CN104189041B - 一种提取人参皂苷的方法及制备得到的人参皂苷提取物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种提取人参皂苷的方法，包括以下步骤：原料处理；提取溶剂提取；提取液处理；树脂吸附精制；碱洗脱杂；成分洗脱；洗脱液脱色；浓缩等步骤。本发明方法采用特定的碱洗脱杂工艺，并结合相应的水提或醇提方法，使制备得到的人参皂苷提取物的产品收率大大提高，达到7～7.5％，并且人参皂苷(Rb1+Rb2+Rc+Rd+Re+Rg1)含量≥45％。
Description
技术领域
本发明属于中药提取的技术领域，具体涉及一种提取人参皂苷的方法及制备得到的人参皂苷提取物。
背景技术
人参皂苷(Ginsenoside)是一种固醇类化合物，三萜皂苷。主要存在于人参属药材中。人参皂苷被视为是人参中的活性成分，因而成为研究的目标。
人参茎叶总皂苷是由人参的干燥茎叶经加工制成的总皂苷，微臭，味苦。主要成份有人参皂苷Rg 1、Re、Rc、Rb 1、Rb 2、Rd等，具有滋补强壮，安神益智，增强免疫的功能。
传统的人参皂苷提取方法主要有水提或者醇提，制备得到总皂苷。这种传统的回流提取工艺存在耗能大，收率低，成本高，人参皂苷含量低等缺点。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种提取人参皂苷的方法，该方法采用特定的碱洗脱杂工艺，并结合相应的水提或醇提方法，使制备得到的人参皂苷提取物的产品收率大大提高，达到7～7.5％，并且人参皂苷(Rb1+Rb2+Rc+Rd+Re+Rg1)含量≥45％。
本发明解决上述技术所采用的技术方案如下：一种提取人参皂苷的方法，包括以下步骤：
步骤一、原料处理：人参茎叶去除异物后粉碎切段，作为原料；
步骤二、提取溶剂提取：将处理好的原料投入到提取罐中，加入提取溶剂强制循环提取，每批原料重复提取3次，合并提取液；所述提取溶剂为水或甲醇溶液或乙醇溶液；
步骤三、提取液处理：当水为提取溶剂时，合并所述步骤二制备的提取液经过板框压滤后，得到水提取过滤液；当甲醇溶液或乙醇溶液为提取溶剂时，合并所述步骤二制备的提取液经过真空减压浓缩至醇度≤1％，回收溶剂可重复利用，浓缩液用水稀释到固含量≤5％，经过板框压滤后，得到醇提取浓缩过滤液；
步骤四、树脂吸附精制：将所述步骤三制备的水提取过滤液或醇提取浓缩过滤液上到装有大孔吸附树脂的柱子上，上样量为树脂重量等量人参茎叶原料所获得的水提取过滤液或醇提取浓缩过滤液；上样流速控制在每小时2个柱床体积；此处步骤四中，上样量为树脂重量等量人参茎叶原料所获得的水提取过滤液或醇提取浓缩过滤液，既能避免有效成分流失，又能尽可能地提高产品收率。
步骤五、碱洗脱杂：所述步骤四上完过滤液后，用碱液上到吸附柱上进行杂质脱除，碱液量为树脂重量的5～7倍量，流速控制在每小时1～1.2个柱床体积；上完碱液后用纯净水将柱内残留的碱液洗脱置换出来，至水洗流出液pH≤8；所述碱液为0.05～0.1mol/L的氨水溶液或同等当量的氢氧化钠或氢氧化钾溶液；此步骤五中，0.05～0.1mol/L的氨水溶液能有效降低有杂质分在树脂上的吸附能力，使其融入碱液中进行脱除，同时，又能尽可能地减少有效成分人参皂苷的流失；碱液量过多会使有效成分流失，过少则脱杂质不充分。
步骤六、成分洗脱：用质量分数65～75％的乙醇解析树脂吸附的人参皂苷有效成分，洗脱液量为树脂重的6～7倍量，洗脱流速控制在每小时1～1.2个柱床体积，收集得人参皂苷洗脱液；此步骤六中，乙醇浓度过低有效成分洗脱不充分，过高不利于生产控制。
步骤七、洗脱液脱色：将步骤六收集到的人参皂苷洗脱液投入到脱色罐中，然后加入洗脱液相应折合人参茎叶原料重量10％的氧化镁进行搅拌回流脱色1～1.5h，然后进行板框过滤、洗涤，收集合并得到氧化镁脱色过滤液及洗涤液；
