JP2015536966A - 生物活性植物組成物を調製するための方法および該方法から作製された組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
例えば、本発明の生物活性植物美容製品組成物を調製するための全体的プロセスを、図1を参照して以下に記載する。図1に描示するように、新鮮な植物を収穫し、採取し、洗浄して、新鮮な植物バイオマス2を得る。この新鮮な植物バイオマスを、粉砕、浸軟、および圧縮4にかけ、細胞内植物材料(細胞ジュース)6および繊維に富む材料(プレスケーキ)8を得る。次いで、細胞ジュース6をナイロンメッシュ10を通して濾過し、濾過された植物細胞ジュース12を得る。濾過された細胞ジュース12を、その脱安定化を誘発する周波数での電磁波処理14に曝露する。次いで、脱安定化された細胞ジュースを、沈殿膜画分20と、細胞質/細胞質ゾル画分30である上清とを得るために、遠心分離18にかける。膜画分20は、例えば、米国特許第7,442,391号、第8,101,212号、第8,277,852号および第8,318,220号に記載のような美容製品に添加することができる生物活性植物美容製品組成物である。植物細胞質/細胞質ゾル画分30を、以下に記載のように、さらなるプロセスのために用いる。
一実施形態においては、膜由来美容製品組成物を調製するためのプロセスは、以下の通りである。この方法は、新鮮な植物バイオマスから分離された植物細胞ジュースを提供することを含む。本出願を通して用いられる「新鮮な植物バイオマス」は、新鮮に収穫された植物バイオマスの大部分が生きている状態にある、および/またはそれが意味のある量の望ましくない分解を受けていないことを意味することが意図される。次いで、植物細胞ジュースを膜画分と細胞ジュース上清への分離を誘発するのに有効な条件下でそれを処理する。得られる膜画分は、抗タンパク質分解活性、細胞増殖阻害活性、または抗タンパク質分解活性と細胞増殖阻害活性の両方を有する。次いで、膜画分を、タンパク質分解活性、細胞増殖阻害活性、またはタンパク質分解活性と細胞増殖阻害活性の両方の調節を示す安定な生物活性植物美容製品組成物を得るのに有効な条件下で変換し、ここで、タンパク質分解活性は少なくとも1つのプロテイナーゼの調節によるものであり、細胞増殖調節活性は少なくとも1つの細胞型の細胞増殖の調節によるものである。
切断を行って、水分喪失に起因するしおれを回避するべきである。最適な条件は、自然水分含量が維持および保持されるものである。
植物を地上少なくとも数センチメートルで切断して、採取されたバイオマス中の土壌および他の破片の量を制限するべきである。例えば、任意の所与の植物供給源の全ての使用可能な葉および茎バイオマスを、地上5センチメートル以上の高さで切断してもよい。植物バイオマス供給源として花組織を用いる場合、植物細胞ジュースの抽出前に植物全体から花を分離する。
植物バイオマスの収穫は、植物の茎および葉組織の地上部を切断することによるものであってもよい。この切断は、植物の細断、すりつぶし、粉砕、または他の型の損傷を回避または最小化する様式で行う。大規模工業的収穫のためには、必要とされる装備の種類に起因する細断を回避することができない場合、採取された植物における微生物増殖、水分喪失、酸化の強化、重合化、異性化、および加水分解プロセス(すなわち、望ましくない異化プロセス)をもたらし得る損傷を最小化するように注意を払う。例えば、本発明の一実施形態においては、植物を、植物全体として手で切断および採取する。別の実施形態においては、植物組織を、収穫装備を用いて切断する。その場合、それぞれの植物に関する地上部の最小細断高さは、5センチメートル以上である。さらに、切断の間および後の損傷を最小化するように特に注意を払う。別の実施形態においては、開花している植物全体を手で採取した後、さらなる加工のため花を分離する。
切断された植物材料の加工施設への送達時間ならびにバイオマスの太陽、高温、および他の負の環境因子への曝露を最小化して、上記のように望ましくない分解プロセスの影響を防止するべきである。例えば、本発明の一実施形態においては、さらなる加工のためのマメ科(Fabeaceae)植物に関する送達時間は、切断の時点から30分を超えない。別の実施形態においては、長距離輸送を受ける植物を、加工施設への一晩の送達中に新鮮さおよび自然水分含量を維持するのに役立つ凍結ゲルパックの袋を含む発泡スチレンクーラーに植物バイオマスをすぐに入れることを含む切断後手順に処理する。これらの手順を、シソ科(Lamiaceae)およびクワ科(Moraceae)に由来する植物バイオマスのために行った。上記のような結果を達成する他の切断後手順を同様に用いることができる。非限定例として、多くの植物種について、加工のための送達時間を最小化するだけでなく、必要に応じて冷蔵により、切断された植物材料を冷たく保持して、加工前および/または加工中の望ましくない分解を防止および/または最小化することが有益である。
