CN104768534A - 制备生物活性植物组合物的方法和由该方法制得的组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及由新鲜植物生物质制备植物部分的方法和由这些部分制得的组合物。该方法包括研磨和压榨新鲜植物生物质以获得含有膜部分的植物细胞汁部分，和利用电磁场在由该细胞汁部分有效分离该膜部分的频率下处理该细胞汁部分，产生基本不含膜部分的细胞质/胞质溶胶部分。上述处理有利地进行使得在该处理期间该细胞汁的温度不超过40℃。

Description

制备生物活性植物组合物的方法和由该方法制得的组合物
发明领域
本发明涉及制备植物部分的方法和由这些部分制得的组合物。
发明背景
在过去的几十年里，医药、化妆品和个人护理工业已包括在多种有益配制剂和产品中使用植物和植物产品。尽管预期该趋势在未来会长久继续下去，但仍需要具有更少副作用且无溶剂并通过环境友好且可持续的方法制备的提高的纯度和活性的更高质量植物成分。
工业总体上已增加其对使用目前可用于工业的许多单一和掺混植物成分的“天然”配制剂的开发和销售的努力的支持。为确保质量、安全性和一致性，例如，化妆品工业已开发并对用于化妆品配制剂的所有引入原料实施各种标准操作程序和严格规格控制。目前许多植物提取物无法符合化妆品工业日益增加的控制和一致性参数。目前植物提取方法限制产品规格参数，从而留下许多质量、性能和相容性的差异性窗口。此外，目前提取方法无法递送植物细胞中存在的全谱活性。因此，由于生物活性植物化妆品成分的提取方法不适当而无法实现基于植物的化妆品配制剂的全部潜力。
目前许多用于由植物提取生物活性组分的方法涉及对植物组织或包含于该组织中的受关注生物活性组分或二者有害的技术。此外，目前许多提取和分离方法得到含有生物或化学污染物的粗制植物提取物，这些污染物可能导致生物活性效力损失、细胞毒性增加和储存寿命缩短。此外，为得到更精制的植物提取物，目前提取方法通常需要使用苛刻化学溶剂。
因此，需要保存生物活性组分的完整性并在不同批次之间产生一致结果的由植物制备生物活性植物组合物的方法。此外，化妆品工业需要能够满足在储存寿命、细胞毒性、质量和性能方面的工业标准的生物活性植物组合物。
发明概述
本发明涉及由新鲜植物生物质制备植物部分的方法和由这些部分制得的组合物。该方法包括研磨(或浸解)和压榨新鲜植物生物质以获得含有膜部分(含有细胞核、或叶绿体、或色质体、或粒线体或其组合)的细胞内植物物质(或植物细胞汁)，和利用电磁波以有效触发由该细胞汁分离该膜部分的频率处理该细胞汁以产生基本不含膜部分的细胞质/胞质溶胶部分(细胞汁的所有残余组分)。有利地上述处理的进行使得在该处理期间该细胞汁的温度不超过40℃。
本发明还涉及来源于新鲜植物的膜部分或细胞质/胞质溶胶部分的植物部分。本发明进一步涉及用于制造植物化妆品组合物的方法以及使用这些组合物的方法。
附图简述
图1为显示用于制备本发明生物活性植物化妆品组合物的方法的一个实施方案的示意图。
发明详述
本发明涉及由新鲜植物生物质制备植物部分的方法和由这些部分制得的组合物。该方法包括研磨(或浸解)和压榨新鲜植物生物质以获得含有膜部分的细胞内植物物质(在本文中称为植物细胞汁)，和利用电磁波以有效触发由该细胞汁部分分离该膜部分的频率处理该细胞汁以产生基本不含膜部分的细胞质/胞质溶胶部分。有利地上述处理的进行使得在该处理期间该细胞汁的温度不超过40℃。
然后可使用膜部分来提供显现抗蛋白水解活性、细胞生长抑制活性和/或抗蛋白水解活性和细胞生长抑制活性二者的稳定植物化妆品组合物，其中抗蛋白水解活性是由于抑制至少一种蛋白酶且细胞生长抑制活性是由于抑制至少一种类型的细胞的细胞生长。
