CN102988291B - 一种氟比洛芬酯脂肪乳注射液组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种氟比洛芬酯脂肪乳注射液组合物及其制备方法，所述氟比洛芬酯注射液含有氟比洛芬酯为活性成分，加上药学上可接受的大豆油、乳化剂、甘油、磷酸氢二钠、枸橼酸和注射用水。其制备方法包含以下步骤：（1）常温下混合氟比洛芬酯和大豆油形成均一油相；（2）常温下混合乳化剂、甘油及注射用水，过滤后形成均一水相；（3）常温下将所述油相加入至所述水相中，形成初乳；（4）将所述初乳高压均质，调节冷凝水流量，控制乳液温度不超过30℃。

Description

一种氟比洛芬酯脂肪乳注射液组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种稳定的氟比洛芬酯注射液及其制备方法。背景技术

氟比洛芬是广泛使用的非甾体抗炎药（non-steroid  anti-inflammatory drugs，NSAIDs），具有抗炎及镇痛作用。我国已于1998年批准上海三维制药有限公司氟比洛芬原料药和片剂生产上市，其原料药批准文号为：国药准字H19980113，用于治疗风湿性关节炎，后又陆续批准缓释片和滴眼液。氟比洛芬是临床广泛使用的非甾体抗炎药，具有抗炎、止痛及解热作用，临床用于疼痛或炎症疾病的治疗。氟吡咯芬难溶于水，其钠盐注射时有强烈疼痛，不能静注给药。目前市场制剂多为口服剂，由于已经发现口服氟比洛芬后引起胃肠道紊乱等不良反应，而且治疗术后疼痛或因癌症引起的疼痛时，多数患者无法口服药物，影响临床应用。

氟比洛芬酯（Flurbiprofen Axetil）是氟比洛芬乙酰氧基乙酯，其结构式为：

分子量：330.36

分子式：C₁₉H₁₉FO₄

化学名为：（±）2-（2-氟-4-联苯基）丙酸-1-乙酰氧基乙酯，为无色至微黄透明油状物，是氟比洛芬的前体药物，具有一定亲脂性。将其溶于大豆油中，再使用磷脂包裹制成脂微球（Lipomicrospheres，LM）——脂肪乳剂，用于静脉注射，1992年在日本上市。临床用于治疗术后及癌症引起的疼痛。药物进入体内靶向分布到创伤及肿瘤部位后，氟比洛芬酯从脂微球中释放出来，在羧基酯酶作用下迅速水解生成氟比洛芬，通过氟比洛芬抑制前列腺素的合成而发挥镇痛作用。

目前市场上仅有的氟比洛芬酯制剂即氟比洛芬酯注射液（商品名凯纷）。注射形式的氟比洛芬酯乳剂具有一定的靶向性和缓释性，能降低药物给药剂量，减少药物毒性，提高药物稳定性等。这一制剂能够免去口服药物的胃粘膜损伤等不良反应，同时也为有吞咽困难的患者提供了一种理想的给药途径。

但是，已有的氟比洛芬酯乳剂在制备、储存过程中会受到工艺条件、贮藏条件（国家药品标准YBH15412004要求0～20℃密闭保存，避免冻结，有效期18个月）等因素的影响而存在稳定性问题，例如这种注射乳液在高温灭菌或放置过程中可能出现破乳（油漂在水中）、分层等现象，从而影响该制剂的临床试验，同时带来安全隐患。同时主药属于酯类化合物，遇水易水解，破乳后部分主药进入水中导致含量大幅降低，影响稳定性。专利申请CN102188393 A公开了一种氟比洛芬酯脂微球制剂，就是以解决上述问题为目的。但其主要是通过调整处方来提高产品质量，而且并未给出如下的技术提示：通过变更原制备工艺来提高产品质量。从注射剂安全角度考虑，增加辅料的种类在提高制剂体外稳定性的同时，也增加了体内的安全隐患。最好的方式，是在现有制剂处方条件下，通过优化现有制备方法来提高产品质量。

脂肪乳剂的制备方法通常是：将主药、卵磷脂和大豆油加到容器中，加热升温并保持55℃～75℃,高速剪切分散30分钟以上至溶解，形成油相；另取容器加入适量注射用水，甘油（供注射用）加入后加热升温并保持50℃～60℃（油相和水相温度相差低于5℃，否则做出乳剂易漂油）低速搅拌1分钟，形成水相；高速运转后，缓缓加入油相，乳化形成初乳，用缓冲盐溶液调节pH值，定容。将初乳置入高压均质机进料口，高压均质3～10次。过滤，灌装。至旋转式水浴灭菌柜中,在121灭菌15分钟。

