CN102731601A - 一种提取腺苷的方法 - Google Patents

一种提取腺苷的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102731601A
CN102731601A CN2012102083461A CN201210208346A CN102731601A CN 102731601 A CN102731601 A CN 102731601A CN 2012102083461 A CN2012102083461 A CN 2012102083461A CN 201210208346 A CN201210208346 A CN 201210208346A CN 102731601 A CN102731601 A CN 102731601A
Authority
CN
China
Prior art keywords
adenosine
minutes
liquid
freezing
flocculation agent
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN2012102083461A
Other languages
English (en)
Inventor
谢畅丰
郑凝坚
刘剑
朱义福
雷剑芬
郑明英
宁韩林
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
XINGHU BIOTECH CO Ltd ZHAOQING CITY GUANGDONG PROV
Original Assignee
XINGHU BIOTECH CO Ltd ZHAOQING CITY GUANGDONG PROV
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by XINGHU BIOTECH CO Ltd ZHAOQING CITY GUANGDONG PROV filed Critical XINGHU BIOTECH CO Ltd ZHAOQING CITY GUANGDONG PROV
Priority to CN2012102083461A priority Critical patent/CN102731601A/zh
Publication of CN102731601A publication Critical patent/CN102731601A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种提取腺苷的方法，步骤为：A、将腺苷发酵液用碱溶液调节pH值至7～8，加热搅拌后加入絮凝剂，60±10分钟后，调整转速为60±10转/分，再搅拌5～7分钟，静置10～15分钟后压滤；B、将步骤A的滤液在旋转式薄膜蒸发器中进行浓缩得浓缩液，所述的浓缩温度控制在70±10℃，真空度-0.095±.01Mpa；C、将步骤B的浓缩液室温放置，自然冷却2±1h，然后继续降温至0℃以下，冷冻结晶得结晶液；D、将步骤C的冷冻结晶液抽滤，得到湿品，将湿品放置烘箱中烘干10±1h得到干燥腺苷粗品。采用本方法从发酵液中提取腺苷，得到的腺苷粗品含杂量少，产品腺苷损失较少，明显提高后续纯化工艺，精制工艺的腺苷收率。且整个提取方法经济有效。

