g，或约1x10^-6g至5x10^-2g，或约1x10^-6g至5x10^-2g，或约1x10^-6g至2.5x10^-2g，或约1x10^-6g至1x10^-2g，或约1x10^-6g至5x10^-3g，或约1x10^-6g至2.5x10^-3g，或约1x10^-6g至1x10^-3g，或约1x10^-6g至5x10^-4g，或约1x10^-5g至5g，或约1x10^-5g至2.5g，或约1x10^-5g至1g，或约1x10^-5g至0.5g，或约1x10^-5g至0.25g，或约1x10^-5g至0.1g，或约1x10^-5g至0.05g，或约1x10^-5g至2.5x10^-2g，或约1x10^-5g至1x10^-2g，或约1x10^-5g至5x10^-3g，或约1x10^-5g至2.5x10^-3g，或约1x10^-5g至1x10^-3g，或约1x10^-5g至5x10^-4g。在一些实施方案中，式1化合物的日剂量为约1x 10^-7，1x 10^-6，1x 10^-5，1x 10^-4，1x 10^-3g，1x 10^-2g，1x 10¹g，或1g。在一些实施方案中，式1化合物的日剂量为1x 10^-7g。在一些实施方案中，式1化合物的日剂量为1x 10^-5g。在一些实施方案中，式1化合物的日剂量为1x 10^-3g。在一些实施方案中，式1化合物的日剂量为1x 10^-2g。在一些实施方案中，受试者的剂量范围为约1x10^-8g至5.0g，或约1x10^-8g至2.5g，或约1x10^-8g至1.00g，或约1x10^-8g至0.5g，或约1x10^-8g至0.25g，或约1x10^-8g至0.1g，或约1x10^-8g至0.05g，或约1x10^-8g至0.025g，或约1x10^-8g至1x10^-2g，或约1x10^-8g至5x 10^-3g，或约1x10^-8g至2.5x 10^-3g，或约1x10^-8g至1x 10^-3g，或约1x10^-8g至5x 10^-4g，或约1x10^-7g至5.0g，或约1x10^-7g至2.5g，或约1x10^-7g至1.00g，或约1x10^-7g至0.5g，或约1x10^-7g至0.25g，或约1x10^-7g至0.1g，或约1x10^-7g至0.05g，或约1x10^{- 7}g至0.025g，或约1x10^-7g至1x 10^-2g，或约1x10^-7g至5x 10^-3g，或约1x10^-7g至2.5x 10^-3g，或约1x10^-7g至1x 10^-3g，或约1x10^-7g至5x 10^-4g，或约1x10^-6g至5.0g，或约1x10^-6g至2.5g，或约1x10^-6g至1g，或约1x10^-6g至0.5g，或约1x10^-6g至0.25g，或约1x10^-6g至0.1g，或约1x10^-6g至5x10^-2g，或约1x10^-6g至5x10^-2g，或约1x10^-6g至2.5x10^-2g，或约1x10^-6g至1x10^-2g，或约1x10^-6g至5x10^-3g，或约1x10^-6g至2.5x10^-3g，或约1x10^-6g至1x10^-3g，或约1x10^-6g至5x10^-4g，或约1x10^-5g至5g，或约1x10^-5g至2.5g，或约1x10^-5g至1g，或约1x10^-5g至0.5g，或约1x10^-5g至0.25g，或约1x10^-5g至0.1g，或约1x10^-5g至0.05g，或约1x10^-5g至2.5x10^-2g，或约1x10^-5g至1x10^-2g，或约1x10^-5g至5x10^-3g，或约1x10^-5g至2.5x10^-3g，或约1x10^-5g至1x10^-3g，或约1x10^-5g至5x10^-4g。在一些实施方案中，如上所述的单独剂量每天重复1、2、3、4、5、6、7、8、9或10次。

