CN104940917A - 用于治疗补体相关障碍的方法和组合物 - Google Patents
用于治疗补体相关障碍的方法和组合物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104940917A CN104940917A CN201510333793.3A CN201510333793A CN104940917A CN 104940917 A CN104940917 A CN 104940917A CN 201510333793 A CN201510333793 A CN 201510333793A CN 104940917 A CN104940917 A CN 104940917A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- antibody
- people
- fab
- patient
- complement
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/12—Antihypertensives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Neurology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Zoology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
本公开内容涉及含有人补体抑制剂的组合物,和所述组合物在治疗或预防补体相关障碍的方法中的应用,以及其它。在一些实施方案中,将所述抑制剂长期施用给患者。在一些实施方案中,以维持全身性补体抑制和防止突破的量和频率,将所述抑制剂施用给患者。在一些实施方案中,所述组合物含有结合人补体组分C5蛋白或诸如C5a或C5b等蛋白片段的抗体或其抗原结合片段。
Description
本申请是2009年11月10日提交的发明名称为“用于治疗补体相关障碍的方法和组合物”、申请号为“200980153390.3”的发明专利申请的分案申请。
相关申请的交叉引用
本申请要求下述美国临时专利申请系列号的利益:2008年11月10日提交的61/198,803;2008年11月18日提交的61/199,563;2008年11月18日提交的61/199,562;2008年11月18日提交的61/199,569;2008年11月19日提交的61/199,764;2008年12月1日提交的61/200,640;2008年12月1日提交的61/200,634;2008年12月1日提交的61/200,635;2009年5月28日提交的61/181,788;和2009年7月23日提交的61/228,047,它们各自的内容通过引用整体并入本文。
技术领域
本发明的领域是医学、免疫学、分子生物学和蛋白化学。
背景技术
补体系统与机体的其它免疫系统联合地起作用,以防御细胞和病毒病原体的侵入。至少有25种补体蛋白被发现是血浆蛋白和膜辅因子的复合物集合。血浆蛋白占脊椎动物血清中的球蛋白的约10%。通过在一系列复杂但精确的酶切割和膜结合事件中相互作用,补体组分实现它们的免疫防御功能。所产生的补体级联导致产生具有调理、免疫调节和裂解功能的产物。例如,在The Merck Manual第16版中提供了与补体活化相关的生物学活性的简要概述。
补体级联可以通过经典途径(CP)、凝集素途径或旁路途径(AP)进行。凝集素途径通常通过甘露糖-结合凝集素(MBL)向高甘露糖底物的结合来启动。AP可以是独立于抗体的,且可以被病原体表面上的某些分子启动。CP通常被靶细胞上的抗原位点的抗体识别和与其结合来启动。这些途径会聚于C3转化酶——在该点,补体组分C3被有活性的蛋白酶切割,生成C3a和C3b。
通过在血液血浆中富含的补体组分C3的自发水解,启动AP C3转化酶。该过程(也称作“空转”)通过C3中的硫酯键的自发切割而发生,形成C3i或C3(H2O)。表面的存在会促进空转,所述表面支持活化的C3的结合,和/或具有中性或阳性电荷特征(例如,细菌细胞表面)。C3(H2O)的这种形成允许血浆蛋白因子B的结合,这又允许因子D把因子B切割成Ba和Bb。Bb片段保持结合C3,形成含有C3(H2O)Bb的复合物——“流动相”或“启动”C3转化酶。尽管以小量产生,流动相C3转化酶可以将多种C3蛋白切割成C3a和C3b,并导致C3b的产生和它随后与表面的共价结合(例如,细菌表面)。结合到表面-结合的C3b上的因子B被因子D切割,从而形成表面-结合的含有C3b、Bb的AP C3转化酶复合物(参见,例如,Müller-Eberhard(1988)Ann Rev Biochem57:321-347.)。
在将第二种C3b单体加入AP C3转化酶以后,形成AP C5转化酶–(C3b)2,Bb(参见,例如,Medicus等人(1976)J Exp Med144:1076-1093和Fearon等人(1975)J ExpMed142:856-863.)。第二种C3b分子的作用是结合C5,并呈递它用于被Bb切割(参见,例如,Isenman等人(1980)J Immunol124:326-331.)。通过加入三聚蛋白备解素来稳定AP C3和C5转化酶,所述备解素描述在,例如,Medicus等人(1976),同上。但是,形成功能性旁路途径C3或C5转化酶不需要备解素结合(参见,例如,Schreiber等人(1978)Proc NatlAcad Sci USA75:3948-3952和Sissons等人(1980)Proc Natl Acad Sci USA77:559-562.)。
在补体组分C1(它是C1q、C1r和C1s的复合物)与抗体相互作用后,形成CP C3转化酶,所述抗体结合在靶抗原(例如,微生物抗原)上。C1的C1q部分与抗体-抗原复合物的结合造成C1的构象变化,其活化Clr。有活性的C1r然后切割C1-相关的C1s,由此产生有活性的丝氨酸蛋白酶。有活性的C1s把补体组分C4切割成C4b和C4a。象C3b一样,新产生的C4b片段含有高度反应性的硫醇,其容易地与靶表面(例如,微生物细胞表面)上的合适分子形成酰胺或酯键。C1s也把补体组分C2切割成C2b和C2a。由C4b和C2a形成的复合物是CP C3转化酶,其能把C3加工成C3a和C3b。在将C3b单体加给CP C3转化酶以后,形成CP C5转化酶–C4b,C2a,C3b(参见,例如,Müller-Eberhard(1988),同上和Cooper等人(1970)J Exp Med132:775-793.)。
除了它在C3和C5转化酶中的作用以外,C3b还起调理素的作用,这通过它与在抗原呈递细胞(诸如巨噬细胞和树突细胞)的表面上存在的补体受体的相互作用来实现。通常认为C3b的调理功能是补体系统的最重要的抗感染功能之一。具有阻断C3b功能的遗传损害的患者易于被多种病原性生物体感染,而具有在补体级联序列后期的损害的患者(即,具有阻断C5功能的损害的患者)被发现仅更易于奈瑟球菌属(Neisseria)感染,然后仅稍微更有倾向性。
AP和CP C5转化酶切割C5,后者是以大约75μg/ml(0.4μM)在正常血清中发现的190kDaβ球蛋白。C5被糖基化,它的质量的约1.5-3%归于碳水化合物。成熟的C5是999个氨基酸的115kDaα链与655个氨基酸的75kDaβ链由二硫键连接形成的异源二聚体。C5作为单拷贝基因的单链前体蛋白产物而合成(Haviland等人(1991)J.Immunol.146:362-368)。该基因的转录物的cDNA序列预测为1658个氨基酸的分泌型前-C5前体以及18个氨基酸的前导序列(参见,例如,美国专利号6,355,245)。
前-C5前体在氨基酸655和659之后被切割,产生β链和α链,所述β链作为氨基端片段(上述序列的氨基酸残基+1至655),所述α链作为羧基端片段(上述序列的氨基酸残基660至1658),在二者之间缺失了4个氨基酸(上述序列的氨基酸残基656-659)。
旁路的或经典的C5转化酶从C5的α链切割C5a,作为包含α链的前74个氨基酸的氨基端片段(即,上述序列的氨基酸残基660-733)。C5a的11kDa质量的大约20%归于碳水化合物。转化酶作用的切割位点是在上述序列的氨基酸残基733处或与其紧密邻近。结合或邻近该切割位点的化合物具有阻断C5转化酶接近切割位点、并从而作为补体抑制剂的潜力。
也可以通过C5转化酶活性以外的方法活化C5。有限的胰蛋白酶消化(参见,例如,Minta和Man(1997)J Immunol.119:1597-1602和Wetsel和Kolb(1982)J Immunol.128:2209-2216)和酸处理(Yamamoto和Gewurz(1978)J Immunol.120:2008和Damerau等人(1989)Molec.Immunol.26:1133-1142)也可以切割C5,并生成有活性的C5b。
C5的切割会释放C5a,即一种有效的过敏毒素和趋化因子,并导致裂解端补体复合物C5b-9的形成。通过放大下游炎症因子(诸如水解酶、活性氧类别(reactive oxygenspecies)、花生四烯酸代谢物和不同的细胞因子)的释放,C5a和C5b-9也具有多效细胞活化性质。
末端补体复合物的形成的第一步包含C5b与C6、C7和C8组合,以在靶细胞表面处形成C5b-8复合物。在C5b-8复合物与几个C9分子结合后,形成膜攻击复合物(MAC、C5b-9、末端补体复合物--TCC)。当足够数目的MAC插入靶细胞膜中时,它们产生的开口(MAC孔)介导靶细胞的快速渗透性裂解。更低的、非裂解浓度的MAC可以产生其它作用。具体地,小量C5b-9复合物向内皮细胞和血小板中的膜插入可以造成有害的细胞活化。在某些情况下,活化可能先于细胞裂解。
如上所述,C3a和C5a是过敏毒素。这些活化的补体组分可以触发肥大细胞脱颗粒作用,这从嗜碱性粒细胞和肥大细胞和炎症的其它介质释放出组胺,导致平滑肌收缩、血管渗透性增加、白细胞活化、和其它炎症现象,包括细胞增殖(导致细胞过多)。C5a也起趋化肽的功能,其用于将促炎症粒细胞吸引到补体活化部位。
C5a受体发现存在于支气管和肺泡上皮细胞和支气管平滑肌细胞的表面上。C5a受体还存在于嗜酸性粒细胞、肥大细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞和活化的淋巴细胞上。
尽管适当地起作用的补体系统会提供对抗感染微生物的稳健防御,补体的不适当调节或活化已经涉入多种障碍的发病机制,所述障碍包括,例如,类风湿性关节炎(RA);狼疮肾炎;缺血再灌注损伤;非典型的溶血性尿毒症综合征(aHUS);致密沉积物病(DDD);黄斑变性(例如,老年性黄斑变性(AMD));溶血、肝酶升高和低血小板(HELLP)综合征;血栓性血小板减少性紫癜(TTP);自发性胎儿死亡;微量免疫血管炎;大疱性表皮松解症;复发性胎儿死亡;多发性硬化(MS);外伤性脑损伤;和由心肌梗塞、心肺转流术和血液透析导致的损伤(参见,例如,Holers等人(2008)Immunological Reviews223:300-316)。
发明内容
本公开内容涉及含有人补体抑制剂(例如,补体组分C5的抑制剂,诸如抗-C5抗体)的组合物和使用所述组合物治疗或预防补体相关障碍的方法。在一些实施方案中,所述组合物含有结合人补体组分C5蛋白的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中,所述组合物含有结合人C5片段C5a或C5b的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中,所述C5抑制剂是小分子或核酸,例如,结合和促进哺乳动物中的C5 mRNA的失活的siRNA或反义RNA。
补体相关障碍包括人类的任意医学障碍,其治疗会直接地或间接地受益于补体系统的抑制。所述障碍通常特征在于补体系统的不适当调节,诸如不适当的:(i)补体系统的活化或(ii)受试者中的活化的补体系统的持续时间。补体相关障碍包括但不限于炎性和自身免疫性障碍。补体相关障碍可以是,例如,RA;抗磷脂抗体综合征(APS);狼疮肾炎;缺血再灌注损伤;aHUS;典型的(也称作腹泻或传染性)溶血性尿毒症综合征(tHUS);DDD;视神经脊髓炎(NMO);多病灶的运动神经病(MMN);MS;黄斑变性(例如,AMD);HELLP综合征;TTP;自发性胎儿死亡;微量免疫血管炎;大疱性表皮松解症;复发性胎儿死亡;和外伤性脑损伤。在一些实施方案中,所述补体相关障碍是补体-相关的血管障碍诸如心血管障碍、心肌炎、脑血管障碍、外周(例如,肌肉骨骼)血管障碍、肾血管障碍、肠系膜/肠血管障碍、血管炎、过敏性紫癜肾炎、系统性红斑狼疮-相关的血管炎、与类风湿性关节炎有关的血管炎、免疫复合物血管炎、塔卡亚萨病、扩张型心肌病、糖尿病性血管病、川崎病(动脉炎)、静脉气栓塞物(VGE)和在支架放置、旋转斑块切除术和经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)之后的再狭窄。其它补体相关障碍包括但不限于:重症肌无力(MG)、冷凝集素疾病(CAD)、皮肌炎、阵发性冷性血红蛋白尿(PCH)、格雷夫斯病、动脉粥样硬化、阿尔茨海默氏病、全身性炎症应答脓毒病、脓毒性休克、脊髓损伤、肾小球肾炎、桥本甲状腺炎、I型糖尿病、银屑病、天疱疮、自身免疫性溶血性贫血(AIHA)、原发性血小板减少性紫癜(ITP)、肺出血肾炎综合征、德戈斯病和灾难性APS(CAPS)。
在一个方面,本公开内容表征了治疗或预防人的补体相关障碍的方法。所述方法包括,给有此需要的人施用治疗有效量的组合物,所述组合物包含人补体的抑制剂(例如,人补体组分C5的抑制剂)。
在另一个方面,本公开内容表征了治疗或预防人的补体相关障碍的方法,所述方法包括,给有此需要的人施用组合物,所述组合物包含治疗有效量的人补体的抑制剂(例如,人补体组分C5的抑制剂)。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述抑制剂可以抑制人补体组分C5蛋白的表达。所述抑制剂可以抑制人补体组分C5蛋白的蛋白表达,或抑制编码所述蛋白的mRNA的表达。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述抑制剂可以抑制人补体组分C5切割成片段C5a和C5b。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述抑制剂结合和抑制C5a和C5b中的一种或两种。所述抑制剂可以是,例如,结合C5a或C5b的抗体。在一些实施方案中,所述抑制剂是结合C5a、但不结合全长C5的抗体。在一些实施方案中,所述抑制剂是结合C5b、但不结合全长C5的抗体。在一些实施方案中,所述抑制剂这样的抗体,其结合具有特定氨基酸序列的人C5a蛋白或其片段,所述氨基酸序列含有在SEQ ID NO:12-25中任一个所述的至少4个(例如,至少4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16或17或更多个)连续氨基酸,或由其组成。在一些实施方案中,所述抑制剂是这样的抗体,其结合具有在SEQ ID NO:12中描述的氨基酸序列的人C5a蛋白。在一些实施方案中,所述抑制剂是这样的抗体,其结合具有特定氨基酸序列的人C5b蛋白或其片段,所述氨基酸序列含有在SEQ ID NO:4或26中任一个所述的至少4个(例如,至少4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16或17或更多个)连续氨基酸,或由其组成。在一些实施方案中,所述抑制剂是这样的抗体,其结合具有在SEQ ID NO:4或26中描述的氨基酸序列的人C5b蛋白。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述抑制剂可以选自:多肽、多肽类似物、核酸、核酸类似物和小分子。所述多肽可以是结合人补体组分C5蛋白(诸如本文所述那些中的任一种)的抗体或其抗原结合片段,或由其组成。在一些实施方案中,所述抗体可以结合补体组分C5蛋白的α链。在一些实施方案中,所述抗体可以结合补体组分C5蛋白的β链。在一些实施方案中,所述抗体可以结合人补体组分C5的α链,且所述抗体可以(i)抑制人体液中的补体活化,(ii)抑制纯化的人补体组分C5与人补体组分C3b或人补体组分C4b的结合,和/或(iii)不结合不含有C5a的人补体活化产物(或任意前述性质的组合)。所述抗体可以结合具有SEQ ID NO:1-11中任一个描述的氨基酸序列或由其组成的人补体组分C5蛋白。所述抗体可以结合分离的寡肽,其包含与SEQ ID NO:5的氨基酸位置8至氨基酸位置12相对应的氨基酸序列。在一些实施方案中,所述抗体可以是单克隆抗体、单链抗体、人源化的抗体、全人抗体、多克隆抗体、重组抗体、双抗体、嵌合的或嵌合抗体、去免疫化的人抗体、全人抗体、单链抗体、Fv片段、Fd片段、Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2片段。在一些实施方案中,所述抗体可以是依库珠单抗或培克珠单抗。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述组合物可以静脉内地施用给人。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述补体相关障碍是旁路补体途径-相关的障碍。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述补体相关障碍是经典补体途径-相关的障碍。在一些实施方案中,所述补体相关障碍选自:类风湿性关节炎、缺血再灌注损伤、非典型的溶血性尿毒症综合征、血栓性血小板减少性紫癜、致密沉积物病、老年性黄斑变性、自发性胎儿死亡、微量免疫血管炎、大疱性表皮松解症、复发性胎儿死亡、多发性硬化、HELLP、先兆子痫、外伤性脑损伤、阿尔茨海默氏病、重症肌无力、冷凝集素疾病、皮肌炎、格雷夫斯病、桥本甲状腺炎、I型糖尿病、银屑病、天疱疮、自身免疫性溶血性贫血、原发性血小板减少性紫癜、肺出血肾炎综合征、抗磷脂综合征、灾难性抗磷脂综合征、视神经脊髓炎(NMO)、多病灶的运动神经病(MMN)、德戈斯病和本文所述的任意其它补体相关障碍。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以另外包括下述步骤:鉴别人具有、疑似具有补体相关障碍或处于发生危险中。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法还可以包括,在施用后,监测人的补体相关障碍的一种或多种症状的改善。
在其中所述补体相关障碍是aHUS的任一种本文所述方法的实施方案中,所述aHUS可以是遗传性、获得性、或原发性形式。在一些实施方案中,所述aHUS可以是补体因子H(CFH)-相关的aHUS(例如,由于CFH中的突变,或受试者中存在结合CFH的抗体)、膜辅因子蛋白(MCP)-相关的aHUS、补体因子I(CFI)-相关的aHUS、C4b-结合蛋白(C4BP)-相关的aHUS、von Willibrand因子(vWF)-相关的障碍、补体因子B-(CFB)-相关的aHUS、或由于增加的C3消耗而导致低C3水平的旁路途径障碍。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以另外包括,鉴别受试者为具有、疑似具有aHUS或处于发生危险中。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括,在施用后,监测受试者的aHUS的一种或多种症状的改善。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述组合物可以在血浆疗法(例如,血浆交换或血浆输注)之前、过程中或之后施用给受试者。在一些实施方案中,C5抑制剂向受试者的施用可以减轻患者对血浆疗法的需求。例如,在一些实施方案中,C5抑制剂向受试者的施用(例如,长期施用)可以减轻或基本上减少患者对血浆疗法的需要至少2个月(例如,3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月或12个月或1、2、3、4、5或6年或更久)。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括,给受试者施用一种或多种可用于治疗典型HUS或aHUS的另外的活性剂。所述一种或多种另外的活性剂可以是,例如,选自:抗高血压药、抗血小板剂、前列环素、纤维蛋白溶解药和抗氧化剂。
在一些实施方案中,所述人是幼儿。所述幼儿可以是,例如,0.5(例如,1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9或9.5)岁。所述幼儿可以小于10(例如,小于9.5、9、8.5、8、7.5、7、6.5、6、5.5、5、4.5、4、3.5、3、2.5、2、1.5、1或小于1)岁。
在其中所述补体相关障碍是典型HUS的任一种本文所述方法的实施方案中,所述典型HUS可以与人体中或人体上的大肠杆菌(E.coli)感染有关。大肠杆菌感染可以是,例如,大肠杆菌O157(例如,O157:H7)、O26、O103、O111或O145感染。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述典型溶血性尿毒症综合征可以与人体中或人体上的痢疾志贺菌(Shigella dysenteriae)感染有关。所述痢疾志贺菌感染可以是1型痢疾志贺菌感染。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以另外包括将人鉴别为具有、疑似具有典型溶血性尿毒症综合征或处于发生危险中。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括,在施用后,监测人的典型溶血性尿毒症综合征的一种或多种症状的改善。
在其中所述补体相关障碍是CAPS的任一种本文所述方法的实施方案中,所述CAPS可以与沉积病症有关。沉积病症可以包括,例如,癌症、移植、感染、外科手术、原发性抗磷脂综合征或自身免疫障碍诸如类风湿性关节炎或系统性红斑狼疮。因此,在一些实施方案中,所述CAPS可以与癌症有关,所述癌症例如,但不限于,胃癌、卵巢癌、淋巴瘤、白血病、子宫内膜癌、腺癌、肺癌或本领域已知沉积或与CAPS有关的任意其它癌症。在一些实施方案中,所述CAPS可以是原发性的。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法还可以包括将人鉴别为具有、疑似具有CAPS或处于发生危险中。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括,在施用后,监测人的一种或多种CAPS症状的改善。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述组合物可以在血浆交换、血浆去除术、IVIG或用于治疗CAPS的任意其它额外疗法之前、过程中或之后施用给人。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法还可以包括,给人施用一种或多种可用于治疗CAPS的另外的活性剂。所述一种或多种另外的活性剂可以选自:抗高血压药、抗细胞因子剂、甾类、抗凝血药或纤维蛋白溶解药。
在其中所述补体相关障碍是TTP的任一种本文所述方法的实施方案中,所述TTP可以是遗传的。例如,人可以携带在ADAMTS13基因中的一个或多个(例如,2、3、4或5个或更多个)突变。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述TTP可以是获得形式。例如,在一些实施方案中,所述人可以产生这样的抗体,其结合和抑制ADAMTS13金属蛋白酶。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述TTP可以是复发形式。例如,所述人可以是已经具有TTP的人。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述TTP(或复发的TTP)与沉积病症有关,例如但不限于:癌症、妊娠、细菌或病毒感染、外科手术或本领域已知的或本文描述的任意其它TTP-相关的病症。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述TTP(或复发的TTP)与TTP相关治疗剂的使用有关。例如,所述TTP可以与例如血小板聚集抑制剂(诸如噻氯匹定或氯吡格雷或免疫抑制剂(例如,环孢菌素、丝裂霉素C、FK506或干扰素-α))的使用有关。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括将人鉴别为具有、疑似具有TTP或处于发生危险中。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括,在施用后,监测人的一种或多种TTP症状的改善。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述组合物可以在血浆交换、血浆输注、血浆去除术或脾切除术之前、过程中或之后施用给人。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括给人施用一种或多种可用于治疗或预防TTP的另外的活性剂。所述一种或多种另外的活性剂可以选自:抗高血压药、甾类、抗凝血药或纤维蛋白溶解药。
在其中所述补体相关障碍是DDD的任一种本文所述方法的实施方案中,所述DDD可以是所述障碍的遗传形式。例如,人可以具有在补体因子H基因、补体因子H-相关的5基因或补体组分C3基因中的DDD-相关突变。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括将人鉴别为具有、疑似具有DDD或处于发生危险中。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括,在施用后,监测人的一种或多种DDD症状的改善。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述组合物可以在血浆交换、血浆置换、血浆去除术或静脉内的γ球蛋白疗法之前、过程中或之后施用给人。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括给人施用一种或多种可用于治疗DDD的另外的活性剂。所述一种或多种另外的活性剂可以选自:抗高血压药、皮质类甾醇类、抗凝血药或纤维蛋白溶解药。
在其中所述补体相关障碍是MG的任一种本文所述方法的实施方案中,所述人可以是表达MG-相关的自身抗体的人,所述自身抗体例如但不限于:MG-相关的抗-AChR抗体、MG-相关的抗-MuSK抗体或MG-相关的抗纹理蛋白抗体。所述MG可以是眼睛的MG和/或药物诱发形式的MG,诸如D-青霉胺-诱发的MG。在一些实施方案中,所述人可以处于肌无力危象中,或处于发生危险中。在一些实施方案中,所述人可以是具有新生儿MG的婴儿,其中具有MG的母亲将MG-相关的抗体通过胎盘传递给胎儿。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以另外包括将人鉴别为具有、疑似具有MG或处于发生危险中。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以另外包括,在施用后,监测人的一种或多种MG症状的改善。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述组合物可以在血浆交换、血浆去除术、IVIG或免疫吸附疗法之前、过程中或之后施用给人。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括给人施用一种或多种可用于治疗或预防MG的另外的活性剂。所述一种或多种另外的活性剂可以是,例如,乙酰胆碱酯酶抑制剂、免疫抑制剂或本领域已知的或本文所述的任意其它可用于治疗MG的另外的活性剂。
在其中所述补体相关障碍是阵发性冷性血红蛋白尿(PCH)的任一种本文所述方法的实施方案中,所述PCH可以与感染(例如,病毒或细菌感染)或肿瘤有关。例如,所述PCH可以与下述感染有关:苍白密螺旋体(Treponema palladium)感染、流感病毒感染、带状疱疹病毒感染、巨细胞病毒(CMV)感染、EB病毒(EBV)感染、腺病毒感染、细小病毒B19感染、柯萨奇病毒A9感染、流感嗜血菌(Haemophilus influenza)感染、肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae)感染或肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)感染。在一些实施方案中,所述PCH可以与非霍奇金淋巴瘤有关。在一些实施方案中,所述PCH可以与免疫(例如,麻疹免疫)有关。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述PCH可以是急性的或复发的。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括将人鉴别为具有、疑似具有PCH或处于发生危险中。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括,在施用后,监测人的一种或多种PCH症状的改善。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述组合物可以在血浆交换、血浆输注、IVIG疗法、红细胞输入或血浆去除术之前、过程中或之后施用给人。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括给人施用一种或多种可用于治疗或预防PCH的另外的活性剂。所述一种或多种另外的活性剂可以选自:抗高血压药、甾类、免疫抑制性(例如,利妥昔单抗)、抗生素、抗病毒剂和化学治疗剂。
在其中所述补体相关障碍是CAD的任一种本文所述方法的实施方案中,所述CAD可以与感染(例如,病毒或细菌感染)或肿瘤有关。例如,所述CAD可以与下述感染有关:HIV感染、巨细胞病毒(CMV)感染、EB病毒(EBV)感染或肺炎支原体感染。在一些实施方案中,所述CAD可以与非霍奇金淋巴瘤有关。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述CAD可以是原发性的或继发性的。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括将人鉴别为具有、疑似具有CAD或处于发生危险中。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括,在施用后,监测人的一种或多种CAD症状的改善。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述组合物可以在血浆交换、血浆置换、IVIG疗法或血浆去除术之前、过程中或之后施用给人。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括给人施用一种或多种可用于治疗或预防CAD的另外的活性剂。所述一种或多种另外的活性剂可以选自:抗高血压药、甾类、免疫抑制性(例如,利妥昔单抗)、抗生素、抗病毒剂和化学治疗剂。
在其中所述补体相关障碍是HELLP综合征的任一种本文所述方法的实施方案中,受累的(affected)妇女可以是孕妇,或可以是最近曾经怀孕的妇女。例如,在施用之前,所述妇女可以是产后小于14天(例如,小于13天、12天、11天、10天、9天、8天、7天、6天、5天、4天、3天、2天、24小时、18小时、12小时、6小时或小于4、3、2或1小时)的妇女。在一些实施方案中,所述妇女已经怀孕超过一次。在一些实施方案中,所述妇女可以是在至少一次先前妊娠中已经发生了先兆子痫或HELLP综合征的妇女。
在其中所述补体相关障碍是HELLP综合征的实施方案中,本文所述的方法可以另外包括下述步骤:将所述妇女鉴别为具有、疑似具有HELLP综合征或处于发生危险中。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以另外包括下述步骤:在施用后,监测所述妇女的HELLP综合征的一种或多种症状的改善。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述组合物可以在血浆交换、血浆去除术、血小板输注或红血细胞输注之前、过程中或之后施用给妇女。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括下述步骤:给所述妇女施用至少一种或多种可用于治疗或预防妇女的HELLP综合征的另外的活性剂。所述一种或多种另外的活性剂可以选自:抗高血压药、甾类、抗癫痫剂和抗血栓药。
在另一个方面,本公开内容表征了一种制品,其包含具有标记的容器和组合物(或由其组成),所述组合物含有人补体的抑制剂(例如,人补体组分C5的抑制剂)。所述标记指示,所述组合物意图施用给具有、疑似具有补体相关障碍或处于发生危险中的人,所述补体相关障碍诸如任一种本文所述的补体相关障碍。所述抑制剂可以是,例如,结合补体组分C5或其片段(诸如C5a或C5b)的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中,所述制品含有一种或多种另外的活性剂,所述活性剂可用于治疗或预防补体相关障碍(例如,改善所述障碍的一种或多种症状)。
本公开内容还部分地基于发明人的发现,即在用C5抑制剂依库珠单抗治疗后,具有补体相关障碍aHUS和肾中的血栓性微血管病(TMA)的患者会经历肾中TMA的完全消退,不会进一步发生TMA。因此,在另一个方面,本公开内容表征了用于治疗患者的血栓性微血管病(TMA)或减轻TMA的发生或严重性的方法,所述患者具有、疑似具有TMA或处于发生危险中。所述方法包括给所述患者(有此需要)施用补体的抑制剂,诸如补体组分C5的抑制剂,由此治疗患者中的TMA。所述抑制剂可以是,例如,任一种本文所述的C5抑制剂,例如,依库珠单抗。C5抑制剂的施用可以减轻所述患者的脑和/或肾中的TMA的发生或严重性。在一些实施方案中,C5抑制剂的施用治疗或促进所述患者中现有的TMA(例如,患者的脑或肾中的现有的TMA)的消退。
在一些实施方案中,所述患者具有补体相关障碍(诸如本文所述那些中的任一种),例如,膜性增生性肾小球肾炎、德戈斯病、非典型的溶血性尿毒症综合征、抗体-介导的排斥、HELLP综合征或灾难性抗磷脂综合征。
发明人还已经发现:给具有例如aHUS或CAPS的患者施用依库珠单抗会导致所述疾病的一种或多种症状的意外快速改善。例如,发明人已经发现,从开始用依库珠单抗的长期治疗后,在小于1个月(例如,小于2周)内,改善了依库珠单抗-治疗的aHUS患者的高血压、尿排出量减少和低血小板水平。在另一个实例中,发明人发现,在开始用依库珠单抗的长期治疗后,在1个月内改善了具有膜性增生性肾小球肾炎的患者的蛋白尿。因此,在另一个方面,本公开内容表征了用于改善与补体相关障碍有关的一种或多种症状的方法,诸如除了阵发性睡眠性血红蛋白尿症以外的任一种本文所述的补体相关障碍。所述方法包括给有此需要的患者施用有效地改善与补体相关障碍有关的一种或多种症状的量的补体的抑制剂(例如,补体组分C5的抑制剂),其中在施用所述抑制剂以后小于2个月(例如,小于7、6、5、4、3或2周;小于20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2或1天;或小于12、11、10、9、8、7、6或甚至小于5小时)以内改善所述症状。补体相关障碍的症状是医学领域众所周知的,且描述在本文中。所述补体抑制剂可以是任一种本文所述的C5抑制剂,例如,依库珠单抗。C5抑制剂在小于2个月内可以改善的示例性的症状包括,例如,蛋白尿、高血压、血小板数减少和肾尿排出量减少。在一些实施方案中,至少一种症状被改善到它的正常水平或值的40(例如,39、38、37、36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2或甚至1)%以内。例如,在一些实施方案中,给具有aHUS的高血压患者施用C5抑制剂依库珠单抗,可以改善患者的高血压到所述患者的正常血压(心脏舒张和/或心脏收缩)的40%以内。在一些实施方案中,C5抑制剂的施用可以彻底改善受试者的补体相关障碍的一种或多种症状。在一些实施方案中,所述患者已经具有肾移植,例如,最近已经经历肾移植的aHUS患者。所述补体相关障碍可以是本文所述那些中的任一种,例如,膜性增生性肾小球肾炎、德戈斯病、非典型的溶血性尿毒症综合征、抗体-介导的排斥、HELLP综合征和灾难性抗磷脂综合征。