Description

一种提取腺苷的方法
技术领域
本发明涉及一种从发酵液中分离提取腺苷粗品的方法
背景技术
腺苷作为药物，在国际上首次投入市场是由日本藤泽药厂的子公司Lyhomed于1989年在美国投入市场，随后又在英国。比利时。法国等很多国家获得批准，腺苷，又名腺嘌呤核苷，分子式C10H13N5O4，分子量267.24，无臭、无味、白色结晶性粉末，难溶于水、乙醇和乙醚，熔点233-238℃，比旋度-68.0°～-72.0°是一种遍布人体细胞的内源性核苷，可直接进入心肌经磷酸化生成腺苷酸，参与心肌能量代谢，同时还参与扩张冠脉血管，增加血流量。腺苷对心血管系统和肌体的许多其它系统及组织均有生理作用。腺苷生产发酵液是指腺苷生物发酵过程所得到的含有糖、氮源、无机盐等多种腺苷培养基混合物，由于微生物生长代谢是一个十分复杂的过程，产生多种初级及次级的代谢产物，使发酵液成分变得非常复杂，如细胞自溶产生的细胞碎片以及细胞本身，微生物代谢生成的糖。蛋白质类胶体物质，还有培养基中违背完全吸收和利用的残余营养物质，而产品腺苷只是占了其中很少的一部分。为了得到发酵液中的腺苷，首先需要将发酵液中各种破碎的微生物细胞、糖、蛋白质等胶态以及纤维颗粒物等固态杂质分离去除。由于生物发酵也是一个复杂体系，同时微生物细胞及碎片细胞，糖、蛋白质类胶粘物质增加了发酵液的粘度，从而使固态杂质的去除变得困难。目前发酵液固液分离方法主要采用一下几种方法：高速离心法，该方法设备投资较大，运行维护费用较高：超滤法，该方法操作简单，产品收率较高，但超滤膜维护困难，实用周期较短；混凝法(单独投加硫酸铝等铝盐混凝剂)，强力搅拌或离心进行固液分离，由于发酵液中存在大量的分子各异得胶体杂质，且铝盐分子量较小，电荷较低，难以完全絮凝沉淀，因而分离去除率低，产品收率不高，尤其针对腺苷发酵液，难以完全絮凝沉淀。
发明内容
针对上述技术问题，本发明提供一种经济有效的腺苷粗品提取方法，该方法具有操作简便、投资少。
为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：一种提取腺苷的方法，步骤为：A、将腺苷发酵液用碱溶液调节pH值至7～8，加热搅拌后加入絮凝剂，60±10分钟后，调整转速为60±10转/分，再搅拌5～7分钟，静置10～15分钟后压滤，所述絮凝剂是聚合硫酸氯化铁铝PAFCS，加入絮凝剂的量占整个腺苷发酵液的体积百分比是(20±5)％；B、将步骤A的滤液在旋转式薄膜蒸发器中进行浓缩得浓缩液，所述的浓缩温度控制在70±10℃，真空度-0.095±.01Mpa；C、将步骤B的浓缩液室温放置，自然冷却2±1h，然后继续降温至0℃以下，冷冻结晶得结晶液；D、将步骤C的冷冻结晶液抽滤，得到湿品，将湿品放置烘箱中烘干10±1h得到干燥腺苷粗品。
进一步：在上述提取腺苷的方法中，所述步骤A的碱溶液是NaOH液，聚合硫酸氯化铁铝PAFCS的质量浓度为4％。所述步骤A加热搅拌的加热温度为50～60℃，搅拌速度为180±20转/分，压滤是用板框压滤机实现压滤工艺。所述步骤B的浓缩液体积是滤液体积的1/4～1/5。所述步骤C冷冻结晶的时间是24±3h。
与现有技术相比，本发明在固液分离除菌步骤中采用一种絮凝剂——聚合硫酸氯化铁铝(PAFCS)，该絮凝剂脱色能力优、絮凝物比重大、絮凝速度快、易过滤、出水率高、且其原料均来源于工业废渣、成本较低、来源广，生产工艺简单。一般情况下，絮凝效果会随着絮凝剂的用量增加而提高，但过量时会使絮凝剂重新变为稳定的胶体，其最佳用量是根据悬浮物的含量通过具体的实验而得出的。PH值对胶体颗粒表面电荷的电位、絮凝剂的性质和作用等都有很大的影响。另外温度：高水温时，反应速度过快，形成的絮凝体细小，低水温时反应速度过慢，影响处理的水量，同时过高的粘度对絮凝剂的撕裂作用也会使絮凝体变得细小。搅拌速度和时间：速度过快，时间过长，会将大颗粒的固体搅碎成小颗粒，将能沉淀的颗粒搅碎成不能沉淀的颗粒。速度过慢，时间过短：絮凝剂与固体不能充分接触，不利于絮凝剂捕固体胶体颗粒，且絮凝剂的浓度也分布不均，更不利于发挥絮凝的效果。采用本方法从发酵液中提取腺苷，得到的腺苷粗品含杂量少，产品腺苷损失较少，明显提高后续纯化工艺，精制工艺的腺苷收率。且整个提取方法经济有效。
具体实施方式
下面，将通过本发明的实施例进行更加详细的说明。但以下这些实施例只是为了对本发明进行详细的说明而列举的示例，本发明的范围并不只局限于这些实施例。
实施例1
取腺苷发酵液2.5L放至混凝器中，测试其腺苷含量20.12g/L，则理论产量50.30g，加入浓度为25％的NaOH溶液(25％是NaOH的浓度，NaOH溶液是用NaOH固体与水配成的，25％是质量分数)调节PH值至7，然后在每分钟180转的搅拌速度下加入浓度为4％的聚合硫酸氯化铁铝(PAFCS)絮凝剂600mL，一分钟后，调整转速为60转/分，再搅拌5分钟，形成大块絮凝颗粒，静置10分钟后倾出上清液，用2L水洗涤沉渣，洗水与上清液混合，经板框压滤机压滤，沉渣也经板框压滤，两次得到滤液混合，总体为5L。将滤液在旋转式薄膜蒸发器中进行浓缩，滤液分四次浓缩完毕，每次1250ml，浓缩温度控制在65℃左右，真空-0.095Mpa，待浓缩至1/4体积时放料。将浓缩液室温放置，自然冷却2h，然后继续降温至0℃，冷冻结晶24h，此时有大量结晶析出。将冷冻结晶液抽滤，得到湿品117g，将湿品放置烘箱中烘干10h得到干燥粗品47.79g，粗品含量为94％，理论产量44.92，粗品收率为89.3％。
实施例2
取腺苷发酵液2.5L放至混凝器中，测试其腺苷含量20.12g/L，则理论产量50.30g，加入浓度为25％的NaOH溶液(25％是NaOH的浓度，NaOH溶液是用NaOH固体与水配成的，25％是质量分数)调节PH值至8，然后在每分钟180转的搅拌速度下加入浓度为5％的聚合硫酸氯化铁铝(PAFCS)絮凝剂500mL，一分钟后，调整转速为40转/分，再搅拌7分钟，形成大块絮凝颗粒，静置15分钟后倾出上清液，用2L水洗涤沉渣，洗水与上清液混合，经板框压滤机压滤，沉渣也经板框压滤，两次得到滤液混合，总体为5L。将滤液在旋转式薄膜蒸发器中进行浓缩，滤液分四次浓缩完毕，每次1250ml，浓缩温度控制在65℃左右，真空-0.095Mpa，待浓缩至1/4体积时放料。将浓缩液室温放置，自然冷却2h，然后继续降温至0℃，冷冻结晶24h，此时有大量结晶析出。将冷冻结晶液抽滤，得到湿品125g，将湿品放置烘箱中烘干10h得到干燥粗品49.22g，粗品含量为95％，理论产量46.759g，粗品收率为92.96％。
实施例3
取腺苷发酵液2.5L放至混凝器中，测试其腺苷含量20.12g/L，则理论产量50.30g，加入浓度为25％的NaOH溶液(25％是NaOH的浓度，NaOH溶液是用NaOH固体与水配成的，25％是质量分数)调节PH值至7～8，然后在每分钟180转的搅拌速度下加入浓度为4％的聚合硫酸氯化铁铝(PAFCS)絮凝剂600mL，一分钟后，调整转速为60转/分，再搅拌5分钟，形成大块絮凝颗粒，静置10分钟后倾出上清液，用2L水洗涤沉渣，洗水与上清液混合，经板框压滤机压滤，沉渣也经板框压滤，两次得到滤液混合，总体为5L。将滤液在旋转式薄膜蒸发器中进行浓缩，滤液分四次浓缩完毕，每次1250ml，浓缩温度控制在65℃左右，真空-0.095Mpa，待浓缩至1/5体积时放料。将浓缩液室温放置，自然冷却2h，然后继续降温至0℃，冷冻结晶24h，此时有大量结晶析出。将冷冻结晶液抽滤，得到湿品117g，将湿品放置烘箱中烘干10h得到干燥粗品47.79g，粗品含量为94％，理论产量44.92，粗品收率为96.36％。
实施例4
取腺苷发酵液2.5L放至混凝器中，测试其腺苷含量18.48g/L，则理论产量46.2g，加入浓度为30％的NaOH溶液(30％是NaOH的浓度，NaOH溶液是用NaOH固体与水配成的，25％是质量分数)调节PH值至7.5，然后在每分钟180转的搅拌速度下加入浓度为4％的聚合硫酸氯化铁铝(PAFCS)絮凝剂500mL，一分钟后，调整转速为60转/分，再搅拌6分钟，形成大块絮凝颗粒，静置15分钟后倾出上清液，用2L水洗涤沉渣，洗水与上清液混合，经板框压滤机压滤，沉渣也经板框压滤，两次得到滤液混合，总体为5L。将滤液在旋转式薄膜蒸发器中进行浓缩，滤液分四次浓缩完毕，每次1250ml，浓缩温度控制在70℃左右，真空-0.095Mpa，待浓缩至1/4体积时放料。将浓缩液室温放置，自然冷却2h，然后继续降温至0℃，冷冻结晶24h，此时有大量结晶析出。将冷冻结晶液抽滤，得到湿品122g，将湿品放置烘箱中烘干10h得到干燥粗品47.36g，粗品含量为94％，理论产量44.52g，粗品收率为93.27％。

