CN104838896A

CN104838896A - 一种利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法

Info

Publication number: CN104838896A
Application number: CN201510323210.9A
Authority: CN
Inventors: 王谦; 齐悦歌; 刘敏; 宋长林
Original assignee: Hebei University
Current assignee: Hebei University
Priority date: 2015-06-12
Filing date: 2015-06-12
Publication date: 2015-08-19

Abstract

本发明提供一种利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，包括如下步骤：A.液体菌种的制备和培养；B.谷粒菌种的制备和培养；C.栽培用培养基的制备；D.无菌条件下，将步骤B制备得到的谷粒菌种接入步骤C制备得到的培养基，进行培养、出菇管理、采收；创新点是在步骤A或/和步骤B或/和步骤C的培养基中含有香蒲屑。本发明利用了湿地香蒲废弃物，减少对水体的生态破坏，降低了栽培成本，具有显著的经济效益和生态效益，具有广阔的应用前景。

Description

一种利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法

技术领域

本发明属于食用真菌栽培的技术领域，具体涉及一种利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，以及专用培养基的制备方法。

背景技术

鸡腿菇,学名毛头鬼伞(Coprinus comatus)，属真菌门、担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、鬼伞科、鬼伞属，因其子实体未开伞时形似火鸡腿，故称为鸡腿菇，日本人称之为细裂夜茸。是新近推出的珍稀食用菌之一，被世界卫生组织(WHO)及联合国粮农组织(FAO)确定为集“天然、营养、保健”三种功能于一体的珍稀食用菌。

鸡腿菇集营养,保健,食疗于一身,具有高蛋白,低脂肪的优良特性"菇体洁白美观,肉质细腻,色、香、味、形俱佳。炒食,炖食,煲汤均久煮不烂,因而倍受消费者青睐。该菇含有人体所需的多种氨基酸和维生素,有清神宁智,益脾健胃,降血压、血糖,去血脂,治疗糖尿病、痔疮,调节免疫力等多种功效。

香蒲屑在植物学上属于被子植物门,双子叶植物纲,蔷薇目,香蒲屑科,香蒲屑属,属拉丁名:Typhal.香蒲屑属是香蒲屑科一单属,水生或沼生,全国共11种,香蒲屑为多年生落叶、宿根性挺水型的单子叶植物，喜温暖、光照充足的环境。植株高1.4～2米,有的高达3米以上。根状茎白色,长而横生,节部处生许多须根,老根黄褐色。茎圆柱形,直立,质硬而中实。叶扁平带状,长达1米多,宽2～3厘米,光滑无毛。基部呈长鞘抱茎。香蒲屑叶宽,含纤维量高,含纤维量为35％-60％。

香蒲屑是国际上公认的湿地水生植物优势品种，编织等虽然能够消费部分蒲草，但用量有限。香蒲屑生长繁殖快且生物量大，在我国分布广泛，由于具有适应性广、抗逆性强等优点，目前，香蒲屑在湿地的大量繁殖进而产生的残枝等废弃物，造成了对水体的破坏，并形成对湿地的内源污染。

纤维素是食药用真菌生长所必须的营养物质，也是香蒲屑的主要成分，所以利用香蒲屑栽培菌类，扩大香蒲屑的资源化开发利用技术途径，不仅成为栽培菌类的新型基质，为农民增收创造更多的机遇，而且，有利于湿地生态的良性发展。

在白灵菇(以棉籽皮为主料种植，余同)菌糠的利用方面，作为珍稀菌类，其栽培目前有工厂化生产发展的趋势；无论是自然气候下的栽培，还是工厂化生产的模式，白灵菇对原料的利用率偏低，栽培后的白灵菇菌糠中，不仅还含有大量的未利用碳氮源，而且，菌糠中丰富的菌丝体也是可以利用的资源，因此，菌糠的再利用也是学科内的研究重点。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用香蒲屑为主料，栽培鸡腿菇的方法，减小香蒲屑对水体的破坏。

为了实现本发明所述目的，本发明提供了以下技术方案。

这种利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，包括如下步骤：

A.液体菌种的制备和培养；

B.谷粒菌种的制备和培养；

C.栽培用培养基的制备；

D.无菌条件下，将步骤B制备得到的谷粒菌种接入步骤C制备得到的培养基，进行培养、出菇管理、采收；

创新点是在步骤A或/和步骤B或/和步骤C的培养基中含有香蒲屑。

所述的利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，步骤A中鸡腿菇的液体菌种培养基中作为底物诱导物、提前加入香蒲屑；其优化液体菌种培养基配方重量百分比为：马铃薯20％，香蒲屑5％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH2PO4 0.3％，MgSO4 0.15％，VB1 10mg/L，羧甲基纤维素0.3％，水1000mL，pH自然。