可使用细胞质/胞质溶胶部分来提供适合用作医药配制剂、化妆品配制剂、营养配制剂、治疗配制剂和/或个人护理配制剂等中的组分的植物组合物。
用于制备本发明的植物部分的总体方法
例如，下文参照图1描述用于制备本发明生物活性植物化妆品组合物的总体方法。如图1中所示，收获、收集并洗涤新鲜植物以产生新鲜植物生物质2。对此新鲜植物生物质进行研磨、浸解和压榨4以产生细胞内植物物质(细胞汁)6和富含纤维的物质(压滤饼)8。然后借助尼龙筛网10过滤细胞汁6以产生经过滤的植物细胞汁12。将经过滤的细胞汁12暴露于触发其失稳的频率的电磁波处理14。且然后对失稳细胞汁进行离心18以产生经沉淀的膜部分20和上清液，该上清液为细胞质/胞质溶胶部分30。膜部分20为可添加至化妆品产品中的生物活性植物化妆品组合物，例如如美国专利No.7,442,391、8,101,212、8,277,852和8,318,220中所述。植物细胞质/胞质溶胶部分30用于其他方法，如下文所述。
可任选地对细胞质/胞质溶胶部分30进行其他处理：i、ii、iii或iv，如下文所概述。作为非限制性实例，处理(i)可包括等电沉淀32和后续离心34，以使得能够分离经沉淀的细胞质部分36与含有胞质溶胶部分的上清液38，例如如美国专利No.7,442,391、8,101,212和8,277,852中所述。替换地，可通过(ii)其他电磁处理(频率>7GHz)和后续离心或过滤、或(iii)膜过滤、或(iv)超滤或其组合(i、ii、iii、iv)来进一步分离胞质溶胶/细胞质部分。细胞质/胞质溶胶部分组分可“按原样”使用或可进一步分离并使用。还可用防腐剂和抗氧化剂使其稳定，例如如美国专利No.7,442,391；7,473,435；7,537,791；8,043,635；8,101,212；8,277,852和8,318,220中所述。
用于制备膜衍生的化妆品组合物的方法
在一个实施方案中，用于制备膜衍生的化妆品组合物的方法如下。该方法包括提供已由新鲜植物生物质分离的植物细胞汁。在本申请中通篇所用的“新鲜植物生物质”欲指大部分刚刚收获的植物生物质处于存活状态和/或其尚未经历有意义量的不希望降解。然后在有效触发将植物细胞汁分离成膜部分和细胞汁上清液的条件下处理植物细胞汁。所得膜部分具有抗蛋白水解活性、细胞生长抑制活性或抗蛋白水解活性和细胞生长抑制活性二者。然后在有效产生显现蛋白分解活性、细胞生长抑制活性或蛋白分解活性和细胞生长抑制活性二者的调节的稳定生物活性植物化妆品组合物的条件下转化膜部分，其中蛋白分解活性是由于调节至少一种蛋白酶且细胞生长调节活性是由于调节至少一种类型细胞的细胞生长。
可由所有类型的植物分离植物细胞汁。目前可用作新鲜植物生物质来源的合适植物的实例包括但不限于来自以下各科的植物：海带科(Laminariaceae)、刚毛藻科(Cladophoraceae)、豆科(Fabaceae)、山茶科(Theaceae)、菊科(Asteraceae)、唇形科(Lamiaceae)、百合科(Liliaceae)、禾本科(Poaceae)、桑科(Moraceae)、伞形科(Apiaceae)、马齿苋科(Portulacaceae)、芸香科(Rutaceae)和蔷薇科(Rosaceae)。