CN104163878B - 一种从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法。本发明以粗品肝素钠为原料，加水溶解后，以离心和二次盐析法沉淀除去肝素钠粗品中的杂质，接着进行亚硝酸降解并还原得到含有游离硫酸根的低分子肝素，加入氯化钡除去降解产生的游离硫酸根，再使用阴离子交换树脂，并调整合适的参数进行转钙和最终除杂，最后氧化脱色、过滤除菌、脱水干燥得到那曲肝素钙原料。本发明以粗品肝素钠为原料，降低了生产成本，通过简化工艺步骤提高那曲肝素钙的收率，减少那曲肝素钙的效价损失，而且能够保证产品的安全性，同时便于工业化大生产。

Description

一种从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体地说是一种从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法。

背景技术

肝素钠是由猪肠粘膜中提出的一种硫酸氨基葡聚糖的钠盐，是一种天然的抗凝血物质，肝素钠至今已有70余年历史，被广泛用于治疗动脉硬化、静脉血栓和预防凝血。但是普通肝素的生物利用度低，副作用大，低分子肝素是未分级肝素中具有较低分子量的组份或片段，是新一代肝素类抗血栓药物。低分子肝素是由肝素解聚制备而成，平均分子量为4000～6000道尔顿。普通的肝素产品都是钠盐型，于钙盐型相比，后者更具有皮下注射时局部血肿现象减少和疼痛状况明显改善等优点，故目前肝素产品更倾向于制成钙盐型。那曲肝素钙临床用于预防手术后血栓栓塞、静脉血栓形成等，也可以用于血液透析时体外循环的抗凝剂。

肝素首先从新鲜的健康生猪的小肠粘膜中提取并制成肝素粗品，肝素粗品中肝素钠粗品中含有病毒、内毒素、蛋白质、核酸、类肝素、不溶性杂质等杂质。肝素钠的精制过程主要是对肝素钠粗品进行除杂、脱色、除菌和脱水干燥，最终得到肝素钠精品。肝素钠粗品除去大分子杂质多采用酶解和离子交换树脂吸附法。其中离子交换树脂吸附法是工艺操作最复杂的一步，树脂吸附主要除去类肝素等杂质，效果好坏直接影响到肝素钠精品的纯度高低和杂质含量。脱色多采用高锰酸钾和过氧化氢两步氧化法，或过氧化氢两次加入氧化法，前种方法的缺点是产品的活性损失大、色泽差，生成二氧化锰沉淀较难滤除；后种方法所得产品色泽虽好，效价损失却较大。除菌一般采用过滤法。

那曲肝素钙的生产工艺一般直接使用肝素钠精品，通过降解、还原、除杂、脱色、除菌和脱水干燥等一系列步骤制得。肝素钠在降解的过程中，发生脱硫酸化作用，产生出游离硫酸根，对那曲肝素钙的质量产生影响。EP药典中规定那曲肝素钙中游离硫酸的含量不得大于0.5％，因此需要对那曲肝素钙中的游离硫酸进行控制。此外，和肝素钠精品生产工艺类似，除杂和脱色步骤都会或多或少地造成效价的损失，影响最终产品的质量。

肝素钠粗品生产肝素钠精品的收率与肝素钠粗品的效价有关，效价越高，收率越高。一般来说，肝素钠粗品生产肝素钠精品的重量收率在40％～50％。从肝素钠制备那曲肝素钙的重量收率一般为60％～70％。可见按现有方法，从肝素钠粗品到那曲肝素钙的重量收率在24％～35％。

专利CN1268650C提供了一种低硝酸盐含量的低分子肝素钙的制备方法，该方法以肝素钠精品为原料，不仅增加了制备那曲肝素钙的成本，而且经历了从肝素钠粗品到肝素钠精品，再从肝素钠精品到低分子肝素钙的两步独立过程，较多的制备步骤不仅会造成效价的损失，而且影响到那曲肝素钙的收率。

专利CN103214596A提供了一种由粗品肝素钠直接生产低分子量肝素钠的方法，该方法虽然以肝素钠粗品为原料，但是在肝素钠降解前，对肝素钠粗品的处理过程较为繁琐，除杂步骤较多，同样会影响到产品的效价、质量和收率。那曲肝素钙的生产工艺中，裂解过程产生新的杂质，游离硫酸，需要严格控制其含量，可见低分子肝素钙和低分子肝素钠的工艺并不一致，因此该方法也不完全适用于低分子肝素钙的制备。