步骤八、浓缩：将所述步骤七得到的氧化镁脱色过滤液及洗涤液进行真空减压浓缩，浓缩温度≤80℃，浓缩真空度≤-0.08MPa，浓缩至浓缩膏比重1.1～1.15，回收乙醇可重复利用。
优选地，所述步骤一中，人参茎叶经过筛选去除铁丝、杂草、泥沙等异物后进行粉碎切段，并且粉碎切段大小为≤3cm。更优选地，所述粉碎切断大小为2～3cm。
优选地，所述步骤二中的提取溶剂，所述甲醇溶液质量分数≥30％，所述乙醇溶液质量分数≥30％。
优选地，所述步骤二中，提取溶剂提取的具体步骤是：每次提取加入原料重10倍量的提取溶剂进行强制循环提取，提取温度≥70℃，提取时间≥1.5小时/次。更优选地，第一次提取，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度70℃，提取时间1.5小时；第二次提取，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度75℃，提取时间2小时；第三次提取，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度80℃，提取时间2.5小时。
优选地，所述步骤四中，所述大孔吸附树脂为D101。
所述的提取人参皂苷的方法，还包括步骤九、干燥：将所述步骤八获得的浓缩膏进行喷雾干燥，温度控制在进风180～190℃，出风控制在80～90℃。
相对于现有技术，本发明具有如下的优点：
1、本发明方法采用特定的碱洗脱杂工艺，并结合相应的水提或醇提方法，使制备得到的人参皂苷提取物的产品收率大大提高，达到7～7.5％，并且人参皂苷(Rb1+Rb2+Rc+Rd+Re+Rg1)含量≥45％。
2、本发明选用0.05～0.1mol/L的氨水溶液作为碱液除杂，该浓度的碱液能有效降低有杂质分在树脂上的吸附能力，使其融入碱液中进行脱除，同时，又能尽可能地减少有效成分人参皂苷的流失。本发明人发现，该浓度的碱液对于人参皂苷提取具有特别优良的效果，如果碱液浓度过高，则会导致部分人参皂苷(如Rd、Rc)的溶解从而使有效成分流失，降低人参皂苷最终产品的含量。
具体实施方式
为了更好地理解本发明的内容，下面结合具体实施例作进一步说明。应理解，这些实施例仅用于对本发明进一步说明，而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明所述的内容后，该领域的技术人员对本发明作出一些非本质的改动或调整，仍属于本发明的保护范围。
实施例1
1.原料处理：人参茎叶经过筛选去除其它异物(如铁丝、杂草、泥沙等)后进行粉碎切段，粉碎切段大小2～3cm备用。
2.原料提取：
2.1提取溶剂为水。
2.2提取工艺：将处理好的原料投入到提取罐中，加入水进行强制循环提取，重复提取3次，合并提取液：第一次提取时，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度70℃，提取时间1.5小时；第二次提取，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度75℃，提取时间2小时；第三次提取，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度80℃，提取时间2.5小时。
2.3提取液处理：合并提取液经过板框压滤后，得到水提取过滤液，将水提取过滤液送交树脂吸附精制岗位。
2.4树脂吸附精制岗位：
2.4.1上样吸附：将水提取过滤液上到装有D101大孔吸附树脂的柱子上，上样量为树脂重量等量人参茎叶原料所获得的水提取过滤液。上样吸附流出液排放的污水池进行处理。
2.4.2上样流速：控制在每小时2个柱床体积。
2.4.3碱洗脱杂：上完水提取过滤液后，用0.05～0.1mol/L的氨水上到吸附柱上进行杂质脱除，碱液量为树脂重量的5～7倍量，流速控制在每小时约1～1.2个柱床体积。上完碱液后用纯净水将柱内残留的碱液洗脱置换出来，至水洗流出液PH≤8。碱洗液及水洗液排放到污水池进行处理。