Claims (5)

1.一种提取腺苷的方法，步骤为：
A、将腺苷发酵液用碱溶液调节pH值至7～8，加热搅拌后加入絮凝剂，60±10分钟后，调整转速为60±10转/分，再搅拌5～7分钟，静置10～15分钟后压滤，所述絮凝剂是聚合硫酸氯化铁铝PAFCS，加入絮凝剂的量占整个腺苷发酵液的体积百分比是(20±5)％；
B、将步骤A的滤液在旋转式薄膜蒸发器中进行浓缩得浓缩液，所述的浓缩温度控制在70±10℃，真空度-0.095±.01Mpa；
C、将步骤B的浓缩液室温放置，自然冷却2±1h，然后继续降温至0℃以下，冷冻结晶得结晶液；
D、将步骤C的冷冻结晶液抽滤，得到湿品，将湿品放置烘箱中烘干10±1h得到干燥腺苷粗品。
2.根据权利要求1所述的提取腺苷的方法，其特征在于：所述步骤A的碱溶液是NaOH液，聚合硫酸氯化铁铝PAFCS的质量浓度为4％。
3.根据权利要求2所述的提取腺苷的方法，其特征在于：所述步骤A加热搅拌的加热温度为50～60℃，搅拌速度为180±20转/分，压滤是用板框压滤机实现压滤工艺。
4.根据权利要求3所述的提取腺苷的方法，其特征在于：所述步骤B的浓缩液体积是滤液体积的1/4～1/5。
5.所述根据权利要求1所述的提取腺苷的方法，其特征在于：所述步骤C冷冻结晶的时间是24±3h。
CN2012102083461A 2012-06-14 2012-06-14 一种提取腺苷的方法 Pending CN102731601A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2012102083461A CN102731601A (zh) 2012-06-14 2012-06-14 一种提取腺苷的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2012102083461A CN102731601A (zh) 2012-06-14 2012-06-14 一种提取腺苷的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN102731601A true CN102731601A (zh) 2012-10-17

