CN103588870A - 一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法 - Google Patents

一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法。该方法为：（1）将壶瓶碎米荠脱脂；（2）将壶瓶碎米荠在60±5℃条件下用75%的酒精溶液浸泡；（3）过滤浸泡后所得的混合物，去除酒精溶液，干燥得到粉末；（4）将所得粉末加水，60～80℃条件下进行水提操作，之后过滤、浓缩水提液得到浓缩液；（5）浓缩液中加乙醇，加入乙醇的体积占溶液总量的70%，静置或者过滤得到醇沉物；（6）醇沉物中加水，再加入果胶酶保温40±5分钟，之后加入高温淀粉酶保温30±5分钟得到水解液；（7）水解液中加乙醇，加入的乙醇体积占溶液总量75%以上，静置或者过滤，获得沉淀物；（8）干燥所得沉淀物。本发明适合大规模提取壶瓶碎米荠的植物硒蛋白。

Description

一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法
技术领域
本发明属于植物蛋白提取方法技术领域，具体涉及一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法。
背景技术
硒是人体必需的微量元素，在人体中发挥着重要的生理功能。无机硒具有蓄积性毒性和致突变作用，使用时剂量难以控制。与无机硒相比，硒蛋白具有毒性低、生物利用率高等优点。近年来，开发与应用纯天然植物硒蛋白成为国内外动物营养学的研究热点之一。
壶瓶碎米荠，是我国特有的十字花科碎米荠属植物新种，具有超强的富硒能力。通过人工普通补硒措施栽培，壶瓶碎米荠硒含量高达1000mg/Kg以上，经过检测，壶瓶碎米荠植株的硒形态大部分以硒代氨基酸存在，属于有机硒。关于植物硒蛋白的提取，目前还没有适合大规模生产的有效方法，本发明涉及一种的方法。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法，它适合大规模提取壶瓶碎米荠的植物硒蛋白。
本发明解决所述技术问题的方案是：一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法，依次包括如下步骤，
（1）将壶瓶碎米荠粉碎后脱脂；
（2）将壶瓶碎米荠在60±5℃条件下用75%的酒精溶液浸泡1小时；
（3）过滤浸泡后所得的混合物，去除酒精溶液，干燥得到壶瓶碎米荠粉末；
（4）将所得的壶瓶碎米荠粉末加适量水，60～80℃条件下进行水提操作，之后过滤、浓缩水提液得到浓缩液；
（5）浓缩液中加乙醇，加入乙醇的体积占溶液总量的70%，然后静置或者过滤得到醇沉物；
（6）醇沉物中加水，再加入果胶酶保温40±5分钟，之后加入高温淀粉酶保温30±5分钟得到水解液；
（7）水解液中加乙醇，加入的乙醇体积占溶液总量75%以上，静置或者过滤，获得沉淀物；
（8）干燥所得沉淀物。
作为改进，所述步骤（4）中壶瓶碎米荠粉末与加入的水之比为1:8（质量比）。
作为改进，所述步骤（4）的水提操作共进行2次，每次1小时。
作为改进，所述步骤（4）浓缩水提液时，当有沉淀物析出时停止浓缩。
作为改进，所述步骤（6）中醇沉物加水溶解后，醇沉物的质量浓度20%～30%。
作为改进，所述步骤（5）和步骤（7）中的乙醇为95%的乙醇或者无水乙醇。
本提取方法的创新之处和优点在于：
（1）通过先用75%的酒精溶液去除单糖、二糖、低聚糖、部分金属离子和无机硒；
（2）以往的蛋白质沉淀一般采用调节等电点或者加入固体硫酸铵达80％饱和的方法获得，本发明采取加入70%乙醇的方法获得硒蛋白，并且找到了沉淀壶瓶碎米荠硒蛋白的适宜醇浓度（浓度过高会沉淀部分低聚糖，浓度过低蛋白质沉淀不完全），另一方面可以有效地去除残留无机硒；
（3）依次加果胶酶和淀粉酶并保温，水解果胶和淀粉；通过两次醇沉的办法，有效地去除了果胶和淀粉等杂质，获得纯度较高的植物硒蛋白，适合大规模生产提取。
具体实施方式
实施例1
一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法，依次包括如下步骤，
（1）将壶瓶碎米荠粉碎后脱脂，再将其干燥；
（2）将壶瓶碎米荠在60±5℃条件下用75%的酒精溶液浸泡1小时，去除小分子糖、金属离子和无机硒等杂质；
（3）过滤浸泡后所得的混合物，去除酒精溶液，干燥得到壶瓶碎米荠粉末；
（4）将所得的壶瓶碎米荠粉末加适量水，壶瓶碎米荠粉末与加入的水之比为1:8（质量比），60～80℃条件下进行水提操作，水提两次，每次1小时，之后过滤、浓缩水提液得到浓缩液；浓缩水提液时，当有沉淀物析出时停止浓缩；
（5）浓缩液中加乙醇，加入乙醇的体积占溶液总量的70%，然后静置或者过滤得到醇沉物；本步骤使用的乙醇为95%的乙醇或者无水乙醇；本步骤的目的是获得粗提壶瓶碎米荠植物硒蛋白和去除残留无机硒。
（6）醇沉物中加水，醇沉物加水溶解后，醇沉物的质量浓度20%～30%，再加入果胶酶保温40±5分钟，之后加入高温淀粉酶保温30±5分钟得到水解液；本步骤的目的是去除果胶和淀粉等杂质；
（7）水解液中加乙醇，加入的乙醇体积占溶液总量75%以上，静置或者过滤，获得沉淀物；本步骤使用的乙醇为95%的乙醇或者无水乙醇；此步骤的目的是获得较高纯度的植物硒蛋白；
（8）干燥所得沉淀物，粉碎后包装。
传统的实验室蛋白质提取方法是利用tris-HCl作为提取液，在低温研磨提取，然后离心。方法复杂并且成本较高，不适合大规模生产。本发明方法首先用75%酒精去除单糖、二糖、低聚糖和无机硒等杂质，然后以水为溶剂提取浓缩醇沉，水解法去除淀粉和果胶，获得较高纯度的硒蛋白。本发明方法提取植物硒蛋白后，可以提出水溶性的植物硒蛋白，经过茚三酮实验检测，其中植物硒蛋白的比例可以达到85%左右。