许多本文所述的补体相关障碍的特征在于阵发性或散发性症状呈现,且在历史上已经仅当症状出现时治疗过。但是,发明人已经发现,甚至当患者是无症状时,潜在的补体相关障碍仍然存在。发明人还已经发现,通过使用补体-介导的抑制剂的长期治疗,可以预防或至少最小化所述障碍的反复或复发。所述抑制剂的这种长期施用可用于预防或最小化常见的不可逆性损伤(例如,诸如肾等器官的缺失),所述损伤在复发发生时给患者造成严重的补体相关障碍(例如,aHUS或CAPS)。因此,最重要的是,以足以连续维持所述抑制剂的浓度的量和频率,给患者施用补体抑制剂,所述浓度足够高以预防或基本上抑制患者的全身性补体活性。
因而,在另一个方面,本公开内容表征了用于治疗补体相关障碍的方法,所述方法包括,以有效地维持患者中的全身性补体抑制的量和频率,给有此需要的患者长期施用补体抑制剂(例如,C5抑制剂诸如抗-C5抗体),且条件是所述补体相关障碍不是阵发性睡眠性血红蛋白尿症。
本文使用的“长期施用”、“长期治疗”或它们的类似语法变体表示这样的治疗方法,其用于维持患者血液中的治疗剂的特定阈值浓度,以便在长时间段内完全地或基本上抑制患者中的全身性补体活性。因此,用补体抑制剂长期治疗的患者可以被用所述抑制剂治疗大于或等于2周(例如,3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51或52周;1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月;或1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5或12年或患者余生)的时间段,其量和给药频率足以维持所述抑制剂在患者血液中的浓度,该浓度会抑制或基本上抑制患者中的全身性补体活性。在一些实施方案中,所述补体抑制剂可以长期施用给有此需要的患者,其量和频率可以有效地维持小于或等于20(例如,19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6或甚至低于5)%的血清溶血活性,和维持小于或等于20%的血清溶血活性。参见,例如,Hill等人(2005)Blood106(7):2559。在一些实施方案中,所述补体抑制剂可以以有效地维持血清乳酸脱氢酶(LDH)水平在LDH的正常范围的至少20(例如,19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6或甚至低于5)%以内的量和频率施用给患者。参见Hill等人(2005)同上。在一些实施方案中,所述补体抑制剂以有效地维持血清LDH水平小于550(例如,小于540、530、520、510、500、490、480、470、460、450、430、420、410、400、390、380、370、360、350、340、330、320、310、300、290、280或小于270)IU/L的量和频率施用给患者。为了维持患者中的全身性补体抑制,所述补体抑制剂可以长期施用给患者,例如,每周1次、每2周1次、每周2次、每天1次、每月1次或每3周1次。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,C5抑制剂(例如,抗-C5抗体)可以以有效地维持患者血液中至少0.7个(例如,至少0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10或更多个)二价C5抑制剂分子(例如,完整的抗-C5抗体诸如依库珠单抗)/C5分子的浓度的量和施用频率施用给患者。关于C5抑制剂的“二价”表示含有至少2个C5分子的结合位点的C5抑制剂。在所述C5抑制剂是单价(例如,单链抗-C5抗体或结合C5的Fab)的情况下,所述抑制剂可以以有效地维持血液中至少1.5个(例如,至少2、2.5、3、3.5、4、4.5或5或更多个)单价C5抑制剂/C5分子的浓度的量和频率施用给患者。在一些实施方案中,所述单价C5抑制剂可以以有效地维持至少2:1(例如,至少3:1、至少4:1、至少5:1或至少6:1或更多)的单价C5抑制剂与C5之比的量和频率施用给患者。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,完整(二价)抗-C5抗体以有效地维持至少40(例如,41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、75、80、85、90、95、100、110或120或更多)μg抗体/毫升患者血液的浓度的量和频率施用给患者。在优选的实施方案中,完整抗-C5抗体(例如,依库珠单抗)以维持抗体浓度为至少50μg/毫升患者血液的量和频率施用。在优选的实施方案中,完整抗-C5抗体(例如,依库珠单抗)以维持抗体浓度为至少100μg/毫升患者血液的量和频率施用。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,单价抗-C5抗体(例如,单链抗体或Fab片段)可以以有效地维持至少80(例如,81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165或170或更多)μg抗体/毫升患者血液的浓度的量和频率施用给患者。本文描述了示例性的长期给药策略。
在另一个方面,本公开内容表征了治疗补体相关障碍的方法,所述方法包括给有此需要的患者长期施用抗-C5抗体,其量和频率可以有效地维持所述患者的全身性补体抑制。在一些实施方案中,所述抗-C5抗体可以长期施用给有此需要的患者,其量和频率可以有效地维持血清溶血活性在小于或等于20(例如,19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6或甚至低于5)%和维持血清溶血活性在小于或等于20%。参见,例如,Hill等人(2005)Blood106(7):2559。在一些实施方案中,所述抗-C5抗体可以以有效地维持血清乳酸脱氢酶(LDH)水平在下述范围内的量和频率施用给患者:LDH正常范围的至少20(例如,19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6或甚至低于5)%;或小于或等于550(例如,小于或等于550、540、530、520、510、500、490、480、470、460、450、430、420、410、400、390、380、370、360、350、340、330、320、310、300、290、280或小于270)IU/L。参见,例如,Hill等人(2005)同上。在一些实施方案中,所述抗-C5抗体以维持患者血液中至少0.7(例如,至少0.8、0.9、1、2、3或4或更多)完整(二价)抗-C5抗体分子/C5分子的浓度的量和频率施用给患者。在一些实施方案中,所述抗-C5抗体可以以有效地维持血液中至少1:1(例如,至少3:2、2:1、5:2或3:1)的完整(二价)抗-C5抗体与C5之比的量和频率施用给患者。在所述抗-C5抗体是单价的情况下,所述抗-C5抗体可以以有效地维持血液中每个C5分子至少2个单价抗-C5抗体的浓度的量和频率施用给患者。在一些实施方案中,所述单价抗-C5抗体可以以有效地维持至少2:1(例如,至少3:1、至少4:1、至少5:1或至少6:1或更多)的单价抗-C5抗体与C5之比的量和频率施用给患者。所述抗-C5抗体可以是,例如,依库珠单抗。所述患者可以具有、疑似具有补体相关障碍或处于发生危险中,且条件是所述障碍不是阵发性睡眠性血红蛋白尿症。例如,所述补体相关障碍可以选自:膜性增生性肾小球肾炎、德戈斯病、非典型的溶血性尿毒症综合征、抗体-介导的排斥、HELLP综合征和灾难性抗磷脂综合征。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,可以基于患者的体重,将抗-C5抗体长期施用给患者。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,可以基于患者的体重,并在表1所述的给药方案下,将抗-C5抗体(例如,依库珠单抗)长期施用给患者。
表1.根据患者体重的完整抗-C5抗体(例如,依库珠单抗)的示例性长期给药方案
*根据本公开内容,(B)维持给药方案可以维持治疗方法的持续时间,例如,至少1(例如,至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、22、24、36或48或更多)个月;至少1(例如,至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15或更多)年;或患者余生。
在优选的实施方案中,可以基于患者的体重,并在表2所述的给药方案下,将抗-C5抗体(例如,依库珠单抗)施用给患者。
表2.根据患者体重的完整抗-C5抗体(例如,依库珠单抗)的示例性长期给药方案
*根据本公开内容,(B)维持给药方案可以维持治疗方法的持续时间,例如,至少1(例如,至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、22、24、36或48或更多)个月;至少1(例如,至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15或更多)年;或患者余生。
应当理解,医学从业人员可以根据需要调节表1或2中的示例性给药方案(频率、持续时间、和/或施用的抗体的总量),以此方式在给药方案持续期间维持患者中的全身性补体活性的完全抑制或基本上完全抑制。
在另一个方面,本公开内容表征了治疗补体相关障碍的方法,所述方法包括给有此需要的患者长期施用抗-C5抗体,其量和频率可以有效地维持至少40(例如,至少41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、75、80、85、90、95、100、110或120或更多)μg抗体/毫升患者血液的浓度,其中所述患者具有、疑似具有补体相关障碍或处于发生危险中,且条件是所述障碍不是阵发性睡眠性血红蛋白尿症。
在一些实施方案中,至少每2周1次,将所述抗-C5抗体施用给患者。在一些实施方案中,每周1次,将所述抗-C5抗体施用给患者。在一些实施方案中,在下述给药方案下,将所述抗-C5抗体施用给患者至少9周(例如,9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51或52周;1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月;或1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5或12年或患者余生):至少800(例如,至少810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体,每周1次,连续4周;在第5周期间至少800(例如,至少810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体1次;和此后每2周至少800(例如,至少810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体,至给药方案结束。在优选的实施方案中,将至少900mg抗-C5抗体施用给患者,每周1次,持续4周;在第5周期间,将至少1200mg施用给患者;和此后每2周,将至少1200mg抗-C5抗体施用给患者,至长期给药方案结束。
在另一个方面,本公开内容表征了移植器官或组织的方法。所述方法包括将器官或组织移植进有此需要的患者中,其中在所述移植之前和之后长期地,以有效地基本上抑制患者中的全身性补体活性的量和频率,将人补体的抑制剂施用给患者。所述补体抑制剂可以是,例如,C5抑制剂诸如抗-C5抗体(例如,依库珠单抗)。如本文所述,可以以维持患者血液中至少0.7个二价C5抑制剂分子(或至少1.5个单价C5抑制剂分子)/C5分子的浓度的量和频率,施用所述C5抑制剂(例如,抗-C5抗体)。在一些实施方案中,可以以维持患者血液中至少40(例如,41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、75、80、85、90、95、100、110或120或更多)μg所述抑制剂(例如,抗-C5抗体)的浓度的量和频率,将所述C5抑制剂(例如,抗-C5抗体)施用给患者。在一些实施方案中,在将器官或组织移植给患者之前小于24(例如,小于23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3或小于2)小时,将至少800(例如,至少810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体(例如,依库珠单抗)施用给患者。在一些实施方案中,所述方法还可以包括,在移植之前,在移植后抑制器官或组织中的补体活化的条件下,使器官或组织接触(例如,浸泡)C5抑制剂(例如,抗-C5抗体诸如依库珠单抗)一定的时间量。所述器官可以是,例如,皮肤、肾脏、心脏、肺、四肢(例如,指或趾)、眼、干细胞群体、骨髓、血管组织、肌肉、神经组织或肝脏。所述患者可以具有aHUS、处于发生危险中或疑似具有aHUS。在一些实施方案中,在移植后小于24(例如,小于23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3或小于2)小时,将至少700(例如,至少710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体施用给患者。在一些实施方案中,在移植后,将所述抗-C5抗体长期施用给患者。例如,可以在下述给药方案下,将抗-C5抗体长期施用给患者至少9周(例如,9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51或52周;1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月;或1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5或12年或患者余生):在移植器官或组织后小于24小时,至少700(例如,至少710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体;在初次移植后给药以后,至少700(例如,至少710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体,每周1次,持续4周;在第5周期间至少700(例如,至少710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体1次;和此后每2周,至少700(例如,至少710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体,至给药方案结束。在优选的实施方案中,在下述给药方案下,将抗-C5抗体施用给经历移植手术的患者:在移植之前小于24小时,将至少1200mg抗-C5抗体施用给患者;在移植后24小时内,将至少900mg抗-C5抗体施用给患者;在第一次手术后施用抗-C5抗体以后,将至少1200mg抗-C5抗体施用给患者,每周1次,持续4周;在第一次手术后施用抗-C5抗体以后,在第5周,将1200mg施用给患者;和此后每2周,将至少1200mg抗-C5抗体施用给患者,至长期治疗方案结束。
在一些实施方案中,所述方法可以另外包括给所述患者施用一种或多种免疫抑制剂,例如但不限于:雷帕霉素、环孢菌素A、抗-IL-2剂、OKT3和他克莫司。所述一种或多种免疫抑制剂可以在移植之前、过程中或之后施用。所述一种或多种免疫抑制剂还可以在施用C5抑制剂之前、同时或之后施用。
本公开内容也表征了用于减轻当移植进患者中时补体-介导的对器官或组织的损伤的方法。所述方法包括,在将器官或组织移植给有此需要的患者之前,在减轻当移植进患者中时补体-介导的对器官或组织的损伤的条件下,使所述器官或组织接触包含C5的抑制剂的药物溶液一段时间。在移植器官或组织之前、过程中和/或之后,也可以将C5抑制剂施用给患者。所述溶液还可以含有一种或多种免疫抑制剂,例如但不限于:雷帕霉素、环孢菌素A、抗-IL-2剂、OKT3和他克莫司。
发明人还已经发现:在已经具有严重补体相关障碍(诸如CAPS和APS)和进入缓解的患者中,在患者中仍然存在低水平的补体活性,该活性使所述患者易于复发(relapse)或反复(recurrence)。如上所述,已经具有这些严重障碍的患者的症状的反复可以造成对诸如肾脏等重要器官的立即的和有时不可逆的损伤。因而,尽管本公开内容绝不受到一种特定理论或作用机理的限制,发明人断言,为了预防突然的复发或反复,应当用C5抑制剂长期治疗具有补体相关障碍(例如,aHUS和CAPS)的患者,即使在所述障碍的一种或多种症状已经改善以后,和/或甚至在患者进入临床缓解以后。因而,在另一个方面,本公开内容表征了治疗补体相关障碍的方法,且条件是所述障碍不是阵发性睡眠性血红蛋白尿症。所述方法包括给遭受补体相关障碍的患者施用C5抑制剂(例如,抗-C5抗体诸如依库珠单抗),其量可有效地治疗补体相关障碍。甚至在所述障碍的一种或多种(例如,2、3、4、5、或6或更多种)症状已经改善以后,将所述C5抑制剂施用给患者。在一些实施方案中,甚至在一种或多种症状已经完全改善以后,将所述C5抑制剂施用给患者。在一些实施方案中,甚至在所述患者已经进入临床缓解以后,将所述C5-抑制剂施用给患者。可以在患者的一种或多种症状已经改善和/或患者进入临床缓解以后,将C5抑制剂施用(例如长期施用)给患者至少8周(例如,9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51或52周;1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月;或1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5或12年或患者余生)。所述补体相关障碍可以是本文所述那些中的任一种,例如膜性增生性肾小球肾炎、德戈斯病、非典型的溶血性尿毒症综合征、抗体-介导的排斥、HELLP综合征和灾难性抗磷脂综合征。
尽管本公开内容绝不受到特定理论或作用机理的限制,基于依库珠单抗在例如aHUS患者中的作用的观察,发明人已经得出结论:补体组分C5a的生物活性可以基本上促成与aHUS有关的血管收缩和高血压。因此,使用C5a抑制剂抑制C5a可用于治疗aHUS和/或改善与aHUS有关的血管收缩和高血压。所述方法包括给有此需要的患者施用补体组分C5a的抑制剂,其量可以有效地治疗患者的aHUS。在一些实施方案中,在施用C5a抑制剂以后小于2个月(例如,小于7、6、5、4、3或2周;小于14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2或1天;或小于12、11、10、9、8、7、6或甚至小于5小时)内,可以改善与aHUS有关的血管收缩和高血压。在一些实施方案中,所述C5a抑制剂是这样的抗体(或其抗原结合片段),其结合具有特定氨基酸序列的人C5a蛋白或其片段,所述氨基酸序列含有在SEQ ID NO:12-25中任一个所述的至少4个(例如,至少4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16或17或更多个)连续氨基酸,或由其组成。在一些实施方案中,所述抑制剂是这样的抗体,其结合具有在SEQ ID NO:12中描述的氨基酸序列的人C5a蛋白。所述C5a抑制剂不会抑制C5切割成片段C5a和C5b。所述C5a抑制剂也不会抑制C5b或膜攻击复合物的形成。如本文所述,在一些实施方案中,所述C5a抑制剂(例如,抗-C5a抗体)可以抑制C5a和C5a受体(例如,C5aR或C5L2)之间的相互作用。在一些实施方案中,所述抗体可以是单克隆抗体、单链抗体、人源化的抗体、全人抗体、多克隆抗体、重组抗体、双抗体、嵌合的或嵌合抗体、去免疫化的人抗体、全人抗体、单链抗体、Fv片段、Fd片段、Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2片段。
在其中所述补体相关障碍是aHUS的任一种本文所述方法的实施方案中,所述aHUS可以是遗传性、获得性、或原发性形式。在一些实施方案中,所述aHUS可以是补体因子H(CFH)-相关的aHUS(例如,与因子H中的突变有关的aHUS,或结合和灭活因子H的自身抗体)、膜辅因子蛋白(MCP)-相关的aHUS、补体因子I(CFI)-相关的aHUS、C4b-结合蛋白(C4BP)-相关的aHUS、补体因子B-(CFB)-相关的aHUS、vWF障碍或与补体活化的旁路途径中的任意其它突变有关的aHUS(由于增加的C3消耗而造成低C3水平)。
在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以另外包括鉴别患者为具有、疑似具有aHUS或处于发生危险中。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括,在施用后,监测所述患者的aHUS的一种或多种症状的改善。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述C5a抑制剂可以在血浆疗法(例如,血浆交换或血浆输注)之前、过程中或之后施用给患者。在一些实施方案中,C5抑制剂向患者的施用可以减轻患者对血浆疗法的需求。例如,在一些实施方案中,C5a抑制剂向患者的施用(例如,长期施用)可以减轻或基本上减少患者对血浆疗法的需要至少2个月(例如,3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月或12个月或1、2、3、4、5或6年或更久)。在一些实施方案中,任一种本文所述的方法可以包括给患者施用一种或多种可用于治疗典型HUS或aHUS的另外的活性剂。所述一种或多种另外的活性剂可以是,例如,选自:抗高血压药、抗血小板剂、前列环素、纤维蛋白溶解剂和抗氧化剂。
在一些实施方案中,所述人是幼儿。所述幼儿可以是,例如,0.5(例如,1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9或9.5)岁。所述幼儿可以小于10(例如,小于9.5、9、8.5、8、7.5、7、6.5、6、5.5、5、4.5、4、3.5、3、2.5、2、1.5、1或小于1)岁。
在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,所述补体相关障碍不是阵发性睡眠性血红蛋白尿症。
“多肽”、“肽”和“蛋白”互换地施用,并表示氨基酸的任意肽-连接的链,无论长度或翻译后修饰。本文所述的补体组分C5蛋白可以含有或是野生型蛋白,或可以是具有不超过50(例如,不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、20、25、30、35、40或50)个保守氨基酸置换的变体。保守置换通常包括在下述组内的置换:甘氨酸和丙氨酸;缬氨酸、异亮氨酸和亮氨酸;天冬氨酸和谷氨酸;天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸和苏氨酸;赖氨酸、组氨酸和精氨酸;以及苯丙氨酸和酪氨酸。
本文所述的人补体组分C5蛋白也包括所述蛋白的“抗原性肽片段”,其比全长和/或未成熟的(初前)C5蛋白更短,但是保留全长蛋白在哺乳动物中诱导抗原应答的能力的至少10%(例如,至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少50%、至少55%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%、至少99.5%或100%或更多)(参见下面的“生产抗体的方法”)。C5蛋白的抗原性肽片段包括蛋白的末端以及内部缺失变体。缺失变体可以缺少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个氨基酸区段(具有2个或更多个氨基酸)或不连续的单个氨基酸。抗原性肽片段的长度可以是至少6(例如,至少7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、250、300、350、400、450、500或600或更多)个氨基酸残基(例如,SEQ ID NO:1-11中任一个中的至少6个连续氨基酸残基)。在一些实施方案中,人C5蛋白的抗原性肽片段长度的少于500(例如,少于450、400、350、325、300、275、250、225、200、190、180、170、160、150、140、130、120、110、100、95、90、85、80、75、70、65、60、55、50、49、48、47、46、45、44、43、42、41、40、39、38、37、36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7或6)个氨基酸残基(例如,SEQ ID NO:1-11中任一个中的少于500个连续氨基酸残基)。在一些实施方案中,全长、未成熟的人C5蛋白(初前-C5蛋白)的抗原性肽片段的长度是至少6个、但是少于500个氨基酸残基。
在一些实施方案中,所述人补体组分C5蛋白可以具有这样的氨基酸序列,它是具有SEQ ID NO:1(参见下面)所述的氨基酸序列的人C5蛋白,或与其具有70(例如,71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100)%同一性。
氨基酸序列同一性百分比(%)被定义为:在比对序列和在必要时导入间隙(以实现最大序列同一性百分比)以后,与参照序列中的氨基酸同一的候选序列中的氨基酸的百分比。用于测定序列同一性百分比的目的的比对可以以在本领域技术范围内的多种方式实现,例如,使用可公开得到的计算机软件诸如BLAST、BLAST-2、ALIGN、ALIGN-2或Megalign(DNASTAR)软件。通过已知的方法,可以确定对于测量比对而言适合的参数,包括在要进行对比的序列的全长范围内实现最大比对所需的任意算法。
示例性的人C5蛋白及其抗原性肽片段的氨基酸序列是本领域已知的,且描述在下面。
如在本公开内容中使用的,术语“抗体”表示通过本领域已知的和本文描述的多种方法中的任一种产生的整个或完整的抗体(例如,IgM,IgG,IgA,IgD,或IgE)分子。术语“抗体”包括多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合的或嵌合抗体、人源化的抗体、去免疫化的人抗体和全人抗体。所述抗体可以从多个物种中的任一种制备或衍生出,所述物种例如哺乳动物,诸如人、非人灵长类动物(例如,猴、狒狒或黑猩猩)、马、牛、猪、绵羊、山羊、狗、猫、兔、豚鼠、沙鼠、仓鼠、大鼠和小鼠。所述抗体可以是纯化的或重组的抗体。
本文使用的术语“抗体片段”、“抗原结合片段”或类似的术语表示保留结合抗原(例如,补体组分C5蛋白)的能力的抗体片段,例如,单链抗体、单链Fv片段(scFv)、Fd片段、Fab片段、Fab’片段或F(ab’)2片段。scFv片段是包含该scFv的来源抗体的重链和轻链可变区的单个多肽链。另外,可以将结合补体组分C5蛋白的双抗体(Poljak(1994)Structure2(12):1121-1123;Hudson等人(1999)J.Immunol.Methods 23(1-2):177-189,它们各自的公开内容通过引用整体并入本文)和细胞内抗体(Huston等人(2001)Hum.Antibodies10(3- 4):127-142;Wheeler等人(2003)Mol Ther8(3):355-366;Stocks(2004)Drug Discov.Today9(22):960-966,它们各自的公开内容通过引用整体并入本文)掺入所述组合物中,并用于本文所述的方法中。
除非另有定义,在本文中使用的所有技术和科学术语具有与本公开内容所属领域的普通技术人员通常理解相同的含义。在冲突的情况下,以本说明书(包括定义)为准。在下面描述了优选的方法和材料,尽管与本文所述的那些相似或等效的方法和材料也可以用于实践或测试这里公开的方法和组合物。在本文中提及的所有出版物、专利申请、专利和其它参考文献通过引用整体并入。
从下面的描述、实施例和权利要求书中,可以明白本公开内容的其它特征和优点,例如,用于治疗或预防补体相关障碍的方法。
详细描述
本公开内容提供了含有人补体组分C5的抑制剂(例如,结合人补体组分C5蛋白或其生物活性片段诸如C5a和C5b的抗体)的组合物,和使用所述组合物治疗或预防人的补体-介导的障碍的方法。尽管绝非有意进行限制,下面详细描述了示例性的组合物(例如,药物组合物和制剂)和使用所述组合物的方法。
组合物
本文所述的组合物含有人补体的抑制剂。根据本公开内容,可以使用结合或以其它方式阻滞任一种人补体组分的产生和/或活性的任意化合物。例如,补体的抑制剂可以是,例如,小分子、核酸或核酸类似物、拟肽(peptidomimetics)或不是核酸或蛋白的大分子。这些试剂包括、但不限于:小有机分子、RNA适体、L-RNA适体、Spiegelmer、反义化合物、双链RNA、小干扰RNA、锁定的核酸抑制剂和肽核酸抑制剂。在一些实施方案中,补体抑制剂可以是蛋白或蛋白片段。
在一些实施方案中,所述组合物含有对人补体组分特异性的抗体。一些化合物包括针对补体组分C1、C2、C3、C4、C5(或其片段;参见下面)、C6、C7、C8、C9、因子D、因子B、因子P、MBL、MASP-1和MASP-2的抗体,由此阻止与C5a有关的过敏毒素活性的产生和/或阻止与C5b有关的膜攻击复合物的组装。
所述组合物还可以含有天然存在或可溶形式的抑制补体的化合物,例如CR1、LEX-CR1、MCP、DAF、CD59、因子H、眼镜蛇毒因子、FUT-175、补体结合抑制素和K76COOH。可以用于结合或以其它方式阻断任意人补体组分的产生和/或活性的其它化合物包括但不限于:蛋白、蛋白片段、肽、小分子、包括ARC187(从Archemix Corporation,Cambridge,MA商业获得)在内的RNA适体、L-RNA适体、spiegelmer、反义化合物、丝氨酸蛋白酶抑制剂、可以用于RNA干扰(RNAi)的分子诸如包括小干扰RNA(siRNA)的双链RNA、锁定的核酸(LNA)抑制剂、肽核酸(PNA)抑制剂等。
在一些实施方案中,所述补体抑制剂抑制补体的活化。例如,所述补体抑制剂可以结合和抑制C1(例如,C1q、C1r或C1s)的补体活化活性,或所述补体抑制剂可以结合和抑制C2、C3或C4(例如,抑制其切割)。在一些实施方案中,所述抑制剂抑制旁路的和/或经典的补体途径的C3转化酶和/或C5转化酶的形成或装配。在一些实施方案中,所述补体抑制剂抑制末端补体形成,例如,C5b-9膜攻击复合物的形成。例如,抗体补体抑制剂可以包括抗-C5抗体。这样的抗-C5抗体可以直接地与C5和/或C5b相互作用,从而抑制C5b的形成和/或生理功能。
在一些实施方案中,本文所述的组合物可以含有人补体组分C5的抑制剂(例如,结合人补体组分C5蛋白或其生物活性片段诸如C5a或C5b的抗体或其抗原结合片段)。本文使用的“补体组分C5的抑制剂”是这样的任意试剂,其抑制:(i)补体组分C5蛋白的表达或适当的细胞内运输或细胞分泌;(ii)C5切割片段C5a或C5b的活性(例如,C5a与它的同源细胞受体的结合,或C5b与C6和/或末端补体复合物的其它组分的结合;参见上面);(iii)人C5蛋白切割成C5a和C5b;或(iv)补体组分C5蛋白的适当的细胞内运输或细胞分泌。补体组分C5蛋白表达的抑制包括:编码人C5蛋白的基因的转录的抑制;编码人C5蛋白的mRNA的降解的增加;编码人C5蛋白的mRNA的翻译的抑制;人C5蛋白的降解的增加;初前人C5蛋白的适当加工的抑制;或细胞对人C5蛋白的适当运输或分泌的抑制。用于测定候选剂是否是人补体组分C5的抑制剂的方法是本领域已知的,且描述在本文中。
人补体组分C5的抑制剂可以是,例如,小分子、多肽、多肽类似物、核酸或核酸类似物。
本文使用的“小分子”意在表示这样的试剂,其具有小于约6kDa、且最优选地小于约2.5kDa的分子量。许多制药公司具有包含小分子阵列的化学和/或生物混合物的广阔文库,所述小分子经常是真菌、细菌或藻类提取物,它们可以用本申请的任意试验来筛选。本申请预见到,除了其它以外,使用小化学文库、肽文库、或天然产物的集合。Tan等人描述了具有超过200万合成化合物的文库,其适用于小型化的基于细胞的试验(J.Am.Chem.Soc.(1998)120:8565-8566)。这样的文库可以用于筛选人补体组分C5的抑制剂,这在本申请的范围内。存在许多可商业得到的化合物文库,诸如Chembridge DIVERSet。文库也可以从科研人员得到,诸如来自NCI发育治疗计划的多样性集合。也可以采用推理性药物设计。例如,推理性药物设计可以采用,将晶体或溶液结构信息应用于人补体组分C5蛋白。参见,例如,在Hagemann等人(2008)J Biol Chem283(12):7763-75和Zuiderweg等人(1989)Biochemistry 28(1):172–85中描述的结构。基于已知的化合物,例如已知的C5抑制剂(例如,结合人补体组分C5蛋白的抗体或其抗原结合片段),也可以实现推理性药物设计。
拟肽可以是这样的化合物,其中主题多肽的至少一部分被修饰,且所述拟肽的三维结构保持与主题多肽基本上相同。拟肽可以是本公开内容的主题多肽的类似物,它们本身是在主题多肽序列内含有一个或多个置换或其它修饰的多肽。或者,主题多肽序列的至少一部分可以被非肽结构替换,使得基本上保留主题多肽的三维结构。换而言之,在主题多肽序列内的1、2或3个氨基酸残基可以被非肽结构替换。另外,主题多肽的其它肽部分可以(但是非必须)被非肽结构替换。拟肽(肽和非肽类似物)可以具有改善的性质(例如,减少的蛋白酶解,增加的保留或增加的生物利用度)。拟肽通常具有改善的口服可用度,这使得它们特别适用于治疗人或动物中的障碍。应当指出,拟肽可以具有或不具有类似的二维化学结构,但是具有共同的三维结构特征和几何形状。每个拟肽可以另外具有一个或多个独特的二维的结合元件。
