CN104542271A

CN104542271A - 一种芥菜无土栽培方法

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Publication number: CN104542271A
Application number: CN201310518530.0A
Authority: CN
Inventors: 雷晓琳
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2013-10-28
Filing date: 2013-10-28
Publication date: 2015-04-29

Abstract

本发明公开一种芥菜无土栽培方法，涉及一种无土栽培技术，属于栽培技术领域。其特征在于：由不定芽的诱导培养基，不定芽的增殖培养基，丛生苗的继代及壮苗培养基和生根培养基组成。其有益效果在于：针对芥菜的嫩枝分化特点，通过利用新抽嫩枝，结合恰当的灭菌技术，使进瓶成功率达到65%以上，有效进种率可达到85～90%，在短期内获得了大量的无菌材料；通过恰当的ZT浓度（0.5～1mg/L）还提高了丛生苗的增殖率及壮苗率，实现了该品种种苗的规模化生产。

Description

一种芥菜无土栽培方法

技术领域

本发明涉及一种无土栽培技术，属于栽培技术领域，具体地说是一种芥菜无土栽培方法。

背景技术

芥菜为十字花科，芸薹属一两年生草本植物。芥菜在我国栽培历史悠久，多分布于长江以南各省，类型和品种很多，有芥子菜、叶用芥菜、茎用芥菜、薹用芥菜、芽用芥菜、根用芥菜等。平时所说的芥菜一般指叶用芥菜。叶用芥菜有大叶芥菜、小叶芥菜、雪里蕻、包心芥菜等，广东地区以大叶芥菜、小叶芥菜最常见。

芥菜含有维生素A、维生素B族、维生素C和维生素D很丰富。具体功效有提神醒脑，芥菜含有大量的抗坏血酸，是活性很强的还原物质，参与机体重要的氧化还原过程，能增加大脑中氧含量，激发大脑对氧的利用，有提神醒脑，解除疲劳的作用。目前各地菜棚虽有少量种植，但都因季节和技术关系，难以提高质量。

近年来，随着我国经济高速增长，居民的收入和生活水平有了显著提高，消费观念也随之改变，出现了多层次的消费阶层，人们日益亲睐于无公害的绿色食品；传统的芥菜无土栽培利用芥菜种子通过立体无土栽培方法直接培育出“活体芽苗”的方法，所培育出的芥菜芽以清洁无污染和完整的活体产品形式进行销售，可随吃随取，比树芽芥菜香味更淡，平直更鲜嫩，且生产周期短，栽培方法简单，便于四季生产均衡上市。但由于利用种子通过无土栽培方法得到芥菜要经过种子萌发，较浪费时间，因此通过愈伤组织获得品质优良的芥菜是我们农业科技工作者的研发任务。

发明内容

本发明克服现有技术利用种子通过无土栽培得到芥菜芽苗，芥菜生长周期慢，香味淡的缺点，提供一种既能解决生长周期长，又能降低生产成本，实现规模化组织培养生产的适宜芥菜品种的组织培养快繁方法。

为实现上述目的，本发明所述一种芥菜无土栽培方法，其特征在于：由不定芽的诱导培养基，不定芽的增殖培养基，丛生苗的继代及壮苗培养基和生根培养基组成：

其中，所述的不定芽的诱导培养基的配方为：MS、ZT3mg/L、IAA0.5mg/L、糖30g/L、琼脂5g/L，pH为5.4～5.6；

所述的不定芽的增殖培养基的配方为：MS、ZT1mg/L、6-BA0.5mg/L、糖30g/L、琼脂5g/L，pH为5.4～5.6；

所述的丛生苗的继代及壮苗培养基的配方为：MS、ZT O.5mg/L，6-BAO.5mg/L，糖30g/L、琼脂5g/L，pH为5.4～5.6；

所述的生根培养基的配方为：MS、NAA2mg/L、糖30g/L、琼脂5g/L，pH为5.4～5.6。

本发明所述一种芥菜无土栽培方法，其按以下步骤进行：

一、外植体的选择：采取3～5cm新抽嫩枝作为外植体；

二、外植体的灭菌：将上述外植体先用75%的酒精处理l0～30min，再0.1%HgCl₂浸泡茎尖5min，浸泡茎段8～lOmin，再用无菌水冲洗外植体4～5次；

三、不定芽的诱导：在无菌工作条件下，将消毒灭菌后的茎尖段和茎段，接种于上述专用培养基中的不定芽的诱导培养基中，培养条件为光照时间12h/d，光照强度1500～20001x，培养温度24±2℃；

