CN103168695B - 峨眉拟单性木兰组织培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于农林苗木组织培养技术领域,具体是一种峨眉拟单性木兰组织培养方法。该方法是将峨眉拟单性木嫩枝经消毒,以普通茎尖进行诱导、增殖和生根培养,得到再生苗。本发明的优点在于以取材方便的植株为母本,普通茎尖为外植体材料;完善了灭毒处理方法;解决了目前有性繁殖中存在的种子难以有效获取的问题,成功建立了峨眉拟单性木兰的组织培养体系,挽救了我国濒危植物峨眉拟单性木兰。
Description
技术领域
本发明属于农林苗木组织培养技术领域,具体是一种峨眉拟单性木兰组织培养方法。
背景技术
峨眉拟单性木兰为木兰科拟单性木兰属下的一个种,四川峨眉山特有常绿植物。因林木砍伐,植被破坏,在原产地所存植株极少,急待采取严格的保护措施。峨眉拟单性木兰其主要分布于常绿阔叶林中,其聚合果呈倒卵圆形,长3~4厘米,种子倒卵圆形,径6~8毫米,外种皮红褐色,易吸引鸟类觅食;因此很难得到可繁殖的种子。寻找一种安全的繁殖方法,挽救峨眉拟单性木兰这一濒危植物已迫在眉睫。
发明内容
本发明提供了一种峨眉拟单性木兰组织培养的方法。通过峨眉拟单性木兰的茎尖作为外植体进行组培,实现峨眉拟单性木兰的人工繁殖。
本发明一种峨眉拟单性木兰组织培养的方法,包括下列步骤:。
1)外植体处理:取峨眉拟单性木兰嫩枝,清洗后,在无菌条件下,用质量浓度70%的酒精消毒30s,质量浓度0.01% 的HgCl2 溶液灭毒10-15 min,用无菌水冲洗5-6 次。
2)诱导培养:将经灭毒的嫩枝,取1cm长茎尖作外植体,接种于诱导培养基,培养温度27±2°C,光照12h,光照强度2000Lx,培养40-45天即可长成3 cm 左右的嫩梢。所述诱导培养基以MS为基础培养基,添加6-BA 2.0 mg/L,IAA 0.02 mg/L, KT 1.5 mg/L,蔗糖3%,琼脂0.5%,pH 5.8。
3)分化培养:从诱导培养基上剪切已萌动的嫩梢,转入分化培养基,培养温度27±2°C,光照12h,光照强度2000Lx,20天每个接种的嫩梢可分化出大于0.5 cm的有效不定芽达4个左右。培养时间为45天。所述分化培养基以MS为基础培养基,添加6-BA 0.5 mg/L,NAA 0.02 mg/L,蔗糖3%,琼脂0.5%,pH 5.8。
4)生根培养:从分化培养基上剪下长高至3-4 cm的试管苗嫩梢,转入生根培养基,培养温度27±2°C,光照12h,光照强度2000Lx,培养时间为20天,生根率达80%以上。所述生根培养基以1/2MS为基础培养基,添加NAA 0.5 mg/L,IBA 2.5 mg/L,蔗糖1.5%,琼脂0.5%,pH 5.8。
5)炼苗培养:将组培苗瓶移至室外,自然光下封口炼苗10-15天,取出组培苗将根部的琼脂洗净,移栽到经过0.2% 的高锰酸钾消毒的蛭石中,浇透水,用塑料膜保湿,置于23-30°C的温室中生长。半个月后将苗栽于营养钵中,于遮光50%的阴棚下放置30天,即可进行常规管理。
本发明是利用植物细胞全能性的生物技术,合理采取峨眉拟单性木兰嫩枝茎尖作为外植体,在配合比合理的培养基中培养,可在短期内繁殖出大量的峨眉拟单性木兰组培苗。本发明优点在于提供了一条全新的峨眉拟单性木兰组培方法,建立无菌培养体系,提供适宜的温度、光照,培育成新个体。
具体实施方式
取峨眉拟单性木兰嫩枝用0. 1%洗衣粉水浸洗30min后,用自来水冲洗1h备用。
无菌条件下,峨眉拟单性木兰嫩枝用70%的酒精消毒30s后,0. 1% HgCl2处理10-15 min,无菌水冲洗5-6次,取lcm长的普通茎尖做外植体,接种诱导培养基。
诱导培养基以MS为基础培养基,添加6-BA 2.0 mg/L,IAA 0.02 mg/L, KT 1.5 mg/L,蔗糖3%,琼脂0.5%,pH 5.8,培养温度27±2°C,光照12h,光照强度2000Lx,培养40-45天即可长成3 cm 左右的嫩梢,剪切已萌动的嫩梢,转入分化培养基。