核酸抑制剂可以用于减少编码人补体组分C5的内源基因的表达。核酸拮抗剂可以是,例如,siRNA、dsRNA、核酶、三螺旋形成体、适体或反义核酸。siRNA是任选地包含突出的小双链RNA(dsRNA)。例如,siRNA的双链体区域的长度是约18-25个核苷酸,例如,约19、20、21、22、23或24核苷酸的长度。在一些实施方案中,siRNA序列可以与靶mRNA精确互补。dsRNA和siRNA具体地可以用于沉默哺乳动物细胞(例如,人细胞)中的基因表达。参见,例如,Clemens等人(2000)Proc.Natl.Acad.Sci.USA97:6499-6503;Billy等人(2001)Proc.Natl.Acad.Sci.USA98:14428-14433;Elbashir等人(2001)Nature411:494-8;Yang等人(2002)Proc.Natl.Acad.Sci.USA99:9942-9947和美国专利申请公开号20030166282、20030143204、20040038278和20030224432。反义试剂可以包括,例如,约8至约80个核碱基(即约8至约80个核苷酸)、例如,约8至约50个核碱基或约12至约30个核碱基。反义化合物包括核酶、外部引导序列(EGS)寡核苷酸(寡酶)、和与靶核酸杂交并调节其表达的其它短的催化性RNA或催化性寡核苷酸。反义化合物可以包括至少8个连续核碱基的区段,其与靶基因中的序列互补。寡核苷酸不需要与它的要特异性地杂交的靶核酸序列100%互补。在下述情况下,寡核苷酸是可特异性地杂交的:寡核苷酸与靶物的结合会干扰靶分子的正常功能、造成效用缺失,且存在足够程度的互补性,以避免在希望特异性结合的条件下(即,在体内试验或治疗性处理的情况下,在生理条件下,或在体外试验的情况下,在进行试验的条件下),寡核苷酸与非靶序列的非特异性结合。反义寡核苷酸与mRNA(例如,编码人C5蛋白的mRNA)的杂交可以干扰mRNA的一种或多种正常功能。要干扰的mRNA的功能包括所有关键功能,例如,RNA向蛋白翻译位点的迁移、从RNA翻译蛋白、RNA剪接成一种或多种mRNA种类、和RNA可以从事的催化活性。反义寡核苷酸与RNA的杂交还可以干扰特定蛋白与RNA的结合。示例性的反义化合物包括特异性地杂交靶核酸(例如,编码人补体组分C5蛋白的mRNA)的DNA或RNA序列。互补区可以延伸约8至约80个核碱基。所述化合物可以包括1个或更多个修饰的核碱基。
修饰的核碱基可以包括,例如,5-取代的嘧啶诸如5-碘尿嘧啶、5-碘胞嘧啶和C5-丙炔基嘧啶诸如C5-丙炔基胞嘧啶和C5-丙炔基尿嘧啶。其它合适的修饰的核碱基包括,例如,7-取代的-8-氮杂-7-脱氮嘌呤和7-取代的-7-脱氮嘌呤,例如,7-碘-7-脱氮嘌呤、7-氰基-7-脱氮嘌呤、7-氨基羰基-7-脱氮嘌呤。它们的实例包括6-氨基-7-碘-7-脱氮嘌呤、6-氨基-7-氰基-7-脱氮嘌呤、6-氨基-7-氨基羰基-7-脱氮嘌呤、2-氨基-6-羟基-7-碘-7-脱氮嘌呤、2-氨基-6-羟基-7-氰基-7-脱氮嘌呤和2-氨基-6-羟基-7-氨基羰基-7-脱氮嘌呤。参见,例如,美国专利号4,987,071;5,116,742;和5,093,246;“Antisense RNA and DNA,”D.A.Melton,编,ColdSpring Harbor Laboratory,Cold Spring Harbor,N.Y.(1988);Haselhoff和Gerlach(1988)Nature334:585-59;Helene,C.(1991)Anticancer Drug D6:569-84;Helene(1992)Ann.NY.Acad.Sci.660:27-36;和Maher(1992)Bioassays 14:807-15。
适体是短寡核苷酸序列,其可以用于识别和特异性地结合几乎任意的分子,包括细胞表面蛋白。通过指数富集配体系统进化(SELEX)方法是有力的,且可以用于容易地鉴别这样的适体。可以对于具有治疗和诊断重要性的广范围的蛋白(诸如生长因子和细胞表面抗原)制备适体。这些寡核苷酸以与抗体类似的亲和力和特异性结合它们的靶物(参见,例如,Ulrich(2006)Handb Exp Pharmacol.173:305-326)。
在一些实施方案中,人C5抑制剂是结合人补体组分C5蛋白的抗体或其抗原结合片段(在下文中,所述抗体可能有时称作“抗-C5抗体”)。
在一些实施方案中,所述抗-C5抗体结合人前-C5前体蛋白中的表位。例如,抗-C5抗体可以结合人补体组分C5蛋白中的表位,所述C5蛋白包含在SEQ ID NO:1(NCBI登记号AAA51925和Haviland等人,同上)中所述的氨基酸序列,或由其组成。
“表位”表示抗体结合的蛋白(例如,人补体组分C5蛋白)上的部位。“重叠表位”包括至少一个(例如,2、3、4、5、或6个)共同的氨基酸残基。
在一些实施方案中,所述抗-C5抗体结合缺少前导序列的人前-C5前体蛋白中的表位。例如,抗-C5抗体可以结合人补体组分C5蛋白中的表位,所述C5蛋白包含在SEQ IDNO:2中所述的氨基酸序列,或由其组成,它是缺少氨基端前导序列的人C5蛋白。
在一些实施方案中,所述抗-C5抗体可以结合在人补体组分C5蛋白的α链中的表位。例如,抗-C5抗体可以结合在特定蛋白内或与其重叠的表位,所述蛋白具有在SEQ IDNO:3中所述的氨基酸序列,它是人补体组分C5α链蛋白。结合C5的α链的抗体描述在,例如,Ames等人(1994)J Immunol152:4572-4581中。
在一些实施方案中,所述抗-C5抗体可以结合在人补体组分C5蛋白的β链中的表位。例如,抗-C5抗体可以结合在特定蛋白内或与其重叠的表位,所述蛋白具有在SEQ IDNO:4中所述的氨基酸序列,它是人补体组分C5β链蛋白。结合C5β链的抗体描述在,例如,Moongkarndi等人(1982)Immunobiol.162:397;Moongkarndi等人(1983)Immunobiol.165:323;和Mollnes等人(1988)Scand.J.Immunol.28:307-312中。
在一些实施方案中,所述抗-C5抗体可以结合在人补体组分C5蛋白的抗原性肽片段内或与其重叠的的表位。例如,抗-C5抗体可以结合在人补体组分C5蛋白的抗原性肽片段内或与其重叠的的表位,所述片段含有下述氨基酸序列,或由其组成:VIDHQGTKSSKCVRQKVEGSS(SEQ ID NO:5)或KSSKC(SEQ ID NO:6)。
在一些实施方案中,所述抗-C5抗体可以结合在人补体组分C5蛋白的片段内或与其重叠的的表位,所述片段含有下述氨基酸序列中的任一个,或由其组成(它们是SEQ IDNO:1的示例性的抗原片段):NFSLETWFGKEILVKTLRVVPEGVKRESYSGVTLDPRGIYGTISRRKEFPYRIPLDLVPKTEIKRILSVKGLLVGEILSAVLSQEGINILTHLPKGSAEAELMSVVPVFYVFHYLETGNHWNIFHSD(SEQ ID NO:7);
SESPVIDHQGTKSSKCVRQKVEGSSSHLVTFTVLPLEIGLHNINFSLETWFGKEILVKTLRVVPEGVKRESYSGVTLDPRGIYGTISRRKEFPYRIPLDLVPKTEIKRILSVKGLLVGEILSAVLSQEGINILTHLPKGSAEAELMSVVPVFYVFHYLETGNHWNIFHSDPLIEKQKLKKKLKEGMLSIMSYRNADYSYS(SEQ ID NO:8);
SHKDMQLGRLHMKTLLPVSKPEIRSYFPES(SEQ ID NO:9);
SHKDMQLGRLHMKTLLPVSKPEIRSYFPESWLWEVHLVPRRKQLQFALPDSLTTWEIQGIGISNTGICVADTVKAKVFKDVFLEMNIPYSVVRGEQIQLKGTVYNYRTSGMQFCVKMSAVEGICTSESPVIDHQGTKSSKCVRQKVEGSSSHLVTFTVLPLEIGLHNINFSLETWFGKEILVKTLRVVPEGVKRESYSGVTLDPRGIYGTISRRKEFPYRIPLDLVPKTEIKRILSVKGLLVGEILSAVLSQEGINILTHLPKGSAEAELMSVVPVFYVFHYLETGNHWNIFHSDPLIEKQKLKKKLKEGMLSIMSYRNADYSYS(SEQ ID NO:10);和
DHQGTKSSKCVRQKVEG(SEQ ID NO:11)。
人补体组分C5的其它示例性的抗原片段公开在例如美国专利号6,355,245中,其公开内容通过引用并入本文。
在一些实施方案中,所述抗-C5抗体特异性地结合人补体组分C5蛋白(例如,具有在SEQ ID NO:1中所述的氨基酸序列的人C5蛋白)。术语“特异性的结合”或“特异性地结合”表示2个分子形成在生理条件下相对稳定的复合物(例如,抗体和补体组分C5蛋白之间的复合物)。通常,当结合常数(Ka)高于106M-1时,认为结合是特异性的。因而,抗体可以以至少(或大于)106(例如,至少或大于107、108、109、1010、10111012、1013、1014或1015或更高)M-1的Ka特异性地结合C5蛋白。特异性地结合人补体组分C5蛋白的抗体的实例描述在例如美国专利号6,355,245中,其公开内容通过引用整体并入本文。
用于测定抗体是否结合蛋白抗原和/或抗体对蛋白抗原的亲和力的方法是本领域已知的。例如,使用多种技术,可以检测和/或定量抗体与蛋白抗原的结合,所述技术例如,但不限于,蛋白印迹、斑点印迹、等离子体表面共振方法(例如,BIAcore系统;PharmaciaBiosensor AB,Uppsala,Sweden and Piscataway,N.J.)或酶联免疫吸附测定(ELISA)。参见,例如,Harlow和Lane(1988)“Antibodies:A Laboratory Manual”Cold Spring HarborLaboratory Press,Cold Spring Harbor,N.Y.;Benny K.C.Lo(2004)“Antibody Engineering:Methods and Protocols,”Humana Press(ISBN:1588290921);Borrebaek(1992)“AntibodyEngineering,A Practical Guide,”W.H.Freeman and Co.,NY;Borrebaek(1995)“AntibodyEngineering,”第2版,Oxford University Press,NY,Oxford;Johne等人(1993)J.Immunol.Meth.160:191-198;Jonsson等人(1993)Ann.Biol.Clin.51:19-26;和Jonsson等人(1991)Biotechniques11:620-627。也参见美国专利号6,355,245。
在一些实施方案中,所述抗-C5抗体可以交叉阻断(crossblock)另一种抗体的结合,所述另一种抗体结合在人补体组分C5蛋白内或与其重叠的表位。在一些实施方案中,所述抗-C5抗体可以交叉阻断特定抗体的结合,所述抗体结合在人补体组分C5蛋白内或与其重叠的表位。所述肽片段可以是具有SEQ ID NO:1-11中任一个描述的氨基酸序列的人补体组分C5蛋白的片段。例如,所述肽片段可以含有下述氨基酸序列,或由其组成:VIDHQGTKSSKCVRQKVEGSS(SEQ ID NO:5)。
本文使用的术语“交叉阻断抗体”表示这样的抗体,与在没有所述抗体存在下抗-C5抗体与表位的结合的量相比,其降低抗-C5抗体与补体组分C5蛋白上的表位的结合的量。适用于测定第一种抗体是否交叉阻断第二种抗体与表位的结合的方法是本领域已知的。例如,通过对比在有和没有实验抗体存在下5G1.1抗-C5单克隆抗体(由杂交瘤细胞系ATCC命名HB-11625生产;参见美国专利号6,355,245)的结合,可以鉴别出交叉阻断抗体。与在没有实验抗体存在下5G1.1抗体的结合相比,在有实验抗体存在下减少的5G1.1抗体的结合指示所述实验抗体是交叉阻断抗体。
用于鉴别特定抗体(例如,抗-C5抗体)结合的表位的方法也是本领域已知的。例如,通过测量抗体与补体组分C5蛋白的几个(例如,3、4、5、6、7、8、9、10、15、20或30或更多个)重叠肽片段(例如,具有SEQ ID NO:1-11中任一个描述的氨基酸序列的蛋白的几个重叠片段)的结合,可以鉴别抗-C5抗体的结合表位。然后使每种不同的重叠肽结合固体支持物上的独特地址,例如,多孔测定板的单独的孔。接着,通过在允许抗-C5抗体结合它的表位的条件下,使抗-C5抗体接触测定板中的每种肽一定量的时间,对所述抗体进行研究。通过洗涤每个孔,去除未结合的抗-C5抗体。接着,使可检测地标记的结合抗-C5抗体的第二抗体(如果存在于平板的孔中)接触每个孔,并通过洗涤步骤去除未结合的第二抗体。孔中的可检测地标记的第二抗体产生的可检测信号的存在或量,指示抗-C5抗体结合与孔结合的特定肽片段。参见,例如,Harlow和Lane(同上),Benny K.C.Lo(同上),和美国专利申请公开号20060153836,其公开内容通过引用整体并入。使用BIAcore色谱技术(参见,例如,Pharmacia BIAtechnology Handbook,“Epitope Mapping,”Section 6.3.2,(May 1994);和Johne等人(1993)J.Immunol.Methods 160:20191-8),也可以鉴别抗体结合的特定表位。
本文所述的抗-C5抗体可以具有阻断补体组分C5蛋白(例如,人C5蛋白)的C5a和/或C5b活性片段的产生或活性的活性。通过该阻断作用,抗-C5抗体抑制例如C5a的促炎症作用和C5b-9膜攻击复合物(MAC)在细胞表面处的产生。具有阻断C5a的产生的能力的抗-C5抗体描述在,例如,Moongkarndi等人(1982)Immunobiol.162:397和Moongkarndi等人(1983)Immunobiol.165:323中。
在一些实施方案中,抗-C5抗体或其抗原结合片段可以使C5蛋白结合人补体组分C3b(例如,在AP或CP C5转化酶复合物中存在的C3b)的能力减少超过50(例如,超过55、60、65、70、75、80、85、90或95或更多)%。在一些实施方案中,在结合C5蛋白后,抗-C5抗体或其抗原结合片段可以使C5蛋白结合补体组分C4b(例如,在CP C5转化酶中存在的C4b)的能力减少超过50(例如,超过55、60、65、70、75、80、85、90或95或更多)%。用于测定抗体是否可以阻断补体组分C5蛋白的C5a和/或C5b活性片段的产生或活性、或与补体组分C4b或C3b的结合的方法是本领域已知的,且描述在例如美国专利号6,355,245和Wurzner等人(1991)Complement Inflamm8:328-340中(也参见下面)。
在一些实施方案中,抗-C5抗体结合补体组分C5蛋白的α链的氨基端区域,但是不结合游离的C5a。在α链的氨基端区域内的抗-C5抗体的表位包括,例如,在人序列VIDHQGTKSSKCVRQKVEGSS(SEQ ID NO:5)内的表位。
在一些实施方案中,所述组合物包含,和/或所述抗体是,依库珠单抗(Alexion Pharmaceuticals,Inc.,Cheshire,CT)(参见,例如,Kaplan(2002)Curr Opin InvestigDrugs3(7):1017-23;Hill(2005)Clin Adv Hematol Oncol3(11):849-50;和Rother等人(2007)Nature Biotechnology25(11):1256-1488.)。
在一些实施方案中,所述组合物包含,和/或所述抗体是,培克珠单抗(AlexionPharmaceuticals,Inc.,Cheshire,CT)(参见,例如,Whiss(2002)Curr Opin InvestigDrugs3(6):870-7;Patel等人(2005)Drugs Today(Barc)41(3):165-70;和Thomas等人(1996)Mol Immunol.33(17-18):1389-401.)。
在一些实施方案中,所述C5抑制剂是结合C5a的抗体(有时在本文中称作“抗-C5a抗体”)。在一些实施方案中,所述抗体结合C5a,但是不结合全长C5。如上面讨论的,C5的原型(proform)(1676个氨基酸残基的前体蛋白)被一系列溶蛋白性裂解事件所加工。前18个肽(编号-18至-1)构成从前体蛋白切掉的信号肽。剩余的1658个氨基酸的蛋白在2个位置被切割,形成α和β链。第一个切割事件发生在氨基酸残基655和656之间。第二个切割发生在氨基酸残基659至660之间。2个切割事件导致3个不同的多肽片段的形成:(i)包含氨基酸1-655的片段,它被称作β链;(ii)包含氨基酸660-1658的片段,它被称作α链;和(iii)由氨基酸656-659组成的四肽片段。α链和β链多肽片段通过二硫键彼此相连,并构成成熟的C5蛋白。通过切割在残基733和734之间的α链,这导致C5a片段(氨基酸660-733)的释放,CP或AP C5转化酶活化成熟的C5。成熟的C5的剩余部分是片段C5b,其含有与β链二硫键连接的α链的残基734–1658。
在体内,C5a被血清酶(羧肽酶B)快速地代谢成73氨基酸形式,称作“C5a des-Arg”,其已经丧失羧基端精氨酸残基。因此,在一些实施方案中,结合C5a的抗体也结合脱精氨酸的(desarginated)C5a。在一些实施方案中,结合C5a的抗体不结合脱精氨酸的C5a。
在一些实施方案中,所述C5抑制剂是这样的抗体,其结合在C5a中存在的新表位(neoepitope),即在从成熟C5的α链片段释放出C5a以后变得暴露的表位。结合C5a(例如,在C5a中存在的新表位)的抗体是本领域已知的,生成这样的抗体的方法也是本领域已知的。例如,结合C5a的抗体可以具有在下述任一篇参考文献中所述的C5a新表位特异性的抗体的结合特异性:例如,PCT公开号WO 01/15731;Ames等人(1994)JImmunol152(9):4572-4581;Inoue(1989)Complement Inflamm 6(3):219-222;和美国专利号6,866,845。在另一个实施例中,结合C5a的抗体可以具有商业的C5a新表位-特异性的抗体的结合特异性,所述抗体例如,但不限于,sc-52633(Santa Cruz Biotechnology,Inc.,SantaCruz,California)、I52-1486(BD Pharmingen/BD Biosciences)、ab11877(Abcam,Cambridge,Massachusetts)和HM2079(克隆2952;HyCult Biotechnology,荷兰)。在一些实施方案中,结合C5a的抗体可以交叉阻断任一种前述C5a新表位-特异性的抗体的结合。
在一些实施方案中,所述C5抑制剂可以是结合哺乳动物(例如,人)C5a蛋白的抗体。例如,所述抗体可以结合具有下述氨基酸序列的人C5a蛋白:TLQKKIEEIAAKYKHSVVKKCCYDGACVNNDETCEQRAARISLGPRCIKAFTECCVVASQLRANISHKDMQLGR(SEQ ID NO:12)。所述抗体可以在下述氨基酸序列内的或与其重叠的表位处结合人C5a:CCYDGACVNNDETCEQRAAR(SEQ ID NO:13);KCCYDGACVNNDETCEQR(SEQ ID NO:14);VNNDETCEQR(SEQ ID NO:15);VNNDET(SEQ ID NO:16);AARISLGPR(SEQ ID NO:17);CCYDGACVNNDETCEQRAA(SEQ IDNO:18);CCYDGACVNNDETCEQRA(SEQ ID NO:19);CCYDGACVNNDETCEQR(SEQ IDNO:20);CCYDGACVNNDETCEQ(SEQ ID NO:21);CCYDGACVNNDETCE(SEQ ID NO:22);CYDGACVNNDETCEQRAAR(SEQ ID NO:23);YDGACVNNDETCEQRAAR(SEQ IDNO:24);或CYDGACVNNDETCEQRAAR(SEQ ID NO:25)。在一些实施方案中,抗体可以结合含有特定氨基酸序列的人C5a蛋白或其片段,所述氨基酸序列含有在SEQ ID NO:12-25中任一个所述的至少4个(例如,至少4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16或17或更多个)连续氨基酸,或由其组成。本文所述的抗体可以结合的其它C5a蛋白片段和用于生成合适的C5a-特异性的抗原结合位点的方法阐述在例如美国专利号4,686,100中,其公开内容通过引用整体并入本文。
在一些实施方案中,抗体与C5a的结合可以抑制C5a的生物活性。用于测量C5a活性的方法包括,例如,趋化性试验、RIA或ELISA(参见,例如,Ward和Zvaifler(1971)JClin Invest50(3):606-16和Wurzner等人(1991)Complement Inflamm 8:328-340)。在一些实施方案中,抗体与C5a的结合可以抑制C5a和C5aR1之间的相互作用。适用于检测和/或测量C5a和C5aR1之间的相互作用(在有和没有抗体存在下)的方法是本领域已知的,且描述在例如Mary和Boulay(1993)Eur J Haematol51(5):282-287;Kaneko等人(1995)Immunology86(1):149-154;Giannini等人(1995)J Biol Chem270(32):19166-19172和美国专利申请公开号20060160726中。例如,在有和没有抗体存在下,可以评价可检测地标记的(例如,放射性标记的)C5a与表达C5aR1的外周血单核细胞的结合。与在没有抗体存在下结合的量相比,在有抗体存在下结合C5aR1的可检测地标记的C5a的量的减少指示所述抗体抑制C5a和C5aR1之间的相互作用。在一些实施方案中,抗体与C5a的结合可以抑制C5a和C5L2之间的相互作用(参见下面)。用于检测和/或测量C5a和C5L2之间的相互作用的方法是本领域已知的,且描述在例如Ward(2009)J Mol Med87(4):375-378和Chen等人(2007)Nature446(7132):203-207(参见下面)中。
在一些实施方案中,所述C5抑制剂是结合C5b的抗体(有时在本文中称作“抗-C5b抗体”)。在一些实施方案中,所述抗体结合C5b,但是不结合全长C5。C5b的结构如上所述,且也详述在例如,Müller-Eberhard(1985)Biochem Soc Symp50:235-246;Yamamoto和Gewurz(1978)J Immunol120(6):2008-2015;和Haviland等人(1991),同上。如上所述,C5b结合C6、C7和C8,在靶细胞表面处形成C5b-8复合物。在连续的结合过程中形成的蛋白复合物中间体包括C5b-6(包括C5b和C6)、C5b-7(包括C5b、C6和C7)和C5b-8(包括C5b、C6、C7和C8)。在结合几个C9分子后,形成膜攻击复合物(MAC、C5b-9末端补体复合物(TCC))。当足够数量的MAC插入靶细胞膜中时,它们产生的孔(MAC孔)介导靶细胞的快速渗透性裂解。
在一些实施方案中,抗体与C5b的结合可以抑制C5b和C6之间的相互作用。在一些实施方案中,抗体与C5b的结合可以抑制C5b-9MAC-TCC的装配或活性。在一些实施方案中,抗体与C5b的结合可以抑制补体-依赖性的细胞裂解(例如,体外和/或体内)。适用于评价抗体是否抑制补体-依赖性的裂解的方法包括,例如,溶血试验或用于检测可溶性C5b-9的活性的其它功能试验。例如,通过Kabat和Mayer(编),“Experimental Immunochemistry,第2版,”135-240,Springfield,IL,CC Thomas(1961),第135-139页所述的溶血试验,或该试验的常规变体,诸如在例如Hillmen等人(2004)N Engl J Med350(6):552中所述的鸡红细胞溶血方法,可以测量在有抗体存在下补体的细胞裂解能力的降低。
结合C5b的抗体以及制备这样的抗体的方法是本领域已知的。参见,例如,美国专利号6,355,245。可商业得到的抗-C5b抗体可从许多销售商得到,包括,例如,HycultBiotechnology(目录号:HM2080;克隆568)和AbcamTM(ab46151或ab46168)。
在一些实施方案中,所述C5抑制剂是结合哺乳动物(例如,人)形式的C5b的抗体。例如,所述抗体可以结合具有下述氨基酸序列的人C5b蛋白的一部分:
QEQTYVISAPKIFRVGASENIVIQVYGYTEAFDATISIKSYPDKKFSYSSGHVHLSSENKFQNSAILTIQPKQLPGGQNPVSYVYLEVVSKHFSKSKRMPITYDNGFLFIHTDKPVYTPDQSVKVRVYSLNDDLKPAKRETVLTFIDPEGSEVDMVEEIDHIGIISFPDFKIPSNPRYGMWTIKAKYKEDFSTTGTAYFEVKEYVLPHFSVSIEPEYNFIGYKNFKNFEITIKARYFYNKVVTEADVYITFGIREDLKDDQKEMMQTAMQNTMLINGIAQVTFDSETAVKELSYYSLEDLNNKYLYIAVTVIESTGGFSEEAEIPGIKYVLSPYKLNLVATPLFLKPGIPYPIKVQVKDSLDQLVGGVPVILNAQTIDVNQETSDLDPSKSVTRVDDGVASFVLNLPSGVTVLEFNVKTDAPDLPEENQAREGYRAIAYSSLSQSYLYIDWTDNHKALLVGEHLNIIVTPKSPYIDKITHYNYLILSKGKIIHFGTREKFSDASYQSINIPVTQNMVPSSRLLVYYIVTGEQTAELVSDSVWLNIEEKCGNQLQVHLSPDADAYSPGQTVSLNMATGMDSWVALAAVDSAVYGVQRGAKKPLERVFQFLEKSDLGCGAGGGLNNANVFHLAGLTFLTNANADDSQENDEPCKEIL(SEQ ID NO:4)。在一些实施方案中,所述抗体可以结合具有下述氨基酸序列的人C5b蛋白的一部分:
LHMKTLLPVSKPEIRSYFPESWLWEVHLVPRRKQLQFALPDSLTTWEIQGIGISNTGICVADTVKAKVFKDVFLEMNIPYSVVRGEQIQLKGTVYNYRTSGMQFCVKMSAVEGICTSESPVIDHQGTKSSKCVRQKVEGSSSHLVTFTVLPLEIGLHNINFSLETWFGKEILVKTLRVVPEGVKRESYSGVTLDPRGIYGTISRRKEFPYRIPLDLVPKTEIKRILSVKGLLVGEILSAVLSQEGINILTHLPKGSAEAELMSVVPVFYVFHYLETGNHWNIFHSDPLIEKQKLKKKLKEGMLSIMSYRNADYSYSVWKGGSASTWLTAFALRVLGQVNKYVEQNQNSICNSLLWLVENYQLDNGSFKENSQYQPIKLQGTLPVEARENSLYLTAFTVIGIRKAFDICPLVKIDTALIKADNFLLENTLPAQSTFTLAISAYALSLGDKTHPQFRSIVSALKREALVKGNPPIYRFWKDNLQHKDSSVPNTGTARMVETTAYALLTSLNLKDINYVNPVIKWLSEEQRYGGGFYSTQDTINAIEGLTEYSLLVKQLRLSMDIDVSYKHKGALHNYKMTDKNFLGRPVEVLLNDDLIVSTGFGSGLATVHVTTVVHKTSTSEEVCSFYLKIDTQDIEASHYRGYGNSDYKRIVACASYKPSREESSSGSSHAVMDISLPTGISANEEDLKALVEGVDQLFTDYQIKDGHVILQLNSIPSSDFLCVRFRIFELFEVGFLSPATFTVYEYHRPDKQCTMFYSTSNIKIQKVCEGAACKCVEADCGQMQEELDLTISAETRKQTACKPEIAYAYKVSITSITVENVFVKYKATLLDIYKTGEAVAEKDSEITFIKKVTCTNAELVKGRQYLIMGKEALQIKYNFSFRYIYPLDSLTWIEYWPRDTTCSSCQAFLANLDEFAEDIFLNGC(SEQ IDNO:26)。在一些实施方案中,所述抗体可以结合含有特定氨基酸序列的人C5b蛋白或其片段,所述氨基酸序列含有在SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:26中所述的至少4个(例如,至少4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20或更多个)连续氨基酸,或由其组成。
C5抑制剂抗体可以结合的人C5b或C5a的其它示例性的子片段公开在例如美国专利号6,355,245中,其公开内容通过引用并入本文。
在一些实施方案中,所述抑制剂是特异性地结合C5a多肽(例如,具有在SEQ IDNO:12中描述的氨基酸序列的人C5a多肽)的抗体。在一些实施方案中,所述抑制剂是特异性地结合C5b多肽的抗体。
本文描述了用于测定特定试剂是否是人补体组分C5的抑制剂的方法,且是本领域已知的。例如,通过本领域众所周知的方法,可以测量体液中的C5a和C5b的浓度和/或生理活性。用于测量C5a浓度或活性的方法包括,例如,趋化性试验、RIA或ELISA(参见,例如,Ward和Zvaifler(1971)J Clin Invest.50(3):606-16和Wurzner等人(1991)ComplementInflamm.8:328-340)。对于C5b,可以使用溶血试验或本文讨论的可溶性C5b-9的试验。也可以使用本领域已知的其它试验。使用这些或其它类型的试验,可以筛选出能抑制人补体组分C5的候选剂,诸如抗-C5抗体,以便例如鉴别可用于本文所述的方法中的化合物,并测定这样的化合物的适当的剂量水平。
用于检测mRNA或蛋白的表达的抑制(例如,人C5蛋白表达或编码人C5蛋白的mRNA表达的抑制)的方法是分子生物学领域众所周知的,且包括,例如,用于mRNA的RNA印迹和RT-PCR(或定量RT-PCR)技术和蛋白检测、蛋白印迹、斑点印迹或ELISA技术(参见,例如,Sambrook等人(1989)“Molecular Cloning:A Laboratory Manual,第2版,”Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,N.Y.)。
用于测定候选化合物是否抑制人C5切割成C5a和C5b形式的方法是本领域已知的,且描述在例如Moongkarndi等人(1982)Immunobiol.162:397;Moongkarndi等人(1983)Immunobiol.165:323;Isenman等人(1980)J Immunol.124(1):326-31;Thomas等人(1996)Mol.Immunol.33(17-18):1389-401;和Evans等人(1995)Mol.Immunol.32(16):1183-95中。
人补体组分C5的抑制也可以降低受试者体液中补体的细胞裂解能力。通过本领域众所周知的方法,例如,通过常规溶血试验诸如Kabat和Mayer(编),“ExperimentalImmunochemistry,第2版,”135-240,Springfield,IL,CC Thomas(1961),第135-139页所述的溶血试验,或该试验的常规变体,诸如在例如Hillmen等人(2004)N Engl JMed350(6):552中所述的鸡红细胞溶血方法,可以测量存在的补体的细胞裂解能力的这种降低。
药物组合物和制剂。可以将含有补体抑制剂(例如,人补体组分C5的抑制剂,诸如抗-C5抗体或其抗原结合片段)的组合物配制成药物组合物,例如,用于施用给受试者来治疗aHUS、CAPS、德戈斯病或TMA。所述药物组合物通常包含药学上可接受的载体。本文使用的“药学上可接受的载体”表示且包括生理上相容的任意和所有溶剂、分散介质、包衣剂、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。所述组合物可以包含药学上可接受的盐,例如,酸加成盐或碱加成盐(参见例如,Berge等人(1977)J.Pharm.Sci.66:1-19)。
所述组合物可以按标准方法配制。药物配制是本领域非常确定的技术,且进一步描述在例如,Gennaro(2000)“Remington:The Science and Practice of Pharmacy,”第20版,Lippincott,Williams&Wilkins(ISBN:0683306472);Ansel等人(1999)“PharmaceuticalDosage Forms and Drug Delivery Systems,”第7版,Lippincott Williams&Wilkins Publishers(ISBN:0683305727);和Kibbe(2000)“Handbook of Pharmaceutical Excipients AmericanPharmaceutical Association,”第3版(ISBN:091733096X)中。在一些实施方案中,可以将组合物配制成例如适当浓度且适合在2-8℃储存的缓冲溶液。在一些实施方案中,可以将组合物配制成在低于0℃的温度(例如,-20℃或-80℃)储存。
所述药物组合物可以是多种形式。这些形式包括,例如,液体、半固体及固体剂型,诸如液体溶液(如注射液和灌注液)、分散系或悬浮液、片剂、丸剂、散剂、脂质体和栓剂。优选形式部分地取决于预期的给药模式和治疗用途。例如,预期用于全身性或局部递送的含有抗-C5抗体的组合物可以是注射液或灌注液的形式。因此,所述组合物可以配制成用于通过肠胃外模式施用(如静脉、皮下、腹膜内、或肌肉内注射)。本文使用的术语“肠胃外施用”、“肠胃外地施用”和其它语法上等效的短语表示除了肠和局部施用以外的施用模式,通常经注射,且包括但不限于:静脉内的、鼻内的、眼内的、肺的、肌肉内的、动脉内的、鞘内的、囊内的、眶内的、心内的、真皮内的、肺内的、腹膜内的、经气管的、皮下的、表皮下的、关节内的、囊下的、蛛网膜下的、椎管内的、硬膜外的、大脑内的、颅内的、颈动脉内的和胸骨内的注射和输注(参见下面)。
可以将组合物配制成溶液、微乳液、分散系、脂质体或其它适合在高浓度稳定储存的有序结构。可以如下制备无菌注射液:通过将需要量的本文所述的抗体,与所需的一种或多种上文所列的成分一起,掺入合适的溶剂中,然后过滤除菌。通常,可以如下制备分散系:将本文所述的人补体组分C5的抑制剂(例如,抗-C5抗体)掺入无菌介质中,所述介质含有基础的分散介质和上文所列的所需的其它成分。在制备无菌注射液所用的无菌粉末的情况下,制备方法包括真空干燥和冷冻干燥,它们产生本文所述抗体的粉末和来自其先前过滤除菌过的溶液的任何其它希望的成分。可以维持溶液的适当流动性,例如,通过利用诸如卵磷脂等包衣,通过在分散系的情况下维持所需的粒度,和通过利用表明活性剂。通过在组合物中包含诸如单硬脂酸盐和明胶等延迟吸收剂,可以实现注射组合物的延长吸收。
在某些实施方案中,可以与保护该化合物免于快速释放的载体一起配制C5抑制剂(例如,抗-C5抗体或其抗原结合片段),,诸如控释制剂(包括植入体)和微囊化的递送系统。可以使用生物可降解的生物相容的聚合物,诸如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。制备这类制剂的多种方法是是本领域已知的(参见,例如,J.R.Robinson(1978)“Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems,”Marcel Dekker,Inc.,New York.)。
在一些实施方案中,可以将本文所述的抗体配制在适合肺内施用(例如,通过喷雾器施用)给诸如人等哺乳动物的组合物中。制备这样的组合物的方法是本领域众所周知的,且描述在例如美国专利申请公开号20080202513、美国专利号7,112,341和6,019,968、和PCT公开号WO 00/061178和WO 06/122257中,它们各自的公开内容通过引用整体并入本文。干粉吸入制剂和适用于施用所述制剂的系统描述在例如美国专利申请公开号20070235029、PCT公开号WO 00/69887和美国专利号5,997,848中。