但由于大豆油流动性较差，磷脂溶解非常缓慢，事实上生产时在高温和高速剪切下一般也需溶解近60分钟。这种情况下大豆油和磷脂都将发生氧化，降解反应,进而降低了脂微球的包裹能力,使得主药氟比洛芬酯降解增加，影响制剂的稳定性。发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有生产工艺之缺陷，提供一种氟比洛芬酯脂肪乳注射液组合物及其制备方法。

本发明的技术方案如下：

一种稳定的氟比洛芬酯注射液，其处方组成如下：

（a）主药氟比洛芬酯其浓度范围是5mg~15mg/ml；

（b）油相溶剂为大豆油（供注射用），其浓度范围分别为10.0~12.0%（g/ml）；

（c）乳化剂为卵磷脂，包括蛋黄卵磷脂或大豆磷脂（供注射用）其浓度范围分别为1.0~2.0%（g/ml）；

（d）渗透压调节剂为甘油（供注射用），其浓度范围分别为1.0~3.0%（g/ml）；

（e）pH调节剂为磷脂氢二钠、枸橼酸缓冲盐溶液其浓度范围是5mM至50mM。

其余为注射用水；

本发明提供一种稳定的氟比洛芬酯注射液的制备方法，包括如下步骤：

（a）常温下将氟比洛芬酯，加入大豆油（供注射用）中，然后在高剪切分散乳化机下，高速剪切分散1分钟，形成油相；

（b）常温下分别将甘油（供注射用）、卵磷脂、磷酸氢二钠、枸橼酸缓冲盐溶液加入适量注射用水中，然后在高剪切分散乳化机下，剪切分散5~10分钟，然后经5.0μm金属滤芯过滤，形成水相；

（c）在高速剪切分散下，将油相缓慢加入水相中，然后常温下继续高速剪切分散20~30分钟，形成初乳；

（d）将初乳补加注射用水至全量，测定pH至6.0~6.5，混匀后移入高压微射流纳米分散仪（Microfluidizer），在1000~1200bar压力下均质4次，调节冷凝水流量，控制乳液温度不超过30℃。

（e）经5.0μm金属滤芯过滤，滤液灌装至7ml西林瓶中；

（f）将灌装后样品置旋转水浴式灭菌柜中，采用过度杀灭法灭菌，灭菌条件选自121℃下灭菌15分钟。经灭菌后即得氟比洛芬酯注射液。

（g）步骤（a）至步骤（e）均在氮气保护下操作。

本发明的配方和工艺方法是经过筛选获得的，筛选过程如下：

配方的筛选：根据已上市产品（商品名：凯纷）说明书及脂肪乳注射液质量标准（中华人民共和国卫生部《药品标准》二部第六册生化药品第一分册）确定本品处方各原辅料及其用量范围。

工艺的筛选：主要做了以下两种工艺研究。

1、蛋黄卵磷脂的加入方式

相关文献显示磷脂作为乳化剂一般加入油相溶解，也有一些工艺将磷脂加入至水相溶解。我们在处方和工艺筛选过程中，将蛋黄卵磷脂全部加入油相溶解，发现溶解温度高、时间长，油相溶解后粘度增加较大，流动性非常不好，且未完全溶解不利于下一步操作。将一部分蛋黄卵磷脂加入水相取得很好的效果，具体筛选实验如下：取10g大豆油四份各置50ml烧杯中，依次加入1.2g、0.8g 、0.4g和0.0g蛋黄卵磷脂，置高剪切分散乳化机下，剪切至溶解，记录时间。另取80ml水四份各置250ml烧杯中，依次加入0.0g、0.4g 、0.8g和1.2g蛋黄卵磷脂，置高剪切分散乳化机下，剪切至溶解，记录时间和温度。分别制成乳剂后，检测性状、粒径分布。结果见表1

表 1蛋黄卵磷脂的加入方式试验

加入油相磷脂量（g）	1.2	0.8	0.4	0.0
					油相溶解时间	29分钟	18分钟	5分钟	0分钟
水相溶解时间	1分钟	2分钟	4分钟	5分钟
					油相温度（℃）	65	60	54	22
油相外观	较粘稠	较粘稠	略粘稠	略粘稠
					水相外观	无色透明	白色分散液	白色分散液	白色分散液
乳剂外观	良好	良好	良好	良好
					乳剂粒径分布	200nm	198nm	189nm	192nm