分化培养基以MS为基础培养基,添加6-BA 0.5 mg/L,NAA 0.02 mg/L,蔗糖3%,琼脂0.5%,pH 5.8,培养温度27±2°C,光照12h,光照强度2000Lx,20天每个接种的嫩梢可分化出大于0.5 cm的有效不定芽达4个左右。培养时间为45天,剪下长高至3-4 cm的试管苗嫩梢,转入生根培养基。
生根培养基以1/2MS为基础培养基,添加NAA 0.5 mg/L,IBA 2.5 mg/L,蔗糖1.5%,琼脂0.5%,pH 5.8,培养温度27±2°C,光照12h,光照强度2000Lx,培养时间为20天,生根率达80%以上。
将组培苗瓶移至室外,自然光下封口炼苗10-15天,取出组培苗将根部的琼脂洗净,移栽到经过0.2% 的高锰酸钾消毒的蛭石中,浇透水,用塑料膜保湿,置于23-30°C的温室中生长。半个月后将苗栽于营养钵中,于遮光50%的阴棚下放置30天,即可进行常规管理。
Claims (1)
1.一种峨眉拟单性木兰组织培养方法,其特征在于该方法包括下列步骤:
1) 外植体处理:取峨眉拟单性木兰嫩枝,清洗后,在无菌条件下,用质量浓度70%的酒精消毒30s,质量浓度0.01%的HgCl2溶液灭毒10-15min,用无菌水冲洗5-6次;
2)诱导培养:将经灭毒的嫩枝,取1cm长茎尖作外植体,接种于诱导培养基,培养温度27±2℃,光照12h,光照强度2000Lx,培养40-45天长成3cm的嫩梢,所述诱导培养基以MS为基础培养基,添加6-BA2.0mg/L,IAA0.02 mg/L,KT1.5 mg/L,蔗糖3%,琼脂0.5%,pH5.8;
3)分化培养:从诱导培养基上剪切已萌动的嫩梢,转入分化培养基,培养温度27±2℃,光照12h,光照强度2000Lx,20天每个接种的嫩梢分化出大于0.5cm的有效不定芽达4个,培养时间为45天,所述分化培养基以MS为基础培养基,添加6-BA0.5 mg/L,NAA 0.02mg/L,蔗糖3%,琼脂0.5%,pH5.8;
4)生根培养:从分化培养基上剪下长高至3-4cm的试管苗嫩梢,转入生根培养基,培养温度27±2℃,光照12h,光照强度2000Lx,培养时间为20天,生根率达80%以上;所述生根培养基以1/2MS为基础培养基,添加NAA0.5 mg/L,IBA2.5 mg/L,蔗糖1.5%,琼脂0.5%,pH5.8;
5)炼苗培养:将组培苗瓶移至室外,自然光下封口炼苗10-15天,取出组培苗将根部的琼脂洗净,移栽到经过0.2%的高锰酸钾消毒的蛭石中,浇透水,用塑料膜保湿,置于23-30℃的温室中生长,半个月后将苗栽于营养钵中,于遮光50%的阴棚下放置30天,进行常规管理。
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A. H. A. Abdelmageed et al.Callus induction and plant regeneration of Michelia champaca (Magnoliaceae): A multipurpose tree.《ournal of Medicinal Plants Research 》.2012,第6卷(第17期),第 3338-3344页. |
Callus induction and plant regeneration of Michelia champaca (Magnoliaceae): A multipurpose tree;A. H. A. Abdelmageed et al;《ournal of Medicinal Plants Research 》;20120509;第6卷(第17期);第3339页左栏第2-3段,表1和表3 * |
濒危植物峨眉拟单性木兰茎段腋芽及愈伤组织诱导;陈英等;《林业科技》;20080131;第33卷(第1期);第10页1.2试验方法部分以及结果分析2.1部分 * |
陈英等.濒危植物峨眉拟单性木兰茎段腋芽及愈伤组织诱导.《林业科技》.2008,第33卷(第1期),第10-12页. |
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