2.4.4成分洗脱：用质量分数70％的乙醇解析树脂吸附的人参皂苷有效成分，洗脱液量为树脂重的6～7倍量，洗脱流速控制在每小时1～1.2个柱床体积，收集洗脱液。
2.4.5洗脱液脱色：将收集到的人参皂苷洗脱液投入到脱色罐中，然后加入洗脱液相应折合人参茎叶原料重量10％的氧化镁进行搅拌回流脱色1～1.5h，然后进行板框过滤、洗涤，收集合并过滤液及氧化酶洗涤液。
3.浓缩：将氧化镁脱色过滤液及洗涤液进行真空减压浓缩，浓缩温度80℃，浓缩真空度≤-0.08MPa，浓缩至浓缩膏比重1.1～1.15，回收乙醇可重复利用。
4.干燥：将浓缩岗位获得的浓缩膏进行喷雾干燥，温度控制在进风180～190℃，出风控制在80～90℃。
实施例1制备的产品收率7.5％；
产品含量：人参皂苷(Rb1+Rb2+Rc+Rd+Re+Rg1)HPLC含量为为45％，UV含量80％；
产品颜色为黄白色。
实施例2
1.原料处理：人参茎叶经过筛选去除其它异物(如铁丝、杂草、泥沙等)后进行粉碎切段，粉碎切段大小为3cm备用。
2.原料提取：
2.1提取溶剂为质量分数30％的甲醇溶液。
2.2提取工艺：将处理好的原料投入到提取罐中，加入提取溶剂进行强制循环提取，重复提取3次，合并提取液：第一次提取时，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度70℃，提取时间1.5小时；第二次提取，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度75℃，提取时间2小时；第三次提取，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度80℃，提取时间2.5小时。
2.3提取液处理：合并提取液经过真空减压浓缩至醇度≤1％，回收溶剂可重复利用，浓缩液用水稀释到固含≤5％，经过板框压滤后，将过滤清液送交树脂吸附精制岗位。
2.4树脂吸附精制岗位：
2.4.1上样吸附：将水提取过滤液或醇提取浓缩过滤液上到装有D101大孔吸附树脂的柱子上，上样量为树脂重量等量人参茎叶原料所获得的水提取过滤液或醇提取浓缩过滤液。上样吸附流出液排放的污水池进行处理。
2.4.2上样流速：控制在每小时2个柱床体积。
2.4.3碱洗脱杂：上完过滤液后，用0.05～0.1mol/L的氨水上到吸附柱上进行杂质脱除，碱液量为树脂重量的5～7倍量，流速控制在每小时约1～1.2个柱床体积。上完碱液后用纯净水将柱内残留的碱液洗脱置换出来，至水洗流出液PH≤8。碱洗液及水洗液排放到污水池进行处理。
2.4.4成分洗脱：用质量分数75％的乙醇解析树脂吸附的人参皂苷有效成分，洗脱液量为树脂重的6～7倍量，洗脱流速控制在每小时1～1.2个柱床体积，收集洗脱液。
2.4.5洗脱液脱色：将收集到的人参皂苷洗脱液投入到脱色罐中，然后加入洗脱液相应折合人参茎叶原料重量10％的氧化镁进行搅拌回流脱色1～1.5h，然后进行板框过滤、洗涤，收集合并过滤液及氧化酶洗涤液。
3.浓缩：将氧化镁脱色过滤液及洗涤液进行真空减压浓缩，浓缩温度80℃，浓缩真空度≤-0.08MPa，浓缩至浓缩膏比重1.1～1.15，回收乙醇可重复利用。
4.干燥：将浓缩岗位获得的浓缩膏进行喷雾干燥，温度控制在进风180～190℃，出风控制在80～90℃。
实施例2制备的产品收率7％；
产品含量：人参皂苷(Rb1+Rb2+Rc+Rd+Re+Rg1)HPLC含量为为45％，UV含量80％；
产品颜色为黄白色。
实施例3
1.原料处理：人参茎叶经过筛选去除其它异物(如铁丝、杂草、泥沙等)后进行粉碎切段，粉碎切段大小为3cm备用。
2.原料提取：
2.1提取溶剂为质量分数30％的乙醇溶液。