结果表明，全部蛋黄卵磷脂加入水相比较合理，油相温度低、时间短，流动性较好，制备的乳剂样品外观良好。

2、高压均质工艺优化：

依照处方制备初乳，然后在1200bar压力下高压均质（高压微射流纳米分散仪）5次制备乳剂。按现有氟比洛芬酯注射液国家标准检测粒径分布，结果见表2。

表2高压均质次数与乳剂的粒径分布

由表中数据可见，高压均质压力为1000bar时，4次、5次均质后的平均粒径及90%累积粒径已经与原研药品无明显差异，考虑到能源的成本投入及生产时机器便于操作和控制，将制备乳液高压均质压力定为1000bar-1200bar，均质次数确定为4次。同时最终的均质次数还要由实际操作时乳剂粒径的在线检测来决定。

均质工艺优化结果：高压均质（1000bar-1200bar）均质4次。

由于本发明是在常温下操作，避免了大豆油和卵磷脂高温氧化和降解，从而保持了乳化和包封效果。因此还意外地缩短了配剂开始到灌装结束的操作时间，降低了污染风险。

具体实施例

以下通过实施例对本发明进行更详细地说明，但本发明并不仅限于此。

实施例1

将10g氟比洛芬酯和100g大豆油（供注射用）加到容器中，高速剪切分散1分钟至溶解，形成油相；另取容器加入850g注射用水，将22g甘油（供注射用）、12g蛋黄磷脂（Q.P.Corporation，FC Plant/日本）和磷酸氢二钠、枸橼酸缓冲盐溶液加入后低速搅拌5分钟，形成水相；将水相置入高剪切分散乳化机工作头下，高速运转后，缓缓加入油相，乳化20分钟形成初乳，定容至1000ml，测定PH值在6.0。将初乳置入高压微射流纳米分散仪进料口，在1000压力下均质4次，调节冷凝水流量，控制乳液温度不超过30℃。经5.0μm金属滤芯过滤，滤液灌装至7ml西林瓶中；至旋转式水浴灭菌柜中,在121℃灭菌15分钟即得。

实施例2

将10g氟比洛芬酯和100g大豆油（供注射用）加到容器中，高速剪切分散1分钟至溶解，形成油相；另取容器加入850g注射用水，将22g甘油（供注射用）、15g蛋黄磷脂（Q.P.Corporation，FC Plant/日本）和磷酸氢二钠、枸橼酸缓冲盐溶液加入后低速搅拌5分钟，形成水相；将水相置入高剪切分散乳化机工作头下，高速运转后，缓缓加入油相，乳化20分钟形成初乳，定容1000ml，测定PH值6.5。将初乳置入高压微射流纳米分散仪进料口，在1200bar压力下均质4次，调节冷凝水流量，控制乳液温度不超过30℃。经5.0μm金属滤芯过滤，滤液灌装至7ml西林瓶中；至旋转式水浴灭菌柜中,在121℃灭菌15分钟即得。

实施例3

将10g氟比洛芬酯和100g大豆油（供注射用）加到容器中，高速剪切分散1分钟至溶解，形成油相；另取容器加入850g注射用水，将22g甘油（供注射用）、12g大豆磷脂（供注射用，上海太伟药业有限公司）和磷酸氢二钠、枸橼酸缓冲盐溶液加入后低速搅拌5分钟，形成水相；将水相置入高剪切分散乳化机工作头下，高速运转后，缓缓加入油相，乳化20分钟形成初乳，定容1000ml，测定PH值6.5。将初乳置入高压微射流纳米分散仪进料口，在1200bar压力下均质4次，调节冷凝水流量，控制乳液温度不超过30℃。经5.0μm金属滤芯过滤，滤液灌装至7ml西林瓶中；至旋转式水浴灭菌柜中,在121℃灭菌15分钟即得。

实施例4

将10g氟比洛芬酯和100g大豆油（供注射用）加到容器中，高速剪切分散1分钟至溶解，形成油相；另取容器加入850g注射用水，将22g甘油（供注射用）、15g大豆磷脂（供注射用，上海太伟药业有限公司）和磷酸氢二钠、枸橼酸缓冲盐溶液加入后低速搅拌10分钟，形成水相；将水相置入高剪切分散乳化机工作头下，高速运转后，缓缓加入油相，乳化20分钟形成初乳，定容1000ml，测定PH值6.5。将初乳置入高压微射流纳米分散仪进料口，在1200bar压力下均质4次，调节冷凝水流量，控制乳液温度不超过30℃。经5.0μm金属滤芯过滤，滤液灌装至7ml西林瓶中；至旋转式水浴灭菌柜中,在121℃灭菌15分钟即得。