所述利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，所述步骤A中液体菌种的制备步骤是：

a.一级液体菌种的制备

无菌条件下，将市售母种接入一级液体培养基中，26-28℃、160r/min恒温振荡培养7d，即制得一级液体菌种；

所述一级液体菌种培养基包括：以重量百分比计，马铃薯20％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH₂PO₄0.3％，MgSO₄0.15％，CMC 0.3％，VB₁10mg/L；

b.二级液体菌种的制备

无菌条件下，将一级液体菌种以10％的接种量接入二级液体培养基中，26-28℃、160r/min恒温振荡培养7d，即制得二级液体菌种；

所述二级液体菌种培养基配方为：以重量百分比计，马铃薯20％，香蒲屑5％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH₂PO₄0.3％，MgSO₄0.15％，CMC 0.3％，VB₁10mg/L。

所述的利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，步骤B中鸡腿菇的谷粒菌种培养基中也作为底物诱导物、提前加入木屑状香蒲屑；其优化的谷粒菌种培养基配方：麦粒85％，香蒲屑14％，生石灰1％。

所述利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，所述步骤B中谷粒菌种的制备特征在于：

将步骤A得到的二级液体菌种接入谷粒菌种培养基，接种量为10％，26-28℃培养至满，得到谷粒菌种。

所述的利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，步骤C中香蒲屑作为栽培鸡腿菇的主料，栽培培养基重量组成包括：香蒲屑60％、白灵菇菌糠10％、棉籽皮10％、麸皮19％、生石灰1％；制备方法是将香蒲屑、白灵菇菌糠粉碎成木屑状，配以棉籽皮、麸皮和生石灰，料水比为1∶1.4。

所述利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，所述步骤C中香蒲屑培养基的制备方法是：

香蒲屑事先粉碎为木屑状，准确称取香蒲屑培养基的各组成成分，加水混合均匀后，堆闷30min，装入容器内，灭菌，冷却后备用。

所述利用香蒲屑培养基栽培鸡腿菇的方法，步骤D中谷粒菌种的接种量为5-10％。

所述利用香蒲屑培养基栽培鸡腿菇的方法，液体培养基中所用香蒲屑，事先粉碎并过80目筛。

所述利用香蒲屑为主要培养基栽培鸡腿菇的方法，步骤C中香蒲屑培养基的灭菌条件为100℃常压灭菌36h。

本发明创新点在于鸡腿菇的栽培培养基主料为香蒲屑；在液体培养基中提前加入香蒲屑作为底物诱导物，并且采用了鸡腿菇PDA母种-液体菌种-谷粒菌种-香蒲屑出菇袋工艺，可以缩短生产周期近三分之一。技术进步效果在于：

1、对于食用菌而言，为其提供生长所需碳源；

2、香蒲屑目前尚未得到开发利用，资源丰富，用于食用菌生产成本低，经济效益高；

3、从生态的角度来看，减少了对水体的破坏，为食用菌栽培提供了一种价格低廉的栽培原料，不仅避免了湿地的内源污染，而且大幅降低了栽培成本，解决了栽培食用菌资源的紧迫性，具有可观的经济效益，应用前景广阔。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明所述内容做进一步详细的说明。

实施例：利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，鸡腿菇菌种为市场采购。

步骤A.液体菌种的制备

一级液体菌种培养基配方：马铃薯20％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH₂PO₄0.3％，MgSO₄0.15％，VB₁10mg/L，CMC 0.3％，pH自然；

二级液体菌种培养基配方：香蒲屑5％，马铃薯20％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH₂PO₄0.3％，MgSO₄0.15％，VB₁10mg/L，CMC 0.3％，pH自然。

其中，香蒲屑需提前粉碎过80目筛；之后，马铃薯、香蒲屑、白灵菇菌糠混合粉末和麸皮加水1000mL共煮，开锅后保持微沸30分钟，过滤，取滤液，趁热加入其他组分，搅拌化开后，定容至水1000mL，分装，灭菌，待接种。

一级液体菌种制备时使用500mL锥形瓶，装液量为200mL，121℃高压灭菌30min后，无菌条件下接入市售的PDA斜面菌种，每瓶接种量为4块0.5cm×0.5cm菌种块。接种后在28℃、160r/min的条件下，恒温振荡培养7d。