2.2提取工艺：将处理好的原料投入到提取罐中，加入提取溶剂进行强制循环提取，重复提取3次，合并提取液：第一次提取时，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度70℃，提取时间1.5小时；第二次提取，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度75℃，提取时间2小时；第三次提取，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度80℃，提取时间2.5小时。
2.3提取液处理：合并提取液经过真空减压浓缩至醇度≤1％，回收溶剂可重复利用，浓缩液用水稀释到固含≤5％，经过板框压滤后，将过滤清液送交树脂吸附精制岗位。
2.4树脂吸附精制岗位：
2.4.1上样吸附：将水提取过滤液或醇提取浓缩过滤液上到装有D101大孔吸附树脂的柱子上，上样量为树脂重量等量人参茎叶原料所获得的水提取过滤液或醇提取浓缩过滤液。上样吸附流出液排放的污水池进行处理。
2.4.2上样流速：控制在每小时2个柱床体积。
2.4.3碱洗脱杂：上完过滤液后，用0.05～0.1mol/L的氨水上到吸附柱上进行杂质脱除，碱液量为树脂重量的5～7倍量，流速控制在每小时约1～1.2个柱床体积。上完碱液后用纯净水将柱内残留的碱液洗脱置换出来，至水洗流出液PH≤8。碱洗液及水洗液排放到污水池进行处理。
2.4.4成分洗脱：用质量分数75％的乙醇解析树脂吸附的人参皂苷有效成分，洗脱液量为树脂重的6～7倍量，洗脱流速控制在每小时1～1.2个柱床体积，收集洗脱液。
2.4.5洗脱液脱色：将收集到的人参皂苷洗脱液投入到脱色罐中，然后加入洗脱液相应折合人参茎叶原料重量10％的氧化镁进行搅拌回流脱色1～1.5h，然后进行板框过滤、洗涤，收集合并过滤液及氧化酶洗涤液。
3.浓缩：将氧化镁脱色过滤液及洗涤液进行真空减压浓缩，浓缩温度80℃，浓缩真空度≤-0.08MPa，浓缩至浓缩膏比重1.1～1.15，回收乙醇可重复利用。
4.干燥：将浓缩岗位获得的浓缩膏进行喷雾干燥，温度控制在进风180～190℃，出风控制在80～90℃。
实施例3制备的产品收率7％；
产品含量：人参皂苷(Rb1+Rb2+Rc+Rd+Re+Rg1)含量为HPLC含量为45％，UV含量80％；
产品颜色为黄白色。
对比例1
该对比例与实施例1相同，其区别仅在于：2.4.3碱洗脱杂的过程中，使用的是1mol/L的氨水溶液。
对比例1制备的产品收率4％；
产品含量：人参皂苷(Rb1+Rb2+Rc+Rd+Re+Rg1)HPLC含量为20％。
对比例2
该对比例与实施例2相同，其区别仅在于：2.4.3碱洗脱杂的过程中，使用的是1mol/L的氨水溶液。
对比例2制备的产品收率5％；
产品含量：人参皂苷(Rb1+Rb2+Rc+Rd+Re+Rg1)HPLC含量为22％。
对比例3
该对比例与实施例3相同，其区别仅在于：2.4.3碱洗脱杂的过程中，使用的是1mol/L的氨水溶液。
对比例3制备的产品收率3.8％；
产品含量：人参皂苷(Rb1+Rb2+Rc+Rd+Re+Rg1)HPLC含量为25％。
如上所述，便可以较好地实现本发明。
Claims (4)
1.一种提取人参皂苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、原料处理：人参茎叶去除异物后粉碎切段，作为原料；
步骤二、提取溶剂提取：将处理好的原料投入到提取罐中，加入提取溶剂强制循环提取，每批原料重复提取3次，合并提取液；所述提取溶剂为水或甲醇溶液或乙醇溶液；其中，第一次提取，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度70℃，提取时间1.5小时；第二次提取，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度75℃，提取时间2小时；第三次提取，提取溶剂为原料重10倍量，提取温度80℃，提取时间2.5小时；