具体而言，已经测试且发现适合作为新鲜植物生物质来源的特定植物的实例包括海带(Kelp)(巨藻(Macrocystis pyrifera))、绿藻(Green Algae)(硬毛藻属(Chaetomorpha))、紫苜蓿(Alfalfa,Medicago sativa)、红三叶(Red Clover)(红车轴草(Trifolium pratense))、大豆(Soy,Glycine max)、茶树(Tea plant,Camellia sinensis)、万寿菊(Marigold)(金盏花(Calendula officinalis))、菊蒿(Feverfew，Tanacetum parthenium)、德国洋甘菊(GermanChamomile)(母菊(Chamomilla recutita))、熏衣草(Lavender)(狭叶熏衣草(Lavandula angustifolia))、鼠尾草(Sage)(药鼠尾草(Salvia officinalis))、莲(Lotus)(荷(Nelumbo nucifera))、百合(Lily)(珠芽百合(Liliumbulbiferum))、燕麦(Oat,Avena sativa)和大麦(Barley,Hordeum vulgare)、榕属(Ficus)物种(孟加拉榕(Ficus benghalensis)、无花果(Ficus carica)、细叶榕(Ficus microcarpa))、苹果(Apple,Pyrus malus)、蒲公英(Dandelion)(药蒲公英(Taraxacum officinales))、柠檬(Lemon,Citrus limon)、马齿苋(Purslane,Portulaca oleracea)、香芹(Parsley,Petroselinum crispum)。可使用植物的各个部分。例如，可使用许多类型植物的茎和叶组织。对于其他植物而言，可使用花作为用于本发明的植物细胞汁的来源。例如，本发明的一个实施方案使用万寿菊的花组织来分离植物细胞汁。在另一个实施方案中，使用鼠尾草的叶和茎组织。
可使用各种分离技术分离植物细胞汁。然而，该分离技术应产生保留该植物的生物活性组分的植物细胞汁。
制备用于提取植物细胞汁的植物生物质的示例性方法包括收获、收集和洗涤新鲜植物。用于制备新鲜植物生物质所采取的合适步骤包括(例如)下列：(1)保存植物细胞的固有水分含量；(2)在收获地上植物组织期间采用最佳切割高度；(3)在收获期间(例如，在切割地上植物组织期间)保留植物完整性；(4)使植物生物质的生物降解的环境影响和时间因素最小化；和(5)在处理前(例如，在研磨和浸解前)清洁植物生物质。下文论述这些步骤中的每一个。
固有水分含量的保存：
切割的进行应避免由于水分损失造成的凋萎。最佳条件为维持并保存天然水分含量的条件。
最佳和优选切割高度：
应在地面上方至少数厘米处切割植物以限制所收集生物质中土壤和其他碎屑的量。例如，可在地面上方大于或等于5厘米的高度处切割任一给定植物来源的所有可用叶和茎生物质。若使用花组织作为植物生物质来源，则在提取植物细胞汁之前由整株植物分离花。
在收获期间植物完整性的保存：
可通过切割植物的地上茎和叶组织来收获植物生物质。切割以避免或最小化植物的切碎、捣碎、压碎或其他类型损伤的方式进行。对于大规模工业收获而言，若由于所需设备类型而不能避免切碎，则须小心进行以最小化所收集植物中可导致微生物生长、水分损失、增强氧化、聚合、异构化和水解过程(即不希望的分解代谢过程)的损伤。例如，在本发明的一个实施方案中，以整株植物手动切割并收集植物。在另一实施方案中，使用收获设备切割植物组织。在该情况下，每一植物的地上最小切碎高度大于或等于5厘米。此外，在切割期间和切割后应特别注意以最小化损伤。在另一实施方案中，手动收集整株开花植物且然后分离花以用于进一步处理。降解的环境影响和时间因素的最小化：