植物組織が収穫されたら、さらなる加工の前に植物から土壌粒子および他の破片を除去するための洗浄ステップを実施する。洗浄を、バイオマスからの細胞ジュースの放出の開始を防止する、損傷を引き起こす、または有益な成分を除去する条件下で短期間にわたる低圧リンスを用いて達成する。例えば、本発明の一実施形態においては、植物バイオマスの洗浄を、1kg/cm2以下の水圧で5分以下で達成した。残留水洗浄は、緑色または黄色の色素を含有しなかったが、これはその後の損傷が存在しないことを示す。過剰の水を、自然レベルに近い乾燥物質含量を保持するために、洗浄したバイオマスから除去する。
本発明はまた、酸化防止活性、細胞増殖刺激活性、または酸化防止活性と細胞増殖刺激活性の両方を示す、膜画分を実質的に含まない細胞質/細胞質ゾル画分由来美容製品組成物を調製するための方法にも関する。この方法は、膜由来美容製品組成物に関して既に上記されたように、新鮮な植物バイオマスから分離された細胞ジュースを提供することを含む。次いで、植物細胞ジュースを膜画分と、細胞質/細胞質ゾル画分とに分離するのに有効な条件下で、植物細胞ジュースを処理する。
新鮮なパセリ(ペトロセリナム・クリスパム(Petroselinum crispum))、タンポポ(タラキサカム・オフィシナレス(Traxacam officinalis))、夏白菊(クリサンテマム・パルテニウム(Chrysanthemum parthenium))、ジャーマンカモミール(カモミラ・レクチタ(Chamomilla recutita))、マリーゴールド(カレンデュラ・オフィシナリス(Calendula officinalis))、アルファルファ(メジカゴ・サティバ(Medicago sativa))、レッドクローバー(トリフォリウム・プラテンセ(Trifolium pratense))、ダイズ(グリシン・マックス(Glycine max))、ラベンダー(ラバンデュラ・アングスチフォリア(Lavandula angustifolia))、セージ(サルビア・オフィシナリス(Salvia officinale))、コンブ(マクロシスティス・ピリフェラ(Macrosystis pyrifera))、ユリ(リリウム・ブルビフェルム(Lilium bulbiferum))、蓮(ネルンボ・ヌシフェラ(Nelumbo nucifera))、イチジク(フィクス・ベンガレンシス(Ficus benghalensis)、フィクス・カリカ(Ficus carica)、フィクス・ミクロカルパ(Ficus microcarpa))、オオムギ(ホルデウム・ブルガレ(Hordeum vulgare))、オートムギ(アベナ・サティバ(Avena sativa))、スベリヒユ(ポルツラカ・オレラセア(Portulaca oleracea))、リンゴ(ピルス・マルス(Pyrus malus))、レモン(シトラス・リモン(Citrus limon))、茶植物(カメリア・シネンシス(Camellia sinensis))からの細胞ジュースの分離。細胞ジュースを、参照により本明細書に組込まれる米国特許第7,442,391号に記載のように調製した。これらの細胞ジュースは、低速遠心分離(3,000gx20分)後にその安定性を保持するコロイド性分散液であった。これらの細胞ジュースを、広帯域誘電分光計制御を用いるマグネトロンパルス処理に曝露した。この処理を、細胞ジュースが脱安定化されるまで、すなわち、沈殿物(膜画分)と、対応する葉緑素を含まない透明な上清(細胞質/細胞質ゾル画分)とに低速遠心分離(3,000gx20min)により分離可能となるまで継続した。上記処理中および分離後に、細胞ジュースの温度は37℃以下であった。実験データの概要を、表1に提示する。
新鮮なパセリ(ペトロセリナム・クリスパム(Petroselinum crispum))、タンポポ(タラキサカム・オフィシナレス(Traxacam officinalis))、夏白菊(クリサンテマム・パルテニウム(Chrysanthemum parthenium))、ジャーマンカモミール(カモミラ・レクチタ(Chamomilla recutita))、マリーゴールド(カレンデュラ・オフィシナリス(Calendula offiinalis))、アルファルファ(メジカゴ・サティバ(Medicago sativa))、レッドクローバー(トリフォリウム・プラテンセ(Trifolium pratense))、ダイズ(グリシン・マックス(Glycine max))、ラベンダー(ラバンデュラ・アングスチフォリア(Lavandula angustifolia))、セージ(サルビア・オフィシナリス(Salvia officinale))、コンブ(マクロシスティス・ピリフェラ(Macrosystis