在本发明一些实施方案中，本发明的局部制剂在眼内或眼周释放的治疗剂足以维持式1化合物的水平在剂量与剂量之间为至少约10nM，约50nM，约100nM，约150nM，约200nM，约250nM，约300nM，约350nM，约500nM，约600nM，约700nM，约800nM，约900nM，约1mM，约2mM，约3mM，约5mM，约6mM，约7mM，约8mM，约9mM，约10mM，约15mM，约20mM或约25mM。

在本发明一些实施方案中，本发明的滴眼制剂在眼内或眼周释放的治疗剂足以实现视网膜中式1化合物的水平在剂量与剂量之间为至少约10nM，约50nM，约100nM，约150nM，约200nM，约250nM，约300nM，约350nM，约500nM，约600nM，约700nM，约800nM，约900nM，约1mM，约2mM，约3mM，约5mM，约6mM，about7mM，约8mM，约9mM，约10mM，约15mM，约20mM或约25mM。在一些其它实施方案中，由本发明的滴眼制剂释放的治疗剂所实现的视网膜中式1化合物的量将少于约10nM。在一些实施方案中，视网膜中式1的的水平少于约9nM，约8nM，约7nM，约6nM，约5nM，约4nM，约3nM，约2nM或约1nM。在一些情况下，基本上没有任何量的式1化合物从本发明的滴眼制剂达到视网膜。在一些情况下，没有任何量的式1化合物的量从本发明的滴眼制剂达到视网膜。在一些情况下，本发明的制剂也可用于缓释或持续释放眼内或眼周设备和制剂。在一些实施方案中，在给药期释放的典型的剂量范围为约0.1mg至约100mg式1化合物。在其它实施方案中，在给药期释放约1mg至约50mg，约1至约25mg，约5mg至约100mg，约5至约50mg，约5至约25mg，约10mg至约100mg，约10mg至约50mg，约10mg至约25mg，或约15mg至约50mg。对于缓释的眼内或眼周设备和制剂的给药期，通常范围为约10天至约1年，约30天至约1年，约60天至约1年，约3个月至约1年，约4个月至约1年，约5个月至约1年，或约6个月至约1年。在一些实施方案中，该缓释的眼内或眼周设备和制剂在约1个月至约9个月，约1个月至约8个月，约1个月至约7个月，约1个月至约6个月，约1个月至约5个月，约1个月至约4个月，或约1个月至约3个月的期间内释放治疗剂。在其它实施方案中，该缓释制剂和设备释放治疗剂长达1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、12个月、18个月、2年、30个月、或3年。

在本发明一些实施方案中，该缓释制剂或植入剂在眼内或眼周释放的治疗剂足以维持式1化合物的水平在1年内为至少约10nM，约50nM，约100nM，约150nM，约200nM，约250nM，约300nM，约350nM，约500nM，约600nM，约700nM，约800nM，约900nM，约1mM，约2mM，约3mM，约5mM，约6mM，about7mM，约8mM，约9mM，约10mM，约15mM，约20mM或约25mM。在本发明一些实施方案中，该缓释制剂或植入剂在眼内或眼周释放的治疗剂足以维持式1化合物的水平在6个月内为至少约10nM，约50nM，约100nM，约150nM，约200nM，约250nM，约300nM，约350nM，约500nM，约600nM，约700nM，约800nM，约900nM，约1mM，约2mM，约3mM，约5mM，约6mM，about7mM，约8mM，约9mM，约10mM，约15mM，约20mM或约25mM。

所述给药可每只眼每天给药多次，优选1至10次，更优选1至4次，最优选一天一次。给予的滴剂的量可为约10-100μl，约10-90μl，约10-80μl，约10-70μl，约10-60μl，约10-50μl，约10-40μl，约10-30μl，约20-100μl，约20-90μl，约20-80μl，约20-70μl，约20-60μl，约20-50μl，约20-40μl，或约20-30μl。本发明一个实施方案给予的滴剂的范围为约10至约30μl。本发明一个实施方案给予的滴剂的范围为约10至约100μl。本发明一个实施方案给予的滴剂的量为约20至约50μl。本发明一个实施方案给予的滴剂的范围为约20至约40μl。本发明一个实施方案给予的滴剂的范围为约10至约60μl。

本发明的制剂可每次给予多滴，1至4滴，优选1至3滴，更优选1至2滴，最优选每天一滴。在一个实施方案中，本发明的制剂约每次给予1滴且每天给予一次。

本发明的制剂可以多剂量形式或单剂量形式包装。在一些情况下，该制剂以多剂量形式包装。在一些实施方案中，该制剂包装为单一剂量单元。在本发明一些实施方案中，相对多剂量包装，单一剂量包装的制剂可提供多种优点，包括剂量控制、增加的患者顺应性、改善的产品标记，和减少伪造品。在多种实施方案中，单一剂量包装的本发明的制剂可为小瓶(vial)、安瓿瓶、管、瓶(bottle)、袋、包、注射器或罩泡板包装的形式。在一些实施方案中，该单一剂量容器可组合在一起且置于另外的容器中。在一些实施方案中，该第二容器为袋子。

本发明的制剂可每次给药几滴，1至4滴，1至3滴，1至2滴，或每天一滴。

III.试剂盒

本发明的组合物也可作为试剂盒提供。该试剂盒包括在合适的包装中的本发明的化合物、和书面材料(其可包括使用说明、临床研究的讨论、副作用的列举等)。该试剂盒可进一步包含另一治疗剂，其与本发明式1化合物共同给药。在一些实施方案中，该治疗剂和本发明式1化合物在试剂盒内作为单独的组合物在单独的容器中提供。在一些实施方案中，该治疗剂和本发明式1化合物在试剂盒内作为单独的组合物在容器中提供。合适的包装和使用的另外的制品(例如，用于液体制剂的量杯，使对空气的暴露最小化的箔片包装，分配器，等)是本领域已知的且可包含在试剂盒中。

实施例

实施例1:式1化合物的5.0％溶液的稳定性

制备三个单独的式1化合物的5.0％水溶液且使其分别在约5℃、25℃和40℃的温度静置约15个月。各溶液总降解产物的百分比在约每4周后测量。该实验的结果图示于图1。对于在5℃储存的溶液，在约6个月后式1化合物的水溶液具有约5％的总降解产物(没有单独的降解产物大于ICH质控阈值)，而对于在25℃和40℃储存的溶液，在约2个月内具有5％总降解产物(没有单独的降解产物大于ICH质控阈值)。

实施例2:式1化合物的三种不同制剂的稳定性

制备相同浓度的式1化合物的三种单独的溶液。第一种溶液(pH＝6.0)储存在40℃，不添加任何其它添加剂，保持约4个月。第二种溶液(pH＝6.0)进一步用焦亚硫酸盐处理且使之在40℃静置约4个月。第三种溶液的pH缓冲至pH 7.5且使之在40℃静置约4个月而不添加任何其它添加剂。各溶液的总降解产物的百分比在约每4周后测量。该实验的结果图示于图2。添加抗氧化剂增加制剂的稳定性，而增加pH至约7.5但不添加任何抗氧化剂也一样增加制剂的稳定性。

实施例3:抗氧化剂对稳定性的影响

制备4种单独的包含3％w/v式1化合物的溶液。第一溶液的pH缓冲至6.5，添加0.3％w/v硫代硫酸盐且将溶液储存在50℃保持约9周。第二溶液的pH调节至6.5，添加0.3％硫代硫酸盐且将溶液储存在40℃保持约9周。第三溶液的pH缓冲至6.5，添加0.3％硫代硫酸盐且将溶液在60℃静置约9个月。不将抗氧化剂添加至第四溶液，将其缓冲至pH为7.5且使之在40℃的温度静置约9周。各溶液的总降解产物的百分比在约每2-4周后测量。该实验的结果图示于图3。添加抗氧化剂增加制剂的稳定性。

实施例4:式1化合物的浓度对制剂稳定性的影响

研究三种不同浓度的式1化合物，1.0％，3.0％和5.0％。样品在40℃的温度监测。三种溶液的pH保持在7.0-7.5的范围。监测三种溶液随时间的总降解百分比(％)。该实验的结果图示于图4。对于前两周，所有三种组合物在类似条件下具有类似的稳定性。

监测有和没有0.1％EDTA的溶液。在这些实验中，EDTA的存在或不存在确实显著改变式1化合物的制剂的稳定性。

实施例5:历经8周研究式1化合物单独的降解产物的稳定性

制备两种包含5.0％w/v式1化合物的溶液。第一溶液储存在40℃保持约9周且第二溶液储存在60℃保持约9周。式1的两种主要降解产物(降解产物A和降解产物B)的各自的百分比通过HPLC分析测量，对于每种溶液在约每2-4周后测量。该实验的结果图示于图5。

储存温度不会显著影响降解产物A和B的形成百分比(％)，因为两种溶液(一个在40℃，另一个在60℃)在任何具体时间显示量相当的单独的降解产物。

实施例6:研究式1化合物的降解机理

图6显示当降解通过反应如X→Y或X→Y+Z发生时化合物的典型降解曲线。式1化合物的降解曲线是如下制备的：以约每4周监测式1的1.0％和5.0％w/v溶液的总降解百分比，持续6个月。这些实验的结果图示于图7。式1的5.0％w/v溶液的降解速率大于式1的1.0w/v溶液的降解速率。当限速反应物如氧气的浓度减少时，两种溶液似乎达到相同的降解水平。这些结果表明式1化合物的降解可能是因为其与氧气的反应。

实施例7:用氮气鼓泡对式1化合物的制剂的稳定性的影响

制备式1化合物的4种单独的溶液。第一溶液的pH缓冲至6.0。第二溶液的pH也缓冲至6.0，且该溶液另外用氮气鼓泡。第三溶液的pH缓冲至7.0。第四溶液的pH也缓冲至7.0，且该溶液另外用氮气鼓泡。所有四种溶液储存在约40℃的温度持续约4个月。以约每4周测量各溶液的总降解产物的百分比。该实验的结果图示于图8。用氮气鼓泡的溶液相比没有用氮气鼓泡的溶液显示更好的稳定性。而且溶液在pH 7.0相比在pH 6.0的相应溶液显示改善的稳定性，表明pH对于式1的稳定性是一个关键变量。

实施例8:pH对氮气鼓泡的式1化合物的溶液的稳定性的影响

制备式1化合物的三种溶液。第一溶液的pH缓冲至6.0，第二溶液的pH也缓冲至7.0，且第三溶液的pH缓冲至7.5。所有三种溶液用氮气鼓泡且储存在约40℃的温度持续约4个月。以约每4周测量各溶液总降解产物的百分比。该实验的结果图示于图9。具有较高pH的氮气鼓泡的溶液显示改善的稳定性。

实施例9:pH对还包含一种或多种抗氧化剂的式1化合物的制剂的稳定性的影响

制备式1化合物的两种溶液。第一溶液的pH缓冲至6.0且第二溶液的pH也缓冲至7.0。将焦亚硫酸盐添加至两种溶液，且储存在约40℃的温度保持约4个月。以约每4周测量各溶液的总降解产物的百分比。该实验的结果图示于图10。这些结果表明添加抗氧化剂显著减少式1的降解和式1的稳定性对pH的敏感性。

实施例10:抗氧化剂对式1化合物的制剂的影响

制备式1的7种不同的溶液，缓冲至pH为约6.5。将亚硫酸氢钠(0.2％w/v)和硫代硫酸钠(0.3％w/v)添加至第一溶液，将亚硫酸氢钠(0.2％w/v)添加至第二溶液，将硫代硫酸钠(0.3％w/v)添加至第三溶液，将乙酰基半胱氨酸(0.2％w/v)添加至第四溶液，将硫代甘油(0.2％w/v)添加至第五溶液，将维生素E TPGS(053％w/v)添加至第六溶液，且将抗坏血酸(0.3％w/v)添加至第七溶液。所有溶液储存在约40℃的温度保持约一个月，然后测量各溶液总降解产物的百分比。该实验的结果图示于图11。出人意料地，仅包含硫代硫酸钠的溶液显示最佳的总体稳定性。

实施例11:pH对氮气鼓泡的溶液的稳定性的影响

制备式1化合物的五种不同的溶液。第一溶液缓冲至pH 6.0，第二溶液缓冲至pH7.0，第三溶液缓冲至pH 7.5，第四溶液缓冲至pH 8.0，且第五溶液缓冲至pH 8.5。不添加抗氧化剂且所有溶液储存在约40℃的温度保持约一个月，然后测量各溶液总降解产物的百分比。该实验的结果图示于图12。在较高pH的溶液显示更好的稳定性。

尽管在此已显示和描述了本发明优选实施方案，但对于本领域技术人员显而易见的是，该实施方案仅作为实例提供。本领域技术人员可在不偏离本发明的情况下进行多种改变、变化和更替。应理解，对本文所述的本发明的实施方案的多种替代可在实施本发明时采用。预期随附权利要求限定了本发明的范围，且这些权利要求及其等价物范围内的方法和结构由所述权利要求及其等价物涵盖。

Claims (15)

1.眼科组合物，其包含式1化合物或其盐，式1化合物为:

药学上可接受的载体；和

硫代硫酸盐，

其中当在40℃的温度储存一个月时所述组合物具有少于1％的式1化合物的总降解产物。

2.权利要求1所述的眼科组合物，其中所述药学上可接受的载体为水性载体。

3.权利要求1或2所述的眼科组合物，其中所述硫代硫酸盐的含量为0.01％至0.5％w/v。

4.权利要求3所述的眼科组合物，其中所述硫代硫酸盐的含量为0.3％w/v。

5.权利要求1所述的眼科组合物，其中所述硫代硫酸盐为硫代硫酸钠。

6.权利要求1所述的眼科组合物，其中所述组合物被缓冲至pH为6.0-8.5。

7.权利要求1所述的眼科组合物，其中式1化合物的含量为1％至5％w/v。

8.权利要求7所述的眼科组合物，其中式1化合物的含量为5％w/v。

9.权利要求1所述的眼科组合物，还包含鼓泡的氮气。

10.一种稳定包含式1化合物或其盐的眼科组合物的方法，式1化合物为:

其中所述方法包括以下步骤：

(i)将式1化合物溶解于水或水性载体中以形成混合物；和

(ii)在步骤(i)之前、之后或与步骤(i)同时向该混合物中添加稳定有效量的药学上可接受的成分，其中所述药学上可接受的成分包括硫代硫酸盐；和

(iii)储存所述组合物达一个月，

其中当在40℃的温度储存一个月时所述组合物具有小于1％的式1化合物的总降解产物。

11.权利要求10所述的方法，其中所述硫代硫酸盐为硫代硫酸钠且其含量为0.3％w/v。

12.权利要求10所述的方法，其中所述药学上可接受的成分包括缓冲剂组分使得该组合物的pH为6.0-8.5。

13.权利要求10所述的方法，其中所述式1的化合物的含量为1％至5％w/v。

14.权利要求1至9中任一项所述的眼科组合物在制备用于在需要的受试者中治疗眼病的药物中的用途，包括给药有效量的所述组合物至所述受试者的步骤,其中所述眼病为干眼病。

15.如权利要求14中所述的用途，其中所述给药步骤包括局部给药至眼。