二级液体菌种装液量规格、灭菌条件及培养条件同上，接种量为10％。

将优化得到的二级液体菌种和常规PDA菌种分别接到添加香蒲屑的试管中，对比其发菌速度。对比结果如表1所示。

表1鸡腿菇液体菌种与PDA菌种的发菌速度对比

菌种	发菌速度(mm/d)
		优化的液体菌种	7.18±0.02
常规PDA菌种	4.98±0.01

由表1可知，液体菌种比PDA菌种的发菌速度快，从而缩短生产周期。

步骤B.谷粒菌种的制备

谷粒菌种培养基配方：麦粒85％，香蒲屑14％，生石灰1％。

准确称取培养基各组成成分，料水比1:1.4进行拌料，装入17cm×32cm×0.05cm聚乙烯塑料袋，每袋装干料300g，制备120袋。

将优化得到的二级液体菌种以及未添加香蒲屑的对照组液体菌种分别接入谷粒菌种培养基，分别接种60袋，测定菌长速，并记录满袋时间。

为了考察本发明所述谷粒菌种培养基的优势，本发明进行了对比试验，操作同上，对照组培养基为麦粒培养基：麦粒99％，生石灰1％；

谷粒菌种培养基的优势对比试验结果如表2所示：

表2鸡腿菇谷粒菌种的满袋时间

由表2可知，菌丝在“麦粒+香蒲屑”谷粒培养基比纯麦粒培养基的长速快，这是因为麦粒间隙，随着香蒲屑的添加，更有利于菌丝生长，且在液体培养基中加入香蒲屑，使菌丝能够更快适应生长底物，从而加快发菌速度，缩短生产周期提高生产效率。

步骤C.香蒲屑培养基的制备

按质量比，称取香蒲屑60％、白灵菇菌糠屑10％、棉籽皮10％、麸皮19％、生石灰1％，料水比为1︰1.4进行拌料，混合均匀后，堆闷30min后装入容器中进行灭菌和接种工作。

将上述培养基装入聚乙烯袋、聚丙烯袋、箱子或玻璃瓶内，口径不限，常规扎口，常压灭菌一般以100℃灭菌，保持36-48h；冷却后接种。

香蒲屑的用量进行了试验分析，具体如下：

按表3所示准确称取各组成成分，将其混匀，加水，料水比为1︰1.4，把配置好的培养基装入试管，每个配方重复5次，100℃常压灭菌36-48h。将步骤B所述谷粒菌种分别接入含有培养基的试管中，进行试管营养生长试验。

表3培养基配方(干料，％)

配方	香蒲屑	棉籽皮	白灵菇菌糠	麸皮	生石灰
						P0	0	80	0	19	1
P1	30	40	10	19	1
						P2	40	30	10	19	1
P3	50	20	10	19	1
						P4	60	10	10	19	1
P5	70	0	10	19	1

每隔2天观察一次试管中菌丝的长速和长势情况，用游标卡尺(精确度0.02mm)测定菌丝的长速。菌丝长速长势结果如表4所示。

表4鸡腿菇的菌丝生长情况

配方	菌丝长速(mm/d)	菌丝长势
			P0	7.24±0.01	+++
P4	7.18±0.02	+++
			P3	7.10±0.01	+++

P5	7.06±0.03	++
			P2	6.90±0.04	++
P1	6.82±0.01	++

(注：列出长速均为平均值±标准误；+++表示生长致密，++表示生长较致密，+表示生长一般。)由表4可以看出，随着香蒲屑添加量的增加，菌丝长势较好，洁白、较致密，与纯棉籽皮培养基具有可比性，菌丝在配方P0上生长最快，P4组比纯香蒲屑P5组长速快。

按表3中的配方称取各成分，混合均匀，料水比1︰1.4进行拌料，装入17cm×32cm×0.05cm聚乙烯塑料袋，每袋装干料约300g，

观察并记录各个配方的生长情况并计算生物转化率。试验结果如表5所示。

生物转化率(％)＝(子实体鲜重/培养基干重)×100％

表5鸡腿菇的生物转化率

培养基编号	平均产量(g)	平均生物效率(％)
			P0	286.05	95.35
P4	283.35	94.45
			P3	280.11	93.37
P5	279.33	93.11
			P2	277.44	92.48
P1	276.48	92.16

从表5可以看出，当以香蒲屑为主要碳源达到60％，鸡腿菇的生物转化率分别达到了94.45％，高于纯香蒲屑的生物转化率93.11％，尽管未达到栽培料主料纯棉籽皮的生物转化率95.35％，但具有可比性。综上所述，香蒲屑可以成为鸡腿菇种植中的主料，香蒲屑这一生态污染物也得到了资源化利用，对生态环境建设具有重要意义。