在一些实施方案中,可以使用例如提高它的稳定性和/或在循环中(例如,在血液、血清或其它组织中)的保留的部分,修饰本文所述的人C5抑制剂(例如,抗-C5抗体或其抗原结合片段)。所述稳定化部分可以使抗体的稳定性或保留提高至少1.5(例如,至少2、5、10、15、20、25、30、40或50或更多个)倍。
可以将本文所述的人补体组分C5的核酸抑制剂(例如,反义核酸或siRNA)掺入要用作基因疗法的一部分的基因构建体中,以递送可以用于在细胞内表达和生成药剂的核酸。可以在任意生物学上有效的载体中施用这种组分的表达构建体,所述载体例如能在体内有效地给细胞递送组分基因的任意制剂或组合物。所述方案包括将主题基因插入病毒载体中,包括重组逆转录病毒、腺病毒、腺伴随病毒、慢病毒和单纯疱疹病毒-1(HSV-1)或重组细菌或真核质粒。病毒载体可以直接转染细胞;在例如,阳离子脂质体(脂质体转染)或衍生的(例如,抗体缀合的)、聚赖氨酸缀合物、短杆菌肽S、人工病毒包膜或其它这样的细胞内载体的辅助下,可以递送质粒DNA,以及直接注射基因构建体或在体内进行CaPO4沉淀(也参见下面的“离体方案”)。合适的逆转录病毒的实例包括本领域技术人员已知的pLJ、pZIP、pWE和pEM(参见,例如,Eglitis等人(1985)Science 230:1395-1398;Danos和Mulligan(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:6460-6464;Wilson等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:3014-3018;Armentano等人(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.USA87:6141-6145;Huber等人(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA88:8039-8043;Ferry等人(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA88:8377-8381;Chowdhury等人(1991)Science254:1802-1805;van Beusechem等人(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:7640-7644;Kay等人(1992)Human Gene Therapy3:641-647;Dai等人(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:10892-10895;Hwu等人(1993)J.Immunol.150:4104-4115;美国专利号4,868,116和4,980,286;PCT公开号WO89/07136、WO89/02468、WO89/05345和WO92/07573)。另一个病毒基因递送系统利用腺病毒-衍生的载体(参见,例如,Berkner等人(1988)BioTechniques6:616;Rosenfeld等人(1991)Science 252:431-434;和Rosenfeld等人(1992)Cell68:143-155)。从腺病毒株Ad 5型dl324或其它腺病毒株(例如,Ad2、Ad3、Ad7等)衍生出的合适的腺病毒载体是本领域技术人员已知的。可用于递送主题基因的另一个病毒载体系统是腺伴随病毒(AAV)。参见,例如,Flotte等人(1992)Am.J.Respir.Cell.Mol.Biol.7:349-356;Samulski等人(1989)J.Virol.63:3822-3828;和McLaughlin等人(1989)J.Virol62:1963-1973。
在一些实施方案中,可以共同配制超过一种(例如,2、3、4、5、6、7、8、9或10或更多种)抑制剂(例如,一种或多种人C5抑制剂)。例如,可以一起配制C5-特异性的siRNA和抗-C5抗体。
在一些实施方案中,可以与一种或多种可用于治疗补体相关障碍(例如,任一种本文所述的补体相关障碍诸如APS、CAPS、aHUS、德戈斯病、HELLP综合征)或改善其症状的另外的活性剂一起,配制本文所述的人补体的抑制剂(例如,人C5抑制剂诸如抗-C5抗体或其抗原结合片段)。例如,可以与抗高血压药、抗凝血药和/或甾类(例如,皮质类固醇)一起,配制抗-C5抗体。抗凝血药的实例包括,例如,华法林(华法林钠)、阿司匹林、肝素、苯茚二酮、磺达肝素、依达肝素钠和凝血酶抑制剂(例如,阿加曲班、来匹卢定、比伐卢定或达比加群)。还可以与纤维蛋白溶解剂(例如,安克洛酶、ε-氨基己酸、抗纤溶酶-a1、前列环素和去纤苷)、环磷酰胺或用于治疗CAPS的抗细胞因子剂一起配制人C5抑制剂(例如,抗-C5抗体、抗-C5a抗体或抗-C5b抗体)。抗细胞因子剂包括,例如,结合和调节细胞因子(例如,促炎症细胞因子诸如TNF)的活性的抗体或可溶性受体。抗细胞因子剂的实例包括,例如,TNF抑制剂诸如可溶性TNF受体(例如,依那西普;)或抗-TNF抗体(例如,英夫利昔单抗;)。在一些实施方案中,可以与诸如利妥昔单抗(RituxanTM;Biogen Idec,Cambridge,MA)等抗-CD20剂一起配制或使用所述抑制剂。在一些实施方案中,可以将人C5抑制剂配制成与静脉内免疫球蛋白疗法(IVIG)或血浆交换一起施用给受试者。
当人C5抑制剂要与第二种活性剂联合使用时,或当要使用2种或更多种人C5抑制剂(例如,抗-C5a抗体和抗-C5b抗体)时,所述药剂可以单独地或一起配制。例如,可以混合各个药物组合物,例如,在即将施用之前,并一起施用,或可以分别施用,例如,在同时或不同时(参见下面)。
如上所述,可以配制组合物,使它包含治疗有效量的人C5抑制剂(例如,抗-C5抗体或其抗原结合片段),或可以将组合物配制成包含亚治疗量的所述抑制剂和亚治疗量的一种或多种另外的活性剂,使得总组分可以治疗上有效地治疗补体相关障碍,诸如本文所述那些中的任一种。在一些实施方案中,可以将组合物配制成包含2种或更多种人C5抑制剂,各自在亚治疗量,使得总抑制剂是在可以治疗上有效地治疗补体相关障碍的浓度,所述补体相关障碍例如aHUS、CAPS、德戈斯病或HELLP综合征。用于测定治疗上有效剂量(例如,抗-C5抗体的治疗上有效剂量)的方法是本领域已知的,且描述在本文中。
生产抗体的方法
合适的生产根据本公开内容的抗体(例如,抗-C5抗体、抗-C5a抗体和/或抗-C5b抗体)或其抗原结合片段的方法是本领域已知的(参见,例如,美国专利号6,355,245),且描述在本文中。例如,可以如下生产单克隆抗-C5抗体:使用表达补体组分C5的细胞、C5多肽、或C5多肽的抗原片段(例如,C5a或C5b)作为免疫原,从而在动物中引起免疫应答,从该动物可以分离产生抗体的细胞,并分离单克隆抗。可以测定此类抗体的序列,并通过重组技术产生抗体或其变体。可以基于单克隆抗体以及能够结合人补体组分C5的多肽的序列,用重组技术产生嵌合的、CDR嫁接的、人源化的和全人的抗体。
此外,使用例如表达C5的细胞或从其衍生的多肽,可以选择来自重组文库的抗体(“噬菌体抗体”),作为诱饵,以基于靶标特异性分离抗体或多肽。非人和嵌合抗-C5抗体的产生和分离是在本领域技术人员的能力范围内。
可以使用重组DNA技术改进在非人细胞中产生的抗体的一种或多种特征。从而,可以构建嵌合抗体,以便降低其在诊断或治疗应用中的免疫原性。此外,通过CDR嫁接并任选通过构架修饰来人源化抗体,可以使免疫原性最小化。参见,美国专利号5,225,539和7,393,648,它们各自的内容通过引用并入本文。
抗体可以从动物血清得到,或者对于单克隆抗体或其片段的情况,在细胞培养物中产生。根据建立的方法,包括在细菌或优选哺乳动物细胞培养物中的方法,可以用重组DNA技术产生抗体。所选的细胞培养系统优选地分泌抗体产物。
在另一个实施方案中,用于产生本文公开的抗体的方法包括,培养已经用杂种载体转化的宿主,例如,大肠杆菌或哺乳动物细胞。所述载体包括一种或多种表达盒,所述表达盒含有可操作地连接到编码信号肽的第一个DNA序列上的启动子,所述第一个DNA序列在合适的读码框中连接到编码抗体蛋白的第二个DNA序列上。然后收集并分离抗体蛋白。任选地,表达盒可以包括可操作地连接到编码多种抗体蛋白的多顺反子(例如,二顺反子)DNA序列上的启动子,所述DNA序列各自单个地在合适的读码框中可操作地连接到信号肽上。
在合适的培养基中在体外进行杂交瘤细胞或哺乳动物宿主细胞的增殖,所述培养基包括常规的标准培养基(例如,Dulbecco氏改良的Egle培养基(DMEM)或RPMI 1640培养基),其任选地补充哺乳动物血清(例如,胎牛血清)或微量元素和生长维持补充物(例如饲养细胞,如正常小鼠腹膜渗出细胞、脾细胞、骨髓巨噬细胞、2-氨基乙醇、胰岛素、转铁蛋白、低密度脂蛋白、油酸等)。作为细菌细胞或酵母细胞的宿主细胞的扩增,同样在本领域已知的合适培养基中进行。例如,对于细菌,合适的培养基包括培养基LE、NZCYM、NZYM、NZM、Terrific Broth、SOB、SOC、2xYT或M9基本培养基。对于酵母,合适的培养基包括培养基YPD、YEPD、基本培养基或完全基本退出培养基(Complete MinimalDropout Medium)。
体外生产提供了相对纯的抗体制备物,并且允许放大生产,以得到大量目的抗体。用于细菌细胞、酵母、植物或哺乳动物细胞培养的技术是本领域已知的,并且包括均一悬浮培养(例如,在气升式反应器或连续搅拌反应器中)、和固定化的或截留的细胞培养(例如,在中空纤维、微囊中、在琼脂糖微珠或陶瓷药筒上)。
通过在体内增殖哺乳动物细胞,也可以得到大量目的抗体。为此目的,将产生目的抗体的杂交瘤细胞注射到组织相容的哺乳动物中,以造成抗体生产肿瘤的生长。任选地,在注射前,用烃、特别是矿物油如降植烷(四甲基-十五烷)引发动物。1-3周后,从那些哺乳动物的体液分离抗体。例如,将通过融合合适的骨髓瘤细胞和来自Balb/c小鼠的产生抗体的脾细胞得到的杂交瘤细胞,或来自杂交瘤细胞系Sp2/0的产生目的抗体的转染细胞,腹膜内地注射进任选地用降植烷预处理过的Balb/c小鼠小鼠中。1-2周后,从动物取出腹水液。
前面的和其它的技术在例如下述文献中讨论:Kohler和Milstein,(1975)Nature256:495-497;美国专利号4,376,110;Harlow和Lane,Antibodies:a Laboratory Manual,(1988)Cold Spring Harbor,它们的公开内容都通过引用并入本文。用于制备重组抗体分子的技术描述在上述文献以及例如下述文献中:WO97/08320;美国专利号5,427,908;美国专利号5,508,717;Smith(1985)Science225:1315-1317;Parmley和Smith(1988)Gene73:305-318;DeLa Cruz等人(1988)Journal of Biological Chemistry263:4318-4322;美国专利号5,403,484;美国专利号5,223,409;WO88/06630;WO92/15679;美国专利号5,780,279;美国专利号5,571,698;美国专利号6,040,136;Davis等人(1999)Cancer Metastasis Rev 18(4):421-5;和Taylor等人(1992)Nucleic Acids Research 20:6287-6295;Tomizuka等人(2000)Proc.Natl.Acad.Sci.USA97(2):722-727,它们各自的内容通过引用整体并入本文。
对细胞培养上清液筛选目的抗体,优选通过表达补体组分C5的细胞的免疫荧光染色,通过免疫印迹,通过酶免疫测定法,例如,夹层测定法或者斑点测定法,或放射免疫测定法。
对于抗体的分离,可以浓缩培养上清液或者腹水液中的免疫球蛋白,例如,通过硫酸铵沉淀、在吸水材料如聚乙二醇中透析,通过选择性膜过滤,等。如果必要和/或希望,通过常规的层析方法纯化抗体,例如,凝胶过滤、离子交换层析、用DEAE-纤维素层析和/或(免疫)亲和层析,例如,使用从表达补体组分C5的细胞系衍生出的一种或多种表面多肽或使用蛋白-A或-G的亲和层析。
另一个实施方案提供了制备在合适的哺乳动物中分泌抗C5蛋白的抗体的细菌细胞系的方法。例如,用来自表达C5的组织或细胞的合并样品或C5多肽或其片段免疫兔。构建从免疫的兔产生的噬菌体展示文库,并根据本领域众所周知的方法(例如,在通过引用并入本文的不同参考文献中公开的方法)淘选目的抗体。
也公开了分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞。优选的杂交瘤细胞是遗传稳定的,分泌具有所希望的特异性的本文描述的单克隆抗体,并可以通过在体外解冻和繁殖或在体内作为腹水,从深度冷冻的培养物扩增。
在另一个实施方案中,提供了制备分泌针对补体组分C5蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞系的方法。在该方法中,用C5的一种或多种多肽或抗原片段,或者用来自表达C5的细胞的一种或多种多肽或抗原片段、表达C5的细胞自身、或含有所述的纯化多肽的抗原载体,免疫合适的哺乳动物,例如,Balb/c小鼠。短暂地培养生长经免疫的哺乳动物的产生抗体的细胞,或者与合适的骨髓瘤细胞系的细胞融合。克隆融合得到的杂交细胞,并选择分泌目的抗体的细胞克隆。例如,将用表达C5的慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞系免疫的Balb/c小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞系PAI或骨髓瘤细胞系Sp2/0-Ag 14的细胞融合。然后对所得的杂交细胞筛选目的抗体的分泌,并克隆阳性杂交瘤细胞。
制备杂交瘤细胞系的方法包括,通过在几个月内,例如在2至4个月内,皮下地和/或腹膜内地注射含有人C5蛋白(或其免疫原性片段)的免疫原性组合物几次,例如4到6次,免疫Balb/c小鼠。在最后一次注射后2到4天,从免疫的小鼠取出脾细胞,并在融合促进剂(优选聚乙二醇)存在下,与骨髓瘤细胞系PAI的细胞融合。优选地,在含有约30%到约50%的分子量约4000的聚乙二醇的溶液中,使骨髓瘤细胞与3-20倍过量的来自经免疫小鼠的脾细胞融合。融合后,在如前文描述的合适的培养基(补充选择培养基,例如HAT培养基)中,以规则的时间间隔扩增细胞,以便防止正常的骨髓瘤细胞生长超过希望的杂交瘤细胞。
抗体和其片段可以是“嵌合的”。嵌合抗体和其抗原结合片段包含来自两个或更多个不同物种(例如小鼠和人)的部分。将具有希望的特异性的小鼠可变区剪接到人恒定结构域基因区段中,可以产生嵌合抗体(例如,美国专利号4,816,567)。以这种方式,可以修饰非人抗体,以使得它们更适合人类临床应用(例如,用于治疗或预防人受试者中的补体相关障碍的方法)。
本公开内容的单克隆抗体包括“人源化”形式的非人(例如小鼠)抗体。人源化的或CDR嫁接的mAb尤其可用作人类的治疗剂,因为它们不象小鼠抗体一样快速地从循环中清除,并且通常不引起不利的免疫反应。制备人源化抗体的方法通常是本领域众所周知的。例如,可以基本上按照Winter和同事(参见,例如,Jones等人(1986)Nature321:522-525;Riechmann等人(1988)Nature332:323-327;和Verhoeyen等人(1988)Science239:1534-1536)的方法进行人源化,其中将啮齿动物CDR或CDR序列用人抗体的对应序列代替。也参见,例如,Staelens等人(2006)Mol Immunol43:1243-1257。在一些实施方案中,非人(例如小鼠)抗体的人源化形式是人抗体(受体抗体),其中受体抗体的高变(CDR)区残基被来自非人物种(诸如小鼠、大鼠、兔或非人灵长类动物)(供体抗体)的具有希望的特异性、亲和力和结合能力的高变区残基替换。在一些情况中,将人免疫球蛋白的构架区残基也用对应的非人残基替换(所谓的“回复突变”)。此外,噬菌体展示文库可以用于改变抗体序列内所选位置的氨基酸。通过人构架的选择,也可以影响人源化抗体的性质。此外,可以修饰人源化和嵌合抗体,以包含在受体抗体或供体抗体中没有发现的残基,以便进一步改善抗体性质,如亲和力或效应子功能。
本公开内容中也提供了全人抗体。术语“人抗体”包括具有来自人种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区(如果存在)的抗体。人抗体可以包括不由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如,通过在体外随机的或位点特异性的诱变或通过体内体细胞突变而导入的突变)。然而,术语“人抗体”不包括这样的抗体,其中来自另一哺乳动物物种(如小鼠)的种系的CDR序列已经被嫁接到人框架序列上(即,人源化的抗体)。全人或人抗体可以来自携带人抗体基因的转基因小鼠(携带可变(V)、多样性(D)、连接(J)和恒定(C)外显子)或来自人细胞。例如,现在可能产生转基因动物(例如小鼠),其在免疫后能够在不产生内源免疫球蛋白的情况下产生人抗体的全部所有组成成分(参见,例如,Jakobovits等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:2551;Jakobovits等人(1993)Nature362:255-258;Bruggemann等人(1993)Year in Immunol.7:33;和Duchosal等人(1992)Nature355:258.)。可以工程化转基因小鼠株,以含有来自未重排的人免疫球蛋白基因的基因序列。人序列可以编码人抗体的重链和轻链,并且在小鼠中正确发挥功能,经历重排以提供与在人类中相似的宽的抗体所有组成成分。可以用靶蛋白(例如,补体组分C5蛋白、其片段,或者表达C5蛋白的细胞)免疫转基因小鼠,以产生特异抗体和它们的编码RNA的不同阵列。然后可以将编码此类抗体的抗体链组分的核酸从动物克隆到展示载体中。典型地,克隆编码重链和轻链序列的核酸的单独群体,然后在插入时将单独群体重组到载体中,使得任何给定的载体拷贝接受重链和轻链的随机组合。设计载体,以表达抗体链,使得它们可以在含有载体的展示包装的外表面上被装配和展示。例如,抗体链可以作为融合蛋白表达,该融合蛋白具有来自噬菌体外表面的噬菌体外壳蛋白。之后,可以对展示包装筛选结合靶标的抗体的展示。
此外,人抗体可以源自噬菌体展示文库(Hoogenboom等人(1991)J.Mol.Biol.227:381;Marks等人(1991)J.Mol.Biol.,222:581-597;和Vaughan等人(1996)NatureBiotech14:309(1996))。可以产生合成的噬菌体文库,其使用合成的人抗体V区的随机组合。通过抗原的选择,可以制备全人抗体,其中V区在性质上非常像人。参见,例如,美国专利号6,794,132,6,680,209,4,634,666,和Ostberg等人(1983),Hybridoma2:361-367,它们各自的内容通过引用整体并入本文。
对于人抗体的产生,也参见Mendez等人(1998)Nature Genetics15:146-156,Green和Jakobovits(1998)J.Exp.Med.188:483-495,它们的公开内容通过引用整体并入本文。人抗体进一步在美国专利号5,939,598、6,673,986、6,114,598、6,075,181、6,162,963、6,150,584、6,713,610和6,657,103以及美国专利申请公开号2003-0229905A1、2004-0010810A1、US2004-0093622 A1、2006-0040363 A1、2005-0054055 A1、2005-0076395 A1、2005-0287630A1中讨论和描述。也参见国际公开号WO 94/02602、WO 96/34096和WO 98/24893和欧洲专利号EP 0 463 151 B1。上面引用的专利、申请和参考文献各自的公开内容通过引用整体并入本文。
在替代方案中,其它人,包括GenPharm International,Inc.,已经利用了“微型基因座”(minilocus)方案。在微型基因座方案中,通过包括来自Ig基因座的片段(个体基因),模拟外源Ig基因座。从而,一个或多个VH基因、一个或多个DH基因、一个或多个JH基因、一个μ恒定区,和另一恒定区(优选γ恒定区)形成用于插入到动物中的构建体。该方案描述在例如美国专利号5,545,807、5,545,806、5,625,825、5,625,126、5,633,425、5,661,016、5,770,429、5,789,650、和5,814,318、5,591,669、5,612,205、5,721,367、5,789,215、5,643,763、5,569,825、5,877,397、6,300,129、5,874,299、6,255,458、和7,041,871中,它们的公开内容通过引用并入。也参见欧洲专利号0 546 073 B1,国际专利公开号WO92/03918、WO 92/22645、WO 92/22647、WO 92/22670、WO 93/12227、WO 94/00569、WO94/25585、WO 96/14436、WO 97/13852和WO 98/24884,它们各自的公开内容通过引用整体并入本文。另外参见Taylor等人(1992)Nucleic Acids Res.20:6287;Chen等人(1993)Int.Immunol.5:647;Tuaillon等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:3720-4;Choi等人(1993)Nature Genetics4:117;Lonberg等人(1994)Nature368:856-859;Taylor等人(1994)International Immunology6:579-591;Tuaillon等人(1995)J.Immunol.154:6453-65;Fishwild等人(1996)Nature Biotechnology14:845;和Tuaillon等人(2000)Eur.J.Immunol.10:2998-3005,它们各自的公开内容通过引用整体并入本文。
在某些实施方案中,提供了去免疫的抗-C5抗体或其抗原结合片段。去免疫的抗体或其抗原结合片段是这样的抗体,其已经被修饰,以便使得该抗体或其抗原结合片段对于给定物种(例如,人)为非免疫原性的,或免疫原性减小。利用本领域技术人员已知的多种技术,通过修饰抗体或其抗原结合片段,可以实现去免疫(参见,例如,PCT公开号WO 04/108158和WO 00/34317)。例如,可以如下将抗体或其抗原结合片段去免疫:通过鉴定抗体或其抗原结合片段的氨基酸序列内的潜在T细胞表位和/或B细胞表位,并例如使用重组技术,从抗体或其抗原结合片段除去一个或多个潜在T细胞表位和/或B细胞表位。然后,可以任选产生并测试经修饰的抗体或其抗原结合片段,以鉴定保留了一种或多种希望的生物学活性(如结合亲和力)、但是具有减小的免疫原性的抗体或其抗原结合片段。鉴定潜在T细胞表位和/或B细胞表位的方法,可以使用本领域已知的技术进行,例如,计算方法(参见例如,PCT公开号WO 02/069232)、体外或计算机生物模拟(in silico)技术、和生物测定法或物理方法(例如,测定肽与MHC分子的结合,测定肽:MHC复合体与来自该物种的T细胞受体的结合以接受所述抗体或其抗原结合片段,使用转基因动物测试所述蛋白或其肽部分(其中所述物种的MHC分子接受所述抗体或其抗原结合片段),或用转基因动物测试,该转基因动物用来自所述物种的免疫系统细胞重建以接受所述抗体或其抗原结合片段,等)。在不同的实施方案中,本文描述的去免疫的抗-C5抗体包括去免疫的抗原结合片段、Fab、Fv、scFv、Fab’和F(ab’)2、单克隆抗体、鼠抗体、工程化的抗体(例如,嵌合抗体、单链抗体、CDR嫁接的抗体、人源化抗体、全人抗体和人工选择的抗体),合成抗体和半合成抗体。
在一些实施方案中,产生了包含编码抗-C5抗体的重链可变结构域和/或轻链可变结构域的插入片段的重组DNA,或表达C5蛋白的细胞系。术语DNA包括编码单链DNA、由所述编码DNA和其互补DNA组成的双链DNA、或这些互补的(单链)DNA自身。
此外,可以酶促地或化学地合成编码抗-C5抗体的重链可变结构域和/或轻链可变结构域的DNA,使其含有编码重链可变结构域和/或轻链可变结构域的真实DNA序列或其突变体。真实DNA的突变体是编码上述抗体的重链可变结构域和/或轻链可变结构域的DNA,其中一个或多个氨基酸被缺失、插入或与一个或多个其它氨基酸交换。优选地,在人源化和表达优化应用中,所述修饰在抗体的重链可变结构域和/或轻链可变结构域的CDR的外面。术语突变DNA也包括沉默突变体,其中一个或多个核苷酸被具有编码相同氨基酸的新密码子的其它核苷酸替换。术语突变序列也包括简并序列。简并序列在遗传密码意义内是简并的,因为无限数目的核苷酸被其它核苷酸代替,而不导致最初编码的氨基酸序列的改变。由于它们的不同的限制位点和/或特定宿主(尤其大肠杆菌)优选的具体密码子的频率,此类简并序列可以用于得到重链鼠可变结构域和/或轻链鼠可变结构域的最佳表达。
术语突变体意在包括根据本领域已知的方法通过真实DNA的体外诱变得到的DNA突变体。
对于完整四聚体免疫球蛋白分子的装配和嵌合抗体的表达,将编码重链和轻链可变结构域的重组DNA插入片段与编码重链和轻链恒定结构域的对应DNA融合,然后转入合适的宿主细胞中,例如在掺入杂交载体以后。
可以使用包括插入片段的重组DNA,所述插入片段编码抗-C5抗体的重链鼠可变结构域,或与人恒定结构域IgG(例如γ1,γ2,γ3或γ4,在具体实施方案中γ1或γ4)融合的表达C5的细胞系的抗体的重链鼠可变结构域。也提供了包括插入片段的重组DNA,所述插入片段编码与人恒定结构域κ或λ(优选κ)融合的抗体的轻链鼠可变结构域。
另一个实施方案涉及编码重组多肽的重组DNA,其中重链可变结构域和轻链可变结构域通过间隔基团连接,任选包含促进抗体在宿主细胞中的加工的信号序列和/或编码促进抗体纯化的肽和/或切割位点和/或肽间隔区和/或试剂的DNA序列。
因此,本公开内容的单克隆抗体或抗原结合片段可以是未缀合到其它物质(例如,治疗剂或检测标记)上的裸抗体或者抗原结合片段。或者,单克隆抗体或抗原结合片段可以缀合到诸如下述物质上:细胞毒性剂、小分子、激素、酶、生长因子、细胞因子、核酶、肽模拟物、化学品、前药、核酸分子包括编码序列(如反义、RNAi、基因寻靶构建体,等)、或可检测的标记(如NMR或X射线造影剂、荧光分子,等)。在某些实施方案中,抗-C5抗体或抗原结合片段(例如,Fab、Fv、单链scFv、Fab’和F(ab’)2)连接到增加所述抗体或抗原结合片段的半衰期的分子上(参见上面)。
几种可能的载体系统可用于在哺乳动物细胞中表达克隆的重链和轻链基因。一类载体依赖于目的基因序列向宿主细胞基因组中的整合。通过同时导入药物抗性基因诸如大肠杆菌gpt(Mulligan和Berg(1981)Proc.Natl.Acad.Sci.USA,78:2072)或Tn5neo(Southern和Berg(1982)Mol.Appl.Genet.1:327),可以选择具有稳定整合的DNA的细胞。可以将选择标记基因连接到待表达的DNA基因序列上,或者通过共转染导入相同的细胞中(Wigler等人(1979)Cell16:77)。第二类载体利用对染色体外质粒赋予自主复制能力的DNA元件。这些载体可以源自动物病毒,诸如牛乳头状瘤病毒(Sarver等人(1982)Proc.Natl.Acad.Sci.USA,79:7147)、多瘤病毒(Deans等人(1984)Proc.Natl.Acad.Sci.USA81:1292)或SV40病毒(Lusky和Botchan(1981)Nature293:79)。
因为免疫球蛋白cDNA仅仅包含代表编码抗体蛋白的成熟mRNA的序列,免疫球蛋白mRNA的合成需要调节基因转录和RNA加工的额外基因表达元件。这些元件可以包括剪接信号、转录启动子(包括诱导型启动子)、增强子和终止信号。掺入这些元件的cDNA表达载体包括Okayama和Berg(1983)Mol.Cell Biol.3:280;Cepko等人(1984)Cell37:1053;和Kaufman(1985)Proc.Natl.Acad.Sci.USA82:689所述的那些。
从本公开内容可以看出,结合人补体组分的抗体(例如,结合C5、C5b或C5a的抗体)可以用于治疗(例如,补体相关障碍的治疗),包括联合治疗,以及用于疾病恶化的监测。
在本公开内容的治疗实施方案中,预见到双特异性抗体。双特异性抗体是单克隆的,优选人或人源化的抗体,其对至少两种不同的抗原有结合特异性。在本发明的情况下,结合特异性之一是对人补体组分C5抗原的结合特异性,另一个是对任一其它抗原的结合特异性。
制备双特异性抗体的方法在本领域技术人员的能力范围内。常规地,双特异性抗体的重组生产是基于两个免疫球蛋白重链/轻链对的共表达,其中两条重链具有不同的特异性(Milstein和Cuello(1983)Nature305:537-539)。可以使具有希望的结合特异性(抗体-抗原组合位点)的抗体可变结构域与免疫球蛋白恒定结构域序列融合。融合优选是与免疫球蛋白重链恒定结构域融合,后者包括至少部分铰链、CH2和CH3区。可以将编码免疫球蛋白重链融合物和免疫球蛋白轻链(如果希望)的DNA插入单独的表达载体中,并且共转染到合适的宿主生物中。对于用于产生双特异性抗体的示例性的当前已知的方法的其它细节,参见,例如,Suresh等人(1986)Methods in Enzymology121:210;PCT公开号WO 96/27011;Brennan等人(1985)Science229:81;Shalaby等人,J.Exp.Med.(1992)175:217-225;Kostelny等人(1992)J.Immunol.148(5):1547-1553;Hollinger等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:6444-6448;Gruber等人(1994)J.Immunol.152:5368;和Tutt等人(1991)J.Immunol.147:60。双特异性抗体也包括交联的或异型缀合(heteroconjugate)抗体。使用任何方便的交联方法,可以制备异型缀合抗体。合适的交联剂是本领域众所周知的,并且在美国专利号4,676,980中与许多交联技术一起公开。
也已经描述了制备和从重组细胞培养物直接分离双特异性抗体片段的多种技术。例如,已经使用亮氨酸拉链产生了双特异性抗体(参见,例如,Kostelny等人(1992)J.Immunol.148(5):1547-1553)。通过基因融合,可以将来自Fo和Jun蛋白的亮氨酸拉链肽连接到两种不同抗体的Fb’部分上。可以在铰链区还原抗体同二聚体,以形成单体,然后再次氧化形成抗体杂二聚体。该方法也可以用于产生抗体同二聚体。Hollinger等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:6444-6448描述的“双抗体”技术已经提供了制备双特异性抗体片段的替代机制。所述片段包含通过接头连接到轻链可变结构域(VL)上的重链可变结构域(VH),所述接头太短,不会允许同一链上的两个结构域之间配对。因此,一个片段的VH和VL结构域被迫与另一片段的互补VL和VH结构域配对,从而形成两个抗原结合位点。也已经报道了通过使用单链Fv(scFv)二聚体来制备双特异性抗体片段的另一个策略(参见,例如,Gruber等人(1994)J.Immunol.152:5368.)。或者,抗体可以是例如在Zapata等人(1995)Protein Eng.8(10):1057-1062中所述的“线性抗体”。简而言之,这些抗体包含一对串联的Fd区段(VH-CH1-VH-CH1),其形成一对抗原结合区。线性抗体可以是双特异性的或单特异性的。
本公开内容也包括双特异性抗体的变体形式,诸如在Wu等人(2007)NatBiotechnol25(11):1290-1297中描述的四价双可变结构域免疫球蛋白(DVD-Ig)分子。将DVD-Ig分子设计成,使得来自2个不同母体抗体的2个不同轻链可变结构域(VL)直接地串联相连,或通过重组DNA技术经由短接头相连,继之以轻链恒定结构域。从2个母体抗体产生DVD-Ig分子的方法进一步描述在例如PCT公开号WO 08/024188和WO 07/024715中,它们各自的公开内容通过引用整体并入本文。
治疗方法
上述的组合物(例如,任一种本文所述的C5抑制剂或其药物组合物)可以尤其用于治疗或预防受试者的多种补体相关障碍(例如,AP-相关的障碍或CP-相关的障碍)的方法中。使用多种方法(其部分地取决于给药途径),可以将所述组合物施用给受试者,例如,人受试者。所述途径可以是,例如,静脉内注射或输注(IV)、皮下注射(SC)、腹膜内(IP)、肺内、眼内或肌肉内注射。某些抑制剂(例如,小分子)可以经口施用给受试者。
通过例如局部输注、注射或借助于植入物,可以实现施用。所述植入物可以是多孔的、无孔的或凝胶状的材料,包括膜,诸如硅橡胶膜或纤维。所述植入物可以构造成向受试者持续或定期释放组合物(参见,例如,美国专利申请公开号20080241223;美国专利号5,501,856;4,863,457;和3,710,795;EP488401;和EP 430539,它们各自的公开内容通过引用整体并入本文)。借助于可植入装置,可以将组合物递送给受试者,所述可植入装置基于例如可扩散的、可侵蚀的或对流系统,例如,渗透泵、可生物降解的植入物、电扩散系统、电渗系统、蒸气压泵、电解泵、泡腾泵、压电泵、基于侵蚀的系统或电机系统。
本文所述的补体抑制剂(例如,C5抑制剂诸如抗-C5抗体)的适当剂量(该剂量能治疗或预防受试者的补体相关障碍)可以取决于多种因素,包括,例如,要治疗的受试者的年龄、性别和体重,和使用的具体抑制剂化合物。例如,与治疗相同受试者所需的C5-特异性的siRNA分子的剂量相比,治疗具有RA的受试者可能需要不同剂量的抗-C5抗体。影响施用给受试者的剂量的其它因素包括,例如,补体相关障碍的类型或严重性。例如,与具有AMD的受试者相比,具有RA的受试者可能需要施用不同剂量的抗-C5抗体。其它因素可以包括,例如,并发地或以前影响受试者的其它医学障碍、受试者的一般健康、受试者的遗传倾向、饮食、施用时间、排泄速率、联合用药、和给受试者施用的任意其它额外治疗剂。还应当理解,任意特定受试者的具体剂量和治疗方法取决于治疗医学从业人员(例如,医生或护士)的判断。
本文所述的抗体可以作为固定剂量施用,或以毫克/千克(mg/kg)剂量施用。在一些实施方案中,也可以选择剂量,以减少或避免针对组合物中的一种或多种活性抗体的抗体或其它宿主免疫应答的产生。尽管绝非有意进行限制,抗体的示例性剂量包括,例如,1-100μg/kg、0.5-50μg/kg、0.1-100μg/kg、0.5-25μg/kg、1-20μg/kg和1-10μg/kg、1-100mg/kg、0.5-50mg/kg、0.1-100mg/kg、0.5-25mg/kg、1-20mg/kg和1-10mg/kg。本文所述的抗体的示例性剂量包括但不限于:0.1μg/kg、0.5μg/kg、1.0μg/kg、2.0μg/kg、4μg/kg和8μg/kg、0.1mg/kg、0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg、4mg/kg和8mg/kg。本文提供了其它示例性剂量和方案(参见,例如,表1和2)。