Claims (6)

1.一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法，其特征在于：依次包括如下步骤，
（1）将壶瓶碎米荠粉碎后脱脂；
（2）将壶瓶碎米荠在60±5℃条件下用75%的酒精溶液浸泡1小时；
（3）过滤浸泡后所得的混合物，去除酒精溶液，干燥得到壶瓶碎米荠粉末；
（4）将所得的壶瓶碎米荠粉末加适量水，60～80℃条件下进行水提操作，之后过滤、浓缩水提液得到浓缩液；
（5）浓缩液中加乙醇，加入乙醇的体积占溶液总量的70%，然后静置或者过滤得到醇沉物；
（6）醇沉物中加水，再加入果胶酶保温40±5分钟，之后加入高温淀粉酶保温30±5分钟得到水解液；
（7）水解液中加乙醇，加入的乙醇体积占溶液总量75%以上，静置或者过滤，获得沉淀物；
（8）干燥所得沉淀物。
2.如权利要求1所述的一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法，其特征在于：所述步骤（4）中壶瓶碎米荠粉末与加入的水之比为1:8（质量比）。
3.如权利要求1所述的一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法，其特征在于：所述步骤（4）的水提操作共进行2次，每次1小时。
4.如权利要求1所述的一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法，其特征在于：所述步骤（4）浓缩水提液时，当有沉淀物析出时停止浓缩。
5.如权利要求1所述的一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法，其特征在于：所述步骤（6）中醇沉物加水溶解后，醇沉物的质量浓度20%～30%。
6.如权利要求1所述的一种壶瓶碎米荠植物硒蛋白的提取方法，其特征在于：所述步骤（5）和步骤（7）中的乙醇为95%的乙醇或者无水乙醇。
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