CN103190522A

CN103190522A - 从芝麻中提取蛋白质的方法

Info

Publication number: CN103190522A
Application number: CN2013101282176A
Authority: CN
Inventors: 杜新磊; 徐亚娟; 李海燕; 张国印
Original assignee: SHANDONG FANGJIAN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: Shandong Guangyu Tang Guo Yao Co., Ltd.
Priority date: 2013-04-12
Filing date: 2013-04-12
Publication date: 2013-07-10
Anticipated expiration: 2033-04-12
Also published as: CN103190522B

Abstract

本发明涉及蛋白的分离纯化方法，特别涉及一种从芝麻中提取蛋白质的方法。其步骤包括：芝麻经超微粉碎成粉，制备芝麻蛋白浸取液，浊点分相萃取，透析纯化制得芝麻蛋白。本发明利用浊点萃取法提取蛋白质，有机溶剂用量少，操作简单，便于大规模操作；充分芝麻蛋白本身的性质，在碱性条件下水溶性强，通过2次浊点萃取，得到杂质少、纯度高的芝麻蛋白；表面活性剂用量少，成本低，体系组成简单，提取率高，制备周期短，分离条件温和。

Description

从芝麻中提取蛋白质的方法

技术领域

本发明涉及蛋白的分离纯化方法，特别涉及一种从芝麻中提取蛋白质的方法。

背景技术

芝麻因其含有丰富的油脂和蛋白质而具有较高的使用价值。但长期以来芝麻的利用仅限于油脂的利用．而取油后主要成分为蛋白质的芝麻粕多用来作为饲料。麻脚中蛋白质含量可达50％，芝麻蛋白的氨基酸组成与FAO HO推荐的人类蛋白质标准具有很好的一致性，芝麻蛋白必需氨基酸含量占氨基酸总量的3O％。必需氨基酸除赖氨酸和异亮氨基含量低于FAO HO要求外，其他的氨基酸都可以满足人体的需求。芝麻蛋白NPU为56％，如添加Lys后，则NPU值可提高至81％。因此，芝麻蛋白可作为许多食品的添加成分，在提高食品营养价值、改良品质等方面都起非常重要的作用。

传统的芝麻蛋白质的提取一般通过酶法、碱法和层析法分离等方法，这些方法存在分离周期长、过程繁琐和得率低等缺点，且使用有机溶剂，影响环境。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提出了一种表面活性剂用量少，成本低，体系组成简单，分离条件温和，提取率高、制备周期短的从芝麻中提取蛋白质的方法。

本发明的技术方案是：一种从芝麻中提取蛋白质的方法,其步骤如下：

（1）前处理：将芝麻经超微粉碎磨成细粉。

（2）制备芝麻蛋白浸取液：按固液比1:18～20，在步骤（1）所得的芝麻细粉中加入含月桂酸聚氧乙烯醚的缓冲液进行搅拌浸取，浸取1～2小时后过滤，得到芝麻蛋白的浸取液。

所述缓冲液为Na₂HPO₄水溶液。所述月桂酸聚氧乙烯醚用作表面活性剂，其在Na₂HPO₄缓冲液中所占的质量百分比为1%～4%。

（3）浊点分相萃取：分两步进行：

按固液比g/ml为1～5:100，向步骤（2）所得的芝麻蛋白浸取液中加入月桂酸聚氧乙烯醚，充分混合形成胶束溶液，再向胶束溶液中滴加HCl溶液调节pH值为4.0～5.0，加热至温度80～85℃，进行分相萃取形成胶束相和水相，离心分离出胶束相。

向所得的胶束相中加入Na₂HPO₄水溶液调节pH至8.0～10.0，水浴50～60℃浸取1～2小时后，加热至温度80～85℃，进行分相萃取形成胶束相和水相，离心分离出水相。

（4）透析纯化：将得到的水相溶液倒入截留分子为10ku～50ku的透析袋中，进行充分透析，然后冷却、干燥，即为芝麻蛋白。

上述提取芝麻蛋白的方法，优选使用黑芝麻。

本发明的有益效果在于：1）利用浊点萃取法提取蛋白质，有机溶剂用量少，操作简单，便于大规模操作。2）充分芝麻蛋白本身的性质，在碱性条件下水溶性强，通过2次浊点萃取，得到杂质少、纯度高的芝麻蛋白。3）表面活性剂用量少，成本低，体系组成简单，提取率高，制备周期短，分离条件温和。

具体实施方式

以下结合实施例具体说明本发明。

实施例1

从芝麻中提取蛋白质的方法,其步骤如下：

1、称取芝麻100克，经超微粉碎，研磨成细粉。

2、制备芝麻蛋白浸取液：在步骤1所得的芝麻细粉中加入含2%的月桂酸聚氧乙烯醚的0.1mol/L的Na₂HPO₄水溶液1800ml，进行搅拌浸取，浸取1小时后过滤，得到芝麻蛋白的浸取液。