药物组合物可以包含治疗有效量的本文所述的补体抑制剂(例如,C5抑制剂诸如抗-C5抗体)。本领域普通技术人员部分地基于施用的抗体的作用、或所述抗体和一种或多种另外的活性剂(如果使用超过一种试剂)的组合作用,可以容易地确定这样的有效量。本文所述的抗体的治疗有效量也可以随诸如下述因素而变化:个体的疾病状态、年龄、性别和体重,以及所述抗体(和一种或多种另外的活性剂)在该个体体内引起希望的反应的能力,所述能力例如改善至少一个疾病参数,例如改善补体相关障碍的至少一种症状。例如,治疗有效量的结合C5a和C5b的抗体可以抑制(减轻其严重性或消除其发生)和/或防止本领域已知的或本文所述的特定障碍和/或特定障碍的任一种症状。治疗有效量也是治疗有益效果超过该组合物的任何有毒或有害作用的量。
在例如I期剂量递增研究中,可以进一步评价本文所述的C5抑制剂(例如,抗-C5抗体)的合适的人剂量。参见,例如,van Gurp等人(2008)Am J Transplantation8(8):1711-1718;Hanouska等人(2007)Clin Cancer Res13(2,part 1):523-531和Hetherington等人(2006)Antimicrobial Agents and Chemotherapy50(10):3499-3500。
本文使用的术语“治疗有效量”或“治疗有效剂量”或类似的术语意在表示引起希望的生物学或医学应答(例如,补体相关障碍的一种或多种症状的改善)的试剂(例如,C5抑制剂)的量。在一些实施方案中,本文所述的组合物含有治疗有效量的抗-C5抗体。在一些实施方案中,本文所述的组合物含有治疗有效量的siRNA,其特异性地结合和促进哺乳动物细胞中C5 mRNA的灭活。在一些实施方案中,本文所述的组合物含有治疗有效量的特异性地结合C5a的抗体。在一些实施方案中,所述组合物含有任一种本文所述的抗体和一种或多种(例如,3、4、5、6、7、8、9、10或11或更多种)其它治疗剂,使得组合物作为整体是治疗上有效的。例如,组合物可以含有本文所述的抗-C5抗体和一种免疫抑制剂,其中所述抗体和试剂各自处于当组合时可以在治疗上有效地治疗或预防受试者的补体相关障碍的浓度。
通过已知的药学方法,在细胞培养物或实验动物(例如,任一种本文所述的补体相关障碍的动物模型)中,可以测定这类组合物的毒性和疗效。这些方法可以用于例如测定LD50(使群体的50%致死的剂量)和ED50(在群体的50%中治疗有效的剂量)。毒性效应和治疗效果的之间的剂量比是治疗指数,它可以用LD50/ED50之比来表示。优选表现出高治疗指数的补体抑制剂(例如,C5抑制剂诸如抗-C5抗体、抗-C5a抗体、或结合和促进哺乳动物细胞中C5 mRNA的灭活的核酸)。虽然可以使用表现出毒副作用的组合物,但应该设计将这类化合物靶向累及组织的部位的递送系统,以便使对正常细胞的潜在损害最小化,从而减小副作用。
从细胞培养物测定和动物研究获得的数据,可以用来制订用于人类的剂量范围。这类抑制剂的剂量通常在所述抑制剂的循环浓度范围内,包括具有很小毒性或无毒性的ED50。所述剂量可以在该范围内变动,取决于所用的剂型和所用的给药途径。对于本文所述(例如,用于治疗或预防补体相关障碍)使用的C5抑制剂(例如,抗-C5抗体或抗-C5a抗体),最初可以从细胞培养物测定来估计治疗有效剂量。可以在动物模型中制订剂量,以便获得循环血浆浓度范围,其包括在细胞培养物中测定的IC50(即达到症状的半数最大抑制的实验化合物浓度)。这类信息可以用来更准确地确定在人类中有用的剂量。例如通过高效液相色谱法或通过ELISA,可以测定在血浆中的水平。
在一些实施方案中,所述方法可以与补体相关障碍的其它治疗联合进行。例如,可以在血浆去除术、IVIG疗法、血浆输注或血浆交换的同时、之前或之后,将所述组合物施用给受试者。参见,例如,Appel等人(2005)J Am.Soc Nephrol.16:1392-1404。在一些实施方案中,不与IVIG联合施用本文所述的C5抑制剂(例如,抗-C5抗体或抗-C5a抗体)。在一些实施方案中,在肾移植的同时、之前或之后,将所述组合物施用给受试者。本文提供了移植器官(例如,肾)或组织的示例性方法以及抗-C5抗体的示例性给药方案。
本文使用的“受试者”可以是任意哺乳动物。例如,受试者可以是人(例如,患者)、非人灵长类动物(例如,猴、狒狒或黑猩猩)、马、牛、猪、绵羊、山羊、狗、猫、兔、豚鼠、沙鼠、仓鼠、大鼠或小鼠。在一些实施方案中,所述受试者是幼儿(例如,人婴儿)。在一些实施方案中,所述受试者是女性。
本文使用的“需要预防”、“需要治疗”或“有此需要”的受试者表示这样的受试者,按照适当的医学从业人员(例如,在人的情况下,医生、护士或开业护士;在非人哺乳动物的情况下,兽医)的判断,其会适当从给定的治疗(诸如使用组合物治疗,所述组合物包含结合和促进哺乳动物细胞中的C5 mRNA的灭活的补体抑制剂(例如,C5抑制剂诸如抗-C5抗体、抗-C5抗体或核酸(例如,siRNA或反义核酸))获益。
如上所述,所述本文所述的补体抑制剂(例如,C5抑制剂诸如抗-C5抗体)可以用于治疗多种补体相关障碍,例如,AP-相关的障碍和/或CP-相关的障碍。这样的障碍包括但不限于:类风湿性关节炎(RA);抗磷脂抗体综合征;狼疮肾炎;缺血再灌注损伤;非典型的溶血性尿毒症综合征(aHUS);典型或传染性溶血性尿毒症综合征(tHUS);致密沉积物病(DDD);视神经脊髓炎(NMO);多病灶的运动神经病(MMN);多发性硬化(MS);黄斑变性(例如,老年性黄斑变性(AMD));溶血、肝酶升高和低血小板(HELLP)综合征;血栓性血小板减少性紫癜(TTP);自发性胎儿死亡;微量免疫血管炎;大疱性表皮松解症;复发性胎儿死亡;和外伤性脑损伤(参见,例如,Holers(2008)Immunological Reviews223:300-316和Holers和Thurman(2004)Molecular Immunology41:147-152.)。在一些实施方案中,所述补体相关障碍是补体-相关的血管障碍诸如心血管障碍、心肌炎、脑血管障碍、周边(例如,肌肉骨骼)血管障碍、肾血管障碍、肠系膜/肠血管障碍、血管炎、过敏性紫癜肾炎、系统性红斑狼疮-相关的血管炎、与类风湿性关节炎有关的血管炎、免疫复合物血管炎、塔卡亚萨病、扩张型心肌病、糖尿病性血管病、川崎病(动脉炎)、静脉气栓塞物(VGE)和在支架放置、旋转斑块切除术和经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)之后的再狭窄(参见,例如,美国专利申请公开号20070172483.)。其它补体相关障碍包括但不限于:MG、CAD、皮肌炎、格雷夫斯病、动脉粥样硬化、阿尔茨海默氏病、全身性炎症应答脓毒病、脓毒性休克、脊髓损伤、肾小球肾炎、桥本甲状腺炎、I型糖尿病、银屑病、天疱疮、AIHA、ITP、肺出血肾炎综合征、德戈斯病、抗磷脂综合征(APS)和灾难性APS(CAPS)。
本文使用的“处于发生补体相关障碍危险中”(例如,AP-相关的障碍或CP-相关的障碍)的受试者是这样的受试者,其具有一个或多个(例如,2、3、4、5、6、7、或8或更多个)发生所述障碍的危险因素。危险因素随具体补体相关障碍而变化,但是是医学领域众所周知的。例如,发生DDD的危险因素包括,例如,发生所述病症的倾向(即所述病症的家族史),或发生所述病症的遗传倾向,例如,编码补体因子H(CFH)、补体因子H-相关的5(CFHR5)和/或补体组分C3(C3)的基因中的一个或多个突变。这样的DDD-相关突变以及用于测定受试者是否携带一个或多个突变的方法是本领域已知的,且描述在例如Licht等人(2006)Kidney Int.70:42-50;Zipfel等人(2006)“The role of complement inmembranoproliferative glomerulonephritis,”见:Complement and Kidney Disease,Springer,Berlin,第199-221页;Ault等人(1997)J Biol.Chem.272:25168-75;Abrera-Abeleda等人(2006)J Med.Genet43:582-589;Poznansky等人(1989)J Immunol.143:1254-1258;Jansen等人(1998)Kidney Int.53:331-349;和Hegasy等人(2002)Am J Pathol161:2027-2034。因而,处于发生DDD危险中的人可以是,例如,在编码CFH的基因中具有一个或多个DDD-相关突变的人,或具有发生该疾病的家族史的人。
TTP的危险因素是医学领域众所周知的,且包括,例如,发生所述病症的倾向(即所述病症的家族史),或发生所述病症的遗传倾向,例如,ADAMTS13基因中的一个或多个突变。与TTP有关的ADAMTS13突变详细地综述在,例如,Levy等人(2001)Nature413:488-494;Kokame等人(2004)Semin.Hematol.41:34-40;Licht等人(2004)KidneyInt.66:955-958;和Noris等人(2005)J.Am.Soc.Nephrol.16:1177-1183。TTP的危险因素也包括已知促成TTP或TTP反复的那些病症或试剂,例如,但不限于,癌症、细菌感染(例如,巴尔通体属感染)、病毒感染(例如,HIV和卡波西肉瘤病毒)、妊娠或外科手术。参见,例如,Avery等人(1998)American Journal of Hematology58:148-149和Tsai,同上)。TTP或TTP反复还已经与某些治疗剂(药物)的使用相关联,包括,例如,噻氯匹定、FK506、皮质类甾醇类、他莫昔芬或环孢素A(参见,例如,Gordon等人(1997)Seminars inHematology34(2):140-147)。在下文中,TTP的这些呈现在适当时称作例如“感染-相关的TTP”、“妊娠-相关的TTP”或“药物-相关的TTP”。因而,处于发生TTP危险中的人可以是,例如,在ADAMTS13基因中具有一个或多个TTP-相关突变的人。处于发生TTP复发形式危险中的人可以是,例如,已经具有TTP和具有感染、正在妊娠、或正在接受外科手术的人。
aHUS的危险因素是医学领域众所周知的,且包括,例如,发生所述病症的倾向(即所述病症的家族史),或发生所述病症的遗传倾向,例如,补体因子H(CFH)、膜辅因子蛋白(MCP;CD46)、C4b-结合蛋白、补体因子B(CFB)或补体因子I(CFI)中的一个或多个突变(参见,例如,Warwicker等人(1998)Kidney Int.53:836-844;Richards等人(2001)Am J HumGenet68:485-490;Caprioli等人(2001)Am Soc Nephrol12:297-307;Neuman等人(2003)J MedGenet40:676-681;Richards等人(2006)Proc Natl Acad Sci USA100:12966-12971;Fremeaux-Bacchi等人(2005)J Am Soc Nephrol17:2017-2025;Esparza-Gordillo等人(2005)Hum MolGenet14:703-712;Goicoechea de Jorge等人(2007)Proc Natl Acad Sci USA104(1):240-245;Blom等人(2008)J Immunol.180(9):6385-91;和Fremeaux-Bacchi等人(2004)J MedicalGenet41:e84)(也参见Kavanagh等人(2006)同上)。危险因素也包括,例如,肺炎链球菌感染、妊娠、癌症、暴露于抗癌试剂(例如,奎宁、丝裂霉素C、顺铂或博来霉素)、暴露于免疫治疗剂(例如,环孢菌素、OKT3或干扰素)、暴露于抗血小板剂(例如,噻氯匹定或氯吡格雷)、HIV感染、移植、自身免疫病和合并的甲基丙二酸尿症和同型胱氨酸尿症(cblC)。参见,例如,Constantinescu等人(2004)Am J Kidney Dis43:976-982;George(2003)Curr Opin Hematol10:339-344;Gottschall等人(1994)Am J Hematol47:283-289;Valavaara等人(1985)Cancer55:47-50;Miralbell等人(1996)J Clin Oncol14:579-585;Dragon-Durey等人(2005)J Am Soc Nephrol16:555-63;和Becker等人(2004)Clin Infect Dis39:S267-S275。
HELLP的危险因素是医学领域众所周知的,且包括,例如,多胎产妊娠、超过25岁的母亲年龄、高加索人种、在先前妊娠中发生先兆子痫或HELLP和差妊娠结局史(参见,例如,Sahin等人(2001)Nagoya Med J44(3):145-152;Sullivan等人(1994)Am J ObstetGynecol171:940-943;和Padden等人(1999)Am Fam Physician60(3):829-836.)。例如,在第一次妊娠期间发生先兆子痫的妊娠的高加索妇女可能是在第二次妊娠期间或之后处于发生HELLP综合征的危险中的人。
CAD的危险因素是医学领域众所周知的,且包括,例如,已知促成CAD或CAD反复的病症或试剂,例如,但不限于,肿瘤或感染(例如,细菌和病毒感染)。已知与CAD的发生有关的病症包括,例如,HIV感染(和AIDS)、丙型肝炎感染、支原体肺炎感染、EB病毒(EBV)感染、巨细胞病毒(CMV)感染、风疹或传染性单核细胞增多症。与CAD有关的肿瘤包括但不限于:非霍奇金淋巴瘤。在下文中,CAD的这些呈现在适当时可以称作例如“感染-相关的CAD”或“肿瘤-相关的CAD”。因而,处于发生CAD危险中的人可以是,例如,具有HIV感染、风疹或淋巴瘤的人。也参见,例如,Gertz(2006)Hematology1:19-23;Horwitz等人(1977)Blood50:195-202;Finland和Barnes(1958)AMA Arch Intern Med191:462-466;Wang等人(2004)Acta Paediatr Taiwan45:293-295;Michaux等人(1998)AnnHematol76:201-204;和Chang等人(2004)Cancer Genet Cytogenet152:66-69。
血栓性微血管病(TMA)的危险因素是医学领域众所周知的,且包括,例如,aHUS、TTP的医疗史或与TMA有关的其它病症,诸如狼疮、癌症、弥散性血管内凝血和其它凝血病和先兆子痫。参见,例如,Copelovitch和Kaplan(2008)Pediatr Nephrol23(10):1761-7。
PCH的危险因素是医学领域众所周知的,且包括,例如,已知促成PCH或PCH反复的病症或试剂,例如,但不限于,肿瘤、感染(例如,细菌和病毒感染)或某些免疫(例如,麻疹免疫)。已知与PCH的发生有关的病症包括,例如,梅毒(Treponema palladium感染)、麻疹、腮腺炎、流感病毒感染、带状疱疹病毒感染、巨细胞病毒(CMV)感染、EB病毒(EBV)感染、腺病毒感染、细小病毒B19感染、柯萨奇病毒A9感染、流感嗜血菌感染、肺炎支原体感染和肺炎克雷伯菌感染。参见,例如,Bunch等人(1972)Arch DisChild47(252):299-300;Ziman等人(2004)Transfusion44(8):1127-1128;Sokol等人(1984)ActaHaematol72(4):245-257;Papalia等人(2000)Br J Haematol109(2):328-9;Sokol等人(1982)Acta Haematol68(4):268-277;和Bell等人(1973)Transfusion13(3):138-141。与PCH有关的肿瘤包括但不限于:实体瘤和造血系肿瘤诸如骨髓纤维化、慢性淋巴细胞白血病(CLL)和非霍奇金淋巴瘤。参见,例如,Sharara等人(1994)South Med J.87(3):397-9;Sivakumaran等人(1999)Br J Haematol105(1):278-9;Breccia等人(2004)Eur J Haematol73(4):304-6;和Wynn等人(1998)Clin Lab Haematol20(6):373-5。在下文中,PCH的这些呈现在适当时可以称作例如,“感染-相关的PCH”或“肿瘤-相关的PCH”。因而,处于发生PCH危险中的人可以是,例如,具有EBV感染或淋巴瘤的人。
MG的危险因素是医学领域众所周知的,且包括,例如,发生所述病症的倾向(即所述病症的家族史),或发生诸如家族性MG等病症的遗传倾向。例如,一些HLA类型与增加的发生MG的危险有关。MG的危险因素包括摄入或暴露于某些诱发MG的药物,例如,但不限于,D-青霉胺。参见,例如,Drosos等人(1993)Clin Exp Rheumatol.11(4):387-91和Kaeser等人(1984)Acta Neurol Scand Suppl.100:39-47。由于MG可以是阵发性的,以前已经经历一种或多种具有MG的症状的受试者可能处于复发危险中。因而,处于发生MG危险中的人可以是,例如,具有MG家族史的人,和/或已经摄入或被施用诱发MG的药物(诸如D-青霉胺)的人。
本文使用的“处于发生CAPS危险中”的受试者是具有一个或多个(例如,2、3、4、5、6、7、或8或更多个)发生所述障碍的危险因素的受试者。大约60%的CAPS发生之前存在诸如感染等促成事件。因而,CAPS的危险因素包括已知促成CAPS的那些病症,例如,但不限于,某些癌症(例如,胃癌、卵巢癌、淋巴瘤、白血病、子宫内膜癌、腺癌和肺癌)、妊娠、产褥期、移植、原发性APS、类风湿性关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)、外科手术(例如,眼外科手术)和某些感染。感染包括,例如,细小病毒B19感染和丙型肝炎感染。在下文中,CAPS的这些呈现可以称作例如,“癌症-相关的CAPS”、“移植-相关的CAPS”、“RA-相关的CAPS”、“感染-相关的CAPS”或“SLE-相关的CAPS”。参见,例如,Soltész等人(2000)Haematologia(Budep)30(4):303-311;Ideguchi等人(2007)Lupus16(1):59-64;Manner等人(2008)Am J Med.Sci.335(5):394-7;Miesbach等人(2006)Autoimmune Rev.6(2):94-7;Gómez-Puerta等人(2006)Autoimmune Rev.6(2):85-8;Gómez-Puerta等人(2006)Semin.Arthritis Rheum.35(5):322-32;Kasamon等人(2005)Haematologia90(3):50-53;Atherson等人(1998)Medicine77(3):195-207;and Canpolat等人(2008)Clin Pediatr47(6):593-7。因而,处于发生CAPS危险中的人可以是,例如,具有原发性CAPS和/或已知与CAPS有关的癌症的人。
从上面内容可以看出,“处于发生补体相关障碍危险中”(例如,AP-相关的障碍或CP-相关的障碍)的受试者不是在目标物种中的所有受试者。
“疑似具有补体相关障碍”(例如,旁路补体途径-相关的障碍)的受试者是具有所述疾病的一种或多种(例如,2、3、4、5、6、7、8、9或10或更多种)症状的受试者。这些障碍的症状随具体障碍而变化,但是是医学领域技术人员已知的。例如,DDD的症状包括,例如:血尿和蛋白尿中的一种或两种;急性肾炎综合征;玻璃疣发生和/或视力受损;获得性部分脂质营养不良和其并发症;和血清C3肾炎因子(C3NeF)(即一种针对C3bBb的自身抗体,所述C3bBb是旁路补体途径的C3转化酶)的存在(参见,例如,Appel等人(2005),同上)。aHUS的症状包括,例如,严重高血压、蛋白尿、尿毒症、嗜睡/疲劳、应激性、血小板减少症、微血管病性溶血性贫血和肾功能损害(例如,急性肾衰竭)。TTP的症状包括,例如,微血栓、血小板减少症、发热、低ADAMTS13金属蛋白酶表达或活性、波动性中枢神经系统异常、肾衰竭、微血管病性溶血性贫血、擦伤、紫癜、恶心和呕吐(例如,由胃肠道缺血或中枢神经系统累及产生)、由心肌缺血导致的胸痛、癫痫发作和肌肉和关节痛。RA的症状可以包括,例如、僵硬、肿胀、疲劳、贫血、体重减轻、发热和常见的残毁痛。类风湿性关节炎的一些常见的症状包括:在觉醒后持续一个小时或更长时间的关节僵硬;在一个特定手指或腕关节处的肿胀;在关节周围的软组织的肿胀;以及在关节双侧的肿胀。可能伴有或没有疼痛地发生膨胀,并可以逐渐恶化,或在恶化之前保持数年不变。HELLP的症状是医学领域已知的,包括,例如,全身乏力、心口痛、恶心、呕吐、头痛、右上腹疼痛、高血压、蛋白尿、视力模糊、胃肠道出血、低血糖、感觉异常、肝酶升高/肝损伤、贫血(溶血性贫血)、和血小板计数低,与妊娠或近期妊娠相组合的它们中的任一种(参见,例如,Tomsen(1995)Am J Obstet Gynecol172:1876-1890;Sibai(1986)Am J ObstetGynecol 162:311-316;和Padden(1999),同上)。
CAPS的症状是医学领域众所周知的,且包括,例如,多个小血管闭塞的组织病理学证据;抗磷脂抗体的存在(通常是在高滴度)、血管栓塞、严重的多器官功能障碍、恶性高血压、急性呼吸窘迫综合症、弥漫性血管内凝血、微血管病性溶血性贫血、裂红细胞和血小板减少症。CAPS与APS的差别在于,具有CAPS的患者通常呈现严重的多器官功能障碍或衰竭,其特征在于快速的弥漫性小血管缺血和主要影响实质器官的血栓形成。相反,APS与单一静脉或动脉的中到大血管闭塞有关。MG的症状包括,例如,易疲劳性和和一定范围的肌无力相关的病症,包括:上睑下垂(一个或两个眼)、复视、步态不稳、抑郁或扭曲的面部表情、和咀嚼、说话或吞咽困难。在某些情况下,受试者可以呈现部分或完全的呼吸肌麻痹。CAD的症状包括,例如,疼痛、发热、脸色苍白、贫血、向四肢的血流量减少(例如,伴有坏疽)和肾脏疾病或急性肾衰竭。在一些实施方案中,在暴露于寒冷气温后可能出现所述症状。
从上述内容可以看出,“疑似具有补体相关障碍”的受试者不是在目标物种内的所有受试者。
在一些实施方案中,所述方法可以包括鉴别受试者为具有、疑似具有补体相关障碍或处于发生危险中的受试者。适用于鉴别受试者的方法是本领域已知的。例如,适用于测定人受试者是否在CFH、CFHR5或C3基因中具有DDD-相关突变的方法(例如,测序技术或使用微阵列)描述在,例如,Licht等人(2006)Kidney Int.70:42-50;Zipfel等人(2006),同上;Ault等人(1997)J Biol.Chem.272:25168-75;Abrera-Abeleda等人(2006)J MedGenet43:582-589;Poznansky等人(1989)J Immunol.143:1254-1258;Jansen等人(1998)Kidney Int.53:331-349;和Hegasy等人(2002)Am J Pathol161:2027-2034。用于检测特征性DDD-相关的电子致密沉积物的存在的方法也是本领域众所周知的。例如,医学从业人员可以从患者的肾获得组织活组织检查,并对该组织进行电子显微镜检查。医学从业人员也可以使用抗-C3抗体通过免疫荧光检查组织,以检测C3的存在,和/或进行光学显微镜检查,以确定是否存在膜性增生性肾小球肾炎。参见,例如,Walker等人(2007)Mod.Pathol.20:605-616和Habib等人(1975)Kidney Int.7:204-215。在一些实施方案中,将受试者鉴别为具有DDD的受试者可以包括,测定血液样品中C3NeF的存在。用于检测血液中C3NeF的存在的方法描述在,例如,Schwertz等人(2001)Pediatr Allergy Immunol.12:166-172。
在一些实施方案中,医学从业人员可以测定受试者的血清中是否存在增加的补体活化。增加的补体活化的指标包括,例如,CH50减少、C3减少、和C3dg/C3d增加。参见,例如,Appel等人(2005),同上。在一些实施方案中,医学从业人员可以针对玻璃疣和/或诸如AMD等其它视力病的发生的证据,检查受试者的眼。例如,医学从业人员可以使用视黄醛功能实验,例如,但不限于,暗适应、视网膜电描记术和眼电描记术(参见,例如,Colville等人(2003)Am J Kidney Dis.42:E2-5)。
将受试者鉴别为具有、疑似具有TTP或处于发生危险中的方法也是本领域已知的。例如,Miyata等人描述了多个用于测量从受试者得到的生物样品中的ADAMTS13活性的试验(Curr Opin Hematol(2007)14(3):277-283)。合适的ADAMTS13活性试验以及人受试者中的ADAMTS13活性的表型正常范围描述在,例如,Tsai(2003)J.Am.Soc.Nephrol14:1072-1081;Furlan等人(1998)New Engl J Med.339:1578-1584;Matsumoto等人(2004)Blood103:1305-1310;和Mori等人(2002)Transfusion42:572-580。用于检测ADAMTS13的抑制剂(例如,结合ADAMTS13的自身抗体)在从受试者得到的生物样品中的存在的方法是本领域已知的。例如,可以使来自患者的血清样品与来自没有TTP的受试者的血清样品相混合,以检测抗-ADAMTS13抗体的存在。在另一个实例中,可以从患者血清分离免疫球蛋白蛋白,并用于体外ADAMTS13活性试验中,以测定是否存在抗-ADAMTS13抗体。参见,例如,Dong等人(2008)Am J Hematol.83(10):815-817。在一些实施方案中,通过评估患者是否携带在ADAMTS13基因中的一个或多个突变,可以测定发生TTP的风险。适用于检测ADAMTS13基因中的突变的方法(例如,核酸阵列或DNA测序)是本领域已知的,且描述在例如Levy等人,同上;Kokame等人,同上;Licht等人,同上;和Noris等人,同上。
另外,将受试者鉴别为具有、疑似具有aHUS或处于发生危险中的方法是本领域已知的。例如,可以进行实验室试验,以测定人受试者是否具有血小板减少症、微血管病性溶血性贫血或急性肾功能不全。通过下述一种或多种,医学专业人员可以诊断出血小板减少症:(i)血小板计数小于150,000/mm3(例如,小于60,000/mm3);(ii)血小板存活时间减少,这反映了循环中增加的血小板破坏;和(iii)在外周涂片中观察到巨血小板,这与血小板生成的继发活化相一致。通过下述一种或多种,医学专业人员可以诊断出微血管病性溶血性贫血:(i)血红蛋白浓度小于10mg/dL(例如,小于6.5mg/dL);(ii)增加的血清乳酸脱氢酶(LDH)浓度(>460U/L);(iii)高胆红素血症、网状细胞增多、循环游离血红蛋白和低或不可检出的触珠蛋白浓度;和(iv)在外周涂片以及阴性库姆斯试验中检测到具有钝锯齿状红细胞或盔状红细胞的典型方面破碎的红细胞(裂红细胞)(参见,例如,Kaplan等人(1992)“HemolyticUremic Syndrome and Thrombotic Thrombocytopenic Purpura,”Informa Health Care(ISBN0824786637)和Zipfel(2005)“Complement and Kidney Disease,”Springer(ISBN3764371668))。
通过评价C3和C4的血药浓度,作为补体活化或失调的度量,也可以将受试者鉴别为具有aHUS。另外,从前面的公开内容可以看出,通过将受试者鉴别为携带在与aHUS(诸如CFI、CFB、CFH或MCP)有关的基因中的一个或多个突变,可以将受试者鉴别为具有遗传性aHUS(同上)。适用于检测基因中的突变的方法包括,例如,DNA测序和核酸阵列技术(参见,例如,Breslin等人(2006)Clin Am Soc Nephrol1:88-99和Goicoechea de Jorge等人(2007)Proc Natl Acad Sci USA104:240-245)。
TMA的特征症状包括,例如,发热、微血管病性溶血性贫血(在血涂片中的裂红细胞)、肾衰竭、血小板减少症和神经学表现。
用于将受试者诊断为具有、疑似具有RA或处于发生危险中的方法也是医学领域已知的。例如,医学从业人员可以检查手的小关节、腕、脚和膝,以鉴别对称分布的炎症。从业人员也可以进行许多实验,以排除其它类型的关节炎症,包括由感染或痛风造成的关节炎。另外,类风湿性关节炎与累及的患者的血循环中的异常抗体有关。例如,称作“类风湿因子”的抗体存在于大约80%的患者中。在另一个实例中,抗-瓜氨酸抗体存在于许多具有类风湿性关节炎的患者中,因而当评价具有不可解释的关节炎症的患者时,它可用于诊断类风湿性关节炎。参见,例如,van Venrooij等人(2008)Ann NY Acad Sci1143:268-285和Habib等人(2007)Immunol Invest37(8):849-857。另一种称作“抗核抗体”(ANA)的抗体也常见于具有类风湿性关节炎的患者中。参见,例如,Benucci等人(2008)Clin Rheumatol27(1):91-95;Julkunen等人(2005)Scan J Rheumatol34(2):122-124;和Miyawaki等人(2005)JRheumatol32(8):1488-1494。
医学从业人员也可以检查红细胞沉积率,以辅助诊断受试者的RA。沉积率可以用作关节炎症的粗度量,且通常在疾病发作(flare)期间更快,且在缓解过程中更慢。可以用于测量在身体中存在的炎症的程度的另一种血液检验是C-反应蛋白。
此外,关节x-射线也可以用于诊断受试者为具有类风湿性关节炎。随着RA进展,x-射线可以显示出关节中的类风湿性关节炎的典型骨侵蚀。关节x-射线也可以辅助监测随时间的疾病进展和关节损害。骨扫描(一种放射性检验方法)可以证实炎症关节。
将受试者鉴别为具有、疑似具有HELLP或处于发生危险中的方法是医学领域已知的。HELLP综合征的标志症状包括溶血,肝酶升高,和低血小板计数。因而,可以对来自受试者的血液进行多种试验,以测定溶血水平、多种肝酶中的任一种的浓度、和血液中的血小板水平。例如,裂红细胞的存在和/或升高的游离血红蛋白、胆红素或血清LDH水平是血管内溶血的指标。常规实验室试验可以用于测定血小板计数以及血液的肝酶水平,所述肝酶例如,但不限于,天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)。适用于将受试者鉴别为具有HELLP综合征的方法也描述在,例如,Sibai等人(1993),同上;Martin等人(1990),同上;Padden(1999),同上;和Gleicher和Buttino(1998)“Principles&Practice of MedicalTherapy in Pregnancy,”第3版,Appleton&Lange(ISBN 083857677X)。
适用于鉴别受试者为具有MG的方法可以是定性的或定量的。例如,医学从业人员可以使用体检来检查受试者的运动功能的状态。其它定性试验包括,例如,冰袋试验,其中将冰袋施用于受试者的眼(在眼睛MG的情况下),以确定冷是否会改善一种或多种症状(例如,上睑下垂)(参见,例如,Sethi等人(1987)Neurology37(8):1383-1385)。其它试验包括,例如,“睡眠试验”,它是基于在休息后MG症状有改善的倾向。在一些实施方案中,医学从业人员可以采用定量或半定量试验,以确定受试者是否具有、疑似具有MG或处于发生危险中。例如,医学从业人员可以进行试验,以检测在从受试者得到的血清样品中的MG-相关的自身抗体的存在或量。MG-相关的自身抗体包括,例如,结合和调节乙酰胆碱受体(AChR)、肌肉-特异性的受体酪氨酸激酶(MuSK)和/或纹理蛋白的活性的抗体(参见,例如,Conti-Fine等人(2006),同上)。适用于检测生物样品中MG-相关的抗体的存在或量的试验是本领域已知的,且描述在例如Hoch等人(2001)Nat Med7:365-368;Vincent等人(2004)Semin Neurol.24:125-133;McConville等人(2004)Ann.Neurol.55:580-584;Boneva等人(2006)J Neuroimmunol.177:119-131;和Romi等人(2005)Arch Neurol.62:442-446。
用于诊断MG的其它方法包括,例如,电诊断试验(例如,单纤维肌电描记术)和Tensilon(或依酚氯铵)试验,其包括给受试者注射乙酰胆碱酯酶抑制剂依酚氯铵,并监测受试者的一种或多种症状的改善。参见,例如,Pascuzzi(2003)Semin Neurol23(1):83-88;Katirji等人(2002)Neurol Clin20:557-586;和“Guidelines in Electrodiagnostic Medicine.AmericanAssociation of Electrodiagnostic Medicine,”Muscle Nerve15:229-253。
使用试验检测结合红细胞上的I抗原的凝聚自身抗体的存在或量(效价),可以将受试者鉴别为具有CAD。抗体可以是单克隆的(例如,单克隆IgM或IgA)或多克隆的。适用于检测这些抗体的方法描述在,例如,Christenson和Dacie(1957)Br J Haematol3:153-164和Christenson等人(1957)Br J Haematol3:262-275。使用全部血细胞计数(CBC)、尿分析、生化研究和库姆斯试验中的一种或多种来检验血液的溶血,也可以将受试者诊断为具有CAD。例如,生化研究可以用于检测升高给定乳糖酶脱氢酶水平、升高的未缀合的胆红素水平、低触珠蛋白水平和/或游离血浆血红蛋白的存在,它们都可以指示急性溶血。可以用于检测CAD的其它试验包括,检测血清中的补体水平。例如,由于溶血的急性期中的消耗,测得的CAD中的血浆补体水平(例如,C2、C3和C4)降低。
不同于aHUS,经常通过腹泻(经常在性质上是带血的,源自产生志贺毒素的微生物的感染)的前驱症状,可以鉴别出典型的(或传染性的)HUS。当在个体的粪便中检测到志贺毒素和/或针对志贺毒素的血清抗体或LPS时,可以将受试者鉴别为具有典型HUS。适用于检验抗-志贺毒素抗体或LPS的方法是本领域已知的。例如,用于检测人类中的结合志贺毒素Stx1和Stx2或LPS的抗体的方法描述在,例如,Ludwig等人(2001)J Clin Microbiol39(6):2272-2279。
该病症的症状是医学领域技术人员已知的,且包括,例如、疼痛、发热、脸色苍白、黄疸、荨麻疹皮肤出疹、血红蛋白尿、血红蛋白血症、贫血、和肾疾病或急性肾衰竭。在一些实施方案中,所述症状可以发生在暴露于低温以后。
在一些实施方案中,所述方法可以包括鉴别受试者为具有、疑似具有PCH或处于发生危险中。适用于鉴别受试者的方法是本领域已知的。例如,使用Donath-Landsteiner试验(它是检测受试者血清中Donath-Landsteiner抗体的存在的试验),可以将受试者诊断为具有PCH。该方法包括,在0-4℃,与表达P-抗原的红细胞一起温育3个样品:(1)受试者的血清;(2)正常血清;和(3)受试者的血清和正常血清的混合物。接着,将样品温热至37℃,并目检溶血。如果存在Donath-Landsteiner抗体,应当在样品(1)和(3)中发生溶血,但不在(2)中发生。参见,例如,Funato等人(2007)Eur J Haematol79(5):462;Win等人(2005)Transfus Med.15(3):254;Sokol等人(1998)Immunohematology14(3):109-12;Eder(2005)Immunohematology21(2):56-62;和Dacie等人(1957)Br J Haematol3:77-87。使用全部血细胞计数(CBC)、尿分析、生化研究和库姆斯试验中的一种或多种,也可以将受试者诊断为具有PCH。例如,生化研究可以用于检测升高的乳糖酶脱氢酶水平,升高的未缀合的胆红素水平、低触珠蛋白水平和/或游离血浆血红蛋白的存在,它们都可以指示急性溶血。可以用于检测PCH的其它试验包括,检测血清中的补体水平。例如,由于溶血的急性期中的消耗,测得的PCH中的血浆补体水平(例如,C2、C3和C4)降低。也参见,例如,Nordhagen等人(1984)Acta Paediatr Scand73(2):258-262;Lindgren等人(1985)Transfusion25(2):142-4;Nordhagen等人(1991)Transfusion31(2):190-1;和Garratty(2001)Transfusion41(8):1073-4。