应最小化切割植物物质至处理设施的递送时间和生物质于日光、高温和其他不利环境因素的暴露以防止如上文所述的不希望降解过程的影响。例如，在本发明的一个实施方案中，用于进一步处理的豆科植物的递送时间距切割时间不超过30分钟。在另一实施方案中，使经历长距离运输的植物以切割后程序处理，包括将植物生物质立刻放置于含有数包冷冻凝胶包的Styrofoam冷却器中以有助于在过夜递送至处理设施期间维持新鲜度和天然水分含量。对来自唇形科和桑科的植物生物质实施这些程序。还可使用实现上文所述结果的其他切割后程序。作为非限制性实例，对于许多植物物种而言，不仅有益地最小化用于处理的递送时间，而且还根据需要通过冷藏来使切割植物物质保持冷却，从而在处理之前和/或处理期间防止和/或最小化不希望降解。
在研磨和浸解前的清洁步骤：
在收获植物组织后进行洗涤步骤以在进一步处理之前由植物去除土壤颗粒和其他碎屑。洗涤在一定条件下使用短持续时间的低压冲洗来实现，以防止引发由生物质释放细胞汁而造成损伤或去除有价值的组分。例如，在本发明的一个实施方案中，植物生物质的洗涤以小于或等于1kg/cm2的水压在小于或等于5分钟内完成。残余水洗液不含任何绿色或黄色颜料，这表明不存在后续损伤。由经洗涤生物质去除过量水以保持接近天然含量的干物质含量。
在如上文所述收获植物组织生物质后，对植物组织生物质进行进一步处理以产生植物细胞汁。在一个实施方案中，对所收获植物组织生物质进行研磨、浸解和压榨以分离细胞内内含物(即细胞汁)，并将其与主要含有细胞壁的富含纤维的压滤饼分离。
合适处理方案的一个实例包括下文所述步骤。可使用锤磨机来研磨植物，以在短时间内产生小尺寸植物组织颗粒且不使生物质温度显著升高。在一个实施方案中，使用经改进的锤磨机以在小于或等于10秒的处理期间产生最大尺寸小于或等于0.5厘米的经浸解植物颗粒，其中生物质温度升高小于或等于5℃。
使经研磨和浸解的植物生物质的暴露最小化以防止如上述的不希望分解代谢过程的影响。在研磨和浸解植物生物质后尽可能快地开始从富含纤维的物质(或压滤饼)中分离出植物细胞汁。在短时间内处理植物生物质且不显著升高温度。在一个实施方案中，紧邻研磨和浸解后使用水平式连续螺旋压机(Compact Press“CP-6”，Vincent公司，FL)压榨植物生物质。将锥体上的压力维持在24kg/cm2水平，螺杆速度为12rpm，且生物质温度升高小于或等于5℃。
初始细胞汁通常含有小纤维颗粒，其可吸附有价值的细胞汁组分并且还堵塞软管和泵。应通过过滤或低速离心来去除上述颗粒。例如，使压榨步骤后所产生的初始细胞汁滤过四层尼龙织物，然后将植物细胞汁用于本发明方法。
在分离植物细胞汁后，植物细胞汁为相对稳定的胶态分散体，其中细胞器呈分散相且细胞质呈连续相。然后根据包括以下的方法处理细胞汁：(1)通过进行“引发膜部分聚集步骤”来触发上述胶态分散体的失稳，产生失稳细胞汁；和(2)对失稳细胞汁混合物进行“膜部分分离步骤”，产生膜部分(含有细胞核、或叶绿体、或色质体、或粒线体、或其组合)和细胞汁上清液。在一个实施方案中，通过使该细胞汁遭受频率大于2.45GHz的电磁波来引发膜部分的失稳。在实现失稳后，进行膜部分分离步骤。该步骤包括(例如)使用分离技术(包括过滤、或离心、或其组合)将失稳细胞汁分离成膜部分和细胞汁上清液。