比较例1

将10g氟比洛芬酯、12g蛋黄磷脂（Q.P.Corporation，FC Plant/日本）和100g大豆油（供注射用）加到容器中，加热升温并保持65℃,高速剪切分散30分钟至溶解，形成油相；另取容器加入850g注射用水、22g甘油（供注射用）和磷酸氢二钠、枸橼酸缓冲盐溶液，加热升温并保持60℃低速搅拌1分钟，形成水相；将水相置入高剪切分散乳化机工作头下，高速运转后，缓缓加入油相，乳化20分钟形成初乳，定容1000ml，测定PH值在6.5。将初乳置入高压微射流纳米分散仪进料口，在1200压力下均质4次，调节冷凝水流量，控制乳液温度不超过45℃。经5.0μm金属滤芯过滤，滤液灌装至7ml西林瓶中；至旋转式水浴灭菌柜中,在121℃灭菌15分钟即得。

本发明技术方案制备的氟比洛芬酯注射液与现有市售产品（商品名：凯纷）相比，可以显著增强其安全性和稳定性，以下通过试验数据进一步说明本发明的有益效果：

试验例1    灭菌稳定性试验

对实施例1、实施例2和比较例1制备的灭菌后前列地尔注射液样品进行评价，考察其灭菌后制剂性状、过氧化值及氟比洛芬（氟比洛芬酯降解物）。检测方法如下：

过氧化值：精密量取本品5ml，依照中国药典2010年版二部附录VIIＨ方法检查，供试品消耗硫代硫酸钠滴定液（0.01mol/L）的毫升数不得大于0.2ml。

游离脂肪酸：对照品溶液的制备 取棕榈酸0.64g，精密称定，置500ml量瓶中，加正庚烷溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置20ml具塞试管中，精密加入混合液[注1]5ml，振摇1分钟，放置10分钟，再分别精密加入正庚烷2ml，水4ml，密塞，上下翻转10次，静置15分钟以上，使分层，分取上层溶液，即得。

供试品溶液的制备 精密量取本品1ml，置20ml具塞试管中，精密加入混合液[注1]5ml，振摇1分钟，放置10分钟，再分别精密加入正庚烷与水各3ml，上下翻转10次，静置15分钟以上，使分层，分取上层溶液，即得。

精密量取对照品溶液和供试品溶液各3ml，置10ml离心管中，加尼罗兰指示液[注2]1ml，在通氮气条件下，用氢氧化钠滴定液（0.01mol/L）滴定至溶液显淡紫色，将滴定结果用氟比洛芬所需消耗滴定液毫升数进行校正。 供试溶液中游离脂肪酸消耗氢氧化钠滴定液（0.01mol/L）的毫升数不得大于对照液消耗氢氧化钠滴定液（0.01mol/L）的毫升数。每1mg氟比洛芬需消耗氢氧化钠滴定液（0.01mol/L）0.4094ml。

氟比洛芬：色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷化键合硅胶为填充剂，以乙腈-水-冰醋酸混合液（1200：800：3）为流动相，柱温40℃；检测波长为254nm。理论板数以氟比洛芬酯计算，应不低于2000，氟比洛芬酯与内标峰的分离度应符合要求，氟比洛芬酯两个对映立体异构体的分离度应大于1.0。

内标溶液的制备 取联苯，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，即得。

取经减压干燥4小时的氟比洛芬对照品适量，加无水乙醇制成每1ml中含1mg的溶液，精密量取1ml置100ml量瓶中，精密加入内标溶液2ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备 精密量取本品1ml，置100ml量瓶中，精密加入内标溶液2ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按内标以峰面积计算，本品每1ml含氟比洛芬不得过0.74mg。

结果见表3。

表3 不同工艺制备的氟比洛芬酯注射液的灭菌稳定性试验

检测指标	实施例1	实施例2	比较例1
				性状	白色乳状液体	白色乳状液体	白色乳状液体
过氧化值	0.07	0.07	0.18
				游离脂肪酸	0.05mg/ml	0.05 mg/ml	0.10mg/ml
氟比洛芬	0.05 mg/ml	0.05 mg/ml	0.09mg/m