四、不定芽的增殖：将诱导出的不定芽接种于上述专用培养基中的不定芽的增殖培养基中，培养条件同上；

五、丛生苗的继代及壮苗，将增殖获得的丛生苗接种于上述专用培养基中的丛生苗的继代及壮苗培养基中进行继代繁殖，培养条件同上；

六、壮苗生根及继续扩繁：将上述继代增殖中高为2.5cm以上的健壮苗切成单株接种于上述专用培养基中的生根培养基中，将其余组织切割成2～4团接种于上述专用培养基中的不定芽的增殖培养基中，培养条件同上；

七、移栽过渡：将步骤六中根长1～2cm的组培瓶苗移到温室中，常温、自然光下逐渐开瓶炼苗2～3天后出瓶移栽；取出植株健壮、根系发达的小苗，洗去沾在根部的培养基，栽植到下述过渡育苗基质中，过渡育苗基质为：田园土：泥炭土=2:1，用0.1%的多菌灵溶液作为定根水浇透，覆盖塑料薄膜，并盖上遮阴网；一周内保持湿度在90%以上和20～25℃的温度；1周后逐渐打开薄膜，增加光照和通风透气；2周后，进行常规管理。

上述芥菜的组织培养快繁方法所述的步骤二外植体的灭菌是将上述外植体先用75%的酒精处理30s，再用0.l%HgCl₂浸泡茎尖5min，浸泡茎段8min，再用无菌水冲洗外植体4～5次。

上述芥菜的组织培养快繁方法中将步骤四不定芽的增殖中获得的丛生幼苗切割为4～8苗的小丛苗团，再接种于上述不定芽的增殖培养基中继代繁殖，每瓶放置1～3团；完成培养周期后，每团苗可增长3～5倍，且丛苗的高度也会增长；如此通过反复继代繁殖，可获得大量的丛生苗。

本发明所述一种芥菜无土栽培方法，其有益效果在于：针对芥菜的嫩枝分化特点，通过利用新抽嫩枝，结合恰当的灭菌技术，使进瓶成功率达到65%以上，有效进种率可达到85～90%，在短期内获得了大量的无菌材料；通过恰当的ZT浓度（0.5～1mg/L）还提高了丛生苗的增殖率及壮苗率，实现了该品种种苗的规模化生产，为扦插苗的生产提供了大量种源；采用MS培养基及低浓度的ZT含量，有效地降低了组培苗的生产成本。

具体实施方式

以下实施例为本发明作进一步出阐述。

实施例1芥菜组织培养快繁方法及其专用培养基试验

试验材料取自甘肃兰州安宁植物园优选单株，所用试剂：MS培养基由本公司自行配制；ZT（即玉米素）、NAA(萘乙酸)、6-BA、IAA从北京康贝斯科技有限公司购买。

本发明所述一种芥菜无土栽培方法，其中培养基由不定芽的诱导培养基，不定芽的增殖培养基，丛生苗的继代及壮苗培养基和生根培养基组成：

所述的不定芽的诱导培养基的配方为：MS、ZT3mg/L、IAA0.5mg/L、糖30g/L、琼脂5g/L，pH为5.4～5.6；

采用上述培养基，对芥菜进行组织培养快繁，按以下步骤进行：

一、外植体的选择：在3月份当枝条上发出的嫩枝长度达3～5cm时，剪取这些新抽嫩枝放入玻璃瓶内带回作为外植体；

二、外植体的灭菌：将上述外植体先用75%的酒精处理30s，使酒精的杀菌作用迅速渗透；再用0.1%HgCl₂浸泡茎尖5min，用0.1%升汞浸泡茎段8min，需不停地摇动瓶子，使外植体充分与杀菌液接触；再用无菌水冲洗4～5次，这样的处理方法，得到了较多数量的无菌外植体和成活个体；

三、不定芽的诱导培养：将经过消毒灭菌的外植体，在无菌工作环境中，接种于上述专用培养基中的不定芽的诱导培养基中，培养条件为每天光照时间12小时，光照强度1500～20001x，培养温度24±2℃，外植体接种到诱导培养基两周后，茎尖顶芽开始生长，侧芽膨大萌动，继续培养至45天，茎尖诱导出2～3芽（顶部侧芽），茎段的节上长出1～2个侧芽；