在本发明方法中可使用多种仪器来产生使细胞汁失稳所需的电磁波：磁控管、功率栅管(power grid tube)、速调管、速调四极管(klystrode)、交叉场放大器、行波管和磁旋管(gyrotron)。一种该仪器包括(但不限于)高功率磁控管。常规和工业磁控管以915MHz和2.45GHz的频率操作。然而，在那些频率下产生可使细胞汁组合物变性的不希望的热量。在本发明的方法中，电磁波以基本高于常规或工业磁控管的频率的频率操作，从而容许使细胞汁失稳而没有由于产生热量导致的不希望变性。在本发明的失稳步骤中，这些电磁波的频率高于常规微波磁控管的频率，即高于2.45GHz；在另一实施方案中大于2.45GHz且小于约7GHz；且在另一实施方案中为约3GHz至约6GHz。在本发明的失稳步骤期间，有益地维持细胞汁的温度低于40℃，在另一实施方案中低于约35℃，在另一实施方案中低于约30℃，在另一实施方案中低于约25℃，在另一实施方案中低于约20℃。
刚刚获得的膜部分(本领域通常称为“蛋白质-维生素浓缩物”)为具有强烈色彩和植物原料来源特有的特殊气味的糊状物。膜部分主要由植物的绿色部分中存在的叶绿体或大部分由花中存在的色质体代表。膜部分的组成主要包括磷脂、膜蛋白、叶绿素、细胞核、粒线体和类胡萝卜素。
制备基本不含膜部分的细胞质/胞质溶胶部分衍生的化妆品组合物的方法
本发明还涉及制备基本不含膜部分的细胞质/胞质溶胶部分衍生的化妆品组合物的方法，这些化妆品组合物显现抗氧化剂活性、细胞生长刺激活性或抗氧化剂活性和细胞生长刺激活性二者。该方法包括提供由新鲜植物生物质分离的细胞汁，如上文对膜衍生的化妆品组合物所述。然后在将植物细胞汁有效分离成膜部分和细胞质/胞质溶胶部分的条件下处理植物细胞汁。
然后可任选地在将该细胞质/胞质溶胶部分有效分离成其组分部分(即细胞质部分和胞质溶胶部分)的条件下进一步处理细胞质/胞质溶胶部分。细胞质部分主要包括白色可溶性蛋白质；在C3植物中，这些蛋白质主要由酶核酮糖-1,5二磷酸羧化酶加氧酶组成。胞质溶胶部分含有低分子量可溶性组分。在有效产生具有抗氧化剂活性、细胞生长刺激活性或抗氧化剂活性和细胞生长刺激活性二者的细胞精华液(cell serum)部分的条件下精制胞质溶胶部分。在有效产生显现抗氧化剂活性、细胞生长刺激活性或抗氧化剂活性和细胞生长刺激活性二者的稳定生物活性植物化妆品组合物的条件下稳定细胞精华液部分，例如如美国专利7,442,391；7,473,435；7,537,791；8,043,635；8,101,212；8,277,852和8,318,220中所述。
植物细胞汁可由所有类型植物获得。目前可用作新鲜植物生物质来源的合适植物的实例包括但不限于来自以下科的植物：海带科、刚毛藻科、豆科、山茶科、菊科、唇形科、百合科、禾本科、桑科、伞形科、马齿苋科、芸香科和蔷薇科。具体而言，已经测试且发现适合作为新鲜植物生物质来源的特定植物的实例包括海带(巨藻)、绿藻(硬毛藻属)、紫苜蓿、红三叶(红车轴草)、大豆、茶树、万寿菊(金盏花)、菊蒿、德国洋甘菊(母菊)、熏衣草(狭叶熏衣草)、鼠尾草(药鼠尾草)、莲(荷)、百合(珠芽百合)、燕麦和大麦、榕属物种(孟加拉榕、无花果、细叶榕)、苹果、蒲公英(药蒲公英)、柠檬、马齿苋、香芹。可使用植物的各个部分。例如，可使用许多类型植物的茎和叶组织。对于其他植物而言，可使用花作为用于本发明的植物细胞汁的来源。例如，本发明的一个实施方案使用万寿菊的花组织来分离植物细胞汁。在另一实施方案中，使用鼠尾草的叶和茎组织。
如上文所述，在将植物细胞汁分离成膜部分和细胞汁上清液(即细胞质/胞质溶胶部分30)后，对该细胞汁上清液进行其他处理：i、ii、iii或iv(图1)，从而使得能够分离细胞质部分与胞质溶胶部分。
评价细胞质部分完全分离的定量准则为在胞质溶胶部分中不存在可检测量的高分子量蛋白质和/或不存在核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶加氧酶。
