CN104098717A - 一种提取肝素钠的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种提取肝素钠的方法，该方法是准备新鲜的猪小肠，然后通过酶解法提取小肠黏膜，将小肠黏膜加水稀释；将加水稀释小肠溶液中加入4~5%精盐混合搅拌，溶液pH值控制在8~9，温度控制在50℃~55℃，3个大气压下静置2~3个小时；然后通过树脂吸附，洗脱，乙醇提取得到精品肝素钠。本发明结构合理，工艺简单，所需要材料可能回收再利用，通过盐解、吸附、洗脱、乙醇提取工序可提取优质的肝素钠。
Description
技术领域
本发明涉及一种生物工程领域，具体为一种提取肝素钠的方法。
背景技术
心脑血管疾病是人类的头号疾病杀手，随着人们生活水平提高带来的营养过剩，全球环境的恶化，生活节奏的加快及人口老龄化的加剧，致使全球心脑血管疾病的发病率和死亡率正逐年增高，肝素钠的出现为众多心脑血管疾病患者创造了生命的奇迹。目前肝素钠是世界上最有效的抗凝血药物，主要应用于心脑血管疾病和血液透析治疗，其中在血液透析中是唯一有效的特效药物，据临床应用及研究显示，肝素钠除具有抗凝血作用外，还具有其他多种生物活性和临床用途，包括降血脂作用、抗中膜平滑肌细胞增生、促进纤维蛋白溶解等作用，低分子肝素是肝素原料药作为原料进一步加工成的一大类抗血栓的药物，具有广泛的临床医学用途，成为治疗急性静脉血栓和急性冠脉综合证、心绞痛、心肌梗塞等疾病的首选药物。
肝素主要从牛肺或猪小肠黏膜提取，是一种由葡萄糖胺、L- 艾杜糖醛苷、N- 乙酰葡萄糖胺和 D- 葡萄糖醛酸交替组成的黏多糖硫酸脂，肝素是世界上迄今为止已知的分子结构最复杂的化学物，短期内无法人工化学合成。
发明内容
本发明的目的是提供一种工艺合理，方法可靠的从肠衣废料提取肝素钠的方法。
本发明是通过以下技术方案来技术的：
一种提取肝素钠的方法，包括以下步骤：
a、原料处理：准备新鲜的猪小肠，然后通过酶解法提取小肠黏膜，将小肠黏膜加水稀释；
b、盐解提取：将加水稀释小肠溶液中加入4~5%精盐混合搅拌，溶液PH值控制在8~9，温度控制在50℃~55℃，3个大气压下静置2~3个小时；
c、树脂吸附：将步骤b中的的溶液过滤得到料液，加入5~10%树脂吸附，保持温度在55℃，搅拌吸附7~9小时；
d、洗脱：将吸附的料液静置过滤，得到吸附有肝素钠的树脂，先用清水将树脂漂洗干净、沥干，加入4.5%的氯化钠溶液3倍量，搅拌洗脱4小时，沥干后再重复洗脱2次；
f、乙醇提取：将3次洗脱的洗脱液合并，搅拌30分钟后送入沉淀罐，静置后取上层滤液加入1~2倍的无水乙醇，充分搅拌然后静置12小时，吸取上层醇液，下层沉淀用滤布滤干，放入烘箱进行烘水脱干，即可得到肝素钠精品。
所述步骤d中在对树脂重复洗脱时，第二、三次洗脱4.5%氯化钠溶液减半，洗脱的时间为2小时，1小时。
所述步骤f中烘水脱干时，真空环境，温度小于60℃。
所述PH的调节，调节剂为氢氧化钠溶液。
本发明的有益效果是：本发明结构合理，工艺简单，所需要材料可能回收再利用，通过盐解、吸附、洗脱、乙醇提取工序可提取优质的肝素钠。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明一种提取肝素钠的方法进一步说明。
实施例1
准备新鲜的猪小肠，然后通过酶解法提取小肠黏膜，将小肠黏膜加水稀释；将加水稀释小肠溶液中加入4~5%精盐混合搅拌，溶液PH值控制在8，温度控制在50℃，3个大气压下静置2个小时；然后溶液过滤得到料液，加入5%树脂吸附，保持温度在55℃，搅拌吸附7小时；将吸附的料液静置过滤，得到吸附有肝素钠的树脂，先用清水将树脂漂洗干净、沥干，加入4.5%的氯化钠溶液3倍量，搅拌洗脱4小时，沥干后再重复洗脱2次，第二、三次洗脱4.5%氯化钠溶液减半，洗脱的时间为2小时，1小时；将3次洗脱的洗脱液合并，搅拌30分钟后送入沉淀罐，静置后取上层滤液加入1倍的无水乙醇，充分搅拌然后静置12小时，吸取上层醇液，下层沉淀用滤布滤干，放入烘箱进行烘水脱干，温度小于60℃，而且在真空的条件下进行，即可得到肝素钠精品。
以上所述，仅是发明的其中一实施例而已，并非是对本发明作任何其他形式的限制，而依据本发明的技术实质所作的任何修改或等同变化，仍属于发明所要求保护的范围。
Claims (4)
1.一种提取肝素钠的方法，其特征在于：包括以下步骤：
a、原料处理：准备新鲜的猪小肠，然后通过酶解法提取小肠黏膜，将小肠黏膜加水稀释；
b、盐解提取：将加水稀释小肠溶液中加入4~5%精盐混合搅拌，溶液PH值控制在8~9，温度控制在50℃~55℃，3个大气压下静置2~3个小时；
c、树脂吸附：将步骤b中的的溶液过滤得到料液，加入5~10%树脂吸附，保持温度在55℃，搅拌吸附7~9小时；
d、洗脱：将吸附的料液静置过滤，得到吸附有肝素钠的树脂，先用清水将树脂漂洗干净、沥干，加入4.5%的氯化钠溶液3倍量，搅拌洗脱4小时，沥干后再重复洗脱2次；
f、乙醇提取：将3次洗脱的洗脱液合并，搅拌30分钟后送入沉淀罐，静置后取上层滤液加入1~2倍的无水乙醇，充分搅拌然后静置12小时，吸取上层醇液，下层沉淀用滤布滤干，放入烘箱进行烘水脱干，即可得到肝素钠精品。
2.根据权利要求1所述一种肠衣提取肝素钠的方法，其特征在于：所述步骤d中在对树脂重复洗脱时，第二、三次洗脱4.5%氯化钠溶液减半，洗脱的时间分别为2小时、1小时。
3.根据权利要求1所述一种肠衣提取肝素钠的方法，其特征在于：所述步骤f中烘水脱干时，真空环境，温度小于60℃。
4.根据权利要求1所述一种肠衣提取肝素钠的方法，其特征在于：所述PH的调节，调节剂为氢氧化钠溶液。
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