在一些实施方案中,可以将所述组合物预防性地施用给受试者,以预防PCH、或预防PCH的复发或反复。例如,可以将本文所述的组合物施用给以前具有晚期支原体属感染或新近诊断出PCH-相关肿瘤的受试者,以预防PCH、减轻PCH的严重性、或预防PCH的反复。
在一些实施方案中,可以将本文所述的C5抑制剂(例如,抗-C5抗体)施用给受试者,作为单一疗法。或者,如上所述,可以将所述抗体施用给受试者,作为与另一种治疗(例如,DDD、TTP、aHUS、RA、HELLP、MG、CAD、CAPS、tHUS、德戈斯病或本文所述的任意其它补体相关障碍的另一种治疗)的联合治疗。例如,联合治疗可以包括给受试者(例如,人患者)施用一种或多种其它药剂(例如,抗凝血药、抗高血压药或皮质类甾醇类),其为具有DDD或处于发生危险中的受试者提供治疗益处。在一些实施方案中,所述联合治疗可以包括给受试者(例如,人患者)施用C5抑制剂(例如,抗-C5抗体或抗-C5a抗体)和免疫抑制剂诸如用于治疗RA。在一些实施方案中,C5抑制剂和一种或多种另外的活性剂同时施用。在其它实施方案中,C5抑制剂在时间上首先施用,且一种或多种另外的活性剂在时间上其次施用。在一些实施方案中,一种或多种另外的活性剂时间上首先施用,且C5抑制剂在时间上其次施用。
本文所述的C5抑制剂(例如,抗-C5抗体)可以替代或增进以前或当前施用的疗法。例如,在用抗-C5抗体治疗后,一种或多种另外的活性剂的施用可以停止或减少,例如,在更低的水平施用。在一些实施方案中,可以维持先前治疗的施用。在一些实施方案中,先前治疗维持至C5抑制剂(例如,抗-C5抗体或抗-C5a抗体)的水平达到足以提供治疗效果的水平。2种治疗可以联合施用。
在一些实施方案中,可以将C5抑制剂长期地施用给患者。例如,用补体抑制剂(例如,C5抑制剂或C5a抑制剂)长期治疗的患者可以被治疗大于或等于2周(例如,3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51或52周;1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月;或1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5或12年或患者余生)的时间段,所述试剂的量和给药频率足以使患者血液中的试剂维持在抑制或基本上抑制患者中的全身性补体活性的浓度。为了维持患者中的全身性补体抑制,可以将C5抑制剂长期施用给患者,例如,每周1次、每2周1次、每周2次、每天1次、每月1次或每3周1次。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,可以以有效地维持至少下述浓度的量和施用频率,将C5抑制剂施用给患者:患者血液中0.7(例如,至少0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10或更多)二价C5抑制剂(例如,完整抗体)分子/C5分子;或患者血液中1.5(例如,至少1.6、1.7、1.8、1.9、2、3、4、5、6、7、8、9或10或更多)单价C5抑制剂(例如,单链抗-C5抗体或抗体的Fab片段)分子/C5分子。例如,在一些实施方案中,可以以有效地维持至少下述浓度的量和频率,将单价抗-C5抗体(例如,单链抗体或Fab抗体片段)施用给患者:至少1.5(例如,至少1.6、1.7、1.8、1.9、2、3、4、5、6或7或更多)单价抗-C5抗体/血液中的C5分子。在任一种本文所述的方法的某些实施方案中,抗-C5抗体以有效地维持下述浓度的的量和频率施用给患者:至少40(例如,41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、75、80、85、90、95、100、110或120或更多)μg抗体/毫升患者血液。本文描述了示例性的长期给药策略(参见,例如,表1和2)。
在一些实施方案中,甚至可以在一种或多种症状已经改善以后,将C5抑制剂(或C5a抑制剂)施用给受试者。监测受试者(例如,人患者)中本文定义的补体相关障碍的改善,是指评价受试者的疾病参数的变化,例如,疾病的一种或多种症状的改善。这样的症状包括本文所述的补体相关障碍的任一种症状。在一些实施方案中,在施用后进行评价至少1小时,例如,至少2、4、6、8、12、24或48小时或至少1天、2天、4天、10天、13天、20天或更久或至少1周、2周、4周、10周、13周、20周或更久。可以在下述时段中的一个或多个中,评价受试者:在开始治疗之前;在治疗过程中;或在已经施用一种或多种治疗组分之后。评价可以包括,评价对进一步治疗的需求,例如,评价剂量、施用频率、或治疗持续时间是否应当改变。还可以包括,评价增加或撤销选择的治疗模态的需求,例如,增加或撤销任一种本文所述的补体相关障碍的任意治疗。
在一些实施方案中,可以将补体抑制剂长期施用给有此需要的患者,其量和频率可以有效地减小或维持血清溶血活性在小于或等于20(例如,19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6或甚至低于5)%。参见,例如,Hill等人(2005)Blood106(7):2559。在一些实施方案中,可以将补体抑制剂施用给患者,其量和频率可以有效地维持血清乳酸脱氢酶(LDH)水平在LDH正常范围的至少20(例如,19,18,17,16,15,14,13,12,11,10,9,8,7,6,或甚至低于5)%以内。参见Hill等人(2005)同上。在一些实施方案中,可以将补体抑制剂施用给患者,其量和频率可以有效地维持血清LDH水平小于550(例如,小于540、530、520、510、500、490、480、470、450、440、430、420、410、400或小于300)IU/L。在一些实施方案中,C5抑制剂(例如,抗-C5抗体诸如依库珠单抗)或C5a抑制剂(例如,抗-C5a抗体)的施用(例如,长期施用)导致一种或多种患者症状改善至它的正常水平或值的40(例如,39、38、37、36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2或甚至1)%以内。例如,在一些实施方案中,用抗-C5抗体治疗(例如,长期治疗)的aHUS患者的高血压可以降低至这样的水平,其在具有患者的年龄、种族、身高、体重、性别和身体健康的人的正常水平的40%以内。
在一些实施方案中,甚至在患者已经进入临床缓解以后,将补体抑制剂(例如,C5抑制剂或C5a抑制剂)施用给受试者。确定补体相关障碍的临床缓解是在医学技术人员的技能范围内。例如,aHUS的临床缓解的指示指标描述在,例如,Nürnberger等人(2009)N EnglJ Med360(5):542-544。CAPS的临床缓解描述在,例如,Manner等人(2008)Am J MedSci335(5):394-397。
本公开内容也提供了同种异基因器官或组织移植的方法。所述方法包括将器官或组织移植进有此需要的患者,其中在移植之前和之后,以有效地基本上抑制患者中的全身性补体活性的量和频率,将C5抑制剂施用给患者。如本文所述,可以以维持患者血液中至少1个C5抑制剂分子(例如,至少1个抗-C5抗体)/C5分子的浓度的量和频率,施用C5抑制剂(例如,抗-C5抗体)。在一些实施方案中,可以以有效地维持血液中至少1.5(例如,至少1.6、1.7、1.8、1.9、2、3、4、5、6或7或更多)单价抗-C5抗体/C5分子的浓度的量和频率,将单价抗-C5抗体(例如,单链抗体或Fab抗体片段)施用给患者。在一些实施方案中,可以以维持患者血液中至少40(例如,41、42、43、44、45、46、47、48、48、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、75、80、85、90、95、100、110或120或更多)μg抑制剂(例如,抗-C5抗体)的浓度的量和频率,将C5抑制剂(例如,抗-C5抗体)施用给患者。在一些实施方案中,在将器官或组织移植给患者之前小于24(例如,小于23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3或小于2)小时,将至少800(例如,至少810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体(例如,依库珠单抗)施用给患者。在一些实施方案中,所述方法还可以包括,在移植之前,在移植后抑制器官或组织中的补体活化的条件下,使供体器官或组织接触(例如,浸泡)C5抑制剂(例如,抗-C5抗体诸如依库珠单抗)一定的时间量。所述器官可以是,例如,皮肤、肾脏、心脏、肺、四肢(例如,指或趾)或肝脏。在一些实施方案中,所述方法可以包括,在取出用于移植的器官或组织之前,将C5抑制剂(例如,抗-C5抗体)施用给供体患者。患者可以具有、疑似具有aHUS或处于发生危险中。在一些实施方案中,在移植后小于24(例如,小于23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3或小于2)小时以内,将至少700(例如,至少710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体施用给患者。在一些实施方案中,在移植后,将抗-C5抗体长期施用给患者。例如,可以在下述给药方案下,将抗-C5抗体长期施用给患者至少9周(例如,9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51或52周;1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月;或1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5或12年或患者余生):在移植器官或组织后小于24小时内,至少700(例如,至少710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体;在初次移植后给药以后,至少700(例如,至少710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体,每周1次,持续4周;在第5周期间,至少700(例如,至少710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体,给药1次;和此后每2周,至少700(例如,至少710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、1000、1100或1200或更多)mg抗-C5抗体,至给药方案结束。在一个优选的实施方案中,施用抗-C5抗体,使得前四次剂量是至少900mg抗体;在第5周施用1200mg;并此后每2周给患者施用1200mg,至长期治疗方案结束。在表1和2中提供了其它示例性的给药方案。
在一些实施方案中,所述方法包括将免疫抑制剂施用给患者。适用于所述方法中的免疫抑制剂包括、但不限于:ATG或ALG、OKT3、达珠单抗、巴利昔单抗、皮质类甾醇类、15-脱氧精胍菌素、环孢素、他克莫司、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、吗替麦考酚酯、6-巯嘌呤、布累迪宁、布喹那、来氟米特、环磷酰胺、西罗莫司、抗-CD4单克隆抗体、CTLA4-Ig、抗-CD154单克隆抗体、抗-LFAl单克隆抗体、抗-LFA-3单克隆抗体、抗-CD2单克隆抗体和抗-CD45抗体。
使用本文所述的方法可以移植的器官或组织的类型包括,例如,心、肾、肺、胰腺、肝脏、血管组织、眼、角膜、晶状体、皮肤、骨髓、肌肉、结缔组织、胃肠组织、神经组织、骨、干细胞、胰岛、软骨、肝细胞和造血细胞。
在一些实施方案中,所述移植方法会导致移植物在受体患者中延长至少1个月(例如,3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月或1、2、3、4、5、6、7、8、9或甚至10年或更久)。
先体外后体内(ex vivo)方案。用于治疗或预防补体相关障碍(例如,AP-相关的障碍或CP-相关的障碍)的先体外后体内策略可以包括,用编码补体抑制剂(例如,抗-C5抗体、抗-C5a抗体)的多核苷酸、或结合和促进本文所述的哺乳动物细胞中的C5 mRNA的灭活的核酸(例如,siRNA),转染或转导从受试者得到的一个或多个细胞。例如,可以用编码结合C5蛋白的抗体的重链和轻链的单个载体转染细胞,或可以用编码重链的第一种载体和编码抗体的轻链的第二种载体转染细胞。
然后使转染的或转导的细胞返回受试者。所述细胞可以是多种类型中的任一种,包括,但不限于,造血细胞(例如,骨髓细胞、巨噬细胞、单核细胞、树突细胞、T细胞或B细胞)、成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞、角质化细胞或肌肉细胞。这样的细胞可以作为C5抑制剂(例如,抗-C5抗体、抗-C5a抗体或核酸(上面))的来源(例如,持久的或定期的来源),只要它们在受试者中存活。在一些实施方案中,所述载体和/或细胞可以构造成用于C5抑制剂的可诱导的或可抑制的表达(参见,例如,Schockett等人(1996)Proc Natl AcadSciUSA93:5173-5176和美国专利号7,056,897)。
优选地,从受试者得到细胞(自体的),但是可能从受试者以外的相同物种的受试者得到(同种异基因的)。
适用于从受试者得到细胞、并转导或转染细胞的方法是分子生物学领域已知的。例如,通过用于先体外后体内基因疗法的任意标准方法,包括磷酸钙、脂转染、电穿孔、病毒感染(参见上面)和基因枪法基因转移,可以完成转导步骤(参见,例如,Sambrook等人(同上)和Ausubel等人(1992)“Current Protocols in Molecular Biology,”Greene PublishingAssociates.)。或者,可以使用脂质体或聚合的微粒。可以选择已经成功地转导的细胞,例如,用于表达编码序列或药物抗性基因。
试剂盒
本公开内容也表征了制品或试剂盒,其包括:具有标签的容器;和含有一种或多种本文所述的补体抑制剂的组合物。例如,所述试剂盒可以含有一种或多种抗-C5a抗体、抗-C5抗体和结合和促进哺乳动物细胞中的C5 mRNA的灭活的核酸(例如,siRNA或反义核酸)。所述标签指示,所述组合物要施用给具有、疑似具有补体相关障碍(例如,AP-或CP-相关的障碍)或处于发生危险中的受试者(例如,人),所述补体相关障碍例如DDD、aHUS、TTP、HELLP、RA、AMD、tHUS、MG、CAD、PCH、CAPS、德戈斯病或本文所述的任意其它补体途径-相关的障碍。所述试剂盒可以任选地包括用于将组合物施用给受试者的装置。例如,所述试剂盒可以包括一个或多个注射器。
在一些实施方案中,所述试剂盒可以另外包括一种或多种另外的活性剂,诸如本文所述那些中的任一种。例如,所述试剂盒可以包括一种或多种皮质类甾醇类、抗高血压药、免疫抑制剂和抗癫痫剂。
下述实施例意在例证而不是限制本发明。
实施例1
医学从业人员将成年人患者鉴别为具有遗传形式的aHUS。每周1次,持续4周,给患者施用含有依库珠单抗的组合物,剂量为900mg。患者然后接受在第5周期间的至少1200mg依库珠单抗1次,和此后每2周的至少1200mg依库珠单抗。在初治期间,患者和医学从业人员观察到aHUS的至少2种已知症状的实质性改善。甚至在医学从业人员确定aHUS处于缓解中以后,将依库珠单抗长期施用给患者。
实施例2
医学从业人员将体重约25kg的人患者鉴别为具有aHUS。每周1次,持续2周,给患者施用含有依库珠单抗的组合物,剂量为至少600mg。患者然后接受在第3周期间的至少600mg依库珠单抗1次,和此后每2周的至少600mg依库珠单抗。在初治期间,患者和医学从业人员观察到aHUS的至少2种已知症状的实质性改善。甚至在医学从业人员确定aHUS处于缓解中以后,将依库珠单抗长期施用给患者,以防止患者的aHUS的反复。
实施例3
医学从业人员将体重约35kg的人患者鉴别为具有CAPS。每周1次,持续2周,给患者施用含有依库珠单抗的组合物,剂量为至少600mg。患者然后接受在第3周期间的至少900mg依库珠单抗1次,和此后每2周的至少900mg依库珠单抗。在初治期间,患者和医学从业人员观察到CAPS的至少2种已知症状的实质性改善。甚至在医学从业人员确定CAPS处于缓解中以后,将依库珠单抗长期施用给患者,以防止患者的CAPS反复,或基本上减少其可能性。
实施例4
医学从业人员将体重约7kg的人患者鉴别为具有aHUS。作为aHUS的结果,该患者在她的肾中具有TMA。给患者施用含有依库珠单抗的组合物,剂量为至少300mg,持续1周。患者然后接受在第2周期间的至少300mg依库珠单抗1次,和此后每3周的至少300mg依库珠单抗。在初治期间,患者和医学从业人员观察到aHUS的至少2种已知症状的实质性改善。医学从业人员还观察到,在给患者长期施用依库珠单抗的同时,患者的肾中的TMA消退,且没有出现新的TMA。甚至在医学从业人员确定aHUS处于缓解中以后,将依库珠单抗长期施用给患者,以防止患者的aHUS反复和由反复可能产生的对她的肾的任何其它损害,或基本上减少其可能性。
实施例5
在移植手术之前小于24小时,给需要肾移植的人患者静脉内地施用依库珠单抗,剂量为1200mg。将同种异基因肾移植进患者。在肾移植后小于24小时,给患者施用另外1200mg依库珠单抗。在第一次手术后施用依库珠单抗以后,患者接受900mg依库珠单抗,每周1次,持续4周。在初次手术后施用依库珠单抗以后第5周,患者接受1200mg依库珠单抗,然后维持包括此后每2周施用1200mg依库珠单抗的给药方案。医学从业人员观察到移植的肾在患者中的存活的实质性改善。
尽管已经参照其具体实施方案描述了本公开内容,本领域技术人员应当理解,可以做出不同的变化,且可以替换等效方案,而不脱离本公开内容的真实精神和范围。另外,可以做出许多修饰,以使特定情形、材料、物质组成、方法、方法步骤适应本公开内容的主题、精神和范围。所有这样的修饰都意图被包括在本公开内容的范围内。
Claims (25)
1.抗-C5抗体或其抗原结合片段在用于移植同种异基因器官或组织的方法中的用途,所述方法包括将器官或组织移植进有此需要的患者中,其中在移植之前将至少1,200 mg的所述抗-C5抗体或其抗原结合片段施用给所述患者,以基本上抑制所述患者中的全身性补体活性。
2.如权利要求1所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中所述器官或组织选自肝、肾、心脏、肺、皮肤、眼、骨髓和血管组织。
3.如权利要求1-2中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中所述抗体结合人补体组分C5的α链,且其中所述抗体(i)抑制人体液中的补体活化,(ii)抑制纯化的人补体组分C5与人补体组分C3b或人补体组分C4b的结合,且(iii)不结合人补体活化产物游离的C5a。
4.如权利要求1-3中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中在移植之前小于24小时,将至少1,200 mg的所述抗-C5抗体或其抗原结合片段施用给所述患者。
5.如权利要求1-4中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中在移植之前,将至少1,200 mg的所述抗-C5抗体或其抗原结合片段以单剂量施用给所述患者。
6.如权利要求1-5中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中在移植之后,将额外800 mg的抗-C5抗体或其抗原结合片段施用给所述患者。
7.如权利要求1-5中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中在移植之后,将至少额外900 mg的抗-C5抗体或其抗原结合片段施用给所述患者。
8.如权利要求1-5中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中在移植之后,在下述方案下,将抗-C5抗体或其抗原结合片段施用给所述患者,持续至少7周:
在移植器官或组织后小于24小时,至少800 mg的所述抗-C5抗体或其抗原结合片段;
至少800 mg的所述抗-C5抗体或其抗原结合片段每周1次,持续4周;
在第5周期间,至少800 mg的所述抗-C5抗体或其抗原结合片段1次;和
此后每2周,至少800 mg的所述抗-C5抗体或其抗原结合片段。
9.如权利要求1-5中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中在移植之后,在下述方案下,将抗-C5抗体或其抗原结合片段施用给所述患者,持续至少7周:
在移植器官或组织后小于24小时,至少1200 mg的所述抗-C5抗体或其抗原结合片段;
至少900 mg的所述抗-C5抗体或其抗原结合片段每周1次,持续4周;
在第5周期间,至少1200 mg的所述抗-C5抗体或其抗原结合片段1次;和
此后每2周,至少1200 mg的所述抗-C5抗体或其抗原结合片段。
10.如权利要求6-9中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中在移植之后,将所述抗体或其抗原结合片段施用给所述患者,持续至少21周。
11.如权利要求6-9中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中在移植之后,将所述抗体或其抗原结合片段施用给所述患者,持续至少一年。
12.如权利要求6-9中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中在移植之后,将所述抗体或其抗原结合片段施用给所述患者,持续患者余生。
13.如权利要求6-9中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中在移植之后,将所述抗体或其抗原结合片段长期施用给所述患者,至少每周1次。
14.如权利要求6-9中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中在移植之后,将所述抗体或其抗原结合片段长期施用给所述患者,至少每2周1次。
15.如权利要求1-14中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中所述抗体或其抗原结合片段选自人源化的抗体、重组抗体、双抗体、嵌合的或嵌合抗体、单克隆抗体、去免疫化的人抗体、全人抗体、单链抗体、Fv片段、Fd片段、Fab片段、Fab’片段和F(ab’)2片段。
16.如权利要求1-15中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中所述抗体是依库珠单抗。
17.抗-C5抗体或其抗原结合片段在用于减轻具有血栓性微血管病、疑似具有血栓性微血管病或处于血栓性微血管病发生危险中的患者中血栓性微血管病的发生或严重性的方法中的用途,所述方法包括给有此需要的患者施用人补体的抑制剂,从而减轻所述患者中血栓性微血管病的发生或严重性。
18.如权利要求17所述的人补体的抑制剂的用途,其中所述患者患有补体相关障碍。
19.如权利要求17或18所述的人补体的抑制剂的用途,其中所述抑制剂的施用减轻所述患者脑中的血栓性微血管病的发生或严重性。
20.如权利要求17-19中任一项所述的人补体的抑制剂的用途,其中所述抑制剂的施用减轻肾中的血栓性微血管病的发生或严重性。
21.如权利要求17-19中任一项所述的人补体的抑制剂的用途,其中给患者施用所述抑制剂促进患者中现有的血栓性微血管病的消退。
22.根据权利要求17-21中任一项所述的抗体或其抗原结合片段的用途,其中在下述方案下,将所述抗体施用给所述患者,持续至少5周:
至少300 mg的抗体,每周1次持续1周;
在第2周期间,至少300 mg的抗体1次;和
此后每3周,至少300 mg的抗体。
23.如权利要求17-22中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中所述抗体结合人补体组分C5的α链,且其中所述抗体(i)抑制人体液中的补体活化,(ii)抑制纯化的人补体组分C5与人补体组分C3b或人补体组分C4b的结合,且(iii)不结合人补体活化产物游离的C5a。
24.如权利要求17-23中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中所述抗体或其抗原结合片段选自人源化的抗体、重组抗体、双抗体、嵌合的或嵌合抗体、单克隆抗体、去免疫化的人抗体、全人抗体、单链抗体、Fv片段、Fd片段、Fab片段、Fab’片段和F(ab’)2片段。
25.如权利要求17-24中任一项所述的抗-C5抗体或其抗原结合片段的用途,其中所述抗体是依库珠单抗。
Applications Claiming Priority (21)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US19880308P | 2008-11-10 | 2008-11-10 | |
US61/198,803 | 2008-11-10 | ||
US19956908P | 2008-11-18 | 2008-11-18 | |
US19956308P | 2008-11-18 | 2008-11-18 | |
US19956208P | 2008-11-18 | 2008-11-18 | |
US61/199,563 | 2008-11-18 | ||
US61/199,562 | 2008-11-18 | ||
US61/199,569 | 2008-11-18 | ||
US19976408P | 2008-11-19 | 2008-11-19 | |
US61/199,764 | 2008-11-19 | ||
US20063508P | 2008-12-01 | 2008-12-01 | |
US20064008P | 2008-12-01 | 2008-12-01 | |
US20063408P | 2008-12-01 | 2008-12-01 | |
US61/200,640 | 2008-12-01 | ||
US61/200,635 | 2008-12-01 | ||
US61/200,634 | 2008-12-01 | ||
US18178809P | 2009-05-28 | 2009-05-28 | |
US61/181,788 | 2009-05-28 | ||
US22804709P | 2009-07-23 | 2009-07-23 | |
US61/228,047 | 2009-07-23 | ||
CN200980153390.3A CN102271703B (zh) | 2008-11-10 | 2009-11-10 | 用于治疗补体相关障碍的方法和组合物 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN200980153390.3A Division CN102271703B (zh) | 2008-11-10 | 2009-11-10 | 用于治疗补体相关障碍的方法和组合物 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN104940917A true CN104940917A (zh) | 2015-09-30 |
Family
ID=42153320
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN200980153390.3A Active CN102271703B (zh) | 2008-11-10 | 2009-11-10 | 用于治疗补体相关障碍的方法和组合物 |
CN201510333793.3A Pending CN104940917A (zh) | 2008-11-10 | 2009-11-10 | 用于治疗补体相关障碍的方法和组合物 |
CN201811080573.4A Pending CN109045296A (zh) | 2008-11-10 | 2009-11-10 | 用于治疗补体相关障碍的方法和组合物 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN200980153390.3A Active CN102271703B (zh) | 2008-11-10 | 2009-11-10 | 用于治疗补体相关障碍的方法和组合物 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201811080573.4A Pending CN109045296A (zh) | 2008-11-10 | 2009-11-10 | 用于治疗补体相关障碍的方法和组合物 |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (8) | US9447176B2 (zh) |
EP (6) | EP3121197A1 (zh) |
JP (7) | JP6223659B2 (zh) |
KR (1) | KR20110094029A (zh) |
CN (3) | CN102271703B (zh) |
AU (1) | AU2009313203B2 (zh) |
BR (1) | BRPI0921237A2 (zh) |
CA (2) | CA3035432A1 (zh) |
DK (1) | DK2894165T3 (zh) |
ES (1) | ES2940466T3 (zh) |
FI (1) | FI2894165T3 (zh) |
HR (1) | HRP20230167T1 (zh) |
HU (1) | HUE061548T2 (zh) |
LT (1) | LT2894165T (zh) |
NZ (3) | NZ614351A (zh) |
PL (1) | PL2894165T3 (zh) |
PT (1) | PT2894165T (zh) |
RS (1) | RS64039B1 (zh) |
SI (1) | SI2894165T1 (zh) |
WO (1) | WO2010054403A1 (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110494168A (zh) * | 2017-02-27 | 2019-11-22 | 再生元制药公司 | 肾病症和肝病症的人源化模型 |
Families Citing this family (93)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9415102B2 (en) | 2002-09-06 | 2016-08-16 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | High concentration formulations of anti-C5 antibodies |
US20050271660A1 (en) | 2002-09-06 | 2005-12-08 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Nebulization of monoclonal antibodies for treating pulmonary diseases |
US8840893B2 (en) | 2004-06-10 | 2014-09-23 | Omeros Corporation | Methods for treating conditions associated with MASP-2 dependent complement activation |
US7612181B2 (en) | 2005-08-19 | 2009-11-03 | Abbott Laboratories | Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
EP4342995A3 (en) | 2006-03-31 | 2024-05-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for controlling blood pharmacokinetics of antibodies |
US8703136B2 (en) | 2006-10-10 | 2014-04-22 | Regenesance B.V. | Complement inhibition for improved nerve regeneration |
DK2202245T3 (en) | 2007-09-26 | 2016-11-21 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | A method of modifying an antibody isoelectric point VIA amino acid substitution in CDR |
EP3056513A1 (en) | 2008-04-11 | 2016-08-17 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule capable of binding to two or more antigen molecules repeatedly |
RS64039B1 (sr) | 2008-11-10 | 2023-04-28 | Alexion Pharma Inc | Metode i kompozicije za lečenje poremećaja povezanih sa komplementom |
MA32975B1 (fr) | 2008-12-22 | 2012-01-02 | Chemocentryx Inc | Antagonistes de c5ar |
BRPI1012759A2 (pt) * | 2009-06-23 | 2019-07-02 | Alexion Pharma Inc | anticorpos biespecíficos que se ligam as proteínas do complemento. |
CN102985106A (zh) * | 2010-03-01 | 2013-03-20 | 阿雷克森制药公司 | 用于治疗德戈斯病的方法和组合物 |
BR112012027900A2 (pt) | 2010-04-30 | 2020-05-12 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Anticorpos anti-c5a e métodos para usar os anticorpos |
SI2585064T1 (sl) | 2010-06-24 | 2017-08-31 | Chemocentryx, Inc. | Antagonisti C5AR |
CN107661491A (zh) * | 2010-09-15 | 2018-02-06 | 赛尔戴克斯治疗公司 | 用可溶性I型补体受体(sCR1)治疗慢性肾病 |
RU2658504C9 (ru) | 2010-11-30 | 2018-08-21 | Чугаи Сейяку Кабусики Кайся | Антигенсвязывающая молекула, способная многократно связываться с множеством антигенных молекул |
US9644035B2 (en) | 2011-04-08 | 2017-05-09 | Omeros Corporation | Methods for treating conditions associated with MASP-2 dependent complement activation |
MX355648B (es) * | 2011-04-08 | 2018-04-26 | Univ Leicester | El uso de un agente inhibidor de masp-2 para tratar condiciones asociadas con la activacion del complemento dependiente de masp-2. |
US20150166676A1 (en) * | 2011-04-08 | 2015-06-18 | Omeros Corporation | Methods for Treating Conditions Associated with MASP-2 Dependent Complement Activation |
MX363606B (es) | 2011-06-22 | 2019-03-28 | Apellis Pharmaceuticals Inc | Uso de inhibidores del complemento en trastornos crónicos. |
AU2013222836B2 (en) | 2012-02-20 | 2017-07-20 | Swedish Orphan Biovitrum Ab (Publ) | Polypeptides binding to human complement C5 |
WO2013137912A2 (en) * | 2012-03-16 | 2013-09-19 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Methods of distributing complement-inhibiting drugs to patients receiving a complement inhibitor |
CA2875567C (en) * | 2012-06-18 | 2023-11-14 | Omeros Corporation | Compositions and methods of inhibiting masp-1 and/or masp-2 and/or masp-3 for the treatment of various diseases and disorders |
WO2014055835A1 (en) * | 2012-10-04 | 2014-04-10 | Novelmed Therapeutics, Inc. | Alternative pathway specific antibodies for treating hemolytic diseases |
JP6538561B2 (ja) | 2012-10-25 | 2019-07-03 | バイオベラティブ・ユーエスエイ・インコーポレイテッド | 抗補体C1s抗体とそれらの用途 |
PT2914291T (pt) | 2012-11-02 | 2022-05-05 | Bioverativ Usa Inc | Anticorpos anti-complemento c1s e suas utilizações |
US20150330989A1 (en) * | 2012-11-15 | 2015-11-19 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Method and system for diagnosing and treating preeclampsia |
WO2014110438A1 (en) * | 2013-01-11 | 2014-07-17 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods related to the c5d domain of complement component c5 |
US10280215B2 (en) * | 2013-01-31 | 2019-05-07 | Seoul National University R&Db Foundation | Anti-C5 antibodies and methods of treating complement-related diseases |
DK2968457T3 (en) * | 2013-03-14 | 2018-10-29 | Baxalta Inc | FACTOR H FOR TRANSPLANTATION |
KR20230162998A (ko) | 2013-03-14 | 2023-11-29 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 보체 성분 C5 iRNA 조성물 및 그 이용 방법 |
EP2978451B1 (en) | 2013-03-29 | 2019-11-27 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for increasing the serum half-life of a therapeutic agent targeting complement c5 |
US20150079613A1 (en) | 2013-08-07 | 2015-03-19 | Ryan Kitchel | Atypical hemolytic uremic syndrome biomarker proteins |
EP3033093A1 (en) * | 2013-08-16 | 2016-06-22 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of graft rejection by administering a complement inhibitor to an organ prior to transplant |
JP6654137B2 (ja) * | 2013-09-16 | 2020-02-26 | チルドレンズ ホスピタル メディカル センター | Hsct関連血栓性微小血管症の治療のための組成物及び方法 |
IL283373B1 (en) * | 2013-10-17 | 2024-04-01 | Omeros Corp | Pharmaceutical preparations containing MASP-2 suppressors to suppress MASP-2-dependent complement activation and related diseases |
AU2014362262B2 (en) | 2013-12-12 | 2021-05-13 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Complement component iRNA compositions and methods of use thereof |
CA2939626C (en) * | 2014-02-20 | 2023-01-17 | Allergan, Inc. | Complement component c5 antibodies |
HUE050921T2 (hu) * | 2014-02-26 | 2021-01-28 | Allergan Inc | C5 komplementkomponens antitestek |
NZ631007A (en) * | 2014-03-07 | 2015-10-30 | Alexion Pharma Inc | Anti-c5 antibodies having improved pharmacokinetics |
US10155983B2 (en) | 2014-03-31 | 2018-12-18 | Machaon Diagnostics, Inc. | Method of diagnosis of complement-mediated thrombotic microangiopathies |
HUE045646T2 (hu) | 2014-06-12 | 2020-01-28 | Ra Pharmaceuticals Inc | Komplement aktivitás modulálása |
EP3191591A1 (en) | 2014-09-12 | 2017-07-19 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Polynucleotide agents targeting complement component c5 and methods of use thereof |
ES2802428T3 (es) | 2014-09-29 | 2021-01-19 | Chemocentryx Inc | Procesos e intermedios en la preparación de antagonistas de C5aR |
US11031102B2 (en) | 2014-11-17 | 2021-06-08 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Risk evaluation and management strategy involving patient follow-ups relating to the use or discontinuation of a complement inhibitor |
US20160168237A1 (en) * | 2014-12-12 | 2016-06-16 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Method for treating a complement mediated disorder caused by an infectious agent in a patient |
TW201809008A (zh) | 2014-12-19 | 2018-03-16 | 日商中外製藥股份有限公司 | 抗c5抗體及使用方法 |
CN107428823B (zh) * | 2015-01-22 | 2021-10-26 | 中外制药株式会社 | 两种以上抗-c5抗体的组合与使用方法 |
EP3250230B9 (en) | 2015-01-28 | 2022-02-23 | RA Pharmaceuticals, Inc. | Modulators of complement activity |
KR20180006379A (ko) | 2015-04-06 | 2018-01-17 | 바이오버라티브 유에스에이 인코포레이티드 | 인간화 항-c1s 항체 및 이들의 이용 방법 |
WO2016178980A1 (en) * | 2015-05-01 | 2016-11-10 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Efficacy of an anti-c5 antibody in the prevention of antibody mediated rejection in sensitized recipients of kindney thansplant |
WO2016200627A1 (en) | 2015-06-09 | 2016-12-15 | Children's Hospital Medical Center | Dosing algorithm for complement inhibitor |
WO2016201301A1 (en) | 2015-06-12 | 2016-12-15 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Complement component c5 irna compositions and methods of use thereof |
WO2017048495A1 (en) | 2015-09-14 | 2017-03-23 | Children's Hospital Medical Center | Methods and compositions for treatment of gaucher disease via modulation of c5a receptor |
WO2017075325A1 (en) * | 2015-10-30 | 2017-05-04 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | A method of inhibiting exacerbations of t cell-mediated allograft vasculopathy |
EP4218790A1 (en) | 2015-12-16 | 2023-08-02 | Ra Pharmaceuticals, Inc. | Modulators of complement activity |
AU2016375183B2 (en) | 2015-12-23 | 2021-01-21 | eleva GmbH | Polypeptides for inhibiting complement activation |
BR112018014222A2 (pt) * | 2016-01-14 | 2018-12-11 | Chemocentryx, Inc. | método de tratamento da glomerulopatia c3 |
US20190151414A1 (en) * | 2016-05-10 | 2019-05-23 | Annexon, Inc. | Anti-complement factor c4/c4b antibodies and uses thereof |
RU2018141451A (ru) * | 2016-05-27 | 2020-06-29 | Алексион Фармасьютикалс, Инк. | Способы лечения рефрактерной генерализованной миастении |
EP3464351A1 (en) * | 2016-06-07 | 2019-04-10 | Novartis AG | Anti-c5 antibody for treating patients with complement c5 polymorphism |
US20190127453A1 (en) * | 2016-06-07 | 2019-05-02 | Novartis Ag | An anti-c5 antibody dosing regimen |
US20190225679A1 (en) * | 2016-06-07 | 2019-07-25 | Novartis Ag | Tesidolumab for use in the treatment of transplant rejection |
JP2019518028A (ja) | 2016-06-10 | 2019-06-27 | アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッドAlnylam Pharmaceuticals, Inc. | 補体成分C5iRNA組成物及び発作性夜間血色素尿症(PNH)を処置するためのその使用方法 |
KR102534895B1 (ko) | 2016-06-14 | 2023-05-24 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | 항-c5 항체 및 이의 용도 |
TW202300168A (zh) | 2016-08-05 | 2023-01-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | Il-8相關疾病之治療用或預防用組成物 |
EP3532845A1 (en) | 2016-10-27 | 2019-09-04 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Assay for c5b-9 deposition in complement-associated disorders |
KR20190093196A (ko) | 2016-12-07 | 2019-08-08 | 라 파마슈티컬스 인코포레이티드 | 보체 활성의 조절인자 |
SG10201908697XA (en) | 2017-01-31 | 2019-10-30 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | A pharmaceutical composition for use in the treatment or prevention of a c5-related disease and a method for treating or preventing a c5-related disease |
CN110603054B (zh) | 2017-03-06 | 2024-05-10 | 宾夕法尼亚大学理事会 | 抗c5抗体及其用途 |
WO2018217638A1 (en) * | 2017-05-22 | 2018-11-29 | Alexion Pharmaceuticals Inc. | Dosage and administration of anti-c5 antibodies for treatment of protein-losing enteropathy in patients |
EP3692064A1 (en) * | 2017-10-04 | 2020-08-12 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Dosage and administration of anti-c5 antibodies for treatment of patients with membranoproliferative glomerulonephritis |
EP3704252A1 (en) | 2017-11-01 | 2020-09-09 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Complement component c3 irna compositions and methods of use thereof |
SG11202004560TA (en) | 2017-11-16 | 2020-06-29 | Iveric Bio Inc | A method for treating or preventing idiopathic polypoidal choroidal vasculopathy (ipcv) |
RU2657768C1 (ru) * | 2017-11-23 | 2018-06-15 | Елена Вячеславовна Волкова | Способ лечения беременных с преэклампсией средней тяжести |
JP7161534B2 (ja) | 2017-11-29 | 2022-10-26 | エフ.ホフマン-ラ ロシュ アーゲー | 標的による干渉が抑制された抗薬物抗体アッセイ |
WO2019112984A1 (en) | 2017-12-04 | 2019-06-13 | Ra Pharmaceuticals, Inc. | Modulators of complement activity |
AU2018383751A1 (en) | 2017-12-13 | 2020-06-25 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-C5 antibody combinations and uses thereof |
GB201800620D0 (en) | 2018-01-15 | 2018-02-28 | Univ Manchester | C3b Binding Polypeptide |
US20190247560A1 (en) * | 2018-02-13 | 2019-08-15 | Gambro Lundia Ab | Extracorporeal devices and methods of treating complement factor related diseases |
CN112512563A (zh) | 2018-08-01 | 2021-03-16 | 中外制药株式会社 | 用于治疗或预防c5相关疾病的药物组合物和治疗或预防c5相关疾病的方法 |
WO2020060987A1 (en) * | 2018-09-18 | 2020-03-26 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Complement component c5 irna compositions and methods of use |
JP2022524078A (ja) | 2019-03-08 | 2022-04-27 | ラ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 深部組織浸透性c5阻害剤としてのジルコプラン |
TW202102481A (zh) | 2019-03-29 | 2021-01-16 | 美商Ra製藥公司 | 補體調節劑和相關方法 |
WO2020219822A1 (en) | 2019-04-24 | 2020-10-29 | Ra Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulating complement activity |
GB2584105B (en) * | 2019-05-21 | 2023-08-02 | Argenx Bvba | Methods of treating neuropathy |
TW202120125A (zh) | 2019-07-31 | 2021-06-01 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | 藉由使用抗c5抗體克羅伐單抗(crovalimab)之治療或預防c5相關疾病之劑量及投藥療程 |
CN114466660A (zh) | 2019-07-31 | 2022-05-10 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 通过使用抗c5抗体可伐利单抗来治疗或预防c5相关疾病的剂量和施用方案 |
WO2021154941A1 (en) | 2020-01-31 | 2021-08-05 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Complement component c5 irna compositions for use in the treatment of amyotrophic lateral sclerosis (als) |
IL298923A (en) | 2020-06-16 | 2023-02-01 | Hoffmann La Roche | A method for determining the free antigen of an antibody in a sample |
WO2022251446A1 (en) | 2021-05-28 | 2022-12-01 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Methods for detecting cm-tma biomarkers |
WO2023044370A2 (en) | 2021-09-17 | 2023-03-23 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Irna compositions and methods for silencing complement component 3 (c3) |
WO2024054436A1 (en) | 2022-09-06 | 2024-03-14 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Diagnostic and prognostic biomarker profiles in patients with hematopoietic stem cell transplant-associated thrombotic microangiopathy (hsct-tma) |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007103134A2 (en) * | 2006-03-02 | 2007-09-13 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Prolongation of survival of an allograft by inhibiting complement activity |
Family Cites Families (121)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3710795A (en) | 1970-09-29 | 1973-01-16 | Alza Corp | Drug-delivery device with stretched, rate-controlling membrane |
US4376110A (en) | 1980-08-04 | 1983-03-08 | Hybritech, Incorporated | Immunometric assays using monoclonal antibodies |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US4634666A (en) | 1984-01-06 | 1987-01-06 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Human-murine hybridoma fusion partner |
US4686100A (en) | 1985-04-02 | 1987-08-11 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Method for the treatment of adult respiratory distress syndrome |
US4980286A (en) | 1985-07-05 | 1990-12-25 | Whitehead Institute For Biomedical Research | In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells |
AU6131086A (en) | 1985-07-05 | 1987-01-30 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Epithelial cells expressing foreign genetic material |
US4676980A (en) | 1985-09-23 | 1987-06-30 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Target specific cross-linked heteroantibodies |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
US4863457A (en) | 1986-11-24 | 1989-09-05 | Lee David A | Drug delivery device |
US4987071A (en) | 1986-12-03 | 1991-01-22 | University Patents, Inc. | RNA ribozyme polymerases, dephosphorylases, restriction endoribonucleases and methods |
US5116742A (en) | 1986-12-03 | 1992-05-26 | University Patents, Inc. | RNA ribozyme restriction endoribonucleases and methods |
ATE114723T1 (de) | 1987-03-02 | 1994-12-15 | Enzon Lab Inc | Organismus als träger für ''single chain antibody domain (scad)''. |
EP0633318A1 (en) | 1987-09-11 | 1995-01-11 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Transduced fibroblasts and uses therefor |
EP0391960B1 (en) | 1987-12-11 | 1994-08-17 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Genetic modification of endothelial cells |
JP2917998B2 (ja) | 1988-02-05 | 1999-07-12 | ホワイトヘッド・インスティチュート・フォー・バイオメディカル・リサーチ | 修飾された肝細胞およびその用途 |
US5223409A (en) | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
GB8823869D0 (en) | 1988-10-12 | 1988-11-16 | Medical Res Council | Production of antibodies |
US5750373A (en) | 1990-12-03 | 1998-05-12 | Genentech, Inc. | Enrichment method for variant proteins having altered binding properties, M13 phagemids, and growth hormone variants |
US5175384A (en) | 1988-12-05 | 1992-12-29 | Genpharm International | Transgenic mice depleted in mature t-cells and methods for making transgenic mice |
US5135916A (en) | 1989-06-12 | 1992-08-04 | Oklahoma Medical Research Foundation | Inhibition of complement mediated inflammatory response |
DE3924924A1 (de) | 1989-07-27 | 1991-02-07 | Goetze Otto | Verfahren zum nachweis und/oder der quantitativen bestimmung von komplementpeptid c5a und/oder c5adesarg |
US5164188A (en) | 1989-11-22 | 1992-11-17 | Visionex, Inc. | Biodegradable ocular implants |
DK0463151T3 (da) | 1990-01-12 | 1996-07-01 | Cell Genesys Inc | Frembringelse af xenogene antistoffer |
US6657103B1 (en) | 1990-01-12 | 2003-12-02 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US20040010810A1 (en) | 1990-01-12 | 2004-01-15 | Abgenix, Inc. | Generation of xenogeneic antibodies |
US6713610B1 (en) | 1990-01-12 | 2004-03-30 | Raju Kucherlapati | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US6075181A (en) | 1990-01-12 | 2000-06-13 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US6673986B1 (en) | 1990-01-12 | 2004-01-06 | Abgenix, Inc. | Generation of xenogeneic antibodies |
US6150584A (en) | 1990-01-12 | 2000-11-21 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
GB9007971D0 (en) | 1990-04-09 | 1990-06-06 | Imutran Ltd | Pharmaceutical formulations |
US5427908A (en) | 1990-05-01 | 1995-06-27 | Affymax Technologies N.V. | Recombinant library screening methods |
US5814318A (en) | 1990-08-29 | 1998-09-29 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