四、不定芽的增殖培养：切下上述不定芽，接种于上述专用培养基中的不定芽的增殖培养基中，培养条件同上，培养45～60天后，不定芽的基部长出愈伤组织，从愈伤组织分化出许多丛生幼苗；进一步将上述获得的丛生幼苗切割为4～8苗的小丛苗团，在上述上述专用培养基中的不定芽的增殖培养基中继代繁殖，每瓶放置2团，完成培养周期后，每团苗可增长3～5倍，且丛苗的高度也会增长，如此反复继代繁殖，可获得大量的丛生苗；

五、丛生苗的继代及壮苗：再将丛生苗切割为3～5苗的丛苗团，接种于上述专用培养基中的丛生苗的继代及壮苗培养基中，每瓶放置10团左右，培养条件同上，培养45～60天后，丛苗团苗的分化量减少为2～3倍，但丛苗的茎增粗、高度增长，多数达到2cm以上；

六、壮苗生根及继续扩繁：将上述高为2.5cm以上的健壮苗切成单株．接种于上述专用培养基中的生根培养基中，培养条件同上；生根苗培养30天左右，长出长短不等的白色根系，培养45天后，根有5～7条，根长达到1.5～3cm，是出瓶过渡移栽的最佳时间；将其余愈伤组织团上的小苗及具有活力的植株下段材料分切为2～4团，接种于上述专用培养基中的不定芽的增殖培养基中，培养条件同上；

七、移栽过渡培养：将步骤六中根长1～2cm的组培生根瓶苗移到温室内，常温、自然光下炼苗2～3天后开瓶出苗移栽，取出植株健壮、根系发达的组培苗、洗除沾在根部的培养基，然后移栽到育苗基质中，育苗基质为泥炭土：珍珠岩=2:1，用0.1%的多菌灵溶液浇透，用塑料薄膜覆盖，并盖上遮阴网；一周内保持较高湿度在90%以上，保持适宜温度在20～25℃，l周后逐渐打开薄膜，增加光照及通风透气；2周后，便可进行常规管理，其组培快繁的种苗移栽成活率达90%以上，本试验在只有3台无菌操作台的情况下，达到了每年生产10万株以上组培苗，实现了该品种种苗的规模化生产，为扦插苗的生产提供了大量种源。

实施例2外植体灭菌方法的实验

本实验使用两种消毒药液及不同的杀菌时间，芥菜茎尖和茎段进行消毒处理，寻找最佳的消毒处理方式；采用套袋和未套袋新萌发的幼嫩枝条、进行两种消毒剂的处理时间比较实验。从表1看出：

1.外植体材料用75%的酒精处理l0～30min，再用0.1%HgCl2浸泡尖5min、浸泡茎段8～lOmin，其有效进种率达到75～90%；

2.外植体材料的最佳消毒处理方式为75%的酒精处理30秒，再用0.1%HgCl2浸泡尖5min、浸泡茎段8min，其有效进种率达到85～90%；

3.采用透明塑料袋套袋与未套袋比较，采用透明塑料袋不仅让新抽嫩枝在洁净的环境中生长，而且透光性好新抽嫩枝也生长健壮，以此作为外植体进瓶材料，可有效提高进瓶成功率达到65%以上，是未套袋材料的2.6倍以上。

Claims

1.一种芥菜无土栽培方法，其特征在于：所述的不定芽的诱导培养基的配方为：MS、ZT3mg/L、IAA0.5mg/L、糖30g/L、琼脂5g/L，pH为5.4～5.6。

2.一种芥菜无土栽培方法，其特征在于：所述的不定芽的增殖培养基的配方为：MS、ZT1mg/L、6-BA0.5mg/L、糖30g/L、琼脂5g/L，pH为5.4～5.6。

3.一种芥菜无土栽培方法，其特征在于：所述的丛生苗的继代及壮苗培养基的配方为：MS、ZT O.5mg/L，6-BA O.5mg/L，糖30g/L、琼脂5g/L，pH为5.4～5.6。

4.一种芥菜无土栽培方法，其特征在于：所述的生根培养基的配方为：MS、NAA2mg/L、糖30g/L、琼脂5g/L，pH为5.4～5.6。