盛装香蒲屑培养基的容器可选用聚乙烯袋、聚丙烯袋、箱子或玻璃瓶。香蒲屑培养基的灭菌条件为100℃常压灭菌36-48h。

D.接种、培养、采收

将灭菌冷却后的出菇袋，无菌操作下按照5-10％的接种量接入步骤B所得谷粒菌种。

当菌丝长满覆土层后，揭去塑料薄膜，保持日光温室内空气相对湿度为85％～90％，并及时通风换气，拉大温差，促进菌丝的倒伏扭结，形成菇蕾。鸡腿菇的出菇期管理主要是控温、保湿和通风。出菇温度控制在15～20℃为宜，较低的温度可刺激菇蕾形成。在13～17℃的温度内，子实体生长慢，质量好；温度超过20℃，子实体生长快，质量差，易感病。出菇期湿度控制在80％～90％，湿度过低时，可向墙壁和作业道喷雾状水，以保持空气湿度。同时需要定期通风，保持空气新鲜，健壮菇体，防止畸形菇产生。出菇期可在黑暗条件下培养，或每天给予微弱的散射光，光线不宜太强。在适宜条件下，经7～8d鸡腿菇子实体基本成熟。

因鸡腿菇生长速度快，开伞后会释放大量的黑孢子，使子实体产生自溶现象，从而失去商品价值。因此，当鸡腿菇菌盖上有少量鳞片、菌柄开始伸长、菌环刚刚松动时，即可采收。一般在七八成熟时采收为佳，采收前4h内不要喷水，以免手捏菇体处变色。采收时，手握菌柄下部轻轻旋转后再拔起。

一潮菇采收后要及时清理料面，将残菇、病菇、死菇、烂菇、病料及其他杂质彻底挖出，移出日光温室外深埋，再补平新土。然后向菌床喷施0.2％～0.3％尿素、0.5％蔗糖、0.5％磷酸二氢钾混合营养液，有明显的增产效果。一般经10d后可出二潮菇。只要管理得当，可采收5～6潮菇。

综上所述，本发明所述香蒲屑可用于栽培鸡腿菇，因此，将香蒲屑作为新原料，用于产业化开发，具有重要的创新意义。

Claims

1.一种利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，包括如下步骤：

A.液体菌种的制备和培养；

B.谷粒菌种的制备和培养；

C.栽培用培养基的制备；

其特征在于：在步骤A或/和步骤B或/和步骤C的培养基中含有香蒲屑。

2.根据权利要求1所述的利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，其特征包括：步骤A中鸡腿菇的液体菌种培养基中作为底物诱导物、提前加入香蒲屑；其优化液体菌种培养基配方重量百分比为：马铃薯20％，香蒲屑5％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH2PO40.3％，MgSO40.15％，VB110mg/L，羧甲基纤维素0.3％，水1000mL，pH自然。

3.根据权利要求2所述利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，所述步骤A中液体菌种的制备特征在于：

a.一级液体菌种的制备

所述一级液体菌种培养基包括：以重量百分比计，马铃薯20％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH₂PO₄ 0.3％，MgSO₄ 0.15％，CMC 0.3％，VB₁ 10mg/L；

b.二级液体菌种的制备

所述二级液体菌种培养基配方为：以重量百分比计，马铃薯20％，香蒲屑5％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH₂PO₄ 0.3％，MgSO₄ 0.15％，CMC 0.3％，VB₁ 10mg/L。

4.根据权利要求1所述的利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，其特征包括：步骤B中鸡腿菇的谷粒菌种培养基中也作为底物诱导物、提前加入木屑状香蒲屑；其优化的谷粒菌种培养基配方：麦粒85％，香蒲屑14％，生石灰1％。

5.根据权利要求4所述利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，所述步骤B中谷粒菌种的制备特征在于：

6.根据权利要求1所述的利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，其特征包括：步骤C中香蒲屑作为栽培鸡腿菇的主料，栽培培养基重量组成包括：香蒲屑60％、白灵菇菌糠10％、棉籽皮10％、麸皮19％、生石灰1％；制备方法是将香蒲屑、白灵菇菌糠粉碎成木屑状，配以棉籽皮、麸皮和生石灰，料水比为1∶1.4。

7.根据权利要求6所述利用香蒲屑培养鸡腿菇的方法，所述步骤C中香蒲屑培养基的制备特征在于：

香蒲屑事先粉碎为木屑状，称取香蒲屑培养基的各组成成分，加水混合均匀后，堆闷30min，装入容器内，灭菌，冷却后备用。

8.根据权利要求1所述利用香蒲屑培养基栽培鸡腿菇的方法，其特征在于，步骤D中谷粒菌种的接种量为5-10％。

9.根据权利要求2所述利用香蒲屑培养基栽培鸡腿菇的方法，其特征在于，液体培养基中所用香蒲屑，事先粉碎并过80目筛。

10.根据权利要求1所述利用香蒲屑培养基栽培鸡腿菇的方法，其特征在于，步骤C中香蒲屑培养基的灭菌条件为100℃常压灭菌36h。