3、浊点分相萃取：分两步进行：

按固液比g/ml为1:100，向步骤2所得的芝麻蛋白浸取液中加入月桂酸聚氧乙烯醚，充分混合形成胶束溶液，向胶束溶液中滴加HCl溶液调节pH值为4.5，加热至温度80℃，进行分相萃取形成胶束相和水相，1小时后离心分离出胶束相。

向所得的胶束相中加入0.1mol/LNa₂HPO₄溶液调节pH至9，水浴50℃浸取2小时后，继续加热至温度80℃，进行分相萃取形成胶束相和水相，30分钟后离心分离出水相。

4、透析纯化：将得到的水相溶液倒入截留分子为10ku的透析袋中，进行充分透析，然后冷却、干燥，即为芝麻蛋白。

实施例2

除以下区别外，其他同实施例1。

1、称取芝麻100克，经超微粉碎，研磨成细粉。

2、制备芝麻蛋白浸取液：在步骤1所得的芝麻细粉中加入含4%的月桂酸聚氧乙烯醚的Na₂HPO₄水溶液2000ml，进行搅拌浸取，浸取2小时后过滤，得到芝麻蛋白的浸取液。

3、浊点分相萃取：分两步进行：

按固液比g/ml为5:100，向步骤2所得的芝麻蛋白浸取液中加入月桂酸聚氧乙烯醚，向步骤2所得的芝麻蛋白浸取液中加入月桂酸聚氧乙烯醚，充分混合形成胶束溶液，向所得的胶束溶液中滴加0.2mol/LHCL溶液调节pH至4.6，加热至温度85℃，进行分相萃取形成胶束相和水相，1小时后离心分离出胶束相。

向所得的胶束相中加入0.1mol/L Na₂HPO₄溶液调节pH至8，水浴60℃浸取1小时后，继续加热至温度85℃，进行分相萃取形成胶束相和水相，30分钟后离心分离出水相。

4、透析纯化：将得到的水相溶液倒入截留分子为50ku的透析袋中，进行充分透析，然后冷却、干燥，即为芝麻蛋白。

实施例3

除以下区别外，其他同实施例1。

1、称取黑芝麻100克，经超微粉碎，研磨成细粉。

2、制备黑芝麻蛋白浸取液：在步骤1所得的黑芝麻细粉中加入含2%的月桂酸聚氧乙烯醚的NaH₂PO₄水溶液2000ml，进行搅拌浸取，浸取2小时后过滤，得到黑芝麻蛋白的浸取液。

3、浊点分相萃取：分两步进行：

按固液比g/ml为3:100，向步骤2所得的芝麻蛋白浸取液中加入月桂酸聚氧乙烯醚，充分混合形成胶束溶液，向所得的胶束溶液中滴加0.1mol/L HCL溶液调节pH至5.0加热至温度85℃，进行分相萃取形成胶束相和水相，1小时后离心分离出胶束相。

向所得的胶束相中加入0.2mol/L NaH₂PO₄水溶液溶液调节pH至9.5，水浴60℃浸取1.5小时后，继续加热至温度82℃，进行分相萃取形成胶束相和水相，30分钟后离心分离出水相。

4、透析纯化：将得到的水相溶液倒入截留分子为30ku的透析袋中，进行充分透析，然后冷却、干燥，即为黑芝麻蛋白。

Claims

1.一种从芝麻中提取蛋白质的方法,其步骤如下：

（1）前处理：将芝麻经超微粉碎磨成细粉；

（2）制备芝麻蛋白浸取液：按固液比1:18～20，在步骤（1）所得的芝麻细粉中加入含月桂酸聚氧乙烯醚的缓冲液进行搅拌浸取，浸取1～2小时后过滤，得到芝麻蛋白的浸取液；

（3）浊点分相萃取：分以下两步进行：

a、按固液比g/ml为1～5:100，向步骤（2）所得的芝麻蛋白浸取液中加入月桂酸聚氧乙烯醚，充分混合形成胶束溶液，再向胶束溶液中滴加HCl溶液调节pH值为4.0～5.0，加热至温度80～85℃，进行分相萃取形成胶束相和水相，离心分离出胶束相；

b、向步骤a所得的胶束相中继续加入缓冲液调节pH至8.0～10.0，水浴50～60℃浸取1～2小时后，加热至温度80～85℃，进行分相萃取形成胶束相和水相，离心分离出水相；

2.根据权利要求1所述的从芝麻中提取蛋白质的方法，其特征在于，步骤(2)中缓冲液为Na₂HPO₄水溶液。

3.根据权利要求1所述的从芝麻中提取蛋白质的方法，其特征在于，所述步骤（2）中月桂酸聚氧乙烯醚在所述缓冲液中所占的质量百分比为1%～4%。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的从芝麻中提取蛋白质的方法，其特征在于，所述芝麻为黑芝麻。