CN105273101A - 一种从牛肝菌中提取牛肝菌多糖的方法 - Google Patents

一种从牛肝菌中提取牛肝菌多糖的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种从牛肝菌中提取牛肝菌多糖的方法,该方法包括以下步骤:(1)用质量分数为0.25-0.35%的盐酸溶液在30-40℃提取牛肝菌1-3?h,得提取液;(2)将所述提取液加碱调节pH值至7.5-8.0,再固液分离除去不溶物,得澄清的水溶液A;(3)在所述水溶液A中加酸调节pH值至4.0-4.5,再固液分离除去不溶物,得澄清的水溶液B;(4)将所述水溶液B加入到大孔吸附树脂柱中,先用水洗涤大孔吸附树脂除去未被吸附的杂质;再用体积分数为15-20%的乙醇溶液洗涤大孔吸附树脂除去极性较高的杂质;再用体积分数为65-70%的乙醇溶液作为解吸液洗涤大孔吸附树脂,收集洗涤后的解吸液,经减压浓缩、干燥得牛肝菌提取物。该方法工艺合理、提取效率高,操作简单,适合工业化生产。

Description

一种从牛肝菌中提取牛肝菌多糖的方法
技术领域
本发明涉及一种从牛肝菌中提取牛肝菌多糖的方法,本发明涉及生物医药领域。
背景技术
牛肝菌(学名:Boletus)是牛肝菌科和松塔牛肝菌科等真菌的统称,是野生而可以食用的菇菌类,其中除少数品种有毒或味苦而不能食用外,大部分品种均可食用。主要有白、黄、黑牛肝菌。
牛肝菌含有人体必需的8种氨基酸,还含有腺膘呤、胆碱和腐胺等生物碱。可药用,治疗腰腿疼痛、手足麻木、四肢抽搐,还可用以治妇女白带异常。它具有清热解烦、养血和中、追风散寒、舒筋活血、补虚提神等功效。另外,还有抗流感病毒、防治感冒的作用。可见美味牛肝菌确是林中菌类中功能齐全、食药兼用的珍品。经常食用牛肝菌可明显增强机体免疫力、改善机体微循环。
牛肝菌水提物牛肝菌多糖对小白鼠肉瘤S-180的生长有阻抑作用,对肉瘤S-180的抑制率为100%,对艾氏腹水癌的抑制率为90%。同时还有抗流感病毒、防治感冒的作用。。
目前,国内外对牛肝菌的报道主要集中蛋白质类,对牛肝菌中牛肝菌多糖进行的提取研究还较少。
发明内容
本发明解决的技术问题是,方便、经济地从牛肝菌中提取牛肝菌多糖,提高牛肝菌提取物中牛肝菌多糖的含量。
本发明的技术方案是,提供一种从牛肝菌中提取牛肝菌多糖的方法,包括以下步骤:
(1)用质量分数为0.25-0.35%的盐酸溶液在30-40℃提取牛肝菌1-3h,盐酸溶液与牛肝菌的质量比为3-5:1,得提取液;
(2)将所述提取液加碱调节pH值至7.5-8.0,再固液分离除去不溶物,得澄清的水溶
液A;
(3)在所述水溶液A中加酸调节pH值至4.0-4.5,再固液分离除去不溶物,得澄清的
水溶液B;
(4)将所述水溶液B以50-100L/h的流速加入到100L大孔吸附树脂柱中,先用水以100-200L/h的流速洗涤大孔吸附树脂除去未被吸附的杂质;再用体积分数为15-20%的乙醇溶液以30-50L/h的流速洗涤大孔吸附树脂除去极性较高的杂质;再用体积分数为65-70%的乙醇溶液作为解吸液以40-60L/h的流速洗涤大孔吸附树脂,收集洗涤后的解吸液,经减压浓缩、干燥得牛肝菌提取物。
进一步地,步骤(1)中,所述盐酸溶液的质量分数为0.3%。
进一步地,所述固液分离为过滤或离心。
进一步地,所述大孔吸附树脂为中极性大孔吸附树脂。
进一步地,所述大孔吸附树脂为AB-8大孔吸附树脂。
进一步地,所述酸为醋酸。
进一步地,所述碱为氢氧化钙。
进一步地,所述步骤(4)中减压浓缩的温度为60-65℃。
进一步地,所述干燥为真空干燥或喷雾干燥,干燥至牛肝菌提取物的水分不超过5%。
进一步地,在所述步骤(1)之前,将牛肝菌破碎至0.5cm以下。
目前类似物质的通常采用的是醇提,成本高,浓缩后用低温长时间沉淀除去杂质,主要缺陷是温度要求高(4℃左右)、时间长(静置12-48小时)、杂质去除不完全,从而导致生产周期产、成本高,而且有效成分含量低、难于产业化。本发明突出的优点是,采用盐酸水溶液提取,成本低,而且不需要进行浓缩,工艺简单连贯,提取液固液分离后直接加碱调节pH值至7.5-8.0,溶液中在酸性条件可溶的杂质会在弱碱性下迅速沉淀,加醋酸调节pH值至4.0-4.5,溶液中在弱碱性条件可溶的杂质会在弱酸性下迅速沉淀,不需低温长时间静置,然后即可常温稀释、立即分离,极大缩短了生产周期。再使用得到酸性水溶液上大孔吸附树脂柱分离,强极性的杂质无法在树脂上吸附,再采用15-20%的乙醇洗涤除去中等极性的杂质,杂质去除完全,产品有效成分高。目前常用的提取方法,提取物中目标产物的含量一般在5%,而用本发明的方法,提取物中牛肝菌多糖的含量能达到40-60%。本发明制备出的产品主要用于膳食补充剂、营养保健品。
本发明的优势在于:
1、本方法中牛肝菌多糖的提取连贯性好,工艺简单,适合工业推广。
2、本方法工艺合理、有效成分含量高、提取效率高,操作简单,适合工业化生产。
3、本发明所制备的提取物纯度稳定,牛肝菌多糖含量在40-60%之间。
4、本发明的制备方法收率高;溶剂可以回收再利用。
具体实施方式
实施例1
称取干燥牛肝菌100kg破碎至0.5cm以下,投入提取罐中,并加入0.3%盐酸溶液500L,开搅拌;打开夹套蒸汽加热至40℃时,开始计时,提取3h,料液过400目滤袋;回流提取完毕后,料液过400目滤袋,滤液加氢氧化钙调节pH值至7.5,离心分离;离心清液加醋酸调节pH值至5.0,离心分离;离心清夜以80L/h的流速加入到100L大孔吸附树脂柱中,先用水以120L/h的流速洗涤大孔吸附树脂除去未被吸附的杂质;再用体积分数为15%的乙醇溶液以45L/h的流速洗涤大孔吸附树脂除去极性较高的杂质;再用体积分数为65%的乙醇溶液作为解吸液以50L/h的流速洗涤大孔吸附树脂,收集洗涤后的解吸液,经减压浓缩、干燥得牛肝菌提取物,牛肝菌多糖含量为59.7%。
实施例2
称取干燥牛肝菌100kg破碎至0.5cm以下,投入提取罐中,并加入0.25%盐酸溶液300L,开搅拌;打开夹套蒸汽加热至30℃时,开始计时,提取2h,料液过400目滤袋;回流提取完毕后,料液过400目滤袋,滤液加氢氧化钙调节pH值至8.0,离心分离;离心清液加醋酸调节pH值至4.5,离心分离;离心清夜以50L/h的流速加入到100L大孔吸附树脂柱中,先用水以100L/h的流速洗涤大孔吸附树脂除去未被吸附的杂质;再用体积分数为15%的乙醇溶液以30L/h的流速洗涤大孔吸附树脂除去极性较高的杂质;再用体积分数为70%的乙醇溶液作为解吸液以40L/h的流速洗涤大孔吸附树脂,收集洗涤后的解吸液,经减压浓缩、干燥得牛肝菌提取物,牛肝菌多糖含量为42.8%。
实施例3
称取干燥牛肝菌100kg破碎至0.5cm以下,投入提取罐中,并加入0.35%盐酸溶液400L,开搅拌;打开夹套蒸汽加热至35℃时,开始计时,提取1h,料液过400目滤袋;回流提取完毕后,料液过400目滤袋,滤液加氢氧化钙调节pH值至7.8,离心分离;离心清液加醋酸调节pH值至4.8,离心分离;离心清夜以100L/h的流速加入到100L大孔吸附树脂柱中,先用水以200L/h的流速洗涤大孔吸附树脂除去未被吸附的杂质;再用体积分数为20%的乙醇溶液以50L/h的流速洗涤大孔吸附树脂除去极性较高的杂质;再用体积分数为65%的乙醇溶液作为解吸液以60L/h的流速洗涤大孔吸附树脂,收集洗涤后的解吸液,经减压浓缩、干燥得牛肝菌提取物312g,牛肝菌多糖含量为54.5%。

