CN103239652B - 治疗慢性肾脏疾病的药物组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种治疗慢性肾脏疾病的药物组合物及其制备方法和应用，该药物组合物包含作为活性成分的黄芪、五味子、丹参、青蒿和土茯苓制成。本发明的药物组合物，方简药精，功专效著，成本低廉，药源广，该组合物具有补脾肾、活血瘀、利湿浊之功效。用于治疗肾虚血瘀之慢性肾脏疾病的蛋白尿。对PAN引起的蛋白尿性大鼠肾病具有保护作用。临床治疗总有效率高，疗效确切。

Description

治疗慢性肾脏疾病的药物组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种治疗慢性肾脏疾病的药物组合物及其制备方法和在制备用于治疗慢性肾脏疾病的蛋白尿药物中的应用。

背景技术

慢性肾脏病是指肾脏损害或肾小球滤过率低于60ml/min/1.73m²持续至少3个月。肾脏损害是指肾脏病理学检查异常，或肾损害的实验室检查指标(如血、尿成分或影像学检查)异常。慢性肾脏病已经成为一个威胁全世界公共健康的主要疾病。在发达国家中(如美国和荷兰)，普通人群中约有6.5～11％患有不同程度的肾脏疾病，其中美国的肾脏病病人数已经超过2000万；医院每年收治肾脏病病人高达100多万，而得了肾脏病未去就医的人数要比收治的病人数大得多。在中国目前尚无详实的慢性肾脏病流行病学调查数据，但初步调查结果显示，40岁以上人群慢性肾脏病的患病率约达8～11％。目前，慢性肾脏病在我国呈现“三高一低”的状态，即高发病率、高致残率、高医疗费、低知晓率。因此，加速开展对慢性肾脏病的筛查和防治，已经成为不可忽视的公共卫生问题。

有研究结果表明：蛋白尿控制的好坏与慢性肾脏病的发展速度及并发症发生率的高低密切相关，对于蛋白尿2g/d以下的慢性肾脏病患者，每年肾小球滤过率GFR下降速度为3～4ml/min；而对于蛋白尿3g/d以上的慢性肾脏病患者，每年肾小球滤过率下降速度达7～14ml/min。因此，降低蛋白尿，使蛋白尿达标是重中之重。尽可能使尿蛋白减至理想目标(＜3g/d)，或明显减轻微量白蛋白尿，可有效改善CKD患者的预后。中药治疗注重整体调节，强调在多个环节发挥作用，具有西医不可比拟的优越性。因此研制开发治疗慢性肾脏疾病的蛋白尿药物更有临床价值。

中医学认为，慢性肾脏疾病，临床上多以蛋白尿，水肿为主症，其基本病机为“脾肾阳虚与血瘀”，“盖脾者土脏，运化水谷精微；肾者水脏，先天之本，主藏精而司开阖”。脾肾阳虚则运化不健，开阖不利，而导致“精微(尿蛋白)”的流失与水肿。另，“血瘀”者，血之瘀滞也，张仲景在《金匮要略》中云“血不利则为水”，清唐容川《血证论》中更明确指出“瘀血流注亦发水肿者，乃血变成水之证，所以言：虚与瘀互为因果也。即虚久则瘀，瘀久则虚，故补肾健脾活血法为治疗慢性肾脏疾病之基本治疗大法。

发明内容

因此，本发明的目的是提供一种治疗慢性肾脏疾病的药物组合物及其制备方法和应用。

本发明提供了一种治疗慢性肾脏疾病的药物组合物，该药物组合物包含作为活性成分的黄芪、五味子、丹参、青蒿和土茯苓。

该组合物中，以黄芪、五味子、丹参为君药，黄芪健脾补气，亦又补肾，《本草纲目》云：芪者，长也，黄芪色黄，为补药之长，故名。所以自古至今，黄芪均以补药之长率先，尤以补脾肾为重，此其第一要药，用量当重，生用者，取其益气固表之功，固表者，益卫气而防外邪也。五味子，酸、温入肾且补中有涩，为补肾之精品，即可补肾填精，又可固涩止遗，确为治疗精微流失之要药也。丹参活血化瘀，古人常有一味丹参功同四物之说。即活血为主，兼有养血之功，慢性肾病，且伤精血，以丹参之活血养血，与黄芪、五味子合之，共奏补肾健脾活血法之疗效，此外，慢性肾脏疾病，脾失健运，肾失司阖，水邪停留，湿浊内蕴，蕴久化热，故以土茯苓为臣药，甘淡利湿，清利湿热，以为君药之臣，确有治标之效。另外，青蒿苦、辛而寒，为佐药即可佐黄芪、五味子、丹参之温性，又可清虚热，利湿热，与上述君臣诸药合用，辅佐治疗，共奏“补脾肾、活血瘀、利湿浊”之功效。故将该组合物用于治疗肾虚血瘀之慢性肾脏疾病的蛋白尿。

现代药理表明：黄芪具有增强肌体的免疫功能，强心、降压、降血糖、利尿、抗衰老、抗肿瘤、抗疲劳、抗病毒、镇静、镇痛等作用。对缺血性的肾脏有保护作用，并有有明显的利尿作用可调节肾小球疾病蛋白质代谢紊乱、提高血浆白蛋白水平，降低尿蛋白量；丹参具有保护血管内皮细胞，抗心律失常，抗动脉粥样硬化，改善微循环，保护心肌，抑制和解除血小板聚集，扩张冠脉、增加冠脉流量，提高机体耐缺氧能力，抑制胶原纤维的产生和促进纤维蛋白的降解，抗炎，抗脂质过氧化和清除自由基，以及保护肝细胞，抗肺纤维化等作用。五味子有抗肾病变作用，五味子有效成分中的木质素对免疫性肾炎呈抑制作用。土茯苓具有利尿、镇痛、抗菌、抗癌、免疫抑制作用。青蒿水提物及溶媒提取物有非常明显的解热、耐高温、抗炎作用和一定的镇痛、抑菌作用。这些药理研究为本品具有补脾肾、活血瘀、利湿浊的作用，用于治疗肾虚血瘀之慢性肾脏疾病的蛋白尿提供了科学依据。

在本发明提供的药物组合物中，所述黄芪、五味子、丹参、青蒿和土茯苓的原料药材的重量份配比可以为：黄芪9～30份，五味子6～12份，丹参8～15份，青蒿4～12份，土茯苓3～10份；优选为黄芪12～20份，五味子9～12份，丹参9～12份，青蒿5～8份，土茯苓5～8份；更优选为黄芪15份，五味子10份，丹参10份，青蒿6份，土茯苓6份。

在本发明的一种实施方案中，所述药物组合物包含作为活性成分的黄芪浸膏、五味子浸膏、丹参浸膏、青蒿浸膏和土茯苓浸膏。

在上述实施方案中，所述黄芪浸膏、五味子浸膏、丹参浸膏、青蒿浸膏和土茯苓浸膏的重量份配比可以为：黄芪浸膏26～36份，五味子浸膏17～25份，丹参浸膏24～31份，青蒿浸膏6～9份，土茯苓浸膏12～15份；优选为黄芪浸膏29～31份，五味子浸膏22～25份，丹参浸膏25～28份，青蒿浸膏6～8份，土茯苓的浸膏12～13份；最优选为黄芪浸膏29.7份，五味子浸膏23.7份，丹参浸膏27.1份，青蒿浸膏7.1份，土茯苓浸膏12.4份。

其中，所述黄芪浸膏、五味子浸膏、丹参浸膏、青蒿浸膏和土茯苓浸膏为将黄芪、五味子、丹参、青蒿和土茯苓药材分别用水提取制得的浸膏。

需要说明的是，虽然各种原料药材的重量份配比与各种浸膏的重量份配比不相同，但这种差别是由于各种药材中活性成分的含量不同所引起的，并不意味着药物组合物中的活性成分配比不同。

在本发明提供的药物组合物中，还可以含有药剂学可接受的辅料。其中，所述药剂学可接受的辅料可以包括：乳糖、糊精、淀粉、可压性淀粉、微晶纤维素、甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羟丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、微粉硅胶和木糖醇中的一种或多种。

根据本发明提供的药物组合物，其中，所述药物组合物可以为口服剂型，优选为颗粒剂、片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、煎膏剂和糖浆剂。

本发明还提供了上述药物组合物的制备方法。在第一种实施方案中，所述药物组合物的制备方法包括将黄芪、五味子、丹参、青蒿和土茯苓的混合物用醇和/或水提取后，将提取液醇沉，滤去沉淀后浓缩。

在第二种实施方案中，所述药物组合物的制备方法包括将黄芪浸膏、五味子浸膏、丹参浸膏、青蒿浸膏和土茯苓浸膏的混合物用水溶解后醇沉，滤去沉淀后浓缩。

在一些实施方案中，本发明的制备方法还可以包括向浓缩得到的浓缩液中加入药剂学可接受的辅料，制成制剂。

优选地，在所述第一种实施方案中，所述药物组合物的制备方法可以包括如下步骤：

(1)将黄芪、五味子、丹参、青蒿和土茯苓的混合物100重量份用600～1600重量份的水或10～50重量％的醇的水溶液煎提，将提取液滤过，减压浓缩至50～200重量份，优选地用800～1200重量份的水煎提2～4次，每次1～3小时，将提取液滤过，减压浓缩至80～150重量份；

(2)向浓缩液中加入体积浓度80～100％的醇至醇的体积含量为50～70％，静置过夜，滤去沉淀，优选地加入体积含量92～98％的乙醇至醇的体积含量为55～65％；

(3)浓缩液中加入药剂学可接受的辅料，混匀；

(4)真空干燥，粉碎过筛或制粒，灌装，灭菌。

优选地，在所述第二种实施方案中，所述药物组合物的制备方法可以包括如下步骤：

(1)将黄芪浸膏、五味子浸膏、丹参浸膏、青蒿浸膏和土茯苓浸膏的混合物100重量份用80～250重量份的水溶解；

(2)加入体积浓度80～100％的醇至醇的体积含量为50～70％，静置过夜，滤去沉淀，优选地加入体积含量92～98％的乙醇至醇的体积含量为55～65％；

(3)浓缩液中加入药剂学可接受的辅料，混匀；

(4)真空干燥，粉碎过筛或制粒，灌装，灭菌。

本发明还提供了所述药物组合物或者按照本发明方法制得的药物组合物在制备用于治疗慢性肾脏疾病的蛋白尿药物中的应用。

本发明的优点在于：本发明提供的药物组合物，方简药精，功专效著，成本低廉，药源广，该组合物具有补脾肾、活血瘀、利湿浊之功效。用于治疗肾虚血瘀之慢性肾脏疾病的蛋白尿。对PAN引起的蛋白尿性大鼠肾病具有保护作用。临床治疗总有效率高，疗效确切。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。

实施例1

本实施例用于说明本发明的药物组合物的制备

(1)将黄芪750g，五味子500g，丹参500g，青蒿300g，土茯苓300g，水煎提3次，每次用23500ml水煎2小时，水提液滤过，减压浓缩至2350g；

(2)浓缩液放冷后加入95％(V/V)的乙醇至醇含量为60％(V/V)，静置过夜，滤去沉淀；

(3)滤液减压浓缩至1750ml，为实施例6样品1；

(3)剩余浓缩液中加入190g乳糖，混匀；

(4)真空干燥，粉碎过6号筛，用90％乙醇制成颗粒，过30目筛制成1000g颗粒，灌装，灭菌。

实施例2

本实施例用于说明本发明的药物组合物的制备

(1)制备各种药材的浸膏

黄芪浸膏：黄芪100重量份用800重量份的水煎提3次，将提取液滤过，滤液减压浓缩(T＝70～75℃)至41.8重量份，密度为1.40(T＝60～65℃)；

五味子浸膏：五味子100重量份用800重量份的水煎提3次，将提取液滤过，滤液减压浓缩(T＝70～75℃)至50重量份，密度为1.41(T＝60～65℃)；

丹参浸膏：丹参100重量份用800重量份的水煎提3次，将提取液滤过，滤液减压浓缩(T＝70～75℃)至57.2重量份，密度为1.39(T＝60～65℃)；

青蒿浸膏：青蒿100重量份用800重量份的水煎提3次，将提取液滤过，滤液减压浓缩(T＝70～75℃)至25重量份，密度为1.36(T＝60～65℃)；

土茯苓浸膏：土茯苓100重量份用800重量份水煎提3次，将提取液滤过，滤液减压浓缩(T＝70～75℃)至43.6重量份，密度为1.38(T＝60～65℃)。

(2)将步骤(1)制得的黄芪浸膏313.5g，五味子浸膏250g，丹参浸膏286g，青蒿浸膏75g，土茯苓浸膏130.8g，加水1295g，混合均匀

(3)向混合物中加入95％(V/V)的乙醇至醇含量为60％(V/V)，静置过夜，滤去沉淀，并将滤液减压浓缩至1750ml；

(4)向浓缩液中加入190g乳糖，混匀；

(5)真空干燥，粉碎过6号筛，用90％乙醇制成颗粒，过30目筛制成1000g颗粒，灌装，灭菌。

实施例3

(1)将黄芪450g，五味子300g，丹参400g，青蒿200g，土茯苓150g，水煎提3次，每次用18000ml 20％重量的乙醇水溶液煎1小时，提取液滤过，减压浓缩至120g；

(2)浓缩液放冷后加入90％(V/V)的乙醇至醇含量为65％(V/V)，静置过夜，滤去沉淀；

(3)浓缩液中加入25g二氧化硅，150g淀粉，混匀；

(4)真空干燥，粉碎过5号筛，填装成1000粒胶囊，灌装，灭菌。

实施例4

本实施例用于说明本发明的药物组合物的制备

(1)将黄芪900g，五味子450g，丹参600g，青蒿400g，土茯苓300g，水煎提3次，每次用21200ml水煎1.5小时，水提液滤过，减压浓缩至4000g；

(2)浓缩液放冷后加入95％(V/V)的乙醇至醇含量为55％(V/V)，静置过夜，滤去沉淀；

(3)滤液减压浓缩至1750ml，为实施例6样品2；

(4)剩余浓缩液中加入120g乳糖，混匀；

(5)真空干燥，粉碎过6号筛，用90％乙醇制成颗粒，过30目筛制成1000g颗粒，灌装，灭菌。

实施例5

本实施例用于说明本发明的药物组合物的制备

(1)将黄芪1000g，五味子400g，丹参500g，青蒿400g，土茯苓300g，水煎提3次，每次用26000ml水煎2小时，水提液滤过，减压浓缩至2600g；

(2)浓缩液放冷后加入95％(V/V)的乙醇至醇含量为60％(V/V)，静置过夜，滤去沉淀；

(3)浓缩液中加入210g乳糖，混匀；

(4)真空干燥，粉碎过6号筛，用90％乙醇制成颗粒，过30目筛制成1000g颗粒，灌装，灭菌。

实施例6

本实施例用于说明本发明的药物组合物的制备

(1)将黄芪750g，五味子500g，丹参500g，青蒿300g，土茯苓300g，各味药材分别用水煎提3次，每次用量为药材量的10倍，每次提取时间为1小时，提取液分别浓缩至与原药材重量相等；

(2)将浓缩液混合均匀；

(3)浓缩液放冷后加入95％(V/V)的乙醇至醇含量为60％(V/V)，静置过夜，滤去沉淀；

(4)滤液减压浓缩至1750ml，为实施例6样品3；

(5)剩余浓缩液中加入200g乳糖，混匀；

(6)真空干燥，粉碎过6号筛，用90％乙醇制成颗粒，过30目筛制成1000g颗粒，灌装，灭菌。

实施例7

本实施例用于说明本发明的药物组合物对对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)引起的大鼠肾病的作用。

考察本品对嘌呤霉素氨基核苷引起的肾小球损伤大鼠慢性肾病模型的蛋白尿的影响。

1、实验材料

1.1药品及试剂

受试药：实施例1、2、6制得的药物组合物，为深棕色黏稠液体，依次记作样品1、2和3，每份各350ml(人临床10天用量)。以0.5％CMC配制成所需浓度使用，4℃冰箱短暂保存。

阳性药：福辛普利钠片(简称福辛普利)，中美上海施贵宝制药有限公司，批号为0911092。以0.5％CMC配制成所需浓度使用，4℃冰箱短暂保存。

造型剂：嘌呤霉素氨基核苷(Puromycin aminonucleoside，PAN)，sigma公司，批号为077K4059。临用时以生理盐水(NS)配制为所需浓度使用，4℃冰箱保存。

1.2实验动物

Wistar大鼠，SPF，天津山川红实验动物科技有限公司提供。动物许可证号：SCXK(津)2009～0001。

2、实验方法

2.1分组和模型制备

雄性Wistar大鼠60只，体重192.7(183～209)g。按体重随机分为6组，每组10只。其中5组颈静脉插管一次注射PAN 70mg/kg制备大鼠肾病模型，另外1组为假手术组，颈静脉插管一次注射NS；造型剂给药体积均为3ml/只，推注时间为5min。

2.2剂量选择依据和给药方案

依据提供的药物量，并考虑到本品为中药制剂，临床是长期用药，需提高剂量用于动物短期给药研究，故本发明药物组合物的剂量确定为10ml/kg，相当于临床用量的2.7倍。阳性药福辛普利，剂量为1mg/kg，相当于临床人日用量。

造型当天开始给药，假手术组和模型对照组灌服0.5％CMC，受试药组灌服本发明的药物组合物，剂量为10ml/kg，阳性药组灌服给予福辛普利。每天1次，连续给药14天。

2.3有效性评价指标

2.3.1尿蛋白量

分别于治疗后第6、10、13天代谢笼收集24h尿液，采用考马斯亮蓝法测定尿中蛋白量。

2.3.2血清生化

末次给药后1h，动物麻醉，腹主动脉取血，常规离心分离血清。双缩脲法测定总蛋白，溴甲酚绿法测定白蛋白，清除法测定脂蛋白，CHOD～PAP法测定总胆固醇(TC)，GPO～PAP法测定甘油三脂(TG)，苦味酸法测定肌酐，脲酶连续检测法测定尿素氮。

2.4统计学处理

所有数据均表示为均数±标准差()。采用非配对t～检验比较组间均数差异的显著性。

3、实验结果

3.1一般观察与对体重增长的影响

实验期间各组动物体重变化见表1。假手术组动物体重增长和外观正常。模型对照组动物体重增长停止，毛色黯淡，偶见腹涨、排泄部润湿、血尿，于第11、13天各死亡1只。样品1、2、3组体重增长几乎停止，样品1和样品3于第13天死亡1只，样品2未见死亡，样品1、2、3各组动物外观异常均明显减轻。阳性药福辛普利组外观基本保持正常，实验期间未见死亡，但体重增长几乎停止。

表1本发明药物组合物对大鼠体重增长(g)的影响

组别	治疗前	治疗1周	治疗2周	死亡动物数
					假手术	192±5	216±7	240±5	0/10
模型对照	192±8	189±9△△△	195±7△△△	2/10
					样品1	192±8	191±7	198±9	1/10
样品2	192±6	190±10	200±12	0/10
					样品3	192±8	191±8	199±10	1/10
阳性药	192±6	190±10	200±12	0/10

注：与假手术组比较：^△△△P＜0.001；与模型对照组比较：P＞0.05。

3.2对尿蛋白及尿量的影响

实验期间各组动物尿量及尿蛋白变化见表2和表3。PAN造型后动物尿蛋白漏泄量明显增加，约于给予造型剂后10天最高，维持至13天以上，上述结果表明，给予PAN能成功复制蛋白尿性肾病模型。灌服样品1能明显降低尿中蛋白漏泄量，给药第6、10、13天分别减少了32.6％、18.5％、24.3％；灌服样品2也能明显降低尿中蛋白漏泄量，给药第6、10、13天分别减少了32.2％、19.0％、25.2％；灌服样品3能明显降低尿中蛋白漏泄量，给药第6、10、13天分别减少了32.6％、19.2％、25.6％；阳性药分别减少了40.0％、29.9％、52.4％。其作用较阳性药弱。PAN造型后动物尿量明显增加，受试药(样品1、2、3)能对抗PAN早期作用，对中期和后期几乎无影响，阳性药对早期有拮抗作用，对中期无作用，对后期有一定作用。

表2本发明药物组合物对肾病大鼠尿蛋白漏泄量(mg/24h)的影响( n＝8～10)

组别	治疗前	治疗6天	治疗10天	治疗13天
					假手术	6.2±1.7	7.8±3.4	9.4±3.8	11.1±4.8
模型对照	6.3±2.1	394.0±86.0△△△	504.2±72.6△△△	504.8±90.9△△△
					样品1	6.2±1.8	268.1±98.3**	412.5±101.8*	384.8±19.6*
样品2	6.2±1.9	266.4±90.8**	410.2±98.1*	380.3±26.8*
					样品3	6.3±2.0	269.5±89.2**	409.3±102.4*	378.6±39.6*
阳性药	6.1±2.1	239.6±62.9***	356.5±62.1***	245.9±73.4***

注：与假手术组比较：^△△△P＜0.001；与模型对照组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001。

表3本发明药物组合物对肾病大鼠尿量(ml/24h)的影响(n＝8～10)

组别	治疗前	治疗6天	治疗10天	治疗13天
					假手术	3.9±1.2	3.8±1.5	4.1±1.9	4.3±1.8
模型对照	3.8±1.3	6.6±1.8△△	12.6±2.5△△△	12.0±2.7△△△
					样品1	3.7±1.2	3.6±1.6***	10.2±2.7	9.8±2.4
样品2	3.8±1.1	3.5±1.6***	10.2±3.5	9.0±3.7
					样品3	3.7±1.3	3.6±1.5***	10.5±3.6	10.1±3.5
阳性药	3.7±1.2	3.6±1.6***	11.2±3.6	8.8±2.7*

注：1、与假手术组比较：^△△P＜0.01，^△△△P＜0.001；

2、与模型对照组比较：^*P＜0.05，^***P＜0.001。

3.3对血清生化的影响

3.3.1对肾清除能力的影响

各组动物血清尿素氮和肌酐变化见表4。PAN造型后动物血清尿素氮明显升高。受试药和阳性药对尿素氮均无影响。

表4本发明药物组合物对肾病大鼠肾清除能力的影响(n＝8～10)

组别	尿素氮(mmol/L)	肌酐(μmol/L)
			假手术	6.84±0.48	35.13±2.97
模型对照	19.90±2.99△△△	35.46±2.11
			样品1	19.96±1.14	35.65±3.16
样品2	19.09±2.10	35.45±2.71
			样品3	18.99±1.88	34.96±4.24
阳性药	20.81±2.28	35.42±6.28

注：与假手术组比较：^△△△P＜0.001。

3.3.2对血清蛋白的影响

各组动物血清蛋白变化见表5。PAN造型后血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比率均明显降低，表明因肾小球受损导致血浆蛋白尤其是白蛋白大量流失，造成低蛋白血症。受试药(样品1、2、3)治疗后能不同程度减少白蛋白流失，纠正白球比率；阳性药也有同样作用，较受试中药稍强。

表5本发明药物组合物对大鼠血清蛋白的影响(n＝8～10)

组别	总蛋白(g/L)	白蛋白(g/L)	球蛋白(g/L)	白球比率
					假手术	65.4±3.9	34.1±1.4	31.2±2.8	1.10±0.07
模型对照	39.6±2.2△△△	15.8±0.8△△△	23.9±1.5△△△	0.66±0.05△△△
					样品1	41.1±2.9	17.3±1.6*	23.8±1.6	0.73±0.07*
样品2	40.8±2.1	17.4±1.3*	23.4±1.6	0.74±0.06*
					样品3	41.5±2.4	18.1±1.5**	23.4±1.5	0.77±0.08*
阳性药	41.9±2.0*	18.3±1.5***	23.6±1.4	0.78±0.08**

注：1、与假手术组比较：^△△△P＜0.001；

2、与模型对照组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001。

3.3.3对血脂水平的影响

各组动物血脂变化见表6。PMN造型后动物的甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)明显增高，表明给予PAN可造成动物高脂血症。受试药(样品1、2、3)治疗后能不同程度拮抗PMN引起的脂质水平升高，其中TG降低了3.3％～6.7％(P＜0.01或P＜0.001)、TC降低了9.4％～10.6％(P＞0.05)；阳性药使TG降低了126.7％(P＜0.001)，TC降低了13.3％(P＜0.05)；受试药较阳性药弱。

表6本发明药物组合物对肾病大鼠血脂的影响(n＝8～10)

组别	TG(mmol/L)	TC(mmol/L)	HDL(mmol/L)	LDL(mmol/L)
					假手术	0.76±0.15	1.77±0.15	1.49±0.12	0.11±0.10
模型对照	1.36±0.09△△△	8.67±1.07△△△	6.21±0.92△△△	2.16±0.29△△△
					样1	0.86±0.40**	8.02±0.67	5.41±0.59*	2.42±0.52
样2	0.82±0.29***	7.94±0.98	5.44±0.38*	2.36±0.45
					样3	0.80±0.41**	7.98±0.89	5.38±0.61*	2.38±0.53
阳性药	0.60±0.29***	7.75±0.56*	5.36±0.30*	2.25±0.43

注：1、与假手术组比较：^△△△P＜0.001；

2、与模型对照组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001。

4.结论

该药物组合物(样品1、2、3)对PAN引起的蛋白尿性大鼠肾病具有一定的保护作用，相当于临床用量2.7倍的受试药的作用强度比相当于临床用量的福辛普利钠片弱。

实施例8

本发明药物组合物的临床资料

用实施例1制得的药物组合物对320例慢性肾脏疾病蛋白尿患者进行了临床治疗研究，取得了较好疗效，现总结如下：

1、临床资料

1)病例选择：所选病例均源于住院及门诊病人，并符合以下条件：(1)神智清楚，能配合治疗；(2)非系统性红斑狼疮，紫癜、糖尿病等原因造成肾损害；(3)不拌有传染性疾病、精神病及中毒性疾病；(4)非未满规定观察期而中断治疗，无法判断疗效或资料不全者。

2)一般情况：320例蛋白尿病人随机分成两组，治疗组160例，其中男性93例，女性67例：年龄27～62岁，平均39.7岁：病程1～8年，平均3.2年。对照组160例，其中男性92例，女性68例：年龄25～62岁，平均38.8岁；病程1～9年，平3.5年。两组患者的性别比例、年龄分布、病程长短等方面无明显差异(P＞0.05)，具有可比性。

3)临床分型：参照文献分为(1)反复发作性肉眼血尿(GH)：临床上以肉眼血尿反复发作为其特点，多数不拌有大量蛋白尿及高血压；(2)无症状尿检异常(U～ab)：临床表现为镜下血尿伴/不伴轻～中度蛋白尿(＜2.0g/d)，通常不伴高血压；(3)肾病综合征/大量蛋白尿型(NS/MP)：临床表现为肾病综合征，或尿检大量蛋白尿(＞2.0g/d)；(4)高血压伴/不伴肾衰型(HT/CRF)：临床表现为血压增高，有或无肾衰竭，尿检有血尿及蛋白尿；(5)血管炎型(VC)：表现为急进性肾炎，肾脏组织学表现为新月体形成，伴肾小球毛细血管袢坏死和/或间质血管炎。治疗组GH 30例，U～ab 76例，NS/MP 31例，HT/CRF 20例，VC 3例；对照组GH 31例，U～ab 77例，NS/MP 30例，HT/CRF 18例，VC 4例。两组患者临床分型比较没有明显差异(P＞0.05)。

4)病理分型：320例患者均经肾穿刺活检确诊，病理分级标准依据1982年WTO制定的《肾病病理分型标准》分为5型：I型：微小病变型；II型：轻度病变型；III型：局灶节段性肾小球肾炎型；IV型：弥漫型膜增生性肾小球肾炎型；V型：弥漫性硬化性肾小球肾炎型。

5)中医辨证：将蛋白尿患者分为肝肾阴虚兼血瘀型、脾肾阳虚兼血瘀型、阴阳两虚兼血瘀型。其中治疗组分别为38例，55例和67例；对照组分别为36例、56例和68例。两组患者中医辨证分型比较没有明显差异(P＞0.05)。

2、方法

1)治疗方案：对照组给予黄葵5^#/次，每日三次口服治疗，配合饮食及对症治疗等，治疗组在对照组的基础上，采用组合物治疗，温水冲服，每日早晚饭后1小时分别服用1袋。三日一剂。配合饮食及对症治疗。两个月为一个疗程。

2)观察指标：尿常规、24h尿蛋白定量(双缩脲法)。

3)统计学处理：根据数据的性质与分布情况，计数资料采用X2检验；计量资料采用t检验；等级资料采用秩和检验。所有数据均采用SPSS10.0统计软件包进行统计学处理。

3、结果

1)两组治疗前后实验室检查的比较见表7。

表7两组治疗前后实验室检查比较

注：与对照组比较：^*P＜0.05；与治疗前比较：^#P＜0.05。

从表7可以看出，两组实验室指标在治疗前比较没有显著性差异，治疗组24h尿蛋白定量治疗前后比较有显著性差异(P＜0.05)，两组间比较，治疗组治疗后24h尿蛋白定量较对照组有显著性差异(P＜0.05)，其它指标比较无显著性差异(P＜0.05)。

表8两组不同辩证分型疗效比较

注：与对照组比较：^*P＜0.01。

从表8可以看出，治疗组中肝肾阴虚兼血瘀、脾肾阳虚兼血瘀、阴阳两虚兼血瘀的总有效率较对照组有非常显著性差异(P＜0.05)；治疗组中，以脾肾阳虚兼血瘀的疗效最佳，较肝肾阴虚兼血瘀有显著性差异(P＜0.05)。

2)两组临床类型疗效比较见表9。

表9两组临床类型疗效比较

注：与对照组比较：^*P＜0.01。

从表9可以看出，治疗组中GH、U～ab、NS/MP、HT/CRF、VC的总有效率较对照组有非常显著性差异(P＜0.01)；治疗组中，以GH的疗效最佳，较VC有非常显著性差异(P＜0.01)。

3)两组病理类型疗效比较见表10。

表10两组病理类型疗效比较

注：与对照组比较：^*P＜0.01。

从表10可以看出，治疗组中，I型、II型、III型、IV型、V型的总有效率较对照组有非常显著性差异(P＜0.01)；治疗组中，以I型的疗效最佳，较V型有非常显著性差异(P＜0.01)。

结论：该组合物对脾肾阳虚兼血瘀的蛋白尿患者疗效最佳，对反复发作性肉眼血尿的疗效最佳，对微小病变型蛋白尿疗效最佳，临床治疗总有效率高，疗效确切。

Claims (25)

1.一种治疗慢性肾脏疾病的药物组合物，该药物组合物的活性成分由黄芪、五味子、丹参、青蒿和土茯苓组成，其中，所述黄芪、五味子、丹参、青蒿和土茯苓的原料药材的重量份配比为：黄芪9～30份，五味子6～12份，丹参8～15份，青蒿4～12份，土茯苓3～10份。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述黄芪、五味子、丹参、青蒿和土茯苓的原料药材的重量份配比为：黄芪12～20份，五味子9～12份，丹参9～12份，青蒿5～8份，土茯苓5～8份。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述黄芪、五味子、丹参、青蒿和土茯苓的原料药材的重量份配比为：黄芪15份，五味子10份，丹参10份，青蒿6份，土茯苓6份。

4.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，该药物组合物还加入药剂学可接受的辅料。

5.根据权利要求4所述的药物组合物，其中，所述药剂学可接受的辅料为：乳糖、糊精、淀粉、可压性淀粉、微晶纤维素、甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羟丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、微粉硅胶和木糖醇中的一种或多种。

6.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述药物组合物为口服剂型。

7.根据权利要求6所述的药物组合物，其中，所述口服剂型为颗粒剂、片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、煎膏剂或糖浆剂。

8.权利要求1至7中任一项所述药物组合物的制备方法，包括将黄芪、五味子、丹参、青蒿和土茯苓的混合物用醇和/或水提取后，将提取液醇沉，滤去沉淀后浓缩。

9.根据权利要求8所述的制备方法，该方法还包括向浓缩得到的浓缩液中加入药剂学可接受的辅料，制成制剂。

10.根据权利要求8或9所述的制备方法，该方法包括如下步骤：

(1)将黄芪、五味子、丹参、青蒿和土茯苓的混合物100重量份用600～1600重量份的水或10～50重量％的醇的水溶液煎提，将提取液滤过，减压浓缩至50～200重量份，将提取液滤过，减压浓缩至80～150重量份；

(2)向浓缩液中加入体积浓度80～100％的醇至醇的体积含量为50～70％，静置过夜，滤去沉淀；

(3)浓缩液中加入药剂学可接受的辅料，混匀；

(4)真空干燥，粉碎过筛或制粒，灌装，灭菌。

11.根据权利要求10所述的制备方法，该方法包括：在步骤(1)中用800～1200重量份的水煎提2～4次，每次1～3小时；在步骤(2)中加入体积含量92～98％的乙醇至醇的体积含量为55～65％。

12.权利要求1至7中任一项所述药物组合物或者按照权利要求8至11中任一项所述方法制得的药物组合物在制备用于治疗慢性肾脏疾病的蛋白尿药物中的应用。

13.一种治疗慢性肾脏疾病的药物组合物，该药物组合物的活性成分由黄芪浸膏、五味子浸膏、丹参浸膏、青蒿浸膏和土茯苓浸膏组成，其中，所述黄芪浸膏、五味子浸膏、丹参浸膏、青蒿浸膏和土茯苓浸膏的重量份配比为：黄芪浸膏26～36份，五味子浸膏17～25份，丹参浸膏24～31份，青蒿浸膏6～9份，土茯苓的浸膏12～15份。

14.根据权利要求13所述的药物组合物，其中，所述黄芪浸膏、五味子浸膏、丹参浸膏、青蒿浸膏和土茯苓浸膏的重量份配比为：黄芪浸膏29～31份，五味子浸膏22～25份，丹参浸膏25～28份，青蒿浸膏6～8份，土茯苓的浸膏12～13份。

15.根据权利要求14所述的药物组合物，其中，所述黄芪浸膏、五味子浸膏、丹参浸膏、青蒿浸膏和土茯苓浸膏的重量份配比为：黄芪浸膏29.7份，五味子浸膏23.7份，丹参浸膏27.1份，青蒿浸膏7.1份，土茯苓的浸膏12.4份。

16.根据权利要求13所述的药物组合物，其中所述黄芪浸膏、五味子浸膏、丹参浸膏、青蒿浸膏和土茯苓浸膏为将黄芪、五味子、丹参、青蒿和土茯苓的原料药材分别用水提取制得的浸膏。

17.根据权利要求13所述的药物组合物，其中，该药物组合物还加入药剂学可接受的辅料。

18.根据权利要求17所述的药物组合物，其中，所述药剂学可接受的辅料为：乳糖、糊精、淀粉、可压性淀粉、微晶纤维素、甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羟丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、微粉硅胶和木糖醇中的一种或多种。

19.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述药物组合物为口服剂型。

20.根据权利要求19所述的药物组合物，其中，所述口服剂型为颗粒剂、片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、煎膏剂或糖浆剂。

21.权利要求13至20中任一项所述药物组合物的制备方法，包括将黄芪浸膏、五味子浸膏、丹参浸膏、青蒿浸膏和土茯苓浸膏的混合物用水溶解后醇沉，滤去沉淀后浓缩。

22.根据权利要求21所述的制备方法，该方法还包括向浓缩得到的浓缩液中加入药剂学可接受的辅料，制成制剂。

23.根据权利要求21或22所述的制备方法，该方法包括如下步骤：

(1)将黄芪浸膏、五味子浸膏、丹参浸膏、青蒿浸膏和土茯苓浸膏的混合物100重量份用80～250重量份的水溶解；

(2)加入体积浓度80～100％的醇至醇的体积含量为50～70％，静置过夜，滤去沉淀；

(3)浓缩液中加入药剂学可接受的辅料，混匀；

(4)真空干燥，粉碎过筛或制粒，灌装，灭菌。

24.根据权利要求23所述的制备方法，该方法包括：在步骤(2)中加入体积含量92～98％的乙醇至醇的体积含量为55～65％。

25.权利要求13至20中任一项所述药物组合物或者按照权利要求21至24中任一项所述方法制得的药物组合物在制备用于治疗慢性肾脏疾病的蛋白尿药物中的应用。