步骤三、提取液处理：当水为提取溶剂时，合并所述步骤二制备的提取液经过板框压滤后，得到水提取过滤液；当甲醇溶液或乙醇溶液为提取溶剂时，合并所述步骤二制备的提取液经过真空减压浓缩至醇度≤1％，回收溶剂可重复利用，浓缩液用水稀释到固含量≤5％，经过板框压滤后，得到醇提取浓缩过滤液；
步骤四、树脂吸附精制：将所述步骤三制备的水提取过滤液或醇提取浓缩过滤液上到装有大孔吸附树脂的柱子上，上样量为树脂重量等量人参茎叶原料所获得的水提取过滤液或醇提取浓缩过滤液；上样流速控制在每小时2个柱床体积；
步骤五、碱洗脱杂：所述步骤四上完过滤液后，用碱液上到吸附柱上进行杂质脱除，碱液量为树脂重量的5～7倍量，流速控制在每小时1～1.2个柱床体积；上完碱液后用纯净水将柱内残留的碱液洗脱置换出来，至水洗流出液pH≤8；所述碱液为0.05～0.1mol/L的氨水溶液或同等当量的氢氧化钠或氢氧化钾溶液；
步骤六、成分洗脱：用质量分数65～75％的乙醇解析树脂吸附的人参皂苷有效成分，洗脱液量为树脂重的6～7倍量，洗脱流速控制在每小时1～1.2个柱床体积，收集得人参皂苷洗脱液；
步骤七、洗脱液脱色：将步骤六收集到的人参皂苷洗脱液投入到脱色罐中，然后加入洗脱液相应折合人参茎叶原料重量10％的氧化镁进行搅拌回流脱色1～1.5h，然后进行板框过滤、洗涤，收集合并得到氧化镁脱色过滤液及洗涤液；
步骤八、浓缩：将所述步骤七得到的氧化镁脱色过滤液及洗涤液进行真空减压浓缩，浓缩温度≤80℃，浓缩真空度≤-0.08MPa，浓缩至浓缩膏比重1.1～1.15，回收乙醇可重复利用；
所述步骤二中的提取溶剂，所述甲醇溶液质量分数≥30％，所述乙醇溶液质量分数≥30％。
2.根据权利要求1所述的提取人参皂苷的方法，其特征在于，所述步骤四中，所述大孔吸附树脂为D101。
3.根据权利要求1所述的提取人参皂苷的方法，其特征在于，还包括步骤九、干燥：将所述步骤八获得的浓缩膏进行喷雾干燥，温度控制在进风180～190℃，出风控制在80～90℃。
4.人参皂苷提取物，其特征在于，采用权利要求1-3任意一项所述的方法制备得到。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Ji Yafei Inventor after: Yang Jianli Inventor after: Chen Zhenzhen Inventor before: Hu Honglai Inventor before: Li Wenfang Inventor before: He Jinwei Inventor before: Cheng Panpan |
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| CB03 | Change of inventor or designer information | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20170605 Address after: 712100 No. 5 Xinqiao South Road, Yangling demonstration area, Shaanxi Applicant after: Yangling Kin Kin Bioengineering Technology Co., Ltd. Address before: 710065, No. first, third, fourth, No. 80, south side, Kam Yip Road, Xi'an hi tech Zone, Shaanxi Applicant before: Xi'an Haotian Bioengineering Tech. Co., Ltd. |
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| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |