CN103937783A - 一种单克隆微囊藻dna的提取方法 - Google Patents
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Abstract
一种单克隆微囊藻DNA的提取方法,将新鲜水样中微囊藻单克隆在解剖镜下分离(体积约1μl),放入0.2mlEP管中,封口膜封严,置-86℃中30秒后,立即转入80℃水浴5分钟,反复5次;EP管中的1ul液体得到单克隆微囊藻DNA;直接作为DNA模板用于PCR反应。本方法可以无污染风险地获得单克隆微囊藻DNA,精准分析目的微囊藻基因,PCR扩增片段可以直接测序。结果可用于种的鉴定、毒性鉴定,水体监测以及进一步的分子研究。特点优点时间短(30-40分钟),无污染风险,可精确分析单克隆DNA(PCR结果可直接用于测序分析),设备要求简单,不需任何化学试剂,易于掌握,易于推广。
Description
技术领域
本发明属于生物体的DNA提取技术,特别涉及一种单克隆微囊藻DNA的提取方法。
背景技术
为了监测和预防微囊藻水华,提取DNA进行种属及毒性鉴定已经成为必要。目前微囊藻DNA提取技术,多是针对扩培后的藻株或野外混合水样直接提取,有三方面不足:一,时间长。由于要对单克隆微囊藻扩培,才能获得足够多的遗传信息一致的DNA用于分析,所以从采样到得到DNA耗时至少一周;二,受污染风险大。扩培操作繁琐,中间环节易受细菌污染,直接导致DNA不能用于分析;三,难以精准分析。野外混合水样直接提取DNA法,只能监测有无目的产毒微囊藻,不能测序,不能明确分类鉴定,无法深入分析研究。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是:提供一种单克隆微囊藻DNA的提取方法。可以无污染风险地获得单克隆微囊藻DNA,精准分析目的微囊藻基因,PCR扩增片段可以直接测序,结果可用于种的鉴定、毒性鉴定,水体监测以及进一步的分子研究。
本发明的技术方案是:
一种单克隆微囊藻DNA的提取方法,其特征在于:将新鲜水样中微囊藻单克隆在解剖镜下分离(体积约1ul),放入0.2mlEP管中,封口膜封严,置-86℃中30秒后,立即转入80℃水浴5分钟,反复5次;EP管中的1ul液体得到单克隆微囊藻DNA;直接作为DNA模板用于PCR反应。
本发明效果是:
本方法可以无污染风险地获得单克隆微囊藻DNA,精准分析目的微囊藻基因,PCR扩增片段可以直接测序。结果可用于种的鉴定、毒性鉴定,水体 监测以及进一步的分子研究。
特点优点时间短(30-40分钟),无污染风险,可精确分析单克隆DNA(PCR结果可直接用于测序分析),设备要求简单,不需任何化学试剂,易于掌握,易于推广。
具体实施方式
一种单克隆微囊藻DNA的提取方法将新鲜水样中微囊藻单克隆在解剖镜下分离(体积约1ul),放入0.2mlEP管中,封口膜封严,置-86℃中30秒后,立即转入80℃水浴5分钟,反复5次。EP管中的1ul液体得到单克隆微囊藻DNA;直接作为DNA模板用于PCR反应。
本专利申请由国家国际科技合作专项资助“饮用水源保护生态修复成套关键技术合作研究”(项目编号:2013DFA71340)
International Science&Technology Cooperation Program of China(Grant No.2013DFA71340)。
Claims (1)
1.一种单克隆微囊藻DNA的提取方法,其特征在于:将新鲜水样中微囊藻单克隆在解剖镜下分离,体积约1ul,放入0.2mlEP管中,封口膜封严,置-86℃中30秒后,立即转入80℃水浴5分钟,反复5次;EP管中的1ul液体,得到单克隆微囊藻DNA;可直接作为DNA模板用于PCR反应。
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Citations (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005028680A2 (en) * | 2003-09-12 | 2005-03-31 | Biocontrol Systems, Inc. | Methods, compositions, and kits for the concentration and detection of microorganisms |
CN1757707A (zh) * | 2005-08-15 | 2006-04-12 | 厦门大学 | 耐高温巴氏杜氏藻诱变选育方法 |
KR20060112076A (ko) * | 2005-04-26 | 2006-10-31 | 오재돈 | 경제성과 안정성을 고려한 최적의 다중증폭기법을 이용한한우 개체식별 마커시스템 개발 |
CN1916178A (zh) * | 2006-09-08 | 2007-02-21 | 东北林业大学 | 一种定向培育含有海藻糖烟草杂合体的新方法 |
CN101386893A (zh) * | 2008-10-28 | 2009-03-18 | 武汉大学 | 一种检测口蹄疫病毒基因组rna的单细胞实时荧光定量rt-pcr的方法 |
CN101701264A (zh) * | 2009-11-20 | 2010-05-05 | 深圳大学 | 一种基于pcr-dgge水体蓝藻检测方法及试剂盒 |
CN102586230A (zh) * | 2012-03-02 | 2012-07-18 | 山东农业大学 | 基于pcr的玉米半粒种子dna快速提取方法 |
CN102643751A (zh) * | 2012-04-25 | 2012-08-22 | 同济大学 | 一种快速分离纯化小球藻的方法 |
CN103060311A (zh) * | 2013-02-05 | 2013-04-24 | 江苏省农业科学院 | 一种油菜单粒种子基因组dna高通量快捷提取方法 |
CN103675283A (zh) * | 2013-12-04 | 2014-03-26 | 中国海洋大学 | 中肋骨条藻的酶联免疫反应检测方法 |
CN103704121A (zh) * | 2013-12-02 | 2014-04-09 | 中国海洋大学 | 多肋藻配子体克隆杂交育苗技术 |
-
2014
- 2014-04-29 CN CN201410177188.7A patent/CN103937783A/zh active Pending
Patent Citations (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005028680A2 (en) * | 2003-09-12 | 2005-03-31 | Biocontrol Systems, Inc. | Methods, compositions, and kits for the concentration and detection of microorganisms |
KR20060112076A (ko) * | 2005-04-26 | 2006-10-31 | 오재돈 | 경제성과 안정성을 고려한 최적의 다중증폭기법을 이용한한우 개체식별 마커시스템 개발 |
CN1757707A (zh) * | 2005-08-15 | 2006-04-12 | 厦门大学 | 耐高温巴氏杜氏藻诱变选育方法 |
CN1916178A (zh) * | 2006-09-08 | 2007-02-21 | 东北林业大学 | 一种定向培育含有海藻糖烟草杂合体的新方法 |
CN101386893A (zh) * | 2008-10-28 | 2009-03-18 | 武汉大学 | 一种检测口蹄疫病毒基因组rna的单细胞实时荧光定量rt-pcr的方法 |
CN101701264A (zh) * | 2009-11-20 | 2010-05-05 | 深圳大学 | 一种基于pcr-dgge水体蓝藻检测方法及试剂盒 |
CN102586230A (zh) * | 2012-03-02 | 2012-07-18 | 山东农业大学 | 基于pcr的玉米半粒种子dna快速提取方法 |
CN102643751A (zh) * | 2012-04-25 | 2012-08-22 | 同济大学 | 一种快速分离纯化小球藻的方法 |
CN103060311A (zh) * | 2013-02-05 | 2013-04-24 | 江苏省农业科学院 | 一种油菜单粒种子基因组dna高通量快捷提取方法 |
CN103704121A (zh) * | 2013-12-02 | 2014-04-09 | 中国海洋大学 | 多肋藻配子体克隆杂交育苗技术 |
CN103675283A (zh) * | 2013-12-04 | 2014-03-26 | 中国海洋大学 | 中肋骨条藻的酶联免疫反应检测方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
周晓明等: "65℃预处理提高蓝绿藻基因及毒素检测水平", 《中国环境科学》 * |
高越: "微小亚历山大藻总RNA提取方法的比较研究", 《中国海洋湖泽学会藻类学分会第七届会员大会暨第十四次学术讨论会论文摘要集》 * |
黄璇: "单细胞技术在正链RNA病毒研究中的应用", 《中国博士学位论文全文数据库 基础科技辑》 * |
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