CA2090473A1 (en) | 1990-08-29 | 1992-03-01 | Robert M. Kay | Homologous recombinatin in mammalian cells |
US5633425A (en) | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
DK0546073T3 (da) | 1990-08-29 | 1998-02-02 | Genpharm Int | Frembringelse og anvendelse af transgene, ikke-humane dyr, der er i stand til at danne heterologe antistoffer |
US5874299A (en) | 1990-08-29 | 1999-02-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5625126A (en) | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5789650A (en) | 1990-08-29 | 1998-08-04 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US6255458B1 (en) | 1990-08-29 | 2001-07-03 | Genpharm International | High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5877397A (en) | 1990-08-29 | 1999-03-02 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5770429A (en) | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US6300129B1 (en) | 1990-08-29 | 2001-10-09 | Genpharm International | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US7041871B1 (en) | 1995-10-10 | 2006-05-09 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
EP0568537B1 (en) | 1990-10-31 | 1998-02-04 | Somatix Therapy Corporation | Genetic modification of endothelial cells |
KR0185215B1 (ko) | 1990-11-30 | 1999-05-01 | 요시다 쇼오지 | 서방성 안구삽입용 약제 |
US5780279A (en) | 1990-12-03 | 1998-07-14 | Genentech, Inc. | Method of selection of proteolytic cleavage sites by directed evolution and phagemid display |
CA2097825A1 (en) * | 1990-12-06 | 1992-06-07 | Henry C. Marsh, Jr. | Synergistic compositions of soluble complement receptors and compounds that inhibit complement and/or suppress immune activity |
JP4146512B2 (ja) | 1991-03-01 | 2008-09-10 | ダイアックス コープ. | 小型タンパク質 |
WO1992022670A1 (en) | 1991-06-12 | 1992-12-23 | Genpharm International, Inc. | Early detection of transgenic embryos |
AU2235992A (en) | 1991-06-14 | 1993-01-12 | Genpharm International, Inc. | Transgenic immunodeficient non-human animals |
AU2515992A (en) | 1991-08-20 | 1993-03-16 | Genpharm International, Inc. | Gene targeting in animal cells using isogenic dna constructs |
EP0746609A4 (en) | 1991-12-17 | 1997-12-17 | Genpharm Int | NON-HUMAN TRANSGENIC ANIMALS CAPABLE OF PRODUCING HETEROLOGOUS ANTIBODIES |
WO1994000569A1 (en) | 1992-06-18 | 1994-01-06 | Genpharm International, Inc. | Methods for producing transgenic non-human animals harboring a yeast artificial chromosome |
AU675661B2 (en) | 1992-07-24 | 1997-02-13 | Abgenix, Inc. | Generation of xenogeneic antibodies |
US5508717A (en) | 1992-07-28 | 1996-04-16 | Sony Corporation | Computer pointing device with dynamic sensitivity |
AU685433B2 (en) * | 1993-02-12 | 1998-01-22 | Regents Of The University Of Minnesota | Pulmonary administration of sCR1 and other complement inhibitory proteins |
EP0754225A4 (en) | 1993-04-26 | 2001-01-31 | Genpharm Int | HETEROLOGIC ANTIBODY-PRODUCING TRANSGENIC NON-HUMAN ANIMALS |
US5625825A (en) | 1993-10-21 | 1997-04-29 | Lsi Logic Corporation | Random number generating apparatus for an interface unit of a carrier sense with multiple access and collision detect (CSMA/CD) ethernet data network |
NZ281112A (en) | 1994-03-07 | 1998-04-27 | Inhale Therapeutic Syst | Powdered insulin delivered as an aerosol |
US6074642A (en) | 1994-05-02 | 2000-06-13 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Use of antibodies specific to human complement component C5 for the treatment of glomerulonephritis |
US5643763A (en) | 1994-11-04 | 1997-07-01 | Genpharm International, Inc. | Method for making recombinant yeast artificial chromosomes by minimizing diploid doubling during mating |
US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
US6019968A (en) | 1995-04-14 | 2000-02-01 | Inhale Therapeutic Systems, Inc. | Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use |
US20050287630A1 (en) | 1995-04-27 | 2005-12-29 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
EP0823941A4 (en) | 1995-04-28 | 2001-09-19 | Abgenix Inc | HUMAN ANTIBODIES DERIVED FROM IMMUNIZED XENO MOUSES |
DK1143006T3 (da) | 1995-08-18 | 2008-07-14 | Morphosys Ip Gmbh | Vektorer/DNA-sekvenser fra humane kombinatoriske antistofbiblioteker |
US20030143204A1 (en) | 2001-07-27 | 2003-07-31 | Lewis David L. | Inhibition of RNA function by delivery of inhibitors to animal cells |
ES2301183T3 (es) | 1996-12-03 | 2008-06-16 | Amgen Fremont Inc. | Anticuerpo completamente humano que se une al receptor del egfr. |
AUPO755097A0 (en) | 1997-06-25 | 1997-07-17 | University Of Queensland, The | Receptor agonist and antagonist |
US7056897B2 (en) | 1997-11-03 | 2006-06-06 | The Arizona Board Of Regents | Inducible expression vectors and methods of use thereof |
JP2002534959A (ja) | 1998-12-08 | 2002-10-22 | バイオベーション リミテッド | 免疫原性タンパク質の改変方法 |
JP2002541213A (ja) | 1999-04-13 | 2002-12-03 | インヘール セラピューティック システムズ, インコーポレイテッド | 不妊症の処置のための乾燥粉末処方物の肺投与 |
WO2000061178A1 (en) | 1999-04-13 | 2000-10-19 | Inhale Therapeutics Systems, Inc. | Pulmonary administration of dry powder formulations for treating infertility |
GB9910975D0 (en) | 1999-05-13 | 1999-07-14 | Univ Strathclyde | Rapid dehydration of proteins |
US6673346B1 (en) | 1999-08-31 | 2004-01-06 | The Regents Of The University Of Michigan | Compositions and methods for the treatment of sepsis |
US6794132B2 (en) | 1999-10-02 | 2004-09-21 | Biosite, Inc. | Human antibodies |
US6680209B1 (en) | 1999-12-06 | 2004-01-20 | Biosite, Incorporated | Human antibodies as diagnostic reagents |
WO2001058526A2 (en) * | 2000-02-10 | 2001-08-16 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Mixtures of caspase inhibitors and complement inhibitors and methods of use thereof |
DE60118023T2 (de) | 2000-12-05 | 2006-12-28 | Alexion Pharmaceuticals, Inc., Cheshire | Rationell entworfene antikörper |
EP2325205A3 (en) * | 2000-12-28 | 2011-10-12 | Altus Pharmaceuticals Inc. | Crystals of whole antibodies and fragments thereof and methods for making and using them |
CA2438652A1 (en) | 2001-02-19 | 2002-09-06 | Merck Patent Gesellschaft Mit Beschraenkter Haftung | Method for identification of t-cell epitopes and use for preparing molecules with reeduced immunogenicity |
ATE382060T1 (de) | 2001-06-01 | 2008-01-15 | Biogen Idec Inc | Moleküle und verfahren zur inhibierung der freisetzung von kim-1 |
US7393648B2 (en) | 2001-12-03 | 2008-07-01 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Hybrid antibodies |
WO2003064621A2 (en) | 2002-02-01 | 2003-08-07 | Ambion, Inc. | HIGH POTENCY siRNAS FOR REDUCING THE EXPRESSION OF TARGET GENES |
AU2003223288A1 (en) | 2002-03-18 | 2003-10-08 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Stratification of patient populations having or suspected of having rheumatoid arthritis |
US7556944B2 (en) | 2002-05-03 | 2009-07-07 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods and compositions for use in preparing siRNAs |
US7700758B2 (en) | 2002-08-12 | 2010-04-20 | New England Biolabs, Inc. | Methods and compositions relating to gene silencing |
US20050271660A1 (en) | 2002-09-06 | 2005-12-08 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Nebulization of monoclonal antibodies for treating pulmonary diseases |
NZ538384A (en) * | 2002-09-06 | 2009-04-30 | Alexion Pharma Inc | Treatment for asthma using a compound which binds to or otherwise blocks the generation and/or activity of one or more complement components reptors, such as, C5a receptors |
US9415102B2 (en) * | 2002-09-06 | 2016-08-16 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | High concentration formulations of anti-C5 antibodies |
DK2345671T3 (en) | 2002-09-27 | 2016-02-15 | Xencor Inc | Optimized Fc variants and methods for their formation |
US7361339B2 (en) | 2003-01-09 | 2008-04-22 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Methods for reducing morality associated with acute myocardial infarction |
WO2004108158A1 (en) | 2003-06-02 | 2004-12-16 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | De-immunized anti-cd3 antibody |
US20070116710A1 (en) * | 2004-02-03 | 2007-05-24 | Leonard Bell | Methods of treating hemolytic anemia |
US20050169921A1 (en) | 2004-02-03 | 2005-08-04 | Leonard Bell | Method of treating hemolytic disease |
US7803931B2 (en) * | 2004-02-12 | 2010-09-28 | Archemix Corp. | Aptamer therapeutics useful in the treatment of complement-related disorders |
US8685435B2 (en) | 2004-04-30 | 2014-04-01 | Allergan, Inc. | Extended release biodegradable ocular implants |
ES2528362T3 (es) * | 2004-05-14 | 2015-02-09 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Prolongación de la supervivencia de un aloinjerto por inhibición de la actividad del complemento |
US7919094B2 (en) | 2004-06-10 | 2011-04-05 | Omeros Corporation | Methods for treating conditions associated with MASP-2 dependent complement activation |
GB0416328D0 (en) | 2004-07-21 | 2004-08-25 | Univ Cardiff | Use of dry powder compositions for pulmonary delivery |
US20060263358A1 (en) * | 2005-05-19 | 2006-11-23 | The Procter & Gamble Company | Method for reducing sepsis or cardiogenic shock associated with myocardial injury |
EP1739078A1 (de) * | 2005-05-30 | 2007-01-03 | Jerini AG | C5a-Rezeptor-Antagonisten |
WO2007002571A2 (en) * | 2005-06-23 | 2007-01-04 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Use of an anti c5 complement antibody to treat patients with sickle cell disease |
WO2007002543A2 (en) * | 2005-06-23 | 2007-01-04 | Medimmune, Inc. | Antibody formulations having optimized aggregation and fragmentation profiles |
US7612181B2 (en) | 2005-08-19 | 2009-11-03 | Abbott Laboratories | Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
CN101370525B (zh) | 2005-08-19 | 2013-09-18 | Abbvie公司 | 双重可变结构域免疫球蛋白及其用途 |
GB0518443D0 (en) * | 2005-09-09 | 2005-10-19 | Evolutec Ltd | Method of treating myasthenia gravis |
WO2007038995A1 (en) * | 2005-09-19 | 2007-04-12 | Csl Behring Gmbh | Factor h for the treatment of chronic nephropathies and production thereof |
FR2894145B1 (fr) * | 2005-12-07 | 2008-10-17 | Lab Francais Du Fractionnement | Utilisation de facteur h du complement a titre de medicament |
SI2359834T1 (sl) * | 2006-03-15 | 2017-02-28 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Zdravljenje pacientov,ki imajo paroksizmalno nočno hemoglobinurijo, z zaviralcem komplementa |
US8037880B2 (en) | 2006-04-07 | 2011-10-18 | The University Of Western Ontario | Dry powder inhaler |
WO2007130031A1 (en) * | 2006-05-01 | 2007-11-15 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Methods for the treatment of muscular dystrophy associated with dysferlin-deficiency |
AU2007313170A1 (en) * | 2006-10-20 | 2008-04-24 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Methods for the treatment of muscular dystrophy associated with dysferlin-deficiency |
US20100120665A1 (en) * | 2007-03-01 | 2010-05-13 | Advanced Vision Therapies, Inc. | Treatment of diseases characterized by inflammation |
WO2008153962A2 (en) | 2007-06-08 | 2008-12-18 | The Trustees Of The University Of Pennylvania | Method of reducing tissue loss in pancreatic islet cell transplantation |
EP2328616B1 (en) | 2008-08-05 | 2015-04-29 | Novartis AG | Compositions and methods for antibodies against complement protein c5 |
RS64039B1 (sr) | 2008-11-10 | 2023-04-28 | Alexion Pharma Inc | Metode i kompozicije za lečenje poremećaja povezanih sa komplementom |
US20120022505A1 (en) | 2010-07-20 | 2012-01-26 | Bruno Dacquay | Closed loop glaucoma drug delivery system |
-
2009
- 2009-11-10 RS RS20230196A patent/RS64039B1/sr unknown
- 2009-11-10 NZ NZ614351A patent/NZ614351A/en not_active IP Right Cessation
- 2009-11-10 DK DK15152757.9T patent/DK2894165T3/da active
- 2009-11-10 EP EP16185212.4A patent/EP3121197A1/en not_active Withdrawn
- 2009-11-10 FI FIEP15152757.9T patent/FI2894165T3/fi active
- 2009-11-10 EP EP15152757.9A patent/EP2894165B1/en active Active
- 2009-11-10 HU HUE15152757A patent/HUE061548T2/hu unknown
- 2009-11-10 WO PCT/US2009/063929 patent/WO2010054403A1/en active Application Filing
- 2009-11-10 PT PT151527579T patent/PT2894165T/pt unknown
- 2009-11-10 US US13/128,523 patent/US9447176B2/en active Active
- 2009-11-10 EP EP15152758.7A patent/EP2894166A1/en not_active Withdrawn
- 2009-11-10 CA CA3035432A patent/CA3035432A1/en active Pending
- 2009-11-10 PL PL15152757.9T patent/PL2894165T3/pl unknown
- 2009-11-10 CA CA2742802A patent/CA2742802C/en active Active
- 2009-11-10 AU AU2009313203A patent/AU2009313203B2/en active Active
- 2009-11-10 CN CN200980153390.3A patent/CN102271703B/zh active Active
- 2009-11-10 EP EP09825611A patent/EP2352517A4/en not_active Withdrawn
- 2009-11-10 CN CN201510333793.3A patent/CN104940917A/zh active Pending
- 2009-11-10 NZ NZ606825A patent/NZ606825A/en not_active IP Right Cessation
- 2009-11-10 KR KR1020117012776A patent/KR20110094029A/ko not_active Application Discontinuation
- 2009-11-10 JP JP2011535776A patent/JP6223659B2/ja active Active
- 2009-11-10 EP EP16179565.3A patent/EP3101031A1/en not_active Ceased
- 2009-11-10 LT LTEP15152757.9T patent/LT2894165T/lt unknown
- 2009-11-10 EP EP21169657.0A patent/EP3974448A1/en active Pending
- 2009-11-10 ES ES15152757T patent/ES2940466T3/es active Active
- 2009-11-10 NZ NZ592786A patent/NZ592786A/xx not_active IP Right Cessation
- 2009-11-10 CN CN201811080573.4A patent/CN109045296A/zh active Pending
- 2009-11-10 HR HRP20230167TT patent/HRP20230167T1/hr unknown
- 2009-11-10 SI SI200932177T patent/SI2894165T1/sl unknown
- 2009-11-10 BR BRPI0921237A patent/BRPI0921237A2/pt not_active Application Discontinuation
-
2014
- 2014-06-25 JP JP2014129867A patent/JP2014185174A/ja not_active Withdrawn
-
2015
- 2015-06-02 JP JP2015111892A patent/JP6189895B2/ja active Active
-
2016
- 2016-05-06 US US15/148,491 patent/US20160319004A1/en not_active Abandoned
- 2016-08-22 US US15/243,386 patent/US20160355580A1/en not_active Abandoned
- 2016-08-22 US US15/243,290 patent/US9771418B2/en active Active
- 2016-08-29 JP JP2016166460A patent/JP2016196513A/ja not_active Withdrawn
- 2016-09-30 US US15/282,464 patent/US20170015740A1/en not_active Abandoned
-
2017
- 2017-09-11 US US15/700,805 patent/US20170369562A1/en not_active Abandoned
- 2017-11-21 JP JP2017223597A patent/JP2018030882A/ja not_active Withdrawn
-
2019
- 2019-03-20 US US16/358,779 patent/US11807678B2/en active Active
- 2019-09-09 JP JP2019163678A patent/JP2019203036A/ja not_active Withdrawn
- 2019-10-11 US US16/599,482 patent/US20200140531A1/en not_active Abandoned
-
2021
- 2021-07-30 JP JP2021125414A patent/JP2021167362A/ja active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007103134A2 (en) * | 2006-03-02 | 2007-09-13 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Prolongation of survival of an allograft by inhibiting complement activity |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
ANDREW L. SINGER, ET AL.: "Successful Liver Transplantation for Budd-Chiari Syndrome in a Patient with Paroxysmal Nocturnal Hemoglobinuria Treated with the Anti-Complement Antibody Eculizumab", 《LIVER TRANSPLANTATION》 * |
CLININCALRIAL.GOV: "NCT00670774 on 20080501", 《HTTPS://CLINICALTRIALS.GOV/ARCHIVE/NCT00670774/2008_05_01》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110494168A (zh) * | 2017-02-27 | 2019-11-22 | 再生元制药公司 | 肾病症和肝病症的人源化模型 |
CN110494168B (zh) * | 2017-02-27 | 2023-02-03 | 再生元制药公司 | 肾病症和肝病症的人源化模型 |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102271703B (zh) | 用于治疗补体相关障碍的方法和组合物 | |
CN102985106A (zh) | 用于治疗德戈斯病的方法和组合物 | |
AU2024201728A1 (en) | Methods and compositions for treating complement-associated disorders |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20150930 |