胞质溶胶部分为透明液体，其具有浅黄色和轻微特征性气味。在数小时内，不稳定胞质溶胶部分不可逆地转变成含有重质沉淀和强烈非特征性气味的深褐色悬浮液。因此，胞质溶胶部分不能用作化妆品成分。下文所述程序使得可精制胞质溶胶部分，从而产生稳定的活性精华液部分，其为稳定化妆品成分。这通过由胞质溶胶部分去除导致产生不希望沉淀且使颜色和气味劣化的不可逆转变的主要组分来完成。该程序包括：pH调节、热处理、冷却、真空过滤和稳定，如美国专利No.7,442,391、8,101,212、8,277,852和8,318,220中所述，其均以引用方式并入本文中。
在产生细胞精华液部分后，然后对其进行稳定步骤以产生精华液衍生的化妆品组合物。在一个实施方案中，稳定步骤包括在至少一种防腐剂与至少一种抗氧化剂的混合物中温育细胞精华液部分以产生经稳定的细胞精华液部分。适合用于本发明的防腐剂包括(例如)山梨酸钾、苯甲酸钠、对羟基苯甲酸甲酯钠和柠檬酸。适合用于本发明的抗氧化剂的实例为偏亚硫酸氢钠。
实施例
尽管本文已详细说明并阐述优选实施方案，但本领域技术人员应理解可在不背离本发明的精神的情况下做出各种修改、增添、替换等且其因此被视为在如下文权利要求书中所界定的本发明范围内。
实施例1(频率)
由下列新鲜植物分离细胞汁：香芹、蒲公英(药蒲公英)、菊蒿、德国洋甘菊(母菊)、万寿菊(金盏花)、紫苜蓿、红三叶(红车轴草)、大豆、熏衣草(狭叶熏衣草)、鼠尾草(药鼠尾草)、海带(巨藻)、百合(珠芽百合)、莲(荷)、孟加拉榕、无花果、细叶榕、大麦、燕麦、马齿苋、苹果、柠檬、茶树。
细胞汁如美国专利No.7,442,391中所述制备，该专利以引用方式并入本文中。这些细胞汁呈胶态分散体，其在低速离心(3,000g×20分钟)后保持其稳定性。将这些细胞汁暴露于使用宽带介电光谱仪控制的磁控管脉冲处理。继续处理直至细胞汁失稳，即变得可通过低速离心(3,000g×20min)分离成沉淀物(膜部分)和相应不含叶绿素的透明上清液(细胞质/胞质溶胶部分)。在上述处理和后续分离期间，细胞汁的温度≤37℃。实验数据汇总显示于表1中。
表1
*)-欲测定。还没有可靠实验数据。
使用细胞汁上清液(细胞质/胞质溶胶部分)进行进一步处理。
实施例2(介电常数降低)
由下列新鲜植物分离细胞汁：香芹、蒲公英(药蒲公英)、菊蒿、德国洋甘菊(母菊)、万寿菊(金盏花)、紫苜蓿、红三叶(红车轴草)、大豆、熏衣草(狭叶熏衣草)、鼠尾草(药鼠尾草)、海带(巨藻)、百合(珠芽百合)、莲(荷)、孟加拉榕、无花果、细叶榕、大麦、燕麦、马齿苋、苹果、柠檬、茶树。
细胞汁如美国专利No.7,442,391中所述制备，该专利也以引用方式并入本文中。这些细胞汁呈胶态分散体，其在低速离心(3,000g×20分钟)后保持其稳定性。将这些细胞汁暴露于使用宽带介电光谱仪控制的短期(10秒至1分钟)磁控管脉冲处理。继续处理直至介电常数(Δε0)的值实现一定程度的降低，该值在低频率和所施加场的最小介电损失下由柯尔-柯尔曲线图(Cole-Cole plot)外推得到。将细胞汁分离成膜部分和相应细胞质/胞质溶胶部分所需的磁控管频率和Δε0的值显示于表2中。在这些条件下，发现细胞汁的低速离心(3,000g×20分钟)足以完全分离含有叶绿素的沉淀物(膜部分)与不含叶绿素的透明上清液(细胞质/胞质溶胶部分)。在上述处理和后续分离期间，细胞汁的温度≤37℃。实验数据汇总显示于表2中。
表2
*)-欲测定。还没有可靠实验数据。
使用细胞汁上清液(细胞质/胞质溶胶部分)进行进一步处理。
实施例3(表面电位降低).