pyrifera))、ユリ(リリウム・ブルビフェルム(Lilium bulbiferum))、蓮(ネルンボ・ヌシフェラ(Nelumbo nucifera))、イチジク(フィクス・ベンガレンシス(Ficus benghalensis)、フィクス・カリカ(Ficus carica)、フィクス・ミクロカルパ(Ficus microcarpa))、オオムギ(ホルデウム・ブルガレ(Hordeum vulgare))、オートムギ(アベナ・サティバ(Avena sativa))、スベリヒユ(ポルツラカ・オレラセア(Portulaca oleracea))、リンゴ(ピルス・マルス(Pyrus malus))、レモン(シトラス・リモン(Citrus limon))、茶植物(カメリア・シネンシス(Camellia sinensis))からの細胞ジュースの分離。細胞ジュースを、参照により本明細書に再び組込まれる米国特許第7,442,391号に記載のように調製した。これらの細胞ジュースは、低速遠心分離(3,000gx20分)後にその安定性を保持するコロイド性分散液であった。これらの細胞ジュースを、広帯域誘電分光計制御を用いる短時間(10秒から1分間)のマグネトロンパルス処理に曝露した。この処理を、低周波数でのCole−Coleプロットおよび印加された電界の最小誘電損失から外挿された誘電率(Δε0)の値のある特定の低下が達成されるまで継続した。マグネトロン周波数および細胞ジュースの膜画分と対応する細胞質/細胞質ゾル画分への分離にとって必要とされるΔε0の値を、表2に提示する。これらの条件で、細胞ジュースの低速遠心分離(3,000gx20分)は、葉緑素を含まない透明な上清(細胞質/細胞質ゾル画分)からの葉緑素を含有する沈殿物(膜画分)の完全な分離にとって十分なものであることがわかった。上記処理中および分離後に、細胞ジュースの温度は37℃以下であった。実験データの概要を、表2に提示する。
新鮮なパセリ(ペトロセリナム・クリスパム(Petroselinum crispum))、タンポポ(タラキサカム・オフィシナレス(Taraxacum officinalis))、夏白菊(クリサンテマム・パルテニウム(Chrysanthemum parthenium))、ジャーマンカモミール(カモミラ・レクチタ(Chamomilla recutita))、マリーゴールド(カレンデュラ・オフィシナリス(Calendula offiinalis))、アルファルファ(メジカゴ・サティバ(Medicago sativa))、レッドクローバー(トリフォリウム・プラテンセ(Trifolium pratense))、ダイズ(グリシン・マックス(Glycine max))、ラベンダー(ラバンデュラ・アングスチフォリア(Lavandula angustifolia))、セージ(サルビア・オフィシナリス(Salvia officinale))、コンブ(マクロシスティス・ピリフェラ(Macrosystis pyrifera))、ユリ(リリウム・ブルビフェルム(Lilium bulbiferum))、蓮(ネルンボ・ヌシフェラ(Nelumbo nucifera))、イチジク(フィクス・ベンガレンシス(Ficus benghalensis)、フィクス・カリカ(Ficus carica)、フィクス・ミクロカルパ(Ficus microcarpa))、オオムギ(ホルデウム・ブルガレ(Hordeum vulgare))、オートムギ(アベナ・サティバ(Avena sativa))、スベリヒユ(ポルツラカ・オレラセア(Portulaca oleracea))、リンゴ(ピルス・マルス(Pyrus malus))、レモン(シトラス・リモン(Citrus limon))、茶植物(カメリア・シネンシス(Camellia sinensis))からの細胞ジュースの分離。細胞ジュースを、米国特許第7,442,391号に記載のように調製した。これらの細胞ジュースは、低速遠心分離(3,000gx20分)後にその安定性を保持するコロイド性分散液であった。これらの細胞ジュースを、広帯域誘電分光計制御を用いる短時間(10秒から1分間)のマグネトロンパルス処理に曝露した。この処理を、Kelvin Probe vibro−capacitorを用いて測定された細胞ジュースの表面電位の値のある特定の低下が達成されるまで継続した。マグネトロン周波数および細胞ジュースの膜画分と対応する細胞質/細胞質ゾル画分への分離に必要とされる表面電位値の低下(ΔSP)の値を、表3に提示する。これらの条件で、細胞ジュースの低速遠心分離(3,000gx20分)は、葉緑素を含まない透明な上清(細胞質/細胞質ゾル画分)からの葉緑素を含有する沈殿物(膜画分)の完全な分離にとって十分なものであることがわかった。上記処理中および分離後に、細胞ジュースの温度は37℃以下であった。実験データの概要を、表3に提示する。
4 粉砕、浸軟および圧縮
6 細胞ジュース
