CN104628798A - 从紫皮石斛原料中同时制备花色苷及多糖的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种从紫皮石斛原料中同时制备花色苷及多糖的方法，所述方法包括以下步骤：1)制备水提液：将新鲜紫皮石斛茎条在水中煎煮，并进行固液分离，所得液体为水提液；2)浓缩水提液：将水提液蒸发，得到浓缩水提液；3)提取多糖：将乙醇加入浓缩水提液中，静置后进行固液分离，所得固体干燥即为多糖；4)提取花色苷：将步骤3)固液分离所得液体去除乙醇后，再将溶液干燥即得花色苷。所述方法能够简便地将紫皮石斛中的花色苷色素和有功能活性的多糖同时分别提取出，并且得到的花色苷色素和多糖纯度较高；提取过程中能耗较低；该方法既可以提高时效，也可以充分利用资源，具有较好的应用前景。

Description

从紫皮石斛原料中同时制备花色苷及多糖的方法
技术领域
本发明涉及中药技术领域，尤其涉及一种从紫皮石斛原料中同时制备花色苷及多糖的方法。
背景技术
石斛为传统贵重中药材，广泛分布于我国云、贵、川等地。早在《神农本草经》中就有记载，具有滋阴清热、生津益胃和润肺止咳等功效。临床一般将其用于慢性萎缩性胃炎、降血糖、抗肿瘤和抗衰老等。现代药理研究表明，其主要成分是多糖，因而石斛多糖广泛应用于保健食品及药品中。
紫皮石斛是云南主栽品种，除了有良好的保健功效外，其水提液呈现明亮的淡紫色，可作为食用色素或添加剂。紫皮石斛中显色的主要成分为花色苷，花色苷是花色素与糖以糖苷键结合而成的一类化合物，属于小分子物质，具有独特的功能性，被应用于清除体内自由基、增殖叶黄素、抗肿瘤、抗癌、抗炎、抑制脂质过氧化和血小板凝集、预防糖尿病、减肥、保护视力等。紫皮石斛的功能性成分为多糖，属于大分子物质，紫皮石斛作为石斛的一种，其含有的多糖具有抗衰老、提高免疫力、活血化瘀、提高心脑血管功能、抗肿瘤、治疗消化系统疾病和治疗眼科疾病等功效。但是在提取紫皮石斛中的花色苷和多糖时，两者均含在水提液中，不好分离。
CN 103910810A公开了一种从石斛原料同时制备石斛色素和石斛多糖的方法，该方法包括：(1)利用有机溶剂的水溶液对所述石斛原料进行打浆，以便得到石斛浆液；(2)对所述石斛浆液进行过滤，以便得到滤液和滤渣，其中，所述滤渣含有纤维；(3)将所述滤液进行静置或离心，以便获得上清液和沉淀，其中，所述上清液含有石斛色素，所述沉淀含有石斛多糖。然后再将所述沉淀中加入2-5倍量蒸馏水溶解，于100℃煮沸5-10分钟，冷却进行离心，以便获得石斛多糖浓缩液；以及进一步将所述石斛多糖浓缩液进行干燥；将所述上清液中加入抗氧化剂后，真空加热浓缩，以便得到石斛色素浓缩液，其中，所述抗氧化剂为选自维生素C、维生素E、茶多酚和抗坏血酸棕榈酸酯的至少一种；以及将所述石斛色素浓缩液进行干燥，以便获得石斛色素干粉。但是此种方法采用打浆的方法得到石斛浆液，得到的多糖不纯，且获取石斛多糖和石斛色素的后处理工序复杂；该方法仅适合铁皮石斛、金钗石斛、鼓槌石斛和流苏石斛，不适于紫皮石斛。
CN 102786604A公开了一次性从铁皮石斛中分离提取石斛多糖、石斛碱、毛兰素的方法，从铁皮石斛中提取石斛多糖、石斛碱和毛兰素的方法，包括石斛破碎、酶解反应、超声波提取、微滤、超滤和纳米膜浓缩、固液分离、真空低温蒸馏、溶剂萃取、溶剂回收、重结晶、真空低温干燥和二氧化碳超临界流体纯化，最后得到石斛多糖、毛兰素、石斛碱。但是该方法对设备要求较高，工艺较复杂。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从紫皮石斛原料中同时制备花色苷及多糖的方法，所述方法能够简便地将紫皮石斛中的花色苷色素和有功能活性的多糖同时分别提取出，并且纯度较高，既可以提高时效，也可以充分利用资源，有较好的应用前景。
为达此目的，本发明采用以下技术方案：
一种从紫皮石斛原料中同时制备花色苷及多糖的方法，包括以下步骤：
1)制备水提液：将新鲜紫皮石斛茎条在水中煎煮，并进行固液分离，所得液体为水提液；
2)浓缩水提液：将水提液蒸发，得到浓缩水提液；
3)提取多糖：将乙醇加入浓缩水提液中，静置后进行固液分离，所得固体干燥即为多糖；
4)提取花色苷：将步骤3)固液分离所得液体去除乙醇后，再将溶液干燥即得花色苷。
步骤1)所述紫皮石斛茎条预先切成小段，有利于紫皮石斛茎条中的花色苷和多糖的渗出，本发明中将紫皮石斛茎条预先切成3cm长段，也可切成更短的小段或其他长度的小段；所述紫皮石斛茎条的质量g与所述水的体积ml比为1:20-30，如1:22、1:23、1:24、1:25、1:26、1:27、1:28或1:29等，所述煎煮的时间为2-4h，如2.1h、2.2h、2.3h、2.5h、2.7h、2.9h、3.0h、3.2h、3.5h、3.7h或3.9h等；所述煎煮的温度为80-100℃，如82℃、85℃、87℃、89℃、90℃、92℃、95℃、97℃或99℃等，煎煮温度对于紫皮石斛茎条中花色苷和多糖的渗出影响不大，在实际操作中也可以选择其他的煎煮温度；所述紫皮石斛茎条在水中重复煎煮2次，所得水提液合并使用，以充分利用紫皮石斛茎条中的多糖和花色苷。所述固液分离只要能够达到将紫皮石斛茎条与所述水提液分离的目的即可，具体分离方式可选择离心分离。本发明采用水提法将紫皮石斛茎条中的多糖和花色苷提取出，保证了花色苷和多糖的纯度，并且只需简单的固液分离就能将紫皮石斛茎条去除，节约能耗。
步骤2)所述浓缩水提液，适量浓缩即可，其主要目的为将水提液中的水蒸发一部分，以减少步骤3)对乙醇的需要量，从而节约资源。本发明将水提液浓缩至原溶液体积的1/4。
由于多糖不溶于乙醇，步骤3)采用醇沉多糖的方式将浓缩水提液中的多糖沉淀出来，所用乙醇为体积分数为80％以上的乙醇，如82％、85％、88％、90％、92％、95％、97％或99％等，其他质量分数的乙醇也可在此使用，只要保证乙醇在溶液中的最终浓度为60-80％即可，如62％、65％、68％、70％、72％、75％、78％或79％等。加入乙醇之后，将溶液静置6-20h，如8h、9h、10h、12h、14h、16h、17h、18h或19h等，再进行固液分离。所述固液分离只要能够达到将多糖与溶液分离的目的即可，具体分离方式不限于离心分离。所述干燥为冷冻干燥，用低温处理，有利于活性物质的完全保留，所述干燥温度为-40℃至-190℃，如-180℃、-170℃、-150℃、-130℃、-110℃、-100℃、-90℃、-80℃、-70℃、-60℃、-50℃或-45℃等。本发明采用乙醇沉出的方法保证了提取多糖的纯度。
步骤4)采用旋转蒸发的方式去除乙醇；由于花色苷在酸性溶液中比较稳定，因此，将溶液干燥前先调节溶液的pH，使得溶液显酸性，调节pH使用的酸性溶液为盐酸，所述pH调节至2-5.5，如将pH值调节至2.5、3、3.5、4、4.5或5等；所述干燥为冷冻干燥，干燥温度为-40℃至-190℃，如-180℃、-170℃、-150℃、-130℃、-110℃、-100℃、-90℃、-80℃、-70℃、-60℃、-50℃或-45℃等。本发明采用调整pH值及低温干燥的方法，保证了色素的稳定性。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明的方法能够将紫皮石斛中的花色苷色素和有功能活性的多糖同时分别提取出，工艺简便，所需原料廉价易得，既能提高时效，也能充分利用资源，并且能耗较低，提取的花色苷色素和多糖具有较高的纯度，花色苷含量在72％以上，多糖含量在93％以上，具有较好的应用前景。
附图说明
图1是本发明提供的从紫皮石斛原料中同时制备花色苷及多糖的工艺流程图。
具体实施方式
下面结合附图并通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。
如图1所示，为本发明提供的从紫皮石斛原料中同时制备花色苷及多糖的工艺流程图。本发明所述从紫皮石斛原料中同时制备花色苷及多糖的方法，包括以下步骤：
1)制备水提液：将新鲜紫皮石斛茎条在水中煎煮，并进行固液分离，所得液体为水提液；
2)浓缩水提液：将水提液蒸发，得到浓缩水提液；
3)提取多糖：将乙醇加入浓缩水提液中，静置后进行固液分离，所得固体干燥即为多糖；
4)提取花色苷：将步骤3)固液分离所得液体去除乙醇后，再将溶液干燥即得花色苷。
其中步骤3)中的固体干燥和步骤4)提取花色苷可同时进行。
实施例1
新鲜紫皮石斛茎条，切成3cm长小段，料液比1:20在温度为80℃的水中煎煮2小时，重复2次，所得水提液合并，所得水提液呈现亮紫色。浓缩水提液后，加入95％乙醇，使溶液中乙醇的质量分数达到75％，静置20h，白色沉淀析出。滤出沉淀，-40℃干燥，即得到紫皮石斛多糖，含量为94％。上清液保留，旋转蒸发除去乙醇，再加盐酸调整pH至5.5，此时，溶液呈现明显的紫色。将溶液在-90℃冷冻干燥，即得到石斛花色苷成分，含量为72％。
实施例2
新鲜紫皮石斛茎条，切成3cm长小段，料液比1:25在温度为100℃的水中煎煮3小时，重复2次，所得水提液合并，所得水提液呈现亮紫色。浓缩水提液后，加入90％乙醇，使溶液中乙醇的质量分数达到60％，静置12h，白色沉淀析出。滤出沉淀，-190℃干燥，即得到紫皮石斛多糖，含量为93％。上清液保留，旋转蒸发除去乙醇，再加盐酸调整pH至4，此时，溶液呈现明显的紫色。将溶液在-40℃冷冻干燥，即得到石斛花色苷成分，含量为73％。
实施例3
新鲜紫皮石斛茎条，切成3cm长小段，料液比1:30在温度为90℃的水中煎煮4小时，重复2次，所得水提液合并，所得水提液呈现亮紫色。浓缩水提液后，加入体积分数为80％的乙醇，使溶液中乙醇的质量分数达到80％，静置6h，白色沉淀析出。滤出沉淀，-90℃条件下干燥，即得紫皮石斛多糖，紫皮石斛多糖含量为94％。上清液保留，旋转蒸发除去乙醇，再加盐酸调整pH至2，此时，溶液呈现明显的紫色。将溶液在-190℃冷冻干燥，即得石斛花色苷成分，花色苷含量为75％。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims (10)

1.一种从紫皮石斛原料中同时制备花色苷及多糖的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
1)制备水提液：将新鲜紫皮石斛茎条在水中煎煮，并进行固液分离，所得液体为水提液；
2)浓缩水提液：将水提液蒸发，得到浓缩水提液；
3)提取多糖：将乙醇加入浓缩水提液中，静置后进行固液分离，所得固体干燥即为多糖；
4)提取花色苷：将步骤3)固液分离所得液体去除乙醇后，再将溶液干燥即得花色苷。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述紫皮石斛茎条的质量g与所述水的体积ml比为1:20-30，所述煎煮的时间为2-4h；
优选地，所述紫皮石斛茎条预先切成3cm长段。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤1)所述煎煮的温度为80-100℃。
4.根据权利要求1-3之一所述的方法，其特征在于，步骤1)所述紫皮石斛茎条在水中重复煎煮2次，所得水提液合并使用。
5.根据权利要求1-4之一所述的方法，其特征在于，步骤3)所述乙醇为体积分数为80％以上的乙醇，所述乙醇在溶液中的质量分数为60-80％；
优选地，所述静置的时间为6-20h。
6.根据权利要求1-5之一所述的方法，其特征在于，步骤3)所述干燥为冷冻干燥，所述干燥温度为-40℃至-190℃。
7.根据权利要求1-6之一所述的方法，其特征在于，步骤4)将溶液干燥前先调节溶液的pH；
优选地，调节pH使用的酸性溶液为盐酸，所述pH调节至2-5.5。
8.根据权利要求1-7之一所述的方法，其特征在于，步骤4)采用旋转蒸发的方式去除乙醇。
9.根据权利要求1-8之一所述的方法，其特征在于，步骤4)所述干燥为冷冻干燥，干燥温度为-40℃至-190℃。
10.根据权利要求1-9之一所述的方法，其特征在于，所述固液分离方式为离心分离。
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