由下列新鲜植物分离细胞汁：香芹、蒲公英(药蒲公英)、菊蒿、德国洋甘菊(母菊)、万寿菊(金盏花)、紫苜蓿、红三叶(红车轴草)、大豆、熏衣草(狭叶熏衣草)、鼠尾草(药鼠尾草)、海带(巨藻)、百合(珠芽百合)、莲(荷)、孟加拉榕、无花果、细叶榕、大麦、燕麦、马齿苋、苹果、柠檬、茶树。
细胞汁如美国专利7,442,391中所述制备。这些细胞汁呈胶态分散体，其在低速离心(3,000g×20分钟)后保持其稳定性。将这些细胞汁暴露于使用宽带介电光谱仪控制的短期(10秒至1分钟)磁控管脉冲处理。继续处理直至细胞汁的表面电位值实现一定程度的降低，该值用开尔文探针振动式电容器(Kelvin Probe vibro-capacitor)测量。将细胞汁分离成膜部分和相应细胞质/胞质溶胶部分的磁控管频率和表面电位值(ΔSP)降低的值显示于表3中。在这些条件下，发现细胞汁的低速离心(3,000g×20分钟)足以完全分离含有叶绿素的沉淀物(膜部分)与不含叶绿素的透明上清液(细胞质/胞质溶胶部分)。在上述处理和后续分离期间，细胞汁的温度≤37℃。实验数据汇总显示于表3中。
表3
使用细胞汁上清液(细胞质/胞质溶胶部分)进行进一步处理。

Claims (20)

1.一种由来源于新鲜植物生物质的植物细胞汁制备植物部分的方法，其中该方法包括使该植物细胞汁遭受频率大于2.45GHz的电磁场并保持有效使该植物细胞汁失稳的时间，得到包含凝结膜部分的凝结细胞汁混合物；和由该凝结细胞汁混合物分离该凝结膜部分，以产生包含基本不含该膜部分的细胞质/胞质溶胶部分的生物活性部分。
2.根据权利要求1的方法，其中将该细胞汁的温度维持在40℃或其以下。
3.根据权利要求1的方法，其中通过使该植物细胞汁遭受频率大于2.45GHz至约7.0GHz的电磁场而使该植物细胞汁失稳。
4.根据权利要求3的方法，其中该电磁场由高功率磁控管产生。
5.根据权利要求1的方法，其中通过过滤或离心来进行该凝结膜部分的分离。
6.根据权利要求3的方法，其中该电磁场的频率为大于2.5GHz至约7.0GHz。
7.根据权利要求6的方法，其中该电磁场的频率为大于3.0GHz至约6.0GHz。
8.根据权利要求7的方法，其中将该细胞汁的温度维持在30℃或其以下。
9.根据权利要求8的方法，其中将该细胞汁的温度维持在25℃或其以下。
10.根据权利要求1的方法，其中通过在至少一种防腐剂与至少一种抗氧化剂的混合物中温育该细胞质/胞质溶胶部分来稳定该细胞质/胞质溶胶部分，以产生稳定生物活性植物化妆品组合物。
11.根据权利要求10的方法，其中该防腐剂选自山梨酸钾、苯甲酸钠、对羟基苯甲酸甲酯钠和柠檬酸。
12.根据权利要求10的方法，其中该抗氧化剂为偏亚硫酸氢钠。
13.根据权利要求1的方法，其中该新鲜植物生物质来源于选自海带科(Laminariaceae)、刚毛藻科(Cladophoraceae)、豆科(Fabeaceae)、山茶科(Theaceae)、菊科(Asteraceae)、唇形科(Lamiaceae)、百合科(Liliaceae)、禾本科(Poaceae)和桑科(Moraceae)的植物科。
14.根据权利要求1的方法，其中该新鲜植物生物质选自巨藻(Macrocystis pyrifera)、硬毛藻属(Chaetomorpha)、紫苜蓿(Medicagosativa)、红车轴草(Trifolium pratense)、大豆(Glycine max)、茶树(Camelliasinensis)、金盏花(Calendula officinalis)、菊蒿(Tanacetum parthenium)、母菊(Chamomilla recutita)、狭叶熏衣草(Lavandula angustifolia)、药鼠尾草(Salvia officinalis)、荷(Nelumbo nucifera)、珠芽百合(Liliumbulbiferum)、燕麦(Avena sativa)和大麦(Hordeum vulgare)。
15.根据权利要求1的方法，其中该生物活性部分包含凝结膜部分。
16.一种稳定的生物活性植物化妆品组合物，包含有效量的权利要求1的基本不含膜部分的细胞质/胞质溶胶部分。
17.一种稳定的生物活性植物化妆品组合物，包含有效量的权利要求1的膜部分。
18.根据权利要求1的方法，其中该方法基本不含经添加的外来溶剂，基本不含经添加的外来水，或基本不含经添加的外来溶剂和经添加的外来水二者。
19.根据权利要求18的方法，其中该方法不含经添加的外来溶剂和经添加的水。
20.根据权利要求6的方法，其中该电磁场的频率为大于3.5GHz至约6.0GHz。
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