8 圧縮ケーキ
10 ナイロンを通した濾過
12 濾過された細胞ジュース
14 電磁波処理
16 遠心分離
20 膜画分(沈殿物)
22 ポリマーマトリックス中への組込み(米国特許第7,442,391号)
30 細胞質/細胞質ゾル画分(上清)
32 等電点沈殿、分離、精製(米国特許第744,391号)
34 遠心分離
36 細胞質画分(沈殿物)
38 細胞質ゾル画分(上清)
Claims (20)
- 新鮮な植物バイオマスに由来する植物細胞ジュースからの植物画分の調製のための方法であって、前記植物細胞ジュースを、植物細胞ジュースを脱安定化するのに有効な時間にわたって、2.45GHzを超える周波数の電磁場にかけ、凝集した膜画分を含む凝集した細胞ジュース混合物を得ること、および前記凝集した細胞ジュース混合物から前記凝集した膜画分を、前記膜画分を実質的に含まない細胞質/細胞質ゾル画分を含む生物活性画分を得るために、分離することを含む、前記方法。
- 前記細胞ジュースの温度が40℃以下に維持される、請求項1に記載の方法。
- 前記植物細胞ジュースが、前記植物細胞ジュースを2.45GHzを超えるものから約7.0GHzの周波数の電磁場にかけることによって脱安定化される、請求項1に記載の方法。
- 前記電磁場を高出力マグネトロンにより発生する、請求項3に記載の方法。
- 前記凝集した膜画分の前記分離が、濾過または遠心分離によって行われる、請求項1に記載の方法。
- 前記電磁場の周波数が2.5GHzを超えるものから約7.0GHzである、請求項3に記載の方法。
- 前記電磁場の周波数が3.0GHzを超えるものから約6.0GHzである、請求項6に記載の方法。
- 前記細胞ジュースの温度が30℃以下に維持される、請求項7に記載の方法。
- 前記細胞ジュースの温度が25℃以下に維持される、請求項8に記載の方法。
- 前記細胞質/細胞質ゾル画分が、少なくとも1つの保存剤と少なくとも1つの酸化防止剤との混合物中で前記細胞質/細胞質ゾル画分をインキュベートすることにより安定化されて、安定な生物活性植物美容製品組成物を得られる、請求項1に記載の方法。
- 前記保存剤が、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、メチルパラベンナトリウム、およびクエン酸からなる群から選択される、請求項10に記載の方法。
- 前記酸化防止剤がメタ重亜硫酸ナトリウムである、請求項10に記載の方法。
- 前記新鮮な植物バイオマスが、コンブ科(Laminariaceae)、シオグサ科(Cladophoraceae)、マメ科(Fabeaceae)、ツバキ科(Theaceae)、キク科(Asteraceae)、シソ科(Lamiaceae)、ユリ科(Liliaceae)、イネ科(Poaceae)およびクワ科(Moraceae)から選択される植物の科に由来する、請求項1に記載の方法。
- 前記新鮮な植物バイオマスが、マクロシスティス・ピリフェラ(Macrocystis porifera)、シャエトモルファ(Chaetomorpha)、メジカゴ・サティバ(Medicago sativa)、トリフォリウム・プラテンセ(Trifolium pratense)、グリシン・マックス(Glycine max)、カメリア・シネンシス(Camellia sinensis)、カレンデュラ・オフィシナリス(Calendula officinalis)、タナセタム・パルテニウム(Tanacetum parthenium)、カモミラ・レクチタ(Chamomilla recutita)、ラバンデュラ・アングスチフォリア(Lavandula angustifolia)、サルビア・オフィシナリス(Salvia officinalis)、ネルンボ・ヌシフェラ(Nelumbo nucifera)、リリウム・ブルビフェルム(Lilium bulbiferum)、アベナ・サティバ(Avena sativa)およびホルデウム・ブルガレ(Hordeum vulgare)からなる群から選択される、請求項1に記載の方法。
- 前記生物活性画分が凝集した膜画分を含む、請求項1に記載の方法。
- 請求項1に記載の膜画分を実質的に含まない有効量の細胞質/細胞質ゾル画分を含む安定な生物活性植物美容製品組成物。
- 有効量の請求項1に記載の膜画分を含む安定な生物活性植物美容製品組成物。
- 前記方法が外来の溶媒の添加を実質的に含まない、外来の水の添加を実質的に含まない、または外来の溶媒の添加と外来の水の添加の両方を実質的に含まない、請求項1に記載の方法。
- 前記方法が、外来の溶媒の添加と水の添加を含まない、請求項18に記載の方法。
- 前記電磁場の周波数が、3.5GHzを超えるものから約6.0GHzである、請求項6に記載の方法。
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