Family

ID=46987974

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2012102083461A Pending CN102731601A (zh) 2012-06-14 2012-06-14 一种提取腺苷的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102731601A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103320326A (zh) * 2013-06-19 2013-09-25 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司 一种腺苷生产菌株的高通量筛选方法
CN110655547A (zh) * 2019-09-12 2020-01-07 河南巨龙生物工程股份有限公司 一种降低单一相关杂质含量的腺苷提取方法
CN110776543A (zh) * 2019-11-28 2020-02-11 河南巨龙生物工程股份有限公司 一种腺苷一次母液回收方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1687439A (zh) * 2005-04-07 2005-10-26 江苏诚意药业有限公司 微生物发酵法生产腺苷的生产工艺
CN101298608A (zh) * 2008-05-29 2008-11-05 北京凯因生物技术有限公司 一种大规模制备腺苷蛋氨酸合成酶的方法
CN101348453A (zh) * 2008-08-29 2009-01-21 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司 一种提纯脯氨酸的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1687439A (zh) * 2005-04-07 2005-10-26 江苏诚意药业有限公司 微生物发酵法生产腺苷的生产工艺
CN101298608A (zh) * 2008-05-29 2008-11-05 北京凯因生物技术有限公司 一种大规模制备腺苷蛋氨酸合成酶的方法
CN101348453A (zh) * 2008-08-29 2009-01-21 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司 一种提纯脯氨酸的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
施善友等: "聚合硫酸氯化铝铁絮凝剂的性能研究", 《合肥工业大学学报（自然科学版）》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103320326A (zh) * 2013-06-19 2013-09-25 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司 一种腺苷生产菌株的高通量筛选方法
CN110655547A (zh) * 2019-09-12 2020-01-07 河南巨龙生物工程股份有限公司 一种降低单一相关杂质含量的腺苷提取方法
CN110776543A (zh) * 2019-11-28 2020-02-11 河南巨龙生物工程股份有限公司 一种腺苷一次母液回收方法
CN110776543B (zh) * 2019-11-28 2023-05-09 河南巨龙生物工程股份有限公司 一种腺苷一次母液回收方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101736045B (zh) 一种小球藻功能成分连续提取的方法
CN104473120B (zh) 一种味精的生产工艺
CN111269107A (zh) 一种l-乳酸提纯精制方法
CN102911036A (zh) 一种获得高纯度二羧酸的方法
CN102807627A (zh) 一种玉米淀粉的制备方法
WO2012013112A1 (zh) 盐析萃取海参中有效成分的方法
CN111087486B (zh) 一种新型抗性糊精膳食纤维连续制备方法
CN108285911B (zh) 一种发酵提取l-异亮氨酸的工艺
CN103804172B (zh) 一种提高有机酸产品质量的方法
CN102731601A (zh) 一种提取腺苷的方法
CN103275150A (zh) 一种硫氰酸红霉素的精制和制备方法
CN108285913B (zh) 一种制备提取l-谷氨酰胺的工艺
CN106883274A (zh) 唾液酸精制方法
CN106117038A (zh) 一种采用乳酸链球菌素废水生产乳酸钙的工艺
CN103772186A (zh) 一种发酵有机酸的精制方法
CN103113440A (zh) 一种硫氰酸红霉素的制备方法
CN111057727B (zh) 一种生产、分离和提取l-谷氨酰胺的方法
CN103012528B (zh) 一种从鸟苷发酵液中提取鸟苷的方法
CN102154107B (zh) 一种高品质生物培养基用酵母浸粉及其制备方法
CN101891774B (zh) 鼠李糖的生产工艺
CN102286044B (zh) 纳他霉素片状晶体的制备方法
CN104789607B (zh) 一种发酵‑分离耦合制备乳酸和/或乳酸盐的方法
CN101086001A (zh) 从发酵液中提取l－谷氨酰胺粗结晶的方法
CN107438673A (zh) 用于制造丙酸盐产物的方法
CN106554273B (zh) 一种发酵液中长链二羧酸的提纯方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C12 Rejection of a patent application after its publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20121017