Claims (10)

1.一种从牛肝菌中提取牛肝菌多糖的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)用质量分数为0.25-0.35%的盐酸溶液在30-40℃提取牛肝菌1-3h,盐酸溶液与牛肝菌的质量比为3-5:1,得提取液;
(2)将所述提取液加碱调节pH值至7.5-8.0,再固液分离除去不溶物,得澄清的水溶
液A;
(3)在所述水溶液A中加酸调节pH值至4.0-4.5,再固液分离除去不溶物,得澄清的
水溶液B;
(4)将所述水溶液B以50-100L/h的流速加入到100L大孔吸附树脂柱中,先用水以100-200L/h的流速洗涤大孔吸附树脂除去未被吸附的杂质;再用体积分数为15-20%的乙醇溶液以30-50L/h的流速洗涤大孔吸附树脂除去极性较高的杂质;再用体积分数为65-70%的乙醇溶液作为解吸液以40-60L/h的流速洗涤大孔吸附树脂,收集洗涤后的解吸液,经减压浓缩、干燥得牛肝菌提取物。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述盐酸溶液的质量分数为0.3%。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述固液分离为过滤或离心。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述大孔吸附树脂为中极性大孔吸附树脂。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述大孔吸附树脂为AB-8大孔吸附树脂。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述酸为醋酸。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述碱为氢氧化钙。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(4)中减压浓缩的温度为60-65℃。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述干燥为真空干燥或喷雾干燥,干燥至
牛肝菌提取物的水分不超过5%。
10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在所述步骤(1)之前,将牛肝菌破碎至
5cm以下。
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