由表3可见，本发明方案制备的氟比洛芬酯注射液较比较例1制备的样品稳定性显著增强。

试验例2   贮藏稳定性试验

将实施例1、比较例1和市售产品灭菌后制剂在常温下贮藏18个月，以主药降解物氟比洛芬为考察指标，进行长期稳定性考察试验。结果见表2。

表4 不同工艺制备的氟比洛芬酯注射液在25±2℃条件下长期稳定性试验

测定时间	实施例1	比较例1	凯纷（批号5010F）
				0月	0.05 mg/ml	0.09mg/ml	未知
3月	0.07 mg/ml	0.17 mg/ml	未知
				6月	0.08 mg/ml	0.22 mg/ml	0.23mg/ml
9月	0.09 mg/ml	0.31mg/ml	0.30 mg/ml
				12月	0.11 mg/ml	0.40 mg/ml	0.38mg/ml
18月	0.25 mg/ml	0.59mg/ml	0.59mg/ml
				24月	0.38mg/ml	0.79 mg/ml	0.81 mg/ml

由表4可见，本发明方案制备的氟比洛芬酯注射液较比较例及市售样品，可在常温下贮藏24个月，产品质量仍符合国家药品标准YBH15412004。

Claims (2)

1.一种氟比洛芬酯脂肪乳注射液，其特征在于，其组成如下：

    主药氟比洛芬酯其浓度范围是5mg~15mg/ml；

油相为大豆油，其浓度范围为10.0~12.0%；

乳化剂为卵磷脂，其浓度范围为1.0~2.0%；

渗透压调节剂为甘油，其浓度范围为1.0~3.0%；

pH调节剂为磷酸氢二钠、枸橼酸缓冲盐溶液，其浓度范围是5mM至50mM，

乳液的pH值的范围是4.5至6.5；

其余为注射用水；

其制备方法如下：

（a）常温下将氟比洛芬酯，加入大豆油中，然后在高剪切分散乳化机下，高速剪切分散1分钟，形成油相；

（b）常温下分别将甘油、卵磷脂、磷酸氢二钠、枸橼酸缓冲盐溶液加入适量注射用水中，然后在高剪切分散乳化机下，剪切分散5~10分钟，然后经5.0μm金属滤芯过滤，形成水相；

（c）在高速剪切分散下，将油相缓慢加入水相中，然后常温下继续高速剪切分散20~30分钟，形成初乳；

（d）将初乳补加注射用水至全量，测定pH至6.0~6.5，混匀后移入高压微射流纳米分散仪，在1000~1200bar压力下均质4次，调节冷凝水流量，控制乳液温度不超过30℃；

（e）经5.0μm金属滤芯过滤，滤液灌装至7ml西林瓶中；

（f）将灌装后样品置旋转水浴式灭菌柜中，采用过度杀灭法灭菌，灭菌条件选自121℃下灭菌15分钟，经灭菌后即得氟比洛芬酯注射液；

（g）步骤（a）至步骤（e）均在氮气保护下操作。

2.权利要求1所述脂肪乳注射液的制备方法，包括以下步骤：

其配方组成如下：

    主药氟比洛芬酯其浓度范围是5mg~15mg/ml；

油相为大豆油，其浓度范围为10.0~12.0%；

乳化剂为卵磷脂，其浓度范围为1.0~2.0%；

渗透压调节剂为甘油，其浓度范围为1.0~3.0%；

pH调节剂为磷酸氢二钠、枸橼酸缓冲盐溶液，其浓度范围是5mM至50mM，

乳液的pH值的范围是4.5至6.5；

其余为注射用水；

其制备方法如下：

（a）常温下将氟比洛芬酯，加入大豆油中，然后在高剪切分散乳化机下，高速剪切分散1分钟，形成油相；

（b）常温下分别将甘油、卵磷脂、磷酸氢二钠、枸橼酸缓冲盐溶液加入适量注射用水中，然后在高剪切分散乳化机下，剪切分散5~10分钟，然后经5.0μm金属滤芯过滤，形成水相；

（c）在高速剪切分散下，将油相缓慢加入水相中，然后常温下继续高速剪切分散20~30分钟，形成初乳；

（d）将初乳补加注射用水至全量，测定pH至6.0~6.5，混匀后移入高压微射流纳米分散仪，在1000~1200bar压力下均质4次，调节冷凝水流量，控制乳液温度不超过30℃；

（e）经5.0μm金属滤芯过滤，滤液灌装至7ml西林瓶中；

（f）将灌装后样品置旋转水浴式灭菌柜中，采用过度杀灭法灭菌，灭菌条件选自121℃下灭菌15分钟，经灭菌后即得氟比洛芬酯注射液；

（g）步骤（a）至步骤（e）均在氮气保护下操作。