发明内容

本发明的目的就是针对上述现有技术的不足，提供一种从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法，本发明简单有效，不仅能够提高那曲肝素钙的收率，而且能够保证产品的安全性，同时便于工业化大生产。

本发明的目的可以通过以下措施达到：

一种从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法，其包括如下步骤：

1)肝素钠粗品加水溶解成质量体积浓度为8％～15％(g/mL)的溶液，离心分离沉淀和上清液；

2)取步骤1)所得上清液加入氯化钙，使溶液中氯化钙的质量体积含量达15％～25％(g/mL)，用盐酸调节溶液的pH值至5.0～5.5后，进行沉淀并分离出沉淀物；

3)将步骤2)所得沉淀物加水溶解成为质量体积浓度8％～15％(g/mL)的溶液，加入醋酸钙，用醋酸调节溶液的pH值至5.0～5.5后，进行沉淀并分离出沉淀物；

4)将步骤3)所得的沉淀物加水溶解成质量体积浓度为10％～15％(g/mL)的肝素钠溶液，然后进行降解、还原以及采用乙醇沉淀后得到含有游离硫酸根的低分子肝素，加水溶解成质量体积浓度为8％～15％(g/mL)的低分子肝素溶液；

5)步骤4)所得的低分子肝素溶液加入质量浓度3.0～12.0％的氯化钡溶液，充分搅拌后抽滤除去沉淀物；

6)步骤5)所得溶液中加入阴离子交换树脂，再加入0.5～0.8倍树脂体积的氯化钙溶液，充分搅拌吸附后沥干吸附液；

7)配制0.3～0.8(L/L)倍树脂体积的氯化钙溶液，加入步骤6)所得树脂中搅拌洗脱3～6小时，洗脱1次或多次，收集洗脱液；

8)步骤7)所得的洗脱液中，用氢氧化钙饱和溶液调节溶液pH值至10.5～11.0，加入过氧化氢(浓度为30％左右)，进行搅拌氧化反应，氧化结束后用酸溶液调节pH值至6.0～6.5；

9)步骤8)所得的氧化后的溶液用滤膜过滤除菌，再加入滤液体积1.0～1.5倍(L/L)的乙醇沉淀，搅拌均匀，静置沉淀10～20小时，沉淀物脱水烘干后即为那曲肝素钙原料。

以下对本发明从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法的具体步骤做进一步说明。

在步骤1)中，所述的肝素钠粗品是从新鲜的健康生猪的小肠粘膜中提取制成，其效价一般是60～90USP U/mg，所述的肝素钠粗品中含有病毒、内毒素、蛋白质、核酸、类肝素、不溶性杂质等之类的杂质。该步骤中，肝素钠粗品溶解后，通过离心可以去除不溶性杂质。

在步骤2)中，沉淀的时间可根据具体情况进行调节，一般为16～36小时。该步骤中可通过离心分离沉淀和上清液，弃去上清液，沉淀物供下一步处理。具体的沉淀操作可在20～30℃下进行。第一次盐析，除去肝素那粗品中的蛋白质，本步步骤中采用氯化钙进行盐析，此外，由于钙离子的引入，更有利于后续的低分子肝素钠盐的转钙。

在步骤3)中，醋酸钙的投加量使其在溶液中的质量体积浓度达到35～45％(g/mL)。该步骤中的沉淀步骤在20～30℃下进行；沉淀的时间可根据具体情况进行调节，一般为16～36小时。沉淀完成后通过离心分离沉淀和上清液，可弃去上清液，沉淀即为初步除杂的肝素钠。第二次盐析，主要除去硫酸皮肤素和硫酸软骨素等类肝素杂质，以及少量的蛋白质。该步骤中使用醋酸钙可简化后续的低分子肝素钠盐的转钙过程。通过离心和两次盐析，去除蛋白、核酸及类肝素等大分子杂质，保证肝素钠的纯度，尽管此时的肝素钠的质量还达不到肝素钠精品的要求，但是可以直接用于生产那曲肝素钙。

在步骤4)中，在一种优选方案中，使用亚硝酸钠进行降解，使用硼氢化钠进行还原，然后再使用乙醇进行沉淀，可得到含有游离硫酸根的低分子肝素。其中亚硝酸钠的量为肝素钠重量的1.0％～10.0％(g/g)，优选为2.0％～5.0％(g/g)，最优选为2.5％～3.5％(g/g)。亚硝酸钠主要用于降解肝素钠，亚硝酸钠的量需要严格控制，亚硝酸钠的量过少，则降解不完全，亚硝酸钠的量过多，则会产生亚硝酸盐残留。硼氢化钠的量为亚硝酸钠重量的20％～50％(g/g)，优选为25％～35％(g/g)，最优选为35％(g/g)。硼氢化钠的作用是中和过量的亚硝酸钠，其加入量也要保证能中和溶液中过量的亚硝酸盐。沉淀所采用的乙醇的加入量为肝素钠溶液体积的1.0～1.5倍(L/L)。

步骤4)中降解、还原和沉淀的一种具体操作为：将肝素钠溶液调节pH值至2.5～3.0后使用亚硝酸钠进行降解，然后在pH值8.5～9.5条件下使用硼氢化钠进行还原，最后调节pH值至7.0～7.5时用乙醇沉淀。在一种优选方案中，该步骤中的降解、还原和沉淀操作包括：将肝素钠溶液用盐酸调节PH至2.5～3.0，加入肝素钠粗品质量2.5％～3.5的亚硝酸钠，在20～30℃下搅拌2～4h，再加入氢氧化钠溶液调节溶液PH至8.5～9.5，加入硼氢化钠搅拌15～30小时，加盐酸调节溶液PH至3.2～3.6搅拌20min，然后加入氢氧化钠溶液调节溶液PH至7.0～7.5，用1.0～1.5倍乙醇沉淀，控制环境温度20～30℃，静置8～24小时，弃去上清，沉淀物即为含有游离硫酸根的低分子肝素。

在步骤5)中，加入氯化钡溶液后的搅拌时间优选为2～5小时，可以通过抽滤或离心等方式除去沉淀物。氯化钡溶液的加入量为低分子肝素溶液体积的1.0～1.5倍。EP药典中对那曲肝素钙中游离硫酸根的含量要求不得大于0.5％，因此需要尽可能将硫酸根除尽。本步骤中氯化钡和游离硫酸根结合生产硫酸钡沉淀后抽滤除去沉淀，可以有效地去除肝素钠降解产生的游离硫酸根。

在步骤6)中，搅拌吸附的时间优选为5～12小时。阴离子交换树脂的加入量需要经过试验考察，加入的树脂量过少，低分子肝素不能完全被树脂吸附，造成收率和效价的损失，加入的树脂量过多，则会吸附杂质，使杂质含量超标。为了同时除去残留的少量的蛋白质、类肝素、游离硫酸根等杂质，需要严格控制氯化钙溶液的浓度，加入低浓度的盐有助于杂质溶解在盐溶液中，而高浓度的盐会使杂质被树脂所吸附。本步骤中氯化钙溶液浓度为0.1mol/L～1.0mol/L，优选为0.1mol/L～0.5mo/L，最优选为0.1mol/L。当阴离子交换树脂的重量为肝素钠重量的2～4倍(g/g)，氯化钙溶液的浓度为0.1mol/L时，既能够使收率、效价损失少，保证最终产品质量，也能够使杂质含量符合要求。

在步骤7)中，可洗涤1次或多次，这里的多次是指2次以及大于2次。当多次洗涤时，合并各次涤涤液。本步骤中氯化钙溶液浓度为1.0mol/L～2.0mol/L，优选为1.2mol/L～1.8mol/L，最优选为1.5mol/L。由于前期已经多次引入钙离子，因此只需将低分子肝素从树脂上洗脱下来即可，洗脱的过程中，即可同步将低分子肝素转为钙盐。

在步骤8)中，进行搅拌氧化反应的时间优选为3～4小时。其中过氧化氢的加入量为洗脱液总体积的0.3％～1.5％，优选为0.8％～1.2，最优选为0.9％～1.1％。加入过氧化氢主要是脱色和除细菌内毒素，本法中只需进行一次氧化反应，即可达到脱色和除细菌内毒素的目的。

在步骤9)中，可结合采用0.45μm滤膜和0.2μm滤膜进行过滤除菌。

本方法以肝素钠粗品计算，终产品那曲肝素钙的重量收率可达58％以上，那曲肝素钙的效价达106以上，其中游离硫酸根含量在0.22％以下。肝素钠粗品价格约为肝素钠精品的30％～40％，本方法以肝素钠粗品为原料，能有效地降低原料成本。本方法省去了从肝素钠粗品生产肝素钠精品的过渡步骤，直接从肝素钠粗品生产那曲肝素钙，将部分步骤合并，简化了工艺过程，缩短了生产周期，提高了生产效率，节约了能源，并且能有效减少三废排放约8％。

本发明以粗品肝素钠为原料直接生产那曲肝素钙，尽可能将肝素钠粗品到肝素钠精品的除杂过程简化，并省去肝素钠粗品的脱色和除菌步骤。其中肝素钠粗品的精制采用离心和二次盐析法，除去不溶性杂质、蛋白质、核酸、类肝素等杂质后，能够直接用于生产那曲肝素钙。在肝素钠原料降解成低分子肝素后，加入氯化钡除去降解产生的游离硫酸根，再使用阴离子交换树脂进行转钙和最终除杂，所除的杂质可能包括残留的类肝素杂质和无机盐杂质。得到的那曲肝素钙用双氧水氧化后过滤除菌，脱水干燥即得那曲肝素钙原料药。

本发明的有益效果：

本方法先以离心法除去肝素钠粗品中的不溶性杂质，再先后以氯化钙和醋酸钙盐析除去粗品中蛋白、核酸、类肝素等杂质，保证所得的肝素钠能够直接用于制备那曲肝素钙，同时也省去了肝素钠粗品的脱色步骤，大大的简化了工艺过程，提高了产品收率。本发明接着进行亚硝酸降解并还原得到含有游离硫酸根的低分子肝素，加入氯化钡除去降解产生的游离硫酸根，再使用阴离子交换树脂进行转钙和最终除杂，调整合适的参数以便同时转钙和除杂同时进行，简化了工艺过程，进一步提高了产品收率。最后氧化脱色、过滤除菌、脱水干燥得到那曲肝素钙原料。

本发明以肝素钠粗品为原料直接生产那曲肝素钙，能够有效地降低生产成本。通过合理设计，将肝素钠粗品到肝素钠精品和肝素钠精品到那曲肝素钙中重复的步骤尽可能合并，简化工艺步骤，减少了废液排放，降低了对环境的污染，节约了企业的三废处理成本，更为重要的是大大的提高了那曲肝素钙的收率。本发明简单有效，能够保证产品的安全性，同时便于工业化大生产。

具体实施方式

实施例1：

1称取事先测定过效价为88的肝素钠粗品200g，加水溶解成浓度为8％(g/mL)的溶液，离心分离沉淀和上清液；

2上清液加入氯化钙，使溶液中氯化钙的含量达24％(g/mL)，用盐酸调节溶液的pH值至5.0后，在20～30℃下沉淀24小时，离心分离沉淀和上清液，弃去上清液；

3将步骤2所得沉淀加水溶解为8％(g/mL)的溶液，加入醋酸钙使其浓度达45％(g/mL)，用醋酸调节溶液的pH值至5.0后，在20～30℃下沉淀20小时，离心分离沉淀和上清液，弃去上清液，沉淀即为初步除杂的肝素钠；

4将步骤3所得沉淀，加水溶解成浓度为12％的溶液，加入肝素钠重量的2.7％(g/g)的亚硝酸钠，使用盐酸溶液调节溶液pH值至2.7，20～30℃下搅拌4小时；用碱溶液迅速调节溶液pH至8.5，加入亚硝酸钠重量35％的硼氢化钠，20～30℃下搅拌还原18小时，加盐酸调节溶液PH至3.5搅拌20min，然后加入氢氧化钠溶液调节溶液PH至7.2，得到还原液，用还原液体积1.0倍(L/L)的乙醇沉淀，20～30℃下静置10小时，所得沉淀取少量测定游离硫酸根含量为7.2％，剩余沉淀加水溶解成浓度为8％(g/mL)的低分子肝素溶液；

5将步骤4所得低分子肝素溶液，加入低分子肝素溶液体积1.0倍(L/L)的10.0％的氯化钡溶液，搅拌4小时，抽滤除去沉淀；

6将步骤5所得溶液加入肝素钠粗品重量2倍(g/g)的阴离子交换树脂，加入0.6倍树脂体积的0.1mol/L氯化钙溶液，搅拌吸附12小时，沥干吸附液；

7配制0.4(L/L)倍树脂体积的1.5mol/L氯化钙溶液，加入树脂中搅拌洗脱4小时，洗脱2次，合并洗脱液；

8步骤7所得的洗脱液中，用氢氧化钙饱和溶液调节溶液pH值至10.5，加入洗脱液总体积的0.8％的30％过氧化氢搅拌氧化，氧化时间4小时，氧化结束后用盐酸溶液调节pH值至6.5。

9步骤8所得的氧化后的溶液用0.45μm滤膜及0.2μm滤膜过滤除菌，再加入滤液体积1.0倍的乙醇沉淀，搅拌均匀，静置沉淀15小时，沉淀物脱水烘干后即为那曲肝素钙原料。

得到那曲肝素钙134g。以肝素钠粗品计算，那曲肝素钙的重量收率为67％。测定那曲肝素钙的效价为114。游离硫酸根含量为0.16％。那曲肝素钙的重均分子量测定结果如下表：

	测定值	标准值
			重均分子量(道尔顿)	4622	3600～5000
分子量2000道尔顿的组分含量	12％	≤15.0％
			分子量在2000～4000道尔顿的组分含量	52％	35.0～55.0％
分子量在2000～8000道尔顿的组分含量	83％	75.0～95.0％

实施例2：

1称取事先测定过效价为74的肝素钠粗品150g加水溶解成浓度为10％(g/mL)的溶液，离心分离沉淀和上清液，

2上清液加入氯化钙，使溶液中氯化钙的含量达16％(g/mL)，用盐酸调节溶液的pH值至5.5后，在20～30℃下沉淀30小时，离心分离沉淀和上清液，弃去上清液；

3将步骤2所得沉淀加水溶解为10％(g/mL)的溶液，加入醋酸钙使其浓度达38％(g/mL)，用醋酸调节溶液的pH值至5.5后，在20～30℃下沉淀30小时，离心分离沉淀和上清液，弃去上清液，沉淀即为初步除杂的肝素钠；

4将步骤3所得沉淀，加水溶解成浓度为10％的溶液，加入肝素钠重量的2.7％(g/g)的亚硝酸钠，使用盐酸溶液调节溶液pH值至2.5，20～30℃下搅拌3小时；用碱溶液迅速调节溶液pH至8.5，加入亚硝酸钠重量35％的硼氢化钠，20～30℃下搅拌还原18小时，加盐酸调节溶液PH至3.4搅拌20min，然后加入氢氧化钠溶液调节溶液PH至7.0，得到还原液，用还原液体积1.2倍(L/L)的乙醇沉淀，20～30℃下静置8小时，所得沉淀取少量测定游离硫酸根含量为5.6％，剩余沉淀加水溶解成浓度为10％(g/mL)的低分子肝素溶液；

5将步骤4所得低分子肝素溶液，加入低分子肝素溶液体积1.5倍(L/L)的7.0％的氯化钡溶液，搅拌3小时，抽滤除去沉淀

6将步骤5所得溶液加入肝素钠粗品重量4倍(g/g)的阴离子交换树脂，加入0.8倍树脂体积的0.1mol/L氯化钙溶液，搅拌吸附6小时，沥干吸附液；

7配制0.6(L/L)倍树脂体积的1.5mol/L氯化钙溶液，加入树脂中搅拌洗脱3小时，洗脱2次，合并洗脱液；

8步骤7所得的洗脱液中，用氢氧化钙饱和溶液调节溶液pH值至10.5，加入与洗脱液等体积的30％过氧化氢，搅拌氧化4小时，氧化结束后用盐酸溶液调节pH值至6.0。

9步骤8所得的氧化后的溶液用0.45μm滤膜及0.2μm滤膜过滤除菌，再加入滤液体积1.2倍的乙醇沉淀，搅拌均匀，静置沉淀10小时，沉淀物脱水烘干后即为那曲肝素钙原料。

得到那曲肝素钙87g。以肝素钠粗品计算，那曲肝素钙的重量收率为58％。测定那曲肝素钙的效价为106。游离硫酸根含量为0.12％。那曲肝素钙的重均分子量测定结果如下表：

	测定值	标准值
			重均分子量(道尔顿)	4463	3600～5000
分子量2000道尔顿的组分含量	14％	≤15.0％
			分子量在2000～4000道尔顿的组分含量	43％	35.0～55.0％
分子量在2000～8000道尔顿的组分含量	79％	75.0～95.0％

实施例3：

1称取事先测定过效价为82的肝素钠粗品220g加水溶解成浓度为12％(g/mL)的溶液，离心分离沉淀和上清液，

2上清液加入氯化钙，使溶液中氯化钙的含量达20％(g/mL)，用盐酸调节溶液的pH值至5.5后，在20～30℃下沉淀20小时，离心分离沉淀和上清液，弃去上清液；

3将步骤2所得沉淀加水溶解为12％(g/mL)的溶液，加醋酸钙使其浓度达入35％(g/mL)，用醋酸调节溶液的pH值至5.5后，在20～30℃下沉淀20小时，离心分离沉淀和上清液，弃去上清液，沉淀即为初步除杂的肝素钠；

4将步骤3所得沉淀，加水溶解成浓度为12％的溶液，加入肝素钠重量的2.7％(g/g)的亚硝酸钠，使用盐酸溶液调节溶液pH值至3.0，20～30℃下搅拌4小时；用碱溶液迅速调节溶液pH至8.5，加入亚硝酸钠重量35％的硼氢化钠，20～30℃下搅拌还原16小时，加盐酸调节溶液PH至3.6搅拌20min，然后加入氢氧化钠溶液调节溶液PH至7.5，得到还原液，用还原液体积1.0倍(L/L)的乙醇沉淀，20～30℃下静置20小时，所得沉淀取少量测定游离硫酸根含量为6.8％，剩余沉淀加水溶解成浓度为12％(g/mL)的低分子肝素溶液；

5将步骤4所得低分子肝素溶液，加入低分子肝素溶液体积1.2倍(L/L)的11.0％的氯化钡溶液，搅拌3.5小时，抽滤除去沉淀

6将步骤5所得溶液加入肝素钠粗品重量2倍(g/g)的阴离子交换树脂，加入0.5倍树脂体积的0.1mol/L氯化钙溶液，搅拌吸附5小时，沥干吸附液；

7配制0.7(L/L)倍树脂体积的1.5mol/L氯化钙溶液，加入树脂中搅拌洗脱4小时，洗脱2次，合并洗脱液；

8步骤7所得的洗脱液中，用氢氧化钙饱和溶液调节溶液pH值至10.8，加入与洗脱液等体积的30％过氧化氢，搅拌氧化3.5小时，氧化结束后用盐酸溶液调节pH值至6.2。

9步骤8所得的氧化后的溶液用0.45μm滤膜及0.2μm滤膜过滤除菌，再加入滤液体积0.8倍的乙醇沉淀，搅拌均匀，静置沉淀14小时，沉淀物脱水烘干后即为那曲肝素钙原料。

得到那曲肝素钙143g。以肝素钠粗品计算，那曲肝素钙的重量收率为65％。测定那曲肝素钙的效价为109。游离硫酸根含量为0.22％。那曲肝素钙的重均分子量测定结果如下表：

	测定值	标准值
			重均分子量(道尔顿)	4278	3600～5000
分子量2000道尔顿的组分含量	10％	≤15.0％
			分子量在2000～4000道尔顿的组分含量	49％	35.0～55.0％
分子量在2000～8000道尔顿的组分含量	86％	75.0～95.0％

Claims (10)

1.一种从肝素钠粗品中生产那曲肝素钙的方法，其特征在于其包括如下步骤：

1）肝素钠粗品加水溶解成质量体积浓度为8%~15%的溶液，离心分离沉淀和上清液；所述的肝素钠粗品是从新鲜的健康生猪的小肠粘膜中提取制成，所述的肝素钠粗品中含有病毒、内毒素、蛋白质、核酸、类肝素和不溶性杂质；

2）取步骤1)所得上清液加入氯化钙，使溶液中氯化钙的质量体积含量达15%~25%，用盐酸调节溶液的pH值至5.0~5.5后，进行沉淀并分离出沉淀物；

3）将步骤2)所得沉淀物加水溶解成为质量体积浓度8%~15%的溶液，加入醋酸钙，用醋酸调节溶液的pH值至5.0~5.5后，进行沉淀并分离出沉淀物；其中醋酸钙的投加量使其在溶液中的质量体积浓度达到35~45%；

4）将步骤3)所得的沉淀物加水溶解成质量体积浓度为10%~15%的肝素钠溶液，然后使用亚硝酸钠进行降解，使用硼氢化钠进行还原，然后再使用乙醇进行沉淀，得到含有游离硫酸根的低分子肝素；加水将其溶解成质量体积浓度为8%~15%的低分子肝素溶液；其中所述亚硝酸钠的量为肝素钠重量的1.0%~10.0%；硼氢化钠的量为亚硝酸钠重量的20%~50%；沉淀所需乙醇的加入量为肝素钠溶液体积的1.0~1.5倍；

5）步骤4)所得的低分子肝素溶液加入质量浓度3.0~12.0%的氯化钡溶液，充分搅拌后除去沉淀物；其中所述的氯化钡溶液为低分子肝素溶液体积的1.0~1.5倍；

6）步骤5)所得溶液中加入阴离子交换树脂，再加入0.5~0.8倍树脂体积的氯化钙溶液，充分搅拌吸附后沥干吸附液；所述的氯化钙溶液浓度为0.1 mol/L ~0.5mo/L；其中所述的阴离子交换树脂的重量为肝素钠重量的2~4倍；

7）配制0.3~0.8倍树脂体积的氯化钙溶液，加入步骤6）所得树脂中搅拌洗脱3~6小时，洗脱1次或多次，收集洗脱液；所述的氯化钙溶液浓度为1.2 mol/L ~1.8mol/L，

8）步骤7)所得的洗脱液中，用氢氧化钙饱和溶液调节溶液pH值至10.5～11.0，加入过氧化氢，进行搅拌氧化反应，氧化结束后用酸溶液调节pH值至6.0~6.5；

9）步骤8)所得的氧化后的溶液用滤膜过滤除菌，再加入滤液体积1.0~1.5倍的乙醇沉淀，搅拌均匀，静置沉淀10~20小时，沉淀物脱水烘干后即为那曲肝素钙。

2.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品中生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤2）或步骤3）中，进行沉淀的时间为16~36小时。

3.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品中生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤4)中，将肝素钠溶液调节pH值至2.5~3.0后使用亚硝酸钠进行降解，然后在pH值8.5~9.5条件下使用硼氢化钠进行还原，最后调节pH值至7.0~7.5时用乙醇沉淀。

4.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品中生产那曲肝素钙的方法，其特征在于所述亚硝酸钠的量为肝素钠重量的2.0%~5.0%；硼氢化钠的量为亚硝酸钠重量的25%~35%。

5.根据权利要求4所述的从肝素钠粗品中生产那曲肝素钙的方法，其特征在于所述亚硝酸钠的量为肝素钠重量的2.5%~3.5%；硼氢化钠的量为亚硝酸钠重量的35%。

6.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品中生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤6)搅拌吸附的时间为5~12小时。

7.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品中生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤6)所述的氯化钙溶液浓度为0.1mol/L；步骤7)所述的氯化钙溶液浓度为1.5mol/L。

8.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品中生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤8）中进行搅拌氧化反应的时间为3~4小时；所述过氧化氢的加入量为洗脱液总体积的0.3%~1.5%。

9.根据权利要求8所述的从肝素钠粗品中生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤8）中进行搅拌氧化反应的时间为3~4小时；所述过氧化氢的加入量为洗脱液总体积的0.8~1.2%。

10.根据权利要求9所述的从肝素钠粗品中生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤8）中进行搅拌氧化反应的时间为3~4小时；所述过氧化氢的加入量为洗脱液总体积的0.9%~1.1%。